专利名称：一种治疗糖尿病周围神经病变药物组合、制备方法及应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种药物，更具体的说涉及一种治疗糖尿病周围神经病变药物组合、 制备方法及应用。
背景技术：
糖尿病是一种高发病，糖尿病周围神经病变(DPN)是该病的常见并发症，发病率高，糖尿病周围神经病变可以侵及神经系统的各部位，包括中枢神经、颅神经、感觉神经、运动神经和植物神经。糖尿病性周围神经病变临床表现繁杂，分类方法较多，根据临床实际情况，将其分为左右对称的多发性神经病变和非对称性神经病变两大类。病理学证实DPN的发病与长期的搞血糖及由此导致的代谢障碍、微循环异常、神经营养因子缺乏、氧化应激自由基增多和自身免疫紊乱等多因素有关。中医认为DPN发病机制是由于消渴病伤阴耗气、肝肾亏虚、筋骨失养、气虚血瘀、 脉络痹阻，气血不能濡养四肢，阳气不能布达四末所致。中药治疗以养阴清热为主，佐以活血通络、涤痰、益气、行气为辅。近年来中医药在治疗DPN进行了大量的探索和研究，人们发现能黄芪能改善DPN患者的肢体麻木、疼痛甚至溃烂等症状，常用生地、玄参、桃花、红花、 紫草等养阴清热；当归、川芎、蜈蚣等活血通络黄芪、川芎、丹参、赤芍等益气活血；而葛根、甘草、龙胆草、黄芪、丹参、桂枝、黄芩甙、芍药、桂皮、苍术、水飞蓟、槐米等有抑制醛糖还原酶(AR)的作用；但目前还没有临床表现较好的治疗糖尿病周围神经病变药物组方的报道。
发明内容
为解决上述问题，本发明提供了一种治疗糖尿病周围神经病变药物组合，药物组合包括黄芪、桂枝、天花粉、生地、赤芍、丹参、牛膝、葛根、鸡血藤、水蛭、白芥子、延胡索、蜈蚣、枸杞。所述黄芪、桂枝、天花粉、生地、赤芍、丹参、牛膝、葛根、鸡血藤、水蛭、白芥子、延胡索、蜈蚣、枸杞的重量比为10 60:5 20:10 60:5 30:5 30:5 50:5 50:5 50:10 60:5 40:8 50:8 50:5 40:5 50。所述黄芪、桂枝、天花粉、生地、赤芍、丹参、牛膝、葛根、鸡血藤、水蛭、白芥子、延胡索、蜈蚣、枸杞的重量比为8:2:6:4:4:6:8:6:8:5:8:6:5:5。所述治疗糖尿病周围神经病变药物组合的制备方法包括以下步骤
1)将白芥子和桂枝水蒸汽蒸馏提取挥发油，加水量为本步骤药材重量3 12倍，提取时间为2 12小时，分别得到挥发油部分、药渣和水液；
2)将步骤1)中的药渣和水液与黄芪、天花粉、生地、赤芍、丹参、牛膝、葛根、枸杞、鸡血藤、延胡索混合，回流提取3 5次，加水量为本步骤药材重量的2 10倍，提取时间为每次0.5 2小时，得到提取液；
3)将步骤2)中的提取液过滤，过D101、D101B、D201、D301、H-20、H_50和H-60中任一种大孔树脂，用浓度为40% 95%的任一浓度的乙醇洗脱，合并乙醇洗脱液，温度50 70°C 减压浓缩至70°C条件下密度为1. 1 1. 4的浸膏I ；
4)将蜈蚣、水蛭回流提取2次，加水量为本步骤药材重量的5 10倍，提取时间为每次0. 5 2小时，合并提取液温度50 70°C减压浓缩至70°C条件下密度为1. 1 1. 4的浸膏II ；
5)将步骤3)中得到的浸膏I和步骤4)中得到的浸膏II50 70°C真空干燥并粉碎或喷雾干燥得到浸膏粉；
6)将步骤5)中得到的浸膏粉过50 80目筛，加入步骤1)中得到的挥发油部分，混勻，得到治疗糖尿病周围神经病变药物组合。所述的治疗糖尿病周围神经病变药物组合在治疗治疗糖尿病周围神经病变中的应用。本发明的有益技术效果是本发明所提供的治疗糖尿病周围神经病变药物组合用于糖尿病所致周围神经病变；具有通经活络，养阴清热，祛瘀逐痰止痛之功效；通过药理实验表明大剂量给药活性优于弥可保，是治疗糖尿病周围神经病变一种优选中药组合。
