专利名称：一种鱼腥草注射液的制备方法及质量控制方法
技术领域：
本发明涉及一种注射液的制备方法及质量控制方法，特别是涉及一种含β-环糊精衍生物的鱼腥草注射液的制备方法及质量控制方法，属于医药技术领域，本申请是第 200410037630. 2号专利的分案申请。
背景技术：
鱼腥草注射液现行工艺制法是取鲜鱼腥草全草进行水蒸汽蒸馏，收集初蒸馏液， 再进行重蒸馏，收集重蒸馏液，加入氯化钠及吐温-80，混勻，加注射用水至配制量，滤过，灌封，灭菌而得。它具有抗菌、抗病毒、抗炎等功效，能提高机体免疫功能，属国家医保甲类药品。鱼腥草注射液中含有鱼腥草挥发油，挥发油在水中溶解度极小，必须加助溶剂或增溶剂才能制成澄明溶液。现行工艺是在重蒸馏液中加入表面活性剂吐温-80增溶，质量标准中规定加吐温-80的用量为0. 5%。而吐温-80是非离子型表面活性剂，有溶血作用， 且有一定毒性，若一次输入鱼腥草注射液100ml，则输入的吐温-80量为0. 5g，对人体不够安全，尤其是输注速度较快时，对人体的不良反应更大。且鱼腥草中挥发油含量随种质，产地，生长期，采收季节等因素变化，差异很大。通常全草中含挥发油0. 0049%左右，有的全草中含0. 025%。有人对不同居群，不同时期采收的鱼腥草全草中有效成份甲基正壬酮含量测定，最高达153. 4 μ g/g，最低为7. 68 μ g/g，相差近20倍[英卫，中国中药杂志200328 (87 718)]。现行工艺中加吐温-80制备鱼腥草注射液，鱼腥草原料中挥发油含量高时，重蒸馏液中挥发油也多，而吐温-80的增溶作用有限，因此难以配制成澄明药液，不得不加入活性炭或滑石粉，滤除部分挥发油，使之澄明，这样有效成份不能得到充分利用，浪费了鱼腥草资源，同时也配制不成含高挥发油含量的鱼腥草注射液。
发明内容
本发明的目的是提供一种鱼腥草注射液的制备方法；本发明的第二个目的是提供一种含环糊精衍生物的，无吐温-80，无溶血作用，稳定性好的鱼腥草注射液的制备方法；本发明的第三个目的是提供一种鱼腥草注射液的质量控制方法；本发明的另一个目的是提供一种有效成分含量确切的鱼腥草注射液的质量控制方法。本发明的目的是通过以下技术方案来实现的将新鲜鱼腥草全草净选，洗净，投入蒸馏锅中，水蒸汽蒸馏，收集初蒸馏液至大部分有效成份蒸出，初蒸馏液重蒸馏，收集至重蒸馏液中有效成份含量在规定范围内；取重蒸馏液加β-环糊精衍生物0.5% 10% (w/v)，加渗透压调节剂氯化钠或葡萄糖成等渗，调 PH值至4. 0 6. 0，滤过，灌封，灭菌即得。鱼腥草注射液中含β-环糊精衍生物的用量为0.5% 10% W/V。β-环糊精衍生物是指各种取代的β -环糊精，包括羟甲基-β -环糊精，羟乙基-β -环糊精，羟丙基-β -环糊精。鱼腥草注射液主要有效成份为甲基正壬酮和癸酰乙醛，每毫升重蒸馏液中含甲基正壬酮的含量为1 μ g 20 μ g。本发明注射液的质量控制方法如下鉴别(1)取本发明注射液5ml，置分液漏斗中，加稀盐酸lml，用氯仿振摇提取 2 3次，每次5ml，分取氯仿液，挥干，残渣加氢氧化钠试液3ml使溶解，加二硝基苯胼试液 lml，振摇，即生成橙红色沉淀；(2)取本发明注射液anl，加品红亚硫酸试液3 5滴，放置片刻，即显粉红色或红紫色；含量测定照气相色谱法(中国药典2000年版一部附录VID)测定；色谱条件与系统适用性试验0V-17毛细管柱，柱温120°C ；理论板数按甲基正壬酮峰计算应不低于8000 ；校正因子测定取正十五烷适量，精密称定，加无水乙醇制成每Iml含0. 