专利名称：一种检测幽门螺旋杆菌胃内分布的组合物及试剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及生物技术领域，特别涉及ー种检测幽门螺旋杆菌胃内分布的组合物及试剂。
背景技术：
幽门螺旋杆菌，Helicobacter pylori,简称Hp。首先由巴里·马歇尔(BarryJ. Marshall)和罗宾 沃伦(J. Robin Warren) 二人发现，此二人因此获得2005年的诺贝尔生理学或医学奖。幽门螺杆菌是一种单极、多鞭毛、末端钝圆、螺旋形弯曲的细菌。长2. 5 4. Oym,宽O. 5 1.0 μ m。在胃粘膜上皮细胞表面常呈典型的螺旋状或弧形。在固体培养基上生长时，除典型的形态外，有时可出现杆状或圆球状。幽门螺旋杆菌的感染是慢性活动性胃炎、消化性溃疡、胃黏膜相关淋巴组织(MALT)淋巴瘤和胃癌的主要致病因素。1994年 世界卫生组织/国际癌症研究机构(WH0/IARC)将幽门螺杆菌定为I类致癌原。因此，幽门螺旋杆菌的检测具有现实意义。自1983年幽门螺旋杆菌(Hp)分离培养成功以来，对幽门螺杆菌感染的检测已发展出了许多方法，包括有细菌学、病理学、血清学、同位素示踪、分子生物学等。目前检测Hp的方法主要分为侵入性及非侵入性两大类。侵入性诊断方法主要是通过胃镜咬取胃粘膜活检组织检查Hp，包括快速尿素酶试验(RUT)、组织学检查、细菌培养、Hp基因检测如聚合酶链式反应(PCR)、寡核苷酸探针杂交等。非侵入性检测方法不需要通过胃镜咬取胃粘膜活检组织检查Hp,主要包括13C或14C尿素呼气试验(Urea Br eathingTest, U BT)、粪便Hp抗原检测、Hp抗体检测、尿液Hp抗体试验等。从微生物学角度来说，细菌培养是诊断的金标准。但是幽门螺杆菌是微需氧菌，环境氧要求5 8%，在大气或绝对厌氧环境下不能生长，培养条件较为严格，一般医院缺少相应的技术和设备。病理组织学检测胃Hp感染的诊断价值已为广大学者所肯定。但钳取的活检组织是否在Hp感染部位，影响病理诊断結果。实际工作中，通过多点活检(胃窦、角切迹和胃体3处活检)提高诊断H P感染准确性。RUT试验因其试剂廉价、反应迅速而得到广泛应用，是内镜检查检测胃Hp感染的首选方式。但因反应强度取决于活检标本内的细菌浓度，取材受Hp在胃内灶性分布的影响，使其敏感度和特异度低。入侵性方法在取活检时带有一定盲目性，非入侵性方法无法判断幽门螺旋杆菌与胃内病变的关系。因此，提供ー种检测幽门螺旋杆菌胃内分布的组合物及试剂具有重要意义。
发明内容
有鉴于此，本发明提供ー种检测幽门螺旋杆菌胃内分布的组合物及试剂。该组合物及试剂在胃镜下可以观察到幽门螺旋杆菌在胃内的分布情況。组合物及试剂中尿素和食用紫甘蓝色素价廉易得，对人体无不良反应。检测幽门螺杆菌结果与快速尿素酶方法和病理组织学检测方法检测结果一致。为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案
本发明提供了ー种检测幽门螺旋杆菌胃内分布的组合物，其包括尿素、食用紫甘蓝色素。在胃镜下通过活检钳道向胃粘膜喷洒尿素和食用紫甘蓝色素混合液，利用幽门螺旋杆菌含有尿素酶，分解尿素产生氨，使得胃粘膜上幽门螺旋杆菌感染部位PH值升高，食用紫甘蓝色素作为PH值指示剂，通过颜色变化显示PH值变化，从而间接检测出幽门螺旋杆菌的存在，显示出幽门螺旋杆菌在胃内的分布情况。作为优选,尿素、食用紫甘蓝色素的质量比为4 6:1 3。作为优选,尿素、食用紫甘蓝色素的质量比为5:1 3。作为优选，尿素、食用紫甘蓝色素的质量比为5:1。本发明提供了ー种检测幽门螺旋杆菌胃内分布的试剂，其包括尿素、食用紫甘蓝 色素和水。