专利名称：一种中药丹参的醋炙炮制方法
技术领域：
本发明涉及中药炮制技术领域，尤其涉及一种中药丹參的醋炙炮制方法。
背景技术：
丹參(Salviamiltiorrhiza Bunge)为唇形科(Lamiaceae)鼠尾草属(Salvia)多年生草本植物，以其根及根茎入药，因其色红且形状似參而得名“丹參”，又称赤參、木羊乳(《吴普本草》)、紫丹參(《现代实用中药》)、红根(《中国药植志》)等。始载于《神农本草经》，列为上品，为历版《中华人民共和国药典》收载中药丹參的唯一来源。其性微寒、味苦、无毒，归心、肝ニ经，有活血通经、祛瘀止痛、清心安神之功效。用于治疗月经不调，经闭痛经，瘾瘕积聚，胸腹刺痛，热痹疼痛，疮疡肿痛，心烦不眠；肝脾肿大，心绞痛。丹參的炮制始载于梁代《本草经集注》，历代应用的炮制方法包括净选、切制和炮·炙。净选包括“去芦头”、“去苗”和“洗浄”。切制有“捣”、“锉”、“切厚片”等。炮炙方法主要有酒制和妙法，尚有焙、醋炒、盐水炒、猪心血炒、炒炭、米炒等。梁代记载有酒溃法，唐代増加了熬法，宋代增加了炙法、妙法和焙法，并有“炒令黑黄”等炒制程度记载。金元时期增加了酒妙法，明代丹參的炮炙方法比较丰富，又増加了酒洗、酒浸、醋拌炒、盐水妙法。清代除沿用前世的酒炒和酒浸法外，又増加了酒蒸和猪心血拌炒法。现代丹參的炮制主要是结合丹參的主要临床应用如祛瘀止痛，活血通经，基本继承了古代炮制方法，其炮制方法主要有切片生用和酒炙法。《中国药典》2010年版和《全国中药炮制规范》1988年版均收有生丹參和酒丹參两种炮制品。此外，在我国ー些地方的炮制规范中尚收有炒、炒炭、米炒、麸炒、鳖血炙、醋炙及猪血制等炮制方法。但无论是药典还是地方规范均未制订炮制エ艺的具体量化參数，使炮制后成品质量难以控制，影响临床用药安全。因此，规范饮片的炮制方法，量化丹參炮制エ艺參数，建立合理的饮片质量考察指标，成为中药现代化过程中ー项重要的任务。
发明内容
根据以上提出的问题，本发明所要解决的技术问题是提供ー种中药炮制エ艺具体量化參数，具体的说是ー种中药丹參的醋炙炮制方法，本发明技术方案如下将丹參生品中加入辅料陈醋，置于密闭容器中，闷润60min，然后置锅内炒制，炒制温度70-80°C，炒制时间为20min，将饮片炒到黄色，略具醋香，取出，晾干即得醋炙丹參饮片。每IOOg丹參生品加入陈醋20g，置于密闭容器中，闷润60min，然后置锅内炒制，炒制温度70_80°C，炒制时间为20mino中药丹參中含丹參的化学成分主要分为两类，脂溶性的ニ萜类化合物和水溶性酚酸类成分，其它有留醇、糖和黄酮等。水溶性成分丹酚酸B与脂溶性成分丹參酮IIA为《中华人民共和国药典》2010年版规定的中药丹參生品含量的检查项目。同时，药理研究证明，水溶性成分原儿茶醛、丹酚酸A具有明显的抗氧化效果，脂溶性成分隐丹參酮、丹參酮I具有明显的抗菌消炎作用。丹參炮制后丹酚酸B和丹酚酸A均増加，其余各成分均有不同程度的降低，这一点与丹参在汤剂中使用、产生疗效的物质基础化学成分应该是水溶性成分研究相一致，符合我国传统煎煮法原理；充分说明了中药丹参炮制的意义。
图I :标准品指纹图谱图2 :丹参生品水溶性成分指纹图谱；图3 :本发明醋炙丹参水溶性成分指纹图谱；图4 :丹参生品脂溶性成分指纹图谱； 图5 :本发明醋炙丹参脂溶性成分指纹图谱。注图I :⑷水溶性标准品色谱图I-原儿茶醛2-丹酚酸B 3-丹酚酸A ；⑶脂溶性标准品色谱图I-丹参酮I 2-隐丹参酮3-丹参酮II A。
具体实施例方式以下结合具体实施例，对本发明进行详细说明。本申请文件中涉及的含量除另有说明外，均为微克每克。实施例I于2009年I月采集四川中江产丹参的六个品系按照表I所示，用以进行丹参饮片炮制工艺的优选。取采集的六个丹参品系，净选，抢水冲洗，在常温下软化后切成2-4mm厚片，置于80°C的烘箱中干燥20min，晾干，制得丹参生品备用；表I供试材料来源及采收时间Table I The sources of S. miltiorrhiza
编号种名Γ~^1生长期采收时间~
~ 丹参S. miltiorrhiza 组培大叶2009. I四川中江
~2丹参S. miltiorrhiza 组培小叶2009. I四川中江
