专利名称：治疗主动脉纤维化的组合物及方法
技术领域：
本发明涉及一种治疗或预防主动脉纤维化的组合物及方法。本发明特别涉及一种包含有VIP或VIP某些活性片段的组合物，及其在主动脉纤维化治疗中的应用。
背景技术：
在整个说明书中对现有技术的任何讨论，绝不应视为这种现有技术广为人知或形成本领域公知常识的一部分。中风、痴呆症等病症的病发率与心脏收缩压的关系比与心脏舒张压的关系更为密切。心脏收缩压升高被认为是自身的血管舒张神经皮内舒张因子(EDRF)或者一氧化氮(NO)的产量下降，导致血管张力或血管收缩增强的结果。这种理论解释了心脏收缩压升高的原因，但没有解释心脏舒张压下降及脉压增宽的原因，脉压增宽与心血管疾病风险的增加有着密切关系。这些现象只有主动脉这一主要血管发生结构性变化可以解释，由于主动脉的柔韧性降低，从而减弱了主动脉缓解和承受心脏收缩压波动的能力，在心脏充盈或舒张状态下，实现弹性回缩的能力也有所降低。弹性纤维的缺失、以胶原蛋白代替弹性纤维以及胶原蛋白和纤维组织数量的增加，使得平滑肌肉纤维受到破坏，这些都会导致血管弹性及柔韧性的降低。血管壁上的这些变化将引起血管壁变硬，相应得造成反射波动以响应心脏收缩的压力波动。这种反射波动的影响即提高并进一步增加了心脏收缩的血管压力。血管壁硬度的增加也阻碍了心脏充盈时的弹性回缩，减弱了脉管系统在心脏舒张时保持血压的能力，并造成了较低的收缩压。这种心脏收缩压和心脏舒张压之间的差异称为脉压。脉压增宽(> 90mmHg)表示患心血管疾病的绝对风险较高，例如中风。当前可用的降血压制剂针对于增加血管收缩剂组分并同等程度地降低了心脏收缩压和舒张压。这些制剂在影响主动脉结构重塑方面的失败意味着对于脉压增宽的患者而言，治疗只限制在通过降低心脏舒张压来进行。因此，心脏收缩压仍然高于建议目标的水平。其结果是尽管经过治疗，但脉压依然持续扩宽或者加剧，这样的患者依然存有较高的患心血管病的风险，例如中风。因此，能够阻碍和/或逆转主动脉结构性变化的治疗制剂，成为了目前的迫切需要。本发明的一个目的是，克服或改善现有技术中的至少一个缺点，或者说提供有用的备选方案。
发明内容
本发明涉及VIP和/或VIP片段及其在治疗主动脉纤维化中的应用。本发明涉及的组合物能够防止纤维化的形成，或者逆转主动脉中已经形成的纤维化，因此用于治疗及预防主动脉纤维化。
根据第一个方面，本发明提供了一种治疗和预防主动脉纤维化的组合物，所述组合物包含药学上有效量的血管活性肠肽(VIP) (SEQ ID No. I)或一种或多种功能性VIP片段，所述功能性 VIP 片段选自 SEQ ID No. 2，SEQ ID No. 3，SEQ ID No. 4，SEQ ID No. 5，SEQID No. 6, SEQ ID No. 7, SEQ ID No. 8, SEQ ID No. 9, SEQ ID No. 10, SEQ ID No. 11, SEQ IDNo. 12，SEQ ID No. 13，SEQ ID No. 14，SEQ ID No. 15 或 SEQ ID No. 16。优选地，本发明所述的组合物与药用载体配合给药，所述载体可以是现有技术中已知的或者随后设计的、适用于预期用途的任意载体。除了载体，本发明药物组合物可以包括其他组分，例如包括染料、防腐剂、缓冲剂和抗氧化剂。所述组合物可以优选与一种或多种其他治疗主动脉纤维化或心脏病症的活性药剂配合给药。所述组合物较佳的给药方式为口服、静脉注射、肌肉或皮下注射。本领域技术人员熟知的其他给药方法也可适用，如贴剂、鼻吸、鼻腔喷雾剂及其他类似的方式等。VIP或VIP活性片段的药学有效量会根据患者和/或待治疗病症病症的严重程度而有所不同。这些变数可由本领域技术人员根据常规试验确定。适当剂量范围可以首先从本文所述的动物模型给药剂量中得到，或参考专利申请PCT/AU2005/000835和PCT/ AU2006/001869。