专利名称：基于适配体靶向的超顺磁氧化铁纳米复合物核磁共振影像造影剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及通过筛选可特异性结合某些靶标的寡核苷酸或多肽适配体，制备超顺磁氧化铁纳米颗粒，通过载体嵌段聚合物胶束组装成纳米复合物，适用于微小病变定位的早期磁共振造影诊断的核磁共振影像造影剂。
背景技术：
由于当前老龄化社会的趋势和世界范围内人们寿命的延长，人们逐渐意识到如何实现个人健康生活的重要性。相应地，人们一直强调对于诸如癌症和其它威胁生命的重大疾病早期诊断的必要，因此一直迫切需要开发一种在认为需要的时候能够用于早期诊断， 并且具备微小病变精确定位的诊断技术。在此背景下人们一直努力开发新颖的诊断和治疗技术，应用人类基因组计划所获得的丰富的生物信息与纳米技术相结合，将两者结合巧妙地用于制造高度敏感及具有精确靶向的生物传感器件，结合常规的核磁共振影像技术，从而实现体内外微小病变的早期靶向定位诊断及其它生物目的研究，如细胞信号传导、代谢过程等等研究。SELEX技术是近年来发展起来的一种研究核酸结构、功能及进化等的一种新的组合化学技术，它不仅在基础研究、生物筛查等方面均有很好的应用，而且在临床诊断方面显示了广阔的前景。通过指数富集配基的系统进化技术体外筛选得到的一组能与目标靶分子高亲和、高特异性结合的寡核苷酸系列(单链DNA或RNA)，称为适配体(Aptamer)。作为一类新型的功能分子，适配体克高亲和力和高特异性地识别不同的分子。它的亲和力和特异性可与抗体相媲美，被认为是“挑战”抗体地位的一种新型试剂，已在生命科学、化学等领域获得越来越多的应用，以不同类型的示踪分子标记适配体后，该类适配体探针可以直观地将适配体与靶分子的特异性识别转化为灵敏的示踪信号，从而为靶分子的检测提供一种灵敏、特异的新型模式，在疾病诊断和治疗中发挥越来越重要的作用。最近Santa-Coloma TA等报道了用靶标切换技术制备的高特异性“monoclonal oligobody (单克隆寡核苷酸适配体)”或“synthetic oligobody (合成寡核苷酸适配体)” (Bianchini M et al, J. Immunol, methods, 2001，252:191-197)可以特异性识别相应的蛋白质，应用于蛋白质印迹、免疫组化、免疫共沉淀等分析试验中。相对于适配体，蛋白类抗体的产生和应用存在以下限制病毒性抗原免疫，动物无法产生耐受免疫，免疫原性弱导致抗体难以产生；杂交瘤单克隆抗体，在人体的排异反应；抗体生产成本高、费时费力，稀有抗体需要大量筛选才能得到，克隆细胞株需要传代培养；批间质量不均一，需要重新优化标定，体内外识别特异性差异；抗体对温度敏感，寿命有限，需要低温保存等缺点。而适配体在体外筛选，特性可依要求设计改变；动力学参数可依照诊断条件的要求而改变；无毒性抗原和免疫原性弱的抗原所受限制；在体外化学合成，可以保证时间、质量和数量的特别需要；特异性不受组织或样品中非靶蛋白的干扰；可以在合成时精确、定点、随意连接其它功能集团和分子，如巯基、 氨基、荧光素、生物素、酶等；比抗体分子小，更适合于体内影像诊断和治疗；变性和复性可逆，而且速度快，可反复使用、长期保存和室温下运输。超顺磁性氧化铁(SPIO)纳米颗粒不仅在电子领域而且还在磁共振成像、生物传感、癌症热治疗和药物输送等生物医学领域得到广泛的应用。在高温条件下利用有机相合成方法，可以获取大小均一、形态可控的高质量超顺磁氧化铁纳米颗粒。虽然这些纳米颗粒可以均勻分散在有机溶剂中，但是为了能进一步应用在生物医学研究领域，这些纳米颗粒还应满足以下两个基本条件首先，相转移后分散于水相中的纳米粒子必须保持原有的磁学性质；其次，为了进一步应用于体内，包被材料应具有良好的生物相容性和生物降解性。 