防治骨质疏松的中药制剂及其制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种防治骨质疏松的中药制剂，是由下列重量份的原料药制成的药剂：海龙1-10份；淫羊藿10-50份；菟丝子10-50份。本发明中药制剂经药效学研究表明，能显著改善雌激素缺失骨质疏松大鼠骨骼生理状态和增强骨的强度和韧性；能明显促进成骨细胞骨形成能力；能显著抑制破骨细胞骨吸收能力，从而具有明显的防治绝经后骨质疏松作用。本发明还公开了前述防治绝经后骨质疏松的中药制剂的制备方法。
【专利说明】防治骨质疏松的中药制剂及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种防治骨质疏松的中药制剂；此外，本发明还涉及该中药制剂的制
备方法。
【背景技术】
[0002]骨质疏松是绝经后妇女和老年人常见病之一。近年来，骨质疏松的患病率和死亡率不断上升，给整个社会带来巨大的负担。而临床治疗骨质疏松药物多存在较大毒副作用和价格高的缺点。中医学认为“肾虚”是骨质疏松发生的基本病理因素。因此，科学家们不断致力于从资源丰富的补肾中药资源中开发新药。
【发明内容】
[0003]本发明所要解决的技术问题在于提供一种工艺稳定、质量可控、疗效确切、无毒副作用的治疗骨质疏松症的中药制剂，并提供其制备方法。
[0004]海龙为海龙科动物刁海龙、拟海龙或尖海龙的干燥体,收载于《中华海洋本草》具温肾壮阳、散结消肿功效， 研究发现海龙水提取物能显著改善去卵巢骨质疏松大鼠、骨密度、骨钙含量和骨断裂力。
[0005]淫羊藿和菟丝子均收载于《中华人民共和国药典》2010版(一部)，淫羊藿为小檗科植物淫羊藿、心叶淫羊藿或箭叶淫羊藿的干燥茎叶，善补肾阳，强筋骨，祛风湿。菟丝子为旋花科植物菟丝子或大菟丝子的干燥种子，具补益肝肾，固精缩尿等功效。
[0006]前述三种中药均具有补肾功效，经常一起出现在临床补肾壮阳的方剂中，它们的组合物也是民间常用的补肾壮阳经验方。本发明经研究发现，这三味药组方具有明显的抗骨质疏松作用。
[0007]根据实施例，本发明提供的一种防治骨质疏松的中药制剂，其创新点在于，该中药制剂是由如下重量份的原料药制成的药剂:海龙1-10份；淫羊藿10-50份；菟丝子10-50份。
[0008]根据实施例，本发明提供的另一种防治骨质疏松的中药制剂，其创新点在于，该中药制剂是由如下重量份的原料药制成的药剂:海龙干粉1-10份；淫羊藿提取物2-10份；菟丝子提取物2-10份。
[0009]根据实施例，本发明提供的再一种防治骨质疏松的中药制剂，其创新点在于，该中药制剂是由如下重量份的原料药制成的药剂:海龙干粉1-10份；总黄酮质量分数达50%的淫羊藿提取物1-5份；总黄酮质量分数达50%的菟丝子提取物1-5份。
[0010]根据实施例，本发明提供的又一种防治骨质疏松的中药制剂，其创新点在于，该中药制剂是由如下重量份的原料药制成的药剂:海龙提取物0.01-0.1份；总黄酮质量分数达50%的淫羊藿提取物1-5份；总黄酮质量分数达50%的菟丝子提取物1-5份。
[0011]根据实施例，本发明前述防治骨质疏松的中药制剂为片剂、胶囊剂、颗粒剂、泡腾片、口含片或口服液。[0012]根据实施例，本发明提供的一中防治骨质疏松的中药制剂的制备方法，包括如下步骤:
[0013]按配比称取海龙，粉碎，过60目筛，搅拌均匀，制得海龙干粉，备用；
[0014]按配比称取淫羊藿叶，加10-20倍重量体积夫人水煎煮2-4次，每次1_2小时，过滤，合并滤液，减压干燥成固体，粉碎，过60目筛，制得淫羊藿提取物，备用；
