一种含有抗帕金森病药物的微球组合药物及其应用的制作方法

专利名称：一种含有抗帕金森病药物的微球组合药物及其应用的制作方法
一种含有抗帕金森病药物的微球组合药物及其应用
技术领域：
本发明涉及一种微球组合物，具体地说，是关于一种含有抗帕金森病药物的微球 组合药物及其应用。
背景技术：
目前对帕金森病，症状性帕金森综合症治疗主要有口服左旋多巴类药物，每日需 要服用三次，但是对于这类病人来说，是十分不便的，因为他们本来行动和记忆有问题，如 果能用一次药可以达到一个星期甚至一个月的效果，这对于他们来说是非常好的一件事 情。中国专利申请号200910201414. X，公开了一种司来吉兰缓释微球及其制备方法。 中国专利申请号200910201416. 9，公开了一种卡巴拉汀缓释微球及其制备方法。中国专利 申请号200410030559. 5，公开了左旋多巴纳米制剂及其制备方法。司来吉兰缓释微球，卡巴 拉汀缓释微球和左旋多巴纳米制剂难于透过血脑屏障和容易被体内的酶降解，体内的血药 浓度比口服还低。左旋多巴纳米制剂不稳定，纳米粒容易集聚，影响其药效，而且左旋多巴 纳米制剂所使用的辅料不是药用辅料，存在毒副作用。

发明内容本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种含有抗帕金森病药物的微球组 合物的用途。本发明的再一的目的是，提供一种含有抗帕金森病药物的微球组合药物。为实现上述第一个目的，本发明采取的技术方案是一种含有抗帕金森病药物的微球组合物在制备预防、治疗帕金森病及帕金森病并 发症疾病药物中的应用，所述的含有抗帕金森病药物的微球组合物选自苄丝胼微球、左旋 多巴甲酯微球、左旋多巴甲酯微球和苄丝胼微球或左旋多巴甲酯和苄丝胼混和药物微球。所述的微球组合物按重量百分比该组合物由以下组分组成可降解的疏水聚合物 50%-99%抗帕金森病药物1%-50%，所述的抗帕金森病药物选自左旋多巴甲酯或苄丝胼一种或两种混合物。所述的可降解的疏水聚合物选自聚乳酸-羟基乙酸、聚乳酸或聚己内酯一种或其 混合物。所述的微球组合物粒径为1-500 μ m。所述的微球组合物粒径为250-500 μ m。所述的微球组合物是通过水包油-油包水法(w/o/w)、油包水(o/V)法、水包 油-油包固法(s/o/w)、油包油-油包固法(s/o/o)或喷雾干燥法制备得到。所述的微球组合物是通过水包油_油包水法(w/o/w)或水包油_油包固法(s/o/ w)制备得到。
为实现上述第二个目的，本发明采取的技术方案是一种含有抗帕金森病药物的微球组合药物，所述的组合药物由左旋多巴甲酯微球 和苄丝胼微球组成。所述的左旋多巴甲酯微球按重量百分比该微球由以下组分组成可降解的疏水聚合物 50%-99%左旋多巴甲酯1%-50%，所述的苄丝胼微球按重量百分比该微球由以下组分组成可降解的疏水聚合物 50%-99%苄丝胼1%_50%。本发明优点在于1、本发明利用水包油法(W/0)、水包油_油包水法(W/0/W)、水包油_油包固法(S/ ο/ff)或油包油-油包固法(S/0/0)成功开发了一种含有抗帕金森病药物的微球组合药物；2、含有抗帕金森病药物的微球组合药物可以皮下注射、肌肉注射、腹腔注射或颅 内注射具有长期疗效；3、含有抗帕金森病药物的微球组合药物有明显协同作用，较单用可显著降低AIM 评分，两药组合在提高疗效的同时可大幅降低治疗费用。4、本发明对含有抗帕金森病药物的微球组合药物发掘了新的医疗用途，开拓了一 个新的应用领域。5、本发明的含有抗帕金森病药物的微球组合药物安全无毒，药理作用强，预示着 很好的药用前景。

图1左旋多巴甲酯和苄丝胼混和药物缓释PLGA微球组合物扫描电镜图。图2左旋多巴甲酯和苄丝胼混和药物缓释PLGA微球组合物体外释放曲线图。图3左旋多巴甲酯缓释PLA微球组合物扫描电镜图。图4左旋多巴甲酯缓释PLA微球组合物体外释放曲线图。图5用水包油_油包水方法制备的苄丝胼缓释PLA微球组合物扫描电镜图。图6用水包油_油包水方法制备的苄丝胼缓释PLA微球组合物体外释放曲线图。图7用水包油_油包固体方法制备的苄丝胼缓释PLA微球组合物扫描电镜图。图8用水包油_油包固体方法制备的苄丝胼缓释PLA微球组合物体外释放曲线 图。
具体实施方式下面结合附图对本发明提供的具体实施方式
作详细说明。实施例1 ①左旋多巴甲酯和苄丝胼混和药物溶液制备a)将市场购买的IOOmg左旋多巴甲酯和苄丝胼混和药物(按照重量比为1 1)， 配制成重量百分比浓度为2. 5% ；②左旋多巴甲酯和苄丝胼混和药物缓释微球组合物制备
a)将①得的左旋多巴甲酯和苄丝胼混和药物溶液分别量取0. 2mL、0. 5mL或ImL和 分别称取595mg的聚羟基乙酸-聚乳酸(PLGA分子量为6000) ,37. 5mg的聚羟基乙酸-聚 乳酸(PLGA分子量为250，000)或25mg的聚羟基乙酸-聚乳酸(PLGA分子量为500，000) 并分别配制成重量百分比浓度为30%、15%或5%的二氯甲烷的有机溶液；将用30%浓度 的和0. 2mL、15%的和0. 5mL或5%的和ImL的上述溶液的顺序一一对应混和并搅拌、漩涡 或超声1-5分钟形成均勻得混悬液，即油包水(W/0)乳液；将制备成左旋多巴甲酯和苄丝胼 混和药物的百分含量为1%、25%或50%缓释微球。b)把步骤(a)得乳液按照上述的顺序一一分别加到重量百分比浓度为氯化钠 和的聚乙二醇(PVA的分子量为1，000, 000)水溶液10mL、5%氯化钠和2. 5%的聚乙二 醇(PVA的分子量为500，000)水溶液10mL、或10%氯化钠和2. 5%的聚乙二醇(PVA的分子 量为1，000, 000)水溶液IOmL并搅拌、漩涡或超声0. 1-5分钟形成复乳；(c)把步骤(b)的复乳加到浓度为1%、5%或10%的IOOOmL氯化钠溶液固化1_4 小时；(d)把步骤(C)得到的微球进行离心收集，并用水洗涤3-5次，冻干后得到微球组 合物(上述制备的微球的扫描电镜图如图1所示，微球的表面光滑、粒径分布均勻，粒径为 约40-100 μ m ；其它的粒径分别约为60-150 μ m、和200-500 μ m,图上均未显示)。制备成左旋多巴甲酯和苄丝胼混和药物的含量为1 %的微球在体外释放曲线如图 2所示，结果显示没有突释和不完全释放，其它也有类似的结果但图上未显示。