专利名称：干姜与吴茱萸组合物、其制备方法及其在制备癌症放、化疗中减毒增效药物中的用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种天然药物组合物，更具体地涉及一种由干姜茱萸汤水煎浓缩提取 物、姜辣素、吴茱萸提取物与吴茱萸碱组成的天然药物组合物，该天然药物组合物的制备方 法以及该天然药物组合物在用于制备减少癌症放、化疗引起的呕吐副作用并对治疗癌症起 增效作用的药物中的用途。
背景技术：
癌症目前已成为人类面临的一大杀手，死亡率仅次于心血管疾病，而且呈逐年上 升的趋势。我国每年有180万恶性肿瘤患者，其中2/3的病人接受放、化疗，虽然有一定的 疗效，但放、化疗后大部分患者会出现不同程度的副作用，其中最常见的副作用是恶心、呕 吐等胃肠道反应。频繁的呕吐可导致消化液大量丢失，水、电解质、酸碱平衡紊乱，使病人痛 苦不堪，严重影响病人的生存质量，不仅会影响到疗效，甚至使病人难以忍受而中断治疗。目前，临床常用的止吐药主要有组胺(H2)、乙酰胆碱(M)及多巴胺(DA)受体拮抗 药和大麻类药物等，但这些药物对放、化疗后呕吐的疗效差，而且毒副作用强，应用上受到 很大限制。新型止吐药，如NK1受体拮抗剂和5-HT3受体拮抗类药物，虽然对放、化疗后呕吐 止吐效果好，但价格昂贵，使用范围窄，而且毒副反应大，临床多需联合用药，且未见抗癌增 效作用，因此期待着天然抗癌减毒增效药物的研制。中医药对于癌症放、化疗减毒增效的研究，令人瞩目。目前尚无对抗癌症放、化疗 具有减轻呕吐副作用及增效作用的中成药。因此，研发一种高效低毒、价格低廉，易于推广 的可用于减轻癌症放、化疗呕吐副作用并起增效减毒作用的天然中药成为临床亟待解决的 问题。中药姜(zingiber)被誉为“呕吐圣药”。姜辣素是从姜中提取的活性成份，本发明 人观察到姜辣素可对抗无机及有机毒物硫酸铜和顺钼所致呕吐，并抑制肠道嗜铬细胞释放 致吐因子5-HT和P物质，姜辣素作用于化疗呕吐最相关的NKJP5-HT3等受体，为多靶点、天 然低毒止吐药。吴茱萸为芸香科植物吴茱萸的近干燥成熟果实，具有祛寒止痛、降逆止呕、 助阳止呕之功。干姜茱萸汤摘录自《外台》卷六，主治霍乱苦呕不息。该方由干姜和茱萸组 成，组方简单，成本非常低。近年来，干姜和吴茱萸抗癌作用得到证实。吴茱萸提取物吴茱萸 碱(Evodiamine)，分子式SC19H17N3O15吴茱萸碱有健胃、镇痛、止干呕和止嗳酸等功效，而且 众多细胞实验证实吴茱萸碱的抗肿瘤活性，其抗瘤谱广，是一种有开发前景的天然抗癌新 药。本发明人经过大量的各配方比例的研究和实验以及临床实践，最后获得了本发明的最 佳药物比例组合物，是与多受体靶点比例相契合的创新性的组合物，并证明了其对癌症放、 化疗引起的呕吐等副作用有极好的疗效并能同时起到辅助抑制肿瘤的效果，由此完成了本 发明。
发明内容
