专利名称：一种阿魏酸的新用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种阿魏酸的新用途，特别涉及一种阿魏酸及其制剂在治疗小剂量辐 射致骨髓造血功能障碍方面的新用途。
背景技术：
与大剂量照射事件或事故的发生相比，受到小剂量辐射暴露的人群和几率要更 大，除受到天然本底辐射外，公众成员还可能因频繁飞行活动、医学检查、不适当的居住环 境，以及职业照射、空间活动等方式或途径，受到小剂量辐射暴露。由于军事作业的特殊环 境，官兵长期小剂量辐射暴露的性质往往比较复杂。因此，开发副作用小或没有明显副作 用，能够长期服用，对小剂量辐射引起的骨髓造血功能障碍有较好保护作用的新型抗辐射损伤药物，对维护我军官兵身心健康具有积极的现实意义。化学合成的预防辐射药存在毒性大的危险，从天然植物，特别是从传统中药、民族 民间植物药中寻找活性成分，创制安全有效的防辐射药具有特有的优势。目前还未见有关 阿魏酸可以治疗小剂量辐射方面的报道。
发明内容
本发明的目的在于公开一种阿魏酸及其制剂在治疗小剂量辐射方面的新用途。本发明中的阿魏酸是从四物汤、当归、川芎等传统中药、植物药中提取的活性成 分，其作用机理是通过促进骨髓造血进而升高外周血中的有形成分，对小剂量辐射引起的 骨髓造血功能障碍方面具有显著治疗作用。阿魏酸及其制剂可为临床治疗小剂量辐射提 供疗效确切、生物利用度高的临床药物，日用剂量含阿魏酸10-100mg/kg，按照成人的平 均体重为60kg，本发明做成药物制剂时，根据日用剂量计算其每日用制剂量中含阿魏酸 0. 6-6g，由于不同剂型所含的阿魏酸每日最大服用量是相同的，因此各个剂型可统一以日 用制剂量为计量单位，所述的制剂单位可以是胶囊剂的每粒、片剂的每片、丸剂的每丸、口 服液的每支等。
图1 :2. 5Gy射线照射小鼠灌胃阿魏酸对外周血白细胞总数的影响；图2 2. 5Gy射线照射小鼠灌胃阿魏酸对外周血红细胞总数的影响图3 2. 5Gy射线照射小鼠灌胃阿魏酸对外周血红蛋白含量的影响图4 2. 5Gy射线照射小鼠灌胃阿魏酸对外周血小板的影响本发明目的是通过如下实验例实现的实验例1阿魏酸对2. 5Gy射线照射小鼠外周血象和骨髓造血功能的影响1、材料与方法(1)实验动物昆明种小鼠72只，二级，雌雄各半，日龄6-8周，体重18_22g，购自军事医学科学院动物中心。由军事医学科学院实验动物中心提供，实验动物生产条件许可证编号为 SYXK-(军)007-004，实验动物合格证号码医动字SCXK-(军)007-004。(2)仪器及试剂阿魏酸购于中国生物制品检定所，批号110736-200932。阿魏酸剂量设置为20、 40、80mg/kg。阳性对照药茜草双酯由军事医学科学院放射与辐射医学研究所二室提供，根 据文献及预实验结果剂量为100mg/kg。生理盐水配制成0. 2ml/只。溶血素(血细胞分析仪用)批号C9011，失效期20100923 ；稀释液批号 C9134，失效期=20110310 ；清洗液批号C9008，失效期=20110715,以上均由山东兰桥科技 有限公司生产。试验所用仪器经《中国人民解放军军事医学科学院计量测试站》检测合格，并发合 格证。F820型血细胞分析仪，日本生产。C02培养箱为ThermoForma公司产品，紫外分光光 度计为Beckman公司产品。Labofuge 400R型低温离心机，Heraeus公司产品。(3)模型制作采用6tlCtlY射线全身一次照射，照射剂量为2. 5Gy，剂量率为2. SOGy.mirT1。(4)实验动物分组与处理实验分正常组、模型组、阳性药物茜草双酯组(100mg/kg)、阿魏酸小剂量组 (20mg/kg)、阿魏酸中剂量组(40mg/kg)、阿魏酸大剂量组(80mg/kg)。