专利名称：包载水溶性药物类脂微粒的制备方法
包载水溶性药物类脂微粒的制备方法
技术领域：
本发明属于药物制剂学领域，更具体地说，本发明涉及一种包载水溶性药物类脂微粒的制备方法。
背景技术：
类脂微粒是由类脂质体衍化而来。类脂质体亦称泡囊(niosomes)，系指用非离子型表面活性剂等类脂材料为囊材制成的单层或多层的新型药物载体单层囊泡，其特点是稳定性高于脂质体，可克服脂质体因磷脂氧化而带来的毒性，因而成为很有前途的新型药物的传递系统。类脂质体用于包裹药品，可减免或减少环境因素对药品的影响，延长药品在体内的有效作用时间，提高药品在体内的有效生物利用度，并可降低药品的毒副作用，尤其适用于具生物活性的大分子药品及热不稳定药品的靶向治疗。近年随着类脂材料的迅速发展，类脂质体已经发展成为类脂微粒，其范围不仅限于液体核心的类脂泡囊(即狭义的类脂质体)，也有胶体为核心的类脂微球，还有气体为核心的类脂空泡。并且根据需要，类脂微粒可以将粒径限定于微米级或纳米级，尤其是纳米级类脂微粒在靶向控释、增强药物稳定性、提高载药量、批量化生产和灭菌等方面具有较明显的优点。已有的类脂微粒用于包载脂溶性药物较好，而包载水溶性药物时类脂微粒包封率较低，通常达不到80%包封率的最低要求。而为提高水溶性药物包封率采用的技术操作较为繁琐，重现性差，很难工业化批量制备。
发明内容本发明要解决的技术问题是针对现有pH梯度法制备包载水溶性药物类脂微粒的不足之处，提供一种快速方便的包载水溶性药物类脂微粒制备方法。本发明的目的是针对现有的pH梯度法制备包载水溶性药物类脂微粒的不足之处，提供一种解决方案。我们在研究pH梯度法制备包载水溶性药物类脂微粒的实验中发现，有些弱酸或弱碱的药物成盐后可以溶解于甲醇、乙醇等有机溶剂中，而乙醇注入法是空白类脂微粒的一种常用制备方法。我们试将一些成盐后弱酸或弱碱的药物溶于乙醇，然后采用注入法转入到不同PH值的水性缓冲体系中，得到包载药物的类脂微粒。该方法将乙醇注入法制备空白类脂微粒和利用PH梯度包载药物两个过程合二为一，简化了操作过程，快捷方便。经过多次试验，为提高包载水溶性药物类脂微粒制备效率，本发明采用了以下的技术方案本发明涉及一种包载水溶性药物类脂微粒的制备方法，是将成盐形式的药物、类脂微粒成膜材料溶于有机溶剂中，形成有机相体系；配制与有机相体系PH值不同的水溶液缓冲体系作为水相体系；有机相体系采用注入法与水相体系混合，形成类脂微粒，药物在从有机相体系混合到水相体系过程中因PH值的改变导致溶解度降低，从而包载于类脂微粒中。上述的成盐形式的药物是指酸性药物与无机碱或有机碱盐形成的盐，或碱性药物与无机或有机酸形成的盐。上述的类脂微粒成膜材料包括类脂成分和表面活性剂，类脂成分选自药学中公认类脂质成分，包括硬脂酸及其酯类、聚乳酸及其酯类、12 30个碳的醇及其酯类、胆固醇及其衍生物、谷留醇及其衍生物、胆酸及其衍生物，表面活性剂包括吐温系列、司盘系列、油酸、甘油、丙二醇、泊洛沙姆。上述的有机溶剂是中等或强极性有机溶剂，优选乙醇。上述的配制与有机相体系pH值不同的水溶液缓冲体系，是采用药学上公知的无机或有机缓冲对配制的水溶液，或采用无机或有机酸溶液，或采用无机或有机碱溶液。上述的水溶液缓冲体系中可以含有药学公知的表面活性剂、多元醇或糖类、水溶性高分子聚合物、抗氧剂、稳定剂。上述的包载水溶性药物的类脂微粒可以进一步通过高压均质方法得到粒径在 IO-IOOOnm范围内的类脂微粒。上述的包载水溶性药物的类脂微粒可以进一步通过透析、离心、层析的处理方法去除脂质碎片和多余盐离子，然后经过干燥方法得到载药类脂微粒干燥品。上述的包载水溶性药物类脂微粒可以进一步加工，形成口服、黏膜、注射、皮肤给药制剂的原料，制成发挥预防、治疗、保健、清洁、美容作用的具体制剂。