稳定性试验考察把左旋多巴甲酯与苄丝胼和本发明制备的左旋多巴甲酯和苄丝 胼混和药物缓释微球同时放在可见光照射，然后回收分别检测左旋多巴甲酯和苄丝胼的含 量，发现左旋多巴甲酯在一年后活性下降6-10%，而微球几乎不变约0-1. 0% ；苄丝胼在一 年后活性下降5-10%，而微球几乎不变约0-0. 8%。体内血药浓度考察用于同剂量的左旋多巴甲酯与苄丝胼口服制剂和左旋多巴甲 酯和苄丝胼混和药物缓释微球比较，发现微球剂型明显好于口服制剂，左旋多巴甲酯和苄 丝胼混和药物缓释微球剂型的苄丝胼体内血药浓度的总面积高于口服的约30% ；左旋多巴 甲酯和苄丝胼混和药物缓释微球发现微球剂型的左旋多巴甲酯也明显好于口服制剂，其体 内血药浓度的总面积高于口服的约40%。实施例2①左旋多巴甲酯和苄丝胼混和药物溶液制备a)将市场购买的IOOmg左旋多巴甲酯和苄丝胼混和药物(按照重量比为2 1)， 配制成重量百分比浓度为2. 5% ；②左旋多巴甲酯和苄丝胼混和药物缓释微球组合物制备a)将①得的左旋多巴甲酯和苄丝胼混和药物溶液分别量取0. 2mL、0. 5mL或ImL和 分别称取595mg的聚乳酸(PLA分子量为6000) ,37. 5mg的聚乳酸(PLA分子量为250，000) 或25mg的聚乳酸(PLA分子量为500，000)并分别配制成重量百分比浓度为30%、15%或 5%的二氯甲烷的有机溶液；将用30%浓度的和0. 2mL、15%的和0. 5mL或5%的和ImL的上 述溶液的顺序一一对应混和并搅拌、漩涡或超声1-5分钟形成均勻得混悬液，即油包水(W/ 0)乳液；将制备成左旋多巴甲酯和苄丝胼混和药物的百分含量为1%、25%或50%缓释微 球。
b)把步骤(a)得乳液分别加到重量百分比浓度为氯化钠和的聚乙二醇 (PVA的分子量为1，000, 000)水溶液10mL、5%氯化钠和2. 5%的聚乙二醇(PVA的分子量为 500，000)水溶液10mL、或10%氯化钠和2. 5%的聚乙二醇(PVA的分子量为1，000，000)水 溶液IOmL并搅拌、漩涡或超声0. 1-5分钟形成复乳；(c)把步骤(b)的复乳加到浓度为1%、5%或10%的IOOOmL氯化钠溶液固化1_4 小时；(d)把步骤(C)得到的微球进行离心收集，并用水洗涤3-5次，冻干后得到微球组 合物(上述制备的微球的扫描电镜图类似如图1所示，微球的表面光滑、粒径分布均勻，粒 径为约45-100 μ m ；其它的粒径分别约为60-170 μ m、和250-500 μ m,图上均未显示)。制备成左旋多巴甲酯和苄丝胼混和药物的含量为1 %的微球在体外释放结果显示 没有突释和不完全释放，其它也有类似的结果但图上未显示。稳定性试验考察把左旋多巴甲酯与苄丝胼和本发明制备的左旋多巴甲酯和苄丝 胼混和药物缓释微球同时放在可见光照射，然后回收分别检测左旋多巴甲酯和苄丝胼的含 量，发现左旋多巴甲酯在一年后活性下降6-8%，而微球几乎不变约0-1. 0% ；苄丝胼在一年 后活性下降5-9. 1 %，而微球几乎不变约0-0. 78%。体内血药浓度考察用于同剂量的左旋多巴甲酯与苄丝胼口服制剂和左旋多巴甲 酯和苄丝胼混和药物缓释微球比较，发现微球剂型明显好于口服制剂，左旋多巴甲酯和苄 丝胼混和药物缓释微球剂型的苄丝胼体内血药浓度的总面积高于口服的约31% ；左旋多巴 甲酯和苄丝胼混和药物缓释微球发现微球剂型的左旋多巴甲酯也明显好于口服制剂，其体 内血药浓度的总面积高于口服的约42%。实施例3①左旋多巴甲酯和苄丝胼混和药物溶液制备a)将市场购买的IOOmg左旋多巴甲酯和苄丝胼混和药物(按照重量比为3 1)， 配制成重量百分比浓度为2. 5% ；②左旋多巴甲酯和苄丝胼混和药物缓释微球组合物制备a)将①得的左旋多巴甲酯和苄丝胼混和药物溶液分别量取0. 2mL、0. 5mL或ImL 和分别称取595mg的聚己内酯(PCL分子量为10，000) ,37. 5mg的聚己内酯(PCL分子量为 2，500, 000)或25mg的聚己内酯(PCL分子量为5，000, 000)并分别配制成重量百分比浓度 为30%、15%或5%的二氯甲烷的有机溶液；将用30%浓度的和0. 2mL、15%的和0. 5mL或 5%的和ImL的上述溶液的顺序一一对应混和并搅拌、漩涡或超声1-5分钟形成均勻得混 悬液，即油包水(W/0)乳液；将制备成左旋多巴甲酯和苄丝胼混和药物的百分含量为1%、 25%或50%缓释微球。b)把步骤(a)得乳液分别加到重量百分比浓度为氯化钠和的聚乙二醇 (PVA的分子量为1，000, 000)水溶液10mL、5%氯化钠和2. 5%的聚乙二醇(PVA的分子量为 500，000)水溶液10mL、或10%氯化钠和2. 5%的聚乙二醇(PVA的分子量为1，000，000)水 溶液IOmL并搅拌、漩涡或超声0. 1-5分钟形成复乳；(c)把步骤(b)的复乳加到浓度为1%、5%或10%的IOOOmL氯化钠溶液固化1_4 小时；(d)把步骤(C)得到的微球进行离心收集，并用水洗涤3-5次，冻干后得到微球组
6合物(上述制备的微球的扫描电镜图类似如图1所示，微球的表面光滑、粒径分布均勻，粒 径为约50-100 μ m ；其它的粒径分别约为65-150 μ m、和250-500 μ m,图上均未显示)。制备成左旋多巴甲酯和苄丝胼混和药物的含量为1 %的微球在体外释放结果显示 没有突释和不完全释放，其它也有类似的结果但图上未显示。稳定性试验考察把左旋多巴甲酯与苄丝胼和本发明制备的左旋多巴甲酯和苄丝 胼混和药物缓释微球同时放在可见光照射，然后回收分别检测左旋多巴甲酯和苄丝胼的含 量，发现左旋多巴甲酯在一年后活性下降6-7%，而微球几乎不变约0-1. 0% ；苄丝胼在一年 后活性下降5-9. 5%，而微球几乎不变约0-0. 72%。体内血药浓度考察用于同剂量的左旋多巴甲酯与苄丝胼口服制剂和左旋多巴甲 酯和苄丝胼混和药物缓释微球比较，发现微球剂型明显好于口服制剂，左旋多巴甲酯和苄 丝胼混和药物缓释微球剂型的苄丝胼体内血药浓度的总面积高于口服的约31. 5% ；左旋多 巴甲酯和苄丝胼混和药物缓释微球发现微球剂型的左旋多巴甲酯也明显好于口服制剂，其 体内血药浓度的总面积高于口服的约42. 5%。实施例4①左旋多巴甲酯和苄丝胼混和药物溶液制备a)将市场购买的IOOmg左旋多巴甲酯和苄丝胼混和药物(按照重量比为4 1)， 配制成重量百分比浓度为2. 