3mg的溶液；作为内标溶液，另取甲基正壬酮对照品5mg，精密称定，置IOOml量瓶中，加无水乙醇溶液并稀释至刻度；精密量取1ml，置具塞试管中，精密加入内标溶液50ul，摇勻，吸取 2ul，注入气相色谱仪，计算校正因子；供试品溶液的制备与测定精密量取本发明注射液25ml，通过C8小柱 (IOOmg lml)ft，用醋酸乙酯-乙醇(70 30)混合液洗脱；收集洗脱液约Iml置具塞试管中，精密加入内标溶液50ul，摇勻，作为供试品溶液，吸取2ul，注入气相色谱仪，测定，即得；本发明注射液每Iml含甲基正壬酮(C11H22O)不得少于1. Ougo本发明中，初蒸馏液的收集量依据初蒸馏液中有效成分含量而定，至基本上无有效成分蒸出为止，而不是现有技术的收集初蒸馏液至1 1[鲜鱼腥草(g)初蒸馏液 (ml)]，使鱼腥草中的挥发油能充分利用。本发明中重蒸馏液的收集量依据重蒸馏液中有效成分含量而定，可规定范围。目前认为鱼腥草中主要的有效成分是甲基正壬酮和癸酰乙醛，都可用化学方法测定含量。现行鱼腥草注射液质量标准中规定每毫升含甲基正壬酮 (C11H22O)不得少于1. Oug，未规定上限。本发明的鱼腥草注射液有效成分甲基正壬酮含量为 1 20ug/ml，实际生产中根据临床需要及给药途径，确定含量范围。本发明的制备方法中采用羟丙基环糊精做鱼腥草注射液增溶剂，它极易溶于水，且无毒，无溶血和无刺激性。有人给病人静脉注射羟丙基环糊精1.5g/Kg无影响，另一试验中注射羟丙基- β -环糊精的剂量为一日470mg/Kg，浓度5 %，4天总剂量达到 30g，也无不良影响(谢伯泰，国外医学合成药制剂分册2002 23(5) :302)。羟丙基-β-环糊精的增溶机理是利用它的中空筒状结构，中心有一空腔，药物分子可以进入空腔，形成包合物，而达到增溶目的。鱼腥草蒸馏液中加入羟丙基-β -环糊精，鱼腥草中挥发油可以进入羟丙基-β-环糊精的空腔生成包合物分散在药液中而制得澄明液体。因此本发明能充分利用不同产地，不同季节，不同种质鱼腥草中的挥发油，制成高含量有效成份的鱼腥草注射液，大幅度降低生产成本。且首次实现制备无吐温-80的鱼腥草注射液，所制得的注射液无溶血，无毒性，解决了现有技术中鱼腥草注射液因加入表面活性剂如吐温-80而产生的溶血作用和不能制成含高浓度挥发油注射液以及不能充分利用鱼腥草中挥发油等问题，质量稳定，澄明度好，配制简便；提高了药物疗效，降低了不良反应；可以肌注或加入葡萄糖或氯化钠注射液中静滴，也可直接静滴；注射剂剂量更准确，使用更安全、更方便，更稳定，
5并使其大量用药成为可能。下面实验例用于进一步说明本发明。实验例1 羟丙基环糊精用作鱼腥草注射液增溶剂用量筛选及对澄明度影响工艺研究取鲜鱼腥草全草，洗净，置蒸馏锅中，加适量水，进行水蒸汽蒸馏，收集初蒸馏液至全草重量的1倍(g/ml)，再重蒸馏，收集重蒸馏液至全草重量的1/2，重蒸馏液中加0. 7 %的氯化钠，搅拌溶解，加注射用水至配制量，备用。取上述鱼腥草重蒸馏液各400ml，按下表加不同用量的羟丙基-β-环糊精和吐温-80，混勻，置集热式恒温磁力搅拌器中，恒温于70°C，搅拌1小时。冷却至室温，用 0. 65 μ m滤膜抽滤，取滤液按照《中国药典》2000年版二部附录IX B澄清度检查法进行澄清度检查。结果见下表1和表2。表1两种不同增溶剂增溶鱼腥草注射液灯检澄清度比较