上述的包载水溶性药物类脂微粒的制备方法具有以下优点1.本发明的包载水溶性药物类脂微粒的制备方法将传统乙醇注入法结合pH梯度法，在内相注入外相同时利用内外相PH差异，一步完成类脂微粒的制备和药物包载，减少传统包载水溶性药物类脂微粒的制备方法的复杂性。2.本发明的包载水溶性药物类脂微粒的制备方法提高水溶性药物在类脂微粒的包封率，明显减少包载水溶性药物的渗漏。3.本发明的包载水溶性药物类脂微粒的制备方法适于包裹多种水溶性药物，结合减压蒸发技术，可以适用于包载易氧化的药物、热不稳定的药物。4.本发明包载水溶性药物类脂微粒的制备方法适于包裹多种成盐形式的药物，所制备的载药类脂微粒可以进一步加工，形成口服、黏膜、注射、皮肤给药制剂的原料，制成发挥预防、治疗、保健、清洁、美容作用的具体制剂。
具体实施方式现结合下列实例来进一步描述本发明。以下通过几个实施例来进一步说明本发明。实施例1 盐酸伊立替康类脂微粒本发明的第一个实施方案制备强酸弱碱盐的类脂微粒，采用盐酸伊立替康为靶药，类脂微粒成膜材料选用胆固醇、十六醇和吐温80，有机相溶剂为乙醇，水相为含有水溶性高分子聚合物羟乙基淀粉的磷酸盐缓冲液(PH7. 5-8. 0)，制备包载盐酸伊立替康的类脂微粒。
制备方法15mg胆固醇、2mg十六醇和2mg吐温80加入到25ml无水乙醇中，60°C 水浴中加热至完全溶解，加入5mg盐酸伊立替康溶解，构成有机相。0.4g羟乙基淀粉(型号130/0. 4)加入pH = 8. 0的50ml 0. 025mol/L磷酸盐缓冲液(PBS)中，溶解后构成水相。 将有机相用注射器吸取，注入到lOOOr/min搅拌的(55士2) °C的水相中，保持lOOOr/min搅拌lOmin，形成类脂微粒混悬液，水浴35°C真空旋转蒸发除尽乙醇，浓缩至总体积50ml，得到包载盐酸伊立替康的类脂微粒混悬液。包封率测定取包载盐酸伊立替康的类脂微粒混悬液经过lOOOOr/min离心lmin， 吸取2ml含有游离盐酸伊立替康的上层溶液，用紫外-可见分光光度计于370nm测吸收度， 代入盐酸伊立替康标准曲线，利用“包封率(％)=[(盐酸伊立替康总量-游离盐酸伊立替康量)/盐酸伊立替康总量]X 100”公式计算盐酸伊立替康类脂微粒的包封率。盐酸伊立替康类脂微粒混悬液样品25°C放置0. 5h后再次测定包封率。盐酸伊立替康标准曲线精密称取盐酸伊立替康标准品，用蒸馏水配制成0. 25、 0.5,1.0,2.0,5. Omg/ml的系列标准溶液，于370nm测吸收度，得到盐酸伊立替康浓度与吸收度的标准曲线，利用该标准曲线计算盐酸伊立替康的浓度。结果盐酸伊立替康类脂微粒包封率平均值为84%，251放置().证后盐酸伊立替康类脂微粒包封率平均值为71%，0. 5h药物释放率低于40%。结果表明，本发明制备的盐酸伊立替康类脂微粒药物的包封率高，达到药典相应的规定，没有突释效应。实施例2 双氯芬酸钠类脂微粒本发明的第二个实施方案制备强碱弱酸盐的类脂微粒，采用双氯芬酸钠为靶药， 类脂微粒成膜材料选用硬脂酸和吐温85，有机相溶剂为丙三醇和乙醇，水相为醋酸-醋酸钠缓冲液，加入水溶性高分子聚合物聚乙烯醇(PVA)，制备包载双氯芬酸钠的类脂微粒。制备方法5mg双氯芬酸钠、IOmg硬脂酸和!Mg吐温85加入含1 %丙三醇的25ml 无水乙醇中，60°C水浴中加热至完全溶解，构成有机相。0. Ig丙二醇和0. 5g聚乙烯醇(PVA) 加入pH = 5. 5的30ml 0. 035mol/L醋酸-醋酸钠缓冲液中，溶解后构成水相。将有机相用注射器吸取，注入到lOOOr/min搅拌的65°C的水相中，65°C水浴中lOOOr/min搅拌，蒸发至无乙醇味，得到包载双氯芬酸钠的类脂微粒混悬液。