专利名称：用于神经疾病免疫疗法的方法和组合物的制作方法
技术领域：
本发明总体涉及这样的抗体，所述抗体是BACEl拮抗剂，其例如抑制或降低BACEl活性，并且涉及包含所述抗体的组合物。另外的实施方案包括用于治疗和诊断多种神经疾病或病症的方法，以及减少患者中APP和/或Αβ多肽的方法。背景淀粉状变性不是单一的疾病实体，而是多样化组的进行性疾病过程，其表征为被称为淀粉状蛋白的蜡状、淀粉样蛋白质的胞外组织沉积，淀粉状蛋白累积于一种或多种器官或身体系统中。当淀粉状沉淀物累积时，它们开始干扰器官或身体系统的正常功能。存在至少15种不同类型的淀粉状变性。主要形式为没有已知前例的原发性淀粉状变性，跟随一些其他状况的继发性淀粉状变性，和遗传性淀粉状变性。
许多老化的疾病是基于或相关于淀粉状蛋白样蛋白，并且被部分表征为促进致病的淀粉状蛋白或淀粉样物质的胞外沉积的形成，以及疾病的进展。这些疾病包括但不限于，神经病症如阿尔茨海默病(Alzheimer, s Disease, AD),雷维小体痴呆(Lewy bodydementia),唐氏综合征(Down, s syndrome),遗传性脑出血伴淀粉状变性(hereditarycerebral hemorrhage with amyloidosis) (Dutch 型)；Guam Parkinson-痴呆综合症状(Guam Parkinson-Dementia complex)。基于或相关于淀粉状蛋白样蛋白的其他疾病有进行性核上性麻痹(progressive supranuclear palsy),多发性硬化(multiplesclerosis)，克一雅病(Creutzfeld Jacob disease)，帕金森病(Parkinson' s disease),HIV相关痴呆(HIV-related dementia), ALS(肌萎缩性脊髓侧索硬化症(amyotropiclateral sclerosis)),成年型糖尿病(Adult Onset Diabetes),老年性心脏淀粉状变性(senile cardiac amyloidosis),内分泌肿瘤,等等,包括黄斑变性在内。多肽β-淀粉状蛋白(Αβ)可能在阿尔茨海默病(AD)的发病中起中心作用。Vassar 等，J.Neurosc1.29:12787-12794(2009)。Αβ 多肽在 CNS 中累积导致突触功能障碍，轴突变性和神经元死亡。AD患者的脑显示显著神经病理病变的特征性病理学，如神经原纤维紊乱(NFTs)，和富含淀粉状蛋白的老年斑。淀粉状蛋白斑的主要成分是Αβ。这些病变与中枢神经系统(CNS)神经元群体的大量损失相关，并且其进展伴随与AD相关的临床痴呆。Αβ是前体蛋白(β淀粉状蛋白前体蛋白(β-APP或APP))的蛋白水解产物。APP是I型跨膜蛋白，其相继被两个蛋白酶，β-和Y-分泌酶切割。β-分泌酶，被称为β-位淀粉状蛋白前体蛋白裂解酶I (BACEl)，首先将APP裂解以暴露Αβ的N末端，由此产生被称为 C99 的膜结合片段。Vassar 等，J.Neurosc1.,29:12787-12794(2009)和 UniProtKB/Swiss-Prot Entry P56817 (BACE1_HUMAN)。然后，Y -分泌酶能够将C99裂解以产生成熟的Αβ多肽。产生的Αβ具有异源C末端，其长度范围为38个氨基酸至43个氨基酸。42个氨基酸形式的Αβ (Αβ42)是纤维蛋白原形式的Αβ，并且在患有唐氏综合征的患者中过量产生，并且提示在AD的早期发病中起作用。Vassar等，J.Neurosc1.29:12787-12794 (2009)。BACEl因此变为治疗靶标，因为其抑制将可能抑制APP和Αβ产生。实际上，BACEl敲除小鼠(BACE1+)不产生脑Αβ，这证实了 BACEl是主要的(如果不是唯一的)负责在脑中产生Αβ的酶。Roberds等，Human Mol.GeneticslO:1317-1324(2001)。此外，AD模型中的BACEl敲除小鼠不形成淀粉状蛋白斑；认知缺陷和胆碱能功能障碍也得到拯救。McConlogue 等，J.Biol.Chem.282:26326-26334 (2007) ；0hno等，Neuron41:27-33(2004);和 Laird 等，J.Neurosc1.25:11693-11709 (2005)。此外，BACEl杂合敲除小鼠具有减少的斑块形成，这表明BACEl活性的完全抑制对于斑块减少不是必要的。McConlogue 等，J.Biol.Chem.282:26326-26334(2007)。最近，APP已经被证实是死亡受体6 (DR6)的配体，其触发依赖于胱天蛋白酶的神经兀细胞体死亡和轴突消减(axon pruning)。Nikolaev 等，Nature457:981-989 (2009)。此外，BACEl化合物抑制剂破坏轴突和细胞体的变性。同上。这些结果指向这样的模型，在所述模型中APP通过结合DR6可以促进AD。有利的是具有一种有效的BACEl的治疗性抑制剂以减少患有神经疾病和病症(如AD)的患者中的APP和Αβ产生。本文中提供的发明涉及这样的抑制剂，包括其在多种方法中的用途。本文中引用的所有参考资料，包括专利申请和出版物，通过引用完整地结合。概述 本发明提供BACEl拮抗剂抗体及其使用方法。具体地，所述抗体抑制或降低BACEl的活性。在一个实施方案中，提供结合BACEl的分离的抗体，其中所述抗体降低或抑制BACEl多肽的活性。特别地，所述抗体结合BACEl的活性位点或BACEl的外结合位点(exosite)。在另一个实施方案中，提供结合BACEl的分离的抗体，其中所述抗体降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含至少一个选自由以下各项组成的组的高变区(HVR)序列:SEQID NO:7-19,22-26，28-30，35-47，56-79 和 118-122。在另一个实施方案中，提供结合BACEl的分离的抗体，其中所述抗体降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含至少一个选自由以下各项组成的组的序列:HVR-H1，HVR-H2和HVR-H3，其中 HVR-Hl 包含氨基酸序列 GFX3tlFX31X32X33X34IH(SEQ ID NO:45)，其中 X3tl = N或T ;X31 = S, L 或 Y ；X32 = G 或 Y ；X33 = Y 或 S ;并且 X34 = A, G 或 S ；HVR-H2 包含氨基酸序列 X35X36ISPX37X38GX39TX40YADSVKG (SEQ ID NO:46)，其中 X35 = A或G ;X36 = W或 S ;X37 = A或 Y ；X38 = G或 S ;X39 = S或Y ;并且X4tl = D或S ;并且HVR-H3 包含氨基酸序列 X41PX42X43X44X45X46X47MDY (SEQID NO:47)，其中 X41 = Q 或 G ；X42 = T 或 F ；X43 = H 或 S ;X44 = Y 或 P ;X45 = Y 或 W ;X46 = Y或V和其中X47任选包括序列YAKGYKA (SEQ ID NO:48)。备选地，所述抗体包含HVR-Hl序列，所述HVR-Hl序列包含氨基酸序列GftfX13GYX14IH(SEQ ID NO:26)，其中X13 = S或L和X14 = A或G ;或选自由以下各项组成的组的氨基酸序列:SEQ ID NO:22 ；SEQ ID NO:23 ;以及 SEQ ID NO:28o在另一个实施方案中，提供结合BACEl的分离的抗体，其中所述抗体降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含至少一个选自由以下各项组成的组的序列:HVR-H1，HVR-H2和HVR-H3，其中 HVR-Hl 包含氨基酸序列 GX71X72X73X74X75X76X77IH(SEQ ID NO:120)，其中 X71 =F 或 Y -,X72 = F，N 或 T ；X73 = F 或 Y ；X74 = L，Q，I，S 或 Y ；X75 = G 或 Y ；X76 = Y 或 S ;并且X77 = A，G 或 S ；HVR-H2 包含氨基酸序列 X78X79ISPX8(IX81GX82X83X84YADSVKG (SEQ ID NO:121)，其中 X78 = A 或 G ；X79 = W 或 S ；X80 = A, S, Q 或 Y ；X81 = G 或 S ；X82 = S, K, L 或 Y ；X83 = T或 Y ;并且 X84 = D 或 S ;并且 HVR-H3 包含氨基酸序列 X85PX86X87X88X89X9tlX91MDY (SEQ ID NO:122),其中 X85 = Q 或 G ；X86 = T 或 F ；X87 = H, Y 或 S ；X88 = Y 或 P ；X89 = Y 或 W ；X90 = Y 或V，并且其中X91任选包括序列YAKGYKA (SEQ ID NO:48)。备选地，所述抗体包含HVR-Hl序列，所述HVR-Hl序列包含氨基酸序列GX53X54X55X56GYGIH(SEQ ID NO:68)，其中X53 = F或Y ；X54 = T或F ；X55 = F或Y ；X56 = L, Q或I ;或选自由以下各项组成的组的氨基酸序列:SEQ ID N0:71-73。备选地，所述抗体包含HVR-H2序列，所述HVR-H2序列包含氨基酸序列GffISPX57X58GX59X60DYADSVKG (SEQ ID NO:69)，其中 X57 = A，S 或 Q ；X58 = G 或 S ；X59 = S，K 或L ；X60 = T或Y ;或选自由以下各项组成的组的氨基酸序列:SEQ ID NO:74_78。备选地，所述抗体包含HVR-H3序列，所述HVR-H3序列包含氨基酸序列GPFX61PWVMDY (SEQ ID NO:70)，其中X61=S或Y ;或SEQ ID NO:79的氨基酸序列。在一个实施方案中，提供结合BACEl的分离的抗体，其中所述抗体降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含HVR-Hl序列，所述HVR-Hl序列包含选自以下的氨基酸序列:SEQID NO:22, SEQ ID NO:23，SEQ ID NO:28 和 SEQ ID NO:71_73。在一个实施方案中，提供结合BACEl的分离的抗体，其中所述抗体降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含HVR-H2序列，所述HVR-H2序列包含选自以下的氨基酸序列:SEQID NO:24, SEQ ID NO:29 和 SEQ ID NO:74-78。在另一个实施方案 中，提供结合BACEl的分离的抗体，其中所述抗体降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含HVR-H3序列，所述HVR-H3序列包含选自以下的氨基酸序列:SEQID NO:25, SEQ ID NO:30 和 SEQ ID NO:79。在一个实施方案中，提供结合BACEl的分离的抗体，其中所述抗体降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含HVR-Hl、HVR-H2和HVR-H3序列，所述HVR-Hl、HVR-H2和HVR-H3 序列对应于对于
图1 (B)中的克隆 YW412.8，YW412.8.31，YW412.8.30，YW412.8.2，YW412.8.29和YW412.8.51所述的那些或对于图2(B)中的克隆Fabl2，LC6，LC9和LClO所述的那些或图24A-C中所述的那些克隆。在一个实施方案中，提供结合BACEl的分离的抗体，其中所述抗体降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含SEQ ID NO:22或23的HVR-Hl序列，SEQ ID NO:24的HVR-H2序列和SEQ ID N0:25的HVR-H3序列。在另一个实施方案中，提供结合BACEl的分离的抗体，其中所述抗体降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含SEQ ID NO:23的HVR-Hl序列，SEQ ID NO:24的HVR-H2序列和SEQ ID NO:25的HVR-H3序列。在另一个实施方案中，提供结合BACEl的分离的抗体，其中所述抗体降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含SEQ IDNO:28 的 HVR-Hl 序列，SEQ ID NO:29 的 HVR-H2 序列，和 SEQ ID NO:30 的 HVR-H3 序列。
在一个实施方案中，提供结合BACEl的分离的抗体，其中所述抗体降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含选自SEQ ID NO:71-73的HVR-Hl序列，选自SEQ ID NO:74-78的HVR-H2序列和选自SEQ ID NO:79的HVR-H3序列。在一个实施方案中，提供结合BACEl的分离的抗体，其中所述抗体降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含可变重(VH)链，所述可变重(VH)链具有选自由以下各项组成的组的氨基酸序列:SEQ ID NO:20，21，27和80-98。在一方面中，所述抗体包含SEQ ID NO:21的VH链氨基酸序列。在另一个实施方案中，提供结合BACEl的分离的抗体，其中所述抗体降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含至少一个选自下组的序列:HVR-L1、HVR-L2和HVR-L3，其中HVR-Ll 包含氨基酸序列 RASQX17VX18X19X20X21A(SEQ ID NO:42)，其中 X17 = S，D 或 V ；X18 =S 或 A ；X19 = S，T 或 N ；X20 = A 或 S ；X21 = V 或 L，HVR-L2 包含氨基酸序列 X22ASX23LyS (SEQID NO:43)，其中X22 = S，W，Y或L ；X23 = F，S或W，并且HVR-L3包含氨基酸序列QQX24X25X26X27X28X29T (SEQ ID NO:44)，其中 X24 = S，F，G，D 或 Y ；X25 = Y，P，S 或 A ；X26 = Y，T 或 N ；X27 = T，Y，D 或 S ；X28 = P 或 L ;并且 X29 = F，P 或 T。在另一个实施方案中，提供结合BACEl的分离的抗体，其中所述抗体降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含至少一个选自下组的序列:HVR-L1、HVR-L2和HVR-L3，其中HVR-Ll 包含氨基酸序列 RASQX17VX18X19X20X21A (SEQ ID NO:42)，其中 X17 = S，D 或 V ；X18 = S或 A ；X19 = S，T 或 N ；X20 = A 或 S ；X21 = V 或 L，HVR-L2 包含氨基酸序列 X62ASX63X64YX65 (SEQID NO:118)，其中 X62 = S，W, Y，F 或 L ;X63 = F，S，Y 或 W ;X64 = L 或 R ;X65 = S，P，R，K 或W，并且 HVR-L3 包含氨基酸序列 QQX66X67X68X69X70X71T (SEQ ID NO:119)，其中 X66 = S，F，G，D或 Y ；X67 = Y，P，S 或 A ；X68 = Y，T 或 N ；X69 = T，Y，D 或 S ；X70 = P，Q，S，K 或 L ;并且 X71=F,P或T。在某些实施方案中，提供结合BACEl的分离的抗体，其中所述抗体降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含HVR-Ll序列，所述HVR-Ll序列包含氨基酸序列RASQX1VX2X3X4X5A (SEQ ID NO: 17)，其中 X1 = D 或 V ;X2 = S 或 A ;X3 = T 或 N ;X4 = S 或 A ;X5 = V或L，或选自由以下各项组成的组的氨基酸序列:SEQ ID NO:7，SEQ ID NO:8或SEQID NO:35o在一个实施方案中，提供结合BACEl的分离的抗体，其中所述抗体降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含HVR-L2序列，所述HVR-L2序列包含氨基酸序列X6ASFLYS (SEQID NO: 18)，其中 X6 = S 或 L 或 X15ASX16LYS (SEQ ID NO:41)，其中 X15 = S，W 或 Y，并且 X16=S或W，或选自由以下各项组成的组的氨基酸序列:SEQ ID NO:9, SEQ ID N0:10，和SEQID NO:36-39.