本发明所述的组合物用于防止或减缓主动脉纤维化的发展，以及降低纤维化的程度，或防止纤维化形成。根据第二方面，本发明提供了一种受试者预防或治疗主动脉纤维化的方法，所述方法包括，向具有发展成主动脉纤维化风险的受试者、或患有主动脉纤维化的受试者提供一种组合物，所述组合物包括药学上有效量的血管活性肠肽(VIP) (SEQ ID No. I)或一种或几种功能性VIP片段，所述功能性VIP片段选自SEQ ID No. 2，SEQ ID No. 3，SEQ ID No. 4，SEQ ID No. 5, SEQ ID No. 6, SEQ ID No. 7, SEQ ID No. 8, SEQ ID No. 9, SEQ ID No. 10, SEQID No. 11，SEQ ID No. 12，SEQ ID No. 13，SEQ ID No. 14，SEQ ID No. 15 或 SEQ ID No. 16。关于预防方法，应该理解的是，所述预防方法尤其能使具有发展成主动脉纤维化风险的受试者受益。以有可能发展为主动脉纤维化的受试者为例，这些受试者具有相关病症，例如动脉粥样硬化、高血压、慢性肾病、慢性维生素D中毒、脉管炎、糖尿病、甲状腺功能减退、高血脂、单纯收缩期高血压、中风、心脏衰竭、心肌梗塞、末期肾脏衰竭以及主动脉瘤。更优地，所述预防方法用于防止或减缓受试者纤维化的形成。所述疗法也可以用于防止或减缓已形成的纤维化的发展，或者降低已形成的纤维化的程度。更优地，所述方法的用药中还进一步包括一种或多种对治疗主动脉纤维化有效的活性药剂。对本领域技术人员显而易见的是，为了达到最佳效果，本发明所述组合物的应用方式可能需要改变，并且有必要考虑疾病或病症的性质及其严重性，以及任何潜在的危险或易染病因素。更优地，所述VIP或一种或多种功能性VIP片段可以通过静脉注射、肌肉注射、皮下注射、口服、舌下含服或鼻吸的方式给药。更优地，所述VIP或一种或多种功能性VIP片段可以通过片剂、胶囊、粉末、液体药齐U、延迟剂或缓释剂、贴片剂、鼻吸剂、鼻腔喷雾剂或其他类似的剂型给药。根据第三方面，本发明提供血管活性肠肽(VIP) (SEQ ID No. I)或一种或多种功能性VIP片段在预防或治疗主动脉纤维化中的应用，所述功能性VIP片段选自SEQ ID No. 2，SEQ ID No. 3，SEQ ID No. 4，SEQ ID No. 5，SEQ ID No. 6，SEQ ID No. 7，SEQ ID No. 8，SEQID No. 9，SEQ ID No. 10，SEQ ID No. 11，SEQ ID No. 12，SEQ ID No. 13，SEQ ID No. 14，SEQID No. 15 或 SEQ ID No. 16。更优地，所述应用是用于防止或减缓已形成的主动脉纤维化的发展，或者用于防止或减缓受试者或危险群体的纤维化形成。同样的，也可以用于降低已形成的纤维化的程度。更优地，所述应用的用药中还进一步包括一种或多种有助于治疗主动脉纤维化的活性药剂。根据第四方面，本发明提供了血管活性肠肽(VIP) (SEQ ID No. I)或一种或多种选自 SEQ ID No. 2，SEQ ID No. 3，SEQ ID No. 4，SEQ ID No. 5，SEQ ID No. 6，SEQ ID No. 7，SEQ ID No. 8，SEQ ID No. 9，SEQ ID No. 10，SEQ ID No. 11，SEQ ID No. 12，SEQ ID No. 13，SEQ ID No. 14，SEQ ID No. 15或SEQ ID No. 16的功能性VIP片段在制备用于预防或治疗主动脉纤维化药物中的应用。本发明所使用的术语“预防”一词，尤其包括用于防止或减缓危险群体中主动脉纤维化的形成。可以给予预防性治疗的受试者中，有很大比例已经出现主动脉纤维化或心脏病的迹象。