权利要求
1.一种鱼腥草注射液的制备方法，其特征在于该制备方法为将新鲜鱼腥草全草投入蒸馏锅中，加适量水，水蒸汽蒸馏，至蒸馏液取2ml加品红亚硫酸试液3 5滴不显红色，收集初蒸馏液，将初蒸馏液重蒸馏，至收取的重蒸馏液中甲基正壬酮含量达1 20 μ g/ml，加入0. 5% 10% W/V的β -环糊精衍生物及渗透压调节剂氯化钠或葡萄糖至等渗，调PH值到4. 0 6. 0，滤过，灌封，灭菌而制成注射液。
2.如权利要求1所述的一种鱼腥草注射液的制备方法，其特征在于该制备方法为 将新鲜鱼腥草全草投入蒸馏锅中，加适量水，水蒸汽蒸馏，至收取的蒸馏液2ml加品红亚硫酸试液3 5滴不显红色，收集初蒸馏液，将初蒸馏液重蒸馏，至收取的重蒸馏液甲基正壬酮含量4 6ug/ml，加入0. 5% W/V的β -环糊精衍生物及渗透压调节剂氯化钠至等渗，调PH值至4. 5 5. 5，滤过，灌封，灭菌而制成注射液。
3.如权利要求1所述的一种鱼腥草注射液的制备方法，其特征在于该制备方法为 将新鲜鱼腥草全草投入蒸馏锅中，加适量水，水蒸汽蒸馏，至收取的蒸馏液2ml加品红亚硫酸试液3 5滴不显红色，收集初蒸馏液，将初蒸馏液重蒸馏，至收取的重蒸馏液甲基正壬酮含量4 6ug/ml，加入0. 75% W/V的β -环糊精衍生物及渗透压调节剂氯化钠至等渗，调PH值至5. 0 6. 0，滤过，灌封，灭菌而制成注射液。
4.如权利要求1所述的一种鱼腥草注射液的制备方法，其特征在于该制备方法为 将新鲜鱼腥草全草投入蒸馏锅中，加适量水，水蒸汽蒸馏，至收取的蒸馏液2ml加品红亚硫酸试液3 5滴不显红色，收集初蒸馏液，将初蒸馏液重蒸馏，至收取的重蒸馏液甲基正壬酮含量4 6ug/ml，加入1. 0% W/V的β -环糊精衍生物及渗透压调节剂葡萄糖至等渗，调PH值至4. 0 5. 0，滤过，灌封，灭菌而制成注射液。
5.如权利要求1所述的一种鱼腥草注射液的制备方法，其特征在于该制备方法为 将新鲜鱼腥草全草投入蒸馏锅中，加适量水，水蒸汽蒸馏，至收取的蒸馏液2ml加品红亚硫酸试液3 5滴不显红色，收集初蒸馏液，将初蒸馏液重蒸馏，至收取的重蒸馏液甲基正壬酮含量4 6ug/ml，加入5% W/V的β -环糊精衍生物及渗透压调节剂葡萄糖至等渗， 调PH值至4. 0 5. 5，滤过，灌封，灭菌而制成注射液。
6.如权利要求1、2、3、4、5所述的一种鱼腥草注射液的制备方法，其特征在于β-环糊精衍生物包括羟甲基- β -环糊精、羟乙基- β -环糊精、羟丙基- β -环糊精。
7.—种鱼腥草注射液的质量控制方法，其特征在于该质量控制方法中鉴别方法包括下列方法中的一种或两种Α.取注射液5ml，置分液漏斗中，加稀盐酸1ml，用氯仿振摇提取2 3次，每次5ml，分取氯仿液，挥干，残渣加氢氧化钠试液3ml使溶解，加二硝基苯胼试液1ml，振摇，即生成橙红色沉淀；B.取注射液anl，加品红亚硫酸试液3 5滴，放置片刻，即显粉红色或红紫色。