在一个实施方案中，提供结合BACEl的分离的抗体，其中所述抗体降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含HVR-L3序列，所述HVR-L3序列包含氨基酸序列QQX7X8X9X10X11X12T (SEQ ID NO:19)，其中 X7 = S，F，G，D 或 Y ;X8 = Y，P，S，或 A ;X9 = T 或 N ;Xio = T,Y,D或S ；Xn = P或L ；X12 = P或T,或选自由以下各项组成的组的氨基酸序列:SEQID NO:11-16 和 SEQ ID NO:40。在某些实施方案中，提供结合BACEl的分离的抗体，其中所述抗体降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含HVR-Ll序列，所述HVR-Ll序列包含氨基酸序列RASQX1VX2X3X4X5A (SEQ ID NO: 17)，其中 X1 = D 或 V ;X2 = S 或 A ;X3 = T 或 N ;X4 = S 或 A ;X5 = V或L，或选自由SEQ ID NO:7组成的组的氨基酸序列。在一个实施方案中，提供结合BACEl的分离的抗体，其中所述抗体降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含HVR-L2序列，所述HVR-L2序列包含氨基酸序列X48ASX49X50YX51 (SEQ ID NO:56)，其中 X48 = S 或 F ;X49 = F 或 Y ;X50 = L 或 R ；X51 = S，P，R，K或W，或选自由以下各项组成的组的氨基酸序列:SEQ ID N0:58-64。在一个实施方案中，提供结合BACEl的分离的抗体，其中所述抗体降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含HVR-L3序列，所述HVR-L3序列包含氨基酸序列QQFPTYX52PT (SEQID NO:57)，其中X52 = L，Q，S或K，或选自由以下各项组成的组的氨基酸序列:SEQ ID NO:65-67。在一个实施方案中，提供结合BACEl的分离的抗体，其中所述抗体降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含HVR-Ll、HVR-L2和HVR-L3序列，所述HVR-Ll、HVR-L2和HVR-L3 序列对应于对于图1 (A)中的克隆 YW412.8，YW412.8.31，YW412.8.30，YW412.8.2，YW412.8.29和YW412.8.51所述的那些或对于图2(A)中的克隆Fabl2，LC6，LC9和LClO所述的那些或对于图23A-C中的克隆所述的那些。在一个实施方案中，提供结合BACEl的分离的抗体，其中所述抗体降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8的HVR-Ll序列；选自由以下各项组成的组的 HVR-L2 序列:SEQ ID NO:9, SEQ ID NO:10 或 SEQ ID NO:58-64 ;和选自由以下各项组成的组的HVR-L3序列:SEQ ID NO:11-16和65-67。在另一方面中，提供结合BACEl的分离的抗体，其中所述抗体降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含SEQ ID NO:7的HVR-Ll 序列，SEQ ID NO:9 的 HVR-L2 序列和 SEQ ID NO:12 的 HVR-L3 序列。
在另一个实施方案中，提供结合BACEl的分离的抗体，其中所述抗体降低或抑制BACEl 多肽的活性并且包含 SEQ ID NO -J, SEQ ID NO:8 或 SEQ ID NO:35 的 HVR-Ll 序列。在另一个实施方案中，提供结合BACEl的分离的抗体，其中所述抗体降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含SEQ ID NO =9-10,36-39或58-64的HVR-L2序列。在另一个实施方案中，提供结合BACEl的分离的抗体，其中所述抗体降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含SEQ ID NO =11-16,40或65-67的HVR-L3序列。在另一个实施方案中，提供结合BACEl的分离的抗体，其中所述抗体降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含可变轻(VL)链序列，所述可变轻(VL)链序列具有选自由以下各项组成的组的氨基酸序列:SEQ ID NO:1-6,31-34和99-117。在一方面中，所述VL链氨基酸序列是SEQ ID NO:2o在另一个实施方案中，提供结合BACEl的分离的抗体，其中所述抗体降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含SEQ ID NO:23的HVR-Hl序列，SEQ ID NO:24的HVR-H2序列，SEQ ID NO:25 的 HVR-H3 序列，SEQ ID NO:7 的 HVR-Ll，SEQ ID NO:9 的 HVR-L2 和 SEQ IDNO: 12 的 HVR-L3。在一个实施方案中，提供结合BACEl的分离的抗体，其中所述抗体降低或抑制BACEl多肽的活性并且包含含有SEQ ID NO:2的氨基酸序列的VL链和含有SEQ ID NO:21的氨基酸序列的VH链。在另一个实施方案中，提供分离的抗体，所述分离的抗体结合一个表位，所述表位包含至少一个选自由以下各项组成的组的BACEl的氨基酸残基:SEQ ID NO:49的314SER ；316GLU ；317LYS ；327GLN ；330CYS ；33ITRP ；332GLN ；335THR ;和 378ASP。在某些实施方案中，所述抗体结合BACEl的一个表位，所述表位包含氨基酸:SEQ ID NO:49的314SER ；316GLU ；317LYS ；327GLN ；330CYS ；33ITRP ；332GLN ；335THR ;和 378ASP。在其他实施方案中，所述抗体结合BACEl的一个表位,所述表位包含至少一个选自由以下各项组成的组的BACEl的氨基酸区域:SEQ ID NO:49的氨基酸315-318 ；SEQ IDNO:49的氨基酸331-335 ；SEQ ID NO:49的氨基酸370-381 ;及其任意组合。在一个实施方案中，所述抗体结合BACEl的一个表位，所述表位包含SEQ ID NO:49的氨基酸315-318，331-335 和 370-381 ο在另一个实施方案中，所述抗体结合BACEl的一个表位，其经结合导致BACEl的P6和P7位点的结构的构象变化。在另一个实施方案中，所述抗体结合包括SEQ ID N0:49的氨基酸218-231的BACEl的表位从而采取随机环结构。本发明的抗体可以以任何数目的形式。例如，本发明的抗体可以是人抗体，人源化抗体或嵌合抗体。在其他方面中，本发明的抗体是全长抗体或其片段(例如，包含抗原结合组件的片段)。在本发明的其他方面中，所述抗体是单克隆抗体。在另一方面中，本发明的抗体可以连接到或缀合到试剂或部分，例如细胞毒性剂，以产生免疫缀合物。在一个实施方案中 ，提供药物制剂，其包含本发明的抗体和药用载体。在另外的实施方案中，提供编码编码本发明的抗体的分离的核酸，以及包含编码本发明的抗体的核酸的载体。在另一方面中，提供包含编码本发明的抗体的核酸的宿主细胞，以及产生本发明的抗体的方法，所述方法包括在适于产生所述抗体的条件下培养包含编码本发明的抗体的核酸的宿主细胞。在另一个实施方案中，提供治疗患有神经疾病或病症的个体的方法，所述方法包括向所述个体给药有效量的本发明的抗体。在另一个实施方案中，提供在患有神经疾病或病症或处于感染神经疾病或病症的风险的患者中减少淀粉状蛋白斑，或抑制淀粉状蛋白斑形成的方法，所述方法包括向所述个体给药有效量的本发明的抗体。在一个实施方案中，减少患者的Αβ蛋白的方法，所述方法包括向所述患者给药有效量的本发明的抗体。在一方面中，患者患有神经疾病或病症，或处于感染神经疾病或病症的风险。在另一个实施方案中，提供抑制患者的轴突变性的方法，所述方法包括向所述患者给药有效量的本发明的抗体。在另一个实施方案中，诊断患者的神经疾病或病症的方法，所述方法包括将分离自所述患者的生物样品与本发明的抗体在适于所述抗体与BACEl多肽结合的条件下接触，并且检测在所述抗体和所述BACEl多肽之间是否形成复合物。在一个实施方案中，确定患者是否适合利用抗-BACEl抗体治疗的方法，所述方法包括将分离自所述患者的生物样品与本发明的抗体在适于所述抗体与BACEl多肽结合的条件下接触，并且检测在所述抗体和所述BACEl多肽之间是否形成复合物，其中在所述抗体和BACEl之间存在复合物表明患者适合利用抗-BACEl抗体治疗。在一方面中，所述患者患有神经疾病或病症，或处于感染神经疾病或病症的风险。
在一方面中，可以用于诊断神经疾病或病症；或用于预测应答性，确定患者对利用BACEl抗体的治疗的适当性的生物样品包括但不限于流体如血清，血浆，唾液，胃分泌物，粘液，脑脊液，淋巴液等，或获得自生物体的组织或细胞样品如神经组织，脑组织，心脏组织或血管组织。在本发明的方法的一方面中，所述患者是哺乳动物。在另一方面中，所述患者是人。在另一方面中，所述神经疾病或病症选自由以下各项组成的组:阿尔茨海默病(AD),外伤性脑损伤(traumatic brain injury),卒中，青光眼，痴呆，肌营养不良(muscular dystrophy) (MD),多发性硬化(multiple sclerosis) (MS)，肌萎缩性侧索硬化(ALS),囊性纤维化(cystic fibrosis),安吉尔曼综合征(Angelman’ ssyndrome),利德尔综合征(Liddle syndrome)，佩吉特病(Paget’ s disease),外伤性脑损伤，雷维小体病(Lewy body disease),脊髓灰质炎后综合征(postpoliomyelitissyndrome),夏伊-德雷格综合征(Shy-Draeger syndrome),橄榄体脑桥小脑萎缩(olivopontocerebellar atrophy),帕金森病(Parkinson, s disease),多系统萎缩(multiple system atrophy),纹状体黑质变性(striatonigral degeneration),核上性麻痹(supranuclear palsy),牛海绵状脑病(bovine spongiform encephalopathy),痒病(scrapie)，克-雅综合征(Creutzfeldt-Jakob syndrome)，库鲁病(kuru)，格-施-沙病(Gerstmann-Straussler-Scheinker disease),慢性消耗性疾病(chronic wasting disease),致命性家族性失眠症(fatal familial insomnia),延髓性麻痹(bulbar palsy),运动神经元病(motor neuron disease),卡纳范病(Canavan disease),亨廷顿病(Huntington ' s disease),神经元腊样脂褐素沉积症(neuronal ceroid-lipofuscinosis)，亚历山大病(Alexander ' s disease)，图雷特综合征(Tourette1 s syndrome),门克斯扭结发综合征(Menkes kinky hair syndrome),科凯恩综合征(Cockayne syndrome),哈勒沃登-施帕茨综合征(Halervorden-Spatzsyndrome),拉福拉病(lafora disease),雷特综合征(Rett syndrome),肝豆状核变性(hepatolenticular degeneration),莱施-奈恩综合征(Lesch-Nyhan syndrome),和翁-隆综合征(Unverricht-Lundborg syndrome),痴呆(包括但不限于,皮克病(Pick, sdisease),和脊髓小脑 性共济失调(spinocerebellar ataxia))。在一方面中,所述神经疾病或病症是阿尔茨海默病。在一个实施方案中，提供由抗体或其片段特异性识别的BACEl表位，所述表位包含至少一个对应于选自有以下各项组成的组的氨基酸的BACEl的氨基酸残基:SEQ ID NO:49 的 314SER ；316GLU ；317LYS ；327GLN ；330CYS ；331TRY ；332GLN ；335THR ；和 378ASP。在一方面中，所述 BACEl 表位包含对应于 SEQ ID NO:49 的 314SER ；316GLU ；317LYS ；327GLN ；330CYS ；33ITRY ；332GLN ；335THR ;和 378ASP 的氨基酸。在一个实施方案中，由抗体或其片段特异性识别的BACEl表位，所述表位包含至少一个选自有以下各项组成的组的BACEl的氨基酸区域:SEQ ID NO:49的氨基酸315-318 ;SEQ ID NO:49的氨基酸331-335 ；SEQ ID NO:49的氨基酸370-381 ;及其任意组合。在一方面中，所述BACEl表位包含SEQ ID NO:49的氨基酸315-318，331-335和370-381。附图简述图1A-1B显示获得自首次用于实验(naive)类型的天然多样性噬菌体展示文库的克隆YW412.8和亲和力成熟形式的YW412.8的轻和重链氨基酸序列，如在实施例1 (A)中所述。图1A显示轻链序列比对。图1B显示重链序列比对。在图1A和IB中，每个克隆的HVR序列由加框的区域指示，其中第一框指示HVR-Ll (SEQ ID NO:7和8-图1A)或HVR-Hl (SEQID NO:22 和 23-图 1B)，第二框指示 HVR-L2 (SEQ ID NO:9 和 10-图 1A)或 HVR-H2 (SEQ IDNO:24-图 1B)，而第三框指示 HVR-L3 (SEQ ID NO:11-16-图 1A)或 HVR-H3 (SEQ ID NO:25-图 1B)。图2A-2B显示获得自首次用于实验类型的合成多样性噬菌体展示文库的克隆Fab12和亲和力成熟形式的Fabl2的轻和重链氨基酸序列，如在实施例1 (B)中所述。图2A显示轻链序列比对。图2B显示重链序列比对。在图2A和2B中，每个克隆的HVR序列由加框的区域指示，其中第一框指示HVR-Ll (SEQ ID NO:35-图2A)或HVR-Hl (SEQ ID N0:28_图2B)，第二框指示 HVR-L2 (SEQ ID NO:36-39-图 2A)或 HVR-H2 (SEQ ID NO:29~ 图 2B)，而第三框指示 HVR-L3 (SEQ ID NO:40_ 图 2A)或 HVR-H3 (SEQ ID NO:30_ 图 2B)。图3A和3B显示来自分离自合成的多样性噬菌体展示文库的轻和重链Fab的HVR或CDR序列，如在实施例1(B)中所述。编号是根据Kabat等的命名法。图3A公开了如SEQID NO:133 的〃 CDRLl "序列，如 SEQ ID NO:134 的〃 CDRL2"序列，如 SEQ ID N0135-144、141和 145-152 的"CDRL3"序列，以及如 SEQ ID N0153-159，158，160-161，159，158，162，161，和163-167的〃CDRHl "序·列，都分别以出现的次序列出。图3B公开了如SEQID N0168-177,174，171，178-182，177，和 183 的"CDRH2"序列，以及如 SEQ ID N0184-202 的"CDRH3"序列，都分别以出现的次序列出。图4提供显示鉴定自天然多样性和合成的多样性噬菌体展示文库的不同克隆对BACEl的抑制的图。在均相时间分辨荧光(HTRF)测定中测试所述克隆对BACEl的抑制，如实施例I㈧中所述的。所有YW系列抗体都以500nM的浓度，除了 YW434.6抗体，其以320nM的浓度被测试。抗体 12.1gG, 14.1gG LC6.1gG, LC9.1gG, LC10.1gG 和 LC11.1gG 以 I μ M 的浓度测试。图5是这样的图，其显示在HTRF测定中在鉴定自合成的多样性噬菌体展示文库的抗-BACElFab存在下的BACEl的活性，如在实施例1(B)中所述。线对应于在BACEl和底物(PBS对照)存在下的100%活性(0%抑制)，和在不存在BACEl情况下的100%抑制。图6显示亲和力成熟的抗-BACElFab的⑶R或HVR序列，如在实施例1 (B)中所述。编号是根据Kabat等的命名法。竞争ELISA比率是在单点(one-point)竞争ELISA测定中在溶液中不存在20nM BACEl或存在20nM BACEl作为竞争者的情况下ELISA信号的比率，如在实施例1(B)中所述。图6公开了〃 CDRLl "序列，如SEQ ID N0133，133，133，133，133 和 203; " CDRL2"序列，如 SEQ ID N0134，134 和 204-207 ; " CDRL3"序列，如 SEQID N0208-209，145，145 和 145-146 ; " CDRHl "序列，如 SEQ ID N0157，157，158，158，158和 162，" CDRH2〃 序列，如 SEQ ID N0172，172，171，171，171 和 178 ;以及〃 CDRH3"序列，如SEQ ID N0188，188，195，195和195-196，都分别以出现的次序列出。图7A-7C包括这样的图，所述图显示来自利用亲和力成熟的抗-BACE克隆进行的竞争性ELISA测定的数据，如在实施例1(B)中所述。Fab展示噬菌体和固定在平板上的BACEl之间的结合与在溶液中的BACEl的连续稀释进行竞争。图7A、7B和7C显示亲本和相应的亲和力成熟的抗体的竞争曲线。
图8A-8C显示这样的图，其显示在HTRF酶测定中抗-BACElFab对BACEl的抑制，如在实施例1⑶中所述。纯化的Fab对个体抗-BACEl克隆的抑制活性在HTRF酶测定中被测量。0M99-2(CalBiochem ，目录号496000)，是BACEl的合成的肽抑制剂，并被用作阳性对照。图8A、8B和8C是亲本和相应的亲和力成熟的衍生物的抑制曲线。在该测定中，0M99-2 的 IC5tl 是 llnM。图9A提供这样的图，该图显示亲和力成熟的YW412.8.31抗-BACEl抗体对人重组BACEl的体外酶活性的影响，使用在HTRF测定中具有增强的对BACEl的敏感性的长肽底物(左图)，或在FRET测定中具有增强的对BACEl的敏感性的短肽底物(右图)，如在实施例2⑶中所述。()\W9-2(CalBiochem ，目录号496000)，BACEl的合成的肽抑制剂，β-分泌酶抑制剂iv( CalBiochem ，I I泌'} 565788)，BACEl的小分子抑制剂(BACE1SMI)和不结合BACEl的IgG抗体被用作对照。图9B-1和9B-2还提供这样的图，该图显示在YW412.8.31或对照IgG抗体存在下，人重组BACEl胞外结构域，人重组BACE2胞外结构域，或组织蛋白酶D胞外结构域对具有增强的对BACEl的敏感性的短肽底物的体外酶活性，如在实施例2⑶中所述。图10显示在重组淀粉状蛋白前体蛋白(APP)在293-HEK细胞中的加工过程中利用不同抗-BACEl 抗体(LC6，LC9, YW412.8，YW412.8.30，YW412.8.31 和 YW412.8.51)进行的实验的结果，如在实施例2(C)中所述。不结合BACEl (Xolair )的IgG抗体用作对照。图11A-11D提供这样的图，该图显示YW412.8.31抗-BACEl抗体对重组或内源淀粉状蛋白前体蛋白(APP)的加工的作用，如在实施例2(C)中所述。图1lA显示来自使用稳定表达野生型人APP的293-HEK细胞的实验的结果。BACE1SMI是小分子BACEl抑制剂，其被用作对照(化合物 8e-Charrier 等，J.Med.Chem.51:3313-3317 (2008)。图1lB 显示来自使用培养自野生型CDl小鼠的E13.5背根神经节神经元的实验的结果。另外的实验使用来自野生型⑶I小鼠的E16.5皮层神经元(图11C)和E16.5培养的海马神经元(图11D)的培养物进行。图12A-12C提供吸收到原发性`小鼠神经元中的YW412.8.31抗-BACEl抗体的图像，如在实施例2(D)中所述。图12A显示YW412.8.31抗-BACEl抗体向神经元中的胞内小泡中的内化。将胚胎皮层神经元在37°C温育达指定的时间。利用α -人-Alexa568在表面(非透化的)或内部(透化的)细胞部分上检测结合的YW412.8.31。大部分的信号被内化。通过利用指定的用于脉管部分的标记物进行共染色，内化的YW412.8.31被定位于以下亚细胞部分:早期核内体(TfR);反式高尔基网络(VAMP4)和溶酶体(LAMPl)。比例尺条=65 4 111(顶部)和20 μ m(底部)。图12B显示:在两个不同温度和三个不同时间点，抗-BACEl抗体摄入E13.5背根神经节(DRG)神经元中，如图中所示。细胞被透化以允许标记胞内BACEl抗体。在非透化的细胞中，仅外部结合的YW412.8.31抗-BACEl抗体被标记。图12 (C)显示YW412.8.31抗-BACEl抗体摄入到来自表达BACEl的小鼠或BACEl敲除小鼠的E16.5皮层神经元中。图13提供来自实施例3(A)的ELISA结果的图示，其将YW412.8抗-BACEl抗体与其自身、另一种抗-BACEl抗体(LC6)，活性位点BACEl结合肽(0M99-2 ( CalBiochem ，目录号 496000))和外结合位点 BACEl 结合妝(BMSl) (Kornacker 等，Biochemistry44:11567-11572(2005)中的肽I)的竞争性结合相比较。
