专利名称：一种注射用还原型谷胱甘肽的冻干方法
技术领域：
本发明涉及一种注射用还原型谷胱甘肽的制备方法，具体涉及一种注射用还原型谷胱甘肽的冻干方法。
背景技术：
谷胱甘肽是一种具有重要生理功能的天然活性肽，它由谷氨酸、半胱氨酸及甘氨酸组成。谷胱甘肽在体内以2种形态存在，即还原型谷胱甘肽(reduced glutathione，简称GSH)和氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione!,简称GSSG)，在机体中大量存在并起主要作用的是还原型谷胱甘肽贾贞，王丹，游松.谷胱甘肽的研究进展.沈阳药科大学学报.2009年3月第沈卷第3期。还原型谷胱甘肽因存在活泼的巯基在水中不稳定且对热敏感，故一般采用无菌操作法制成注射用冻干粉针剂供临床使用。目前市售的注射用还原型谷胱甘肽冻干粉的生产工艺可分为两种，第一种是将原料冻干，在无菌操作条件下进行转运、粉碎过筛后分装，优点为生产成本较低，其缺点是药粉易吸潮，药粉结块并增加重量，同时容易产生装量不准， 药物分解变质，在无菌操作过程中存在极大的污染风险等；第二种是将药物配制成液体后直接进行无菌分装，然后进行冷冻干燥，较好地克服了第一种方法存在的缺点，生产过程简单，避免了无菌操作过程中存在的污染风险，提高了药品质量严婷，秦咏九，徐新元.注射用还原型谷胱甘肽产品质量初步考察.China Pharmacist 2003, Vol.6 No. 9。但第二种方法目前还存在三方面问题(1)直接生产成本高主要原因在于还原型谷胱甘肽溶液本身粘度大，产品冻干升华过程中水分升华困难，冻干过程控制难度大，冻干周期长，且规格越大，产品水溶液浓度越大，其冻干难度也越大，所以只能选择底面积大，瓶口直径大的较大规格的注射剂瓶， 如中国专利申请CN200910055295. 1中采用IOml注射剂瓶冻干0. 3g、0. 6g还原型谷胱甘肽来降低难度系数，但这样做会减小产能，增加生产成本。(2)批与批之间产品质量不均一由于其冻干工艺较为复杂，部分生产厂商在冻干过程中以实际制品温度为主要控制温度，由于制品温度与人员手工操作放置探头于瓶中的高低位置及温度传感器在瓶口部分占用的水分升华通道的面积以及温度传感器在板层的位置等均有直接影响关系，因此在实际生产操作中存在较大变量很难做到前后批次产品质量稳定可控，造成批与批之间产品质量不均一。(3)无法提供大规格产品由于注射用还原型谷胱甘肽对于绝大部分病患群体在安全范围内使用剂量大，小规格产品在临床上只能多支联用，不仅增加污染风险同时消耗较高材料成本，目前的冻干工艺能提供产品的最大规格为1. 2g，不能很好的满足临床需求。因此，提供一种冻干周期短、产量高、成本低、质量稳定均一并适合生产大规格注射用还原型谷胱甘肽的冻干工艺，成为目前业内迫切需要解决的问题。
发明内容
本发明提供了一种冻干周期短、产量高、成本低、质量稳定可控的冻干工艺。本发明提供了一种注射用还原型谷胱甘肽的冻干方法，预冻过程结束后，进行一、 二期冻干升华，其特征为一期冻干升华过程为30分钟内抽真空至5 10Pa，将隔板温度在40 60分钟内升温至-2 0°C，保持10-20小时，再将隔板温度降温至_10 -12°C， 保持10-30小时，然后在5-15小时内将隔板温度升温至0°C，全过程均维持在5 lOI^a。其中，一期冻干升华过程中，优选为在30分钟内抽真空至8 10Pa，且全过程均维持在8 10Pa。本冻干方法可以在冻干机隔板常温状态下开始进行预冻过程，但优选为在预冻过程之前，将冻干机隔板温度预冷至10 20°C，更优选为冻干机隔板温度预冷至15 18°C。预冻过程和二期冻干升华过程均可以采用本领域常规方法，但优选为预冻过程为将隔板温度降温至-7 -10°C，并保温0. 75 1. 