本发明第一个目的在于提供一种天然药物组合物，该组合物低毒高效，疗效确切、 便于应用及推广，既可以抗肿瘤，又能对抗放、化疗后呕吐等副作用。本发明第二个目的在于提供上述天然药物组合物的制备方法。本发明第三个目的在于提供上述天然药物组合物在制备减少癌症放、化疗副作用 并对治疗癌症起增效减毒作用的药物中的用途。本发明提供的一种天然药物组合物，由干姜茱萸汤水煎浓缩提取物、姜辣素、吴茱 萸提取物与吴茱萸碱以重量计按1-4 3-7 2-9 2-3的比例组成。上述天然药物组合物，其中干姜茱萸汤水煎浓缩提取物、姜辣素、吴茱萸提取物与 吴茱萸碱的用量比例是4 7 9 3。其中，干姜茱萸汤水煎浓缩提取物、姜辣素、吴茱萸提取物可通过本领域技术人员 公知的常规方法进行提纯获得，姜辣素与吴茱萸碱可以商业购得，采用常规方法获得的这 些成分或采用商业购得的成分组成的本发明的天然药物均能获得相同的疗效。以下列出的 方法仅仅是发明人认为更优选的方法，并不意在对该天然药物组合物中各成分的提取方法 作出特别的限制。优选地，上述天然药物组合物中干姜茱萸汤水煎浓缩提取物的制备方法是按照配伍比例为1 1取干姜、吴茱萸，加入10倍量蒸馏水，浸泡lh，于加石棉网 的电炉上加热煎煮lh，绢布过滤，保存滤液，药渣再加6倍蒸馏水，同法浸泡、煎煮、过滤，将 两次滤液混合，加热浓缩至小体积，超滤膜过滤，采用真空干燥箱70°C减压干燥3 得黄色 粉末，即为干姜茱萸汤水煎浓缩提取物上述天然药物组合物中姜辣素的制备方法是将干姜切成薄片，自然干燥，用高速万能粉碎机打成粉末，过30目筛，再将过筛细 粉放入5000mL大磨口瓶中，以6倍量95%的乙醇常温下浸泡72h ；在40°C，40KHz的超声波 频率下超声提取15min，离心得到上清液，残渣弃去；将上清液再减压抽滤，滤液置于旋转 蒸发仪中真空浓缩得姜油状混合物，再将该混合物进行多次浓缩干燥纯化得到姜辣素。上述天然药物组合物中吴茱萸提取物制备方法是取吴茱萸的近干燥成熟果实，干燥，粉碎，过筛，加10倍量水回流2次，每次2小 时。合并两次滤液，用乙酸乙酯萃取，取有机相挥干乙酸乙酯，得吴茱萸提取物。上述天然药物组合物中吴茱萸碱制备方法是上述制得的吴茱萸提取物运用聚酰胺柱层析，以2种溶剂组成的混合溶媒洗脱， 结合薄层色谱，收取含吴茱萸碱洗脱液挥干溶剂，甲醇重结晶，得淡黄色固体，测熔点为 278°C，即为吴茱萸碱。本发明还提供了该天然药物组合物的优选的制备方法，包括(1)干姜茱萸汤水煎浓缩提取物的制备按照配伍比例为1 1取干姜、吴茱萸，加入10倍量蒸馏水，浸泡lh，于加石棉网 的电炉上加热煎煮lh，绢布过滤，保存滤液，药渣再加6倍蒸馏水，同法浸泡、煎煮、过滤，将 两次滤液混合，加热浓缩至小体积，超滤膜过滤，采用真空干燥箱70°C减压干燥3 得黄色 粉末，即为干姜茱萸汤水煎浓缩提取物。(2)姜辣素的制备
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将干姜切成薄片，自然干燥，用高速万能粉碎机打成粉末，过30目筛，再将过筛细 粉放入5000mL大磨口瓶中，以6倍量95%的乙醇常温下浸泡72h ；在40°C，40KHz的超声波 频率下超声提取15min ；离心得到上清液，残渣弃去；将上清液再减压抽滤，滤液置于旋转 蒸发仪中真空浓缩得姜油状混合物，再将该混合物进行多次浓缩干燥纯化得到姜辣素。(3)吴茱萸提取物制备取吴茱萸的近干燥成熟果实，干燥，粉碎，过筛，加10倍量水回流2次，每次2小 时。合并两次滤液，用乙酸乙酯萃取，取有机相挥干乙酸乙酯，得吴茱萸提取物。