专利名称：多穗石柯叶药材的质量控制方法
技术领域：
本发明涉及一种壳斗科栎(石柯)属常绿植物多穗石柯叶 Lithocarpuslitseifolius(Hance)Chun药材的质量控制领域，提供了多穗石柯叶药材的质量控制方法。
背景技术：
多穗石柯，拉丁学名为Lithocarpus litseifolius (Hance)Chun，属于壳斗科 Fagaceae，栎(石柯)属Lithoearpus常绿植物，别名多穗石柯《中华本草》、《中药大辞典》、 黑石虎《广西药用植物名录》、大叶稠子(大叶稠)、鸡山柯《中国树木志》、多穗柯《中国高等植物图鉴》、绵石栎、绵柯、刚板栗、羊角栎、绵槠、青皮刚、大青K、灰稠、稠木、稠栗、《全国中草药汇编二版下册》《新华本草纲要第三册》、甜茶。人们习惯上称为甜荼或甘茶。文献中收载的植物来源中植物名不一致，《海南植物志》收载的植物来源为壳斗科栎属(石柯属)植物Lithocarpus litseifolius (Hance) Chun (中文名为多穗石柯)，而《中华本草》、《中药大辞典》、《全国中草药汇编》、《新华本草纲要》、《中药志》、《中国高等植物图鉴》收载的植物来源为壳斗科栎属(石柯属)植物Lithocarpus polystachyus Rehd (中文名为多穗石柯、多穗柯等)，经与《中国植物志》及《Flora of China》比照鉴定，认定该植物标本的禾中名为 Lithocarpus litseifolius (Hance) Chun ( = L. polystachyus Rehd.)。该叶味甘甜清爽，不仅生津止渴，且对人体有较好的药理作用和保健功能。据《中药志》上记载及有关文献资料报导“能防治高血压、治疗湿热痢疾、皮肤瘙痒、痈疽恶疮等症。并具有滋养肝肾和胃降逆、润肺止咳、解困醒酒等作用；《本草纲目》记载“气味甘、 平”、“无毒、疗痔、止血及血痢、止渴、活血、利小便”;《中药大辞典》记载“治高血压”;《中华本草》对多穗石柯叶记载“清热解毒，化痰，祛风，降压。主治湿热泻痢，肺热咳嗽，痈疽疮疡，皮肤瘙痒，高血压。”，其中《四川常用中草药》记载清热、止泻，治痈疽恶毒疮，皮肤瘙痒， 湿热痢疾。《浙江药用植物志》记载治高血压病。多穗石柯叶特有的药效已被学术界获得认同，目前市场上已开始对多穗石柯叶作为食品、保健食品开发，但对多穗石柯叶的质量如何控制没有涉及，因此需要对其质量控制方法进行规范，以控制多穗石柯叶的质量。
发明内容
本发明的目的是提供一种多穗石柯药材的含量检测方法；本发明的另一目的是提供一种多穗石柯药材的鉴别方法；本发明的再一目的是提供一种多穗石柯药材的质量检查方法；本发明的再一目的是提供一种多穗石柯药材的质量检测方法。发明详述本发明所述的多穗石柯叶药材为为壳斗科植物栎(石柯)属Lithoearpus常绿植物多穗石柯Lithocarpus litseifolius Chun的干燥叶，该药材出自于《海南植物志》。《中华本草》、《中药大辞典》、《中国本草彩色图鉴》收载品名为多穗石柯叶；《全国中草药汇编》、 《中药辞海》收载品名均为多穗石柯，《中国高等植物图鉴》收载品名为多穗柯。