3丹参S. miltiorrhiza 矮杆大叶2009. I四川中江
4丹参S. miltiorrhiza 高杆大叶I年2009.1四川中江
5丹参S. miltiorrhiza 小叶丹参2009. I四川中江
6丹参S. miltiorrhiza 白叶丹参2009. I四川中江将丹参生品中加入辅料陈醋，陈醋与丹参生品的质量比为10 100，置于密闭容器中，闷润至陈醋被丹参充分吸收，饮片具醋香为止，置锅内，温度70-80°C，时间为20min，将饮片炒到黄色，略具醋香，取出，放冷即得六种不同品系醋炙丹参饮片。以水溶性成分及脂溶性成分六种成分为指标，对上述得到的六种不同品系的丹参进行优选，优选出含量最高的川产中江丹参。
对优选出的丹参采用正交试验法进行炮制优选，丹参饮片生品中加入辅料陈醋，陈醋与丹参生品的质量比为10 100-40 100，置于密闭容器中，闷润至陈醋被丹参充分吸收，闷润时间30-90min，饮片具醋香为止，置锅内，温度70_110°C，时间为5_20min，将饮片炒到黄色，略具醋香，取出，放冷即得醋炙丹参饮片。应用高效液相色谱技术，对所得的炮制品进行含量检测分析。通过此种方法得到的丹参醋炙品，量化了丹醋炙丹参饮片加工炮制各个环节的工艺参数，获得了制备酒炙丹参饮片的最佳炮制工艺每IOOg药材加陈醋20g，闷润60min，70-80°c炒制20min。实施例22. I正交试验设计选取丹参的水溶性成分——原儿茶醛，丹酚酸A，丹酚酸B及脂溶性成分——隐丹 参酮，丹参酮I，丹参酮IIA为考察指标，选用L9 (34)正交试验设计方案，以辅料用量，闷润时间，炒制温度及炒制时间4个因素，每个因素设计三个水平进行正交试验，以优选出最佳炮制工艺。结果见表2。表2醋丹参工艺因素水平表Table 2 Design for factors and levels in frying with vinegar process
_
水平ABCD
醋用量(g'lOOg·1) 闷润时间(min) 炒制温度(°C) 炒制时间(min)~I103040-505
~206070-8010
~4090100-110202. 2样品含量测定2. 2. I色谱条件脂溶性成分色谱条件AgilentXDB-C18(250 X 4. 60mm i. d.，5 μ m);检测波长254nm ;流动相A(0. I %磷酸水)-B(甲醇)；梯度洗脱程序为0-75min,60-68 % B ；75-80min, 68-70% B ；80-110min, 70% B ;流速:0. 8mL · mirT1 ;柱温 30°C ;进样量 10 μ L。水溶性成分色谱条件AgilentXDB-C18(250 X 4. 60mm i. d.，5 μ m);检测波长288nm;流动相:A(0. 03 %磷酸水)-B (乙腈)；梯度洗脱程序为0-20min, 8-23 % B ；20-35min, 23-28. 5% B ;35_40min, 28. 5% B ;40_45min，28. 5-8% B ;流速:1. OmL .mirT1 ;柱温25°C ;进样量10 μ L。2. 2. 2对照品溶液的制备脂溶性对照品分别准确称取丹参酮I、隐丹参酮和丹参酮II A对照品适量，纯甲醇分别定容至25. OOmL的棕色容量瓶中，得到脂溶性对照品母液。精密吸取0. 50mL隐丹参酮，2. OOmL丹参酮I和2. OOmL丹参酮II A对照品母液，置于25. OOmL棕色量瓶中，加甲醇至刻度、摇匀，得到丹参酮I、隐丹参酮和丹参酮II A浓度分别为11. 5mg · Ι^，8. 32mg · Γ1和16. 9mg · Γ1的混合标准品，4°C冰箱保存，备用。水溶性对照品制备分别准确称取原儿茶醛、丹酚酸A和丹酚酸B适量，纯甲醇分别定容至至25. OOmL的棕色容量瓶中，得到水溶性对照品母液。精密吸取I. OOmL原儿茶醛，8. OOmL丹酚酸A和5. OOmL丹参酮B对照品母液，置于25. OOmL棕色量瓶中，加甲醇至刻度、摇勻，得到原儿茶醒、丹酹酸A和丹酹酸B浓度分别为8. 16mg *L_1, 26. 5mg *L_1和123mg *L_1的混合标准品，4°C冰箱保存备用。2. 2. 3供试品溶液的制备脂溶性供试液制备取供试品粉末O. 2g，精密称定，置于50. OOmL具塞锥形瓶中，精密加入80 %乙醇25. OOmL,密塞，称定重量，超声处理30min，冷却，80 %乙醇补重，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