5小时，在1 1. 5小时内快速降温至_45°C， 并保持0. 5 4小时；二期冻干升华过程为将隔板温度快速升温至60°C，保持6 12小时。根据本发明提供的冻干方法，优选为在充氮气条件下将处方量的还原型谷胱甘肽原料加入20°C以下注射用水中，搅拌均勻，加入药用级氢氧化钠溶液，搅拌使溶液澄清， 调节药液pH在5. 2 5. 7之间，定量分装于西林瓶中半加塞后进行冻干。本发明提供的冻干方法，具体为0. 3g，0. 6g规格产品用5ml的西林瓶生产，1. 2g规格用IOml瓶生产，1. 8g规格用15ml瓶生产，在生产过程中全部冻干过程以隔板温度为基准进行控制，隔板温度恒定性能要强，即要求冻干设备隔板表面温度与导热油进口温度的偏离范围为导热油到达-20°C以下设定标准温度5分钟时间内两者温差不低于2°C。本发明提供的冻干方法主要包含以下步骤(1)将冻干机隔板温度预冷至10°C 20°C以下，放入半加塞灌装完毕的液体产品，开始进入冻干程序此步骤的目的是从开始配制到灌装结束的全过程均使该液态产品处于低温防氧化的保护下，使溶液状态均勻，避免出现分层、析出结晶等不利于冻干水分升华和造成最终所得成品质量不均勻的情况。(2)将隔板温度降温至-7 -10°C，并保温0.75 1.5小时左右，使所有产品的溶液状态均勻一致，在1 1. 5小时以内快速降温至-45°c，并保持0. 5 4小时高速度的制冷效率能够确保所有产品在很短时间内快速越过临界共晶点，形成坚实的晶体骨架， 为后续的快速升华打好基础；(3) 一期冻干升华过程先抽真空，然后采用极速升温，降温再升温的一期冻干升华过程，能够明显缩短冻干周期，降低生产成本。本发明提供了一种使用5ml西林瓶进行0. 3g、0. 6g规格产品的冻干制剂的制备工艺，使每一批次生产的产量较IOml西林瓶提高30%的产能，直接材料成本降低10%左右， 且冻干生产周期较目前生产周期缩短20 % 30 %，IOml西林瓶生产的1. 2g产品的冻干生产周期较目前生产周期缩短10%左右，是一种低成本、高产能的生产工艺；同时本发明提供的冻干工艺统一对隔板温度进行控制，所得产品批间差异小，产品质量稳定可控；根据本发明提供的冻干工艺制备出的1.8g大规格产品，其质量稳定可靠，很好地满足了临床需要，是目前市场上该产品大剂量使用的首选。
具体实施例方式本发明通过以下实施例和试验例来进一步阐述说明，但本发明并不仅限于此。以下各实施例、试验例中的制备例所用还原型谷胱甘肽原料均购自日本Kyowa HakkoKogyo Co.，Ltd，产品批号为:099355。实施例1 制备0. 3g注射用还原型谷胱甘肽称取还原型谷胱甘肽原料3. Okg放入不锈钢桶内，然后加入5. 5kg的20°C以下注射用水，搅拌均勻，同时通入经0. 22um滤芯过滤的氮气密闭保护直至全部产品灌装完毕， 加0. 2g/ml氢氧化钠溶液约1900ml，同时搅拌使溶液澄清，调节药液pH在5. 2 5. 7之间， 最后补加注射用水至11. 4kg，继续搅拌10分钟。药液配制完毕经0. 22um滤芯过滤后，分装于5ml规格的西林瓶中，每瓶装量1ml，灌装10000瓶，同时对灌装的产品加半塞，然后将产品放至已经提前预冷隔板温度至15°C的冻干箱内直至全部产品灌装完毕，关闭冻干箱门， 执行冻干程序。产品的冻干程序如下将隔板温度降温至-10°C，并保温45分钟，使所有产品的溶液状态均勻一致；设定隔板温度1. 5小时以内快速降温至_45°C，保持3小时；30分钟内抽箱体真空至5pa以内，然后开始升温，此后全过程均维持在5pa的真空度，升温时首先将隔板温度在40分钟内升温至0°C，保持10小时，再将隔板温度降温至-10°C，保持14小时，然后在5小时内将隔板温度缓慢升温至0°C后，直接将隔板温度快速升温至60°C，保持6小时，在真空的状态下对产品压全塞；整体冻干周期长40小时。