包封率测定取双氯芬酸钠类脂微粒混悬液经过lOOOOr/min离心lmin，吸取含有游离双氯芬酸钠的上层溶液anl，用紫外-可见分光光度计于274nm测吸收度，代入双氯芬酸钠标准曲线，利用“包封率(％)=[(双氯芬酸钠总量-游离双氯芬酸钠量)/双氯芬酸钠总量]X 100”公式计算双氯芬酸钠类脂微粒的包封率。双氯芬酸钠类脂微粒混悬液样品 25°C放置0. 5h后再次测定包封率。双氯芬酸钠标准曲线精密称取双氯芬酸钠标准品，用蒸馏水配制成0.05、0. 1， 0. 25,1.0, 2. Omg/ml的系列标准溶液，于274nm测吸收度，得到双氯芬酸钠浓度与吸收度的标准曲线，利用该标准曲线计算双氯芬酸钠的浓度。结果实验组双氯芬酸钠类脂微粒包封率平均值为83%，25°C放置0.证后实验组双氯芬酸钠类脂微粒包封率平均值为70%，0. 5h药物释放率低于40%。结果表明，本发明制备的盐酸阿霉素类脂微粒药物的包封率高，达到药典相应的规定，没有突释效应。实施例3 盐酸阿霉素类脂微粒本发明的第一个实施方案制备纳米级类脂微粒，采用盐酸阿霉素为靶药，类脂微粒成膜材料选用单硬脂酸甘油酯和司盘80，有机相溶剂为乙醇，水相为含稳定剂丙二醇和水溶性高分子聚合物泊洛沙姆(Poloxamer 188)的磷酸盐缓冲液(pH7. 5-8. 0)，通过高压均质方法得到粒径在纳米范围内的包载盐酸阿霉素的单室类脂微粒。制备方法5mg盐酸阿霉素、8mg单硬脂酸甘油酯和3mg司盘80加入到25ml无水乙醇中，60°C水浴中加热至完全溶解，构成有机相。0. Ig丙二醇和0. 5g泊洛沙姆(Poloxamer 188)加入pH = 8. 0的30ml 0. 035mol/L磷酸盐缓冲液(PBS)中，溶解后构成水相。将有机相用注射器吸取，注入到lOOOr/min搅拌的65°C水相中，保持lOOOr/min搅拌lOmin，形成类脂微粒混悬液，水浴35°C真空旋转蒸发除尽乙醇，浓缩至总体积30ml，得到包载盐酸阿霉素的类脂微粒混悬液，经高压通过0. 65 μ m滤膜，得到包载盐酸阿霉素的单室类脂微粒。包封率测定取包载盐酸阿霉素的类脂微粒混悬液经过lOOOOr/min离心lmin，吸取2ml含有游离盐酸阿霉素的上层溶液，用紫外-可见分光光度计于480nm测吸收度，代入盐酸阿霉素标准曲线，利用“包封率(％)=[(盐酸阿霉素总量-游离盐酸阿霉素量)/盐酸阿霉素总量]X 100”公式计算盐酸阿霉素类脂微粒的包封率。盐酸阿霉素类脂微粒混悬液样品25°C放置0. 5h后再次测定包封率。盐酸阿霉素标准曲线精密称取盐酸阿霉素标准品，用蒸馏水配制成0.05、0. 1， 0. 5，1. 0，2. 5mg/ml的系列标准溶液，于480nm测吸收度，得到盐酸阿霉素浓度与吸收度的标准曲线，利用该标准曲线计算盐酸阿霉素的浓度。结果经过激光粒径分析仪测定，盐酸阿霉素类脂微粒粒径分布400-650nm，粒子分布均勻。盐酸阿霉素类脂微粒包封率平均值为83%，25°C放置0.证后盐酸阿霉素类脂微粒包封率平均值为68%，0. 5h药物释放率低于40%。结果表明，本发明制备的盐酸阿霉素纳米级类脂微粒微粒形态好，药物的包封率高，达到药典相应的规定，没有突释效应。例4 盐酸阿霉素类脂微粒注射剂本发明的第四个实施方案采用实施例3制备的盐酸阿霉素类脂微粒进一步加工， 制备盐酸阿霉素类脂微粒注射剂。制备方法将实施例3制得的盐酸阿霉素类脂微粒混悬液经葡聚糖凝胶柱洗脱， 去除游离的盐酸阿霉素和脂质碎屑，分离出包载盐酸阿霉素的类脂微粒。将包载盐酸阿霉素类脂微粒定溶于5ml pH = 7. 5磷酸盐缓冲液(PBS)中，加200mg甘露醇作为支持剂，分装于IOml的西林瓶中，_30°C冷冻5小时，冷冻干燥(5 X 10_4Pa，20h)，制成盐酸阿霉素类脂微粒冻干注射剂。结果盐酸阿霉素类脂微粒冻干注射剂，以生理盐水溶解后进行电镜形态观察，包载盐酸阿霉素的类脂微粒形态圆整，粒径略有增加，范围500-700nm，分布均勻，无聚团现象。结果表明包载盐酸阿霉素的类脂微粒可以制成注射剂等具体制剂，形态保持较好，稳定性较高。