5% ；②左旋多巴甲酯和苄丝胼混和药物缓释微球组合物制备a)将①得的左旋多巴甲酯和苄丝胼混和药物溶液分别量取0. 2mL、0. 5mL或ImL和 分别称取IOOmg聚羟基乙酸-聚乳酸(PLGA分子量为6000)、200mg聚乳酸(PLA分子量为 6000)和295mg聚己内酯(PCL分子量为10，000)共595mg的聚合物混合物；12. 5mg聚羟基 乙酸-聚乳酸(PLGA分子量为20，000)、15mg聚乳酸(PLA分子量为50，000)和IOmg聚己 内酯(PCL分子量为10，000)共37. 5mg的聚合物混合物；或5mg聚羟基乙酸-聚乳酸(PLGA 分子量为50，000)、7mg聚乳酸(PLA分子量为500，000)和13mg聚己内酯(PCL分子量为 1，000, 000)共25mg的聚合物混合物；并分别配制成重量百分比浓度为30%、15%或5%的 二氯甲烷的有机溶液；将用30%浓度的和0. 2mL、15%的和0. 5mL或5%的和ImL的上述溶 液的顺序一一对应混和并搅拌、漩涡或超声1-5分钟形成均勻得混悬液，即油包水(W/0)乳 液；将制备成左旋多巴甲酯和苄丝胼混和药物的百分含量为1%、25%或50%的缓释微球。b)把步骤(a)得乳液分别加到重量百分比浓度为氯化钠和的聚乙二醇 (PVA的分子量为1，000, 000)水溶液10mL、5%氯化钠和2. 5%的聚乙二醇(PVA的分子量为 500，000)水溶液10mL、或10%氯化钠和2. 5%的聚乙二醇(PVA的分子量为1，000，000)水 溶液IOmL并搅拌、漩涡或超声0. 1-5分钟形成复乳；(c)把步骤(b)的复乳加到浓度为1%、5%或10%的IOOOmL氯化钠溶液固化1_4 小时；(d)把步骤(C)得到的微球进行离心收集，并用水洗涤3-5次，冻干后得到微球组 合物(上述制备的微球的扫描电镜图类似如图1所示，微球的表面光滑、粒径分布均勻，粒 径为约55-100 μ m ；其它的粒径分别约为65-150 μ m、和250-500 μ m,图上均未显示)。
制备成左旋多巴甲酯和苄丝胼混和药物的含量为1 %的微球在体外释放结果显示 没有突释和不完全释放，其它也有类似的结果但图上未显示。
稳定性试验考察把左旋多巴甲酯与苄丝胼和本发明制备的左旋多巴甲酯和苄丝 胼混和药物缓释微球同时放在可见光照射，然后回收分别检测左旋多巴甲酯和苄丝胼的含 量，发现左旋多巴甲酯在一年后活性下降6-7%，而微球几乎不变约0-1. 0% ；苄丝胼在一年 后活性下降5-8. 5%，而微球几乎不变约0-0. 72%。体内血药浓度考察用于同剂量的左旋多巴甲酯与苄丝胼口服制剂和左旋多巴甲 酯和苄丝胼混和药物缓释微球比较，发现微球剂型明显好于口服制剂，左旋多巴甲酯和苄 丝胼混和药物缓释微球剂型的苄丝胼体内血药浓度的总面积高于口服的约31. 7% ；左旋多 巴甲酯和苄丝胼混和药物缓释微球发现微球剂型的左旋多巴甲酯也明显好于口服制剂，其 体内血药浓度的总面积高于口服的约43. 5%。需要说明的是实施例1，2，3，4是左旋多巴甲酯和苄丝胼混和药物微球组合物制备。实施例5①左旋多巴甲酯溶液制备a)将IOOmg左旋多巴甲酯，配制成重量百分比浓度为2. 5%的水溶液；②左旋多巴甲酯缓释微球组合物制备(a)将称取37. 5mg的聚乳酸(PLA，分子量为90，000-140，000)配制成重量百分比 浓度为15%的二氯甲烷的有机溶液和量取0. 5mL上述的①左旋多巴甲酯溶液混和并搅拌、 漩涡或超声1-5分钟形成均勻得混悬液，即油包水(W/0)乳液；将制备成左旋多巴甲酯的理 论百分含量为25%缓释微球。(b)把步骤(a)得乳液分别加到重量百分比浓度为5%氯化钠和的聚乙二 醇(PVA的分子量为146，000-186, 000，醇解度98-99% )水溶液IOmL并搅拌、漩涡或超声 0. 1-5分钟形成复乳；(c)把步骤(b)的复乳加到浓度为5%的IOOOmL氯化钠溶液固化1_4小时；(d)把步骤(c)得到的微球进行离心收集，并用水洗涤3-5次，冻干后得到微球组 合物(上述制备的微球的表面光滑、粒径分布均勻，粒径为约66-110 μ m如图3所述)。制备的微球组合物其实际PLA的重量百分比为75%和左旋多巴甲酯为25%、 在37°C和pH2的磷酸缓冲溶液中摇体外第1天的释放量占总的左旋多巴甲酯的百分比为 20. 63%、14天后的累积释放99. 04%，释放曲线如图4所述。本发明的方法制备的微球组合物的包封率比用W/0法制备微球高5-22% ；第一天 的突释比ff/Ο和S/0/0法少4% -11%ο稳定性试验考察把左旋多巴甲酯和本发明制备的左旋多巴甲酯微球同时放在可 见光照射，然后回收检测其含量，发现左旋多巴甲酯在一年后活性下降6-10%，而微球几乎 不变约0-1. 0%。治疗效果考察用于同剂量的左旋多巴甲酯口服制剂和左旋多巴甲酯微球比较， 发现微球剂型明显好于口服制剂，其体内血药浓度的总面积高于口服的约35%。实施例6①左旋多巴甲酯溶液制备a)将IOOmg左旋多巴甲酯，配制成重量百分比浓度为2. 5%的水溶液；②左旋多巴甲酯缓释微球组合物制备
(a)将称取295mg的聚乳酸(PLA，分子量为90，000-140，000)配制成重量百分比 浓度为15%的二氯甲烷的有机溶液和量取0. 2mL上述的①左旋多巴甲酯溶液混和并搅拌、 漩涡或超声1-5分钟形成均勻得混悬液，即油包水(W/0)乳液；将制备成左旋多巴甲酯的理 论百分含量为缓释微球。(b)把步骤(a)得乳液分别加到重量百分比浓度为5%氯化钠和的聚乙二 醇(PVA的分子量为146，000-186, 000，醇解度98-99% )水溶液IOmL并搅拌、漩涡或超声 0. 1-5分钟形成复乳；(c)把步骤(b)的复乳加到浓度为10%的IOOOmL氯化钠溶液固化1_4小时；(d)把步骤(c)得到的微球进行离心收集，并用水洗涤3-5次，冻干后得到微球组 合物(上述制备的微球的表面光滑、粒径分布均勻，粒径为约60-140 μ m)。制备的微球组合物其实际PLA的重量百分比为99%和左旋多巴甲酯为1%、 在37°C和pH3的磷酸缓冲溶液中摇体外第1天的释放量占总的左旋多巴甲酯的百分比为 19. 98 %、14天后的累积释放92. 23 %。