根据第五方面，本发明提供了一种减少受试者主动脉中胶原蛋白形成或促进胶原蛋白降解的方法，所述方法包括对受试者施用一种组合物，所述组合物包括药学有效量的血管活性肠肽(VIP) (SEQ ID No. I)或一种或多种功能性VIP片段，所述功能性VIP片段选自 SEQ ID No. 2，SEQ ID No. 3，SEQ ID No. 4，SEQ ID No. 5，SEQ ID No. 6，SEQ ID No. 7，SEQ ID No. 8，SEQ ID No. 9，SEQ ID No. 10，SEQ ID No. 11，SEQ ID No. 12，SEQ ID No. 13，SEQ ID No. 14，SEQ ID No. 15 或 SEQ ID No. 16。除非文中另有明确要求，整个描述及权利要求中所使用的“包括”及其他类似词语均属于开放性描述而非唯一的或详尽的描述，即是“包括但不限于”的意思。
图I :对大鼠施用载体及肽类处理4周之后，大鼠体内主动脉纤维化情况，载体和肽类均以5pmol/kg/min的剂量注射给药；图2 :对主动脉壁纤维化的SHR用VIP及不同的VIP片段处理4周后对其纤维化的影响，所有VIP或VIP片段都以5pmol/kg/min的剂量给药。与对照输注比较Zp < 0. 005，**p < 0. 0005 ；图3 :对主动脉壁纤维化的SHR用不同的VIP片段处理4周后对其纤维化的影响，所有VIP片段都以5pmol/kg/min的剂量给药。与对照输注比较，*p < 0. 025，**p < 0. 01，***p < 0. 005 及_ <0. 001。图4 :对主动脉壁纤维化的SHR用不同的VIP片段处理4周后对其纤维化的影响，所有VIP片段均以5pmol/kg/min的剂量给药。优选实施方式的描述
现已发现VIP分子作为一个整体，能够起到防止、减缓或逆转主动脉纤维化的作用。鉴于这一领域已广泛接受的观点，本发明进一步令人惊奇的发现，即使VIP片段缺乏对其功能性非常重要的氨基酸及其特征结构，仍然是有用的治疗剂，对于逆转或延迟主动脉纤维化的病发，或防止具有心脏病潜在危险的受试者的纤维化病发仍然有较好的作用。尤为有效的VIP片段选自但不局限于以下片段VIP(4-12)，VIP(4-16)，VIP(4-10)，VIP(4-20), VIP(4-24), VIP(10-28), VIP(16-20)，VIP(16-24)，VIP(16-28)，VIP (6-10),VIP(6-12)，VIP(6-16)，VIP(6-20)，VIP (6-24)，and VIP(6-28)。本发明所述的药物组合物在治疗主动脉纤维化中的应用代表了用于这些病症病症的一类新型治疗制剂。当前尚没有治疗主动脉纤维化的方法。不希望受任何特定的作用机理约束，但相信本发明的药物制剂可以以几乎所有目前已知的主动脉纤维化促进剂为作用目标。在本研究的基础上，并且不希望受理论所约束，假定VIP或者VIP片段作为防止纤维化发展的主要调节因素，并且VIP的缺失可能启动一些促纤维化介质合成，从而造成主动脉损伤。本发明所述的VIP片段几乎能与天然VIP以相同的方式起作用，但由于其分子较小，增加了稳定性且易于生产，从而更适合用于治疗应用。应当理解的是，本发明也包括在其范围内的某些VIP片段类似物，所述类似物是基于VIP片段中一个或多个氨基酸被保守地替代，并没有改变所述VIP片段的生物活性。本领域技术人员熟知这种置换，采用技术非常成熟且简单的试误法即可。因此，本发明中所述 的术语“VIP片段”即涵盖了这样的类似物。所有这些序列涉及人类源的VIP及片段，但由于氨基酸保守水平高，本发明也预期和涵盖了源于其他哺乳动物的VIP及其片段。本发明还预期包括含VIP和/或活性VIP片段的药物组合物。这些组合物可包括任何类型的剂型，如片剂、胶囊、粉末、液体制剂、延迟或缓释剂、贴剂、鼻吸剂、鼻腔喷雾剂等。所述制剂也可包含其他成分，如染料、防腐剂、缓冲剂和抗氧化剂。