图14显示与人BACEl胞外结构域共结晶的Fab YW412.8.31的2.8 A结构的不同视图，如在实施例3 (B)中所述。Fab结合在分泌酶活性位点远侧的BACEl外结合位点，该外结合位点与已知与具有BACEl抑制性质的某些肽相互作用的另一个外结合位点部分重叠。图15提供Fab YW412.8.31与人BACEl胞外结构域的相互作用的局部放大图。BACEl以表面表示显示,而Fab被显示为带状物。加点的表面指示BACEl表位。图16A和16B显示检测在野生型小鼠中BACEl对A β L水平的贡献的实验的结果。检测BACEl+/+小鼠中的A β !_40水平对比BACEl-/-小鼠中的A β ^40水平。以单剂量的对照IgG抗体或抗-BACE YW412.8.31抗体给小鼠用药，如在实施例4中所述。图16Α显示检测在小鼠中BACEI对A β ^产生的贡献的遗传研究的结果。在BACEI敲除小鼠(BACE1-/-)中观察到的A β H。水平为BACEl的特异性抑制剂如何改变野生型小鼠中的A β H。产生提供了对照。图16Β显示用药对照IgG或抗-BACE1YW412.8.31 (50mg/kg)在用药后24或48小时对血浆和CNS(皮层)中Αβ ^产生的影响。通过向C57B1/6小鼠进行IV注射递送单剂量的对照IgG或抗-BACEl抗体(50mg/kg)。24或48小时后，收集血浆和脑样品以分析A β η。。血浆A β !_40减少35% (在24小时)，皮层A β ^40减少 20%。绘制的值是平均值(土SEM)*p < 0.01 ;**p < 0.001。图17A-17B提供实施例4中所述的体内YW412.8.31抗-BACEl抗体实验的结果。图17A显示在用YW412.8.31抗-BACEl抗体以两个不同浓度处理(与赋形剂对照处理相比)的小鼠的血浆和海马 中观察到的Aii1,水平的图。图17B是个体药物动力学对比药效学读数的图，指示对于YW412.8.31抗-BACEl抗体，PK/PD关系存在于该小鼠模型中。图18A和18B显示来自实验的比较，其中hAPP-转基因小鼠被全身(图A，与在为比较而重新绘制的图17A中描述的相同的实验)或通过连续ICV输注(图B)用药以YW412.8.31抗-BACEl抗体。在图18A中，动物通过IP注射(3剂量0Q4D)接收赋形剂或抗-BACEl抗体(30或100mg/kg)。在最后的剂量后2小时，收集血浆和脑样品以分析A β H0和A β卜42。以30和100mg/kg的抗-BACEl抗体，血浆A β卜40和A β ^42减少至 30 %对照水平。海马Αβ H。和Αβ卜42被高剂量的抗-BACEl (100mg/kg)减少(13-22% )，皮层Αβ 卜42显示减少的趋势(12-18% )。在图18Β中，通过单侧ICV输注递送对照IgG或抗-BACEl抗体7天。以两种剂量都观察到Aβ ^和Αβ卜42的一致减少:在皮层中(15-23%)，在海马中(15-20%)。图C显示在全身对比ICV递送后抗-BACEl抗体在脑中的水平。绘制的值是平均值(土 SEM)*p < 0.05 ;**p < 0.001图19A和19B显示经由IV注射递送到BALB/C小鼠的单剂量的YW412.8.31抗-BACEl (I或10mg/kg)的PK分析(图19A)。分析血清PK直至用药后21天。使用两个分开的PK测定:一个测定检测血清中的所有抗-BACEl (总mAb)，而一个测定仅检测血清中未结合的抗-BACEl (游离mAb)。BACE1+/+，BACEl+/-和BACEl-/-小鼠中的单剂量PK分析确认了在初始研究中观察到的非线性，并且表明提高的清除率确实是靶标介导的(图19B)。图20A和20B显示通过IV递送用药以对照IgG或YW412.8.31抗-BACEl抗体(30mg/kg)的食蟹猴的PK分析。使用猴吸附的山羊抗-人IgG多克隆抗体(Bethyl,Montgomery, TX)测量在猴血清(图20A)和CSF样品(图20B)中的总抗-BACEl或对照抗体浓度，如在实施例5中所述。图21A-21D是如在实施例5中所述的实验的结果，在所述实验中通过IV递送给食蟹猴用药以对照IgG或抗-BACEl抗体YW412.8.31。阴影线显示个体动物的数据，实线显示组平均。在7天、2天以及在用药前采样血浆和CSF以设置每个个体猴中Aii1,基线水平的平均值。在不同时间测量血浆A β 图21A)和CSF Αβ 图21B)。在基线血浆(图21C)和CSF (图21 )Αβ H。动物间的可变性也被显示。图22Α和22Β显示在野生型小鼠中在全身用药YW412.8.31后的A β产生。图22Α是这样的图，其显示在通过IP注射向C57B1/6J小鼠给药单剂量的对照IgG或YW412.8.31(100mg/kg)后的A β卜4(|产生。4小时后，收集血浆和脑样品以分析A β 血浆A 减少了 48 %，但是在该范例中前脑A β U未减少。图22Β是这样的图，其显示在通过3次IP注射(每次相隔4天)给药对照IgG或YW412.8.31 (30或100mg/kg)后的A β ^40产生。在最后剂量4小时后，收集血浆和脑样品以分析Ai^4tlt5血浆Ai^4tl减少了 50-53%，而前脑Αβ卜#当以30mg/kg用药时未减少，而当以100mg/kg用药时减少了 42%。绘制的值是平均值(土 SEM)*p < 0.0001图23A-23C显示克隆YW412.8.31和亲和力成熟形式的YW412.8.31的轻链氨基酸序列。图23A-23C显示完全轻链序列比对。每个克隆的HVR序列由加框的区域指示，其中第一框指示 HVR-Ll (SEQ ID NO -J-图 23A)，第二框指示 HVR-L2 (SEQ ID NO:9 和 58-64-图23B)，而第三框指示 HVR-L3 (SEQ ID NO:12 和 66-67-图 23C)。图24A-24C显示克隆YW412.8.31和亲和力成熟形式的YW412.8.31的重链氨基酸序列。图24A-24C显示完全重链序列比对。每个克隆的HVR序列由加框的区域指示，其中第一框指示 HVR-Hl (SEQ ID NO:24 和 71-73-图 24A)，第二框指示 HVR-H2 (SEQ ID NO:24和 74-78-图 24B)，而第三框指示 HVR-H3 (SEQ ID NO:25 和 79-图 24C)。图25A和B显示这样 的图，所述图显示在如在实施例6中所述的HTRF测定中YW412.8.31和亲和力成熟的克隆对BACEl的抑制。测试克隆YW412.8.31.3S ；YW412.8.31.9S ；YW412.8.31.25S ；YW412.8.31.58S ；YW412.8.31.53 ；YW412.8.31.69 ；YW412.8.31.77 ；YW412.8.31.81S 和 YW412.8.31.89S 抑制 BACEl 的蛋白酶活性的能力。发明实施方案详述定义用于本文目的的“接纳体人构架”是包含衍生自人免疫球蛋白构架或如下所定义的人共有构架的轻链可变结构域(VL)构架或重链可变结构域(VH)构架的氨基酸序列的构架。“衍生自”人免疫球蛋白构架或人共有构架的接纳体人构架可以包含其相同的氨基酸序列，或其可以包含氨基酸序列的变化。在一些实施方案中，氨基酸变化的数目为10以下，9以下，8以下，7以下，6以下，5以下，4以下，3以下，或2以下。在一些实施方案中，VL接纳体人构架的序列与VL人免疫球蛋白构架序列或人共有构架序列相同。“亲和力”是指分子(例如抗体)的单一结合位点与其结合配偶体(例如抗原)之间全部非共价相互作用总和的强度。除非另有说明，在用于本文时，“结合亲和力”指反映结合对的成员(例如抗体与抗原)之间1:1相互作用的内在结合亲和力。分子X对其配偶体Y的亲和力通常可用解离常数(Kd)来表述。亲和力可通过本领域知道的常用方法来测量，包括本文中所描述的那些。用于测量结合亲合力的具体说明性和示例性实施方案描述于以下。
“亲和力成熟的”抗体指这样的抗体，在该抗体的一个或多个高变区(HVR)中具有一处或多处改变，导致该抗体对抗原的亲和力与没有这些改变的亲本抗体相比有提高。术语“抗-β -分泌酶抗体”、“抗-BACEl抗体”、“结合β -分泌酶的抗体”和“结合BACEl的抗体”是指这样的抗体，所述抗体能够以足够的亲合力结合BACEl抗体以致所述抗体可以用作靶向BACEl中的诊断剂和/或治疗剂。在一个实施方案中，抗-BACEl抗体与不相关的、非BACEl蛋白结合的程度低于所述抗体与BACEl结合的约10%，如例如通过放射性免疫测定(RIA)测量的。在某些实施方案中，结合BACEl的抗体的解离常数(Kd)彡I μ Μ，(IOOnM, ( IOnM, ( InM, ( 0.1nM, ( 0.0lnM,或彡 0.00InM(例如 KT8M 以下，例如 KT8M至10_13Μ，例如10_9Μ至I(T13M)。在某些实施方案中，抗-BACEl抗体结合在来自不同物种和同种型的BACEl中保守的BACEl表位。术语"抗体"在本文中以最广义使用，并且包括不同抗体结构，包括但不限于单克隆抗体，多克隆抗体，多特异性抗体(例如，双特异性抗体)，和抗体片段，只要它们显示所需的抗原结合活性。"抗体片段"是指 不同于完整抗体的分子，其包含完整抗体的部分，所述部分结合完整抗体结合的抗原。抗体片段的实例包括但不限于Fv，Fab，Fab'，Fab’_SH，F(ab' )2 ；双抗体；线性抗体；单链抗体分子(例如scFv);和由抗体片段形成的多特异性抗体。与参照抗体“结合相同表位的抗体”是指这样的抗体，其在竞争测定中阻断50%以上的所述参照抗体与其抗原的结合，反之，参照抗体在竞争测定中阻断50%以上的该抗体与其抗原的结合。本文中提供一个示例性竞争测定。术语“嵌合”抗体是指这样的抗体，其中一部分重链和/或轻链来源于特定来源或物种，而剩余的重链和/或轻链来源于不同来源或物种。抗体的“类别”是指其重链具有的恒定结构域或恒定区的类型。有五个主要类别的抗体:IgA，IgD，IgE，IgG和IgM，并且这些中的数个可以进一步被划分为亚类(同种型)，例如，IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1和IgA2。对应于不同类别的免疫球蛋白的重链恒定结构域分别被称为α，δ，ε，γ和μ。术语“细胞毒性剂”用在本发明中指抑制或防止细胞功能和/或引起细胞死亡或破坏的物质。细胞毒性剂包括但不限于:放射性同位素(例如，At211，I131，I125，Y90，Re186, Re188, Sm153, Bi212，P32，pb212和Lu的放射性同位素)；化疗剂或药物(例如，甲氨蝶呤(methotrexate),阿霉素(adriamicin),长春花生物喊(vinca alkaloids)(长春新碱(vincristine)，长春碱(vinblastine),依托泊苷(etoposide)),多柔比星(doxorubicin),美法仑(melphalan),丝裂霉素(mitomycin) C,苯丁酸氮芥(chlorambucil),柔红霉素(daunorubicin)或其它嵌入剂)；生长抑制剂；酶及其片段如核酸水解酶；抗生素；毒素如小分子毒素或细菌、真菌、植物或动物起源的酶促活性毒素，包括其片段和/或变体；和下面公开的各种抗肿瘤或抗癌剂。“效应子功能”指那些可归于抗体Fe区且随抗体同种型而变化的生物学活性。抗体效应子功能的实例包括=Clq结合和补体依赖性细胞毒性(CDC) ；Fc受体结合；抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC);吞噬作用；细胞表面受体(例如B细胞受体)下调jPB细胞活化。试剂例如药物制剂的"有效量"是指在需要的剂量和时间阶段有效获得所需的治疗或预防结果的量。
术语“Fe区”在本文中用于定义免疫球蛋白重链的C端区域，所述区域包含至少一部分的恒定区。该术语包括天然序列Fe区和变体Fe区。在一个实施方案中，人IgG重链Fe区从Cys226或Pr0230延伸至重链的羰基端。然而，Fe区的C端赖氨酸(Lys447)可以存在或者可以不存在。除非另外说明，Fe区或恒定区中的氨基酸残基的编号是根据EU编号系统，其也被称为 EU 索引，如在 Kabat 等，Sequences ofProteins of ImmunologicalInterest (免疫学感兴趣的蛋白质的序列)，5th Ed.Public Health Service, NationalInstitutes of Health, Bethesda, MD, 1991 中所述。"构架"或"FR"是指除高变区(HVR)残基之外的可变结构域残基。可变结构域的FR通常由四个FR结构域组成:FR1，FR2，FR3和FR4。因此，HVR和FR序列通常出现在VH(或 VL)的以下序列中:FR1-H1(L1)-FR2-H2(L2)-FR3-H3(L3)-FR4。术语“全长抗体”、“完整的抗体”和“完整抗体”在本文被可交换地用于指结构与天然抗体结构基本相似或具有包含如本文所定义的Fe区的重链的抗体。术语"宿主细胞"、"宿主细胞系"和"宿主细胞培养物"被可交换地使用并且是指其中引入外源核酸的细胞，包括这种细胞的后代。宿主细胞包括"转化体"和"转化的细胞"，其包括初级转化的细胞和来源于其的后代，而不考虑传代的数目。后代在核酸含量上可能与亲本细胞不完全相同，而是可以包含突变。本文中包括与在最初转化的细胞中筛选或选择的具有相同功能或生物学活性的突变体后代。“人抗体”指具有这样的氨基酸序列的抗体，所述氨基酸序列对应于这样抗体的氨基酸序列，所述抗体由人或人细胞生成或来源于非人来源，其利用人抗体库或其它人抗体编码序列。人抗体的这种定义明确排除包含非人抗原结合残基的人源化抗体。“人共有构架”是指这样的构架，即在选择人免疫球蛋白VL或VH构架序列中，其代表最常出现的氨基酸残基。一般而言，对人免疫球蛋白VL或VH序列的选择是从可变结构域序列的亚型中选择。 一般而言，该序列的亚型是如Kabat等，Sequences ofProteins of Immunological Interest (免疫学感兴趣的蛋白质的序列)，第五版，NIHPublication91-3242, Bethesda MD (1991)，1-3 卷中的亚型。在一个实施方案中，对于 VL，该亚型是如Kabat等(见上文)中的亚型K I。在一个实施方案中，对于VH，该亚型是如Kabat等(见上文)中的亚型III。“人源化”抗体是指包含来自非人HVR的氨基酸残基和来自人FR的氨基酸残基的嵌合抗体。在某些实施方案中，人源化抗体将包含基本上所有的至少一个、通常两个可变结构域，其中所有或基本上所有的HVR(例如，CDR)对应于非人抗体的那些，并且所有或基本上所有的FR对应于人抗体的那些。人源化抗体任选可以包含至少一部分的来源于人抗体的抗体恒定区。抗体(例如非人抗体)的“人源化形式”是指已经进行了人源化的抗体。术语“高变区”或“HVR”当在本文中使用时，是指抗体可变结构域的每个区域，其序列高可变和/或形成结构上限定的环(“高变环”)。通常，天然四链抗体包含六个HVR;三个在VH(H1，H2，H3)中，三个在VL(L1，L2，L3)中。HVR通常包含来自高变环和/或“互补决定区”(CDR)的氨基酸残基，后者具有最高序列可变性和/或涉及抗原识别。示例性高变环发生在氨基酸残基 26-32 (LI)，50-52 (L2) ,91-96 (L3)，26-32 (Hl)，53-55 (H2)，和96-101 (H3) ο (Chothia 和 Lesk，J.Mol.Biol.196:901-917 (1987))。示例性 CDR(CDR_L1，CDR-L2，CDR-L3，CDR-Hl，CDR-H2，和 CDR-H3)发生在氨基酸残基 LI 的 24-34，L2 的 50-56，L3的 89-97，Hl 的 31_35B，H2 的 50-65，和 H3 的 95-102。(Kabat 等，Sequences of Proteinsof Immunological Interest (免疫学感兴趣的蛋白质的序列)，5th Ed.Public HealthService,National Institutes of Health,Bethesda,MD(1991))。除了 VH 中的 CDR1,CDR通常包含形成高变环的氨基酸残基。⑶R还包含“特异性决定残基”或“SDR”，其是与抗原接触的残基。SDR包含在被称为缩短的(abbreviated)-⑶R或a_⑶R的⑶R区域中。示例性 a-CDR(a-CDR-Ll，a_CDR_L2，a_CDR_L3，a-CDR-Hl，a_CDR-H2，和 a_CDR-H3)发生在氨基酸残基 LI 的 31-34，L2 的 50-55，L3 的 89-96，Hl 的 31_35B，H2 的 50-58，和 H3 的 95-102。(见 Almagro 和 Fransson, Front.Biosc1.13:1619-1633 (2008))。除非另外说明，可变结构域中的HVR残基和其他残基(例如，FR残基)在本文中根据Kabat等(见上文)编号。“免疫缀合物”是与一个或多个异源分子(包括但不限于细胞毒性剂)缀合的抗体。“个体”或“受试者”是哺乳动物。哺乳动物包括但不限于，家养动物(例如，牛，羊，猫，狗和马)，灵长类动物(例如，人和非人灵长类动物如猴)，兔，以及啮齿类动物(例如，小鼠和大鼠)。在某些实施方案中，个体或受试者是人。"分离的"抗体是这样的抗体，其已经与其天然环境的组分分离。在一些实施方案中，将抗体纯化至超过95%或99%纯度，如通过例如电泳(例如，SDS-PAGE，等电聚焦(IEF)，毛细管电泳)或层析(例如，离子交换或反相HPLC)确定的。对于用于评估抗体纯度的方法的综述，参见，例如，Flatman 等，J.Chromatogr.B848:79-87 (2007)。"分离的"核酸是指这样的核酸分子，其已经与其天然环境的组分分离。分离的核酸包括包含在通常包含该核酸分子的细胞中的核酸分子，但是该核酸分子存在于染色体外或在不同于其天然染色体位置的染色体位置处。“分离的编码抗-BACEl抗体的核酸”是指一个或多个核酸分子，其编码抗体重和轻链(或其片段)，包括在单一载 体或分开的载体中的这样的核酸分子，以及存在于宿主细胞中的一个或多个位置处的这样的核酸分子。术语“单克隆抗体”在用于本文时指从一群基本上同质的抗体中获得的抗体，即除了可能的变体抗体(该变体抗体例如含有天然存在的突变或在产生单克隆抗体制剂的过程中出现，此类变体通常少量存在)外，构成群体的个体抗体是相同的和/或结合相同的表位。相比于通常包括针对不同决定簇(表位)的不同抗体的多克隆抗体制剂，单克隆抗体制剂中的每个单克隆抗体针对抗原上的单一决定簇。因此，修饰语“单克隆”表明抗体从基本上同质的抗体群获得的特征，不应解释为要求通过任何特定方法来产生抗体。例如，将根据本发明使用的单克隆抗体可通过多种技术来生成，包括但不限于杂交瘤法，重组DNA法，噬菌体展示法，和利用包含所有或部分的人免疫球蛋白基因座的转基因动物的方法，这样的方法和用于制备单克隆抗体的其他示例性方法描述于本文中。“裸抗体”是指没有缀合异源部分(如细胞毒性部分)或放射性标记的抗体。裸抗体可以存在于药物制剂中。"天然抗体"是指天然存在的具有变化的结构的免疫球蛋白分子。例如，天然IgG抗体是约150,000道尔顿的异源四聚体糖蛋白，其由两个相同的轻链和两个相同的重链组成，所述链通过二硫键结合。从N末端至C末端，每个重链具有可变区(VH)，其也被称为可变重结构域或重链可变结构域，其后是三个恒定结构域(CH1，CH2和CH3)。类似地，从N末端到C末端，每个轻链具有可变区(VL)，其也被称为可变轻结构域或轻链可变结构域，其后是恒定轻(CL)结构域。基于其恒定结构域的氨基酸序列，抗体的轻链可以被分配给被称为kappa (K)和Iambda(A)的两个类型中的一个。术语“包装说明书”用于指通常包括在治疗产品的商品包装中的使用说明，其包含关于适应征、用法、剂量、给药、组合疗法、禁忌症的信息和/或关于使用这样的治疗产品的
敬生
