专利名称：三磷酸胞苷二钠混悬粉针剂及制备方法
技术领域：
本发明涉及三磷酸胞苷二钠的一种新剂型，具体涉及了三磷酸胞苷二钠混悬粉针剂及制备方法。
背景技术：
三磷酸胞苷二钠为核苷酸衍生物，是一种辅酶类药物，在体内参与磷脂类合成代谢。能够穿过血一脑脊液屏障，它是脑磷脂合成与核酸代谢的中间产物和能量来源，也能提高神经细胞膜性结构的稳定性和重建能力、支持神经细胞存活、延缓细胞衰老死亡、提高神经细胞抗损伤能力、促进神经突起生长。可以有效地防止神经细胞损伤或缺血后的继发死亡，还可以稳定肝细胞膜，促进肝细胞损伤后修复，对于血管硬化引起的心肌和脑组织有营养、促进再生和修复作用，因而应用广泛。三磷酸胞苷二钠的理化特性为具有热不稳定性，其原料要求在冷处保存，制剂规定在阴凉处保存。三磷酸胞苷二钠的磷酸键受热易断裂，迅速降解为一磷酸胞苷钠和二磷酸胞苷二钠而失去活性，容易影响到药物的疗效和安全性。针对三磷酸胞苷二钠注射剂的热不稳定性的特点，中国公开专利号CN101658498 B (名称三磷酸胞苷二钠与精氨酸的冻干制品及其制备方法)，该发明的产品，
稳定性有待进一步提闻。根据三磷酸胞苷二钠的临床用途和理化特性，制备一种质量优良稳定且具有缓慢给药的药用新剂型成为迫切需求，本发明人经过长期的研究，发现将三磷酸胞苷二钠应用高压乳均技术制成三磷酸胞苷二钠混悬液，既能解决稳定性差的特点，又能缓慢给药，大大提高生物利用度的特点，获得了令人满意的效果。
发明内容
针对三磷酸胞苷二钠注射剂的临床用途和稳定性差的特点，本发明提供一种质量优良稳定且具有缓慢给药的三磷酸胞苷二钠药用新剂型即三磷酸胞苷二钠混悬粉针剂及其制备方法，具体地说由三磷酸胞苷二钠、表面活性剂(稳定剂)和冻干保护剂组成，表面活性剂(稳定剂)为白蛋白制成的三磷酸胞苷二钠混悬粉末。为了解决上述技术问题，本发明通过下述技术方案得以解决
一种三磷酸胞苷二钠混悬粉针剂，其为粉针剂，由三磷酸胞苷二钠、表面活性剂(稳定齐U)和冻干保护剂组成，具体组分如下
三磷酸胞苷二钠I份
表面活性剂(稳定剂) O. I份 10份 冻干保护剂2份 15份。
作为优选，所述的表面活性剂(稳定剂)为白蛋白。作为优选，所述的白蛋白选自人血清白蛋白、通过基因工程方法得到的重组白蛋白或动物血清白蛋白。
作为优选，所述的冻干保护剂选自甘露醇、蔗糖、山梨醇、乳糖、果糖、海藻糖、麦芽糖、氨基酸盐、右旋糖苷中的一种或多种。上述技术方案中三磷酸胞二钠混悬粉针剂的制备方法，具体如下
(1)将三磷酸胞苷二钠在有机溶剂中溶解，形成溶液A;
(2)将表面活性剂(稳定剂)在水溶液中溶解，形成溶液B； (3)将溶液B分散在溶液A中，高速剪切1-5分钟，形成初乳C；
(4)将初乳C在高压和高切变力或气穴作用下形成一种稳定的乳剂；
(5)乳剂在减压条件下蒸发产生一种由蛋白质包被药理活性物质组成的胶体系统，过滤灭菌；
(6)加入冻干保护剂，冷冻干燥去除水分，制得三磷酸胞苷二钠混悬粉末。作为优选，所述步骤(I)中有机溶剂选自乙醇、丙二醇、丙三醇、甲醇、丁酮、乙酸乙酯、二氯甲烷、甲酸乙酯中的一种或几种；优选为甲酸乙酯。作为优选，所述步骤(2)中的水溶液选自双蒸水、O. 9%氯化钠水溶液、5%葡萄糖水溶液、含5%葡萄糖的林格氏注射液、含5%葡萄糖和含O. 9%氯化钠的注射用水的一种或几种。本发明提供的三磷酸胞苷二钠混悬粉针剂，进行稳定性试验考察，在高温60°C、光照4500Lx条件下放置10天，各项指标均无明显变化；在高温40°C、相对湿度75%±5%条件下加速试验6个月，各项检测指标没有明显变化；在高温25°C、相对湿度60%土 10%条件下长期试验18个月，各项检测指标没有明显变化。本发明提供的三磷酸胞苷二钠混悬粉针剂，进行急性毒性试验、异常毒性试验和热源检查均符合规定，安全性得到证明。本发明由于采用了以上技术方案，具有显著的技术效果