(4)吴茱萸碱制备上述制得的吴茱萸提取物运用聚酰胺柱层析，以2种溶剂组成的混合溶媒洗脱， 结合薄层色谱，收取含吴茱萸碱洗脱液挥干溶剂，甲醇重结晶，得淡黄色固体，测熔点为 278°C，即为吴茱萸碱。(5)按比例选取干姜茱萸汤水煎浓缩提取物、姜辣素、吴茱萸提取物与吴茱萸碱， 均勻混合，即得。上述天然药物组合物的制备方法，还包括将步骤( 制得的产品进一步通过常 规的制药手段制成含有天然药物组合物IOOmg或200mg规格的胶囊，或将按湿法制粒工艺 制成含天然药物组合物IOOmg或200mg规格的片剂。本发明还包括天然药物组合物在制备减少癌症放、化疗副作用并对治疗癌症起增 效作用的药物中的用途，以及在制备减少癌症放、化疗引起的呕吐反应并对治疗癌症起增 效作用的药物中的用途。本发明天然药物组合物的服用方法治疗癌症放、化疗后呕吐可用胶囊剂或片剂， 每人每天600mg，分三次饭后服用。本发明天然药物组合物在抗呕吐及抑制肿瘤方面的有益效果如下1、本发明天然药物组合物具有良好的抗呕吐作用，现已完成临床前在水貂呕吐模 型的药理学研究。采用我们首创的水貂呕吐模型，观察该天然药物组合物对顺钼导致水貂 呕吐模型在一定时期内的对抗作用。研究表明该天然药物组合物对于顺钼所致水貂的呕 吐反应有明显的对抗作用，其作用优于单独应用干姜茱萸汤水煎浓缩提取物、姜辣素、吴茱 萸提取物。同时，其降低致呕率方面，其作用与西药昂丹司琼媲美。2、本发明天然药物组合物具有抑制肿瘤的作用，现已完成临床前在小鼠肿瘤模型 上的药理学研究。采用了小鼠肿瘤模型，观察天然药物组合物对小鼠体内肿瘤的抑制作用。 研究表明该天然药物组合物对于小鼠体内肿瘤有明显的抑制作用。3、另外证明了本天然药物组合物能增强化疗药物对肿瘤的抑制作用，现已完成临 床前在小鼠肿瘤细胞模型上的药理学研究。采用了小鼠肿瘤模型，观察该天然药物组合物 与环磷酰胺联合对小鼠体内肿瘤的抑制作用。研究表明该天然药物组合物能明显增加环 磷酰胺对于肿瘤的抑制作用。4、同时完成了在小鼠的急性毒理研究，研究表明该天然药物组合物对进食及行 为活动等无影响，脏器及病理学观察也未见异常。说明该天然药物组合物毒性很小。5、本发明人独创地将干姜茱萸汤水煎浓缩提取物、姜辣素、吴茱萸提取物与吴茱 萸碱进行组合，并通过大量实验确定这些组分之间的用量配比，使该组合物发挥了很好的 协同作用，获得意外的效果。经过我们反复实验研究，令发明人惊讶的是本发明的天然药物组合物各组分之间的比例在1-4 3-7 2-9 2-3时产生了出乎意料的协同作用，增效明 显，对副作用起到非常好的效果，尤其在各组分的用量比例是4 :7:9: 3时尤其明显， 这是本发明人在之前发表的论文基础上通过继续努力付出大量创造性劳动而获得的，本领 域普通技术人员仅仅通过公开的内容无法简单获得这种配比范围以及最佳用量比例。6、该天然药物组合物干姜茱萸汤水煎浓缩提取物、姜辣素、吴茱萸提取物与吴茱 萸碱各组分均可通过常规手段获得，其中一些组分例如姜辣素还可通过商业购得，这样的 组合物本身具有获得方便、成本较低的效果。这也是发明人通过大量创造性劳动方获得的 兼具极佳疗效和较高工业实用性的产品。
