专利名称：一种治疗急性肝炎、慢性肝炎及肝纤维化的中药的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种中药，尤其涉及一种治疗急性肝炎、慢性肝炎及肝纤维化的中药。
技术背景
在当今临床医学领域，肝脏系统疾病一直是引起人类死亡的病种之一，而急性肝炎、慢性肝炎及肝纤维化是肝脏系统疾病中最常见的多发病。肝炎广泛流传于世界各地，且发病率呈上升趋势，慢性肝炎具有病程长、缠绵难愈的特点，最终导致肝硬化和肝癌。国际知名企业都将治疗肝炎药物列入重点课题，我国也历次列入攻关研究内容。由于乙型肝炎是由乙型肝炎病毒引起的，治疗乙肝最理想的方法是将病毒从体内彻底地清除，但至今世界上尚没有一种特效的药物能确定有效地清除乙肝病毒。治疗乙肝药物的表面抗原转阴率不超过40%，降酶的效果不稳定。因此有效地对之予以防治具有十分重要的意义。目前国内外市场上的用于治疗此类病症的中西药物很多，西医主要采用抗病毒、免疫调节、改善肝功能和抗肝纤维化等综合疗法。以核苷类药物为代表的化学药物存在停药后复发率高，对 HBeAg作用不明显的缺点，而以干扰素为代表的生物类药物治疗HBV同样存在复发率较高， 不良反应较大。但公知的中药类制剂大多为普通的复方制剂，如肝毒净颗粒、乙肝解毒胶囊等，属于有效部位以上类别的药物较少，而属于有效部位组合制剂且既抗又保的用于治疗急性肝炎、慢性肝炎及肝纤维化治疗药物尚不多见。发明内容
本发明的目的是克服现有技术所存在的上述不足，提供一种组方科学、制备方便、 疗效好、安全无副作用的治疗急性肝炎、慢性肝炎及肝纤维化的中药。
其技术方案为
一种治疗急性肝炎、慢性肝炎及肝纤维化的中药，由以下重量百分比的原料制成 太白橡木总皂苷25% 50%，叶下珠总多酚50% 75%。
一种治疗急性肝炎、慢性肝炎及肝纤维化的中药的制备方法，包括以下步骤
1)取太白橡木(飞天蜈蚣七)药材，粉碎，加3 8倍量30% 95%乙醇提取2 次，合并提取液，滤过，减压回收乙醇并浓缩成每ml相当于原药材0. 25g，加于HPDltltl大孔树脂柱上进行吸附，水洗至洗脱液无色，改用70%乙醇洗脱，TLC检查洗脱终点，收集洗脱液， 回收乙醇，浓缩成相对密度为1.20 1.40，温度为40°C的稠膏，50°C真空干燥，粉碎，即得太白橡木总皂苷；
2)取叶下珠药材，加3 8倍量30% 95%乙醇提取2次，合并提取液，滤过，减压回收乙醇并浓缩成每ml相当于原药材0. 2g，取上清液用盐酸调pH值约为3后加于已经处理好的HPDltltl大孔树脂柱上进行吸附，水洗至洗脱液无色，改用50%乙醇洗脱，TLC检查洗脱终点，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩成相对密度为1. 10 1. 30，温度为40°C的稠膏，50°C 真空干燥，粉碎，即得叶下珠总多酚；
3)将步骤1)和步骤2~)的产物按照上述比例混合，制成适于临床使用的药剂学所用剂型的制剂。
优选地，步骤；3)所述的剂型为硬胶囊剂、软胶囊剂、片剂、丸剂、滴丸剂、颗粒剂、散剂、口服液。
本发明的有益效果
与现有技术相比，本发明的技术方案具有以下优点
本发明所述中药的处方系分别由太白橡木总皂苷和叶下珠总多酚按一定比例配伍而成。太白橡木为主药，叶下珠为辅药。太白橡木(飞天蜈蚣七)性平、味甘、微苦，具有驱风除湿、利水消肿、活血散瘀、止痛、健脾的功效。民间常用于风湿性关节炎，肾炎水肿，肝硬化腹水，急慢性肝炎，胃痛，淋虫，血崩，跌打损伤，痈肿等的治疗。现代研究亦表明橡木根皮对肾炎、肝炎，类风湿性关节炎等均具有良好的防治效果。辅药叶下珠，甘苦、凉，入肝肺二经。具有平肝清热，利水解毒的功效。主治肠炎、痢疾、传染性肝炎、肾炎水肿、尿路感染、 小儿疳积、火焰目翳、口疮头疮、无名肿毒等。叶下珠与太白橡木相伍，既可清热利湿，抗乙肝病毒，又可保肝降酶，防止肝硬化的发生，促进肝细胞再生。显而易见，两药配伍，有相得益彰之效，比单用任何一味的效果要好。综上所述，本发明所述中药的处方是在祖国医药学理论指导下，结合现代药理学研究成果，加之科学合理的制造工艺，而最终形成的一个配伍合理，主辅有序的治疗处方。
图1是受试药物对乙肝病毒HBSAg的影响效果图2是受试药物对乙肝病毒HBeAg的影响效果图3是受试药物对体外CCl4所致急性肝细胞损伤肝功能的影响效果图4是受试药物对体内CCl4所致急性肝损伤肝功能的影响效果图。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施方式
对本发明的技术方案作进一步详细地说明。
初步探索太白橡木和叶下珠配伍治疗湿热毒邪的机理，并对两者的比例作以探索。方法观察两者以一定的比例组成的处方太白橡木总皂苷与叶下珠总多酚分别以 1 1、1 2、1 3、2 1、2 2、2 3、3 1、3 2、3 3配伍对体外抗乙肝病毒、体内外抗CCl4所致急性肝细胞损伤肝功能及急性肝损伤肝功能的影响。结果经体内外实验表明，药物A具有良好的抗肝细胞损伤作用，药物B具有良好的抗乙肝病毒作用，对HBsAg和 HbeiVg均有抑制作用。药物A与药物B组合有利于乙肝病毒性肝炎治疗。根据体内外实验结果推荐药物临床应用时药物A、B以1 2混合，用量为0. 05g/kg/d。