[0015]按配比称取菟丝子，粉碎，过40目筛，粉末加10-20倍重量体积夫人水提取2-4次，每次1-2小时，过滤，合并滤液，减压干燥成固体，粉碎，过60目筛，制得菟丝子提取物，备用;
[0016]将海龙干粉、淫羊藿提取物和菟丝子提取物混匀，加入赋形剂制成临床可接受的片剂、胶囊剂、颗粒剂、泡腾片、口含片或口服液。
[0017]根据实施例，本发明提供的另一种防治骨质疏松的中药制剂的制备方法，包括如下步骤:
[0018]按配比称取海龙，粉碎，过60目筛，搅拌均匀，制得海龙干粉，备用；海龙干粉用10-20倍重量、体积浓度为20-95%的乙醇提取1-3次，每次1_2小时，过滤，合并滤液，减压干燥成固体，粉碎，过60目筛，制得到海龙提取物，备用；
[0019]按配比称取淫羊藿叶粉末或菟丝子粉末，过40目筛，用10-20倍重量的水煎煮2-4次，每次1-2小时，过滤，合并滤液，将滤液减压浓缩至相对密度为1.00-1.05，加入体积浓度为60% -95%的乙醇浸泡12-48h，取上清液回收乙醇至无醇味；用DM301大孔吸附树脂精制回收乙醇后的上清液 :取无醇味的上清液上柱，用10-15倍上样量的蒸馏水洗去杂质，然后用体积浓度为40% -80%的乙醇洗脱，收集洗脱液，干燥成固体，粉碎，过60目筛，制得总黄酮质量分数达50%的淫羊藿提取物或总黄酮质量分数达50%的菟丝子提取物；
[0020]将海龙干粉或海龙提取物、总黄酮质量分数达50%的淫羊藿提取物和总黄酮质量分数达50%的菟丝子提取物混匀，加入赋形剂制成临床可接受的片剂、胶囊剂、颗粒剂、泡腾片、口含片或口服液。
[0021]本发明前述防治骨质疏松的中药制剂的制备方法中，大孔吸附树脂条件为:径高比1:5-20 ;树脂量和上样量之比为1-4:1 ;洗脱溶剂和上样量之比为5-20:1 ;洗脱速度为
0.5-2.0mL/min。
[0022]本发明中药制剂(以下称龙仙组方)经药效学研究表明，能显著改善雌激素缺失骨质疏松大鼠和老年骨质疏松大鼠骨骼生理状态，包括提高骨密度、改善骨微细结构和提高骨组织的生物力学等，同时促进成骨细胞骨形成和抑制破骨细胞骨吸收能力，从而具有显著的抗骨质疏松作用。因此，本发明中药制剂具有可开发为抗骨质疏松药物的潜力和应用前景。
【具体实施方式】
[0023]下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。这些实施例应理解为仅用于说明本发明而不用于限制本发明的保护范围。在阅读了本发明记载的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等效变化和修饰同样落入本发明权利要求所限定的范围。
[0024]实施例1 (制备龙仙组方)[0025]称取海龙粗粉(过60目筛)0.5kg，搅拌均匀，即海龙干粉。然后称取淫羊藿叶和菟丝子各0.5kg,分别加10倍重量体积夫人水煎煮3次，每次2小时，过滤，合并滤液，加入海龙干粉，混匀，减压干燥成固体，粉碎，过60目筛，得龙仙组方。
[0026]实施例2 (制备龙仙组方)
[0027]称取海龙粗粉(过60目筛)0.5kg，搅拌均匀，即海龙干粉。再用10倍量70%乙醇浸泡，700C回流提取3次，每次2小时，得到提取液；将所得到的提取液抽滤，合并滤液，减压回收乙醇，继续浓缩至60°C相对密度0.8-1.2kg/L，得海龙提取物浓缩液。称取淫羊藿叶和菟丝子各0.5kg,分别加20倍重量体积夫人水煎煮2次，每次I小时，过滤，合并滤液，加入海龙干粉或海龙提取物浓缩液，混匀，减压干燥成固体，粉碎，过60目筛，得龙仙组方。