目前，不同种类材料如小分子配体和基于聚乙二醇的聚合物已成功用于相转移，转移后的水溶性SPIO纳米微粒表象出良好的影像对比效应和生物相容性，SPIO可以作为高效的影像造影剂，可广泛应用于组织、细胞甚至是分子水平的核磁共振显影中，开发高灵敏度和具有靶向特异的SPIO纳米复合物的探索工作仍在继续。目前在影像探针的研究领域，可用作药物载体的聚合物胶束已受到越来越多的关注，这些聚合物胶束通过双亲性两嵌段聚合物在水溶液中自组装而形成核-壳结构。经自组装形成的聚合物胶束体系具有较低临界胶束浓度(CMC)、较低药物毒副作用和较长血液循环时间等优点，是包裹功能性纳米粒子如SPIO和量子点灯的良好载体，用于生物成像的研究。聚合物胶束包裹纳米粒子所形成的纳米复合物除保留纳米粒子原本的磁学和光学特性外，还提高了它在体内外的生物相容性，尤其突出的是多个磁性纳米微粒可以在胶束疏水核内形成致密的团簇结构，从而在同样铁浓度下产生比单个氧化铁粒子更强的T2效应，这一独特结构是开发高灵敏度磁共振影像探针的重要基础。同时两嵌段聚合物胶束的亲水段可以和适配体连接，从而具有了靶向特异性。多糖是一类具有良好生物相容性的天然聚合物，其中葡聚糖、透明质酸、硫酸软骨素和壳聚糖等在药物和基因转导中已有广泛的应用。右旋糖酐等葡聚糖因其良好的生物安全性而在临床上用于血浆替代品，它也是 Feridex和Resovist两种SPIO造影剂得包被材料。但单一的葡聚糖本身并不能够使疏水性SPIO颗粒在水溶液中稳定分散。
发明内容
为解决上述问题，本发明提供一种基于适配体靶向的超顺磁氧化铁纳米复合物核磁共振影像造影剂，包括
(a)用于分子识别的寡核苷酸或多肽适配体；
(b)超顺磁氧化铁纳米微粒；
(c)生物相容性双亲性葡聚糖嵌段共聚物载体，用于超顺磁氧化铁纳纳米粒子和连接用于分子识别的寡苷酸酸或多肽适配体。进一步的，上述寡核苷酸或多肽适配体是筛选可特异性结合某些靶标；具体包括肿瘤、病毒、细菌、信号蛋白、抗原、抗体，核酸、有机小分子、金属离子及某些特异性细胞等。进一步的，上述生物相容性双亲性葡聚糖嵌段共聚物，是通过缩合反应连接分子识别寡核苷酸或多肽适配体，通过乳液挥发包裹超顺磁氧化铁纳米粒子。进一步的，基于上述适配体的寡核苷酸或多肽与超顺磁氧化铁纳米颗粒在生物相容性嵌段共聚物中组合成为具有靶向功能的纳米复合影像造影剂，利用适配体的靶向识别靶分子。
上述靶分子包括蛋白质、多肽、氨基酸、核苷酸、药物、维生素、有机化合物、无机化合物、细胞、细菌、病毒、肿瘤、信号蛋白、抗原、抗体、金属离子中的一种或多种组合。
一种基于适配体靶向的超顺磁氧化铁纳米复合物核磁共振影像造影剂的应用，可用于体内、体外靶向定位微小病灶，通过常规的核磁共振造影诊断设备用于体内外微小病变的早期靶向定位诊断，也可用于细胞信号传导、代谢过程、基因检测、病毒侦测、肿瘤探测等生物研究。一、对于上述靶分子适配体体外筛选与合成
适配体(Aptamer)是可以折叠成明确三维结构的、通过空间构型互补与靶分子结合的一段短的单链寡核苷酸系列，即单链DNA (ssDNA)或RNA。它的获得得益于1990年新型组合化学技术——指数富集配基的系统进化技术(Systematic Evolution of Ligands by Exponential enrichment, SELEX)的创建和发展。对于广泛范围的靶分子，如金属离子、有机物、氨基酸、多肽、核酸、蛋白质、病毒、细菌、细胞等，均可以利用SELEX技术体外筛选分别获得其高亲和力高特异性的适配体分子，其过程如图1所示。