注A为太白橡木总皂苷，B为叶下珠总多酚。
实验材料
药物药物A、B由陕西中医学院药物研究所提供。乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg) 诊断试剂盒(酶联免疫法)(上海科华生物技术有限公司)，乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)诊断试剂盒(酶联免疫法)(北京科卫临床诊断试剂有限公司)。谷丙转氨酶(ALT)测定试剂盒(批号20080514)、谷草转氨酶(AST)测定试剂盒(批号:20080514)、总胆红素(TBILI) 测定试剂盒(批号20080514)南京建成生物工程研究所。分析纯四氯化碳，上海长江化工厂(批号:20070627)。
动物小白鼠，体重20士2g，新生昆明种小鼠，雄性，体重10士 lg，SPF级，由湖北省实验动物研究中心提供，合格证号SCXD (鄂)2003-0005。实验期间室温20 士 2°C。
仪器紫外-可见分光光度计(日本Hitachi有限公司3010型)；净化工作台(苏州净化设备有限公司SW-CJ-ZF型)；离心机(德国Sigma有限公司3-18K型)；电热恒温水浴锅(上海精宏实验设备有限公司DK-8A型)。多功能酶标仪(Tecan Genios)。
方法与结果
参照图1、图2，受试药物对乙肝病毒的影响
选取处于对数生长期H印G2. 2. 15细胞，稀释至细胞浓度约为105/ml，于96孔细胞培养板每孔加样200ul，培养24h后加入不同浓度药物2ul。设计7个浓度(300，100，33. 3， 11. 1,3.3,1. l，0.37mg/ml)，根据预试分别取其中5个浓度，每个浓度3个复孔。细胞在培养箱中培养4d后，吸出培养液，换液后再加药一次。继续培养4d后，根据试剂盒检测方法， 按以下操作检测HBsAg和HbeAg。
(1)加样先把试剂盒放在CO2温箱中温育30min，分别取培养8d的细胞50ul加入e抗和表抗试剂盒的对应孔。然后每孔分别加酶结合物50ul，对照孔加阳性对照，混勻， 置37°C CO2温箱中温育30min。
(2)洗板弃取反应孔内液体，将稀释后的洗液注满各孔，静置10-20秒，弃洗涤液，重复洗板共5次，最后拍干。
(3)显色每孔依次加显色剂A液，B液各一滴，混勻，置37°C避光温育lOmin。
(4)终止每孔依次加终止液50ul。
(5)测定用酶标仪在450nm处测定OD值。以OD值代表HBsAg和HbeAg含量。计算 IC50。
测完e抗和表抗的培养板，每孔加入MTT (5mg/ml) 20ul，37°C继续孵育4h，终止培养，小心弃取孔内上清液，每孔加150ulDMS0，振荡lOmin。用酶标仪在490nm处测定OD值。 判断药物的细胞毒性。结果见表1、2。
表1 受试药物对乙肝病毒HBSAg的影响( ±s, η = 5)
权利要求
1.一种治疗急性肝炎、慢性肝炎及肝纤维化的中药，其特征在于，由以下重量百分比的原料制成太白橡木总皂苷25% 50%，叶下珠总多酚50% 75%。
2.权利要求1所述的中药的制备方法，其特征在于，包括以下步骤1)取太白橡木药材，粉碎，加3 8倍量30% 95 %乙醇提取2次，合并提取液，滤过， 减压回收乙醇并浓缩成每ml相当于原药材0. 25g，加于HPDltltl大孔树脂柱上进行吸附，水洗至洗脱液无色，改用70%乙醇洗脱，TLC检查洗脱终点，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩成相对密度为1. 20 1. 40，温度为40°C的稠膏，50°C真空干燥，粉碎，即得太白橡木总皂苷；2)取叶下珠药材，加3 8倍量30% 95%乙醇提取2次，合并提取液，滤过，减压回收乙醇并浓缩成每ml相当于原药材0. 2g，取上清液用盐酸调pH值约为3后加于已经处理好的HPDltltl大孔树脂柱上进行吸附，水洗至洗脱液无色，改用50%乙醇洗脱，TLC检查洗脱终点，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩成相对密度为1. 10 1. 30，温度为40°C的稠膏，50°C真空干燥，粉碎，即得叶下珠总多酚；3)将步骤1)和步骤幻的产物按照上述比例混合，制成适于临床使用的药剂学所用剂型的制剂。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤幻所述的剂型为硬胶囊剂、软胶囊剂、片剂、丸剂、滴丸剂、颗粒剂、散剂、口服液。
全文摘要
本发明公开了一种治疗急性肝炎、慢性肝炎及肝纤维化的中药，其特征在于，由以下重量百分比的原料制成太白楤木总皂苷25％～50％，叶下珠总多酚50％～75％。本发明具有组方科学、制备方便、疗效好、安全无副作用的特点。
文档编号A61K36/47GK102512485SQ20111045557
公开日2012年6月27日 申请日期2011年12月31日 优先权日2011年12月31日
发明者唐志书, 郭东艳, 郭伟 申请人:陕西中医学院