本发明的方法制备的微球组合物的包封率比用W/0法制备微球高5-19% ；第一天 的突释比ff/Ο和S/0/0法少4% -20%o稳定性试验考察把左旋多巴甲酯和本发明制备的左旋多巴甲酯微球同时放在可 见光照射，然后回收检测其含量，发现左旋多巴甲酯在一年后活性下降5-8%，而微球几乎 不变约0-0. 8%。治疗效果考察用于同剂量的左旋多巴甲酯口服制剂和左旋多巴甲酯微球比较， 发现微球剂型明显好于口服制剂，其体内血药浓度的总面积高于口服的约36%。实施例7①左旋多巴甲酯溶液制备a)将IOOmg左旋多巴甲酯，配制成重量百分比浓度为2. 5% ；②左旋多巴甲酯缓释微球组合物制备a)将①得的左旋多巴甲酯溶液分别量取0. 2mL、0. 5mL或ImL和分别称取595mg的 聚乳酸(PLA分子量为6000) ,37. 5mg的聚乳酸(PLGA分子量为250，000)或25mg的聚乳酸 (PLGA分子量为500，000)并分别配制成重量百分比浓度为30%、15%或5%的二氯甲烷的 有机溶液；将用30%浓度的和0. 2mL、15%的和0. 5mL或5%的和ImL的上述左旋多巴甲酯 溶液的顺序一一对应混和并搅拌、漩涡或超声1-5分钟形成均勻得混悬液，即油包水(W/0) 乳液；将制备成左旋多巴甲酯的百分含量为或50%缓释微球。b)把步骤(a)得乳液按照上述的顺序一一对应分别加到重量百分比浓度为氯 化钠和的聚乙二醇(PVA的分子量为1，000, 000)水溶液10mL、5%氯化钠和2. 5%的聚 乙二醇(PVA的分子量为500，000)水溶液10mL、或10%氯化钠和2. 5%的聚乙二醇(PVA的 分子量为1，000, 000)水溶液IOmL并搅拌、漩涡或超声0. 1-5分钟形成复乳；(c)把步骤(b)的复乳加到浓度为5%的IOOOmL氯化钠溶液固化1_4小时；(d)把步骤(c)得到的微球进行离心收集，并用水洗涤3-5次，冻干后得到微球组 合物(上述制备的微球的扫描电镜图类似如图3所示，微球的表面光滑、粒径分布均勻，粒 径为约45-100 μ m ；其它的粒径分别约为60-170 μ m、和250-500 μ m,图上均未显示)。本发明的方法制备的微球组合物的包封率比用W/0法制备微球高4-12%;第一天的突释比ff/Ο和S/0/0法少2% -12%0稳定性试验考察把左旋多巴甲酯和本发明制备的左旋多巴甲酯微球同时放在可 见光照射，然后回收检测其含量，发现左旋多巴甲酯在一年后活性下降5-10%，而微球几乎 不变约0-0. 8%。治疗效果考察用于同剂量的左旋多巴甲酯口服制剂和左旋多巴甲酯微球比较， 发现微球剂型明显好于口服制剂，其体内血药浓度的总面积高于口服的约20-36%。实施例8 ①左旋多巴甲酯溶液制备a)将市场购买的IOOmg左旋多巴甲酯，配制成重量百分比浓度为2. 5% ；②左旋多巴甲酯缓释微球组合物制备a)将①得的左旋多巴甲酯溶液分别量取0. 2mL、0. 5mL或ImL和分别称取595mg的 聚己内酯(PCL分子量为10，000)、37. 5mg的聚己内酯(PCL分子量为2，500，000)或25mg 的聚己内酯(PCL分子量为5，000，000)并分别配制成重量百分比浓度为30%、15%或5% 的二氯甲烷的有机溶液；将用30%浓度的和0. 2mL、15%的和0. 5mL或5%的和ImL的上述 左旋多巴甲酯溶液的顺序一一对应混和并搅拌、漩涡或超声1-5分钟形成均勻得混悬液， 即油包水(W/0)乳液；将制备成左旋多巴甲酯的百分含量为1%、25%或50%缓释微球。b)把步骤(a)得乳液按照上述的顺序一一分别加到重量百分比浓度为氯化钠 和的聚乙二醇(PVA的分子量为1，000, 000)水溶液10mL、5%氯化钠和2. 5%的聚乙二 醇(PVA的分子量为500，000)水溶液10mL、或10%氯化钠和2. 5%的聚乙二醇(PVA的分子 量为1，000, 000)水溶液IOmL并搅拌、漩涡或超声0. 1-5分钟形成复乳；(c)把步骤(b)的复乳加到浓度为1%、5%或10%的IOOOmL氯化钠溶液固化1_4 小时；(d)把步骤(C)得到的微球进行离心收集，并用水洗涤3-5次，冻干后得到微球组 合物(上述制备的微球的扫描电镜图类似如图3所示，微球的表面光滑、粒径分布均勻，粒 径为约50-100 μ m ；其它的粒径分别约为65-150 μ m、和250-500 μ m,图上均未显示)。本发明的方法制备的微球组合物的包封率比用W/0法制备微球高4-13% ；第一天 的突释比ff/Ο和S/0/0法少2% -12%。稳定性试验考察把左旋多巴甲酯和本发明制备的左旋多巴甲酯微球同时放在可 见光照射，然后回收检测其含量，发现左旋多巴甲酯在一年后活性下降5-10%，而微球几乎 不变约0. 1-1. 0%。治疗效果考察用于同剂量的左旋多巴甲酯口服制剂和左旋多巴甲酯微球比较， 发现微球剂型明显好于口服制剂，其体内血药浓度的总面积高于口服的约20-36%。实施例9①左旋多巴甲酯溶液制备a)将市场购买的IOOmg左旋多巴甲酯，配制成重量百分比浓度为2. 5% ；②左旋多巴甲酯缓释微球组合物制备a)将①得的左旋多巴甲酯溶液分别量取0. 2mL、0. 5mL或ImL和分别称取IOOmg聚 羟基乙酸-聚乳酸(PLGA分子量为6000)、200mg聚乳酸(PLA分子量为6000)和295mg聚己 内酯(PCL分子量为10，000)共595mg的聚合物混合物；12. 5mg聚羟基乙酸-聚乳酸(PLGA
10分子量为20，000)、15mg聚乳酸(PLA分子量为50，000)和IOmg聚己内酯(PCL分子量为 10，000)共37. 5mg的聚合物混合物；或5mg聚羟基乙酸-聚乳酸(PLGA分子量为50，000)、 7mg聚乳酸(PLA分子量为500，000)和13mg聚己内酯(PCL分子量为1, 000, 000)共25mg 的聚合物混合物；并分别配制成重量百分比浓度为30%、15%或5%的二氯甲烷的有机溶 液；将用30%浓度的和0. 2mL、15%的和0. 5mL或5%的和ImL的上述左旋多巴甲酯溶液的 顺序一一对应混和并搅拌、漩涡或超声1-5分钟形成均勻得混悬液，即油包水(W/0)乳液； 将制备成左旋多巴甲酯的百分含量为1%、25%或50%的缓释微球。b)把步骤(a)得乳液按照上述的顺序一一分别加到重量百分比浓度为氯化钠 和的聚乙二醇(PVA的分子量为1，000, 000)水溶液10mL、5%氯化钠和2. 