专利名称：一种以十字花科植物提取物作为活性成分的药物制剂的制作方法
技术领域：
本发明属于制药技术领域，具体涉及一种以十字花科植物提取物作为活性成分的药物制剂，其中植物提取物中的活性成分为异硫氰酸酯类化合物或其衍生物的混合物，活性成分在提取物中的重量百分比大于50%，每个药物制剂单位中活性成分的含量大于lmg，可以制成临床上相关疾病的药物制剂。
背景技术：
人类流行病学研究结果表明食十字花科蔬菜:如青花菜、羽衣甘蓝、抱子甘蓝、花椰菜、辣根、大白菜等可以预防如胰腺癌、肺癌、直肠癌、乳腺癌及前列腺癌等多种癌症的发生。硫代葡萄糖苷是植物体内合成的一类含氮次级化合物，广泛分布在高等植物、海绵体、红藻类等450种生物中，其中以十字花科植物如辣根、芥末、油菜籽、花椰菜、青花菜中的硫代葡萄糖苷含量最高。其中辣根中苯乙基硫代葡萄糖苷含量最高，辣根(A rm oracia Iapath ifolia Gilib.)，又名西洋山葵，马萝卜，为十字花科辣根属多年生草本植物。其肉质根及地下莖外皮较厚，黄白色或肉白色，圆柱型，全部入土长约30 60cm,莖粗约5 6cm,原产欧洲南部，以陆地栽培为主，资源非常丰富。所有硫代葡萄糖苷都由一个含糖基团、硫酸盐基团和可变的非糖侧链(R)组成。基于R基团的不同，硫代葡萄糖苷可以分为3类:脂肪族硫代葡萄糖苷、芳香族硫代葡萄糖苷和吲哚硫代葡萄糖苷，其中苯乙基硫代葡萄糖苷在内源性黑芥子硫苷酸酶或胃肠微生物作用下水解生成苯乙基异硫氰酸酯，大量研究结果显示苯乙基异硫氰酸酯疗效最为确切。为保证本发明的药物制剂疗效，制剂中限定了功效成分苯乙基硫代葡萄糖苷和苯乙基异硫氰酸酯的含量，以期研制成功临床使用方便的药物，为广大的相关疾病患者解除病苦。
发明内容
本发明采用了两种提取方法，分别富集了苯乙基硫代葡萄糖苷和苯乙基异硫氰酸酯，制成药物口服制剂，经动物试验证明可有效治疗前列腺相关疾病和癌症，有望开发成功治疗前列腺增生、前列腺炎和前列腺癌、皮肤癌等疾病的药物。本发明十字花科植物提取物中活性成分异硫氰酸酯类化合物或其衍生物混合物占总提取物的50%，混合物包括苯乙基异硫氰酸酯、烯丙基异硫氰酸酯和苄基异硫氰酸等，HPLC可标定成分大于30%，其中苯乙基异硫氰酸酯在总提取物中的含量大于30%。本发明十字花科植物提取物中活性成分异硫氰酸酯类化合物或其衍生物活性成分在单位药物制剂中的含量大于lmg。所述十字花科植物选自辣根、西兰花、水田芥、芥末和油菜籽、冬独行菜中的一种，优选辣根，其中辣根提取物中可以含有苯乙基异硫氰酸酯，也可以是苯乙基硫代葡萄糖苷。所述提取物中苯乙基异硫氰酸酯提取方法包括如下步骤:(I)称取辣根粉适量，在温度35_40°C，时间l_3h，pH 6-7, Vc添加量为辣根粉的
0.1-0.3 %，辣根粉的粒度为60-100目的条件下水解，过滤，滤渣部分搓成粉末备用；
(2)取粉末状滤渣，以70 %乙醇-水微沸提取2-3次，每次l_3h，料液比I: 10-10-20g/mL，提取液静置，合并上清液过滤，减压浓缩得粗浸膏；(3)粗浸膏用水分散，以石油醚萃取至无色或淡黄色，回收石油醚得提取物浸膏。所述苯乙基硫代葡萄糖苷提取方法包括如下步骤:(I)取辣根粉IOOg适量，用微波加热法将酶失活，加入70 %乙醇煮沸提取两次，每次60min，静止至上清液澄清，取上清液浓缩成2L溶液备用；(2)浓缩液上碱性苯乙烯型阴离子交换树脂，用纯化水冲洗5-8倍柱体积，再用