8.如权利要求7所述的一种鱼腥草注射液的质量控制方法，其特征在于该质量控制方法中含量测定方法为用照气相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验0V-17毛细管柱，柱温120°C ；理论板数按甲基正壬酮峰计算应不低于8000 ；校正因子测定取正十五烷适量，精密称定，加无水乙醇制成每Iml含0. 3mg的溶液；作为内标溶液，另取甲基正壬酮对照品5mg，精密称定，置IOOml量瓶中，加无水乙醇溶液并稀释至刻度；精密量取Iml，置具塞试管中，精密加入内标溶液50ul，摇勻，吸取2ul，注入气相色谱仪，计算校正因子；供试品溶液的制备与测定精密量取注射液25ml，通过(8小柱，用比例为70 30的醋酸乙酯-乙醇混合液洗脱；收集洗脱液约Iml置具塞试管中，精密加入内标溶液50ul，摇勻， 作为供试品溶液，吸取2ul，注入气相色谱仪，测定，即得； 注射液每Iml含甲基正壬酮不得少于1. Ougo
9.如权利要求7所述的一种鱼腥草注射液的质量控制方法，其特征在于该质量控制方法为鉴别A.取注射液5ml，置分液漏斗中，加稀盐酸lml，用氯仿振摇提取2 3次，每次 5ml，分取氯仿液，挥干，残渣加氢氧化钠试液3ml使溶解，加二硝基苯胼试液1ml，振摇，即生成橙红色沉淀；B.取注射液2ml，加品红亚硫酸试液3 5滴，放置片刻，即显粉红色或红紫色； 含量测定 照气相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验0V-17毛细管柱，柱温120°C ；理论板数按甲基正壬酮峰计算应不低于8000 ；校正因子测定取正十五烷适量，精密称定，加无水乙醇制成每Iml含0. 3mg的溶液； 作为内标溶液，另取甲基正壬酮对照品5mg，精密称定，置IOOml量瓶中，加无水乙醇溶液并稀释至刻度；精密量取Iml，置具塞试管中，精密加入内标溶液50ul，摇勻，吸取2ul，注入气相色谱仪，计算校正因子；供试品溶液的制备与测定精密量取注射液25ml，通过(8小柱，用比例为70 30的醋酸乙酯-乙醇混合液洗脱；收集洗脱液约Iml置具塞试管中，精密加入内标溶液50ul，摇勻， 作为供试品溶液，吸取2ul，注入气相色谱仪，测定，即得； 注射液每Iml含甲基正壬酮不得少于1. Ougo
全文摘要
本发明公开了一种鱼腥草注射液的制备方法及质量控制方法。本发明注射液的制备方法为取鲜鱼腥草全草进行水蒸汽蒸馏，收集初蒸馏液，再进行重蒸馏，收集重蒸馏液，加入渗透压调节剂及β-环糊精衍生物，调PH值，滤过，灌封，灭菌制成注射液。本发明制备方法首次实现制备无吐温-80的鱼腥草注射液，所制成的鱼腥草注射液无溶血作用，且含有效成份的浓度高，可以肌注也可静滴，使用更安全，更稳定。本发明质量控制方法包括对甲基正壬酮和癸酰乙醛的鉴别方法和对甲基正壬酮的含量测定方法，能有效控制产品质量。
文档编号A61P37/04GK102335271SQ20111028129
公开日2012年2月1日 申请日期2004年4月28日 优先权日2004年4月28日
发明者何晓丽, 吴飞驰, 徐乃焕, 董绍象, 袁涛 申请人:湖南正清制药集团股份有限公司