一种治疗中枢神经系统退行性病变的药物组合物、其制备方法和用途的制作方法

文档序号:995485阅读:278来源:国知局
专利名称:一种治疗中枢神经系统退行性病变的药物组合物、其制备方法和用途的制作方法
技术领域
本发明涉及一种药物组合物,该药物组合物主要由黄芩、川芎和当归组成,具有治 疗和缓解中枢神经系统退行性病变的作用,尤其是治疗和缓解老年痴呆、血管性痴呆或轻 度认知障碍症的作用,属于中药技术领域。
背景技术
老年性痴呆是一种常见的中枢神经系统退行性疾病。近年来,随着世界人口的老 龄化.老年痴呆症的发病率呈不断上升趋势,目前该病列死亡原因第4位(仅次于心脏病、 肿瘤和中风),成为当前老年医学所面临的最为严峻的问题之一。据统计,在我国60岁以 上人口中患病率约5%,约600万,并随年龄增高而增加。老年性痴呆的病理变化,在形态 上主要表现为大脑皮质明显萎缩,以额叶、颞叶、顶叶为主。脑回萎缩变窄,脑沟增宽,脑室 扩大;主要的组织病理学变化是在大脑细胞外出现了由β-淀粉样蛋白的42个氨基酸肽的 亚型(即Αβ42)聚集形成的淀粉样斑块(老年斑)(SP),以及在神经元内出现了由细胞微 管和过度磷酸化的Tau蛋白构成的神经纤维缠结(NFT)。由于淀粉样蛋白的产生增多 或清除减少,聚集的β “淀粉样蛋白启动了一系列在神经退行性变性与痴呆发病中的病理 过程,即淀粉样蛋白假说。Αβ42的聚集导致了淀粉样斑块的形成,并启动一系列与神经元 和突触功能异常、炎性反应、Tau蛋白的过度磷酸化、神经纤维缠结形成、神经元死亡、神经 递质异常相关的改变,最终导致痴呆的发生。老年性痴呆临床以意识模糊、记忆缺损、人格 和语言障碍为主要表现。该病可导致老年人生活质量下降,严重者丧失生活自理能力,给家 庭、社会带来沉重负担,随着我国人口的老龄化,其发病率亦持续升高,因此积极防治老年 性痴呆已成为老年临床医学的一个重要课题。按发病机制,老年性痴呆症可分为4类阿尔茨海默症(Alzheimer’ S diease, AD)、血管性痴呆症(Vascular dementia,VD)、混合型痴呆症(Mixed dementia, MD)和其它 痴呆症(Other dementia, 0D),其中AD和VD最常见。现代医学对老年性痴呆的病因及发病机制已经进行了多年的研究,但因其病因复 杂,至今对其具体环节尚未明了,目前对AD的病因和发病机制的认识主要集中于遗传和环 境因素所引起的脑内慢性炎症和胆碱能系统功能进行性下降,主要的较具代表性的学说 有胆碱能学说、自由基损伤学说、钙超载学说及中医的血流变学说等。中医学对老年性痴呆病位、病因、病机有独到的认识。中医辨证论治理论认为,无 论血管性痴呆或阿尔茨海默病,都主要表现为中医“神”的病变。中医认为痰浊、瘀血是加 速脑衰老导致老年痴呆的重要因素,心肾不足、气虚血亏、阴损精衰是发病的核心,而痰瘀 火邪的作用只是发病的重要因素。辨证论治是中医的特色与精华,在中医对老年性痴呆的 治疗中占主导地位。因老年性痴呆的发病机制存在多种假说,目前尚无一种假说能较完整的解释老年 性痴呆,因此尽管临床治疗老年性痴呆的药物种类很多,但还没有特效药物,目前用于治疗老年性痴呆的药物主要有改善胆碱能神经传递药、自由基消除剂和抗氧化剂、改善血液循 环和脑细胞代谢的药物和钙通道阻滞剂等。在老年性痴呆的治疗上,中药及其复方在缓解衰老及衰老相关疾病的防治方面有 着丰富的理论和实践经验,具有整体调理、综合施治的优点,且毒副作用少,适宜长期服用, 尤其是中药多靶点、多环节、多方式的作用机制,治疗AD具有明显的优越性,在AD治疗中, 起到越来越重要的作用。中药复方是根据中医药理论的作用机理,选用不同的组方,采用多种分析手段,从 多方位、多角度,全面而客观地阐述了中药复方制剂的促智作用。