0.5-lmol/L的NaOH溶液作为洗脱剂解离吸附在树脂上的苯乙基异硫氰酸酯葡萄糖苷，调PH值中性，减压浓缩即得。本发明苯乙基异硫氰酸酯-N-乙酰半胱氨酸共轭物衍生物活性分子与药用辅料混合制成，活性成分存在的方式可以是固体也可以是液体，其给药方式可以是口服制剂也可以是非肠道给药。本发明含有十字花科植物提取物作为活性成分的药物制剂，活性成分在单位药物制剂中的含量大于lmg，其特征在于单位药物制剂是指各种可以计算的口服制剂，包括但不局限于:片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、混悬剂、滴丸、口服液体制剂；所说的非肠道给剂型包括但不局限于注射剂、气 雾剂、栓剂或皮下给药剂型。本发明的药物制剂还含有一种或多种可药用的附加成分，例如明矾、稳定剂、抗菌剂、缓冲剂、着色剂、矫味剂、辅料等。其中，0-1000份可药用的活性成分载体包括:1.0-1000重量份表面活性剂或增溶剂，所述的表面活性剂包括，但不局限于 聚氧乙烯月桂醇醚、聚氧乙烯单硬脂酸甘油酯、硬脂酸聚烃氧酯、维生素E琥珀酸聚乙二醇酯、聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯氢化蓖麻油、泊洛沙姆、聚乙二醇、吐温、聚山梨酯等；所述的增溶剂包括，但不局限于:聚乙烯吡咯烷酮K17、聚乙烯吡咯烷酮K25、聚乙烯吡咯烷酮K30、聚乙烯吡咯烷酮K90、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000中的一种或一种以上的混合物。2.0-500份重量油性成分，所述的油性成分包括，但不局限于:大豆油、玉米油、花生油、硬脂酸、软脂酸、葵花籽油、橄榄油、芝麻油、棉籽油、低芥酸菜子油、油酸、中链脂肪酸甘油三酯、单辛葵酸甘油酯、单乙酸甘油酯、二乙酸甘油酯、三乙酸甘油酯中的一种或一种以上的混合物。3.由上述1、2中的一种或多种药用载体组成的混合载体。4.通过其它辅料制成其它合适的剂型，具体的辅料包括，但不局限于:a)吸附剂和稀释剂，其包括但不局限于:α乳糖(_水)、无水乳糖、β环糊精、羟丙基β环糊精、微晶纤维素、微晶纤维素丸心、乳糖淀粉丸心、碳酸钙、碳酸氢钙、改性淀粉、蔗糖八乙酸酯、羧甲基淀粉纳、羟丙基纤维素、硬脂酸、甘露醇、山梨醇、山梨酯、羧甲基纤维素钠、多孔淀粉、微粉硅胶中的一种或一种以上的组合。其中优选β环糊精，最佳用量为2.0-500重量份，b)润滑剂，其包括但不局限于:硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、聚乙二醇、微粉硅胶、滑石粉。其中优选聚乙二醇，通常用量为0-30重量份。c)黏合剂，其包括但不局限于:聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、乙基纤维素(200目)、聚乙二醇等。其中优选聚乙二醇6000，通常用量为0-100重量份。d)包衣材料，其包括但不局限于:羟丙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、乙基纤维素、二甲氨乙基甲基丙烯酯-中性甲基丙烯酯聚合物、聚乙二醇‘二氧化钛、氧化铁红、山梨酸钾等。其中优选羟丙基甲基纤维素E15、聚乙二醇4000、乙基纤维素。通常用量为0.5-20
重量份。以苯乙基异硫氰酸酯为主要活性成分的药物制剂中，活性成分的数量是1-25重量份，表面活性剂数量是5-200重量份，油性成分的数量是0.5-100重量份，其他辅料的数量是0.5-1500重量份。以苯乙基异硫氰酸酯为主要活性成分的药物制剂中，活性成分的数量是1-25重量份，环糊精的数量是1-100重量份，其他辅料的数量是0.5-1500重量份。以苯乙基异硫代葡萄糖苷为主要活性成分的药物制剂中，活性成分的数量是1-25重量份，环糊精的数量是1-100重量份，其他辅料的数量是0.5-1500重量份。以苯乙基异硫代葡萄糖苷为主要活性成分的药物制剂中，活性成分的数量是1-25重量份，糊精或淀粉的数量是1-100重量份，其他辅料的数量是0.5-1500重量份。本发明片剂的制备方法是:本发明提取物和环糊精、崩解剂、稀释剂分别仔细研细，混合均匀，用黏合剂职称软材，筛滤制粒，置50-60°C条件下干燥，再筛滤整粒后加入润滑剂，混合均匀，压片。