(1)提高了三磷酸胞苷二钠的稳定性，长期放置检测各项指标没有明显变化，保证有效期内产品质量合格；
(2)本发明的混悬注射剂在体内可以长时间缓慢给药，大大提高生物利用度。(3)本发明所用表面活性剂(稳定剂)蛋白质在体内降解，无毒性和无免疫原性，而且可以有效提高药物治疗指数，降低药物毒性和减少药物的副作用。
具体实施例方式下面结合实施例对本发明作进一步详细描述
实施例I三磷酸胞苷二钠混悬粉针剂，按处方20mg (1000瓶)计算
处方三磷酸胞苷二钠20g
人血清白蛋白60g
甘露醇50g
制备工艺
(1)将三磷酸胞苷二钠20g在甲酸乙酯中溶解，形成溶液A;
(2)将人血清白蛋白60g在5%葡萄糖水溶液中溶解，形成溶液B；
(3)将溶液B分散在溶液A中，高速剪切2分钟，形成初乳C；
(4)将初乳C在高压和高切变力或气穴作用下形成一种稳定的乳剂；(5)乳剂在减压条件下蒸发产生一种由蛋白质包被药理活性物质组成的胶体系统，过滤灭菌；
(6)加入甘露醇50g，冷冻干燥去除水分，制得三磷酸胞苷二钠混悬粉末。对比例I三磷酸胞苷二钠混悬粉针剂，按处方20mg (1000瓶)计算
处方三磷酸胞苷二钠20g
泊洛沙姆60g 甘露醇50g
制备工艺同实施例1，选取和实施例I相同重量份数的非本发明优选组分组成，制成的三磷酸胞苷二钠混悬粉针剂。实施例2三磷酸胞苷二钠混悬粉针剂，按处方40mg (1000瓶)计算
处方三磷酸胞苷二钠40g
人血清白蛋白200g
山梨醇IOOg
制备工艺
(1)将三磷酸胞苷二钠40g在甲酸乙酯中溶解，形成溶液A;
(2)将人血清白蛋白200g在O.9%氯化钠水溶液中溶解，形成溶液B ；
(3)将溶液B分散在溶液A中，高速剪切3分钟，形成初乳C；
(4)将初乳C在高压和高切变力或气穴作用下形成一种稳定的乳剂；
(5)乳剂在减压条件下蒸发产生一种由蛋白质包被药理活性物质组成的胶体系统，过滤灭菌；
(6)加入山梨醇100g，冷冻干燥去除水分，制得三磷酸胞苷二钠混悬粉末。对比例2三磷酸胞苷二钠混悬粉针剂，按处方40mg (1000瓶)计算
处方三磷酸胞苷二钠40g
人血清白蛋白600g
山梨醇20g
制备工艺同实施例2，选取本发明优选组分范围外的质量组分组成，制得三磷酸胞苷二钠混悬粉针剂。实施例3三磷酸胞苷二钠混悬粉针剂，按处方IOmg (1000瓶)计算
处方三磷酸胞苷二钠IOg
人血清白蛋白45g
乳糖35g
制备工艺
(1)将三磷酸胞苷二钠IOg在甲酸乙酯中溶解，形成溶液A;
(2)将人血清白蛋白45g在5%葡萄糖水溶液中溶解，形成溶液B；
(3)将溶液B分散在溶液A中，高速剪切4分钟，形成初乳C；
(4)将初乳C在高压和高切变力或气穴作用下形成一种稳定的乳剂；
(5)乳剂在减压条件下蒸发产生一种由蛋白质包被药理活性物质组成的胶体系统，过滤灭菌；
(6)加入乳糖35g，冷冻干燥去除水分，制得三磷酸胞苷二钠混悬粉末。
对比例3三磷酸胞苷二钠混悬粉针剂，按处方IOmg (1000瓶)计算(制备工艺不同)
处方三磷酸胞苷二钠IOg
人血清白蛋白45g
乳糖35g
制备工艺
(1)将人血清白蛋白45g、三磷酸胞苷二钠IOg加入5000ml灭菌注射用水中，分散均匀，室温搅拌60min;
(2)将上述液体室温条件下采用组织捣碎器剪切搅拌IOmin,转速1300r/min,得乳化
液；
(3)向乳化液加入冻干保护剂乳糖35g，溶解后过滤分装，冷冻干燥，得三磷酸胞苷二钠混悬粉针剂。试验例I粒径的分布
