专利名称：一种杜仲鲜叶中综合提取杜仲胶和绿原酸的工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种从杜仲鲜叶中综合提取杜仲胶和绿原酸等成分的工艺，具体涉及从杜仲鲜叶中综合提取杜仲胶、含有绿原酸等成分的粗提物、杜仲纯粉和叶肉粉的工艺方法，是对杜仲鲜叶资源的综合开发利用，属于高分子材料和天然药物利用技术领域。
背景技术：
杜仲，又名思仲、思仙、玉丝皮、乱银丝，俗称丝绵。杜仲属杜仲科植物，系多年生落叶乔木。杜仲是第三纪冰川时期残留下来的古生树种，只此一种，仅产于中国，是我国独有的珍稀贵重树种，被国家列为二级保护植物。杜仲是我国传统名贵的中药材，皮和叶均能入药，《中国药典》载明杜仲叶的药理功效为强筋骨、补肝肾，主治筋骨萎软，腰膝疼痛，头脑晕眩，精神萎糜。
杜仲叶含有杜仲胶类高分子材料和以绿原酸、桃叶珊瑚苷及松脂醇二葡萄糖苷为代表的多种天然药物成分，其中绿原酸含量在已测定的植物中最高。
绿原酸具有抗菌、抗病毒、利胆、保肝、降压、兴奋中枢神经系统等作用，是药品制造业的珍贵原料，制剂在临床上主要用于治疗多种急性细菌性感染，并对放化疗所致的白细胞减少症有显著效果。另外，氯原酸对妇女月经过多、子宫出血也有良好的止血效果，并在抗癌、抗艾滋病、治疗糖尿病等方面显示出良好的前景。由于氯原酸具有广泛的抗菌抗病毒功效，是医药界天然广谱抗生素开发的热点。
桃叶珊瑚苷具有保肝利胆、促进胶源蛋白合成、抗肌肉骨骼老化等多种医学功效， 并对乙肝病毒有明显的抑制作用，是杜仲叶中含量较高的药用活性物质。但是，桃叶珊瑚苷的分子量仅为346，并且含有多个极性官能团，所以性质活泼，极性较强，用传统工艺很难将其从杜仲叶中分离富集出来。
杜仲中的木脂素类及松脂醇二葡萄糖苷被认定为最高质量的无副作用的天然降压药物，木脂素类及其松脂醇二葡萄糖苷主要赋存在杜仲皮中，树叶的含量比较少。
1984年，中科院化学所的“反式——聚异戊二烯硫化橡胶制法”问世，标志着人类对杜仲资源的开发利用进入了新的历史时代。1994年国务院出台了《关于杜仲资源综合开发有关问题的会议纪要的批示》(国阅[1994]02号)，现在杜仲胶已被国家列入新型材料目录，为国家解决橡胶资源紧缺提供了一条新思路。
关于杜仲成分的开发利用，集中在橡胶工业和医药工业两大行业。橡胶工业多用剧烈条件破坏纤维获得杜仲胶，但同时破坏了绿原酸等热敏性物质，且制备工艺复杂，工业消耗很大，价格昂贵，导致产品缺乏市场竞争力，无法实现大规模的开发应用。医药行业对其开发主要集中在提取绿原酸和桃叶珊瑚苷等成分，胶质往往作为杂质除去，并且胶质污染和溶剂残留问题没有在工艺流程中得到解决。因此，开发利用杜仲资源需要迫切解决的问题，一是行业技术之间的融合，二是产品的市场竞争力。
关于杜仲资源的使用部位，上世纪主要集中在皮上，后来发展到干叶。但是用干叶作原料，一是干化场地需求量大限制了原料的采集回收，二是热处理造成成本提升并且绿原酸等热敏性物质大量损失，三是溶剂消耗大量增加并且消除溶剂残留相当困难。目前鲜叶的综合利用未见报道，特别是杜仲鲜叶绿色环保的物理分离及循序开发可同时得到杜仲胶高分子材料和以绿原酸为代表的医药原料两大类原料的方法未见报道。秦巴山区是我国杜仲主要资源区，资源充足，天然存林量国内唯一，对杜仲树的培育被国务院列入汉江流域区划案中。发明内容