目口 O相对于参比多肽序列的“百分比)氨基酸序列同一性”定义为在将所述序列进行比对(并在必要时导入空位)以获取最大百分比序列同一性，且不将任何保守置换视为序列同一性的部分之后，候选序列中的氨基酸残基与参比多肽序列中的氨基酸残基相同的百分数。可使用本领域各种方法进行序列比对以便测定百分比氨基酸序列同一性，例如，使用公众可得到的计算机软件如BLAST、BLAST-2、ALIGN或MEGALIGN(DNASTAR)软件。本领域技术人员可以决定测量比对的适宜参数，包括对所比较的序列全长获得最大比对所需的任何算法。然而，为此目的，％氨基酸序列同一性值使用序列比较计算机程序ALIGN-2产生。ALIGN-2序列比较计算机程序的作者是Genentech，lnc，并且源代码已经随用户文档提交至美国版权局(Washington D.C.，20559)，其美国版权注册登记号为TXU510087。公众可通过Genentech, Inc.(South San Francisco, California)得到 ALIGN-2 程序，或者可以从源代码编译。ALIGN-2程序应当为在UNIX操作系统、包括数字UNIXV4.0D上使用而进行编译。ALIGN-2程序设定了所有序列比对参数并且不变。在ALIGN-2应用于氨基酸序列比较的情况中，给定氨基酸序列A相对于(to)、与(with)、或针对(against)给定氨基酸序列B的％氨基酸序列同一'丨生(或者这样说:给定氨基酸序列A具有或含有相对于、与或针对给定氨基酸序列B的某一 ％氨基酸序列同一性)如下计算: 100乘以X/Y比值其中X是用序列比对程序ALIGN-2在该程序的A和B比对中评分为相同匹配的氨基酸残基数，且其中Y是B中的氨基酸残基总数。可以理解，当氨基酸序列A与氨基酸序列B的长度不相等时，A相对于B的％氨基酸序列同一性将不等于B相对于A的％氨基酸序列同一性。除非另外具体说明，在本文用的所有％氨基酸序列同一性的值都是用ALIGN-2计算机程序如前段所描述的那样得到的。术语“药物制剂”指这样的制剂，其以允许包含在其中的活性成分的生物学活性有效的形式存在，并且不包含对施用所述制剂的受试者具有不可接受的毒性的另外的成分。“药用载体”是指药物制剂中不同于活性成分的成分，其对受试者是无毒的。药用载体包括但不限于缓冲剂、赋形剂、稳定剂或防腐剂。除非另外说明，术语“BACE1”当在本文中使用时是指来自任何脊椎动物来源(包括哺乳动物如灵长类动物(例如人)和啮齿类动物(例如，小鼠和大鼠))的任何天然β-分泌酶I (也被称为β-位淀粉状蛋白前体蛋白裂解酶1，膜相关天冬氨酸蛋白酶2，memapsin2,天冬氨酰蛋白酶2或Asp2)。该术语包括“全长”未加工的BACEl以及由细胞内加工产生的任何形式的BACEl。该术语还包括天然存在的BACEl的变体，例如，剪接变体或等位变体。示例性BACEl多肽的氨基酸序列显示在以下SEQ ID NO:49中，并且有人BACEl、同种型A的序列，如在Vassar等，Science286:735-741 (1999)中报道的，该文献通过引用完整地结合于本文中。 MAQALPWLLLWMGAGVLPAHGTQHGIRLPLRSGLGGAPLGLRLPRETDEEPEEPGRRGSFVEMVDNLRGKSGQGYYVEMTVGSPPQTLNILVDTGSSNFAVGAAPHPFLHRYYQRQLSSTYRDLRKGVYVPYTQGKWEGELGTDLVSIPHGPNVTVRANIAAITESDKFFINGSNWEGILGLAYAEIARPDDSLEPFFDSLVKQTHVPNLFSLQLCGAGFPLNQSEVLASVGGSMIIGGIDHSLYTGSLWYTPIRREWYYEVIffRVEINGQDLKMDCKEYNYDKSffDSGTTNLRLPKKVFEAAVKSIKAASSTEKFPDGFWLGEQLVCWQAGTTPWNIFPVISLYLMGEVTNQSFRITILPQQYLRPVEDVATSQDDCYKFAISQSSTGTVMGAVIMEGFYVVFDRARKRIGFAVSACHVHDEFRTAAVEGPFVTLDMEDCGYNIPQTDESTLMTIAYVMAAICALFMLPLCLMVCQWCCLRCLRQQHDDFADDISLLK(SEQ ID NO:49)存在数种其他同种型的人BACEl，包括同种型B、C和D。参见UniProtKB/Swiss-Prot Entry P56817，其通过引用完整地结合于本文中。同种型B显示在SEQ ID NO:50中并且与同种型A(SEQ ID NO:49)不同在于它缺失氨基酸190-214(即缺失SEQ ID NO:49的氨基酸190-214)。同种型C显示在SEQ ID NO:51中并且与同种型A(SEQ ID NO:49)不同在于它缺少氨基酸146-189 (即缺失SEQ ID NO:49的氨基酸146-189)。同种型D显示在SEQ ID NO:52中并且与同种型A (SEQ ID NO:49)不同在于它缺少氨基酸146-189和190-214(即缺失 SEQ ID NO:49 的氨基酸 146-189 和 190-214)。用于本文时，“治疗(t·reatment)”(及其语法变化如“治疗(treat)”或“治疗(treating) ”)指在尝试改变待治疗的个体的天然进程中的临床干预，并且可以为了预防或在临床病理学的进程中进行。治疗的理想效果包括但不限于防止疾病发生或复发，缓和症状，消除疾病的任何直接或间接病理学后果，预防转移，减少疾病进展速率，改善或减轻疾病状态，和症状缓解或改善的预后。在一些实施方案中，将本发明的抗体用于延缓疾病的发生或减缓疾病的进展。术语“可变区”或“可变结构域”是指参与抗体与抗原结合的抗体重或轻链的结构域。天然抗体的重链和轻链(VH和VL，分别地)的可变结构域通常具有相似的结构，其中每个结构域包含四个保守的构架区(FR)和三个高变区(HVR)。(参见，例如，Kindt等KubyImmunology, 6thed., W.H.Freeman 和 C0.91 页(2007))。单个 VH 或 VL 结构域可以足以给予抗原结合特异性。此外，可以使用来自与特定抗原结合的抗体的VH或VL结构域来分离结合所述抗原的抗体，以分别筛选互补VL或VH结构域的文库。参见，例如，Portolano等，J.1mmunol.150:880-887(1993) ；Clarkson 等，Nature352:624-628(1991)。术语"载体"当在本文中使用时是指能够增殖与其相连的另一个核酸的核酸分子。该术语包括作为自我复制核酸结构的载体以及结合到已经引入其的宿主细胞的基因组中的载体。一些载体能够指导与其可操作相连的核酸的表达。这样的载体在本文中被称为"表达载体"。术语"神经病症"或"神经疾病"指的是或描述了哺乳动物的中枢和/或周围神经系统中的疾病或病症。神经疾病的实例包括但不限于以下列表的疾病和病症。神经病病症是神经系统的疾病或异常，其表征为不适当或不受控的神经信号传导或对其的缺乏，并且包括但不限于，慢性疼痛(包括感受伤害的疼痛(由对身体组织的损伤引起的疼痛，包括癌相关的疼痛)，神经性疼痛(由神经、脊髓或脑中的异常引起的疼痛)，和精神性疼痛(完全或大部分相关于心理障碍)，头痛，偏头痛，神经病，以及常常伴随这样的神经病病症的症状和综合征如眩晕或恶心。淀粉状变性是一组疾病和病症，其与在CNS中的胞外蛋白质沉积物相关，其包括但不限于，继发性淀粉状变性，年龄相关性淀粉状变性，阿尔茨海默病(AD),轻度认知损伤(mild cognitive impairment,MCI),雷维小体痴呆,唐氏综合征,遗传性脑出血伴淀粉状变性(Dutch型)；Guam Parkinson-痴呆综合症状，脑淀粉状血管病，亨廷顿病，进行性核上性麻痹，多发性硬化；克-雅病，帕金森病，传递性海绵状脑病，HIV相关痴呆，肌萎缩性脊髓侧索硬化症(ALS),包涵体肌炎(inclusion-body myositis, IBM),和涉及β -淀粉状蛋白沉积的眼病(即，黄斑变性，玻璃疣相关视神经病变和白内障)。CNS的癌症表征为一个或多个CNS细胞(即，神经细胞)的异常增殖，并且包括但不限于，胶质瘤(glioma),多形性胶质母细胞瘤(glioblastoma multiforme),脑膜瘤(meningioma),星细胞瘤(astrocytoma),听神经瘤(acoustic neuroma),软骨瘤(chondroma),少突神经胶质瘤(oligodendroglioma),成神经管细胞瘤(medul1blastomas),神经节神经胶质瘤(ganglioglioma),神经鞘瘤(Schwannoma),神经纤维瘤(neurofibroma),成神经细胞瘤(neuroblastoma)，和硬膜外、髓内或硬膜内肿瘤。眼疾病或病症是眼睛的疾病或病症，为本文的目的，眼睛被视为受制于BBB的CNS器官。眼病或病症包括但不限于，巩膜、角膜、虹膜和睫状体的病症(即，巩膜炎(scleritis)、角膜炎(keratitis)、角膜溃瘍(cornealulcer),角膜擦伤(corneal abrasion),雪盲(snow blindness),电光性眼炎(arc eye),Thygeson 浅层点状角膜病变(Thygeson，s superficial punctate keratopathy)，角膜新生血管化(corneal neovascularisation),富克斯营养不良(Fuchs’ dystrophy),圆锥形角膜(keratoconus),干燥性角膜结膜炎(keratoconjunctivitis sicca),虹膜炎(iritis)和葡萄膜炎(uveitis)),晶状体的病症(即，白内障(cataract)),脉络膜和视网膜的病症(B卩，视网膜脱离(retinal detachment),视网膜劈裂症(retinoschisis),高血压性视网膜病变(hypertensive retinopathy),糖尿病视网膜病变(diabeticretinopathy),视网膜病(retinopathy),早产儿视网膜病，老年性黄斑变性(age-relatedmacular degeneration),黄斑变性(macular degeneration)(湿性或干性)，视网膜外膜(epiretinal membrane),色素性视网膜炎(retinitis pigmentosa)和黄斑水肿(macular edema))，青光眼(glaucoma),悬浮物(floaters),视神经和视觉通路的病症(即，莱伯遗传性视神经病(Leber’ s hereditary optic neuropathy)和视觉盘玻璃疣(optic disc drusen))，眼肌/双眼移动调节/折射的病症(S卩，斜视，眼肌瘫痪(ophthalmoparesis),进行性外部眼肌麻痹(opthalmoplegia),内斜视，外斜视，远视，近视，散光，屈光不正，老花眼和眼肌麻痹)，视觉障碍和失明(即，弱视，莱伯先天性黑朦(Lever，s congenital amaurosis),暗点，色盲(color blindness)，全色盲(achromatopsia),夜盲症(nyctalopia),失明(blindness),河盲(river blindness)和微眼炎 / 缺损(micro-opthalmia/coloboma)),红眼，阿盖耳罗伯逊瞳孔(Argyll Robertsonpupil),角膜真菌病(keratomycosis),干眼病和无虹膜(aniridia)。CNS的病毒或微生物感染包括但不限于由以下引起的感染，病毒(即，流感，HIV，脊髓灰质炎病毒，风疹，)，细菌(B卩，奈瑟氏球菌 属(Neisseria sp.),链球菌属(Streptococcus sp.),假单胞菌属(Pseudomonas sp.),变形菌属(Proteus sp.)，大肠杆菌(E.coli),金黄色葡萄球菌(S.aureus),肺炎球菌属(Pneumococcus sp.),脑膜炎球菌属(Meningococcus sp.),嗜血杆菌属(Haemophilus sp.),和结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis))和其他微生物如真菌(即，酵母，新型隐球菌(Cryptococcus neoformans)),寄生虫(即，弓形虫(toxoplasma gondii))或变形虫(amoebas)，导致CNS病理生理学，包括但不限于，脑膜炎，脑炎，脊髓炎，血管炎和脓肿(abscess)，其可以是急性的或慢性的。CNS的炎症是这样的炎症，其由对CNS的损伤导致，所述损伤可以是物理损伤(即，由于事故，手术，脑创伤，脊髓损伤，脑震荡(concussion)所致的)或由于或相关于一种或多种CNS的其他疾病或病症(即，脓肿，癌症，病毒或微生物感染)的损伤。当用于本文中时，CNS的缺血是指一组病症，其相关于脑部的异常血流或血管行为或其病因，并且包括但不限于，局部脑缺血(focal brain ischemia)，全局脑缺血(global brain ischemia)，卒中(即，蛛网膜下出血和脑内出血(intracerebral hemorrhage))，和动脉瘤。神经退行性疾病是一组疾病和病症，其相关于CNS中神经细胞丧失功能或死亡，并且包括但不限于，肾上腺脑白质营养不良(adrenoleukodystrophy)，亚历山大病，阿尔 白斯病(Alper’ s disease)，肌萎缩性侧索硬化，运动失调性毛细血管扩张症(ataxia telangiectasia)，Batten病(Batten disease)，科凯恩综合征，基层皮质变性(corticobasal degeneration),由淀粉状变性引起或与其相关的变性，弗里德赖希共济失调症(Friedreich’ s ataxia)，额颞叶变性(emporal lobar degeneration), Kennedy 病(Kennedy’ s disease)，多系统萎缩，多发性硬化，原发性侧索硬化，进行性核上性麻痹，脊髓性肌萎缩，横贯性脊髓炎，雷夫叙姆病(Refsrnn’ s disease)，和脊髓小脑性共济失调。CNS的发作疾病和病症涉及CNS中的不适当和/或异常电导，并且包括但不限于，癫痫(即，失神发作(absence seizures)，失张力发作(atonic seizures)，良性运动性癫痫(benign Rolandic epilepsy)，儿童期失神(childhood absence)，阵挛发作(clonic seizures)，复杂部分发作(complex partialseizures)，额叶性癫痫(frontal lobe epilepsy)，发热性癫痫发作(febrile seizures)，婴儿疫挛(infantile spasms)，少年肌阵挛性痛痫(juvenile myoclonic epilepsy),青少年期失神痛痫(juvenile absence epilepsy)，伦-格综合征(Lennox-Gastautsyndrome)，兰-克综合征(Landau-Kleffner Syndrome)，Dravet 综合征(Dravet’ ssyndrome)，Otahara 综合征(Otahara syndrome)，West 综合征(West syndrome)，肌肉阵挛性发作(myoclonic seizures)，线粒体病(mitochondrial disorders)，进行性肌阵挛性痛痫(progressive myoclonic epilepsies)，精神性发作(psychogenic seizures)，反射性痛痫(reflex epilepsy) ，Rasmussen 综合征(Rasmussen, s Syndrome)，简单部分发作(simple partial seizures)，继发性全身性痛痫发作(secondarily generalizedseizures)，颞叶痛痫(temporal lobe epilepsy)，阵挛性发作(toniclonic seizures),强直发作(tonic seizures)，精神运动发作(psychomotor seizures)，边缘叶癫痫(limbic epilepsy)，部分性癫痫发作(partial-onset seizures)，全身发作性癫痫发作(generalized-onset seizures)，痛痫持续状态(status epilepticus)，腹型痛痫(abdominal epilepsy)，失神型发作(akinetic seizures)，植物神经性发作(autonomicseizures)，大量双侧肌阵挛(massive bilateral myoclonus)，月经性痛痫(catamenialepilepsy)，跌倒发作(drop seizures)，情绪性发作(emotional seizures)，病灶性发作(focal seizures)，发笑发作(gelastic seizures)，贾克森扩布(Jacksonian March)，拉福拉病(Lafora Disease)，运动性发作(motor seizures)，多病灶性发作(multifocalseizures)，夜发作(nocturnal seizures)，光敏性发作(photosensitive seizure)，假性发作(pseudo seizures)，感觉性发作(sensory seizures)，微小发作(subtle seizures),sylvan 发作(sylvan seizures),戒断发作(withdrawal seizures),和视反射发作(visual reflex seizures))。行为障碍是CNS的病症，其表征为就受折磨的受试者而言的异常行为，并且包括但不限于，睡眠障碍(sleep disorders)(即，失眠(insomnia),深眠状态(parasomnias),夜惊(night terrors),昼夜节律睡眠障碍(circadian rhythmsleep disorders),和发作性睡病(narcolepsy)),心境障碍(mood disorders)(即，抑郁(depression),自杀性抑郁(suicidal depression),焦虑(anxiety),慢性情感障碍(chronic affective disorders),恐怖病(phobias),惊恐发作(panic attacks),强迫性障碍(obsessive-compulsive disorder),注意力缺陷伴多动障碍(attention deficithyperactivity disorder) (ADHD),注意缺陷障碍(attention deficit disorder) (ADD),慢性疲劳综合征(chronic fatigue syndrome),广场恐怖症(agoraphobia),创伤后应激障碍(post-traumatic stress disorder),双相性精神障碍(bipolar disorder)),进食障碍(即，厌食症(anorexia)或贪食症(bulimia)),精神病(psychoses),发育行为障碍(developmental behavioral disorder)(即，自闭症(autism),雷特综合征(Rett，ssyndrome), Aspberger 综合征(Aspberger’ s syndrome)),人格障碍和精神障碍(即，精神分裂症(schizophrenia),妄想障碍(delusional disorder),等)。溶酶体忙积症(Lysosomal storage disorder)是代谢病症,在一些情况中其与CNS相关或具有CNS特异性症状；这样的病症包括但不限于泰-萨克斯病(Tay-Sachs disease),戈谢病(Gaucher’sdisease)，法布里病(Fabry disease)，粘多糖贮积症(I，II，III，IV，V, VI 和 VII 型)，糖原忙积病(glycogen storage disease), GMl 神经节苷脂忙积症(GMl-gangliosidosis),异染性脑白质病变(metachromatic leukodystrophy), Farber 病(Farber’s disease),卡纳范脑白质营养不良(Canavan’sleukodystrophy),和神经元腊样脂褐素沉积症(neuronalceroid lipofuscinoses) I 型和 2 型，尼曼-皮克病(Niemann-Pick disease), Pompe 病(Pompe disease),和克拉伯病(Krabbe，s disease)。组合物和方法在一方面中，本发明部分基于结合BACEl并且降低和/或抑制BACEl活性的抗体。在某些实施方案中，提供结合到BACEl的活性位点或外结合位点的抗体。示例性抗-BACEl抗体在一方面中，本发明提供抗-BACEl抗体，所述抗-BACEl抗体包含至少一个、两个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR: (a)包含氨基酸序列SEQ ID NO:22，23，26，28，45，68，71，72，73 或 120 的 HVR-Hl ； (b)包含氨基酸序列 SEQ ID NO:24，29，46，69，74，75，76，77，78 或 121 的 HVR-H2 ； (c)包含氨基酸序列 SEQ ID NO:25，30，47，70，79 或 122 的 HVR-H3 ；(d)包含氨基酸序列SEQ ID NO:7,8,17，35或42的HVR-Ll ； (e)包含氨基酸序列SEQ IDNO:9，10，18，36-39，41，43，56，58，59，60，61，62，63，64 或 118 的 HVR-L2 ;和(f)包含氨基酸序列 SEQ ID NO19，40，44，57，65，66，67 或 119 的 HVR-L3。在一方面中，本发明提供抗体，所述抗体包含至少一个，至少两个，或所有三个选自以下的 VH HVR 序列:(a)包含氨基酸序列 SEQ ID NO:22，23，26，28，45，68，71-73 或 120的 HVR-Hl ； (b)包含氨基酸序列 SEQ ID NO:24，29，46，69，74-78 或 121 的 HVR-H2 ;和(c)包含氨基酸序列 SEQ ID NO: 25，30，47，70，79 或 122 的 HVR-H3。