作为优选,尿素、食用紫甘蓝色素和水的质量比为4 6:1 3:8 12。作为优选,尿素、食用紫甘蓝色素和水的质量比为5:1 3:10。作为优选，尿素、食用紫甘蓝色素和水的质量比为5:1 10。本发明提供的检测幽门螺旋杆菌胃内分布的试剂，是将本发明提供的检测幽门螺旋杆菌胃内分布的组合物溶于溶剂制得，其中溶剂可以为水，也可以为酒精等，凡是能够溶解本发明提供的检测幽门螺旋杆菌胃内分布的组合物的溶剂均在本发明的保护范围内。本发明提供ー种检测幽门螺旋杆菌胃内分布的试剂。该试剂在胃镜下可以观察到幽门螺旋杆菌在胃内的分布情况。尿素和食用紫甘蓝色素价廉易得，对人体无不良反应。检测幽门螺杆菌结果与快速尿素酶方法和病理组织学检测方法检测结果一致。既能有效提高钳取活检组织检测幽门螺杆菌的准确性，亦能直接判断有无幽门螺旋杆菌感染。可在胃镜检查的同时检测幽门螺旋杆菌。
具体实施例方式本发明公开了ー种检测幽门螺旋杆菌胃内分布的试剂，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进エ艺參数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技木。本发明提供了ー种检测幽门螺旋杆菌胃内分布的组合物，其包括尿素、食用紫甘蓝色素。作为优选,尿素、食用紫甘蓝色素的质量比为4 6:1 3。作为优选,尿素、食用紫甘蓝色素的质量比为5:1 3。作为优选，尿素、食用紫甘蓝色素的质量比为5:1。本发明提供了ー种检测幽门螺旋杆菌胃内分布的试剂，其包括尿素、食用紫甘蓝色素和水。作为优选,尿素、食用紫甘蓝色素和水的质量比为4 6:1 3:8 12。作为优选，尿素、食用紫甘蓝色素和水的质量比为5:1 3:10。作为优选,尿素、食用紫甘蓝色素和水的质量比为5:1 10。
本发明提供ー种检测幽门螺旋杆菌胃内分布的试剂。该试剂在胃镜下可以观察到幽门螺旋杆菌在胃内的分布情况。尿素和食用紫甘蓝色素价廉易得，对人体无不良反应。检测幽门螺杆菌结果与快速尿素酶方法和病理组织学检测方法检测结果一致。既能有效提高钳取活检组织检测幽门螺杆菌的准确性，亦能直接判断有无幽门螺旋杆菌感染。本发明提供的了检测幽门螺旋杆菌胃内分布的试剂中所用原料均可由市场购得。下面结合实施例，进ー步阐述本发明实施例I胃镜检查前,用尿素5g、食用紫甘蓝色素lg、水50mL,配置混合溶液备用。胃镜检查观察胃黏膜情况并照相记录，然后通过活检钳道插入喷管，向胃粘膜上喷洒尿素、食用紫甘蓝色素溶液，观察颜色变化情况并照相记录。检查结束前，吸尽胃内残留液体。术中对变成蓝色的胃粘膜区域取活检组织I块，对不变色的胃粘膜区域取活检组织I块作为对照， 活检组织在体外快速尿素酶方法检测幽门螺杆菌，然后将活检组织浸泡于中性福尔马林液中，常规脱水、包埋、切片、进行Giemsa染色，用病理学方法检测幽门螺杆菌。对照三种方法检测幽门螺杆菌效果。在变成蓝色的胃粘膜区域取的活检组织，用体外快速尿素酶方法和进行组织切片Giemsa染色方法检测幽门螺杆菌均呈阳性。在不变成蓝色的胃粘膜区域取的活检组织，用体外快速尿素酶方法和进行组织切片Giemsa染色方法检测幽门螺杆菌均呈阴性。实施例2胃镜检查前，用尿素4g、食用紫甘蓝色素3g、水60mL,配置混合溶液备用。胃镜检查观察胃黏膜情况并照相记录，然后通过活检钳道插入喷管，向胃粘膜上喷洒尿素、食用紫甘蓝色素溶液，观察颜色变化情况并照相记录。检查结束前，吸尽胃内残留液体。术中对变成蓝色的胃粘膜区域取活检组织I块，对不变色的胃粘膜区域取活检组织I块作为对照，活检组织在体外快速尿素酶方法检测幽门螺杆菌，然后将活检组织浸泡于中性福尔马林液中，常规脱水、包埋、切片、进行Giemsa染色，用病理学方法检测幽门螺杆菌。