将本发明实施例1-3和对比例1-3制备的混悬粉针剂用注射用水溶解稀释，用JSM-5900扫描显微镜观察到本发明实施例1-2制备的混悬注射剂颗粒大小均一，呈不规则球状或椭圆形球状，而对比例制备的1-2的混悬注射剂颗粒大小不均一，呈现各种形状，杂
乱无章。试验例2粒径的大小
将本发明实施例1-3和对比例1-3制备的混悬粉针剂用注射用水稀释，用zetasizer3000HS激光粒度分析仪测定粒径大小，实施例样品在150_300nm左右，对比例1-2样品大小不均一,没有稳定的范围。结果见表I :
表I粒径测定结果
实施例实施例I 对比例I 实施例2 对比例2 实施例3 对比例3平均粒径 190 ± IOnm 420 ± IOnm 260 ± IOnm 710±10nm 220 ± IOnm550 + IOnm
试验例3稳定性考察
将以上各实施例和对比例制备的样品与上市的注射用三磷酸胞苷二钠(浙江浙北药业有限公司生产，批号20110105)在高温60°C、光照4500Lx条件下放置10天，结果见表2 ;在高温40°C、相对湿度75%±5%条件下加速试验6个月，结果见表3 ;在高温25°C、相对湿度60%±10%条件下长期试验18个月，结果见表4。有关物质和含量的测定可采用本领域熟知的常规技术如HPLC进行。本稳定性考察试验中，含量测试项采用HPLC法检测三磷酸胞苷二钠的含量。所使用对照品购自中国药品生物制品检定所。表2影响因素结果
_可见异物有关物质(％)__含量(％)
O天实施例I 白色粉末 6.5 符合规定 1.0599.8
对比例I 白色粉末 6.0 符合规定 1.1599.6
实施例2 白色粉末 6.3 符合规定 1.45100. I
对比例2 白色粉末 5.8 符合规定 1.50100.3
实施例3 白色粉末 5.5 符合规定 1.3399.7对比例3白色粉末5.7符合规定1.42 99.5
_上市制剂__白色粉末__符合规定_205_99^6_
实施例I白色粉末6. 5符合规定I. 55 99.6
10天对比例I白色粉末6.1符合规定1.85 99.2
高温实施例2白色粉末6.2符合规定1.95 99.5
60 0C 对比例2白色粉末5.7符合规定2. 10 99.3
实施例3白色粉末5.2符合规定1.63 99.4
对比例3白色粉末5.4符合规定1.82 98.8
_上市制剂__白色粉末_4^8_符合规定_2,52_98^2_ 实施例I白色粉末6.4符合规定I. 53 99. 5
10天对比例I白色粉末6.3符合规定1.88 99.3
光照实施例2白色粉末6.1符合规定1.92 99.6
4500LX 对比例2白色粉末5.5符合规定2.05 99.5
实施例3白色粉末5.4符合规定1.58 99.4
对比例3白色粉末5.4符合规定1.85 98.6
_上市制剂__白色粉末_LI_符合规定_2,55_98^5_
表3加速试验结果
Jiia__μ__可见异物有关物质(％)__含暈(%)
实施例I白色粉末6.4符合规定1.08 99.8
对比例I白色粉末6. I符合规定I. 18 99.5
实施例2白色粉末6.2符合规定1.51 100
I月对比例2白色粉末5.6符合规定1.57 100.2
实施例3白色粉末5.6符合规定1.40 99.7
对比例3白色粉末5.5符合规定1.51 99.5
_上市制剂白色粉末5. 2符合规定 2. 20_99.3
实施例I白色粉末6.5符合规定I. 12 99.7
对比例I白色粉末6.0符合规定1.19 99.4
实施例2白色粉末6.3符合规定1.55 99.9
2月对比例2白色粉末5.8符合规定1.60 99.8
实施例3白色粉末5.5符合规定1.43 99.6
对比例3白色粉末5.5符合规定1.55 99.3
_上市制剂白色粉末5.1符合规定 2.25_990.