在一个实施方案中，所述抗体包含HVR-Hl，所述HVR-Hl包含氨基酸序列SEQ IDNO:22 或 SEQ ID NO:23 或 SEQ ID NO:28 或 SEQ ID NO:71 或 SEQ ID NO:72 或 SEQ ID NO:73。在另一个实施方案中，所述抗体包含HVR-H2，所述HVR-H2包含氨基酸序列SEQ ID NO:24 或 SEQ ID N0:29 或 SEQ ID N0:74 或 SEQ ID N0:75 或 SEQ ID NO:76 或 SEQ ID NO:77或SEQ ID NO:780在另一个实施方案中，所述抗体包含HVR-H3，所述HVR-H3包含氨基酸序列SEQ ID N0:25或SEQ ID NO:30或SEQ ID NO:79。在一个实施方案中，所述抗体包含HVR-Hl，所述HVR-Hl包含氨基酸序列SEQ ID NO:28。在另一个实施方案中，所述抗体包含HVR-H2，所述HVR-H2包含氨基酸序列SEQ ID NO:29。在另一个实施方案中，所述抗体包含HVR-H3，所述HVR-H3包含氨基酸序列SEQ ID NO:30。在另一个实施方案中，所述抗体包含(a) HVR-Hl，所述HVR-Hl包含氨基酸序列SEQID NO:22 ； (b)HVR-H2,所述 HVR-H2 包含氨基酸序列 SEQ ID NO:24 ;和(c)HVR_H3，所述HVR-H3包含氨基酸序列SEQ ID NO: 25，或者所述抗体包含(a) HVR-Hl，所述HVR-Hl包含氨基酸序列SEQ ID NO:23 ； (b)HVR_H2，所述HVR-H2包含氨基酸序列SEQ ID NO:24 ;和(c)HVR-H3，所述HVR-H3包含氨基酸序列SEQ ID NO:25。在另一个实施方案中，所述抗体包含(a) HVR-Hl，所述HVR-Hl包含氨基酸序列SEQ ID NO:28 ； (b) HVR-H2，所述HVR-H2包含氨基酸序列SEQ ID NO:29 ;和(c) HVR-H3，所述HVR-H3包含氨基酸序列SEQ ID NO:30。在另一个实施方案中，所述抗体包含(a) HVR-Hl，所述HVR-Hl包含氨基酸序列SEQ ID NO:23 ；(b)HVR-H2，所述HVR-H2包含氨基酸序列SEQ ID NO:74 ;和(c)HVR_H3，所述HVR-H3包含氨基酸序列SEQ ID NO: 25，或者所述抗体包含(a) HVR-Hl，所述HVR-Hl包含氨基酸序列SEQ IDNO:23 ； (b)HVR-H2，所述HVR-H2 包含氨基酸序列 SEQ ID NO:75 ;和(c) HVR-H3，所述HVR-H3包含氨基酸序列SEQ ID NO:25或者所述抗体包含(a) HVR-Hl，所述HVR-Hl包含氨基酸序列 SEQ ID NO:71 ； (b) HVR-H2，所述 HVR-H2 包含氨基酸序列 SEQ ID NO:24 ;和(c)HVR-H3,所述HVR-H3包含氨基酸序列SEQ ID NO: 25，或者所述抗体包含(a) HVR-Hl，所述HVR-Hl包含氨基酸序列SEQ ID NO:72 ； (b)HVR_H2，所述HVR-H2包含氨基酸序列SEQ ID NO:24 ;和(c)HVR-H3，所述HVR-H 3包含氨基酸序列SEQ ID NO: 25，或者所述抗体包含(a) HVR-HlJjf述HVR-Hl包含氨基酸序列SEQ ID NO:23 ; (b) HVR-H2，所述HVR-H2包含氨基酸序列SEQ IDN0:76;和(c)HVR-H3，所述HVR-H3包含氨基酸序列SEQ ID NO:25，或者所述抗体包含(a)HVR-Hl，所述HVR-Hl包含氨基酸序列SEQ ID NO:23 ； (b) HVR-H2，所述HVR-H2包含氨基酸序列SEQ ID NO:77 -M (c) HVR-H3，所述HVR-H3包含氨基酸序列SEQ ID N0:79，或者所述抗体包含(a) HVR-Hl，所述HVR-Hl包含氨基酸序列SEQ ID NO:73 ; (b)HVR_H2，所述HVR-H2包含氨基酸序列SEQ ID NO:78 ;和(c) HVR-H3，所述HVR-H3包含氨基酸序列SEQ ID NO:25。在另一方面中，本发明提供抗体，所述抗体包含至少一个，至少两个，或全部三个选自以下的VL HVR序列:(a) HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:7，8，17，35和42 ； (b)HVR-L2，所述 HVR-L2 包含氨基酸序列 SEQ ID NO:9，10，18，36-39，41，43，56，58-64或 118;和(c)HVR-L3，所述 HVR-L3 包含氨基酸序列 SEQ ID NO: 11-16，19，40，44，57，65-67或 119。在一个实施方案中，所述抗体包含HVR-L1，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ IDNO:7或SEQ ID N0:8。在另一个实施方案中，所述抗体包含HVR-L2，所述HVR-L2包含氨基酸序列 SEQ ID NO:9 或 SEQ ID NO: 10 或 SEQ ID N0:58 或 SEQ ID N0:59 或 SEQ ID NO:60或 SEQ ID N0:61 或 SEQ ID NO:62 或 SEQ ID NO:63 或 SEQ ID NO:64。在另一个实施方案中，所述抗体包含HVR-L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQ ID N0:11或SEQ ID NO:12或 SEQ ID NO: 13 或 SEQ ID NO: 14 或 SEQ ID NO: 15 或 SEQ ID NO: 16 或 SEQ ID NO:65 或SEQ ID N0:66或SEQ ID NO:67。在另一个实施方案中，所述抗体包含HVR-L1，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:350在另一个实施方案中，所述抗体包含HVR-L2，所述包含选自由以下各项组成的组的氨基酸序列:SEQ ID N0:36-39。在另一个实施方案中，所述抗体包含HVR-L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQ ID NO:40。在另一个实施方案中，所述抗体包含(a)HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:7 ； (b)HVR-L2，所述 HVR-L2 包含氨基酸序列 SEQ ID NO:9 ;和(c)HVR_L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQ ID NO: 11，或者所述抗体包含(a) HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:7 ;(b)HVR-L2，所述HVR-L2包含氨基酸序列SEQ ID NO:9 ;和(c)HVR-L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQ ID NO: 12，或者所述抗体包含(a) HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:7 ； (b)HVR_L2，所述HVR-L2包含氨基酸序列SEQ IDNO:9 ;和(c)HVR-L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQ ID NO:13，或者所述抗体包含(a)HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:7 ; (b) HVR-L2，所述HVR-L2包含氨基酸序列SEQ ID NO:9 -M (c)HVR-L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQ ID NO: 14，或者所述抗体包含(a) HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:7 ； (b)HVR_L2，所述HVR-L2包含氨基酸序列SEQ ID NO:9 -M (c)HVR-L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQ ID NO:16,或者所述抗体包含(a) HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:8 ; (b) HVR-L2，所述HVR-L2包含氨基酸序列SEQ ID NO:10 ;和(c) HVR-L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQID N0:15。在另一个实施方案中，所述抗体包含(a)HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:35 ;(b)HVR-L2，所述 HVR-L2 包含氨基酸序列 SEQ ID NO:36 ;和(c)HVR_L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQ ID NO -A0,或者所述抗体包含(a) HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:35 ； (b) HVR-L2，所述HVR-L2包含氨基酸序列SEQ ID NO:37 ;和(c)HVR-L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQ ID NO:40，或者所述抗体包含(a)HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:35 ; (b) HVR-L2，所述HVR-L2包含氨基酸序列SEQ IDN0:38;和(c)HVR-L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQ ID NO:40，或者所述抗体包含(a)HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO`:35 ； (b)HVR_L2，所述HVR-L2包含氨基酸序列 SEQ ID NO:39 ;和(c) HVR-L3，所述 HVR-L3 包含氨基酸序列 SEQ ID NO:40。在另一个实施方案中，所述抗体包含(a)HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:7 ;(b)HVR-L2，所述 HVR-L2 包含氨基酸序列 SEQ ID NO:58 ;和(c)HVR_L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQ ID NO:12，或者所述抗体包含(a) HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:7 ； (b)HVR-L2，所述HVR-L2包含氨基酸序列SEQ ID NO:9 ;和(c)HVR-L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQ ID NO:65，或者所述抗体包含(a)HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:7 ； (b)HVR_L2，所述HVR-L2包含氨基酸序列SEQ IDN0:59;和(c)HVR-L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQ ID NO: 12，或者所述抗体包含(a)HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:7 ； (b) HVR-L2，所述HVR-L2包含氨基酸序列SEQ ID NO:9 -M (c)HVR-L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQ ID N0:66，或者所述抗体包含(a) HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:7 ； (b)HVR_L2，所述HVR-L2包含氨基酸序列SEQ ID NO:9 -M (c)HVR-L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQ ID NO:67，或者所述抗体包含(a) HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:7 ; (b) HVR-L2，所述HVR-L2包含氨基酸序列SEQ ID NO:60 ;和(c) HVR-L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQID NO:67，或者所述抗体包含(a) HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:7 ； (b)HVR-L2，所述HVR-L2包含氨基酸序列SEQ ID NO:61 ;和(c) HVR-L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQ ID NO:65，或者所述抗体包含(a) HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ IDNO:7 ； (b)HVR-L2，所述 HVR-L2 包含氨基酸序列 SEQ ID NO:59 ;和(c)HVR_L3，所述 HVR-L3包含氨基酸序列SEQ ID NO:66，或者所述抗体包含(a) HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列 SEQ ID NO:7 ； (b)HVR-L2，所述 HVR-L2 包含氨基酸序列 SEQ ID NO:62 ;和(c)HVR_L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQ ID NO:67，或者所述抗体包含(a) HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:7 ； (b)HVR-L2，所述HVR-L2包含氨基酸序列SEQ ID NO:63 ;和(c)HVR-L3，所述HVR-L3包含氨基酸序列SEQ ID NO: 12，或者所述抗体包含(a)HVR-Ll，所述HVR-Ll包含氨基酸 序列SEQ ID NO:7 ； (b)HVR_L2，所述HVR-L2包含氨基酸序列SEQ IDNO:64 -M (c)HVR-L3，所述 HVR-L3 包含氨基酸序列 SEQ ID NO:12。在另一方面中，本发明的抗体包含(a) VH结构域，所述VH结构域包含至少一个，至少两个，或全部三个选自以下的VH HVR序列:(i) HVR-Hl，所述HVR-Hl包含选自以下的氨基酸序歹Ij:SEQ ID NO:22，23，26，28，45，68，71-73或 120(ii)HVR-H2，所述HVR-H2包含选自以下的氨基酸序列:SEQ ID NO:24，29，46，69，74-78 或 121 和(iii)HVR_H3，所述HVR-H3 包含选自以下的氨基酸序列:SEQ ID NO:25，30，47，70，79或122 ;和(b) VL结构域，所述VL结构域包含至少一个，至少两个，或全部三个选自以下的VL HVR序列:(i) HVR-Ll，所述HVR-Ll包含选自以下的氨基酸序列:SEQ ID NO:7，8，17，35或42，(ii)HVR-L2，所述HVR-L2包含选自以下的氨基酸序列:SEQ ID NO:9，10，18，36-39，41，43，56，58-64 或 118，和(c)HVR-L3,所述HVR-L3包含选自以下的氨基酸序列:SEQ ID NO: 11-16，19，40，44，57，65-67或119。在另一方面中，本发明提供抗体，所述抗体包含(a)HVR-Hl，所述HVR-Hl包含氨基酸序列 SEQ ID NO:23 ;(b)HVR-H2，所述 HVR-H2 包含氨基酸序列 SEQ ID NO:24 ；(c)HVR-H3,所述HVR-H3包含氨基酸序列SEQ ID NO:25 ； (d)HVR-Ll,所述HVR-Ll包含氨基酸序列SEQ ID NO:7 ;(e)HVR-L2，所述 HVR-L2 包含氨基酸序列 SEQ ID NO:9 ;和(f)HVR_L3，所述HVR-L3包含选自以下的氨基酸序列:SEQ ID NO:12。在某些实施方案中，所述抗体包含至少一个选自以下的序列:HVR_H1，HVR-H2，HVR-H3，其中 HVR-Hl 包含氨基酸序列 GFX3tlFX31X32X33X34IH(SEQ ID NO:45)，其中 X3tl = N或 T ；X31 = S，L 或 Y ；X32 = G 或 Y ；X33 = Y 或 S ;并且 X34 = A，G 或 S ;其中 HVR-H2 包含氨基酸序列 X35X361SPX37X38GX39TX40YADSVKG(SEQ ID NO:46)，其中 X35 = A 或 G ；X36 = W 或S ;X37 = A或Y ；X38 = G或S ；X39 = S或Y ;并且X4tl = D或S ;并且其中HVR-H3包含序列X41PX42X43X44X45X46X47MDY (SEQ ID NO:47)，其中 X41 = Q 或 G ;X42 = T 或 F ；X43 = H 或 S ；X44 =
Y或 P ;X45 = Y 或 W ;X46 = Y 或 V，并且其中 X47 任选包括序列 YAKGYKA (SEQ ID NO:48)。在某些实施方案中，所述抗体包含至少一个选自以下的序列:HVR_H1，HVR-H2和HVR-H3，其中 HVR-Hl 包含氨基酸序列 GX71X72X73X74X75X76X77IH(SEQ ID NO:120)，其中 X71 = F或 Y ；X72 = F, N 或 T ；X73 = F 或 Y ；X74 = L, Q, I, S 或 Y ；X75 = G 或 Y ；X76 = Y 或 S ;并且 X77=A，G 或 S ；HVR-H2 包含氨基酸序列 X78X791SPX80X81GX82X83X84YADSVKG (SEQ ID NO: 121)，其中X78 = A 或 G ；X79 = W 或 S ；X80 = A, S, Q 或 Y ；X81 = G 或 S ；X82 = S, K, L 或 Y ；Χ83 = T 或 Y ;并且 X84 = D 或 S ;并且 HVR-H3 包含氨基酸序列 X85PX86X87X88X89X9tlX91MDY (SEQ ID NO: 122)，其中 X85 = Q 或 G ；X86 = T 或 F ；X87 = H, Y 或 S ；X88 = Y 或 P ；X89 = Y 或 W ；X90 = Y 或 V,并且其中X91任选包括序列YAKGYKA (SEQ ID NO:48)。在某些实施方案中，所述抗体包含至少一个选自以下的序列:HVR_L1，HVR-L2，HVR-L3，其中 HVR-Ll 包含氨基酸序列 RASQX17VX18X19X2ciX21A, (SEQ ID NO:42)其中 X17 = S，D或V ；X18 = S或A ；X19 = S, T或N ；X20 = A或S ；X21 = V或L,其中HVR-L2包含氨基酸序列X22ASX23LYS (SEQ ID NO:43)，其中 X22 = S，W，Y 或 L ；X23 = F，S 或 W，并且其中 HVR-L3 包含氨基酸序列 QQX24X25X26X27X28X29T (SEQ ID NO:44)，其中 X24 = S，F，G，D 或 Y ；X25 = Y，P，S 或A ；X26 = Y，T 或 N ；X27 = T，Y，D 或 S ；X28 = P 或 L ;并且 X29 = F，P 或 T。在某些实施方案中，所述抗体包含至少一个选自下组的序列:HVR-L1、HVR-L2和HVR-L3，其中 HVR-Ll 包含氨基酸序列 RASQX17VX18X19X2ciX21A(SEQ ID NO:42)，其中 X17 = S，D或V ；X18 = S或A ；X19 = S, T或N ；X20 = A或S ；X21 = V或L,其中HVR-L2包含氨基酸序列X62ASX63X64YX65 (SEQ ID NO:118)，其中 X62 = S，W，Y，F 或 L ；X63 = F，S，Y 或 W ；X64 = L 或 R ;X65 = S，P，R，K 或 W，并且 HVR-L3 包含氨基酸序列 QQX66X67X68X69X7tlX71T (SEQ ID NO: 119)，其中 X66 = S，F，G，D 或 Y ；X67 = Y，P，S 或 A ；X68 = Y，T 或 N ；X69 = T，Y，D 或 S ；X70 = P，Q，S，K或L ;并且X71=F, P或T。在某些实施方案中，所述抗体包含至少一个选自以下的序列:HVR_L1，HVR-L2，HVR-L3，其中 HVR-Ll 包含氨基酸序列 RASQX1VX2X3X4X5A (SEQ ID NO:17)，其中 X1 = D 或 V ;X2=S 或 A ;X3 = T 或 N ;X4 = S 或 A ;X5 = V 或 L，其中 HVR-L2 包含氨基酸序列 X6ASFLYS (SEQID NO:18)，其中 X6 = S 或 L，并且其中 HVR-L3 包含氨基酸序列 QQX7X8X9X10X11X12T (SEQ IDNO: 19)，其中 X7 = S，F，G，D 或 Y ；X8 = Y，P，S，或 A ;X9 = T 或 N ；X10 = T，Y，D 或 S ；Xn = P或 L ；X12 = P 或 T。在某些实施方案中，所述抗体包含至少一个选自以下的序列:HVR_L1，HVR-L2，HVR-L3，其中 HVR-Ll 包含氨基酸序列 RASQX1VX2X3X4X5A (SEQ ID NO:17)，其中 X1 = D 或 V ;X2=S 或 A5X3 = T 或 N; X4 = S 或 A; X5 = V 或 L，其中 HVR-L2 包含氨基酸序列 X48ASX49X5tlYX51 (SEQID NO:56)，其中 X48 = S 或 F ;X49 = F 或 Y ；X50 = L 或 R ；X51 = S，P，R，K 或 W，其中 HVR-L3包含氨基酸序列 QQFPTYX52PT (SEQ ID NO:57)，其中 X52 = L，Q，S 或 K。在某些实施方案中，所述抗体包含至少一个选自以下的序列:HVR_H1，HVR-H2，HVR-H3，其中 HVR-Hl 包含氨基酸序列 GFTFX13GYX14IH(SEQ ID NO:26)，其中 X13 = S 或 L 和X14 = A 或 G，其中 HVR-H2 包含氨基酸序列 GWISPAGGSTDYADSVKG(SEQ ID NO:24)，并且其中HVR-H3 包含氨基酸序列 GPFSPWVMDY (SEQ ID NO:25).