对照三种方法检测幽门螺杆菌效果。在变成蓝色的胃粘膜区域取的活检组织，用体外快速尿素酶方法和进行组织切片Giemsa染色方法检测幽门螺杆菌均呈阳性。在不变成蓝色的胃粘膜区域取的活检组织，用体外快速尿素酶方法和进行组织切片Giemsa染色方法检测幽门螺杆菌均呈阴性。实施例3胃镜检查前,用尿素6g、食用紫甘蓝色素2g、水40mL,配置混合溶液备用。胃镜检查观察胃黏膜情况并照相记录，然后通过活检钳道插入喷管，向胃粘膜上喷洒尿素、食用紫甘蓝色素溶液，观察颜色变化情况并照相记录。检查结束前，吸尽胃内残留液体。术中对变成蓝色的胃粘膜区域取活检组织I块，对不变色的胃粘膜区域取活检组织I块作为对照，活检组织在体外快速尿素酶方法检测幽门螺杆菌，然后将活检组织浸泡于中性福尔马林液中，常规脱水、包埋、切片、进行Giemsa染色，用病理学方法检测幽门螺杆菌。对照三种方法检测幽门螺杆菌效果。在变成蓝色的胃粘膜区域取的活检组织，用体外快速尿素酶方法和进行组织切片Giemsa染色方法检测幽门螺杆菌均呈阳性。在不变成蓝色的胃粘膜区域取的活检组织，用体外快速尿素酶方法和进行组织切片Giemsa染色方法检测幽门螺杆菌均呈阴性。实施例4胃镜检查前,用尿素5g、食用紫甘蓝色素3g、水40mL,配置混合溶液备用。胃镜检查观察胃黏膜情况并照相记录，然后通过活检钳道插入喷管，向胃粘膜上喷洒尿素、食用紫甘蓝色素溶液，观察颜色变化情况并照相记录。检查结束前，吸尽胃内残留液体。术中对变成蓝色的胃粘膜区域取活检组织I块，对不变色的胃粘膜区域取活检组织I块作为对照，活检组织在体外快速尿素酶方法检测幽门螺杆菌，然后将活检组织浸泡于中性福尔马林液中，常规脱水、包埋、切片、进行Giemsa染色，用病理学方法检测幽门螺杆菌。对照三种方法检测幽门螺杆菌效果。
在变成蓝色的胃粘膜区域取的活检组织，用体外快速尿素酶方法和进行组织切片Giemsa染色方法检测幽门螺杆菌均呈阳性。在不变成蓝色的胃粘膜区域取的活检组织，用体外快速尿素酶方法和进行组织切片Giemsa染色方法检测幽门螺杆菌均呈阴性。实施例5胃镜检查前,用尿素4g、食用紫甘蓝色素lg、水60mL,配置混合溶液备用。胃镜检查观察胃黏膜情况并照相记录，然后通过活检钳道插入喷管，向胃粘膜上喷洒尿素、食用紫甘蓝色素溶液，观察颜色变化情况并照相记录。检查结束前，吸尽胃内残留液体。术中对变成蓝色的胃粘膜区域取活检组织I块，对不变色的胃粘膜区域取活检组织I块作为对照，活检组织在体外快速尿素酶方法检测幽门螺杆菌，然后将活检组织浸泡于中性福尔马林液中，常规脱水、包埋、切片、进行Giemsa染色，用病理学方法检测幽门螺杆菌。对照三种方法检测幽门螺杆菌效果。在变成蓝色的胃粘膜区域取的活检组织，用体外快速尿素酶方法和进行组织切片Giemsa染色方法检测幽门螺杆菌均呈阳性。在不变成蓝色的胃粘膜区域取的活检组织，用体外快速尿素酶方法和进行组织切片Giemsa染色方法检测幽门螺杆菌均呈阴性。实施例6胃镜检查前，用尿素5g、食用紫甘蓝色素lg，配置组合物备用。胃镜检查观察胃黏膜情况并照相记录，然后将上述组合物溶于50mL水通过活检钳道插入喷管，向胃粘膜上喷洒尿素、食用紫甘蓝色素组合物，观察颜色变化情况并照相记录。检查结束前，吸尽胃内残留液体。术中对变成蓝色的胃粘膜区域取活检组织I块，对不变色的胃粘膜区域取活检组织I块作为对照，活检组织在体外快速尿素酶方法检测幽门螺杆菌，然后将活检组织浸泡于中性福尔马林液中，常规脱水、包埋、切片、进行Giemsa染色，用病理学方法检测幽门螺杆菌。对照三种方法检测幽门螺杆菌效果。在变成蓝色的胃粘膜区域取的活检组织，用体外快速尿素酶方法和进行组织切片Giemsa染色方法检测幽门螺杆菌均呈阳性。在不变成蓝色的胃粘膜区域取的活检组织，用体外快速尿素酶方法和进行组织切片Giemsa染色方法检测幽门螺杆菌均呈阴性。