具体实施例方式实施例1治疗糖尿病周围神经病变药物组合的制备方法1
称取黄芪40g、桂枝10g、天花粉30 g、生地20g、赤芍20 g、丹参30 g、牛膝40 g、葛根 30g、鸡血藤40g、水蛭25g、白芥子40 g、延胡索30 g、蜈蚣25 g、枸杞25g ；将白芥子和桂枝水蒸汽蒸馏提取挥发油，加水量为药材重量7倍，提取时间为9小时，分别得到挥发油部分、 药渣和水液。将药渣和水液与黄芪、天花粉、生地、赤芍、丹参、牛膝、葛根、枸杞、鸡血藤、延胡索混合，回流提取3次，加水量为药材重量的8倍，提取时间为每次1小时，得到提取液。将提取液过滤，，过D101、D101B、D201、D301、H-20、H_50 和 H_60 中任一种大孔树脂，用浓度为40% 95%的任一浓度的乙醇洗脱，其中最佳洗脱乙醇浓度为60 80%，温度 50 70°C、真空度0. 01 0. 08Mpa减压浓缩至70°C条件下密度为1. 1 1. 4的浸膏I。将蜈蚣、水蛭回流提取2次，加水量为药材重量的5 10倍，提取时间为每次 0. 5 2小时，合并提取液温度50 70°C、真空度0. 01 0. 08Mpa减压浓缩至70°C条件下密度为1. 1 1. 4的浸膏II ；将浸膏II 50 70°C真空干燥并粉碎或喷雾干燥得到浸膏粉；
将浸膏粉过80目筛，加入挥发油部分，混勻，得到药物组合物I。实施例2治疗糖尿病周围神经病变药物组合的制备方法2
称取黄芪60g、桂枝5 g、天花粉10 g、生地5 g、赤芍5g、丹参5 g、牛膝5 g、葛根5g、 鸡血藤IOg 水蛭5g、白芥子8g、延胡索8 g、蜈蚣5g、枸杞5 g，制备方法和实施例1相同， 得到药物组合物II。实施例3治疗糖尿病周围神经病变药物组合的制备方法3
称取黄芪10g、桂枝20 g、天花粉60 g、生地30 g、赤芍30 g、丹参50 g、牛膝50 g、葛根50 g、鸡血藤60g 水蛭40g、白芥子50 g、延胡索50 g、蜈蚣40 g、枸杞50 g，制备方法
4和实施例1相同，得到药物组合物III。实施例4治疗糖尿病周围神经病变药物组合的制剂
将实施例1、2和3制备得到的治疗糖尿病周围神经病变药物组合，加入乳糖、糊精、淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉等药剂学上可接受的辅料，搅拌均勻，以10% 70%的乙醇为粘合剂湿法制粒或者干法制粒，装入胶囊，即得本发明药物的胶囊剂。将实施例1、2和3制备得到的治疗糖尿病周围神经病变药物组合，加入聚乙二醇 4000、聚乙二醇6000或者其混合物、泊乳沙姆、40-硬脂酸聚烃氧酯、明胶、硬脂酸、单硬脂酸甘油脂等药剂学上可接受的辅料，混勻，滴制，干燥，得到滴丸剂。将实施例1、2和3制备得到的治疗糖尿病周围神经病变药物组合，加入乳糖、糊精、淀粉、糖粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉等药剂学上可接受的辅料，混勻，以10% 70%的乙醇为粘合剂湿法制粒，低温干燥或者采用干法制粒，得到颗粒剂。将实施例1、2和3制备得到的治疗糖尿病周围神经病变药物组合，加入乳糖、糊精、淀粉、糖粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉、滑石粉、硬脂酸镁等药剂学上可接受的辅料，混勻，制粒，低温干燥或者采用干法制粒，压片，得到片剂。将实施例1、2和3制备得到的治疗糖尿病周围神经病变药物组合，加入乳糖、糊精、淀粉、糖粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉等药剂学上可接受的辅料，混勻，制软材，制丸，干燥，得到丸剂。将实施例1、2和3制备得到的治疗糖尿病周围神经病变药物组合，加入豆油、玉米油或者其他油类和其他适宜辅料，搅拌均勻，以明胶为主要囊皮材料，按药剂学常规制备方法，制成软胶囊剂。实施例5药物组合物I治疗糖尿病周围神经病变的药理活性考察对四氧嘧啶诱导的大鼠糖尿病模型为