权利要求
1.一种包载水溶性药物类脂微粒的制备方法，其特征在于将成盐形式的水溶性药物、类脂微粒成膜材料溶于有机溶剂中，形成有机相体系；配制与有机相体系PH值不同的水溶液缓冲体系作为水相体系；有机相体系采用注入法与水相体系混合，形成类脂微粒，水溶性药物在从有机相体系混合到水相体系过程中因PH值的改变导致溶解度降低，从而包载于类脂微粒中形成包载水溶性药物的类脂微粒。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述的成盐形式的药物是指酸性药物与无机碱或有机碱盐形成的盐，或碱性药物与无机或有机酸形成的盐。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述的类脂微粒成膜材料包括类脂成分和表面活性剂，类脂成分选自药学中公认类脂质成分，包括硬脂酸及其酯类、聚乳酸及其酯类、12 30个碳的醇及其酯类、胆固醇及其衍生物、谷留醇及其衍生物、胆酸及其衍生物，表面活性剂包括吐温系列、司盘系列、油酸、甘油、丙二醇、泊洛沙姆。
4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述的有机溶剂是中等或强极性有机溶剂。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述的有机溶剂是乙醇。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述的配制与有机相体系PH值不同的水溶液缓冲体系，是采用药学上公知的无机或有机缓冲对配制的水溶液，或采用无机或有机酸溶液，或采用无机或有机碱溶液。
7.根据权利要求5所述的水溶液缓冲体系，其特征在于所述的水溶液缓冲体系中可以含有药学公知的表面活性剂、多元醇或糖类、水溶性高分子聚合物、抗氧剂、稳定剂。
8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述的包载水溶性药物的类脂微粒进一步通过高压均质方法得到粒径在IO-IOOOnm范围内的类脂微粒。
9.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述的包载水溶性药物的类脂微粒进一步通过透析、离心、层析的处理方法去除脂质碎片和多余盐离子，然后经过干燥方法得到载药类脂微粒干燥品。
10.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述的包载水溶性药物类脂微粒进一步加工，形成口服、黏膜、注射、皮肤给药制剂的原料，制成发挥预防、治疗、保健、清洁、美容作用的具体制剂。
全文摘要
本发明涉及一种包载水溶性药物类脂微粒的制备方法。该方法将注入法结合pH梯度法，在内相注入外相同时利用内外相pH差异，完成类脂微粒的药物包载，减少传统制备工艺的复杂性。本发明的类脂微粒适于包裹水溶性药物，并且适用剂型范围广。
文档编号A61K9/16GK102188390SQ20101013131
公开日2011年9月21日 申请日期2010年3月18日 优先权日2010年3月18日
发明者赵应征, 鲁翠涛 申请人:鲁翠涛