实施例7胃镜检查前，用尿素4g、食用紫甘蓝色素3g，配置备用。胃镜检查观察胃黏膜情况并照相记录，然后将上述组合物溶于40mL水通过活检钳道插入喷管，向胃粘膜上喷洒尿素、食用紫甘蓝色素组合物，观察颜色变化情况并照相记录。检查结束前，吸尽胃内残留液体。术中对变成蓝色的胃粘膜区域取活检组织I块，对不变色的胃粘膜区域取活检组织I块作为对照，活检组织在体外快速尿素酶方法检测幽门螺杆菌，然后将活检组织浸泡于中性福尔马林液中，常规脱水、包埋、切片、进行Giemsa染色，用病理学方法检测幽门螺杆菌。对照三种方法检测幽门螺杆菌效果。在变成蓝色的胃粘膜区域取的活检组织，用体外快速尿素酶方法和进行组织切片Giemsa染色方法检测幽门螺杆菌均呈阳性。在不变成蓝色的胃粘膜区域取的活检组织，用体外快速尿素酶方法和进行组织切片Giemsa染色方法检测幽门螺杆菌均呈阴性。 实施例8胃镜检查前，用尿素6g、食用紫甘蓝色素2g，配置组合物备用。胃镜检查观察胃黏膜情况并照相记录，然后将上述组合物溶于50mL75%的酒精，通过活检钳道插入喷管，向胃粘膜上喷洒组合物，观察颜色变化情况并照相记录。检查结束前，吸尽胃内残留液体。术中对变成蓝色的胃粘膜区域取活检组织I块，对不变色的胃粘膜区域取活检组织I块作为对照，活检组织在体外快速尿素酶方法检测幽门螺杆菌，然后将活检组织浸泡于中性福尔马林液中，常规脱水、包埋、切片、进行Giemsa染色，用病理学方法检测幽门螺杆菌。对照三种方法检测幽门螺杆菌效果。在变成蓝色的胃粘膜区域取的活检组织，用体外快速尿素酶方法和进行组织切片Giemsa染色方法检测幽门螺杆菌均呈阳性。在不变成蓝色的胃粘膜区域取的活检组织，用体外快速尿素酶方法和进行组织切片Giemsa染色方法检测幽门螺杆菌均呈阴性。以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
权利要求
1.ー种检测幽门螺旋杆菌胃内分布的组合物，其特征在于，其包括尿素、食用紫甘蓝色素。
2.根据权利要求I所述的组合物，其特征在于，所述尿素、所述食用紫甘蓝色素的质量比为4 6:1 3。
3.根据权利要求I所述的组合物，其特征在于，所述尿素、所述食用紫甘蓝色素的质量比为5:1 3。
4.根据权利要求I所述的组合物，其特征在于，所述尿素、所述食用紫甘蓝色素的质量比为5:1。
5.ー种检测幽门螺旋杆菌胃内分布的试剂，其特征在于，其包括尿素、食用紫甘蓝色素和水。
6.根据权利要求2所述的试剂，其特征在于，所述尿素、所述食用紫甘蓝色素和水的质量比为4 6:1 3:40 60。
7.根据权利要求2所述的试剂，其特征在于，所述尿素、所述食用紫甘蓝色素和水的质量比为5:1 3:50。
8.根据权利要求2所述的试剂，其特征在于，所述尿素、所述食用紫甘蓝色素和水的质量比为5:1:50。
全文摘要
本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种检测幽门螺旋杆菌胃内分布的组合物及试剂。该组合物和试剂在胃镜下可以观察到幽门螺旋杆菌在胃内的分布情况。组合物及试剂中尿素和食用紫甘蓝色素价廉易得，对人体无不良反应。检测幽门螺杆菌结果与快速尿素酶方法和病理组织学检测方法检测结果一致。
文档编号A61K49/00GK102688505SQ20121018358
公开日2012年9月26日 申请日期2012年6月5日 优先权日2012年6月5日
发明者垚森 申请人:垚森