专利名称：香鳞毛蕨中绵马素pb在制备抗肿瘤药物中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及医药领域，具体涉及香鳞毛蕨中绵马素PB在抗肿瘤药物方面的新用途。
背景技术：
随着世界环境的污染加剧、不健康的生活方式以及不科学的饮食习惯的增加，癌症的发病率在过去的几十年中急剧上升，癌症死亡率也仅次于心血管疾病。癌症患病率和死亡率的急剧上升，促使世界范围内的抗癌药物市场不断扩大。近年来随着分子肿瘤学、分子药理学的不断发展以及对肿瘤本质的逐渐阐明，药物、基因工程、组合化学、大规模快速筛选等先进技术的广泛应用，加速了新型抗瘤药物的开发。目前主要的抗肿瘤药物有:烷化齐[J，抗代谢药物，抗肿瘤抗生素，钼类抗肿瘤药物，激素类，抗肿瘤植物药，用于微管和微管蛋白(如:紫杉醇等)，用于拓扑异构酶(如:喜树碱等)，抑制肿瘤细胞DNA合成(如:三尖杉酯碱等)。近年来，从天然药物中寻找新的具有抗肿瘤活性的高效低毒物质已经成为世界医药界的研究热点。因而，低毒、高效抗肿瘤天然产物类药物的开发将会具有广阔的市场前景。香鳞毛蕨是鳞毛蕨科中的鳞毛蕨属(Dryopteris A danson),植物主要分布于北温带，全世界约有400种，我国有300多种。生长于林下，海拔1000-1700m的碎石坡或火山周围的岩石缝中，长成小群落，能产生大量孢子进行有性繁殖，也可移苗栽植。鳞毛蕨属中主要的药用植物为传统驱虫药，应用历史悠久，始载于《神农本草经》；在国外作为驱虫药使用开始于1750年，后在英国、德国、日本和美国药典均有收录。除了传统的药理功效外，良好的抗病毒、抗肿瘤、抗菌、消炎、止血及子宫收缩等活性是当代研究者们关注的主要原因。粗茎鳞毛蕨的水提物和醇提物对乙型肝炎病毒表面抗原有较明显抑制作用，贯众的有效成分对流感病毒、副流感病毒、腺病毒、鼻病毒、脊髓灰质炎病毒、单纯疱疹病毒、乙型脑炎病毒等均有抑制作用。粗茎鳞毛蕨提取物中的总间苯三酚有明显抗癌活性，对多种移植性动物肿瘤有较强的抑制作用。其优点是杀伤细胞的同时不损伤宿主的骨髓造血细胞。实验表明，药物的作用机制是显著损伤肿瘤细胞的线粒体，干扰细胞呼吸。
发明内容
本发明的目的是提供了从香鳞毛蕨中绵马素PB在制备治疗抗肿瘤药物中的应用。本发明以人乳腺癌细胞、人肺癌细胞、人胃癌细胞、人结肠癌细胞、人白血病细胞、人卵巢癌细胞、人宫颈癌细胞、人肝癌细胞、人神经胶质瘤细胞为研究对象，使用MTT法检测香鳞毛蕨中绵马素PB，对肿瘤细胞的体外抑制作用，结果证明，绵马素PB对肿瘤细胞的抑制作用较明显。 本发明通过裸鼠体内实体瘤抑瘤实验证明香鳞毛蕨中绵马素PB具有体内抗肿瘤活性。
基于上述研究结果，本发明证实了香鳞毛蕨中绵马素PB具有治疗乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌等癌症的新用途，可用于制备抗肿瘤的药物。本发明可以纯化的形式与药学上适当的载体一起被使用。可制成的药物剂型包括片剂、丸剂、胶囊剂、颗粒剂、混悬剂、滴丸、口服液或粉针剂，还可以采用现代制药界所公认的控释或缓释剂型。根据本发明的药物组合物的给药途径可以是本领域普通技术人员普遍知道的任何一种。可以通过任何适当的方式给药，包括非肠道、静脉内、肌内、腹腔内给药，或者也可以通过用导管直接灌注给药。给药的剂量和频率依据年龄、性别、病人状态，同时服用其它药物、不良反应和临床医师考虑到的其它因素而定。本发明的优点:1.本发明以新鲜或者干燥香鳞毛蕨为原料，在不破坏植物生态平衡、不影响农业生产的基础上，对植物资源进行高效合理的利用。2.本发明中的香鳞毛蕨中绵马素PB具有低毒不易产生耐药性的特点，且具有重要的潜在产业化开发价值以及对人类研究抗癌药物的重大贡献。