具体实施例方式下面通过实施例和试验例进一步阐述本发明天然药物组合物的制备，以及其在抗 呕吐和抗肿瘤中应用的有益效果。实施方案(1)干姜茱萸汤水煎浓缩提取物的制备按照配伍比例为1 1取干姜、吴茱萸，加入10倍量蒸馏水，浸泡lh，于加石棉网 的电炉上加热煎煮lh，绢布过滤，保存滤液，药渣再加6倍蒸馏水，同法浸泡、煎煮、过滤，将 两次滤液混合，加热浓缩至小体积，超滤膜过滤，采用真空干燥箱70°C减压干燥3 得黄色 粉末，即为干姜茱萸汤水煎浓缩提取物。(2)姜辣素的制备将干姜切成薄片，自然干燥，用高速万能粉碎机打成粉末，过30目筛，再将过筛细 粉放入5000mL大磨口瓶中，以6倍量95%的乙醇常温下浸泡72h ；在40°C，40KHz的超声波 频率下超声提取15min ；离心得到上清液，残渣弃去；将上清液再减压抽滤，滤液置于旋转 蒸发仪中真空浓缩得姜油状混合物，再将该混合物进行多次浓缩干燥纯化得到姜辣素。(3)吴茱萸提取物制备取吴茱萸的近干燥成熟果实，干燥，粉碎，过筛，加10倍量水回流2次，每次2小 时。合并两次滤液，用乙酸乙酯萃取，取有机相挥干乙酸乙酯，得吴茱萸提取物。(4)吴茱萸碱制备上述制得的吴茱萸提取物运用聚酰胺柱层析，以2种溶剂组成的混合溶媒洗脱， 结合薄层色谱，收取含吴茱萸碱洗脱液挥干溶剂，甲醇重结晶，得淡黄色固体，测熔点为 278°C，即为吴茱萸碱。第二步制剂的制备(1)本发明天然药物组合物胶囊制剂的制备分别称取上述步骤制备的干姜茱萸汤水煎浓缩提取物16mg、姜辣素^mg、吴茱萸 提取物36mg与吴茱萸碱lang，同时称取淀粉40;3mg、硬脂酸镁5mg，均勻混合，填充胶囊，制 成每个纯重500mg的胶囊剂。(2)本发明天然药物组合物片剂的制备分别称取上述步骤制备的干姜茱萸汤水煎浓缩提取物16mg、姜辣素^mg、吴茱萸 提取物36mg与吴茱萸碱lang，同时称取淀粉30;3mg、乳糖lOOmg，均勻混合，用湿法制粒、干 燥，整粒后与5mg硬脂酸镁混合，压片，制成每片纯重500mg的片剂。
药效及药理学资料在下述试验例子中组合物为干姜茱萸汤水煎浓缩提取物、姜辣素、吴茱萸 提取物与吴茱萸碱的用量比例为4 7 9 3。发明人对上述各成分用量比例在 1-4 3-7 2-9 2-3之间时的多种配比组合获得的组合物进行了与上相同的实验，均发 现在这种用量范围内的天然药物组合物能获得很好的协同作用，对癌症放、化疗副作用能 起到很好的效果并对癌症的治疗有增效作用。并且，发明人发现干姜茱萸汤水煎浓缩提取 物、姜辣素、吴茱萸提取物与吴茱萸碱还可以是以常规手段获得的成分，而不仅仅是用上述 的方法获得的成分，由常规手段制得的或商业购得的上述四种成分组成的组合物具有与上 述方法制得的组合物相同的效果，其实验资料这里不再列举，本领域技术人员对此能够认 可。以下是优选的实施方式获得的药效及药理学资料试验例1 天然药物组合物治疗呕吐作用的药效学研究1、试验材料(1)吴茱萸，由青岛众生大药房购买并由山东中医药大学钱秋海教授鉴定为芸香 科植物吴茱萸的近干燥成熟果实。干姜，由青岛众生大药房购买并由山东中医药大学钱秋 海教授鉴定为姜科植物的栽培品种姜的干燥根茎。(2)顺钼(cisplatin)，山东齐鲁制药厂生产，批号903005CE，20mg/支。(3)盐酸昂丹司琼注射液，奥赛康制药，，批号090102，anl:^ig.