专利名称：一种盐酸千金藤素注射剂及其制法和检测方法
技术领域：
本发明涉及一种盐酸千金藤素注射剂及其制法和检测方法，属于医药制剂技术领域。
背景技术：
恶性肿瘤是人类三大主要死亡原因之一，是世界上所有国家面临的一个重大的健康问题。据统计，当今世界每年癌症的新发病人数已经超过1000万，死亡人数超过700 万，中国每年患病人数260万，死亡超过170万，且这个数字还在不断增加。多少年来，医学界、生物学界一直在寻找疗效确切的癌症治疗方法，虽然取得一定进展，但始终没有得到彻底解决。目前治疗肿瘤一般采用手术、放疗、化疗等方法，放疗、化疗治疗取得了良好的治疗效果，但在治疗过程中往往在杀伤肿瘤细胞的同时，又对人体正常组织细胞，尤其是对造血器官产生严重影响，使许多肿瘤治疗病人伴随有白细胞减少，从而影响治疗的进程，甚至不得不中止治疗，影响肿瘤疾病的根除。因此，在肿瘤疾病治疗过程中，应用促进白细胞增生的药物，是提高放疗和化疗疗效，延长癌症患者生命的关键所在。千金藤素是一种双苄基异喹啉类生物碱，是日本近藤平三郎博士 1934年由防己科植物头花千金藤素中提取分离出来的。千金藤素具有消炎、抑菌、调节免疫功能等作用。 近年来不少学者研究发现它还具有刺激网状内皮系统、活化造血组织、促进骨髓组织增生等功能，在临床上用于预防和治疗肿瘤病人因放疗或化疗的白细胞减少症，目前，已卓有成效。目前，国内临床应用的千金藤素制剂，大多是口服药物制剂，稳定性差，服用后存在着溶出度低、吸收较差、肝肠首过效应和生物利用度低等问题，从而影响药效的发挥，最终影响治疗的效果。盐酸千金藤素注射剂可以克服上述千金藤素口服给药的诸多不利因素，成为近年来千金藤素制剂应用的新领域。
发明内容
本发明的目的，在于提供一种以盐酸千金藤素为原料，与药剂学上可接受的辅料而制成的一种药用注射剂，为治疗肿瘤病人因放疗化疗引起的白细胞减少症等疾病，提供一种生物利用度高、快速释药、快速起效的药用制剂。本发明所述的盐酸千金藤素原料药可以是任何公知的方法制备而得的。本发明的一种盐酸千金藤素注射剂，是由所述的盐酸千金藤素与药剂学上可接受的辅料而制成的一种注射剂。本发明的一种盐酸千金藤素注射剂其处方规格为所述的盐酸千金藤素10g，注射用水2000ml，与药剂学上可接受的辅料而制成的1000支的注射剂，即规格为5mg/ml。本发明的一种盐酸千金藤素注射剂的制备工艺为取IOOOml的新鲜注射用水，加热至60°C，缓缓加入盐酸千金藤素10g，边加边搅拌至完全溶解，加新鲜注射用水至 2000ml，混勻，即得。本发明的一种盐酸千金藤素注射剂，其鉴别方法为
(1)本发明注射剂显氯化物的鉴别反应；
(2)本发明注射剂在含量测定项下记录的色谱图中，供试品主峰的保留时间应与对照品主峰的保留时间一致。本发明的一种盐酸千金藤素注射剂，其检查方法为
(1)PH值取本发明注射剂，依中国药典2005年版二部附录VIH法测定，pH值应为 4. 0 6. 0 ；
(2)有关物质取本发明注射剂适量，加流动相制成每Iml中含千金藤素Img的溶液，作为供试品溶液；量取适量，加流动相制成每Iml中含15 μ g的溶液，作为对照溶液；取对照溶液20μ 1，注入液相色谱仪，调节仪器灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的10% ； 再精密量取供试品溶液和对照溶液各20 μ 1，分别注入液相色谱仪，记录供试品溶液色谱图至主成分峰保留时间的2倍；供试品溶液色谱图中如显杂质峰，除辅料峰外，各杂质峰面积的和，不得大于对照溶液主峰面积的1. 5倍，即含量为1. 5% ；
(3)无菌取本发明注射剂，照中国药典2005年版二部附录XIH方法检查，应符合规
定；
(4)细菌内毒素取本发明注射剂，依中国药典2005年版二部附录XIE方法检查，每 Img盐酸千金藤素中内毒素的量应小于6. OEU ；
(5)其他应符合中国药典2005年版二部附录IB注射剂项下各项规定。本发明的一种盐酸千金藤素注射剂，其含量测定方法为
用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-氨水=88 12 :0. 2为流动相，检测波长为^3nm，理论板数按千金藤素峰计算应不低于3000 ；精密量取本发明注射剂aiil，置于 25ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇勻，精密量取1ml，置于5ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇勻，滤过，精密量取20 μ 1注入液相色谱仪，记录色谱图；另取千金藤素对照品适量，精密称定，用流动相溶解并稀释成每Iml含75 μ g的溶液，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。本发明注射剂含千金藤素(C37H38N2O6)应为标示量的90. 0% 110. 0%。由于注射剂临床应用的特殊性，我们还进行了盐酸千金藤素注射液的药效实验， 以确保临床使用的安全有效性，总结如下