水溶性供试液的制备取供试品粉末O. 5g，精密称定，置索氏提取器中，纯水提取4h，旋转蒸发仪浓缩定容至25. OOmL，摇匀，过滤，取续滤液，即得。2. 2. 4方法学考察线性关系考察精密吸取脂溶性对照品溶液和水溶性对照品溶液各I μ L、2 μ L、5 μ L、10 μ L、20 μ L、40 μ L，于上述色谱条件分别测定，以对峰面积⑴为横坐标，对照品质量⑴为纵坐标进行线性回归，得回归方程，结果见表3，色谱图见图I。稳定性考察取同一供试品溶液,在上述色谱条件下于0h、2h、4h、6h、8h、12h和24h进样,测定
峰面积，计算原儿茶醒、丹酹酸A、丹酹酸B、丹参酮I、隐丹参酮和丹参酮II A含量及RSD值，结果见表4，5。表3回归方程及线性范围Table 3 Calibration curve data and and linearity range for sixcomponents by HPLCanalysis
指标成分回归方程I线性范围(Hg)
原儿茶醒Y = 2. 34E-007X+3. 20E-004I. 000 8. 16-326
丹酚酸 BY = 7. 92E-007X+5. 28E-003I. 000 124-4943
丹酚酸 AY = 3. 11E-007X-1. 62E-003I. 000 26. 5-1060
隐丹参酮Y = 2. 87E-007X-6. 30E-004I. 000 8. 32-166
丹参酮 IY = 9. 65E-008X+4. 00E-004I. 000 11. 5-230
丹参酮 IIAY=L 94E-007X-1. 33E-003I. 000 17. 0-339
精密度考察取同一供试品溶液，在上述色谱条件下连续进样6次，测定峰面积和保留时间，计算原儿茶醛、丹酚酸A、丹酚酸B、丹参酮I、隐丹参酮和丹参酮II A含量及RSD值，结果见表4，5。重复性考察取同一批样品6份，精密称定，按照供试品溶液的制备方法分别制备，在上述色谱条件下分别测定，计算原儿茶醛、丹酚酸A、丹酚酸B、丹参酮I、隐丹参酮和丹参酮II A的含量及RSD值，结果见表4，表5。加样回收率考察精确称取已知指标成分含量的样品粉末6份，分别加入混合对照适量，依法测定， 计算回收率及RSD值，结果见表4、表5。表4水溶性成分方法学考察(η = 6)Table 4 Validation data for phenolic acids by HPLC quantitativeanalysis
权利要求
1.一种中药丹參的醋炙炮制方法，其特征在于将丹參生品中加入辅料陈醋，置于密闭容器中，闷润60min，然后置锅内炒制，炒制温度70-80°C，炒制时间为20min，将饮片炒到黄色，略具醋香，取出，晾干即得醋炙丹參饮片。
2.按照权利要求I所述的醋炙炮制方法，其特征在于每IOOg丹參生品加入陈醋20g，置于密闭容器中，闷润60min，然后置锅内炒制，炒制温度70-80°C，炒制时间为20min。
全文摘要
一种中药炮制工艺具体量化参数，具体的说是一种中药丹参的醋炙炮制方法，本发明技术方案如下将丹参生品中加入辅料陈醋，置于密闭容器中，闷润60min，然后置锅内炒制，炒制温度70-80℃，炒制时间为20min，将饮片炒到黄色，略具醋香，取出，晾干即得醋炙丹参饮片。每100g丹参生品加入陈醋20g，置于密闭容器中，闷润60min，然后置锅内炒制，炒制温度70-80℃，炒制时间为20min。采用本发明方法炮制所得的醋炙丹参饮片有效成分损失小，能有效满足临床对中药丹参饮片的需求，提高药效及临床疗效。
文档编号A61P17/02GK102836210SQ201110168718
公开日2012年12月26日 申请日期2011年6月22日 优先权日2011年6月22日
发明者张利, 张慧, 王涛, 欧平, 杨在君, 李强 申请人:四川农业大学