根据临床经验及实验研 究,选项出的有效中药复方有补肾益智方是老年性痴呆的主要生化指标、中药补肾益智方 具有补肾、益气、生髓、养脑作用,其含药血清能有效地保护由淀粉样蛋白引起的这些改变; 丹桅逍遥散使模型大鼠脑能量负荷、蛋白质、糖醛还原酶信使含量降低;使模型的脑蛋白 质、糖醛还原酶信使含量回升,减轻物质代谢障碍。中医药治疗老年性痴呆已经积累了丰富 的经验,具有整体调理、综合施治的优点,且毒副作用少,适宜长期服用,同时在保健预防及 调畅情志等方面有许多独到之处,形成了较为系统的理论。但目前还存在一些不足,主要表 现在许多临床研究中没有采用统一的诊断、分型、疗效评定标准,在组方、选药、剂量上因人 而异,无法规范。治疗老年性痴呆应以早期诊断预防为主,并早日开发出疗效确切的系列药 物,促使中医药治疗老年性痴呆的研究深入化和科学化,提高中医药治疗老年性痴呆的临 床疗效,以造福人类。随着人口的老龄化以及疾病谱的改变中医中药在防治老年性痴呆的 前景会越来越广阔。目前尚无文献报道仅仅由黄芩、川芎、当归三味原料药制备成制剂,尤其是将这三 种药合用用于治疗中枢神经系统退行性病变,未见相关研究。

发明内容
本发明的目的在于提供一种药物组合物,该药物组合物主要由黄芩、川芎和当归 组成,具有治疗和缓解中枢神经退行性病变的作用,尤其是具有治疗和缓解老年痴呆、血管 性痴呆和轻度认知障碍的作用。优选地,本发明药物组合物中,所述的主要原料药黄芩、川芎和当归的重量配比为 黄芩5-20份,川芎5-15份,当归5-15份;更为优选地,所述主要原料药的重量配比为黄芩 10-15份,川芎8-12份,当归8-12份,更优选为黄芩12-15份,川芎10-12份,当归10-12 份。本发明的目的还在于提供一种制备本发明药物组合物的活性成分的制备方法,制 备本发明药物组合物的活性成分时,先从原料药中制备获取川芎和当归挥发性成分,备用; 所得挥发性成分与经水或与水相互溶的有机溶剂提取后的川芎、当归和黄芩清膏混合均 勻,即得药物组合物活性成分,混合后的活性成分加入制药上可接受的辅料,以制剂常规技 术制备所需的药物单元剂型,如可以是颗粒、片剂、胶囊、滴丸、口服液、混悬液、乳浊液、注 射液等临床所需的剂型。或者,本发明主要原料药组合物的活性成分的提取制备方法可以是取处方量的 原料药,粉碎合并后,以水或与水相互溶的有机溶剂提取1-4次,过滤,合并各次提取滤液, 滤液减压浓缩后的活性成分提取物清膏,备用;提取物清膏加入制药上可接受的赋形剂,混合均勻,以制剂常规技术制备所需的药物单元剂型。本发明的一优选实施例中,给出了具体制备本发明药物组合物活性成分的方法,该方法包括(a)称取处方量的黄芩、川芎和当归,粉碎成粗粉;(b)取黄芩,加水或30-80% 的乙醇提取,滤过,滤液浓缩得清膏I ; (c)取川芎、当归,混合,加水蒸馏,收集挥发油,备 用;药渣所得水煎液滤过,滤液浓缩,得清膏II ; (d)将(b)、(c)步骤制备的清膏I、清膏II 和挥发油混合均勻,加入药学上可接受飞赋形剂,以常规制剂工艺制备所需的单元剂型。本发明的再一优选实施例中,给出了另一种途径制备本发明药物组合物活性成分 的方法,具体包括(a)称取处方量的黄芩、川芎和当归,粉碎成粗粉;(b)取黄芩、川芎、当 归,混合,加水煎煮蒸馏,收集挥发油,药渣水煎液过滤,滤液浓缩,得清膏;(c)将所得清膏 和挥发油混合均勻,加入药学上可接受的赋形剂,以常规制剂技术制备所需的单元剂型。本发明中,所用的能够与水相互溶的有机溶剂,可以是选自与水相互溶的甲醇、乙 醇、丙酮中的任意一种,优选为与水相互溶的乙醇,更优选为浓度为30% -80%的乙醇。本发明中,所用的提取方法可以是煎煮提取、回流提取、浸泡提取、超声提取或渗 漉提取中的任意一种方式,或者采用不同提取方法的组合。