文献中收载的植物来源中植物名不一致，《海南植物志》收载的植物来源为壳斗科栎属(石柯属)植物Lithocarpus litseifolius (Hance) Chun (中文名为多穗石柯)，而《中华本草》、《中药大辞典》、《全国中草药汇编》、《新华本草纲要》、《中药志》、《中药辞海》、《云南植物志》、《中国高等植物图鉴》收载的植物来源为壳斗科栎属(石柯属)植物Lithocarpus polystachyus Rehd，其中《全国中草药汇编》、《新华本草纲要》收载的植物名为绵石栎，《中华本草》、《中药辞海》、《云南植物志》收载的植物名为多穗石栎，《中药大辞典》、《中国高等植物图鉴》收载的植物名为多穗柯。经与《中国植物志》及《Flora of China》比照鉴定，认定该 is·+示*白勺禾中$力 Lithocarpus litseifolius (Hance) Chun ( = L. polystachyus Rehd.)。本发明中多穗石柯叶药材的原植物多穗石柯Lithocarpus Iitseifolius(Hance) Chim为常绿乔木，高ll-15m。小枝幼时淡褐色，老时干后暗黑褐色。叶片革质，长椭圆形或卵状长椭圆形，长7-14cm，宽3-km，先端急尖或突然渐尖，基部锲形，全缘，无毛，下面稍带灰白色，侧脉7-10对，支脉纤细，疏离，稍明显，小脉通常不明显。雄花序极少复穗状；雌花 3朵一簇，常1朵结实。果序长8-lOcm，轴纤细，直径约5mm;壳斗浅盘形，包围坚果基部，直径9-14mm，高3_5mm ；鳞状苞片轮状排列，细小，除顶部外与壳斗愈合，被褐黑色绒毛；坚果扁球形，直径1. 6-1. 8cm,长9-13mm，未成熟时顶部锥尖状，成熟时近平坦，中央有短尖头， 基部截平，无毛；果脐深内陷，直径6-8mm。花期5_9月，果期翌年5_9月。野生于海拔400-2000m的温暖山林密林中，路边灌木林中偶见。在湖南、江西、重庆等地有栽培。主产于长江以南各省区，尤以湖南、江西、广西、安徽等省资源丰富，而且集中；广东、云南、四川、福建等省次之。以江西、福建交界的武夷山脉、湖南地区的武陵山脉分布最广。印度、泰国也有分布。本发明通过多穗石柯药材的薄层、性状、显微三方面的鉴别方法来控制药材的质量。本发明中多穗石柯叶药材优选的薄层色谱为取本品粉末0. l-10g，加乙醇 lO-lOOml，加热回流0. 1-2小时，滤过；滤液浓缩至l_50ml，作为供试品溶液。另取根皮苷对照品，加乙醇制成每Iml含0. l_50mg根皮苷的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液1_20μ 1，对照品溶液1_20μ 1，分别点于同一硅胶薄层板上，以三氯甲烷-丙酮-甲醇(3 1 1)5 15°C放置0.1-50小时的下层溶液为展开剂，展开，取出， 晾干，喷以0. 1-70%香草醛浓硫酸溶液，在50-200°C加热至斑点显色清晰，置日光下检视。 供试品色谱中，在与根皮苷对照品色谱相应的位置，显相同颜色的斑点。本发明中多穗石柯叶药材最优选的薄层色谱为取本品粉末0.2_5g，加乙醇 20-50ml，加热回流0. 5-1. 5小时，滤过；滤液浓缩至2_20ml，作为供试品溶液。另取根皮苷对照品，加乙醇制成每Iml含0. 2-20mg根皮苷的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液2-10 μ 1，对照品溶液2-10 μ 1，分别点于同一硅胶薄层板上，以三氯甲烷-丙酮-甲醇(3 1 1)5 15°C放置0.5-20小时的下层溶液为展开剂，展开，取出， 晾干，喷以0. 5-50%香草醛浓硫酸溶液，在80-150°C加热至斑点显色清晰，置日光下检视。 供试品色谱中，在与根皮苷对照品色谱相应的位置，显相同颜色的斑点。