每组12只小鼠，阿魏 酸腹腔注射给药后2天，6tlCtl γ射线2. 5Gy照射造成小鼠骨髓造血抑制、外周血象有形成分 减少，造模后再连续给药5天。(5)实验方法与指标的检测外周血象检测在照前、照后1、4、7、10、13、17天，每只实验小鼠尾静脉取血 20μ 1，用Sysmex-800自动血球计数仪检测外周血象。集落培养颈椎脱臼处死小鼠，置75%酒精中浸泡片刻消毒，取下小鼠股骨，用 RPMI 1640培养液冲出骨髓细胞，过4号针头制成单细胞悬液，计数细胞并算出接种细胞悬 液量，按接种有核细胞1 X 105/ml体系计算；配粒系培养体系(马血清2ml ；G-CSF IOOng ；细胞IXlO5 ； 1640补至7. 6ml)，用恒 温水浴法在37°C条件下预热IOmin后加入5%煮沸琼脂0. 5ml立即混勻，用5ml注射器边 加边摇快速混勻。每皿滴入上述体系1ml，放一塑料盒中并放几个加水的平皿后，于37°C、 5% CO2的条件下培养6天观察计数，多于50个细胞为一个细胞集落。配红系培养体系(巯基乙醇IiT4MO. 2ml ；3% L-谷氨酰胺0. 03ml ；马血清0. 7ml ； Epo 100U ；IL-3 60ng ；IL-Il 50ng ;2. 7% 甲基纤维素 0. 7ml ；细胞 1 X IO5/孔)，放于振荡 器上振荡片刻，加入24孔板中，每孔0. 2ml,于37°C、5% CO2的条件下培养3天观察计数 CFU-E,多于50个细胞为一个细胞集落。于37°C、5% CO2的条件下培养7天观察计数BFU-E、 CFU—meg、CFU—mix。(6)数据处理及统计用Microsoft excel输入所有动物不同时间的测量结果，计算各组均数、标准差及组间均数的显著性t检验。2、试验结果(1)阿魏酸对2. 5Gy照射小鼠外周血象的影响
阿魏酸对外周血白细胞数的影响照后1天起照射对照组、模型+药物组与正常对 照组比较外周血白细胞数显著降低，照后1-17天阳性药茜草双酯组、阿魏酸低、中、高剂量 组与模型对照组比较均不同程度升高外周血白细胞数。阿魏酸高剂量组的作用优于阳性对 照药，见表1，图1。表1 2. 5Gy射线照射小鼠灌胃阿魏酸外周血白细胞总数的变化
照后时间白细胞总数(X107L)
(d)_TE常对照 模型对照 低剂量中剂量高剂量阳性药 注与正常对照组相比，#P < 0. 05，##P < 0. 01 ；与照射对照组相比，*P < 0. 05， < 0· 01。阿魏酸对外周血红细胞数的影响照后1天起照射对照组与正常对照组比较，夕卜 周血红细胞数降低，而给药组不同程度升高外周血红细胞数，但仅在个别时间点有统计学 意义，见表2，图2。表2 2. 5Gy射线照射小鼠灌胃阿魏酸外周血红细胞总数的变化
照后时间白细胞总数(X1012/L)
(d)_正常对照 模型对照低剂量中剂量高剂量阳性药 注与正常对照组相比，#P < 0. 05，##P < 0. 01 ；与照射对照组相比，*P < 0. 05， < 0· 01。阿魏酸对外周血红蛋白的影响照后1天起照射对照组、模型+药物组与正常对照 组比较外周血红蛋白含量显著降低，照后1-17天阳性药茜草双酯组、阿魏酸低、中、高剂量 组与模型对照组比较均不同程度升高外周血红蛋白含量，见表3，图3。表3 2. 5Gy射线照射小鼠灌胃阿魏酸外周血红蛋白含量的变化 注与正常对照组相比，#Ρ < 0. 05，##Ρ < 0. 01 ；与照射对照组相比，*Ρ < 0. 05， < 0· 01。阿魏酸对外周血小板数的影响照后1天起照射对照组、模型+药物组与正常对照 组比较外周血小板数量显著降低，照后1-17天阳性药茜草双酯组、阿魏酸低、中、高剂量组 与模型对照组比较均不同程度升高外周血小板数量，见表4、图4。