本发明的目的是提供一种杜仲鲜叶综合利用方法，以杜仲鲜叶为原料，综合提取杜仲胶、含有绿原酸等成分的粗提物、杜仲纯粉和叶肉粉，是对杜仲鲜叶资源的综合开发利用。
本发明实现过程如下一种杜仲鲜叶中综合提取杜仲胶和绿原酸的工艺，其特征在于包括下述步骤(1)杜仲鲜叶原料榨滤得到叶渣和叶汁；(2)叶渣经烘干、机械分离得胶丝绵和叶肉粉；(3)叶肉粉加水提取，提取液与叶汁合并，残余叶肉粉经干燥、粉碎得到粒度<80目的叶肉粉；(4)合并的叶汁经粗滤、微滤、超滤得到含绿原酸粗提物；(5)胶丝绵经水提取得到提取液和胶渣，提取液浓缩干燥后生产杜仲纯粉，胶渣加乙醇提取产出杜仲粗胶。
所述杜仲鲜叶原料为取自4-9月的杜仲树鲜叶。
上述步骤(3)中，叶肉粉加3-7倍去离子水后，用超声提取设备进行封闭式连续化常温提取，提取液与叶汁合并，经粗滤、微滤、超滤后得到含绿原酸粗提物，超滤膜截留分子量在3000-6000之间。
含绿原酸粗提物经分子蒸馏得到热敏性成分和非热敏性成分，热敏性成分以绿原酸粗提物和桃叶珊瑚苷为主，非热敏性成分以木脂素为主，热敏性成分经柱层析得绿原酸和桃叶珊瑚苷，非热敏性成分经柱层析得到木脂素。
含绿原酸粗提物中绿原酸含量大于30%，桃叶珊瑚苷含量大于10%，松脂醇葡萄糖苷含量大于3%。
步骤(5)中胶渣加乙醇超声回流提取生产杜仲粗胶。
杜仲鲜叶所含的活性物质分属高分子材料和医药原料两大领域。只有把两类物质预先从原叶的组织结构中分离开来，使其避免在提取过程中交叉污染，杜仲叶才能成为两类材料的提取原料。杜仲胶赋存在杜仲叶的白色丝网状纤维中，而医药原料成分主要赋存在叶肉之中，两类物质赋存的部位完全不同。据此发明三次循序链式工艺，把杜仲胶和医药原料预先分离第一次采用榨汁，经压榨将游离在叶汁中的医药原料及部分叶肉组织榨滤出来；第二次采用平锤粉碎和筛选分离，将大部分叶肉组织从原叶纤维组织中分离出来； 第三次采用常温超声水提取，使粘附在纤维组织上的叶肉组织脱落，纤维状粗渣用于提取杜仲胶，水溶液用于加工医药原料。经过三次分离富集，用于提取杜仲胶的含胶渣，重量约为干原叶的30%，含胶量是干原叶的3倍以上。这样分摊在杜仲胶上的原料成本不超过干原叶的30%，而提取杜仲胶的工业消耗要比干原叶降低70%。同时，由于叶肉组织的剔除，减少了废渣带走杜仲胶的数量，因此杜仲胶的产率要比原叶提高3-4%。
本发明的优点与积极效果1、生产的工艺流程前伸到杜仲鲜叶原料的采集和回收，对医药原料成分分离富集大部分采用物理方法，溶剂为鲜叶原料自含水分或去离子水，提取浓缩在常温下进行，保障初级医药原料成分不发生性状变化；2、本发明超滤处理既除对产品产生影响的重金属、淀粉、色素等成分，又分类富集得到医药原料成分。超滤液中主要含以绿原酸为代表的医药原料成分，滤汁进行低温浓缩干燥后得到含绿原酸粗提物，其中绿原酸含量大于30%，桃叶珊瑚苷大于10%，松脂醇葡萄糖苷大于3%。