本发明中,制药上可接受的赋形剂,是本领域技术人员所熟知的常用赋形剂,根据 制成不同制剂的需要,本领域技术人员可以从这些常规的赋形剂中做出选择,以制备成所 需的单元剂型,所选用的赋形剂包括但不局限于填充剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂、防腐剂寸。在本发明一实施例中,给出了不同比例的本发明药物组合物用于抗拟痴呆小鼠模 型的实验研究,从而得出本发明原料药组合物较为优选的原料药的配比范围。在本发明其它实施例中,给出了本发明主要原料药较优配比的提取物成分用于抗 东莨菪碱致拟痴呆小鼠、抗血管性痴呆模型小鼠、对小鼠软脑组织循环的药理实验,证明本 发明药物组合物可用于相关中枢神经系统退行性病变的治疗。本发明中,药物组合物的形式还可以是从黄芩、川芎和当归中提取出单一有效成 分进行单一活性成分组合配比以用于治疗中枢神经退行性病变,尤其是老年痴呆、血管性 痴呆和轻度认知障碍的治疗和缓解改善。本发明中,从主要原料药黄芩、川芎和当归中提取 的单一活性成分分别为黄芩苷、藁本内酯和阿魏酸,其中各活性成分间的重量配比为黄芩 苷18-24份,藁本内酯10-15份,阿魏酸3-6份,优选为黄芩苷20份、藁本内酯12份、阿魏 酸4份。在本发明实施例中,还给出了优选的黄芩苷、藁本内酯和阿魏酸对小鼠痴呆和认 知障碍模型的药理研究。
具体实施例方式本发明通过下述实施例进一步阐明,但任何实施例或其组合不应当理解为对本发 明的范围或实施方式的限制。本发明的范围由所附权利要求书限定,结合本说明书和本领 域一般常识,本领域普通技术人员可以清楚地明白权利要求书所限定的范围。在不偏离本 发明的精神和范围的前提下,本领域技术人员可以对本发明的技术方案进行任何修改或改 变,这种修改和改变也包含在本发明的范围内。实施例1本发明颗粒剂的制备
处方黄芩150g川芎150g 当归50g称取处方量的上述 药,粉碎成粗粉,当归、川芎合并,加10倍重量的水,浸泡,采用 水蒸气蒸馏的方法,提取收集所得挥发性成分,备用;水提液过滤,备用;滤渣与黄芩粗粉 合并,以水箭煮提取3次,过滤,合并滤液,所得滤液再与川芎、当归水提液合并,减压浓缩 得清膏,将所得的挥发性成分加入到清膏中,混合均勻,清膏中加入淀粉和微晶纤维素,制 软材,制粒、干燥、整粒,即得颗粒剂。实施例2本发明颗片剂的制备处方黄芩150g川芎IOOg 当归IOOg称取处方量的原料药,粉碎成粗粉,合并各原料药材,加入20倍量的70%的乙醇, 浸泡过夜,待药材浸透,采用渗漉法进行渗漉提取,收集渗漉提取液,渗漉器内适时加入新 鲜的70 %的乙醇补充,待渗漉液颜色变淡,渗漉提取完毕,合并收集的渗漉提取液,减压浓 缩,得原料药活性成分提取物清膏,备用;提取物清膏中加入淀粉、微晶纤维素、交联羧甲基 纤维素,制软材、制粒、干燥、整粒,所得颗粒再加入润滑剂硬脂酸镁,压片,即得片剂。实施例3本发明胶囊剂的制备处方黄芩200g川芎50g当归50g称取处方量的原料药,粉碎成粗粉,合并川芎和当归,加10倍量的水浸泡至药材 浸透,以水蒸气蒸馏方法提取收集所得挥发性成分,备用;水提取液过滤,得滤液,滤渣再用 水提取两次,过滤,将各次水提液合并,减压浓缩,得清膏I ;黄芩加50%的乙醇回流提取3次,过滤,合并滤液,滤液减压浓缩,得黄芩提取清 膏II ;将清膏I、II和挥发性成分合并均勻,加入糊精和微晶纤维素,制软材、制粒、干 燥、整粒,将整好的颗粒装入硬胶囊囊壳内,即得硬胶囊剂。实施例4本发明滴丸剂的制备处方黄芩50g川芎150g 当归150g取处方量的的黄芩、川芎、当归,粉碎成粗粉,混合均勻,药材粉末中加入10倍量 60 %的乙醇回流提取3次,过滤,合并滤液,滤液减压浓缩,真空干燥,粉碎,得活性成分提 取物药粉。提取物药粉,按照本领域常规的制剂技术,加入制备滴丸所需的赋形剂,制成滴丸 剂。