表4 2. 5Gy射线照射小鼠灌胃阿魏酸外周血血小板数的变化_照后时间血小板数(X109/L)(d)正常对照模型对照低剂量中剂量 高剂量 阳性药照前值933. 8 + 271933. 9 + 2961160. 3 + 280 1109. 2士118 1049. 1士251 974. 4士184照后1 天915. 3 + 183689.2士210## 854. 4士 199林 926. 1士304** 925. 4士234* 992. 1士213**照后4 天1194 士 2971185 士 2151243. 6 士 292 1256. 7士190 1409. 3士304* 1332. 1士117**照后7 天1052. 9 ± 190510.3士136##551 士 94* 659.6士119** 724.3士259** 603.7士126**照后10 天1117.7 士 146 418.4 士 194## 571.9 士 224* 579.5士110** 547.8士134** 593.9士100**照后13 天 978.2 士 224683.6 士 238## 886.7 士 190 林 956.7士167** 1058.6士116** 907.3士106**照后17 天 1021.1 士 161 712.3 士 189## 931.4 士 160** 989.7士189** 1019.3士142** 915.2士124*_注与正常对照组相比，#P < 0. 05，##P < 0. 01 ；与照射对照组相比，*P < 0. 05， < 0. 01(2)阿魏酸对2. 5Gy射线照射小鼠骨髓造血功能的影响(见表5)阿魏酸对CFU-E的影响2. 5Gy照射7天后，模型对照组CFU-E集落数显著降低，模 型+药物组集落数均显著高于模型对照组，其中阿魏酸高剂量组的作用优于阳性对照药。
阿魏酸对BFU-E的影响2. 5Gy照射7天后，模型对照组BFU-E集落数显著降低， 模型+药物组集落数均显著高于模型对照组，其中阿魏酸中、高剂量组的作用优于阳性对 照药。阿魏酸对CFU-Meg的影响2. 5Gy照射7天后，模型对照组CFU-Meg集落数显著降低，模型+药物组集落数略高于模型对照组，但各组间未见统计差别。阿魏酸对CFU-Mix的影响2. 5Gy照射7天后，模型对照组CFU-Mix集落数显著降低，阳性药茜草双酯组、阿魏酸中、高剂量组显著高于模型对照组。阿魏酸对CFU-GM的影响2. 5Gy照射7天后，模型对照组CFU-GM集落数显著降低， 模型+药物组集落数均显著高于模型对照组，其中阿魏酸各剂量组均优于阳性药茜草双酯 组。表5对2. 5Gy照射小鼠骨髓造血功能的影响 注与模型对照组比较*P < 0.05，< 0.01 ；与阳性药茜草双酯组比较#P < 0. 05，##P < 0. 01。下述实施例均能实现上述实验例的效果。
具体实施例方式实施例1 片剂的制备按照常规工艺，从四物汤水煎液中提取阿魏酸，加入常规辅料，制成阿魏酸片剂， 用于治疗小剂量辐射引起的骨髓造血功能障碍，日用剂量含阿魏酸20mg/kg。实施例2 胶囊的制备按照常规工艺，从四物汤中提取阿魏酸，加入常规辅料，制成阿魏酸胶囊剂，治疗 小剂量辐射致骨髓造血功能障碍，日用剂量含阿魏酸40mg/kg。实施例3 丸剂的制备按照常规工艺，从当归中提取阿魏酸，加入常规辅料，制成阿魏酸丸剂，治疗小剂 量辐射致骨髓造血功能障碍，日用剂量含阿魏酸80mg/kg。实施例4 滴丸的制备按照常规工艺，从川芎中提取阿魏酸，加入常规辅料，制成阿魏酸滴丸剂，治疗小 剂量辐射致骨髓造血功能障碍，日用剂量含阿魏酸50mg/kg。实施例5 阿魏酸口服液，治疗小剂量辐射致骨髓造血功能障碍，日用剂量含阿魏 酸 60mg/kgo实施例6 阿魏酸注射剂，治疗小剂量辐射致骨髓造血功能障碍，日用剂量含阿魏 酸 10mg/kgo