SELEX技术将大容量的随机寡核苷酸系列库(ssDNA文库、RNA文库或修饰寡核苷酸文库，约IO13M8个随机系列)与靶分子共同孵育，并通过各种分离技术如磁珠分离、纤维膜过滤、亲和色谱、毛细管电泳等将结合复合物与游离未结合系列分离，洗脱收集获得与靶分子结合的系列，并对这些系列进行聚合酶链式反应(PCR)扩增生成次级文库，用于下轮筛选，经过数轮反复的体外筛选、扩增后，对已达到高亲和力的收敛文库进行单克隆及测序， 从而获得特异性识别靶分子的适配体。通常，单克隆所得完全适配体核酸序列须经一定的剪裁，去掉处于引物及随机区的部分碱基序列，得到其明确的功能系列，从而应用于传感、 分析领域。上述寡核苷酸适配体包含如下的核苷酸系列AAACAXnGYCCC的长15_50个碱基， X为随机碱基系列，每个X可为A、T、C、G系列碱基，η为随机碱基数，长度为20-30nt (包括 0-30的任何整数，列如8、10、11、12、18、20、25、28、30)的整数；Y为G或C碱基。如果要筛选RNA-Aptamer，则5’端引物里还需包含T7启动子序列，它可识别DNA转录为RNA时所必须的T7RNA聚合酶，使随机DNA文库转录为随机RNA文库。通过类似于SELEX的技术，也可以得到金属离子、有机物、氨基酸、多肽、核酸、蛋白质、病毒、细菌、细胞等靶分子多肽适配体，该多肽适配体具有和核酸适配体一样的特异靶向性。上述寡核苷酸适配体系列可根据需要在其末端修饰巯基、氨基、荧光素、生物素、 酶等功能集团和分子，如接上硫代磷酸，可用于细胞内诊断和治疗。二、超顺磁氧化铁(SPIO)纳米微粒的制备
将Immol 6(&03(；)3与5讓01 1，2-十六烷醇、3mmol油酸及3mmol油胺混合于IOmL 苄醚、氩气保护下加热至300°C回流1小时。溶液冷却至室温后用甲醇沉淀得到黑色固体， 将沉淀回溶于混合了油酸油胺的正己烷中，再用甲醇沉淀，得到的产物溶于正己烷中保存备用。油溶性超顺磁氧化铁(SPIO)纳米微粒见图2。三、聚乙二醇(PEG)、聚己内酯(CL)、多糖(Dex)等嵌段共聚物的制备
1、多糖硅烷化选择壳聚糖、葡聚糖、右旋糖酐等多糖适量溶解于IOmL 二甲基亚砜(DMSO)中，氩气保护下加入适当的六甲基二硅氮烷(HMDS)和三甲基氯硅烷(TMSCL)反应4小时后加入細1甲苯，使反应体系清亮。氩气保护下50°C反应20小时，产物用冰庚烷沉淀后，真空烘箱干燥。2,PEG,CL的开环聚合合成Dex-g-PCL/PEG 将甲苯共沸干燥后的硅烷化葡聚糖溶于干燥甲苯中，加入一定量的PEG、CL和Sn(0Ct)2，氩气保护下105°C反应48小时，冰庚烷沉淀得到产物。TMSD-g-PCL/PEG中质量分数可以根据1HNMR数据计算得出。3、硅烷化Dex-g-PCL/PEG的脱保护将上述方法合成的TMSD-g-PCL/PEG分散在含 0. IM HCl的二氧六环中，室温搅拌池后用冰庚烷沉淀，于真空烘箱中干燥。 四、Dex-g-PCL/PEG/SPIO纳米复合物制备采用乳液挥发法，按照聚合物/SPIO质量比等于1-4比例，将适量的聚合物和SPIO分散于适量的氯仿，并将其加入适量的纯水中， 用探头超声分散，氯仿挥发后即得到水相中的Dex-g-PCL/PEG/SPIO纳米复合物。可采用过滤、透析、层析等适当方式，去除未结合的游离聚合物或SPI0。五、适配体偶联Dex-g-PCL/PEG/SPIO纳米复合物活化PEG、PCL衍生物末端的-H00C，在温度4-25°C及PH2-8的磷酸盐缓冲液中，使之与适配体(aptamer)的5，-NH2 共价结合，常用的偶联剂如N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)，1-乙基-3- (3- 二甲氨基-丙基)碳二亚胺(EDAC)、二环己基碳二亚胺(DCC)等。