实施例5本发明口服液的制备处方黄芩150g川芎150g 当归150g取处方量的黄芩、川芎、当归,粉碎成粗粉,合并,药材中加10倍量的水至浸透,水 蒸气蒸馏提取,收集挥发性成分备用;提取液过滤,药渣再用水回流提取两次,过滤,合并各 次水提取液,减压浓缩至相对密度约为1. 05,加入所得的挥发性成分,并加入制备口服液所 需的防腐剂和助溶剂,制备成口服制剂。实施例6单一提取制备而得的有效成分片剂处方黄芩苷2g藁本内酯1. 2g阿魏酸0. 4g称取处方量的黄芩苷、藁本内酯和阿魏酸,合并均勻,加入填充剂微晶纤维素和崩 解剂交联聚乙烯吡咯烷酮,以聚维酮的乙醇溶液为粘合剂,制软材、制粒、整粒,所得颗粒中加入润滑剂硬脂酸镁,压制成片。实施例7本发明药物颗粒抗拟痴呆小鼠模型的试验胆碱能学说认为,痴呆患者脑内Maynert基底核及海马和新皮层区胆碱能神经元 减少导致乙酰胆碱神经递质水平降低,从而导致认知功能及情绪行为的障碍。东莨菪碱为M 胆碱能受体阻断剂,可阻断乙酰胆碱对M受体的激动作用,造成学习记忆功能障碍,故采用 小鼠腹腔注射氢溴酸东莨菪碱液(SCOP)可造成学习记忆障碍,可模拟老年性痴呆患者的 学习记忆能力减退,可用于早期药物的筛选。因此选择避暗法中逃避潜伏期(S)和错误次 数作为考核指标来进行黄芩、川芎和当归三味中药配伍配比比例筛选。 1实验材料1. 1 动物KM小鼠,体重18_22g,SPF级,由四川省医学科学院实验动物研究所提供,动物合 格证号川实动管质SCXK (川)2004-16。小鼠在室温22-24°C,明暗周期12h/12h条件下饲 养,除给药、造模及试验程序外均自由饮水摄食。实验场地为国家中医药管理局成都中医药 大学中药药理三级实验室,编号TCM-2009-315。1. 2 药物黄芩、川芎、当归均购自成都同仁堂药店,经成都中医药大学生药教研室王光志博 士鉴定,均为药典正品,按照不同的剂量配伍配比比例,采用实施例2的方法制备成100% 标准提取液备用(标准提取液为每Iml提取液中含Ig生药材)。氢溴酸东莨菪碱液(SC0P, 上海禾丰制药有限公司生产)。安理申,卫材(中国)药业有限公司生产,批号080709。1. 3试剂和仪器BA-200自动避暗测试仪(及测试箱)(小鼠),由成都泰盟科技有限公司生产, ACHE试剂盒,南京建成生物工程所,批号20090606。2实验方法2. 1、药物配比的正交设计选L9 (34)正交设计表进行实验,见表1。表1黄芩、川弯和当归配比比例(g) 2. 1模型制备避暗实验组各组小鼠分别于第14日给药后50min,除空白对照组外,其余各组小 鼠在避暗训练前lOmin,ip给予SCOP 2mg/kg体重(0. lml/10g体重),造成小鼠记忆获得 障碍模型。空白对照组ip等量的N. S。2. 2分组与给药小鼠适应三天,120只小鼠随机分成12组,10只/组,即正常对照组(A)、模型组 (B)、安理申阳性对照组(C)、D(黄芩川弯当归=1 1 1)、E(黄芩川芎当归= 1:2: 2)、F(黄芩川芎当归=1:3: 3)、G(黄芩川芎当归=2 1 2)、H(黄 芩川弯当归=2 2 3)、1(黄芩川弯当归=2:3: 1)、J (黄芩川弯当归 =3:1: 3)、K(黄芩川芎当归=3:2: 1)、L(黄芩川芎当归=3:3:2); 按0. 2ml/10g体重/天ig给药,模型对照组、空白对照组给予等量生理盐水,安理申组给药 剂量为1. 3mg/kg体重;给药15日,于第14、15日给药后开始进行学习记忆行为学试验。2. 3小鼠学习记忆能力测试(避暗法)2. 3. 1避暗训练避暗试验组小鼠于实验第14日ig给药或蒸馏水50min后,除空 白对照组外,其余各组小鼠ip. SCOP造模,造模后IOmin后将动物背对洞口放入避暗箱明 室,适应3min,通36V交流电,即刻计时,记录5min内各动物的潜伏期和错误次数。2. 3. 2避暗测试避暗组小鼠于实验第15日(避暗训练24小时后)ig给药或N. S 60min后,同上法将小鼠放入避暗箱明室,同时通36V交流电、计时,记录5min内各动物的潜 伏期和错误次数。2. 4统计学方法数据采用“均数士标准差”(XiSD )表示,运用SPSS11. 5统计软件进行数据统