SD大鼠60只(体重200士20g)，于自然光线、自由饮水、自由摄食条件下，适应性喂养 1周。用生理盐水将四氧嘧啶稀释成50 mg/mL的溶液，大鼠禁食12 h后，按200 mg / kg 的量分两次腹腔注射，每日一次，72 h后眶静脉取血，用葡萄糖氧化酶法测定血糖，凡血糖彡16. 7mmol / L纳入实验。将建模成功的大鼠48只按血糖值的大小随机分为模型组、本发明组合物大剂量组、小剂量组、弥可保(500yg /片)对照组，每组12只。另设10只鼠龄、体重相匹配的大鼠作为正常对照组。造模5天后给药。正常组及模型组生理盐水10 mL / kg灌胃，每日一次。大剂量组，药物组合物I IOg生药/ kg ；小剂量组，药物组合物I 5g生药/ kg ；弥可保组300 Ug / kg灌胃，每天一次。连续给药8周。观察指标及测试方法为
血糖实验开始、结束时各测一次眶静脉取血，用葡葡糖氧化酶法测定。糖化血红蛋白(HbAlc)微柱法，实验结束时大鼠股动脉取血2 mL, EDTA抗凝待检。坐骨神经组织cGMP、cAMP测定取样方法4%的戊巴比妥钠按25 mg / kg大鼠的剂量腹壁下注射，待完全麻醉后，分离出坐骨神经，剪下后快速放入干冰中保存。在冰浴环境下，将坐骨神经放入盛有2 mL冷的0. 05 mmoL醋酸缓冲液(pH4. 75)的勻浆器内，将组织粉碎后，悬浮液倒入10 mL试管内，用2 mL无水乙醇洗勻浆器，然后将乙醇倒入悬浮液中混勻，静止5 min，350g离心15 min，将上清液收集在小瓶内，用2 mL 75%乙醇洗勻浆器和沉淀2次，混勻，350g离心15 min,合并上清液，60°C水浴中吹干，残渣放于4°C保存。测量时用1 mL醋酸缓冲液溶解残渣，然后取0. 1 mL与乙酰化试剂5μ ，1251-(:ΑΜΡ或1251-cGMP IOOyL，抗血清100 μ L混勻，4°C存放过夜后，再向其中加入正常兔血清100 μ L，羊抗兔血清100 μ L，混勻，4°C存放过夜。300g离心15 min，负压吸去上清液，测量沉淀γ-放射性强度。红细胞Na-K-ATP酶测定取肝素抗凝全血1 mL，加4倍量生理盐水，轻轻混勻， 1000 1500转/分，离心机离心5-10 min,弃上清液，按此方法反复洗涤3次，留沉淀的红细胞。在上述沉淀的红细胞中加双蒸水1.5 mL，将试管放在漩涡混勻器上混勻30 min，放置30 min使其充分溶解，最后每试管取样200 L按试剂盒说明分步操作，规定每小时IO7个红细胞的ATP酶分解ATP产生1 μ mol无机磷的量为一个ATP酶活力单位，即微克分子磷/ IO7RBC / hour (μ mo Ipi / IO7 个 RBC / h)。血液流变学指标测定将大鼠腹腔注射20%乌拉坦5 mL / kg麻醉后，颈动脉插管取血，接入到用肝素抗凝的血液流变管中，测定全血表观粘度、血浆粘度、纤维蛋白原。所有数据结果以叉士 s 表示，用SPSS10. 0处理，各组间样本采用方差分析。实验结果为
给药后糖化血红蛋白、体重的变化情况见表1。表1给药后各组大鼠糖化血红蛋白、体重的变化(I 士 S)
与正常组比较* P<0. 05，**P<0. 01，***P<0. 001 ； 与模型组比较Δ Ρ<0. 05，ΔΔ Ρ<0. 01, ΔΔΔ Ρ<0. 001 ； 与弥可保组比较:#Ρ<0. 05，##Ρ<0. 01 ； 与小剂量组比较 Ρ<0. 05, Ρ<0. 01。下表同。