在某些实施方案中，所述抗体包含至少一个选自以下的序列:HVR_H1，HVR-H2，HVR-H3,其中 HVR-Hl 包含氨基酸序列 GX53X54X55X56GYGIH(SEQ ID NO:68)，其中 X53=F或Y ；X54 = T或F ；X55 = F或Y ；X56 = L, Q或I,其中HVR-H2包含氨基酸序列GffISPX57X58GX59X60DYADSVKG (SEQ ID NO:69)，其中 X57 = A，S 或 Q ；X58 = G 或 S ；X59 = S，K 或L ；X60 = T或Y，并且其中HVR-H3序列包含氨基酸序列GPFX61PWVMDY (SEQ ID NO:70)，其中X61 = S 或 Y。在某些实施方案中，所述抗体包含至少一个选自以下的序列:HVR_L1，HVR-L2，HVR-L3，其中HVR-Ll包含氨基 酸序列RASQSVSSAVA(SEQ ID NO:35)，其中HVR-L2包含氨基酸序列 X15ASX16LYS (SEQ ID NO:41)，其中 X15 = S，W 或 Y 和 X16 = S 或 W，并且其中 HVR-L3包含氨基酸序列 QQYSYSPFT (SEQ ID NO:40)。在某些实施方案中，如以上所提供的抗-BACEl抗体的任意一个或多个氨基酸在以下HVR位置被置换:在HVR-Hl (SEQ ID NO:26)中:位置 5 和 8 ;在HVR-Ll (SEQ ID NO:17)中:位置 5，7，8，9 和 10 ;在HVR-L2(SEQ ID NO:18)中:位置 1，或者在 HVR-L2 (SEQ ID NO:41)中，位置 I和4 ;以及在HVR-L3(SEQ ID NO:19)中:位置 3，4，5，6，7 和 8。在某些实施方案中，置换是保守置换，如本文中提供的。在某些实施方案中，任意一个或多个以下置换可以以任意组合进行:在HVR-Hl (SEQ ID NO:26)中:位置5处的丝氨酸或亮氨酸和位置8处的丙氨酸或甘氨酸；在HVR-Ll (SEQ ID NO:17)中:位置5处的天冬氨酸或缬氨酸；位置7处的丝氨酸或丙氨酸；位置8处的苏氨酸或天冬酰胺；位置9处的丝氨酸或丙氨酸和位置10处的缬氨酸或亮氨酸；在HVR-L2(SEQ ID NO:18)中:位置I处的丝氨酸或亮氨酸，或HVR-L2(SEQ ID NO:41)位置I处的丝氨酸、酪氨酸或色氨酸或位置4处的酪氨酸、丝氨酸或色氨酸；和在HVR_L3(S EQ ID NO:19)中:位置3处的丝氨酸，苯丙氨酸，甘氨酸，天冬氨酸或酪氨酸；位置4处的酪氨酸或脯氨酸，位置5处的丝氨酸，丙氨酸，苏氨酸或天冬酰胺；位置6处的酪氨酸，苏氨酸，天冬氨酸或丝氨酸，位置7处的天冬氨酸，丝氨酸，脯氨酸或亮氨酸和位置8处的脯氨酸或苏氨酸。在某些实施方案中，置换是保守置换，如本文中所提供的。在某些实施方案中，任意一个或多个以下置换可以以任意组合进行:在HVR-Hl (SEQ ID NO:26)中:S5L 和 A8G ；在HVR-Ll (SEQ ID NO:17)中:D5V ；S7A ；T8N ；S9A 和 VIOL ；在HVR-L2(SEQ ID NO:18)中:S1L，或者在 HVR-L2 (SEQ ID NO:41)中，位置 SlW 或Y和S4W ；以及在HVR-L3 (SEQ ID NO: 19)中:位置 S3F、G、D 或 Yl ;Y4P、S 或 A ；T5N ;T6Y、D 或 S ;P7L 和 Ρ8Τ。在某些实施方案中，如以上所提供的抗-BACEl抗体的任意一个或多个氨基酸在以下HVR位置被置换:在HVR-Hl (SEQ ID NO:120)中:位置 2，3，5，6，7 和 8 ;在HVR-H2(SEQ ID NO: 121)中:位置 1，2，6，7，9，10，和 11 ;在HVR-H3(SEQ ID NO:122)中:位置 I，3，4，5，6，7，和 8在HVR-Ll (SEQ ID NO:42)中:位置 5，7，8，9 和 10 ;在HVR-L2(SEQ ID NO:118)中:位置 I，4，5 和 7 ;以及在HVR-L3(SEQ ID NO:119)中:位置 3，4，5，6，7 和 8。在某些实施方案中，置换是保守置换，如本文中所提供的。
以上置换的可能的组合被如上所述的SEQ ID NO:42_47和118-122的共有序列所涵盖。在任何以上实施方案中，抗-BACEl抗体被人源化。在一个实施方案中，抗-BACEl抗体包含如在任何以上实施方案中的HVR，和还包含接纳体人构架，例如人免疫球蛋白构架或人共有构架。在另一个实施方案中，抗-BACEl抗体包含如在任何以上实施方案中的HVR，和还包含 VH 或 VL，其包含 SEQ ID NO: 1—6，20，21，27，31—34，80—98 和 99-117 的 FRl, FR2,FR3，或FR4序列。在另一方面中，抗-BACEl抗体包含重链可变结构域(VH)序列，该序列与选自以下的氨基酸序列具有至少 90 %，91 %，92 %，93 %，94 %，95 %，96 %，97 %，98 %，99 %，或100%序列同一性:SEQ ID NO:20，21，27和80-98。在某些实施方案中，相对于参比序列，具有至少 90 %，91 %，92 %，93 %，94 %，95 %，96 %，97 %，98 %，或 99 % 同一性的 VH 序列包含置换(例如，保守置换)，插入，或缺失，而包含该序列的抗-BACEl抗体保持结合BACEl和/或抑制或减弱BACEl活性的能力。在某些实施方案中，总计I至10个氨基酸被置换，插入和/或缺失在SEQ ID NO:20，21，27和80-98中。在某些实施方案中，置换，插入，或缺失发生在HVR外的区域中(S卩，在FR中)。任选地，抗-BACEl抗体包含SEQ ID NO =20,21,27或80-98中的VH序列，包括所述序列的翻译后修饰。在一个特别的实施方案中，VH包含一个、两个或三个选自以下的HVR: (a)HVR-Hl，所述HVR-Hl包含氨基酸序列SEQ ID NO:22,23，26，28，45，68，71，72，73 或 120，(b)HVR_H2，所述HVR-H2 包含氨基酸序列 SEQ ID NO:24，29，46，69，74，75，76，77，78 或 121，和(c) HVR-H3，所述 HVR-H3 包含氨基酸序列 SEQ ID NO:25,30,47,70,79 或 122。在一方面中，本发明提供抗-BACEl抗体，所述抗体包含至少一个、两个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR: (a) HVR-H1，所述HVR-Hl包含图1 (B)，2 (B)和24(A)中的氨基酸序列;(b) HVR-H2，所述HVR-H2包含图1 (B)，2 (B)和24 (B)中的氨基酸序列；(c)HVR-H3，所述 HVR-H3 包含图1 (B)，2 (B)和 24 (C)中的氨基酸序列 A(I)HVR-LUy^iHVR-Ll包含图1 (A)，2 (A)和23 (A )中的氨基酸序列；(e) HVR-L2，所述HVR-L2包含图1 (A)，2 (A)和23(B)中的氨基酸序列；和(f)HVR-L3，所述HVR-L3包含图1(A)和2 (A)和23 (C)中的氨基酸序列。在另一方面中，提供抗-BACEl抗体，其中所述抗体包含轻链可变结构域(VL)，所述结构域与选自以下的氨基酸序列具有至少90%，91%，92%，93%，94%，95%，96%，97%，98%，99%，或 100% 的序列同一性:SEQ ID NO:1_6，31-34 和 99-117。在某些实施方案中，相对于参比序列，具有至少90 %，91 %，92 %，93 %，94 %，95 %，96 %，97 %，98 %，或99%同一性的VL序列包含置换(例如，保守置换)，插入，或缺失，但是包含所述序列的抗-BACEl抗体保持结合BACEl和/或抑制或降低BACEl活性的能力。在某些实施方案中，在SEQ ID NO:1-6，31-34和99-117中总计I至10个氨基酸被置换，插入和/或缺失。在某些实施方案中，置换，插入，或缺失发生在HVR外的区域中(S卩，在FR中)。任选地，抗-BACEl抗体包含SEQ ID NO:1-6，31-34或99-117中的VL序列，包括所述序列的翻译后修饰。在一个特别的实施方案，VL包含一个、两个或三个选自以下的HVR: (a) HVR-Ll，所述HVR-LI包含氨基酸序列SEQ ID NO:7，8，17，35或42 ; (b)HVR_L2，所述HVR-L2包含氨基酸序列SEQID NO:9，10，18，36-39，41，43 和 56，58-64 或 118 ;和(c) HVR-L3，所述 HVR-L3 包含氨基酸序列 SEQ ID NO:11-16,19，40，44，57，65，66，67 或 119。在另一方面中，提供抗-BACEl抗体，其中所述抗体包含如在任何以上提供的实施方案中的VH，和如在任何以上提供的实施方案中的VL。在一个实施方案中，所述抗体包含分别包含SEQ ID N0:21和SEQ ID NO:2中的VH和VL序列，包括所述序列的翻译后修饰。在另一个方面中，本发明提供抗体，所述抗体结合与本文中提供的抗-BACEl抗体相同的表位。例如，在某些实施方案中，提供这样的抗体，其结合与包含选自SEQ ID NO:20,21，27 和 80-98 的 VH 序列和选自 SEQ ID NO:1-6,31-34 和 99-117 的 VL 序列的抗-BACEl抗体相同的表位。在某些实施方案中，提供这样的抗体，其结合与包含分别在SEQ ID NO:21和SEQ ID NO:2中的VH和VL序列的抗-BACEl抗体相同的表位。在某些实施方案中，提供这样的抗体，其结合BACEl内的表位，所述表位包含至少一个,至少两个,至少三个,至少四个,至少五个,至少六个,至少七个,至少八个,至少九个氨基酸，所述氨基酸对应于SEQ ID N0:49的氨基酸314SER，316GLU，317LYS，318PHE，319PR0,327GLN,328LEU,329VAL,330CYS,331TRP,332GLN,333ALA,335THR,337PR0,340ILE,375THR,378ASP,380CYS,426PHE。在某些实施方案中，提供这样的抗体，其结合BACEl内的表位，所述表位包含至少一个,至少两个,至少三个,至少四个,至少五个,至少六个,至少七个,至少八个,至少九个氨基酸，所述氨基酸对应于SEQ ID NO:49的氨基酸314SER ；316GLU ；317LYS ；327GLN ；330CYS ；33ITRP ；332GLN ；335THR ;和378ASP。在其他实施方案中，构象表位包含对应于以下的氨基酸:SEQ ID NO:49 的 314SER ；316GLU ；317LYS ；327GLN ；330CYS ；331TRP ；332GLN ；335THR ;和378ASP。要理解，在BACEl表位中鉴定的氨基酸对应于人BACEl同种型A的序列。然而，所述BACEl构象表位含包括在BACEl的其他变体和同种型中的相应氨基酸，并且所述表位可以包括除指定残基以外的氨基酸。 在某些实施方案中，提供这样的抗体，其结合BACEl内的表位，所述表位包含至少一个，至少两个或 至少三个BACEl的氨基酸区域，所述氨基酸区域对应于SEQ ID NO:49的氨基酸 315-318 ；SEQ ID NO:49 的氨基酸 331-335 ；SEQ ID NO:49 的氨基酸 370-381 ;或其任意组合。在一个实施方案中，抗体结合BACEl的一个表位，所述表位包含SEQ ID NO:49的氨基酸 315-318,331-335 和 370-381。在另一个实施方案中，提供这样的抗体，其结合BACEl内的表位，这导致:在结合后相对于未结合抗体的BACEl，BACEl的P6和/或P7位点的构象变化(Turner等，Biochemistry44:105-112 (2005))。在另一个实施方案中，提供这样的抗体，其结合BACEl的表位，这诱使BACEl的SEQ ID NO:49的氨基酸218-231采取随机环结构。BACEl的SEQID NO:49的氨基酸218-231以α -螺旋结构存在于结合底物的复合物中。在另一个实施方案中，提供这样的抗体，其结合BACEl内的位点，如在图14和15中所示的以及在BACEl和抗-BACEl抗体、YW412.8.31的晶体结构中所示(实施例3(B))。在其他实施方案中，提供这样的抗体，其结合BACEl内的外结合位点。在一个实施方案中，BACEl内的外结合位点与Kornacker等，Biochem.44:11567-11573(2005)鉴别的外结合位点是相同的外结合位点。在一个实施方案中，提供这样的抗体，其与在Kornacker等，Biochem.44:11567-11573(2005)(该参考文献通过引用完整地结合于本文中)中鉴别的肽(即，肽 1，2，3，1-11，1-10，1-9，1-8，1-7，1-6，2-12，3-12，4-12，5-12，6-12，7-12，8-12,9-12,10-12，4，5，6，5-10，5-9，￥5六，卩6六，￥7六，卩8六，19六，卩1(^和1^1八)竞争结合BACE1。在另一个实施方案中，提供这样的抗体，其如本文所述的任何抗-BACEl抗体那样竞争结合(例如，结合相同的表位)。在本发明的另一个方面中，根据任何以上实施方案的抗-BACEl抗体是单克隆抗体，包括嵌合抗体，人源化抗体或人抗体。在一个实施方案中，抗-BACEl抗体是抗体片段，例如，Fv，Fab，Fab’，scFv，双抗体，或F(ab’)2片段。在另一个实施方案中，抗体是全长抗体，例如，完整的IgGl抗体或如本文所定义的其他抗体类别或同种型。在另一个方面中，根据任何以上实施方案的抗-BACEl抗体可以单独地或组合地结合任何如在以下部分1-7中所述的特征:1.抗体亲合力在某些实施方案中，本文提供的抗体具有的解离常数(Kd)≤ΙμΜ，≤IOOnM,≤IOnM, ≤ InM, ≤ 0.1nM, ≤ 0.0lnM,或≤ 0.00InM(例如 KT8M 以下，例如 KT8M 至 I(T13M,例如，10_9Μ 至 I(T13M)。在一个实施方案中，Kd通过用目的抗体的Fab形式及其抗原进行的放射性标记的抗原结合测定法(RIA)测量，如由以下测定所述的。Fab对抗原的溶液结合亲合力通过在存在未标记抗原的滴定系列的情况下，用最小浓度的(125I)-标记的抗原平衡Fab，接着用抗-Fab抗体-包被的板捕获结合的抗原来测量(参见，例如，Chen等，J.Mol.Biol.293:865-881 (1999)) ο 为了确定测定的条件，将MICROTITER 多孔板(Thermo Scientific)用5yg/ml的在50mM碳酸钠(ρΗ9.6)中的捕获抗-Fab抗体(Cappel Labs)包被过夜，并随后用PBS中的2% (w/v)牛血清白蛋白在室温(约23°C )封闭2-5小时。在非吸附板(Nunc#269620)中，将IOOpM或26pM[125I]-抗原与目的Fab的系列稀释物混合(与在Presta 等，癌症研究(Cancer Res).57:4593-4599(1997)中的抗-VEGF 抗体，Fab-12 的评估一致)。接着，将目的Fab温育过夜；然而温育可以持续更长的阶段(例如65小时)从而确保达到平衡。随后，将混合物转移到捕获板中以在室温进行温育(例如I小时)。接着，去除溶液，并将所述板用在PBS中的0.1%聚山梨醇酯20(TVVEEN-20R)洗涤8次。当所述板已经干燥时，加入150 μ I/孔的闪烁剂(MICR0SCINT-20 ；Packard)，并将所述板在T0PC0UNT Y计数器(Packard)上计数10分钟。选择提供少于或等于20%的最大结合的每种Fab的浓度用在竞争性结合测定中。根据另一个实施方案，Kd是通过表面等离子共振测定法使用BIACORE -2000或 B1ACORE'K-3000仪器(BIAcore, Inc.，Piscataway, NJ)在 25 °C 使用固定化抗原CM5芯片在 10个应答单位(RU)测量的。简而言之，依照供应商的说明书用盐酸N-乙基-N’-(3-二甲基氨基丙基)-碳化二亚胺(EDC)和N-羟基-琥珀酰亚胺(NHS)活化羧甲基化右旋糖苷生物传感器芯片(CM5，BIAC0RE Inc.)。用IOmM乙酸钠pH4.8将抗原稀释至5 μ g/ml ( 0.2 μ Μ)，然后以5 μ I/分钟的流速注入至获得约10个应答单位(RU)的偶联蛋白质。注入抗原后，注入IM乙醇胺以封闭未反应基团。为了进行动力学测量，在25°C以约25 μ I/分钟的流速注入在含0.05%聚山梨醇酯20 (TWEEN-20 )表面活性剂的PBS(PBST)中的两倍连续稀释的Fab (0.78ηΜ至500ηΜ)。使用简单一对一朗格缪尔(Langmuir)结合模型(BI ACORE Evaluation Software version3.2)通过同时拟合结合和解离传感图计算结合速率(U和解离速率Gw)。平衡解离常数(Kd)以比率k Jkm计算。参见例如Chen等，J.Mol.Biol.(分子生物学杂志)293 =865-881 (1999)。如果根据上文表面等离子共振测定法，结合速率超过IO6M-1S-1,那么结合速率可使用荧光淬灭技术来测定，即根据分光计诸如配备了断流装置的分光光度计(Aviv Instruments)或8000系列SLM-AMINCO 分光光度计(ThermoSpectronic)中用搅拌比色杯(stirred cuvette)的测量,在存在浓度渐增的抗原的条件下，测量PBS，pH7.2中的20nM抗-抗原抗体(Fab形式)在25°C的荧光发射强度(激发=295nm ;发射=340nm, 16nm带通)的升高或降低。2.抗体片段在某些实施方案中，本文提供的抗体是抗体片段。