计分析。3 结果3. 1药物对拟痴呆小鼠模型避暗法逃避潜伏期和错误次数的影响与正常对照组比较,模型对照组小鼠逃避潜伏期明显缩短,错误次数显著增多,有 显著的统计学意义(P < 0.01)。与模型对照组比较,黄芩川芎当归不同配比方组和阳 性药逃避潜伏期明显延长,错误次数显著减少,有明显的统计学意义(P < 0. 05)。见表2。表2各配比组成药物对小鼠逃避潜伏期和错误次数的影响(避暗法) 以逃避潜伏期为考察指标,由表中极差大小显示,各影响因素作用主次为B > A > C ;方差分析结果表明A、B因素有显著性意义(P < 0. 05),即黄芩、川芎用量为主要影响因 素,C因素无显著性意义(P>0.05),即当归用量影响较小,故配伍比例考虑以A3B3C1为 佳,即黄芩川芎当归的最终重量配伍比例为15 15 5。3. 2. 1以错误次数为指标 表4黄芩川芎当归剂量配伍比例方差分析表(错误次数) 以错误次数为考察指标,由表中极差大小显示,各影响因素作用主次为A>B>C ; 方差分析结果表明A因素有显著性意义(P < 0. 05),即黄芩用量为主要影响因素,B和C 因素无显著性意义(P > 0. 05),即,川芎、当归用量影响较小,故配伍比例考虑以A3B1C1为 佳,即黄芩川芎当归的最终重量配伍比例为15 5 5。4、结论综合逃避潜伏期和错误次数两方面的因素,川芎用量对逃避潜伏期为主要影响因 素,但对错误此时不是主要影响因素,因此其用量可以选择次优水平,即B2 ;虽然C不是主 要影响因素,用量可以选择C3,但同时考虑到川芎当归临床一般都是作为药对出现,因此,确定A3B2C2为最佳配伍,即黄芩川芎当归的最终重量配伍比例为15 10 10。在以下药理实施例中,本发明实验药物组合物组所用的药材比例及活性成分制备方法采用实施例2所制备得到的活性成分提取物作为实验给药药物。实施例8本发明药物颗粒抗东莨菪碱致拟痴呆小鼠的试验1实验材料1. 1实验动物KM小鼠60只,体重20 士 2g,鼠龄45 50天,雌雄各半,均由四川省医学科学院实 验动物研究所提供,合格证号为SCXK (川)2004-15,在室温22-24°C,明暗周期12h/12h条 件下饲养,自由饮水摄食。1. 2药品与试剂安理申,卫材(中国)药业有限公司生产,批号080709。氢溴酸东莨菪碱液 (SCOP),上海禾丰制药有限公司生产,批号6A18007。ACHE试剂盒,南京建成生物工程所,批 号 20090606。1. 3实验主要仪器及试剂DT-200小鼠跳台测试仪(及测试箱),成都泰盟科技有限公司BA-200自动避暗测试仪(及测试箱),成都泰盟科技有限公司2实验方法2. 1分组及处理KM小鼠,雌雄各半,按体重及性别随机分为正常对照组、模型对照组、安理申阳 性对照组和本发明药物高、中、低剂量组以及实施例6的单一活性成分组,各组动物按 0.2ml/10g体重/天ig给药,给药剂量见表1。避暗、跳台实验组各组小鼠分别于第14日 给药后50min,除空白对照组外,其余各组小鼠在避暗训练、跳台训练前lOmin,ip给予SCOP 2mg/kg体重(0. lml/10g体重),造成小鼠记忆获得障碍模型。空白对照组ip等量的N. S。 各组小鼠在行为学试验结束时,立刻取脑组织,制备脑勻浆,按AchE试剂盒步骤说明测定 各组小鼠全脑AchE活性。2. 