5%的聚乙二 醇(PVA的分子量为500，000)水溶液10mL、或10%氯化钠和2. 5%的聚乙二醇(PVA的分子 量为1，000, 000)水溶液IOmL并搅拌、漩涡或超声0. 1-5分钟形成复乳；(c)把步骤(b)的复乳加到浓度为1%、5%或10%的IOOOmL氯化钠溶液固化1_4 小时；(d)把步骤(C)得到的微球进行离心收集，并用水洗涤3-5次，冻干后得到微球组 合物(上述制备的微球的扫描电镜图类似如图3所示，微球的表面光滑、粒径分布均勻，粒 径为约55-100 μ m ；其它的粒径分别约为65-150 μ m、和250-500 μ m,图上均未显示)。本发明的方法制备的微球组合物的包封率比用W/0法制备微球高4-15% ；第一天 的突释比ff/Ο和S/0/0法少2% -12%。稳定性试验考察把左旋多巴甲酯和本发明制备的左旋多巴甲酯微球同时放在可 见光照射，然后回收检测其含量，发现左旋多巴甲酯在一年后活性下降5-10%，而微球几乎 不变约0. 1-1. 0%。治疗效果考察用于同剂量的左旋多巴甲酯口服制剂和左旋多巴甲酯微球比较， 发现微球剂型明显好于口服制剂，其体内血药浓度的总面积高于口服的约26-37%。本发明利用水包油_油包水(W/0/W)制备微球方法进一步微囊包在具有缓释的高 分子材料中。使其制备的微球表面光滑圆整，均勻度好，溶液规整无粘连；包封率高，突释
小，载药量高。需要说明的是实施例5，6，7，8，9是左旋多巴甲酯微球组合物制备。实施例10①苄丝胼溶液制备a)将IOOmg苄丝胼，配制成重量百分比浓度为2. 5%的水溶液；②苄丝胼缓释微球组合物制备(a)将称取37. 5mg的聚乳酸(PLA，分子量为90，000-140, 000)配制成重量百分比 浓度为15%的二氯甲烷的有机溶液和量取0. 5mL上述的①苄丝胼溶液混和并搅拌、漩涡或 超声1-5分钟形成均勻得混悬液，即油包水(W/0)乳液；将制备成苄丝胼的理论百分含量为 15%缓释微球。(b)把步骤(a)得乳液分别加到重量百分比浓度为5%氯化钠和的聚乙二 醇(PVA的分子量为146，000-186, 000，醇解度98-99% )水溶液IOmL并搅拌、漩涡或超声 0. 1-5分钟形成复乳；(c)把步骤(b)的复乳加到浓度为5%的IOOOmL氯化钠溶液固化1_4小时；
(d)把步骤(c)得到的微球进行离心收集，并用水洗涤3-5次，冻干后得到微球组 合物(上述制备的微球的表面光滑、粒径分布均勻，粒径为约66-110 μ m如图5所述)。制备的微球组合物其实际PLA的重量百分比为85%和苄丝胼为15%、在37°C和 PH2的磷酸缓冲溶液中摇体外第1小时的释放量占总的苄丝胼的百分比为20. 63%、4天后 的累积释放99. 04%，释放曲线如图6所述。本发明的方法制备的微球组合物的包封率比用W/0法制备微球高5-30% ；第一天 的突释比ff/Ο和S/0/0法少3% -12%o稳定性试验考察把苄丝胼和本发明制备的苄丝胼微球同时放在可见光照射，然 后回收检测其含量，发现苄丝胼在一年后活性下降5-10%，而微球几乎不变约0-0. 8%。体内血药浓度效果考察用于同剂量的苄丝胼口服制剂和苄丝胼微球比较，发现 微球剂型明显好于口服制剂，其体内血药浓度的总面积高于口服的约30%。实施例11①苄丝胼溶液制备a)将IOOmg苄丝胼，配制成重量百分比浓度为2. 5%的水溶液；②苄丝胼缓释微球组合物制备(a)将称取295mg的聚乳酸(PLA，分子量为90，000-140，000)配制成重量百分比 浓度为15%的二氯甲烷的有机溶液和量取0. 2mL上述的①苄丝胼溶液混和并搅拌、漩涡或 超声1-5分钟形成均勻得混悬液，即油包水(W/0)乳液；将制备成苄丝胼的理论百分含量为
缓释微球。(b)把步骤(a)得乳液分别加到重量百分比浓度为5%氯化钠和的聚乙二 醇(PVA的分子量为146，000-186, 000，醇解度98-99% )水溶液IOmL并搅拌、漩涡或超声 0. 1-5分钟形成复乳；(c)把步骤(b)的复乳加到浓度为10%的IOOOmL氯化钠溶液固化1_4小时；(d)把步骤(c)得到的微球进行离心收集，并用水洗涤3-5次，冻干后得到微球组 合物(上述制备的微球的表面光滑、粒径分布均勻，粒径为约60-140 μ m)。制备的微球组合物其实际PLA的重量百分比为99%和苄丝胼为1%、在37°C和 PH2的磷酸缓冲溶液中摇体外第1小时的释放量占总的苄丝胼的百分比为18. 88%,7天后 的累积释放91. 23%。本发明的方法制备的微球组合物的包封率比用W/0法制备微球高5-18% ；第一天 的突释比ff/Ο和S/0/0法少4% -18%o稳定性试验考察把苄丝胼和本发明制备的苄丝胼微球同时放在可见光照射，然 后回收检测其含量，发现苄丝胼在一年后活性下降5-8%，而微球几乎不变约0-0. 8%。体内血药浓度考察用于同剂量的苄丝胼口服制剂和苄丝胼微球比较，发现微球 剂型明显好于口服制剂，其体内血药浓度的总面积高于口服的约30%。实施例12①苄丝胼溶液制备a)将IOOmg苄丝胼，配制成重量百分比浓度为2. 5%的水溶液；②苄丝胼缓释微球组合物制备(a)将称取37. 5mg的聚乳酸-羟基乙酸(PLGA，分子量为6000-500，000)配制成重量百分比浓度为15%的二氯甲烷的有机溶液和量取0. 5mL上述的①苄丝胼溶液混和并 搅拌、漩涡或超声1-5分钟形成均勻得混悬液，即油包水(W/0)乳液；将制备成苄丝胼的理 论百分含量为35%缓释微球。(b)把步骤(a)得乳液分别加到重量百分比浓度为5%氯化钠和的聚乙二 醇(PVA的分子量为146，000-186, 000，醇解度98-99% )水溶液IOmL并搅拌、漩涡或超声 0. 1-5分钟形成复乳；(c)把步骤(b)的复乳加到浓度为5%的IOOOmL氯化钠溶液固化1_4小时；(d)把步骤(c)得到的微球进行离心收集，并用水洗涤3-5次，冻干后得到微球组 合物(上述制备的微球的表面光滑、粒径分布均勻，粒径为约66-110 μ m)。制备的微球组合物其实际PLGA的重量百分比为65%和苄丝胼为35%、在37°C 和PH2的磷酸缓冲溶液中摇体外第1小时的释放量占总的苄丝胼的百分比为20. 63%、4天 后的累积释放99. 04%。