实施例I白色粉末6.3符合规定1.22 99.6对比例I白色粉末5.9符合规定1.25 99.2实施例2白色粉末6.1符合规定1.52 99.83月对比例2白色粉末5.9符合规定1.55 99.5实施例3白色粉末5.4符合规定1.43 99.5对比例3白色粉末5.5符合规定1.55 99. I_上市制剂白色粉末4.9符合规定 2.35_98^8.实施例I白色粉末6. I符合规定1.2899.3
对比例I白色粉末5.7不符合规定1.4399.0
实施例2白色粉末5.9符合规定1.6399.4
6月对比例2白色粉末5.5不符合规定1.7599. I
实施例3白色粉末5.2符合规定1.6599.2
对比例3白色粉末5.1不符 合规 定1.7898.9
_上市制剂_白色粉末_14_不符合规定_2^8_98.2
表4长期试验结果
Jlii__'MK__可见异物有关物质(％)__含暈(%)
实施例I白色粉末6.4符合规定1.0999.8
对比例I白色粉末6.0符合规定1.2099.5
实施例2白色粉末6.2符合规定1.48100
3月对比例2白色粉末5.8符合规定1.52100.2
实施例3白色粉末5.7符合规定1.3899.7
对比例3白色粉末5.6符合规定1.4799.5
_上市制剂_白色粉末_^3_符合规定_209_99.3
实施例I白色粉末6.3符合规定I. 1399.7
对比例I白色粉末5.9符合规定1.2599.4
实施例2白色粉末6.2符合规定1.5299.7
6月对比例2白色粉末5.7符合规定1.5599.5
实施例3白色粉末5.5符合规定1.4399.6
对比例3白色粉末5.3符合规定1.5099.2
_上市制剂白色粉末5.0符合规定2.28_98^9.
实施例I白色粉末6.2符合规定I. 1899.6
对比例I白色粉末5.8符合规定1.2899.2
实施例2白色粉末6.1符合规定1.5599.5
9月对比例2白色粉末5.6符合规定1.6099.3
实施例3白色粉末5.4符合规定1.4699.4
对比例3白色粉末5.3符合规定1.5598.8
_上市制剂白色粉末4. 9符合规定2. 35_98.5
实施例I白色粉末6.1符合规定1.2899.4
对比例I白色粉末5.7符合规定1.3598.6
实施例2白色粉末5.9符合规定1.5899.3
12月对比例2白色粉末5.5不符合规定1.7598.4
实施例3白色粉末5.2符合规定1.5399.2
对比例3白色粉末5.1 不符合规定1.78
98. 3
_上市制剂白色粉末4. 4不符合规定2. 58_98. I
实施例I白色粉末5.9符合规定1.4299. I对比例I 白色粉末 5.6 不符合规定 1.5298.2
实施例2 白色粉末 5.9 符合规定1.6399. I
18月对比例2 白色粉末 5.4 不符合规定 1.9298.3
实施例3 白色粉末 5.1 符合规定1.6598.9
对比例3 白色粉末 4.9 不符合规定 2.1397.9
_上市制剂_白色粉末_13_不符合规定_2^90_97.6