2小鼠学习记忆能力测试(1)避暗法①避暗训练避暗试验组小鼠于实验第14日ig给药或蒸馏水50min后,除空白对 照组外,其余各组小鼠ip. SCOP造模,造模后IOmin后将动物背对洞口放入避暗箱明室,适 应3min,通36V交流电,即刻计时,记录5min内各动物的潜伏期和错误次数。②避暗测试避暗组小鼠于实验第15日(避暗训练24小时后)ig给药或N. S 60min后,同上法将小鼠放入避暗箱明室,同时通36V交流电、计时,记录5min内各动物的潜 伏期和错误次数。(2)跳台法①跳台训练跳台试验组小鼠于实验第14日ig给药或N. S 50min后,采用与避暗 实验相同的方法造小鼠记忆获得障碍模型,IOmin后将各组小鼠放跳台上,适应3min,然后 给予32V交流电,即刻计时,记录动物5min内的潜伏期和错误次数。②跳台测试跳台组小鼠于实验第15日(跳台训练24小时后),土8给药或15 60min后,同上法将小鼠放于跳台上,同时给予32V交流电、并计时,记录动物5min内的潜伏期和错误次数。2. 3统计学处理应用SPSS 15. 0统计软件进行数据统计处理。3 结果3. 1对小鼠逃避潜伏期和错误次数的影响(避暗法)表5药物对小鼠逃避潜伏期和错误次数的影响(避暗法)(£tS ) 注与模型组比较,*P < 0. 05广P < 0. 01.由表5可知,与模型对照组比较,药物各剂量组、安理申组能显著延长小鼠的潜伏 期(ρ < 0. 05),并减少5min内小鼠的错误次数(ρ < 0. 05)。3. 2配伍组方(SZ)对小鼠逃避潜伏期和错误次数的影响(跳台法)表6药物组方对小鼠逃避潜伏期和错误次数的影响(跳台法)() 注与模型组比较,*P < 0. 05广P < 0.01由表6可知,与模型对照组比较,药物各剂量组、安理申组能显著延长小鼠的潜伏 期(ρ < 0. 05),并减少5min内小鼠的错误次数(ρ < 0. 05)。3. 3对记忆获得障碍小鼠脑组织AchE活性的影响表7药物组方对SCOP致记忆障碍模型小鼠脑内AchE活性的影响(5±S ) 注与模型组比较,*P< 0. 05 ;**P < 0.01.由见表7可知,与模型对照组比较,药物各剂量组、安理申组能显著降低AchE活性 (P < 0. 05)。4 结论本发明药物能显著提高东莨菪碱所致拟痴呆小鼠学习记忆能力,降低脑组织ACHE 活性。实施例9本发明药物颗粒抗血管性痴呆模型的试验1实验材料1.1实验动物SD大鼠,雌雄各半,SPF级,350_500g,由四川省医学科学院实验动物研究所提供, 合格证号为SCXK (川)2004-15,在室温22-24°C,明暗周期12h/12h条件下饲养,自由饮水摄食。1.2药品与试剂尼莫地平片,江苏聚荣制药集团有限公司制造,批号080218 ;MDA、MAO试剂盒,南 京建成生物工程所,批号20091106、20091107。1.3实验主要仪器MT-200水迷宫,成都泰盟科技有限公司2实验方法2.1模型制备大鼠采用2-V0法永久性结扎双侧颈总动脉,空白组只分离双侧颈总动脉,不结 扎,术后每只大鼠每天im注射用青霉素钠10万单位抗感染,共3天,术中注意补水,术后注 意保温,术后自由饲养一月后动物进行分组给药。2. 2分组与给药造模大鼠SD大鼠50只,按体重分层随机分为模型对照组、尼莫地平阳性对照组、 药物高、中、低剂量组及实施例6处方组,另取10只同批大鼠作为空白对照组,各组动物按 lml/100g体重/天ig给药,给药剂量见表1,模型对照组、空白对照组给予等量生理盐水, 连续给药15日,于实验第11日给药后开始进行水迷宫行为学试验,前4天进行定位航行实 验,第5天去平台进行空间搜索实验。2. 