(4)健康成年水貂，体重1. 3-1. mcg，雄性，由青岛特种养殖动物饲养中心提供，每 只动物单独置于75CmX50CmX50Cm的铁笼中，24h自然光照射，实验前自由进食饮水。2、试验方法将水貂随机分为7组，每组6只，A组为姜辣素组，B组为吴茱萸提取物组，C组为 姜辣素与吴茱萸提取物配伍组(比例为7 9)，D组为干姜茱萸汤水煎浓缩提取物，E组为 本发明的天然药物组合物(干姜茱萸汤水煎浓缩提取物、姜辣素、吴茱萸提取物与吴茱萸 碱按4 7 9 3比例混合)，F组为顺钼阳性对照组，G组为昂丹司琼组。A组先以姜 辣素10g. kg—1 (相当于含生药量)ig预处理，30min给予顺钼7. 5mg. kg^ip ；B组给予吴茱萸 提取物10g. kg—1 (相当于含生药量)ig预处理，30min给予顺钼7. 5mg. kg^ip ；C组给予姜辣 素与吴茱萸提取物配伍药物10g. kg"1 (相当于含生药量)ig预处理，30min给予顺钼7. 5mg. kg^ip ；D组给予干姜茱萸汤水煎浓缩提取物10g. kg_H相当于含生药量)ig预处理，30min 给予顺钼7. 5mg. kg_Hp ；E组给予本发明的天然药物组合物10g. kg—1 (相当于含生药量)ig 预处理，30min给予顺钼7. 5mg. kg—Hp ；F组给予生理盐水，30min给予顺钼7. 5mg. kg^ip ；G 组先以昂丹司琼组7. 5g. kg—1预处理，30min给予顺钼7. 5mg. kg_Hp。为观察水貂在给药后 6h内的呕吐反应，记录其呕吐潜伏期，干呕及呕吐次数。3、实验结果与对照组比较，各治疗组均能明显减轻干呕及呕吐次数并有效延长呕吐潜伏期(P < 0. 05,P < 0. 01)。姜辣素与吴茱萸提取物配伍组延长呕吐潜伏期优于与昂丹司琼组。姜 辣素组、姜辣素与吴茱萸提取物配伍组，干姜茱萸汤水煎浓缩提取物组，及本发明的天然药 物组合物能够有效降低致呕率。其中姜辣素与吴茱萸提取物配伍组，干姜茱萸汤水煎浓缩 提取物组与昂丹司琼组相同；而本发明的天然药物组合物组致呕率低于昂丹司琼组。结果 见表1.
表1 提取物配伍对顺钼(7. 5mg/kg, ip)致呕作用的影响( ± & η = 6)
权利要求
1.一种天然药物组合物，其特征在于该组合物由干姜茱萸汤水煎浓缩提取物、姜辣素、 吴茱萸提取物与吴茱萸碱以重量计按1-4 3-7 2-9 2-3的比例组成，其中干姜茱萸汤水煎浓缩提取物的制备方法是按照配伍比例为1 1取干姜、吴茱萸，加入10倍量蒸馏水，浸泡lh，于加石棉网的 电炉上加热煎煮lh，绢布过滤，保存滤液，药渣再加6倍蒸馏水，同法浸泡、煎煮、过滤，将两 次滤液混合，加热浓缩至小体积，超滤膜过滤，采用真空干燥箱70°C减压干燥36h得黄色粉 末，即为干姜茱萸汤水煎浓缩提取物。其中吴茱萸提取物的制备方法是取吴茱萸的近干燥成熟果实，干燥，粉碎，过筛，加10倍量水回流2次，每次2小时。合 并两次滤液，用乙酸乙酯萃取，取有机相挥干乙酸乙酯，得吴茱萸提取物。其中吴茱萸碱的制备方法是上述制得的吴茱萸提取物运用聚酰胺柱层析，以2种溶剂组成的混合溶媒洗脱，结合 薄层色谱，收取含吴茱萸碱洗脱液挥干溶剂，甲醇重结晶，得淡黄色固体，测熔点为278°C， 即为吴茱萸碱。