由以上结果发现对比例和上市的三磷酸胞苷二钠在后期均发生不同程度地可见异物不符合规定的现象，PH值下降较大、有关物质升高、含量降低明显，本发明制备的三磷 酸胞苷二钠混悬粉针剂样品加速3月、6月，长期12月、18月稳定性试验，外观性状没有明显变化，为无菌粉末，PH值、含量和有关物质也没有明显变化，均符合质量要求；充分说明了本发明在产品稳定性方面的优越性，具有令人满意的技术效果。总之，以上所述仅为本发明的较佳实施例，凡依本发明申请专利范围所作的均等变化与修饰，皆应属本发明专利的涵盖范围。
权利要求
1.三磷酸胞苷二钠混悬粉针剂，其特征在于其为粉针剂，由三磷酸胞苷二钠、表面活性剂和冻干保护剂组成，具体组分如下 三磷酸胞苷二钠I份 表面活性剂O. 1-10份 冻干保护剂2-15份。
2.根据权利要求I所述的三磷酸胞苷二钠混悬粉针剂，其特征在于所述的表面活性剂为白蛋白。
3.根据权利要求2所述的三磷酸胞苷二钠混悬粉针剂，其特征在于所述的白蛋白为人血清白蛋白、通过基因工程方法得到的重组白蛋白或动物血清白蛋白。
4.根据权利要求I所述的三磷酸胞苷二钠混悬粉针剂，其特征在于所述的冻干保护剂选自甘露醇、蔗糖、山梨醇、乳糖、果糖、海藻糖、麦芽糖、氨基酸盐、右旋糖苷中的一种或几种。
5.根据权利要求1-4任一所述的三磷酸胞二钠混悬粉针剂的制备方法，其特征在于，方法如下 (1)将三磷酸胞苷二钠在有机溶剂中溶解，形成溶液A; (2)将表面活性剂在水溶液中溶解，形成溶液B； (3)将溶液B分散在溶液A中，高速剪切1-5分钟，形成初乳C； (4)将初乳C在高压和高切变力或气穴作用下形成一种稳定的乳剂； (5)乳剂在减压条件下蒸发产生一种由蛋白质包被药理活性物质组成的胶体，过滤灭菌； (6)加入冻干保护剂，冷冻干燥去除水分，制得三磷酸胞苷二钠混悬粉末。
6.根据权利要求5所述的三磷酸胞二钠混悬粉针剂的制备方法，其特征在于所述步骤(I)的有机溶剂选自氯仿、乙醇、丙二醇、丙三醇、甲醇、丁酮、乙酸乙酯、二氯甲烷、甲酸乙酯中的一种或几种。
7.根据权利要求6所述的三磷酸胞二钠混悬粉针剂的制备方法，其特征在于所述的有机溶剂为甲酸乙酯。
8.根据权利要求5所述的三磷酸胞二钠混悬粉针剂的制备方法，其特征在于所述步骤(2)中的水溶液选自双蒸水、O. 9%氯化钠水溶液、5%葡萄糖水溶液、含5%葡萄糖的林格氏注射液、含5%葡萄糖和含O. 9%氯化钠的注射用水中的一种或几种。
9.根据权利要求5所述的三磷酸胞二钠混悬粉针剂的制备方法，其特征在于所述的冻干保护剂选自甘露醇、蔗糖、山梨醇、乳糖、果糖、海藻糖、麦芽糖、氨基酸盐、右旋糖苷中的一种或几种。
全文摘要
本发明涉及三磷酸胞苷二钠的一种新剂型，具体涉及了三磷酸胞苷二钠混悬粉针剂及制备方法。其为粉针剂，由三磷酸胞苷二钠、表面活性剂和冻干保护剂组成，具体组分如下三磷酸胞苷二钠1份；表面活性剂0.1-10份；冻干保护剂2-15份。本发明提高了三磷酸胞苷二钠的稳定性，混悬注射剂在体内可以长时间缓慢给药，大大提高生物利用度。所用表面活性剂(稳定剂)蛋白质在体内降解，无毒性和无免疫原性，而且可以有效提高药物治疗指数，降低药物毒性和减少药物的副作用。
文档编号A61K47/42GK102614135SQ20121011029
公开日2012年8月1日 申请日期2012年4月16日 优先权日2012年4月16日
发明者傅永宝, 傅苗青, 傅贤龙 申请人:浙江磐谷药源有限公司