3Morris水迷宫测试大鼠学习记忆能力MT-200水迷宫水池平分为4个象限,平台位于SW象限中央,水温24°C,水面高于平台1.5cm,水中加牛奶至不透明,大鼠每日于SW象限中间位置面向池壁入水,实验时间为120s,前4天定位航行,由仪器自动记录其潜伏期,平台停留时间、平台停留距离,经过平 台次数,若大鼠在120s未找到平台,计为120s,实验后所有大鼠均台上停IOs以增强记忆; 实验共5天,第五天去平台,进行空间搜索实验,时间为120s,空间搜索中,手动记录其潜伏 期,并由仪器自动记录其经过平台次数、平台停留时间、平台停留距离。结果见表8。2. 4大鼠海马、血清MDA含量、MAO活性的测定各组动物学习记忆行为学试验测试结束后,立即取海马组织冻存备用,取血并分 离血清,按试剂盒说明进行大鼠海马、血清MDA含量与MAO活性的检测。结果见表9和表 10。3实验结果3. 1药物对鼠空间搜索能力的影响表8药物组方对VD模型大鼠空间学习记忆能力的影响(5±S ) 注与模型组比较,*Ρ < 0. 05广P < 0.01.由表8可知,与模型对照组比较,药物各剂量组能显著缩短大鼠的逃避潜伏期(P <0.01),并增加120s内大鼠的经过平台次数(p<0. 05)、平台停留时间(p<0. 05)、平台 停留距离(ρ <0.05)。3. 2对大鼠海马组织、血清MDA含量、MAO活性的影响表9对大鼠海马组织MDA含量、MAO活性的影响(5±S ) 注与模型组比较,*P< 0. 05 ;**P < 0.01.表10对大鼠血清MDA含量、MAO活性的影响 注与模型组比较,*P< 0. 05 ;**P < 0.01.由表9和表10可知,与模型对照组比较,药物各剂量组、尼莫地平组能显著降低大 鼠海马组织、血清MDA含量、MAO活性(ρ < 0. 01)。4、结论本发明药物可以显著提高血管性痴呆模型的学习记忆能力,降低海马组织和血清 中MDA及MAO的活性。实施例10本发明药物颗粒对小鼠软脑膜微循环试验1实验材料1.1实验动物KM小鼠60只,体重20 士 2g,鼠龄45 50天,雌雄各半,均由四川省医学科学院实 验动物研究所提供,合格证号为SCXK (川)2004-15,在室温22-24°C,明暗周期12h/12h条 件下饲养,自由饮水摄食。1.2药品与试剂尼莫地平片,江苏聚荣制药集团有限公司制造,批号080218 ;重酒石酸去甲肾上 腺素注射液,上海禾丰制药有限公司出品,批号0360602 ;1. 3实验主要仪器及试剂XTff-CTV微循环彩色电视显微镜,北京泰克仪器有限公司生产;2实验方法取小鼠60只,分为5组,即空白对照组、尼莫地平对照组、本发明药物高、中、低剂 量组及实施例6处方配比组,每组12只。连续给药7天后,腹腔注射戊巴比妥钠麻醉 后,腹卧位头部固定,颅顶正中皮肤“T”型切开,以矢状缝外3mm,冠状缝下3mm为中心,用手 术刀片掀开颅骨,暴露软脑膜,形成一个直径约5mm的颅窗,加入生理盐水20ul,术后稳定 30min后开始试验,整个试验过程保持动物体温37°C。将实验动物置于微循环显微镜下选 择直径为30 50um微动脉血管,稳定30min,测管径大小,再滴加0. 1 % NAlOul,用XTW-CTV 微循环彩色电视显微镜借助于JS接目测微计连续观察滴加NA后3、9min时微动脉血管管 径大小的变化。同时观察正常软脑膜及滴加0. NA后微循环的血色、流态、每视野交织网 点数目。结果见表11、12、13、14。3实验结果3. 1药物对小鼠软脑膜微动脉血管管径的影响表11对小鼠软脑膜微动脉血管管径的影响(iB:S ) 注与空白对照组比较,*P < 0. 05,**P < 0. 01表12对小鼠软脑膜微血管交织网点数目的影响(每视野娃S) 注与空白对照组比较,*P < 0. 05,**P < 0. 01表13对小鼠软脑膜微血管血瘀模型流态的影响 注与空白对照组比较,*P < 0. 05,**P < 0. 