本发明的方法制备的微球组合物的包封率比用W/0法制备微球高5-30% ；第一天 的突释比ff/Ο和S/0/0法少3% -12%o稳定性试验考察把苄丝胼和本发明制备的苄丝胼微球同时放在可见光照射，然 后回收检测其含量，发现苄丝胼在一年后活性下降5-10%，而微球几乎不变约0-0. 8%。体内血药浓度考察用于同剂量的苄丝胼口服制剂和苄丝胼微球比较，发现微球 剂型明显好于口服制剂，其体内血药浓度的总面积高于口服的约30%。实施例13①苄丝胼溶液制备a)将IOOOmg苄丝胼，配制成重量百分比浓度为2. 5%的水溶液；②苄丝胼缓释微球组合物制备(a)将称取25mg的聚乳酸(PLA，分子量为90，000-140，000)配制成重量百分比浓 度为15%的二氯甲烷的有机溶液和量取0. 2mL上述的①苄丝胼溶液混和并搅拌、漩涡或超 声1-5分钟形成均勻得混悬液，即油包水(W/0)乳液；将制备成苄丝胼的理论百分含量为 45%缓释微球。(b)把步骤(a)得乳液分别加到重量百分比浓度为5%氯化钠和的聚乙二 醇(PVA的分子量为146，000-186, 000，醇解度98-99% )水溶液IOmL并搅拌、漩涡或超声 0. 1-5分钟形成复乳；(c)把步骤(b)的复乳加到浓度为10%的IOOOmL氯化钠溶液固化1_4小时；(d)把步骤(c)得到的微球进行离心收集，并用水洗涤3-5次，冻干后得到微球组 合物(上述制备的微球的表面光滑、粒径分布均勻，粒径为约60-140 μ m)。制备的微球组合物其实际PLA的重量百分比为55%和苄丝胼为45%、在37°C和 PH2的磷酸缓冲溶液中摇体外第1小时的释放量占总的苄丝胼的百分比为18. 88%,7天后 的累积释放91. 23%。本发明的方法制备的微球组合物的包封率比用W/0法制备微球高5-18% ；第一天 的突释比ff/Ο和S/0/0法少4% -18%o稳定性试验考察把苄丝胼和本发明制备的苄丝胼微球同时放在可见光照射，然 后回收检测其含量，发现苄丝胼在一年后活性下降5-8%，而微球几乎不变约0-0. 8%。
体内血药浓度考察用于同剂量的苄丝胼口服制剂和苄丝胼微球比较，发现微球 剂型明显好于口服制剂，其体内血药浓度的总面积高于口服的约30%。需要说明的是实施例10，11，12，13是苄丝胼微球组合物采用水包油-油包水方法 制备。实施例14①将IOOmg苄丝胼，先用显微镜观察是否在0.4-10 μ m，如果不在可以用粉碎机粉 碎成 0. 4-5 μ m ；②苄丝胼缓释微球组合物制备(a)将称取37. 5mg的聚乳酸(PLA，分子量为90，000-140, 000)配制成重量百分比 浓度为15%的二氯甲烷的有机溶液和称取①得的苄丝胼微粒12. 5mg混和并搅拌、漩涡或 超声1-5分钟形成均勻得混悬液，即油包固体(S/0)乳液；将制备成苄丝胼的理论百分含量 为25%缓释微球。(b)把步骤(a)得乳液分别加到重量百分比浓度为5%氯化钠和的聚乙二 醇(PVA的分子量为146，000-186, 000，醇解度98-99% )水溶液IOmL并搅拌、漩涡或超声 0. 1-5分钟形成复乳；(c)把步骤(b)的复乳加到浓度为5%的IOOOmL氯化钠溶液固化1_4小时；(d)把步骤(c)得到的微球进行离心收集，并用水洗涤3-5次，冻干后得到微球组 合物(上述制备的微球的表面光滑、粒径分布均勻，粒径为约66-120 μ m如图7所述)。制备的微球组合物其实际PLA的重量百分比为75%和苄丝胼为25%、在37°C和 PH2的磷酸缓冲溶液中摇体外第1小时的释放量占总的苄丝胼的百分比为10. 63%,7天后 的累积释放98. 34%，释放曲线如图8所述。 本发明的方法制备的微球组合物的包封率比分别比用W/0和W/0/W法制备微球高 5-30% ；第一天的突释比W/0和W/0/W法及S/0/0法少5% -20%。稳定性试验考察把苄丝胼和本发明制备的苄丝胼微球同时放在可见光照射，然 后回收检测其含量，发现苄丝胼在一年后活性下降5-10%，而微球几乎不变约0-0. 8%。体内血药浓度考察用于同剂量的苄丝胼口服制剂和苄丝胼微球比较，发现微球 剂型明显好于口服制剂，其体内血药浓度的总面积高于口服的约28-48%。实施例15①苄丝胼微粒制备将IOOmg苄丝胼，先用显微镜观察是否在0.4-10 μ m，如果不在可以用粉碎机粉碎 成 0. 4-5 μ m ；②苄丝胼缓释微球组合物制备(a)将称取 495mg 的聚羟基乙酸 _ 聚乳酸(PLGA, d, I-Iactide 46-52% Mole 和 glycolide 48-54% Mole ；分子量为5000-6000)配制成重量百分比浓度为30%的二氯甲烷 的有机溶液和称取①得的苄丝胼微粒5mg混和并搅拌、漩涡或超声1-5分钟形成均勻得混 悬液，即油包固体(S/0)乳液；将制备成苄丝胼的理论百分含量为缓释微球。(b)把步骤(a)得乳液分别加到重量百 比浓度为氯化钠和2%的聚乙二 醇(PVA的分子量为146，000-186, 000，醇解度98-99% )水溶液IOmL并搅拌、漩涡或超声 0. 1-5分钟形成复乳；
(c)把步骤(b)的复乳加到浓度为15%的IOOOmL氯化钠溶液固化1_4小时；(d)把步骤(c)得到的微球进行离心收集，并用水洗涤3-5次，冻干后得到微球组 合物(上述制备的微球的表面光滑、粒径分布均勻，粒径为约70-100 μ m)。制备的微球组合物其实际PLGA的重量百分比为99%和苄丝胼为1%、在37°C和 PH2的磷酸缓冲溶液中摇体外第1小时的释放量占总的苄丝胼的百分比为10. 63%、4天后 的累积释放95. 23%。本发明的方法制备的微球组合物的包封率比分别比用W/0和W/0/W法制备微球高 5% -30% ；第一天的突释比W/0和W/0/W法及S/0/0法少5% -20%。稳定性试验考察把苄丝胼和本发明制备的苄丝胼微球同时放在可见光照射，然 后回收检测其含量，发现苄丝胼在一年后活性下降5-10%，而微球几乎不变约0-1%。体内血药浓度考察用于同剂量的苄丝胼口服制剂和苄丝胼微球比较，发现微球 剂型明显好于口服制剂，其体内血药浓度的总面积高于口服的约27-46%。实施例16①苄丝胼微粒制备将IOOmg苄丝胼，先用显微镜观察是否在0.4-10 μ m，如果不在可以用粉碎机粉碎 成 0. 4-5 μ m ；②苄丝胼缓释微球组合物制备(a)将称取 37. 