实施例2 制备0. 6g注射用还原型谷胱甘肽称取还原型谷胱甘肽原料6. Okg放入不锈钢桶内，然后加入11. Okg的20°C以下注射用水，搅拌均勻，同时通入经0. 22um滤芯过滤的氮气密闭保护直至全部产品灌装完毕， 加0. 2g/ml氢氧化钠溶液约3800ml，同时搅拌使溶液澄清，调节药液pH在5. 2 5. 7之间， 最后补加注射用水至22. 8kg,继续搅拌10分钟。药液配制完毕经0. 22um滤芯过滤后，分装于5ml规格的西林瓶中，每瓶装量anl，灌装10000瓶，同时对灌装的产品加半塞，然后将产品放至已经提前预冷隔板温度至15°C的冻干箱内直至全部产品灌装完毕，关闭冻干箱门， 执行冻干程序。产品的冻干程序如下将隔板温度降温至_7°C，并保温75分钟，使所有产品的溶液状态均勻一致；设定板温1. 5小时以内快速降温至_45°C，保持3小时；30分钟内抽箱体真空至8pa以内，然后开始升温，此后全过程均维持在8pa的真空度，升温时首先将隔板温度在60分钟内升温至0°C，保持15小时，再将隔板温度降温至-12°C，保持M小时，然后在10小时内将隔板温度缓慢升温至0°C后，直接将隔板温度快速升温至60°C，保持10小时，在真空的状态下对产品压全塞；整体冻干周期长65小时。实施例3 制备1. 2g注射用还原型谷胱甘肽称取还原型谷胱甘肽原料12. Ok g放入不锈钢桶内，然后加入22. Okg的20°C以下注射用水，搅拌均勻，同时通入经0. 22um滤芯过滤的氮气密闭保护直至全部产品灌装完毕，加0. 2g/ml氢氧化钠溶液约7600ml，同时搅拌使溶液澄清，调节药液pH在5. 2 5. 7之间，最后补加注射用水至45. Wcg，继续搅拌10分钟。药液配制完毕经0. 22um滤芯过滤后，
5分装于IOml规格的西林瓶中，每瓶装量細1，灌装10000瓶，同时对灌装的产品加半塞，然后将产品放至已经提前预冷隔板温度至18°C的冻干箱内直至全部产品灌装完毕，关闭冻干箱门，执行冻干程序。产品的冻干程序如下将隔板温度降温至-10°C，并保温90分钟，使所有产品的溶液状态均勻一致；设定隔板温度1. 5小时以内快速降温至_45°C，保持4小时；30分钟内抽箱体真空至IOpa以内，然后开始升温，此后全过程均维持在IOpa的真空度，升温时首先将隔板温度在50分钟内升温至0°C，保持17小时，再将隔板温度降温至-12°C，保持30小时，然后在15小时内将隔板温度缓慢升温至0°C后，直接将隔板温度快速升温至60°C，保持10小时，在真空的状态下对产品压全塞；整体冻干周期长83小时。实施例4 制备1. Sg注射用还原型谷胱甘肽称取还原型谷胱甘肽原料18. Okg放入不锈钢桶内，然后加入33. Okg的20°C以下注射用水，搅拌均勻，同时通入经0. 22um滤芯过滤的氮气密闭保护直至全部产品灌装完毕，加0. 2g/ml氢氧化钠溶液约11400ml，同时搅拌使溶液澄清，调节药液pH在5. 2 5. 7 之间，最后补加注射用水至68. 4kg，继续搅拌10分钟。药液配制完毕经0.22um滤芯过滤后，分装于15ml规格的西林瓶中，每瓶装量6ml，灌装10000瓶，同时对灌装的产品加半塞， 然后将产品放至已经提前预冷隔板温度至15°C的冻干箱内直至全部产品灌装完毕，关闭冻干箱门，执行冻干程序。产品的冻干程序如下将隔板温度降温至-10°C，并保温90分钟，使所有产品的溶液状态均勻一致；设定隔板温度1. 5小时以内快速降温至_45°C，保持4小时；30分钟内抽箱体真空至8pa以内，然后开始升温，此后全过程均维持在8pa的真空度，升温时首先将隔板温度在40分钟内升温至0°C，保持15小时，再将隔板温度降温至_12°C，保持30小时，然后在15小时内将隔板温度缓慢升温至0°C后，直接将隔板温度快速升温至60°C，保持12小时，在真空的状态下对产品压全塞；整体冻干周期长83小时。试验例1各冻干周期比较根据中国专利申请CN200910055295. 1说明书具体实施方式