所预期的药物制剂的物理形式和成分为药物制剂领域技术人员能够配制的常规制剂，并且基于例如1995年第19 版《雷明登药物科学与实践》(Remington The Science and Practice of Pharmacy),英国药典2000版和类似制剂课本和手册中所述的既定原则和组成。本发明所述的组合物也可包括用于主动脉纤维化疾病治疗的其他活性药剂。本发明所述组合物的给药途径和频率根据治疗需要和待给予分子的性质决定。因此，所述制剂可适当制备成静脉、肌肉或皮下注射。VIP和/或VIP片段也可用于粘膜给药，如口服、舌下、鼻腔等。这些参数很容易由本领域技术人员确定。本发明所述的药物组合物已显示出对防止或减缓主动脉纤维化的形成的有效性，以及降低(或逆转)已形成的纤维化程度的有效性，从而在治疗应用中起重要作用。因此本发明所述的组合物可用于预防或治疗主动脉纤维化。对于应用本发明的组合物能够治疗的病症范围和严重程度来说，这些是重要发现。本发明所述的组合物可用于治疗那些具有发展成主动脉纤维化风险的受试者。所述有风险的受试者具有相关病症，例如动脉粥样硬化、高血压、慢性肾病、慢性维生素D中毒、脉管炎、糖尿病、甲状腺功能减退、高血脂、单纯收缩期高血压、中风、心脏衰竭、心肌梗塞、末期肾脏衰竭以及主动脉瘤及其他类似病症。通过应用本发明所述的组合物，在主动脉纤维化或有风险发展成主动脉纤维化的受试者的主动脉中保持VIP含量，可实现显著疗效，包括减少纤维化，降低促纤维化介质的水平、产生或活性，减缓纤维化进展，减少胶原蛋白的形成或促进胶原蛋白降解。本发明将参考以下具体且非限制性实施例进行描述。
具体实施例方式所有一般方法和技术已在PCT/AU2005/000835中详细描述，在此将其全部内容纳入参考范围。实施例I-VIP和VIP片段的氨基酸序列SEQ ID No IVIP(1~28)-His-Ser-Asp-Ala-Val-Phe-Thr-Asp-Asn-Tyr-Thr-Arg-Leu-Arg-Lys-Gln-Met-Ala-Val-Lys-Lys-Tyr-Leu-Asn-Ser-Ile-Leu-AsnSEQ ID No 2 VIP (4-12)-Ala-Val-Phe-Thr-Asp-Asn-Tyr-Thr-ArgSEQ ID No 3 VIP(4-16)-Ala-Val-Phe-Thr-Asp-Asn-Tyr-Thr-Arg-Leu-Arg-Lys-GlnSEQ ID No 4 VIP (4-10)-Ala-Val-Phe-Thr-Asp-Asn-Tyr SEQ ID No 5 VIP (4-20)-Ala-Val-Phe-Thr-Asp-Asn-Tyr-Thr-Arg-Leu-Arg-Lys-Gln-Met-Ala-Val-LysSEQ ID No 6 VIP(4-24)-Ala-Val-Phe-Thr-Asp-Asn-Tyr-Thr-Arg-Leu-Arg-Lys-Gln-Met-Ala-Val-Lys-Lys-Tyr-Leu-AsnSEQ ID No 7 VIP (10-28)-Tyr-Thr-Arg-Leu-Arg-Lys-Gln-Met-Ala-Val-Lys-Lys-Tyr-Leu-Asn-Ser-Ile-Leu-AsnSEQ ID No 8 VIP (16-20)-Gln-Met-Ala-Val-LysSEQ ID No 9 VIP (16-24)-Gln-Met-Ala-Val-Lys-Lys-Tyr-Leu-AsnSEQ ID No 10 VIP (16-28) -Gln-Met-Ala-Val-Lys-Lys-Tyr-Leu-Asn-Ser-Ile-Leu-AsnSEQ ID No 11 VIP (6-10)-Phe-Thr-Asp-Asn-TyrSEQ ID No 12 VIP (6-12)-Phe-Thr-Asp-Asn-Tyr-Thr-ArgSEQ ID No 13 VIP (6-16)-Phe-Thr-Asp-Asn-Tyr-Thr-Arg-Leu-Arg-Lys-GlnSEQ ID No 14 VIP(6-20)-Phe-Thr-Asp-Asn-Tyr-Thr-Arg-Leu-Arg-Lys-Gln-Met-Ala-Val-LysSEQ ID No 15 VIP (6-24)-Phe-Thr-Asp-Asn-Tyr-Thr-Arg-Leu-Arg-Lys-Gln-Met-Ala-Val-Lys-Lys-Tyr-Leu-AsnSEQ ID No 16 VIP(6-28)-Phe-Thr-Asp-Asn-Tyr-Thr-Arg-Leu-Arg-Lys-Gln-Met-Ala-Val-Lys-Lys-Tyr-Leu-Asn-Ser-IIe-Leu-Asn实施例2-向纤维化大鼠模型注入VIP片段，观察其对主动脉纤维化的影响使用两种主动脉纤维化的动物模型(动物从澳大利亚,西澳大利亚柏斯的澳大利亚动物资源获得)i)用2. 2 %盐饮食喂养的雄性SHR大鼠ii)用4. 4%盐饮食喂养的雄性WKY大鼠每种模型中，对大鼠随机施用VIP(1_28)，VIP(4-12), VIP(4-16), VIP(4-10),VIP(4-20), VIP(4-24), VIP(10-28), VIP (16-20)，VIP(16-24)，VIP(16-28)，VIP(6-10),VIP (6-12)，VIP (6-16)，VIP (6-20)，VIP (6-24)，及 VIP (6-28)。所有肽均来自于澳大利亚的Auspep公司或由其合成。VIP片段溶于Hartman溶液中用于后续的注射研究。以12周龄的大鼠开始试验，使这些大鼠适应尾套血压测量并持续2周。然后进行插入渗透微型真空泵(Alzet)用于传送载体(Hartman溶液，(Baxter公司)_(对照))、VIP或VIP片段，所述真空泵设计成以5pmol/kg/min的剂量静脉输注所述载体、VIP或VIP片段。该输注持续4周，期间每周两次对大鼠称重及测量其血压。在4周的注入期末期，麻醉大鼠并收集其主动脉。将动脉在甲醛缓冲液中固定，主动脉嵌入蜡中切片、并使用苏木紫和曙红或Masson 三色染色法(Lomb Scientific)染色。为了对主动脉纤维化进行定量分析，每个主动脉取20个区域进行数字化运算，将每个主动脉中的纤维化数量通过Image-Pro Plus V5. 0软件换算成表面积百分比，并以此确定每个大鼠及随后的每个输注组的平均值。图1-4表示出对施用2. 2 %盐饮食的SHR大鼠输注VIP和不同的VIP片段四周后，其主动脉纤维化的降低情况。 本领域技术人员在阅读本文后即知，本发明对于健康保健的重要性是立竿见影的。本发明所述的具有防止基础病变(纤维化)甚至能够逆转纤维化病变作用的药物制剂可以防止轻度病症扩大为严重疾病，从而大大减少医疗负担。某些VIP片段的总体大小和其活性使其成为药物发展中的理想目标。应当明白，在符合本发明所述的指导和精神的情况下，也预期本发明所述组合物、方法和应用的其他实施例和变形，这些均在本发明的范围之内。
权利要求
1.一种预防或治疗受试者主动脉纤维化的方法，所述方法包括向具有患主动脉纤维化风险的受试者或已经患有主动脉纤维化的受试者施用一种组合物，所述组合物包含药学上有效量的血管活性肠肽(VIP) (SEQ ID No. I)或一种或多种功能性VIP片段，所述功能性VIP 片段选自 SEQ ID No. 2，SEQ ID No. 3，SEQ ID No. 4，SEQ ID No. 5，SEQ ID No. 6，SEQID No. 7，SEQ ID No. 8，SEQ ID No. 9，SEQ ID No. 10，SEQ ID No. 11，SEQ ID No. 12，SEQ IDNo. 13，SEQ ID No. 14，SEQ ID No. 15 或 SEQ ID No. 16。