5mg 的聚羟基乙酸 _ 聚乳酸(PLGA，d，I-Iactide 46-52% Mole 和 glycolide 48-54% Mole ；分子量为5000-6000)配制成重量百分比浓度为15%的二氯甲烷 的有机溶液和称取①得的苄丝胼微粒12. 5mg混和并搅拌、漩涡或超声1-5分钟形成均勻得 混悬液，即油包固体(S/0)乳液；将制备成苄丝胼的理论百分含量为25%缓释微球。(b)把步骤(a)得乳液分别加到重量百分比浓度为5%氯化钠和的聚乙二 醇(PVA的分子量为146，000-186, 000，醇解度98-99% )水溶液IOmL并搅拌、漩涡或超声 0. 1-5分钟形成复乳；(c)把步骤(b)的复乳加到浓度为10%的IOOOmL氯化钠溶液固化1_4小时；(d)把步骤(c)得到的微球进行离心收集，并用水洗涤3-5次，冻干后得到微球组 合物(上述制备的微球的表面光滑、粒径分布均勻，粒径为约60-120 μ m)。制备的微球组合物其实际PLGA的重量百分比为75%和苄丝胼为25%、在37°C 和PH为2的磷酸缓冲溶液中摇体外第1小时的释放量占总的苄丝胼的百分比为32. 88%, 4天后的累积释放95. 25%。本发明的方法制备的微球组合物的包封率比分别比用W/0和W/0/W法制备微球高 5-30% ；第一天的突释比W/0和W/0/W法及S/0/0法少5% -20%。稳定性试验考察把苄丝胼和本发明制备的苄丝胼微球同时放在可见光照射，然 后回收检测其含量，发现苄丝胼在一年后活性下降5-10%，而微球几乎不变约0-0. 9%。体内血药浓度考察用于同剂量的苄丝胼口服制剂和苄丝胼微球比较，发现微球 剂型明显好于口服制剂，其体内血药浓度的总面积高于口服的约27-49%。实施例17①将IOOmg苄丝胼，先用显微镜观察是否在0.4-10 μ m，如果不在可以用粉碎机粉 碎成 0. 4-5 μ m ；
②苄丝胼缓释微球组合物制备(a)将称取 25mg 的聚羟基乙酸-聚乳酸(PLGA，d，I-Iactide 46-52% Mole 和 glycolide 48-54% Mole ；分子量为6000)配制成重量百分比浓度为10%的二氯甲烷的有 机溶液和称取①得的苄丝胼微粒25mg混和并搅拌、漩涡或超声1-5分钟形成均勻得混悬 液，即油包固体(S/0)乳液；将制备成苄丝胼的理论百分含量为50%缓释微球。(b)把步骤(a)得乳液分别加到重量百分比浓度为氯化钠和的聚乙二醇 (PVA的分子量为110，000-124，000，醇解度为醇解度98-99% )水溶液IOmL并搅拌、漩涡或 超声0. 1-5分钟形成复乳；(c)把步骤(b)的复乳加到浓度为5%的IOOOmL氯化钠溶液固化1_4小时；(d)把步骤(c)得到的微球进行离心收集，并用水洗涤3-5次，冻干后得到微球组 合物(上述制备的微球的表面光滑、粒径分布均勻，粒径为约50-120 μ m)。制备的微球组合物其实际PLGA的重量百分比为50%和苄丝胼为50%、在37°C 和PH为2的磷酸缓冲溶液中摇体外第1小时的释放量占总的苄丝胼的百分比为45. 78%, 4天后的累积释放95. 83%。本发明的方法制备的微球组合物的包封率比分别比用W/0和W/0/W法制备微球高 5-30% ；第一天的突释比W/0和W/0/W法及S/0/0法少5% -20%。稳定性试验考察把苄丝胼和本发明制备的苄丝胼微球同时放在可见光照射，然 后回收检测其含量，发现苄丝胼在一年后活性下降5-10%，而微球几乎不变约0-0. 8%。体内血药浓度考察用于同剂量的苄丝胼口服制剂和苄丝胼微球比较，发现微球 剂型明显好于口服制剂，其体内血药浓度的总面积高于口服的约28-48%。需要说明的是实施例14，15，16，17是苄丝胼微球组合物采用水包油-油包固体方 法制备。实施例18 平行实验为了科学评价以下各组药物的性能，我们用平行试验的方法，同时检测下列各组 的稳定性、体内血药浓度和包封率。各组药物分组情况如下A组左旋多巴甲酯缓释微球采用本发明W/0/W的方法制备得到，其中左旋多巴甲 酯含量为5 %，高分子辅料含量为95 %。B组苄丝胼缓释微球采用本发明的W/0/W方法制备得到，其中苄丝胼含量为5 %， 高分子辅料含量为95%。C组苄丝胼缓释微球采用本发明的(S/0/W)方法制备得到，其中苄丝胼含量为 5%，高分子辅料含量为95%。D组左旋多巴甲酯和苄丝胼混和药物缓释微球(W/0/W)方法制备得到，其中苄丝 胼含量为2. 5 %，左旋多巴甲酯含量为2.5%，高分子辅料含量为95 %。E组司来吉兰缓释微球采用中国专利申请号200910201414. X专利文献报道的 01/02乳化液中干燥方法制备得到司来吉兰缓释微球，其中司来吉兰缓释微球中的卡巴拉 汀含量为5 %，高分子辅料含量为95 %。F组卡巴拉汀缓释微球采用中国专利申请号200910201416. 9专利文献报道的 01/02乳化液中干燥方法制备得到卡巴拉汀缓释微球，其中卡巴拉汀缓释微球中的卡巴拉
16汀含量为5 %，高分子辅料含量为95 %。H组左旋多巴纳米制剂采用中国专利申请号200410030559. 5专利文献报道的方 法制备得到左旋多巴纳米制剂。各组药物实验结果如下 实施例19用途实验1.偏侧帕金森病大鼠模型的制作SD大鼠(180_220g)3%戊巴比妥醛麻醉后，剃毛刀剪去头部的毛，先后用2%碘 酒与75%酒精棉球消毒头部皮肤。沿矢状缝作6cm长切口，小心剥离筋膜和肌肉，推开骨 膜，暴露骨缝，用3 %的双氧水洗洁，然后插入耳棒，先将一侧的耳棒轻轻插入外耳道，碰到 骨性外耳道底后将耳棒固定，然后把另一侧耳棒同样插入同定，调整上颂固定器的螺丝， 将大鼠的上门齿塞进上齿固定板的槽内，并装好两侧眼眶固定杆，最后旋紧全部螺丝。参 照Paxinos和Watson的大鼠全脑立体定位图谱，坐标为(1)前囟后3. 7mm，矢状缝右侧 1. 7mm,颅骨骨膜下7. 8mm,门齿线-2. 4mm ；⑵前囟后4. 4mm,矢状缝右侧1. 2mm,颅骨骨膜 下7. 8mm,门齿线_2. 4mm。6-0HDA (无菌生理盐水新鲜配制，含0. 2%抗坏血酸，浓度为4mg/ ml) 二靶点毁损一侧纹状体建立PD大鼠偏侧毁损模型。微量进样器每点注射6-0HDA 4ul, 注射速度lul/min，留针3分钟。术后三周大鼠腹腔内注射阿朴吗啡0. 5mg/kg(用含抗 坏血酸的生理盐水新鲜配制)，诱导其向健侧旋转，每周一次，每次30分钟，连续四周，旋转 次数在7次/分以上并保持稳定者视为建模成功大鼠。