本发明中多穗石柯叶药材薄层色谱的展开系统，是在尝试了各种展开溶剂，包括石油醚、氯仿(三氯甲烷)、乙酸乙酯、甲醇、丙酮等溶剂，进行深入研究，不断组合筛选，而后确定了较理想的展开体系即三氯甲烷-丙酮-甲醇，通过调整三者间的相互比例，最终研究确定了最为合理的展开系统三氯甲烷-丙酮-甲醇(3 1 1)。本发明中多穗石柯叶药材的优选性状鉴别方法为叶多扁平或皱缩卷曲，有些破碎不全，完整叶长5-25cm，宽1-lOcm，叶片革质，卵状披针形至长椭圆形，叶脉在背面突出， 先端渐尖或长渐尖。叶绿色，上面色深，下面色淡，基部契形，全缘，无毛，叶柄长0. 5-4cm,基部增粗，常呈暗褐色。质脆，气微，味甜。本发明中多穗石柯叶药材的最优选性状鉴别方法为叶多扁平或皱缩卷曲，有些破碎不全，完整叶长7-20cm，宽2-8cm，叶片革质，卵状披针形至长椭圆形，叶脉在背面突出，先端渐尖或长渐尖。叶绿色，上面色深，下面色淡，基部契形，全缘，无毛，叶柄长 1-2. 5cm，基部增粗，常呈暗褐色。质脆，气微，味甜。本发明中多穗石柯叶药材的优选显微鉴别方法为粉末灰绿色或灰棕色，叶的下表皮细胞呈多角形，壁薄，非腺毛单细胞，直径1-15 μ m，长15-75 μ m。气孔不定式或不等式，纤维多已折断，成束或单根散在，直径3-25 μ m,螺纹或网纹导管。可见栅栏组织碎片和棕色块状物，薄壁细胞含草酸钙簇晶。本发明中多穗石柯叶药材的最优选显微鉴别方法为粉末灰绿色或灰棕色，叶的下表皮细胞呈多角形，壁薄，非腺毛单细胞，直径3-9 μ m，长22-50 μ m。气孔不定式或不等式，纤维多已折断，成束或单根散在，直径7-17 μ m,螺纹或网纹导管。可见栅栏组织碎片和棕色块状物，薄壁细胞含草酸钙簇晶。本发明中多穗石柯叶药材的薄层色谱鉴别方法为取本品粉末0. l-10g，加乙醇 lO-lOOml，加热回流0. 1-2小时，滤过；滤液浓缩至l_50ml，作为供试品溶液。另取根皮苷对照品，加乙醇制成每Iml含0. l_50mg根皮苷的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液1_20μ 1，对照品溶液1_20μ 1，分别点于同一硅胶薄层板上，以三氯甲烷-丙酮-甲醇(1-4 0-2 0-2) 5 15°C放置0. 1-50小时的下层溶液为展开剂，展开， 取出，晾干，喷以0. 1-70%香草醛浓硫酸溶液，在50-200°C加热至斑点显色清晰，置日光下检视。供试品色谱中，在与根皮苷对照品色谱相应的位置，显相同颜色的斑点。本发明通过提供一种多穗石柯药材的水分、灰分、酸不溶性灰分、浸出物质量检查方法来控制药材的质量。本发明通过采集湖南芷江3-9月份野生、栽培的多穗石柯叶共14份样品，每份平行试验，参照水分、灰分、浸出物测定法测定。为确定总灰分的性质，对3-5月份各抽检1分进行总灰份和酸不溶性灰分的检测表1.部分样品的总灰分与酸不溶性灰分对比样品名称总灰分(％ ) 酸不溶性灰分(％ )基地苔叶4 月(090402) 3. 500. 07野生叶5 月(090501) 3. 840. 11野生嫩芽3 月(090301) 5. 220. 23由表1可知，总灰分高的样品对应酸不溶性灰分也相应增高。本发明通过采集湖南芷江3-9月份野生、栽培的多穗石柯叶共14份样品，每份平行试验，照醇溶性浸出物测定法项下的冷浸法用70%乙醇作溶剂测定。表2.样品的水分、灰分与浸出物的结果
权利要求
1.多穗石柯叶药材质量控制方法，其特征在于通过高效液相色谱法测定多穗石柯叶药材中根皮苷含量，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇为流动相A，以0. 01-1%磷酸溶液为流动相B，进行梯度洗脱，检测波长为250-300nm，柱温10-60°C。
2.权利要求1中的质量控制方法，其特征在于高效液相色谱法以0.05-0. 5%磷酸溶液为流动相B，进行梯度洗脱，检测波长为270j90nm，柱温20-40°C。
3.权利要求1-2的质量控制方法，其特征在于多穗石柯叶药材中根皮苷含量不得低于 2. 0%。
4.多穗石柯叶药材质量控制方法，其特征在于通过薄层色谱法鉴别，以多穗石柯叶药材粉末制成的溶液为供试品，以根皮苷溶液为对照品溶液，以三氯甲烷-丙酮-甲醇混合溶剂于5 15°C放置0. 1-50小时的下层溶液为展开剂，以0. 1-70%香草醛浓硫酸溶液为显色剂，在50-200°C加热至斑点显色清晰。
5.利要求4所述的质量控制方法，其特征在于以多穗石柯叶药材粉末制成的溶液为供试品，以根皮苷溶液为对照品溶液，以三氯甲烷丙酮甲醇为3 1 1配比在5 15°C放置0. 5-20小时的下层溶液为展开剂，以0. 5-50%香草醛浓硫酸溶液为显色剂，在 80-150°C加热至斑点显色清晰。
6.权利要求4-5所述的质量控制方法，其特征在于供试品是由多穗石柯叶药材粉末 0. 2-5g，加乙醇20-50ml，加热回流0. 5-1. 5小时，滤过，滤液浓缩至2_20ml制成。
7.权利要求4-5所述的质量控制方法，其特征在于对照品溶液由根皮苷对照品加乙醇制成每Iml含0. 2-20mg根皮苷的溶液，作为对照品溶液。
8.多穗石柯叶药材质量控制方法，其特征在于通过多穗石柯叶药材的性状鉴别控制质量，其中多穗石柯叶药材完整叶长7-20cm，宽2-8cm，叶片革质，长椭圆形或卵状长椭圆形， 叶脉在背面突出，先端急尖或渐尖，叶绿色，上面色深，下面色淡，基部契形，全缘，无毛，叶柄长1-2. 5cm,基部增粗，常呈暗褐色，质脆，气微，味甜。
9.多穗石柯叶药材质量控制方法，其特征在于通过多穗石柯叶药材的显微鉴别控制质量，其中多穗石柯叶药材粉末灰绿色或灰棕色，叶的下表皮细胞呈多角形，壁薄，非腺毛单细胞，直径3-9 μ m，长22-50 μ m。气孔不定式或不等式，纤维多已折断，成束或单根散在，直径7-17 μ m,螺纹或网纹导管。可见栅栏组织碎片和棕色块状物，薄壁细胞含草酸钙簇晶。
10.多穗石柯叶药材质量控制方法，其特征在于多穗石柯叶药材中水分不得超过 8. 0%，总灰分不得超过6. 5 %，酸不溶性灰分不得超过0. 3 %，浸出物不得低于18. 0%。
11.权利要求1-10中药材质量控制方法，其特征在于多穗石柯叶药材为壳斗科 Fagaceae，栎(石柯)属 Lithoearpus 常绿植物 Lithocarpus litseifolius (Hance) Chun 的叶。
全文摘要
本发明涉及多穗石柯叶药材的质量控制，提供了多穗石柯叶药材的质量控制方法，在评价该药材的含量检测、薄层鉴别、性状鉴别、显微鉴别以及水分灰分控制方法的基础上，为规范多穗石柯叶药材质量提供了科学依据。
文档编号A61P17/04GK102218085SQ20101015295
公开日2011年10月19日 申请日期2010年4月13日 优先权日2010年4月13日
发明者孙伟新, 蒋华良, 顾书华 申请人:常州善美药物研究开发中心有限公司