结果表明，模型组及治疗各组糖化血红蛋白明显高于正常组P<0. 01 ；本发明组合物组显示出一定的降低糖化血红蛋白作用，大剂量组的效果明显，与模型组比较有显著性差异Ρ<0. 05，与弥可保组比较亦有显著性差异Ρ<0. 05。成模大鼠体重较正常组均明显减轻，尤以模型组减轻最为明显Ρ<0. 01 ；治疗各组似有增加体重的作用，但小剂量组及弥可保组与模型组比较无明显差异Ρ>0. 05。大剂量组有一定的增加体重作用，与模型组比较
6P<0. 01，与小剂量组比较P<0. 05。大鼠坐骨神经cGMP、cAMP的变化见表2。表2给药后各组大鼠坐骨神经cGMP、cAMP比较(X 士 S)
权利要求
1.一种治疗糖尿病周围神经病变药物组合，其特征在于药物组合包括黄芪、桂枝、天花粉、生地、赤芍、丹参、牛膝、葛根、鸡血藤、水蛭、白芥子、延胡索、蜈蚣、枸杞。
2.根据权利要求1所述的治疗糖尿病周围神经病变药物组合，其特征在于所述黄芪、 桂枝、天花粉、生地、赤芍、丹参、牛膝、葛根、鸡血藤、水蛭、白芥子、延胡索、蜈蚣、枸杞的重量比为 10 60 5 20 10 60 5 30 5 30 5 50 5 50 5 50 10 60 5 40:8 50:8 50:5 40:5 50。
3.根据权利要求2所述的治疗糖尿病周围神经病变药物组合，其特征在于所述黄芪、 桂枝、天花粉、生地、赤芍、丹参、牛膝、葛根、鸡血藤、水蛭、白芥子、延胡索、蜈蚣、枸杞的重量比为 8:2:6:4:4:6:8:6:8:5:8:6:5:5。
4.根据权利要求1、2或3之一所述治疗糖尿病周围神经病变药物组合的制备方法，其特征在于包括以下步骤1)将白芥子和桂枝水蒸汽蒸馏提取挥发油，加水量为本步骤药材重量3 12倍，提取时间为2 12小时，分别得到挥发油部分、药渣和水液；2)将步骤1)中的药渣和水液与黄芪、天花粉、生地、赤芍、丹参、牛膝、葛根、枸杞、鸡血藤、延胡索混合，回流提取3 5次，加水量为本步骤药材重量的2 10倍，提取时间为每次0.5 2小时，得到提取液；3)将步骤2)中的提取液过滤，过D101、D101B、D201、D301、H-20、H_50和H-60中任一种大孔树脂，用浓度为40% 95%的任一浓度的乙醇洗脱，合并乙醇洗脱液，温度50 70°C 减压浓缩至70°C条件下密度为1. 1 1. 4的浸膏I ；4)将蜈蚣、水蛭回流提取2次，加水量为本步骤药材重量的5 10倍，提取时间为每次0. 5 2小时，合并提取液温度50 70°C减压浓缩至70°C条件下密度为1. 1 1. 4的浸膏II ；5)将步骤3)中得到的浸膏I和步骤4)中得到的浸膏II50 70°C真空干燥并粉碎或喷雾干燥得到浸膏粉；6)将步骤5)中得到的浸膏粉过50 80目筛，加入步骤1)中得到的挥发油部分，混勻，得到治疗糖尿病周围神经病变药物组合。
5.根据权利要求4所述的治疗糖尿病周围神经病变药物组合的制备方法，其特征在于步骤6)所述的治疗糖尿病周围神经病变药物组合通过添加辅料制备成胶囊剂、滴丸剂、颗粒剂、片剂、丸剂、软胶囊剂中的一种。
6.权利要求1-5之一所述的治疗糖尿病周围神经病变药物组合在治疗治疗糖尿病周围神经病变中的应用。
全文摘要
本发明公开了一种治疗糖尿病周围神经病变药物组合，其药物组合包括黄芪、桂枝、天花粉、生地、赤芍、丹参、牛膝、葛根、鸡血藤、水蛭、白芥子、延胡索、蜈蚣、枸杞；具有通经活络，养阴清热，祛瘀逐痰止痛之功效；通过药理实验表明大剂量给药活性优于弥可保，是治疗糖尿病周围神经病变一种优选中药组合。
文档编号A61K36/815GK102178786SQ20111011341
公开日2011年9月14日 申请日期2011年5月4日 优先权日2011年5月4日
发明者秦剑, 陈刚莲, 陈用芳 申请人:重庆康刻尔制药有限公司