2.根据权利要求I所述的方法，其特征在于所述方法可以防止或减缓受试者纤维化的形成。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述方法可以防止或减缓已形成的纤维化的发展，或降低已形成的纤维化的程度。
4.根据权利要求1-3任一所述的方法，其特征在于用药中还进一步包括一种或多种对治疗主动脉纤维化有效的活性药剂。
5.根据权利要求1-4任一所述的方法，其特征在于所述VIP或一种或多种功能性VIP片段可以通过静脉注射、肌肉注射、皮下注射、口服、舌下含服或鼻吸的方式给药。
6.根据权利要求1-4任一所述的方法，其特征在于所述VIP或一种或多种功能性VIP片段可以通过片剂、胶囊、粉末、液体制剂、延迟剂或缓释剂、贴片剂、鼻吸剂、鼻腔喷雾剂或其他类似的剂型给药。
7.血管活性肠肽(VIP)(SEQ ID No. I)或一种或多种功能性VIP片段在预防或治疗主动脉纤维化中的应用，所述功能性VIP片段选自SEQ ID No. 2, SEQ ID No. 3, SEQ ID No. 4，SEQ ID No. 5, SEQ ID No. 6, SEQ ID No. 7, SEQ ID No. 8, SEQ ID No. 9, SEQ ID No. 10, SEQID No. 11，SEQ ID No. 12，SEQ ID No. 13，SEQ ID No. 14，SEQ ID No. 15 或 SEQ ID No. 16。
8.血管活性肠肽(VIP)(SEQ ID No. I)或一种或多种功能性VIP片段在制备用于预防或治疗主动脉纤维化药物中的应用，所述功能性VIP片段选自SEQ ID No. 2, SEQ ID No. 3,SEQ ID No. 4，SEQ ID No. 5，SEQ ID No. 6，SEQ ID No. 7，SEQ ID No. 8，SEQ ID No. 9，SEQID No. 10，SEQ ID No. 11，SEQ ID No. 12，SEQ ID No. 13，SEQ ID No. 14，SEQ ID No. 15 或SEQ ID No. 16。
9.一种减少受试者主动脉内胶原蛋白形成或促进胶原蛋白降解的方法，所述方法包括向受试者施用一种组合物，所述组合物包含药学上有效量的血管活性肠肽(VIP) (SEQ IDNo. I)或一种或多种功能性VIP片段，所述功能性VIP片段选自SEQ ID No. 2, SEQ ID No. 3,SEQ ID No. 4，SEQ ID No. 5，SEQ ID No. 6，SEQ ID No. 7，SEQ ID No. 8，SEQ ID No. 9，SEQID No. 10，SEQ ID No. 11，SEQ ID No. 12，SEQ ID No. 13，SEQ ID No. 14，SEQ ID No. 15 或SEQ ID No. 16。
10.一种用于预防或治疗主动脉纤维化的组合物，所述组合物包括药学上有效量的血管活性肠肽(VIP) (SEQ ID No. I)或一种或多种功能性VIP片段，所述功能性VIP片段选自SEQ ID No. 2，SEQ ID No. 3，SEQ ID No. 4，SEQ ID No. 5，SEQ ID No. 6，SEQ ID No. 7，SEQID No. 8，SEQ ID No. 9，SEQ ID No. 10，SEQ ID No. 11，SEQ ID No. 12，SEQ ID No. 13，SEQID No. 14，SEQ ID No. 15 或 SEQ ID No. 16。
全文摘要
本发明涉及包含血管活性肠肽(VIP)或其片段的组合物，以及所述组合物在治疗主动脉纤维化及其他相关病症中的应用。
文档编号A61K38/10GK102711797SQ201180001731
公开日2012年10月3日 申请日期2010年4月6日 优先权日2009年4月2日
发明者K·A·杜甘 申请人:维克特斯生物系统有限公司