1.对造血细胞放射线损害的恢复作用隔天给照射损伤的鼠注射盐酸千金藤素，到了第10天每骨髓单位细胞的CFU-S，是对照组的大约2倍；体外培养试验结果表明，盐酸千金藤素注射液(简称CE)对淋巴细胞的T细胞有作用，由于这种T细胞的增加不是由CE对T细胞直接作用产生的，本实验结果认为CE的作用机理在造血系统组织的上皮性细胞的作用， 试验显示CE作为细胞因子诱导物质，对造血系统组织的上皮性细胞起作用，通过产生的细胞因子的生理活性恢复造血系统的细胞增殖分化。盐酸千金藤素注射液能使受到放射线伤害的白细胞、淋巴细胞的数量增加，从而恢复免疫力。2.对小鼠免疫功能的影响试验中用环磷酰胺30mg/kg造成小鼠免疫抑制状态下，注射盐酸千金藤素150mg/kg/d也能使腹腔巨噬细胞的吞噬功能，绵羊红细胞所致特异性抗体的产生能力以及脾脏系数提高至接近正常水平。表明，盐酸千金藤素注射液对小鼠的非特异性及特异性免疫功能有明显的增强作用。此外，为了保证本发明用药安全，根据盐酸千金藤素注射液临床应用特点，我们还进行了该注射液的溶血性试验、全身主动性过敏试验、血管刺激性和肌肉刺激性试验。结果表明本发明所述的盐酸千金藤素注射剂对家兔红细胞无明显的体外溶血及致凝集作用；对豚鼠无明显致敏作用；对新西兰兔耳缘静脉无明显刺激作用；对家兔股四头肌无明显刺激作用。本发明所述的盐酸千金藤素注射液，其制备工艺简单可行、安全有效、稳定可靠， 能够显著提高恶性肿瘤患者化疗放疗所引起的白细胞减少症，增强患者的免疫力有着光明的应用前景。
具体实施例方式实施例1
取IOOOml的新鲜注射用水，加热至60°C左右，缓缓加入所述的盐酸千金藤素10g，边加边搅拌至完全溶解，加新鲜注射用水至2000ml，混勻，得中间体；测定中间体的pH值为4. 0 时，过0. 22 μ m的微孔滤膜过滤，密封，115°C灭菌30分钟，检验，即得。
权利要求
1.一种盐酸千金藤素注射剂，其特征在于该注射剂规格为5mg盐酸千金藤素/ml注射用水。
2.如权利要求1所述的一种盐酸千金藤素注射液的制备工艺，其特征在于取IOOOml 的新鲜注射用水，加热至60°C，缓缓加入盐酸千金藤素10g，边加边搅拌至完全溶解，加新鲜注射用水至2000ml，混勻，即得。
3.如权利要求1所述的一种盐酸千金藤素注射剂的鉴别方法，其特征在于(1)本发明注射剂显氯化物的鉴别反应；(2)本发明注射剂在含量测定项下记录的色谱图中，供试品主峰的保留时间应与对照品主峰的保留时间一致。
4.如权利要求1所述的一种盐酸千金藤素注射剂的检查方法，其特征在于(1)PH值取本发明注射剂，依中国药典2005年版二部附录VIH法测定，pH值应为 4. 0 6. 0 ；(2)有关物质取本发明注射剂1支，加流动相制成每Iml中含千金藤素Img的溶液， 作为供试品溶液；量取供试品溶液，加流动相制成每Iml中含15 μ g的溶液，作为对照溶液； 精密移取供试品溶液和对照溶液各20 μ 1，分别注入液相色谱仪，记录供试品溶液色谱图至主成分峰保留时间的2倍；供试品溶液色谱图中如显杂质峰，除辅料峰外，各杂质峰面积的和，不得大于对照溶液主峰面积的1. 5倍，即含量为1. 5% ；(3)无菌取本发明注射剂，照中国药典2005年版二部附录XIH方法检查，应符合规定；(4)细菌内毒素取本发明注射剂，依中国药典2005年版二部附录XIE方法检查，每 Img盐酸千金藤素中内毒素的量应小于6. OEU ；(5)其他应符合中国药典2005年版二部附录IB注射剂项下各项规定。
5.如权利要求1所述的一种盐酸千金藤素注射剂的含量测定方法，其特征在于 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-氨水=88 12 0. 2为流动相，检测波长为^3nm，理论板数按千金藤素峰计算应不低于3000 ；精密量取本发明注射剂^iil，置于 25ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇勻，精密量取Iml，置于5ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇勻，滤过，精密量取20 μ 1注入液相色谱仪，记录色谱图；另取千金藤素对照品，精密称定，用流动相溶解并稀释成每Iml含75μ g的溶液，测定，按外标法以峰面积计算，即得。
全文摘要
本发明涉及一种盐酸千金藤素注射剂及其制法和检测方法，公开了以盐酸千金藤素为原料，与药剂学上可接受的辅料而制成的一种注射剂，同时还公开本发明注射剂的检测方法和临床用途。本发明所述的盐酸千金藤素注射剂其制备工艺简单可行、安全有效、生物利用度高，能够显著提高恶性肿瘤患者化疗放疗所引起的白细胞减少症，具有很好的应用前景。
文档编号A61K31/4741GK102475680SQ20101055651
公开日2012年5月30日 申请日期2010年11月24日 优先权日2010年11月24日
发明者赵涛 申请人:菏泽步长制药有限公司