六、上述适配体偶联Dex-g-PCL/PEG/SPIO纳米复合物通过过滤、透析、层析等合适方式纯化，消毒灭菌后分装，就获得了基于适配体靶向的超顺磁氧化铁SPIO纳米复合物造影剂，注射后可用于体内体外核磁共振造影。七、适配体偶联Dex-g-PCL/PEG/SPIO纳米复合物形成稳定的胶体溶液，用动态光散射、磁化强度和T2驰豫效能(relaxivity)等参数来表征胶束的物理特性；通过小鼠肝脏造影来评价该纳米复合材料的体内显影效果；通过静脉注射造影剂后在不同时间点对肝脏、脾脏进行组织病理学切片和染色，检测磁共振造影剂在体内的分布、细胞吞嗤情况。
图1 适配体SELEX筛选过程的示意图。图2 超顺磁氧化铁SPIO示意图。图3 超顺磁氧化铁SPIO聚合物纳米粒子。图4 靶向分子-SPIO-嵌段聚合物纳米复合粒子。图5 适配体-SPIO-嵌段聚合物纳米复合物诊断示意。
具体实施例下面结合具体实施方式
对本发明做进一步说明。1: ssDNA扩增文库的构建
在 PCR 体系(10XPCR 反应缓冲液 IOul，dNTPs (25mM) 8ul，5，引物(25pmol/ul) 2ul，3，引物(25pmol/ul)2ul，模板0. 25ug，Pfu DNA聚合酶Iul)中，下游引物的5，端标记有生物素。以原始ssDNA文库为模板进行PCR扩增，可得到3’末端带有生物素的dsDNA 文库。所述原始ssDNA文库具有20_25个随机系列，全长85个碱基的随机DNA文库， 此文库两端为固定系列，可设计引物对文库进行PCR扩增。ssDNA的系列为5' -T AATACAGACTX25GATCCCAGTCA-3‘ dsDNA产物经分离纯化后，加入链亲和素磁珠结合，扩增的dsDNA通过3，端的生物素与磁珠链亲和素结合，然后用0. 15N的NaOH使dsDNA变性解链，带有生物素的一条链与链亲和素结合留在磁珠上，而不带生物素的一条链解离出来，经乙醇沉淀，溶于TE缓冲液中，测定OD值，作为第一次随机筛选的随机ssDNA文库。2 ssDNA次级文库构建
选用叶酸作为靶标分子，将叶酸、福氏免疫佐剂、磷脂、胆固醇适量混合研磨制备免疫原，将上述免疫原小鼠大腿、背部皮下多点免疫注射，30-60天后采血检测叶酸抗体。采小鼠血清提取叶酸抗体，将小鼠抗叶酸抗体用PBS缓冲液稀释后在合适的温度条件下包被聚乙烯小孔板。实验时将叶酸稀释适量加入已包被抗叶酸抗体的聚乙烯小孔板孵育适当时间，用PBS缓冲液清洗未结合的游离叶酸分子，真空低温抽干密封储存于4°C冰箱备用。把约0. 5nmol生物素标记的随机ssDNA和上述聚苯乙烯微孔板在500ul含 1%BSA 的结合 TE 缓冲液(IOmM Tris-HCl1PH 7. 5，ImM EDTA, lmMCaC12, ImM MgC12)中孵育， 轻轻震荡，4°C过夜。倾去孵育液，然后用0.5 ml TE缓冲液洗涤3次微孔板，然后用7M尿素在94°C反应10分钟洗脱结合的寡核苷酸，然后用酚/氯仿/异丙醇(25 :24 :1，PH 8)抽提，洗脱液加入10%糖原后用乙醇沉淀，再进行PCR (95°C预变性5分钟后，扩增5个循环 94°C变性1分钟，55°C退火2分钟，72°C延伸1分钟，最后72°C终止延伸5分钟)，取10 ul 上述PCR产物为模板，再次PCR扩增，每3个循环取样，选择PCR产量大，无杂带的循环数为最佳循环数，将剩余90ul产物全部扩增。其中一部份以[a -32P]CTP为底物进行PCR，得到的产物与包被不同浓度有叶酸的聚苯乙烯板杂交进行验证。其余部分通过PCR生成生物素化dsDNA，再拆分为生物素化ssDNA。不同浓度叶酸包被微孔板和放射性标记的第一轮筛选后的扩增文库进行点杂交，结果显示杂交信号强度随叶酸浓度增加而增加，表明获得的标记DNA文库和叶酸有特异的结合作用。3 叶酸多克隆寡核苷酸适配体制备