中实施例2、3、5提供的冻干工艺方法生产出0. 3g、0. 6g、l. 2g注射用还原型谷胱甘肽制备例1 :0. 3g注射用还原型谷胱甘肽灭菌配液锅中先加注射用水约30L，控制水温在40°C以下，加还原型谷胱甘肽 12. !3Kg，搅拌均勻，加质量分数10%氢氧化钠约16. 2L，同时搅拌使溶解澄清，加注射用水至总量82L，调节pH值至4. 8 5. 8，分析合格后，药液先用0. 45um滤器过滤，再用0. 22um 微孔滤膜过滤除菌，滤液检查可见异物合格后，分装于IOml管制瓶内，每瓶0. 3g/2ml，每半小时抽查装量的准确度。灌装结束后，由机器自动半加塞，随后将灌装产品装入抽底盘内并及时送入冻干箱，关闭箱门。在1. 5 2小时内将制品温度从室温降至-40°C，保温1小时； 2小时内将制品温度从-40°C升至-17°C，保温1小时；在2小时内将制品温度再降至-40 V， 保温1小时后开始抽真空并升温至45 50°C，此过程需要49小时，保温10小时左右出箱、 轧盖、灯检、包装。每瓶含还原型谷胱甘肽0. 3g。整体冻干周期长68小时。
制备例2 0. 6g注射用还原型谷胱甘肽灭菌配液锅中先加注射用水约30L，控制水温在40°C以下，加还原型谷胱甘肽 24. 6Kg，搅拌均勻，加质量分数10%氢氧化钠约32. 4L，同时搅拌使溶解澄清，加注射用水至总量82L，调节pH值至4. 8 5. 8，分析合格后，药液先用0. 45um滤器过滤，再用0. 22um 微孔滤膜过滤除菌，滤液检查可见异物合格后，分装于IOml管制瓶内，每瓶0. 6g/2ml，每半小时抽查装量的准确度。灌装结束后，由机器自动半加塞，随后将灌装产品装入抽底盘内并及时送入冻干箱，关闭箱门。在1. 5 2小时内将制品温度从室温降至-40°C，保温1小时； 2小时内将制品温度从_40°C升至-17°C，保温1小时；在2小时内将制品温度再降至-40 V， 保温1小时后开始抽真空并升温至45 50°C，此过程需要61小时，保温10小时左右出箱、 轧盖、灯检、包装。每瓶含还原型谷胱甘肽0. 6g。整体冻干周期长80小时。制备例3 :1. 2g注射用还原型谷胱甘肽灭菌配液锅中先加注射用水约55L，控制水温在40°C以下，加还原型谷胱甘肽 49. ^ig,搅拌均勻，加质量分数10%氢氧化钠约64. 8L，同时搅拌使溶解澄清，加注射用水至总量164L，调节pH值至4. 8 5. 8，分析合格后，药液先用0. 45um滤器过滤，再用0. 22um 微孔滤膜过滤除菌，滤液检查可见异物合格后，分装于IOml管制瓶内，每瓶1. 2g/^il，每半小时抽查装量的准确度。灌装结束后，由机器自动半加塞，随后将灌装产品装入抽底盘内并及时送入冻干箱，关闭箱门。在1. 5 2小时内将制品温度从室温降至-40°C，保温1小时； 2小时内将制品温度从_40°C升至-17°C，保温1小时；在2小时内将制品温度再降至-40 V， 保温1小时后开始抽真空并升温至45 50°C，此过程需要76小时，保温10小时左右出箱、 轧盖、灯检、包装。每瓶含还原型谷胱甘肽1. 2g。整体冻干周期长95小时。由本申请实施例1-3与制备例1-3比较可知，采用本申请提供的冻干工艺制备同规格的注射用还原型谷胱甘肽，冻干周期大大缩短，0. 3g、0. 6g的产量也有大幅提高，有效地降低生产成本。
权利要求