2.实验分组将48只制模成功帕金森大鼠随机分成八组每组6只。第一组PD组(生理盐水治疗，每天一次，连续两周)第二组苄丝胼组(10mg/kg，s. c.每天一次，连续两周)第三组左旋多巴甲酯组(10mg/kg，s. c.每天一次，连续两周)，第四组左旋多巴甲酯和苄丝胼组(5mg的左旋多巴甲酯/kg，s. c.和5mg的苄丝 胼/kg，s. c.每天一次，连续两周)第五组苄丝胼微球组180mg/kg，皮下注射、肌肉注射、腹腔注射或颅腔注射一 次，其中180mg苄丝胼微球中含有苄丝胼90mg)，第六组左旋多巴甲酯微球组(180mg/kg，皮下注射、肌肉注射、腹腔注射或颅腔 注射一次，其中180mg左旋多巴甲酯微球中含有左旋多巴甲酯90mg)，第七组左旋多巴甲酯微球和苄丝胼微球组(70mg苄丝胼微球/kg，皮下注射、肌 肉注射、腹腔注射或颅腔注射一次，其中70mg苄丝胼微球中含有苄丝胼35mg，70mg左旋多 巴甲酯微球/kg，皮下注射、肌肉注射、腹腔注射或颅腔注射一次，其中70mg左旋多巴甲酯 微球中含有左旋多巴甲酯35mg)，第八组左旋多巴甲酯和苄丝胼混和药物微球组(140mg/kg，皮下注射、肌肉注射、腹腔注射或颅腔注射一次，其中140mg混和药物微球中含有苄丝胼35mg和左旋多巴甲 酯 35mg)。3.异常不自主运动(AIM)评分在治疗的第1，2，4，6，8，10，12，14天进行AIM评分，每组大鼠给予相应治疗后每隔 20分钟进行一次AIM评分，共进行2小时，每次观察1分钟。共分成4部分进行评分(上肢 AIM、口面部AIM、轴性AIM和运动AIM)，每部分又根据其有无和严重程度分5个等级(0_4) 0 无；1 :AIM存在不到观察时间的50% ；2 :AIM存在大于观察时间的50% ；3 持续存在，刺 激使停止；4:持续存在，刺激不能使之停止。各组异常不自主运动(AIM)评分结果见表1表1 各组异常不自主运动(AIM)评分结果 4.前肢功能测定我们进行大鼠前肢功能测定。方法如下实验者一手固定大鼠躯体后半部和后肢， 使其离地，另一手固定一侧前肢使另一前肢着地，以大鼠正手方向斜向一侧移动大鼠(5s 内移动90cm)，记录移动时着地侧前肢步数。交替测量两侧上肢的跨步数。前肢功能测定结 果见表2表2前肢功能测定结果
20 5.结果从表1的结果可知微球皮下注射降低各种类型的AIM评分。从表2的结果可知 6-0HDA损伤后大鼠的前肢协调能力下降，微球皮下注射后其协调能力上升，这表明左旋多 巴引起的异动症阻碍了大鼠的协调功能。但微球皮下注射明显减轻大鼠协调能力的下降。左旋多巴甲酯能通过血脑屏障，但是左旋多巴甲酯，左旋多巴甲酯微纳米，左旋多 巴甲酯缓释微球容易被体内酶降解而失活。苄丝胼虽然不能通过血脑屏障，但是可以防止 左旋多巴甲酯，被体内的酶降解，苄丝胼和左旋多巴甲酯起到协同的作用。从表1的结果可 知两药(第七组左旋多巴甲酯微球和苄丝胼微球组，第八组左旋多巴甲酯和苄丝胼混 和药物微球组)有明显协同作用，较单用(第五组苄丝胼微球组，第六组左旋多巴甲酯 微球组)可显著降低AIM评分，两药组合在提高疗效的同时可大幅降低治疗费用。以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人 员，在不脱离本发明方法的前提下，还可以做出若干改进和补充，这些改进和补充也应视为 本发明的保护范围。
权利要求
一种含有抗帕金森病药物的微球组合物在制备预防、治疗帕金森病及帕金森病并发症疾病药物中的应用，其特征在于，所述的含有抗帕金森病药物的微球组合物选自苄丝肼微球、左旋多巴甲酯微球、左旋多巴甲酯微球和苄丝肼微球或左旋多巴甲酯和苄丝肼混和药物微球。
2.根据权利要求2所述的应用，其特征在于所述的微球组合物按重量百分比该组合 物由以下组分组成可降解的疏水聚合物 50%-99%抗帕金森病药物1%-50%，所述的抗帕金森病药物选自左旋多巴甲酯或苄丝胼一种或两种混合物。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于所述的可降解的疏水聚合物选自聚乳 酸-羟基乙酸、聚乳酸或聚己内酯一种或其混合物。
4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于所述的微球组合物粒径为1-500μπι。
5.根据权利要求2所述的应用，其特征在于所述的微球组合物粒径为250-500μ m。
6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于所述的微球组合物是通过水包油_油包 水法(w/o/w)、油包水(o/w)法、水包油-油包固法(s/o/w)、油包油-油包固法(s/o/o)或 喷雾干燥法制备得到。
7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于所述的微球组合物是通过水包油_油包 水法(w/o/w)或水包油-油包固法(s/o/w)制备得到。
8.一种含有抗帕金森病药物的微球组合药物，其特征在于，所述的组合药物由左旋多 巴甲酯微球和苄丝胼微球组成。
9.根据权利要求8所述的微球组合药物，其特征在于，所述的左旋多巴甲酯微球按重 量百分比该微球由以下组分组成可降解的疏水聚合物 50%-99%左旋多巴甲酯1%-50%，所述的苄丝胼微球按重量百分比该微球由以下组分组成可降解的疏水聚合物 50%-99%苄丝胼1%-50%。
全文摘要
本发明涉及一种含有抗帕金森病药物的微球组合物在制备预防、治疗帕金森病及帕金森病并发症疾病药物中的应用，所述的含有抗帕金森病药物的微球组合物选自苄丝肼微球、左旋多巴甲酯微球、左旋多巴甲酯微球和苄丝肼微球或左旋多巴甲酯和苄丝肼混和药物微球。本发明还提供了一种含有抗帕金森病药物的微球组合药物。本发明对含有抗帕金森病药物的微球组合药物发掘了新的医疗用途，开拓了一个新的应用领域。本发明的含有抗帕金森病药物的微球组合药物安全无毒，药理作用强，预示着很好的药用前景。
文档编号A61K31/165GK101879143SQ20101023067
公开日2010年11月10日 申请日期2010年7月20日 优先权日2010年7月20日
发明者任甜甜, 刘振国, 杨新新, 袁伟恩, 陈伟 申请人:上海交通大学医学院附属新华医院