本发明的药物可以是按常规制剂方法制备成的胶囊剂，其制备方法是化合物与所述药学上可接受载体分别研细过筛，混合均匀，装胶囊，或用黏合剂制成软材，筛滤制粒，置50-60°C条件下干燥，再筛滤制粒后加入润滑剂，混合均匀，装胶囊。本发明的药物可以是按常规制剂方法制备成的颗粒剂，其制备方法为按处方量取化合物与上述辅料混合后，喷雾干 燥，干式制粒，整粒即得产品；或将原辅料混合按处方量加入黏合剂，制成软材，将上述软材经12目筛制粒，再于30-75°C干燥，12目筛整粒，将整粒好的颗粒加入已过80目筛的椰子香精混合均匀，分装即得颗粒剂。本发明的药物可以是按常规制剂方法制备成粉剂，其制剂粉剂方法是:含化合物的组合物和稀释剂分别研细过筛，混合均匀，分装。尽管在上文中，描述本发明的指出了具体的剂型，但是其它类型的口服固体制剂，例如泡腾片、快速分散片、骨架片、小片、多层片、脉冲缓释片、微型片等形式，均可以被生产，而且这些剂型也包括在本发明的范围内。本发明的组合物还可以是液体制剂。包括但不局限于，含水或含油悬浮液、溶液、乳液、糖浆和酏剂。组合物还可配制成干产品，在使用前用水或其它合适赋形剂配制。该液体制剂可含有添加剂，包括，但不局限于，悬浮剂、乳化剂、非水赋形剂和防腐剂。悬浮剂包括，但不局限于，山梨糖醇糖浆、甲基纤维素、葡萄糖、糖浆、羧甲基纤维素、白明胶、羟基乙基纤维素、硬脂酸铝凝胶和氢化食用脂肪。乳化剂包括吗，但不局限于，卵磷脂、脱水山梨糖醇单油酸酯和阿拉伯树胶。非水赋形剂包括，但不局限于，食用油、杏仁油、精制椰子油、油月旨、丙二醇和乙醇。防腐剂包括，但不局限于，甲基或丙基对羧基苯甲酸酯和山梨酸。本发明的组合物还可配制成栓剂，其含有栓剂基础物，包括，但不局限于，可可脂或甘油。本发明的组合物还可配制用于吸入，它可以是包括，但不限于，溶液、悬浮液或乳液形式，它可作为干粉或气溶胶形式，使用推进剂，例如二氯二氯甲烷或三氯氟甲烷给药。本发明的组合物还可配制成含有含水或非水赋形剂的外用制剂，其包括，但不局限于，乳液、油膏、洗液、软膏、药膏、斑点或膜。
其中，按照药品组合物中活性成分的体外溶出及稳定性，优选硬胶囊、软胶囊或液体硬胶囊、片剂、丸剂，最优选肠溶硬胶囊、肠溶软胶囊、肠溶液体硬胶囊、肠溶片剂和肠溶丸剂，。
具体实施例实施例一:提取物I十字花科植物提取物中苯乙基异硫氰酸酯在提取物中的含暈大于30%制备方法(I)称取辣根粉IOOg适量，加入2kg水中，在温度40°C，时间2h，pH6_7，Vc添加量为辣根粉的0.2g，辣根粉的粒度为60-100目的条件下水解，过滤，滤渣部分搓成粉末备用；(2)取粉末状滤渣，以10倍量70%乙醇-水微沸提取2次，每次2.5h，合并滤液，减压浓缩得粗浸膏；(3)粗浸膏以水分散，以石油醚萃取至无色或淡黄色，回收石油醚得提取物浸膏
0.3g0实施例二:提取物2十字花科植物提耳又物中苯乙基硫代匍萄糖苷在提耳又物中的含暈大于30 %制备万法(I)取辣根粉IOOg适量，用微波加热法将酶失活，加入70 %乙醇煮沸提取两次，每次60min，静止至上清液澄清，取上清液浓缩成2L溶液备用；(2)浓缩液上碱性苯乙烯型阴离子交换树脂，用纯化水冲洗5-8倍柱体积，再用
0.5-lmol/L的NaOH溶液作为洗脱剂解离吸附在树脂上的苯乙基异硫氰酸酯葡萄糖苷，调PH值中性，减压浓缩即得，得浸膏O j g。实施例三:制备提取物I肠溶软胶囊
提取物IIOOmg 中链脂肪酸甘油酯Ig 大豆油900mg 聚氧乙烯蓖麻油Ig工艺:取处方量药物加热熔融，搅拌混合均匀后，采用压制法制成软胶囊，外面包裹肠溶衣即得肠溶软胶囊，共计10粒。实施例四:制备提取物I肠溶胶囊提取物IIOOmgβ_ 环糊精Ig提取物I溶于3_5ml乙醇溶液充分溶解，β -环糊精制成水饱和溶液，将提取物I乙醇溶液缓慢加入β -环糊精制成水饱和溶液，充分搅拌后用薄膜蒸发器减压挥发乙醇溶齐U，将硬脂酸聚烃氧(40)酯500mg、糊精适量均匀加入含提取物的β-环糊精溶液中，制成软材，湿法制粒，低温干燥后装入胶囊，外面包裹肠溶衣即得肠溶胶囊，共计10粒。实施例五:提取物2片剂/胶囊/肠溶片剂/肠溶胶囊