3、鲜叶汁经粗滤滤出的叶渣，与从叶渣中分离出来的叶肉粉，都是剔除了杜仲胶丝后的叶肉组织，医药原料成分完全一致，可合并使用。叶肉粉剔除了杜仲胶和粗纤维，粒度< 80目，含有丰富的医学保健成分，经紫外线灭菌后，可作为饲料添加剂，用于畜禽防疫和提高肉蛋产量品质。
4、本发明用挤压榨滤的方法，将热敏性成分绿原酸和桃叶珊瑚苷同杜仲鲜叶中的赋存介质水分子一起从杜仲叶中分离出来，再通过超滤将其富集在滤液中，避免了温度和溶剂对其产生的干扰影响，保障了绿原酸和桃叶珊瑚苷的原生性状。
5、本发明利用杜仲鲜叶得到的干固物中滤除了 90%的杂质，含绿原酸粗提物中松脂醇二葡萄糖苷的含量大于3%，再利用分子蒸馏将粗提物分为热敏性和非热敏性两大类， 从热敏性聚积物中提取分离绿原酸和桃叶珊瑚苷。从非热敏性聚积物中提取分离木脂素， 产品用于防治高血压。本发明产出的热敏性聚积物为绿原酸粗提物，绿原酸含量不低于 50%,桃叶珊瑚苷含量不低于10%。本发明产出的非热敏性聚积物木脂素粗提物，木脂素含量不低于50%，松脂醇二葡萄糖苷含量不低于10%，产品中不含有害成分。
6、本发明从杜仲鲜叶中综合提取杜仲胶、含有绿原酸等成分的粗提物、杜仲纯粉和叶肉粉，最大限度的利用了杜仲鲜叶资源，利于工业化生产。
具体实施方式
本发明以4-9月采集的杜仲鲜叶为原料。杜仲鲜叶与干叶所含的绿原酸、桃叶珊瑚苷类活性物质的医学功效一致，但是这类物质具有热敏性，既怕高温，也怕光照。5月采集的杜仲鲜叶，实验中在日光下照晒2小时，所含的绿原酸流失30-40%。杜仲鲜叶直接榨汁不仅避免高温干燥中医药成分的流失，而且解决了在室内阴凉干化需要巨大的晾干场地难题。选定鲜叶作原料，能保障规模化生产的原料供给。
鲜叶原料采集及处理的工艺过程为(1)原料分三次采集，其中4-6月剪裁树上的密集枝叶；7-8月采收树上大部分枝叶，保留当年和次年挂果枝；9月回收全部叶果；(2)采集的鲜叶就地分选归类。病虫叶和杂质发酵除菌做肥料；4、5月份选出的嫩叶，7、8月分选出的雄花可用于制茶，预防自然落地叶进入加工环节，保障原料品质。
杜仲鲜叶作原料，既保障了产品的功效成分较强的活性又规避了鲜叶干化过程中重要成分的流失和质变，同时大幅度降低了干化场地占用和劳动力消耗，为规模化生产提供了原料供给保障。
实施例1取安康5月产的杜仲鲜叶1KG，用板框式压滤机压滤，得叶汁550 g，叶渣450g，滤液再经微孔滤膜滤过，滤液备用。叶渣低温(<60°C)干燥、机械分离得到叶肉粉140 g，杜仲胶丝70 g。取上述杜仲胶丝70 g，加6倍量水常温超声提取，得提取液与胶渣，提取液浓缩干燥，得杜仲纯粉15. 6 g，胶渣加5倍量乙醇超声提取，得杜仲粗胶15 g。叶肉粉加6倍量水常温超声提取2次，过滤，滤液与叶汁经微滤后的滤液合并，用截留分子量3000的超滤膜滤过，得滤渣和滤液，所得滤液< 50°C浓缩，喷雾干燥得含绿原酸粗提物四g，提取物中绿原酸含量30. 16%，桃叶珊瑚苷含量10. 21%，松脂醇葡萄糖苷3. 20%。粗提物上硅胶柱层析，乙酸乙酯洗脱，得绿原酸6. 3 g，桃叶珊瑚苷2. 2 g。