2.如权利要求1所述的天然药物组合物，其中干姜茱萸汤水煎浓缩提取物、姜辣素、吴 茱萸提取物与吴茱萸碱的用量比例是4 7 9 3。
3.如权利要求1所述的天然药物组合物，其中姜辣素的制备方法是将干姜切成薄片，自然干燥，用高速万能粉碎机打成粉末，过30目筛，再将过筛细粉放 入5000mL大磨口瓶中，以6倍量95%的乙醇常温下浸泡72h ；在40°C，40KHz的超声波频率 下超声提取15min，离心得到上清液，残渣弃去；将上清液再减压抽滤，滤液置于旋转蒸发 仪中真空浓缩得姜油状混合物，再将该混合物进行多次浓缩干燥纯化得到姜辣素。
4.如权利要求1或2的天然药物组合物的制备方法，其特征在于该方法包括(1)干姜茱萸汤水煎浓缩提取物的制备按照配伍比例为1 1取干姜、吴茱萸，加入10倍量蒸馏水，浸泡lh，于加石棉网的 电炉上加热煎煮lh，绢布过滤，保存滤液，药渣再加6倍蒸馏水，同法浸泡、煎煮、过滤，将两 次滤液混合，加热浓缩至小体积，超滤膜过滤，采用真空干燥箱70°C减压干燥36h得黄色粉 末，即为干姜茱萸汤水煎浓缩提取物。(2)姜辣素的制备将干姜切成薄片，自然干燥，用高速万能粉碎机打成粉末，过30目筛，再将过筛细粉放 入5000mL大磨口瓶中，以6倍量95%的乙醇常温下浸泡72h ；在40°C，40KHz的超声波频率 下超声提取15min，离心得到上清液，残渣弃去；将上清液再减压抽滤，滤液置于旋转蒸发 仪中真空浓缩得姜油状混合物，再将该混合物进行多次浓缩干燥纯化得到姜辣素。(3)吴茱萸提取物制备取吴茱萸的近干燥成熟果实，干燥，粉碎，过筛，加10倍量水回流2次，每次2小时。合 并两次滤液，用乙酸乙酯萃取，取有机相挥干乙酸乙酯，得吴茱萸提取物。(4)吴茱萸碱制备上述制得的吴茱萸提取物运用聚酰胺柱层析，以2种溶剂组成的混合溶媒洗脱，结合 薄层色谱，收取含吴茱萸碱洗脱液挥干溶剂，甲醇重结晶，得淡黄色固体，测熔点为278°C， 即为吴茱萸碱。(5)按比例选取干姜茱萸汤水煎浓缩提取物、姜辣素、吴茱萸提取物与吴茱萸碱均勻混 合，即得。
5.如权利要求书4所述的天然药物组合物的制备方法，还包括将步骤(5)制得的产 品进一步通过常规的制药手段制成含有天然药物组合物IOOmg或200mg规格的胶囊，或将 按湿法制粒工艺制成含天然药物组合物IOOmg或200mg规格的片剂。
6.如权利要求1-3任一项所述的天然药物组合物在制备减少癌症放、化疗副作用并对 治疗癌症起增效作用的药物中的用途。
7.如权利要求1-3任一项所述的天然药物组合物在制备减少癌症放、化疗引起的呕吐 反应并对治疗癌症起增效作用的药物中的用途。
全文摘要
本发明涉及一种天然药物组合物、其制备方法及其在制备癌症放、化疗中减毒增效药物中的用途，该天然药物组合物由干姜茱萸汤水煎浓缩提取物、姜辣素、吴茱萸提取物与吴茱萸碱按1-4∶3-7∶2-9∶2-3的比例组成，该组合物对由癌症放、化疗引起的呕吐等副作用有极好的疗效并能同时起到抑制肿瘤的作用。
文档编号A61P39/02GK102091314SQ20111004935
公开日2011年6月15日 申请日期2011年3月2日 优先权日2011年3月2日
发明者倪倍倍, 刘小红, 岳旺, 石振艳 申请人:青岛大学