具体实施方案实例一体外检测抗肿瘤细胞活性实验细胞:人乳腺癌细胞(MCF-7)、人肺癌细胞(A549)、人胃癌细胞(SGC-7901)、人结肠癌细胞(HCT-8)、人白血病细胞(CEM)、人卵巢癌细胞(H0-4980)、人宫颈癌细胞(Hela)、人肝癌细胞(HepG2)、人神经胶质瘤细胞(SHG-44)。均购自上海细胞库。
实验材料:香鳞毛蕨中绵马素PB，本实验室制备；生理盐水，哈尔滨三联药业；紫杉醇，上海昊化化工有限公司。方法:(I)分别取处于指数生长期的肿瘤细胞，用含有10%胎牛血清的RPMI1640培养液稀释成20000个细胞/mL。(2) 96孔板每孔中加入200 μ L细胞悬液，置于37°C，5% CO2培养箱中培养24h。(3)将香鳞毛蕨中绵马素PB，用DMSO溶解，每孔中加入一定浓度的药物，稀释至需要的工作浓度。同时以紫杉醇为阳性对照。(4)置于37°C,5% CO2培养箱中分别培养48h。(5)MTT用无血清RPMI1640培养液配成5mg/mL溶液，每孔中加入20 μ L，置于37°C>5% CO2孵箱中孵育4h。(6)吸出上清，用培养液洗三次加入100 μ L DMSO溶解沉淀物，用振荡器摇匀测定0D570 值。(7)按公式计算药物对肿瘤细胞的抑制率:公式:肿瘤细胞生长抑制率=(1-实验组OD/对照组0D) X 100%根据48h的实验数据，由OD值计算生长抑制率，将抑制率与药物浓度做图，得出剂量反应曲线，计算出IC5tl(半数抑制浓度)值。表I绵马素PB对肿瘤细胞的体外半数抑制率
权利要求
1.本发明涉及了一种香鳞毛蕨中绵马素PB在制备抗肿瘤药物的应用，其特征在于香鳞毛蕨中绵马素PB，加入不同的赋形剂后可加工成任何一种药剂学上所说的剂型，且对于肿瘤细胞具有良好的活性。
2.权利要求1所述香鳞毛蕨中绵马素PB在制备抗肿瘤药物中的应用，其特征在于所述的肿瘤细胞包括人乳腺癌细胞、人肺癌细胞、人胃癌细胞、人结肠癌细胞、人白血病细胞、人卵巢癌细胞、人宫颈癌细胞、人肝癌细胞、人神经胶质瘤细胞。
3.权利要求1所述的治疗肿瘤的香鳞毛蕨中绵马素PB，其特征在于加入不同的赋形剂后可加工成任何一种药剂学上所说的剂型，包括片剂、丸剂、胶囊剂、颗粒剂、混悬剂、滴丸、口服液或粉针剂，以 及用现代制药界所公认的控释或缓释剂型。
全文摘要
本发明涉及了一种香鳞毛蕨中绵马素PB在制备抗肿瘤药物的应用。本发明通过体外活性筛选和体内抑瘤实验证明绵马素PB对于多种肿瘤细胞具有较好的抑制活性，尤其是MCF-7人乳腺癌细胞。绵马素PB加入不同的赋形剂后可加工成任何一种药剂学上所说的剂型。香鳞毛蕨中绵马素PB，具有毒副作用小，疗效确切，抗瘤谱广，抗多药耐药性好，安全可靠等特点。香鳞毛蕨资源丰富，采集方便，提取工艺简单，具有重要的产业化开发价值。
文档编号A61P35/00GK103191087SQ201210001618
公开日2013年7月10日 申请日期2012年1月5日 优先权日2012年1月5日
发明者付玉杰, 祖元刚, 梁璐, 高畅, 王薇, 牟璠松, 罗猛 申请人:东北林业大学, 付玉杰