抗体片段包括但不限于，Fab,Fab’，Fab’ -SH, F(ab’)2，FvjP scFv片段，以及以下描述的其他片段。对于特定抗体片段的综述，请参见Hudson等Nat.Med.9:129-134 (2003)。对于scFv片段的综述，请参见，例如，Pluckthiin, The Pharmacology ofMonoclonal Antibodies (单克隆抗体的药理学)，卷 Il3, Rosenburg 和 Moore 编辑，(Springer-Verlag, New Yorkh269-3I5K (I994);还请参见W093/16185 ;和美国专利号5，571，894和5，587，458。对于包含拯救受体(salvagereceptor)结合表位残基和 具有提高的体内半衰期的Fab和F(ab' )2片段的讨论，参见美国专利号5,869,046。双抗体是具有两个抗原结合位点的抗体片段，其可以是二价或双特异性的。参见，例如，EP404，097 ；W01993/01161 ;Hudson 等，Nat.Med.9:129-134(2003);和 Hollinger 等，Proc.Natl.Acad.Sc1.USA90:6444-6448 (1993)。三抗体和四抗体也描述于 Hudson 等，Nat.Med.9:129-134(2003)中。单一结构域抗体是包含抗体的全部或部分重链可变结构域或全部或部分轻链可变结构域的抗体片段。在某些实施方案中，单一结构域抗体是人单一结构域抗体(Domantis, Inc.，Waltham, MA ;参见，例如，美国专利号 6，248，516B1)。抗体片段可以通过不同技术制备，包括但不限于完整抗体的蛋白水解消化以及通过重组宿主细胞(例如大肠杆菌或噬菌体)产生,如本文所述。3.嵌合和人源化抗体在某些实施方案中，本文中所提供的抗体是嵌合抗体。某些嵌合抗体于例如美国专利第 4，816，567 号；及 Morrison 等人，Proc.Natl.Acad.Sc1.USA, 81:6851-6855 (1984)中描述。在一个实例中，嵌合抗体包含非人类可变区(例如源自小鼠、大鼠、仓鼠、兔或例如猴的非人类灵长类动物的可变区)及人类恒定区。在另一实例中，嵌合抗体是种类或亚类已经自亲本抗体的种类或亚类发生变化的“种类转变”抗体。嵌合抗体包括其抗原结合片段。在某些实施方案中，嵌合抗体是人源化抗体。通常，非人类抗体经人源化以降低对人类的免疫原性，同时保持亲本非人类抗体的特异性及亲和力。一般而言，人源化抗体包含一个或多个可变结构域，其中HVRs，例如CDRs (或其部分)源自非人类抗体，且FRs (或其部分)是源自人类抗体序列。人源化抗体任选地也将包含人类恒定区的至少一部分。在一些实施方案中，人源化抗体中的一些FR残基经来自非人类抗体(例如HVR残基所源自的抗体)的相应残基置换，例如以恢复或提高抗体特异性或亲和力。人源化抗体及其制备方法于例如Almagro和Fransson, Front.Biosc1.13:1619-1633 (2008)中评述，且进一步于例如Riechmann等人，Nature (自然)332:323-329(1988) ;Queen 等人，Proc.Natl.Acad.Sc1.USA86: 10029-10033 (1989);美国专利第 5，821，337 号、第 7，527，791 号、第 6，982，321 号和第 7，087，409 号；Kashmiri 等人，Methods (方法)36:25-34(2005)(描述 SDR(a-CDR)移植)Padlan，Mol.1mmunol.(分子免疫学)28:489-498 (1991)(描述“表面重整”)-,Oall1 Acqua 等人，Methods36:43-60 (2005)(描述“FR 重组(shuffling)”)；及 Osbourn 等人，Methods (方法)36:61-68(2005)和Klimka 等人，Br.J.Cancer (英国癌症杂志)，83 =252-260(2000)(描述FR重组(shuffling)的“导向选择”方法)中描述。可用于人源化的人类构架区包括，但不限于，使用“最佳拟合”法选择的构架区(参见例如Sims等人，J.1mmunol.(免疫学杂志)151:2296(1993));源自特定亚群的轻链或重链可变区的人类抗体共同序列的构架区(参见例如Carter等人，Proc.Natl.Acad.Sc1.USA, 89:4285 (1992);及 Presta 等人，J.1mmunol.(免疫学杂志),151:2623 (1993))；人类成熟(体细胞突变)构架区或人类生殖系构架区(参见例如Almagro及Fransson,Front.Biosc1.13:1619-1633(2008));及源自筛选FR文库的构架区(参见例如Baca等人，J.Biol.Chem.(生物化学杂志)272:10678-10684(1997)及 Rosok 等人，J.Biol.Chem.(生物化学杂志)271:22611-22618(1996)) ο4.人抗体在某些实施方案中，本文中所提供的抗体是人抗体。可使用本领域中已知的各种技术来制备人抗体。人抗体一般描述于van Dijk和van de Winkel,Curr.0pin.Pharmacol.(当前药学观点)5:368-74 (2001)以及 Lonberg, Curr.0pin.1mmunol.(当前免疫学观点)20 =450-459(2008)。可通过向已经经过修饰因而对于抗原攻击刺激产生完整人抗体或具有人类可变区的完整抗体的转基因动物施用免疫原，来制备人抗体。这些动物通常含有全部或一部分人类免疫球蛋白基因座，其替 代了内源免疫球蛋白基因座，或存在于染色体外或随机整合于动物染色体内。在这些转基因小鼠中，内源免疫球蛋白基因座一般已经失活。关于从转基因动物获得人抗体的方法的综述，参见Lonberg, Nat.Biotech.(自然生物技术)23:1117-1125(2005)。也参见例如描述XEN0M0USE 技术的美国专利第6,075, 181号及第6，150，584号；描述HUMAB 技术的美国专利第5，770, 429号；描述K-M MOUSE 技术的美国专利第7，041, 870号，及描述VelociMouse 技术的美国专利申请公开号US2007/0061900。这些动物产生的完整抗体的人类可变区可进一步修饰，例如通过与不同人类恒定区组合。人抗体也可通过基于杂交瘤的方法制得。用于产生人单克隆抗体的人骨髓瘤及小鼠-人融合骨髓瘤细胞系已经描述。(参见例如Kozbor J.1mmunol.(免疫学杂志)，133:3001(1984) ；Brodeur 等人，Monoclonal Antibody Production Techniquesand Applications (单克隆抗体产生技术及应用)，第51-63页(Marcel Dekker, Inc.,New York, 1987)；并且 Boerner 等人，J.1mmunol.(免疫学杂志)，147:86 (1991)。)通过人类B细胞杂交瘤技术产生的人抗体也在Li等人，Proc.Natl.Acad.Sc1..USA，103:3557-3562(2006)中描述。其他方法包括例如美国专利第7，189，826号(描述由杂交瘤细胞系产生单克隆人类 IgM 抗体)及 Ni，Xiandai Mianyixue, 26 (4) =265-268(2006)(描述人-人杂交瘤)中所述的那些方法。人杂交瘤技术(Trioma技术)也于Vollmers和 Brandlein, Histology and Histopathology (组织学和组织病理学)，20(3):927-937 (2005),及 Vollmers 和 Brandlein,Methods and Findings in Experimental andClinical Pharmacology (实验和临床药学方法和发现)，27 (3):185-91 (2005)中描述。也可通过分离选自源自人噬菌体展示文库的Fv克隆可变结构域序列产生人抗体。随后可将这些可变结构域序列与所需人恒定结构域组合。下文描述自抗体文库选择人抗体的技术。5.源自文库的抗体可通过在组合文库中筛选具有所需活性的抗体来分离本发明抗体。举例来说，本领域中已知多种用于产生噬菌体展示文库并且在这些文库中筛选具有所需结合特征的抗体的方法。这些方法于例如Hoogenboom等人，Methods in Molecular Biology(分子生物学方法)178:1-37 (O' Brien等人编，人Press, Totowa, NJ, 2001)中评述,并且进一步于例如 McCafferty 等人，Nature (自然)348:552-554 ；Clackso 等人，Nature (自然)352:624-628(1991) ;Marks 等人，J.Mol.Biol.(分子生物学杂志)222:581-597 (1992) ；Marks及 Bradbury, Methods in Molecular Biology (分子生物学方法)248:161-175 (Lo 编，人 Press, Totowa, NJ, 2003) ；Sidhu 等人，J.Mol.Biol.(分子生物学杂志)338(2):299-310(2004) ;Lee 等人，J.Mol.Biol.(分子生物学杂志)340 (5):1073-1093(2004)；Fellouse, Proc.Natl.Acad.Sc1.USAlOl (34):12467-12472(2004)；并且 Lee 等人，J.1mmunol.Methods (免疫学方法杂志)284(1-2):119-132(2004)中描述。在某些卩遼菌体展示方法中,VH及VL基因库(repertoire)是通过聚合酶链式反应(PCR)分别克隆并且随机重组于卩遼菌体文库中，随后可如Winter等人，Ann.Rev.1mmunol.(免疫学年度综述)，12:433-455(1994)中所述在其中筛选抗原结合噬菌体。噬菌体通常呈现单链Fv(ScFv)片段或Fab片段形式的抗体片段。来自免疫来源的文库无需构建杂交瘤即可提供免疫原的高亲和力抗 体。或者，天然库可经克隆(例如自人)以在无任何免疫的情况下提供针对多种非自体抗原以及自体抗原的抗体单一来源，如Griffiths等人,EMBOJ，12:725-734(1993)所述。最后，也可以通过从干细胞克隆未重排的V基因区段，并且使用含有随机序列的PCR引物来编码高变性CDR3区，并且实现体外重排来合成制得天然文库，如 Hoogenboom 及 Winter, J.Mol.Biol.(分子生物学杂志志)，227 =381-388 (1992)所述。描述人抗体噬菌体文库的专利公开物包括例如:美国专利第5，750，373号，及美国专利公开第 2005/0079574 号、第 2005/0119455 号、第 2005/0266000 号、第 2007/0117126 号、第2007/0160598 号、第 2007/0237764 号、第 2007/0292936 号和第 2009/0002360 号。从人抗体文库分离的抗体或抗体片段被视为本文的人抗体或人抗体片段。6.多特异性抗体在某些实施方案中，本文中所提供的抗体是多特异性抗体，例如双特异性抗体。多特异性抗体是对至少两个不同位点具有结合特异性的单克隆抗体。在某些实施方案中，一种结合特异性是针对BACEl而另一种是针对任何其他抗原。在某些实施方案中，双特异性抗体可结合至BACEl的两个不同表位。双特异性抗体也可用于将细胞毒性剂定位于表达BACEl的细胞。双特异性抗体可制成全长抗体或抗体片段形式。制造多特异性抗体的技术包括，但不限于，具有不同特异性的两个免疫球蛋白重链-轻链对的重组共表达(参见Milstein及Cuello，Nature (自然)305:537(1983)；W093/08829 ；及 Traunecker 等人，EMBO J.10:3655(1991)),及“凸起-入-孔洞(knob-1n-hole) ”工程改造(参见例如美国专利第5，731，168号)。也可通过以下方法制得多特异性抗体:工程改造用于制备抗体Fe-异二聚体的静电导引作用(W02009/089004A1)；将两种或两种以上抗体或片段交联(参见例如美国专利第4，676，980号，及Brennan等人Science (科学)，229:81(1985));使用亮氨酸拉链来产生双特异性抗体(参见例如Kostelny 等人，J.1mmunol.(免疫学杂志)，148 (5):1547-1553(1992));使用“双抗体”技术来制得双特异性抗体片段(参见例如Hollinger等人，Proc.Natl.Acad.Sc1.USA, 90:6444-6448 (1993));及使用单链Fv (sFv) 二聚体(参见例如Gruber等人,J.1mmunol.(免疫学杂志)，152:5368 (1994));及如例如 Tutt 等人，J.1mmunol.(免疫学杂志)147:60 (1991)中所述制备三特异性抗体。本文中也包括具有三个或三个以上功能性抗原结合位点的经工程改造抗体，包括“章鱼抗体(Octopus antibodies) ” (参见例如 US2006/0025576A1)。本文中的抗体或片段也包括包含结合至BACEl以及另一不同抗原的抗原结合位点的“双重作用FAb或“DAF” (例如参见US2008/0069820)。7.抗体变体在某些实施方案中，涵盖本文中所提供抗体的氨基酸序列变体。举例来说，可能需要其来提高抗体的结合亲和力和/或其他生物特性。可通过在编码抗体的核苷酸序列中引入适当修饰或通过肽合成来制备抗体的氨基酸序列变体。这些修饰包括例如抗体氨基酸序列内的残基缺失和/或插入其中和/或对其进行置换。可进行缺失、插入和置换的任何组合以获得最终构建体，其限制条件是最终构建体具有所需特征，例如抗原结合。a)置换、插入和缺失变体在某些实施方案中，提供具有一个或多个氨基酸置换的抗体变体。用于置换性诱变的相关位点包括HVRs和FRs。保守性置换显示在表I中在“保守性置换”的标题下。更多实质性变化于表I中的“示例性置换”的标题下提供且如下文关于氨基酸侧链种类进一步描述。可将氨基酸置换引入相关抗体中并筛选具有所需活性，例如保持/提高的抗原结合、降低的免疫原性、或提高的ADCC或CDC的产物。表I
权利要求
1.结合BACEl的分离的抗体或其片段，其中所述抗体降低或抑制BACEl多肽的活性。
2.权利要求1的抗体，其中所述抗体结合BACEl的活性位点。
3.权利要求1的抗体，其中所述抗体结合BACEl的外结合位点。
4.权利要求1的抗体，所述抗体包含至少一个选自由以下各项组成的组的高变区(HVR)序列:SEQ ID NO:7-19, 22-26，28-30，35-47，56-79 和 118-122。
5.权利要求1的抗体,所述抗体包含至少一个选自由以下各项组成的组的序列:HVR-Hl, HVR-H2 和 HVR-H3，其中 HVR-Hl 包含氨基酸序列 GFX3tlFX31X32X33X34IH(SEQ ID NO:45)，其中X3。= N或T;X31 = S，L或Y ;X32 = G 或 Y ;X33 = Y或 S ;并且X34 = A，G或 S ;HVR_H2包含氨基酸序列 X35X361SPX37X38GX39TX40YADSVKG (SEQ ID NO:46)，其中 X35 = A 或 G ；X36 = W或S ;X37 = A或Y ;X38 = G或S ；X39 = S或Y ;并且X4ci = D或S ;并且HVR-H3包含氨基酸序列 X41PX42X43X44X45X46X47MDY (SEQ ID NO:47)，其中 X41 = Q 或 G ;X42 = T 或 F ；X43 = H 或 S ；X44=Y 或 P ;X45 = Y 或 W ;X46 = Y 或 V 并且其中 X47 任选包含序列 YAKGYKA (SEQ ID NO:48)。
6.权利要求1的抗体,所述抗体包含至少一个选自由以下各项组成的组的序列:HVR-Hl，HVR-H2 和 HVR-H3，其中 HVR-Hl 包含氨基酸序列 GX71X72X73X74X75X76X77IH(SEQ ID NO:120)，其中 X71 = F 或 Y ；X72 = F，N 或 T ；X73 = F 或 Y ；X74 = L，Q，I，S 或 Y ；X75 = G 或 Y ；X76=Y 或 S ;并且 X77 = A，G 或 S ；HVR-H2 包含氨基酸序列 X78X79ISPX80X81GX82X83X84YADSVKG(SEQID NO:121)，其中 X78 = A 或 G ;X79 = W 或 S ;X80 = A，S，Q 或 Y ;X81 = G 或 S ;X82 = S，K，L 或Y；X83 = T 或 Y ;并且 X84 = D 或 S ;并且 HVR-H3 包含氨基酸序列 X85PX86X87X88X89X9tlX91MDY (SEQID NO: 122)，其中 X85 = Q 或 G ；X86 = T 或 F ；X87 = H，Y 或 S ；X88 = Y 或 P ；X89 = Y 或 W ；X90=Y或V和其中X91任选包含序列YAKGYKA (SEQ ID NO:48)。
7.权利要求1的抗体,所述抗体包含至少一个选自由以下各项组成的组的序列:HVR-Hl, HVR-H2 和 HVR-H3，其中 HVR-Hl 包含氨基酸序列 GX53X54X55X56GYGIH(SEQ ID NO:68)，其中 X53 = F 或 Y ；X54 = T 或 F ；X55 = F 或 Y ；X56 = L，Q 或 I，HVR-H2 包含氨基酸序列GffISPX57X58GX59X60DYADSVKG (SEQ ID NO:69)，其中 X57 = A，S 或 Q ；X58 = G 或 S ；X59 = S，K 或L ；X60 = T 或 Y，其中 HVR-H3 序列包含氨基酸序列 GPFX61PWVMDY (SEQ ID NO:70)，其中 X61 =S或Y或SEQ ID NO:79的氨基酸序列。