01表14小鼠软脑膜微血管血瘀模型血色的影响 注与空白对照组比较,*P < 0. 05,**P < 0. 01由表11 14可见,本发明药高、中、低各剂量组均可改善由去甲肾上腺素所致的 大鼠软脑膜局部微循环障碍,使微动脉血管扩张,血流增快,每视野交织网点数增多,对血 流流态也有一定的改善作用,使血色变红,与空白对照组相比有统计学差异(P < 0.05、P < 0. 01)。9分种后本发明药各剂量组和阳性对照组软脑膜局部微循环障碍基本恢复,而空 白对照组恢复不明显。4 结论本发明药有改善脑膜微循环的作用。综上所述,本发明三个原料药黄、川芎、当归配伍使用,可用于治疗和缓解老年痴 呆、血管性痴呆或轻度认知障碍诸症,具有协同增效作用。
权利要求
一种药物组合物,其特征在于,主要是由原料药黄芩、川芎和当归组成。
2.根据权利要求1所述的药物组合物,其特征在于,所述的原料药重量配比为黄芩 5-20份,川芎5-15份,当归5-15份。
3.根据权利要求1所述的药物组合物,其特征在于所述的原料药重量配比为黄芩 10-15份,川芎8-12份,当归8-12份。
4.根据权利要求1所述的药物组合物,其特征在于所述的原料药重量配比为黄芩 12-15份,川芎10-12份,当归10-12份。
5.一种制备权利要求1-4中任意一权利要求所述药物组合物的活性成分的方法,其特 征是先制备获取川芎和当归挥发性成分,备用;所得挥发性成分与经水或与水相互溶的有 机溶剂提取后的川芎、当归和黄芩清膏混合均勻,即得药物组合物活性成分,混合后的活性 成分加入制药上可接受的赋形剂,以制剂常规技术制备所需的药物单元剂型。
6.一种制备权利要求1-4中任意一权利要求所述药物组合物的活性成分的方法,其特 征是取处方量的原料药,粉碎合并后,以水或与水相互溶的有机溶剂提取1-4次,过滤,合 并各次提取滤液,滤液减压浓缩后的活性成分提取物清膏,备用;提取物清膏加入制药上可 接受的赋形剂,混合均勻,以制剂常规技术制备所需的药物单元剂型。
7.根据权利要求5或6所述的方法,其特征是所述的与水相互溶的有机溶剂为甲醇、乙 醇、丙酮中的任意一种或两种;所述的提取可以是煎煮提取、回流提取、浸泡提取、超声提取 或渗漉提取中的任意一种方式或其组合。
8.根据权利要求6所述的方法,其特征是所述的与水相互溶的有机溶剂为30%-80% 的乙醇。
9.根据权利要求1所述的药物组合物,其特征是所述的原料药是从黄芩、川芎和当归 中提取的单一活性成分,分别是黄芩中的黄芩苷,川芎中的藁本内酯和当归中的阿魏酸,其 中所述黄芩苷、藁本内酯和阿魏酸的重量比为黄芩苷18-24份,藁本内酯10-15份,阿魏酸 3-6 份。
10.权利要求1-4或权利要求9中任意一权利要求所述组合物在制备具有治疗和缓解 中枢神经系统退行性病变药物中的应用。
11.根据权利要求10所述的应用,其特征是所述的中枢神经系统退行性病变为老年痴 呆、血管性痴呆或轻度认知障碍症。
全文摘要
本发明属于制药技术领域,具体提供了一种药物组合物,主要由原料药黄芩、川芎和当归组成。本发明还提供了该药物组合物的制备方法和用途,经实验证明本发明药物组合,具有解毒通络,益智醒神功效,即能够有效改善痴呆或认知障碍的认知功能,改善行为学异常,提高患者生命质量,也能有效针对脑细胞氧化应激损伤、微炎症损伤,具有治疗中枢神经系统退行性病变,尤其是用于治疗老年痴呆或血管性痴呆或轻度认知障碍的作用。
文档编号A61P9/00GK101869600SQ201010217290
公开日2010年10月27日 申请日期2010年7月5日 优先权日2010年7月5日
发明者代渊, 徐世军, 辛文锋 申请人:成都中医药大学
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1