实施例2取安康6月产的杜仲鲜叶1KG，用板框式压滤机压滤，得叶汁480 g，叶渣520g，滤液再经微孔滤膜滤过，滤液备用。叶渣低温(<60°C)干燥、机械分离得到叶肉粉145 g，杜仲胶丝75 g。取上述杜仲胶丝75 g，加6倍量水常温超声提取，得提取液与胶渣，提取液浓缩干燥，得杜仲纯粉16g，胶渣加5倍量乙醇超声提取，得杜仲胶18 g。叶肉粉加6倍量水常温超声提取2次，过滤，滤液与叶汁经微滤后的滤液合并，用截留分子量5000的超滤膜滤过， 得滤渣和滤液，所得滤液< 50°C浓缩，喷雾干燥得含绿原酸粗提物，经分子蒸馏器蒸馏，得到热敏性成分12. 5g，非热敏性成分6. 9 g，热敏性成分上硅胶柱层柱层析，乙酸乙酯洗脱， 得绿原酸6. 8g，桃叶珊瑚苷2. 6g，非热敏性成分上硅胶柱层析，石油醚-乙酸乙酯(8:2)洗脱，得到木脂素3. 5g。
权利要求
1.一种杜仲鲜叶中综合提取杜仲胶和绿原酸的工艺，其特征在于包括下述步骤(1)杜仲鲜叶原料榨滤得到叶渣和叶汁；(2)叶渣经烘干、机械分离得胶丝绵和叶肉粉；(3)叶肉粉加水提取，提取液与叶汁合并，残余叶肉粉经干燥、粉碎；(4)合并的叶汁经粗滤、微滤、超滤得到含绿原酸粗提物；(5)胶丝绵经水提取得到提取液和胶渣，提取液浓缩干燥后生产杜仲纯粉，胶渣加乙醇提取产出杜仲粗胶。
2.根据权利要求1所述的杜仲鲜叶综合提取杜仲胶和绿原酸的工艺，其特征在于所述杜仲鲜叶原料为取自4-9月的杜仲树鲜叶。
3.根据权利要求1所述的杜仲鲜叶综合提取杜仲胶和绿原酸的工艺，其特征在于叶肉粉加3-7倍去离子水后，用超声提取设备进行封闭式连续化常温提取，提取液与叶汁合并，经粗滤、微滤、超滤后得到含绿原酸粗提物。
4.根据权利要求3所述的杜仲鲜叶综合提取杜仲胶和绿原酸的工艺，其特征在于超滤膜截留分子量在3000-6000之间。
5.根据权利要求1所述的杜仲鲜叶综合提取杜仲胶和绿原酸的工艺，其特征在于含绿原酸粗提物经分子蒸馏得到热敏性成分和非热敏性成分，热敏性成分经柱层析得绿原酸和桃叶珊瑚苷，非热敏性成分经柱层析得到木脂素。
6.根据权利要求5所述的杜仲鲜叶综合提取杜仲胶和绿原酸的工艺，其特征在于含绿原酸粗提物中绿原酸含量大于30%，桃叶珊瑚苷含量大于10%，松脂醇葡萄糖苷含量大于 3%。
7.根据权利要求1所述的杜仲鲜叶综合提取杜仲胶和绿原酸的工艺，其特征在于步骤(5)中胶渣加乙醇超声回流提取生产杜仲粗胶。
全文摘要
本发明公开了一种杜仲鲜叶中综合提取杜仲胶和绿原酸成分的工艺，包括下述步骤(1)杜仲鲜叶原料榨滤得到叶渣和叶汁；(2)叶渣经烘干、机械分离得胶丝绵和叶肉粉；(3)叶肉粉加水提取，提取液与叶汁合并，残余叶肉粉经干燥、粉碎得到叶肉粉；(4)合并的叶汁经粗滤、微滤、超滤得到含绿原酸粗提物；(5)胶丝绵经水提取得到提取液和胶渣，提取液浓缩干燥后生产杜仲纯粉，胶渣加乙醇提取产出杜仲粗胶。本发明从杜仲鲜叶中综合提取杜仲胶、含有绿原酸等成分的粗提物、杜仲纯粉和叶肉粉，最大限度的利用了杜仲鲜叶资源，利于工业化生产。
文档编号A61K36/46GK102504281SQ20111037934
公开日2012年6月20日 申请日期2011年11月25日 优先权日2011年11月25日
发明者南怀炼, 向纪明, 王兆廷, 王浩东, 谢娟平, 郭吉根, 鲁绪会 申请人:安康学院, 安康市昊泰生物资源开发有限公司