8.权利要求5的抗体，所述抗体包含HVR-Hl序列，所述HVR-Hl序列包含氨基酸序列GftfX13GYX14IH(SEQ ID NO:26)，其中 X13 = S 或 L 和 X14 = A 或 G。
9.权利要求6的抗体，所述抗体包含HVR-Hl序列，所述HVR-Hl序列包含选自由以下各项组成的组的氨基酸序列:SEQ ID NO:22 ；SEQ ID NO:23 ；SEQ ID NO:28 和 SEQ ID NO:71-73。
10.权利要求6的抗体，所述抗体包含HVR-H2序列，所述HVR-H2序列包含选自以下的氨基酸序列:SEQ ID NO:24, SEQ ID NO:29 和 SEQ ID NO:74_78。
11.权利要求6的抗体，所述抗体包含HVR-H3序列，所述HVR-H3序列包含选自以下的氨基酸序列:SEQ ID NO:25 ；SEQ ID NO:30 和 SEQ ID NO:79。
12.权利要求6的抗体，所述抗体包含HVR-Hl、HVR-H2和HVR-H3序列，所述HVR-Hl、HVR-H2 和 HVR-H3 序列对应于对于图1(B)中的克隆 YW412.8，YW412.8.31，YW412.8.30，YW412.8.2，YW412.8.29和YW412.8.51或图24 (A) -(C)中的克隆所示的那些序列。
13.权利要求6的抗体，所述抗体包含HVR-Hl、HVR-H2和HVR-H3序列，所述HVR-Hl、HVR-H2和HVR-H3序列对应于对于图2⑶中的克隆Fabl2，LC6，LC9和LClO所示的那些序列。
14.权利要求6的抗体，所述抗体包含SEQID NO: 22或23的HVR-Hl序列，SEQ ID NO:24 的 HVR-H2 序列和 SEQ ID NO:25 的 HVR-H3 序列。
15.权利要求14的抗体，其中所述HVR-Hl序列是SEQID NO:23。
16.权利要求6的抗体，所述抗体包含SEQID NO:28的HVR-Hl序列，SEQ ID NO:29的HVR-H2 序列，和 SEQ ID NO:30 的 HVR-H3 序列。
17.权利要求6的抗体，所述抗体包含VH链，所述VH链具有选自由以下各项组成的组的氨基酸序列:SEQ ID NO:20，21，27 和 80-98。
18.权利要求16的抗体，其中所述VH链氨基酸序列是SEQID NO:21。
19.权利要求1的抗体，所述抗体包含至少一个选自下组的序列:HVR-L1、HVR-L2和HVR-L3，其中 HVR-Ll 包含氨基酸序列 RASQX17VX18X19X20X21A(SEQ ID NO:42)，其中 X17 = S，D 或 V ；X18 = S 或 A ；X19 = S, T 或 N ；X20 = A 或 S ；X21 = V 或 L, HVR-L2 包含氨基酸序列X22ASX23LYS (SEQ ID NO:43)，其中 X22 = S，W，Y 或 L ；X23 = F，S 或 W，并且 HVR-L3 包含氨基酸序列 QQX24X25X26X27X28X29T (SEQ ID NO:44)，其中 X24 = S，F，G，D 或 Y ；X25 = Y，P，S 或 A ；X26=Y, T 或 N ；X27 = T, Y, D 或 S ；X28 = P 或 L ;并且 X29 = F, P 或 T。
20.权利要求1的抗体，所述抗体包含至少一个选自下组的序列:HVR-L1、HVR-L2和HVR-L3，其中 HVR-Ll 包含氨基酸序列 RASQX17VX18X19X20X21A(SEQ ID NO:42)，其中 X17 = S，D 或 V ；X18 = S 或 A ；X19 = S, T 或 N ；X20 = A 或 S ；X21 = V 或 L, HVR-L2 包含氨基酸序列X62ASX63X64YX65 (SEQ ID NO:118)，其中 X62 = S，W，Y，F 或 L ；X63 = F，S，Y 或 W ；X64 = L 或 R ;X65 = S，P，R，K 或 W，并且 HVR-L3 包含氨基酸序列 QQX66X67X68X69X7tlX71T (SEQ ID NO: 119)，其中 X66 = S，F，G，D 或 Y ；X67 = Y，P，S 或 A ；X68 = Y，T 或 N ；X69 = T，Y，D 或 S ；X70 = P，Q，S，K或L ;并且X71 = F，P或T。
21.权利要求1的抗体,所述抗体包含至少一个选自由以下各项组成的组的序列:HVR-LUHVR-L2 和 HVR-L3，其中 HVR-Ll 包含氨基酸序列 RASQX1VX2X3X4X5A(SEQ ID NO:17)，其中X1 = D或V ;X2 = S或A ;X3 = T或N ;X4 = S或A ;X5 = V或L, HVR-L2包含氨基酸序列 X48ASX49X50YX51 (SEQ ID NO:56)，其中 X48 = S 或 F ；X49 = F 或 Y ；X50 = L 或 R ；X51 = S，P，R, K 或 W，并且 HVR-L3 包含氨基酸序列 QQFPTYX52PT (SEQ ID NO:57)，其中 X52 = L，Q，S 或K0
22.权利要求17的抗体，所述抗体包含HVR-Ll序列，所述HVR-Ll序列包含氨基酸序列RASQX1VX2X3X4X5A (SEQ ID NO: 17)，其中 X1 = D 或 V ;X2 = S 或 A ;X3 = T 或 N ;X4 = S 或 A ;X5 = V 或 L。
23.权利要求19的抗体，所述抗体包含HVR-L2序列，所述HVR-L2序列包含氨基酸序列X6ASFLYS (SEQ ID NO: 18)或 X15ASX16LYS (SEQ ID NO:41)，其中 X6 = S 或 L ;X15 = S，W 或 Y ;并且X16 = S或W。
24.权利要求19的抗体，所述抗体包含HVR-L3序列，所述HVR-L3序列包含氨基酸序列QQX7X8X9X10X11X12T (SEQ ID NO:19)，其中 X7 = S，F，G，D 或 Y ;X8 = Y，P，S，或 A ;X9 = T 或 N ;X10 = T, Y, D 或 S ；Xn = P 或 L ；X12 = P 或 T。
25.权利要求19的抗体，所述抗体包含HVR-Ll序列，所述HVR-Ll序列包含选自由以下各项组成的组的氨基酸序列:SEQ ID NO -J, SEQ ID NO:8或SEQ ID NO:35。
26.权利要求20的抗体，所述抗体包含HVR-L2序列，所述HVR-L2序列包含选自由以下各项组成的组的氨基酸序列:SEQ ID NO:9, SEQ ID NO:10，SEQ ID NO:36-39和SEQ IDNO: 58-64。
27.权利要求20的抗体，所述抗体包含HVR-L3序列，所述HVR-L3序列包含选自由以下各项组成的组的氨基酸序列:SEQ ID NO:11-16, SEQ ID NO:40和SEQ ID NO:65_67。
28.权利要求20的抗体，所述抗体包含HVR-Ll、HVR-L2和HVR-L3序列，所述HVR-Ll、HVR-L2 和 HVR-L3 序列对应于对于图1(A)中的克隆 YW412.8，YW412.8.31，YW412.8.30，YW412.8.2，YW412.8.29和YW412.8.51和图23 (A) - (C)中的克隆所示的那些序列。
29.权利要求20的抗体，所述抗体包含HVR-Ll、HVR-L2和HVR-L3序列，所述HVR-Ll、HVR-L2和HVR-L3序列对应于对于图2⑷中的克隆Fabl2，LC6，LC9和LClO所示的那些序列。
30.权利要求20的抗体，所述抗体包含SEQID NO:7或SEQ ID NO:8的HVR-Ll序列；SEQ ID NO:9或SEQ ID NO:10的HVR-L2序列；和选自由SEQ ID NO:11-16组成的组的HVR_L3 序列 ο
31.权利要求30的抗体，其中所述HVR-Ll序列是SEQID NO:7，所述HVR-L2序列是SEQ ID NO:9，并且所述 HVR-L3 序列是 SEQ ID NO:12。
32.权利要求20的抗体，所述抗体包含SEQID NO:35的HVR-Ll序列；选自由SEQ IDNO:36-39组成的组的HVR-L2序列和SEQ ID NO:40的HVR-L3序列。
33.权利要求20的抗体，所述抗体包含VL链序列，所述VL链序列具有选自由以下各项组成的组的氨基酸序列:SEQ ID NO:1-6,31-34和99-117。
34.权利要求33的抗体，其中所述VL链氨基酸序列是SEQID NO:2。
35.权利要求15的抗体，所述抗体还包含含有SEQID NO:7的氨基酸序列的HVR-L1，含有SEQ ID NO:9的氨基酸序列的HVR-L2和含有SEQ ID NO: 12的氨基酸序列的HVR-L3。
36.权利要求34的抗体，所述抗体还包含VH链，所述VH链包含SEQID NO:21的氨基酸序列。
37.分离的抗体或其片段，所述分离的抗体或其片段结合表位，所述表位包含至少一个选自由以下各项组成的组的BACEl的氨基酸残基:SEQ ID NO:49的314SER ；316GLU ；317LYS ；327GLN ；330CYS ；33ITRP ；332GLN ；335THR ;和 378ASP。
38.权利要求37的抗体，其中所述表位包含SEQID NO:49的314SER ;316GLU ;317LYS ;327GLN ；330CYS ；331TRP ；332GLN ；335THR ;和 378ASP。
39.分离的抗体或其片段，所述分离的抗体或其片段结合表位，所述表位包含至少一个选自由以下各项组成的组的BACEl的氨基酸区域:SEQ ID NO:49的氨基酸315-318 ;SEQ IDNO:49的氨基酸331-335 ；SEQ ID NO:49的氨基酸370-381 ;及其任意组合。
40.权利要求39的抗体，其中所述表位包含SEQID NO:49的氨基酸315-318，331-335和 370-381 ο
41.分离的抗体或其片段，所述分离的抗体或其片段结合BACEl的表位，并且经结合导致BACEl的P6和P7位点的结构的构象变化。
42.分离的抗体或其片段，所述分离的抗体或其片段结合BACEl的表位，并且经结合诱导SEQ ID NO:49的氨基酸218-231采取随机环结构。
43.权利要求37-42的抗体，其中所述抗体降低或抑制BACEl的活性。
44.权利要求1-43中任一项的抗体，所述抗体是单克隆抗体。
45.权利要求1-44中任一项的抗体，所述抗体是人抗体、人源化抗体或嵌合抗体。
46.权利要求1-45中任一项的抗体，所述抗体是抗体片段。
47.权利要求1-45中任一项的抗体，所述抗体是全长IgGl抗体。
48.分离的核酸，所述分离的核酸编码权利要求1-47中任一项所述的抗体。
49.宿主细胞，所述宿主细胞包含权利要求48所述的核酸。
50.产生抗体的方法，所述方法包括培养权利要求49所述的宿主细胞以产生所述抗体。
51.免疫缀合物，所述免疫缀合物包含权利要求1-47中任一项所述的抗体和细胞毒性剂。
52.药物制剂，所述药物制剂包含权利要求1-47中任一项所述的抗体和药用载体。
53.治疗患有神经疾病或病症的个体的方法,所述方法包括向所述个体给药有效量的权利要求1-47中任一项所述的抗体。
54.减少患有神经疾病或病症或处于感染神经疾病或病症的风险的患者中的淀粉状蛋白斑的方法，所述方法包括向所述个体给药有效量的权利要求1-47中任一项所述的抗体。
55.抑制患有神经疾病或病症或处于发生神经疾病或病症的风险的患者中的淀粉状蛋白斑形成的方法，所述方法包括向所述个体给药有效量的权利要求1-47中任一项所述的抗体。
56.权利要求53-55中任一项所述的方法,其中所述神经疾病或病症选自由以下各项组成的组:阿尔茨海默病(AD)，外伤性脑损伤，卒中，青光眼，痴呆，肌营养不良(MD)，多发性硬化(MS)，肌萎缩性侧索硬化(ALS)，囊性纤维化，安吉尔曼综合征，利德尔综合征，佩吉特病，外伤性脑损伤，雷维小体病，脊髓灰质炎后综合征，夏伊-德雷格综合征，橄榄体脑桥小脑萎缩，帕金森病，多系统萎缩，纹状体黑质变性，核上性麻痹，牛海绵状脑病，痒病，克-雅综合征，库鲁病，格-施-沙病，慢性消耗性疾病，致命性家族性失眠症，延髓性麻痹，运动神经元病，卡纳范病，亨廷顿病，神经元蜡样脂褐素沉积症，亚历山大病，图雷特综合征，门克斯扭结发综合征，科凯恩综合征，哈勒沃登-施帕茨综合征，拉福拉病，雷特综合征，肝豆状核变性，莱施-奈恩综合征，以及翁-隆综合征，皮克病，和脊髓小脑性共济失调。
57.权利要求56所述的方法，其中所述神经疾病或病症选自由以下各项组成的组:阿尔茨海默病，卒中，外伤性脑损伤和青光眼。
58.减少患者的淀粉状蛋白_β(Αβ)蛋白的方法，所述方法包括向所述患者给药有效量的权利要求1-47中任一项所述的抗体。
59.权利要求58所述的方法，其中所述患者患有神经疾病或病症，或处于感染神经疾病或病症的风险。
60.权利要求59所述的方法，其中所述神经疾病或病症选自由以下各项组成的组:阿尔茨海默病，卒中 ，外伤性脑损伤和青光眼。
61.诊断患者的神经疾病或病症的方法,所述方法包括将分离自所述患者的生物样品与权利要求1-47中任一项所述的抗体在适合所述抗体与BACEl多肽结合的条件下接触，并且检测在所述抗体和所述BACEl多肽之间是否形成复合物。
62.确定患者是否适合利用抗-BACEl抗体治疗的方法，所述方法包括将分离自所述患者的生物样品与权利要求1-47中任一项所述的抗体在适合所述抗体与BACEl多肽结合的条件下接触，并且检测在所述抗体和所述BACEl多肽之间是否形成复合物，其中在所述抗体和BACEl之间存在复合物指示患者适合利用抗-BACEl抗体治疗。
63.权利要求61或62所述的方法，其中所述生物样品选自由以下各项组成的组:血清，血浆，唾液，胃分泌物，粘液，脑脊液，淋巴液，神经组织，脑组织，心脏组织或血管组织。
64.权利要求1-47中任一项的抗体，其用作药物。
65.权利要求1-47中任一项的抗体，其用于治疗神经疾病，所述神经疾病选自由以下各项组成的组:阿尔茨海默病(AD)，外伤性脑损伤，卒中，青光眼，痴呆，肌营养不良(MD)，多发性硬化(MS)，肌萎缩性侧索硬化(ALS)，囊性纤维化，安吉尔曼综合征，利德尔综合征，佩吉特病，外伤性脑损伤，雷维小体病，脊髓灰质炎后综合征，夏伊-德雷格综合征，橄榄体脑桥小脑萎缩，帕金森病，多系统萎缩，纹状体黑质变性，核上性麻痹，牛海绵状脑病，痒病，克-雅综合征，库鲁病，格-施-沙病，慢性消耗性疾病，致命性家族性失眠症，延髓性麻痹，运动神经元病，卡纳范病，亨廷顿病，神经元蜡样脂褐素沉积症，亚历山大病，图雷特综合征，门克斯扭结发综合征，科凯恩综合征，哈勒沃登-施帕茨综合征，拉福拉病，雷特综合征，肝豆状核变性，莱施-奈恩综合征，以及翁-隆综合征，皮克病，和脊髓小脑性共济失调。
66.权利要求1-47中任一项的抗体，其用于减少和/或抑制淀粉状蛋白-β(Αβ)蛋白产生。
67.权利要求1-47中任一项所述的抗体在制备药物中的用途。
68.权利要求67所述的用途，其中所述药物用于治疗神经疾病，所述神经疾病选自由以下各项组成的组:阿尔茨 海默病(AD)，外伤性脑损伤，卒中，青光眼，痴呆，肌营养不良(MD)，多发性硬化(MS)，肌萎缩性侧索硬化(ALS)，囊性纤维化，安吉尔曼综合征，利德尔综合征，佩吉特病，外伤性脑损伤，雷维小体病，脊髓灰质炎后综合征，夏伊-德雷格综合征，橄榄体脑桥小脑萎缩，帕金森病，多系统萎缩，纹状体黑质变性，核上性麻痹,牛海绵状脑病，痒病，克-雅综合征，库鲁病，格-施-沙病，慢性消耗性疾病，致命性家族性失眠症，延髓性麻痹，运动神经元病，卡纳范病，亨廷顿病，神经元蜡样脂褐素沉积症，亚历山大病，图雷特综合征，门克斯扭结发综合征，科凯恩综合征，哈勒沃登-施帕茨综合征，拉福拉病，雷特综合征，肝豆状核变性，莱施-奈恩综合征，以及翁-隆综合征，皮克病，和脊髓小脑性共济失调。
69.权利要求67所述的用途，其中所述药物用于减少和/或抑制淀粉状蛋白-β(Αβ)蛋白产生。
70.被抗体或其片段特异性识别的BACEl表位，所述BACEl表位包含至少一个对应于选自由以下各项组成的组的氨基酸的BACEl的氨基酸残基:SEQ ID NO:49的314SER ;316GLU ;317LYS ；327GLN ；330CYS ；331TRP ；332GLN ；335THR ;和 378ASP。
71.权利要求70所述的BACEl表位，其中所述表位包含对应于SEQID NO:49的314SER ；316GLU ；317LYS ；327GLN ；330CYS ；33ITRP ；332GLN ；335THR ;和 378ASP 的氨基酸。
72.被抗体或其片段特异性识别的BACEl表位，所述BACEl表位包含至少一个选自由以下各项组成的组的BACEl的氨基酸区域:SEQ ID NO:49的氨基酸315-318 ；SEQ ID NO:40的氨基酸331-335 ；SEQ ID NO:49的氨基酸370-381 ;及其任意组合。
73.权利要求72所述的BACEl表位，其中所述表位包含SEQ ID NO:49的氨基酸315-318,331-3 35 和 370-381。
全文摘要
本发明提供针对特定神经蛋白的抗体及其使用方法。
文档编号A61K39/395GK103228674SQ201180054386
公开日2013年7月31日 申请日期2011年11月9日 优先权日2010年11月10日
发明者贾斯文德·阿特沃尔, 陈咏梅, 塞西莉亚·培·芝·秋, 罗伯特·A·拉扎勒斯, 王伟茹, 赖安·J·沃茨, 吴岩, 张英楠 申请人:霍夫曼-拉罗奇有限公司