实施例7 阿魏酸颗粒剂，治疗小剂量辐射致骨髓造血功能障碍，日用剂量含阿魏 酸 30mg/kg。实施例8 阿魏酸冻干粉针剂，治疗小剂量辐射致骨髓造血功能障碍，日用剂量含 阿魏酸90mg/kg。实施例9 阿魏酸缓释片，治疗小剂量辐射致骨髓造血功能障碍，日用剂量含阿魏 酸 70mg/kg。实施例10 阿魏酸缓释胶囊，治疗小剂量辐射致骨髓造血功能障碍，日用剂量含 阿魏酸100mg/kg。实施例11 按照常规工艺，从四物汤水煎液中提取阿魏酸，加入常规辅料，制成阿 魏酸片剂，用于治疗小剂量辐射引起的骨髓造血功能障碍，每日用制剂量中含阿魏酸1. 2g， 每片含阿魏酸0. 2g，6片/天。实施例12 按照常规工艺，从四物汤中提取阿魏酸，加入常规辅料，制成阿魏酸胶 囊剂，治疗小剂量辐射致骨髓造血功能障碍，每日用制剂量含阿魏酸2. 4g，每粒含阿魏酸 0. 2g，12 粒 / 天。实施例13 按照常规工艺，从当归中提取阿魏酸，加入常规辅料，制成阿魏酸丸 齐U，治疗小剂量辐射致骨髓造血功能障碍，每日用制剂量含阿魏酸4. Sg,每丸含阿魏酸 1.6g，3 丸 / 天。实施例14 阿魏酸口服液，治疗小剂量辐射致骨髓造血功能障碍，每日用制剂量 含阿魏酸3. 6g，每支含阿魏酸1. 2g，3支/天。实施例15 阿魏酸缓释片，治疗小剂量辐射致骨髓造血功能障碍，每日用剂量含阿魏酸6g，每片含阿魏酸lg，6片/天。
权利要求
一种阿魏酸在制备治疗小剂量辐射引起的骨髓造血功能障碍药物中的应用。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于该阿魏酸从传统中药、植物药中提取。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于该阿魏酸从四物汤或当归、或川芎中提取。
4.如权利要求1-3任一所述的应用，其特征在于该药物通过促进骨髓造血进而升高外 周血中的有形成分。
5.如权利要求1-3任一所述的应用，其特征在于该药物的日用剂量中含阿魏酸 10-100mg/kg。
6.如权利要求4所述的应用，其特征在于该药物的日用剂量中含阿魏酸10-100mg/kg。
7.如权利要求5所述的应用，其特征在于该药物的日用剂量中含阿魏酸20mg/kg或 40mg/kg 或 80mg/kgo
8.如权利要求6所述的应用，其特征在于该药物的日用剂量中含阿魏酸20mg/kg或 40mg/kg 或 80mg/kgo
9.如权利要求1-3任一所述的应用，其特征在于该药物的每日用制剂量中含阿魏酸 0. 6_6g0
10.如权利要求4所述的应用，其特征在于该药物的每日用制剂量中含阿魏酸0.6-6g。
11.如权利要求9所述的应用，其特征在于该药物的每日用制剂量中含阿魏酸1.2g或 2. 4g 或 4. 8g。
12.如权利要求10所述的应用，其特征在于该药物的每日用制剂量中含阿魏酸1.2g或 2. 4g 或 4. 8g。
全文摘要
本发明公开一种阿魏酸及其制剂在治疗小剂量辐射致骨髓造血功能障碍方面的新用途，其作用机理是通过促进骨髓造血进而升高外周血中的有形成分，对小剂量辐射引起的骨髓造血功能障碍方面具有显著治疗作用，可为临床治疗小剂量辐射提供疗效确切、生物利用度高的临床药物。
文档编号A61P39/00GK101836972SQ20101020002
公开日2010年9月22日 申请日期2010年6月13日 优先权日2010年6月4日
发明者刘明, 梁乾德, 洪倩, 王宇光, 肖成荣, 谭红玲, 马增春, 高月 申请人:中国人民解放军军事医学科学院放射与辐射医学研究所