将上述杂交方法筛选到与叶酸有强力结合的次级DNA文库用尿素-苯酚洗脱抽提纯化，通过PCR (95°C预变性5分钟后，扩增90个循环94°C变性1分钟，55°C退火2分钟，72°C延伸1分钟，最后72°C终止延伸5分钟)扩增生成生物素化dsDNA，拆分为生物素化 ssDNA叶酸寡核苷酸适配体备用。多克隆寡核苷酸适配体经过PCR扩增后，连接与pGEM-T easy Vector,然后转染感受态细胞，挑取3个克隆进行测序。每一个阳性克隆即为一个单克隆寡核苷酸适配体。通过包被叶酸聚苯乙烯微孔板，可以检测单克隆寡核苷酸适配体的结合系数，选择合适的单克隆寡核苷酸适配体备用。4 硅烷化葡聚糖(TMSD)的制备
Dex-g-PCL的制备过程包括葡聚糖的硅烷化、CL开环聚合和脱保护3个步骤，根据文献报道，将0. 25g干燥葡聚糖溶解于IOmlDMSO中，氩气保护下加入适量的HMDS和TMSCl，反应 4小时后加入甲苯，使反应体系均勻清亮，氩气保护下50°C反应20小时，产物用冰庚烷沉淀后，真空烘箱干燥。5 =CL的开环聚合根据文献报道，实验采用Sn (Oct) 2引发CL开环聚合合成Dex-g-PCL，将甲苯共沸干燥后的硅烷化葡聚糖溶于干燥甲苯中，加入一定量的CL和Sn (Oct) 2，氩气保护下105°C反应 48小时，冰庚烷沉淀得到产物。硅烷化Dex-g-PCL的脱保护将TMSD_g_PCL分散在含0. IM HCl的二氧六环中，室温搅拌池后用庚烷沉淀，于真空烘箱中干燥。6:双亲性葡聚糖的表征
以 d6-DMS0，CDC13(TMS 为内标)和 D20 为溶剂，用 Bruker AM 400 (400 Hz)获得不同反应阶段聚合物的核磁氢谱，用Perkin-Elmer红外光谱仪获得聚合物的红外吸收光谱。7:SPIO纳米颗粒制备
将lmmolFe(acac)3与5mmol 1，2-十六烷醇、3mmol油酸及3mmol油胺混合于IOmL 苄醚、氩气保护下加热至300°C回流1小时，溶液冷却至室温后用甲醇沉淀得到黑色固体， 将沉淀回溶于混合了油酸油胺的正己烷中，再用甲醇沉淀，得到的产物产物于正己烷中保存。8 :Dex-g-PCL/SPI0纳米复合物的制备
用乳液挥发法按照聚合物/SPIO等于3的质量比，将适量的聚合物和SPIO分散于 0. 5mL氯仿，并将其加至5mL纯水中，用探头超声(SONICS，US)分散，氯仿挥发后即得到水相中的Dex-g-PCL/SPIO纳米复合物，该纳米复合物的粒度分布和形貌分别通过Malvern Nanosizer粒度仪和扫描电子显微镜(Hitachi S-4800，Janpan)进行表征。9 生物素化适配体-Dex-g-PCL联接
生物素化ssDNA叶酸寡核苷酸适配体携带的生物素与Dex-g-PCL葡聚糖通过缩合反应联接在一起，通过合适的柱层析纯化“适配体-Dex-g-PCL”复合物。10 适配体-Dex-g-PCL/SPIO纳米复合物制备
将柱层析纯化“适配体-Dex-g-PCL”复合物加按照3 1加入超顺磁氧化铁纳米微粒(SPI0)，用乳液挥发法制备复合物。11 适配体-Dex-g-PCL/SPIO 和 Dex-g-PCL/SPIO 纳米复合物对比