1.一种注射用还原型谷胱甘肽的冻干方法，预冻过程结束后，进行一、二期冻干升华， 其特征为一期冻干升华过程为30分钟内抽真空至5 10Pa，将隔板温度在40 60分钟内升温至-2 0°C，保持10-20小时，再将隔板温度降温至-10 -12°C，保持10-30小时， 然后在5-15小时内将隔板温度升温至0°C，全过程均维持在5 lOI^a。
2.根据权利要求1所述的冻干方法，其特征为预冻过程为将隔板温度降温至-7 -10°C，并保温0. 75 1. 5小时，在1 1. 5小时内快速降温至_45°C，并保持0. 5 4小时。
3.根据权利要求1所述的冻干方法，其特征为二期冻干升华过程为将隔板温度快速升温至60°C，保持6 12小时。
4.根据权利要求1 3任一所述的冻干方法，其特征为预冻过程之前，将冻干机隔板温度预冷至10 20°C。
5.根据权利要求4所述的冻干方法，其特征为在充氮气条件下将处方量的还原型谷胱甘肽原料加入20°C以下注射用水中，搅拌均勻，加入药用级氢氧化钠溶液，搅拌使溶液澄清，调节药液PH在5. 2 5. 7之间，定量分装于注射剂瓶中半加塞后进行冻干。
6.根据权利要求5所述的冻干方法，其特征为预先将冻干机隔板温度预冷至15°C;预冻过程为将隔板温度降温至-10°C，并保温0. 75小时，在1. 5小时内快速降温至-45°c，并保持3小时；冻干一期升华过程为30分钟内抽真空至5Pa，将隔板温度升温至0°C，保持10 小时，再将隔板温度降温至-10°C，保持14小时，然后在5小时内将隔板温度升温至0°C，全过程均维持在5Pa ；二期升华过程为将隔板温度快速升温至60°C，保持6小时。
7.根据权利要求5所述的冻干方法，其特征为预先将冻干机隔板温度预冷至15°C;预冻过程为将隔板温度降温至_7°C，并保温1. 25小时，在1. 5小时内快速降温至_45°C，并保持3小时；冻干一期升华过程为30分钟内抽真空至8Pa，将隔板温度升温至0°C，保持15小时，再将隔板温度降温至_12°C，保持M小时，然后在10小时内将隔板温度升温至0°C，全过程均维持在8Pa ；冻干二期升华过程为将隔板温度快速升温至60°C，保持10小时。
8.根据权利要求5所述的冻干方法，其特征为预先将冻干机隔板温度预冷至18°C;预冻过程为将隔板温度降温至-10°C，并保温1. 5小时，在1. 5小时内快速降温至_45°C，并保持4小时；冻干一期升华过程为30分钟内抽真空至10Pa，将隔板温度升温至0°C，保持17 小时，再将隔板温度降温至_12°C，保持30小时，然后在15小时内将隔板温度升温至0°C， 全过程均维持在10 ；冻干二期升华过程为将隔板温度快速升温至60°C，保持10小时。
9.根据权利要求5所述的冻干方法，其特征为预先将冻干机隔板温度预冷至15°C;预冻过程为将隔板温度降温至-10°c，并保温1. 5小时，在1. 5小时内快速降温至-45°c，并保持4小时；冻干一期升华过程为30分钟内抽真空至8Pa，将隔板温度升温至0°C，保持15小时，再将隔板温度降温至-12°C，保持30小时，然后在15小时内将隔板温度升温至0°C，全过程均维持在8Pa ；冻干二期升华过程为将隔板温度快速升温至60°C，保持12小时。
全文摘要
本发明提供了一种注射用还原型谷胱甘肽的冻干方法，具体为预冻过程结束后，一期冻干升华过程为先抽真空再升温，将隔板温度升温至-2～0℃，保持10-20小时，再将隔板温度降温至-10～-12℃，保持10-30小时，然后在5-15小时内将隔板温度升温至0℃。采用此一期升华方法能够明显缩短冻干周期，降低生产成本。
文档编号A61K9/19GK102151251SQ201110004370
公开日2011年8月17日 申请日期2011年1月11日 优先权日2011年1月11日
发明者孟莹, 李世旭, 林彤慧, 王洪波, 邢立娟 申请人:山东绿叶制药有限公司