提取物2IOOmg将提取物2和环糊精、崩解剂、稀释剂分别仔细研细，混合均匀，用黏合剂职称软材，筛滤制粒，置50-60°C条件下干燥，再筛滤整粒后加入润滑剂，混合均匀，压片，共计10片。把制得的颗粒装入硬胶囊即得胶囊。在制得的片剂和胶囊外包肠溶衣，即得肠溶片剂或肠溶胶囊。实施例六:体外细胞筛选试验及结果前列腺细胞培养3天后，在无菌环境下将提取物I和提取物2用注射用水配成1000ug/ml、500ug/ml、100ug/ml，3个剂量组每组3个复合孔，0.1%的DMSO为溶剂对照组，非那雄胺为阳性对照。药物处理3天后MTT法测定细胞活性，计算各药物对前列腺细胞增生的抑制率。抑制率=(空白对照活细胞数-给药组细胞活性)/空白对照细胞活性*100%表I药物对前列腺细胞增生的抑制率)
权利要求
1.一种以十字花科植物提取物作为活性成分的药物制剂，其特征在于十字花科植物提取物中活性成分为异硫氰酸酯类化合物或其衍生物的混合物，活性成分占提取物的重量百分比大于50%，活性成分在单位药物制剂中的含量大于lmg。
2.根据权利要求1所述的异硫氰酸酯类化合物或其衍生物的混合物，其特征在于苯乙基异硫氰酸酯或其葡萄糖苷占活性成分异硫氰酸酯类化合物或其衍生物的30%以上。
3.根据权利要求1所述含有十字花科植物提取物，其特征在于十字花科植物选自辣根、西兰花、水田芥、芥末、油菜籽和冬独行菜中的一种，优选辣根。
4.根据权利利要求1-2所述的苯乙基异硫氰酸酯，其特征在于苯乙基异硫氰酸酯提取方法包括如下步骤: (1)称取辣根粉适量，在温度35-40°C，时间l_3h，pH6-7, Vc添加量为辣根粉的0.1-0.3 %，辣根粉的粒度为60-100目的条件下水解，过滤，滤渣部分搓成粉末备用； (2)取粉末状滤洛，以70%乙醇-水微沸提取2-3次，每次l-3h，料液比I: 10-10-20g/mL，提取液静置，合并上清液过滤，减压浓缩得粗浸膏； (3)粗浸膏用水分散，以石油醚萃取至无色或淡黄色，回收石油醚得提取物浸膏。
5.根据权利利要求1-2所述的苯乙基硫代葡萄糖苷，其特征在于苯乙基硫代葡萄糖苷提取方法包括如下步骤: (1)取辣根粉IOOg适量，用微波加热法将酶失活，加入70%乙醇煮沸提取两次，每次60min,静止至上清液澄清，取上清液浓缩成2L溶液备用； (2)浓缩液上碱性苯乙烯型阴离子交换树脂，用纯化水冲洗5-8倍柱体积，再用0.5-lmol/L的NaOH溶 液作为洗脱剂解离吸附在树脂上的苯乙基异硫氰酸酯葡萄糖苷，调PH值中性，减压浓缩即得。
6.根据权力要求I含有十字花科植物提取物作为活性成分的药物制剂，其特征在于单位药物制剂是指各种可以计数的口服制剂，所述的口服制剂包括但不局限于:片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、混悬剂、滴丸、口服液体制剂、气雾剂、栓剂或皮下给药剂型。
7.根据权利要求1含有十字花科植物提取物作为活性成分的药物制剂，其特征在于用于治疗肿瘤、各种炎症及组织增生。
8.根据权利要求1含有十字花科植物提取物作为活性成分的药物制剂，其特征在于用于治疗前列腺癌、皮肤癌和前列腺炎及前列腺增生。
全文摘要
本发明公开了一种以十字花科植物提取物作为活性成分的药物制剂，其中植物提取物中的活性成分为异硫氰酸酯类化合物或其衍生物的混合物，活性成分在提取物中的重量百分比大于50％，每个药物制剂单位中活性成分的含量大于1mg，可以制成临床上相关疾病的药物制剂。
文档编号A61K36/31GK103181942SQ20111045364
公开日2013年7月3日 申请日期2011年12月30日 优先权日2011年12月30日
发明者张文芳 申请人:张文芳