用动态光散射、磁化强度和T2驰豫效能(relaxivity)等参数来表征胶束的物理特性； 通过小鼠肝脏造影来评价该纳米复合材料的体内显影效果；通过静脉注射造影剂后在不同时间点对肝脏、脾脏进行组织病理学切片和染色，检测磁共振造影剂在体内的分布、细胞吞嗤及靶向情况。本发明使用适配体、超顺磁性氧化铁纳米微粒与聚乙二醇、聚己内酯和多糖嵌段共聚物组装成为纳米胶束复合物，利用适配体与靶分子特异性结合的靶向作用及SPIO纳米微粒的磁共振造影特性，通过常规的核磁共振造影诊断设备用于体内外微小病变的早期靶向定位诊断。本发明通过选择合适的靶分子适配体，也可以用于细胞信号传导、代谢过程、细菌/病毒侦测、分子相互作用等生物研究。本发明选择双亲性葡聚糖作为包裹SPIO纳米粒子而形成纳米复合材料，技术上以聚乙二醇、聚己内酯等与多糖合成的嵌段共聚物，形成双亲性的纳米胶束，既可以包裹疏水性SPIO纳米微粒，同时通过合适的基团与修饰后的适配体聚合反应，可以共同组成具有靶向特异性的纳米复合物。
权利要求
1.一种基于适配体靶向的超顺磁氧化铁纳米复合物核磁共振影像造影剂，其特征在于，包括(a)用于分子识别的寡核苷酸或多肽适配体；(b)超顺磁氧化铁纳米微粒；(c)生物相容性双亲性葡聚糖嵌段共聚物载体，用于超顺磁氧化铁纳纳米粒子和连接用于分子识别的寡苷酸酸或多肽适配体。
2.根据权利要求1所述的基于适配体靶向的超顺磁氧化铁纳米复合物核磁共振影像造影剂，其特征在于，寡核苷酸或多肽适配体是经筛选的可特异性结合靶标或特异性细胞。
3.根据权利要求2所述的基于适配体靶向的超顺磁氧化铁纳米复合物核磁共振影像造影剂，其特征在于，所述可特异性结合靶标包括肿瘤、病毒、细菌、信号蛋白、抗原、抗体， 核酸、有机小分子或金属离子。
4.根据权利要求1所述的基于适配体靶向的超顺磁氧化铁纳米复合物核磁共振影像造影剂，其特征在于，所述生物相容性双亲性葡聚糖嵌段共聚物，是通过缩合反应连接分子识别寡核苷酸或多肽适配体，通过乳液挥发包裹超顺磁氧化铁纳米粒子。
5.根据权利要求1所述的基于适配体靶向的超顺磁氧化铁纳米复合物核磁共振影像造影剂，其特征在于，所述基于上述适配体的寡核苷酸或多肽与超顺磁氧化铁纳米颗粒在生物相容性嵌段共聚物中组合成为具有靶向功能的纳米复合影像造影剂，利用适配体的靶向识别靶分子。
6.根据权利要求5所述的基于适配体靶向的超顺磁氧化铁纳米复合物核磁共振影像造影剂，其特征在于，所述靶分子包括蛋白质、多肽、氨基酸、核苷酸、药物、维生素、有机化合物、无机化合物、细胞、细菌、病毒、肿瘤、信号蛋白、抗原、抗体或金属离子中的一种或多种组合。
7.—种如权利要求1所述的基于适配体靶向的超顺磁氧化铁纳米复合物核磁共振影像造影剂的应用，是用于体内、体外靶向定位微小病灶、病变的核磁共振造影剂。
全文摘要
本发明提供一种基于适配体靶向的超顺磁氧化铁纳米复合物核磁共振影像造影剂，包括(a)用于分子识别的寡核苷酸或多肽适配体；(b)超顺磁氧化铁纳米微粒；(c)生物相容性双亲性葡聚糖嵌段共聚物载体，用于超顺磁氧化铁纳纳米粒子和连接用于分子识别的寡苷酸酸或多肽适配体。本发明使用适配体、超顺磁性氧化铁纳米微粒与聚乙二醇、聚己内酯和多糖的嵌段共聚物组装成为的纳米胶束复合物，利用适配体与靶分子特异性结合的靶向作用及SPIO纳米微粒的磁共振造影特性，通过生物相容性的嵌段共聚物构建复合纳米胶束，进入体内后，靶向定位微小病灶，通过常规的核磁共振造影诊断设备用于体内外微小病变的早期靶向定位诊断。本发明通过选择合适的靶分子适配体，也可以用于细胞信号传导、代谢过程、基因检测、病毒侦测、肿瘤探测等生物研究。
文档编号A61K49/18GK102526770SQ20101061716
公开日2012年7月4日 申请日期2010年12月31日 优先权日2010年12月31日
发明者戴永强 申请人:上海长征富民金山制药有限公司, 戴永强