[0028]实施例3 (制备龙仙组方)
[0029]称取海龙粗粉(过80目筛)0.5kg，搅拌均匀，即海龙干粉。再用20倍量50%乙醇浸泡，80°C回流提取3次，每次I小时，得到提取液；将所得到的提取液抽滤，合并滤液，减压回收乙醇，继续浓缩至60°C相对密度0.8-1.2kg/L，得海龙提取物浓缩液。称取淫羊藿叶和菟丝子各0.5kg，分别加10倍重量体积夫人水煎煮3次，每次I小时,过滤,合并滤液,加入海龙干粉或海龙提取物浓缩液，混匀，减压干燥成固体，粉碎，过80目筛，得龙仙组方。
[0030]实施例4 (制备龙仙组方)
[0031]称取海龙粗粉(过60目筛)0.5kg，搅拌均匀，即海龙干粉。用10倍量95%乙醇浸泡，70°C回流提取3次，每次I小时，得到提取液，过滤，合并滤液，减压回收乙醇，继续浓缩至60°C相对密度0.8-1.2kg/L，得海龙提取物浓缩液。淫羊藿叶或菟丝子粉末(过40目筛)，加10倍重量体积夫人水煎煮3次，每次2小时，过滤，合并滤液，滤液减压浓缩至密度为1.00-1.05，加95%的乙醇浸泡12-48h，取上清液回收乙醇至无醇味。用DM301大孔吸附树脂精制方法:取一定量的滤液`上柱，用15倍量(上样量)的纯化水洗去杂质，然后用50%的乙醇洗脱总黄酮(大孔树脂条件:径高比1:5树脂量(g)和上样量(mL) 1-1，洗脱溶剂和上样量5:20，洗脱速度0.5mL/min)。收集洗脱液，干燥成固体，粉碎，过60目筛，得到总黄酮质量分数达50%淫羊藿提取物或总黄酮质量分数达50%菟丝子提取物。将上述海龙干粉或海龙提取物浓缩液与淫羊藿、菟丝子提取物粉末混匀，得到龙仙组方。
[0032]实施例5 (制备龙仙组方)
[0033]称取海龙粗粉0.5kg，过60目筛，即海龙干粉，用20倍量70%乙醇浸泡，80°C回流提取2次，每次2小时，得到提取液，过滤，合并滤液，减压回收乙醇，浓缩至无乙醇味，60°C减压干燥成固体，粉碎，过60目筛，得海龙提取物。淫羊藿叶或菟丝子粉末(过40目筛)，加20倍重量体积夫人水煎煮2次，每次I小时，过滤，合并滤液，滤液减压浓缩至密度为
1.00-1.05，加95%的乙醇浸泡12-48h，取上清液回收乙醇至无醇味。用DM301大孔吸附树脂精制方法:取一定量的滤液上柱，用10倍量(上样量)的纯化水洗去杂质，然后用70%的乙醇洗脱总黄酮(大孔树脂条件:径高比1:5树脂量(g)和上样量(mL) 1-1，洗脱溶剂和上样量5:20，洗脱速度0.5mL/min)，收集洗脱液，干燥成固体，粉碎，过60目筛，得到总黄酮质量分数达50%淫羊藿提取物或总黄酮质量分数达50%的菟丝子提取物。将上述海龙干粉或海龙提取物与淫羊藿、菟丝子提取物粉末混匀，得到龙仙组方。
[0034]实施例6 (制备龙仙组方胶囊剂)
[0035]按实施例1-5的制备方法制备得到龙仙组方；加入赋形剂淀粉后，再将其制成胶囊1000粒。
[0036]实施例7 (制备龙仙组方胶囊剂)
[0037]按实施例1-5的制备方法制备得到龙仙组方；加入赋形剂羟基纤维素钠后，再将其制成胶囊1000粒。
[0038]以下通过药理实验具体说明本中药组方防治骨质疏松的药效。
[0039]实验例I (龙仙组方对去卵巢骨质疏松大鼠的影响)
[0040]1.实验材料
[0041]动物:SD大鼠由上海斯莱克实验动物有限公司提供。许可证号:SCXK(沪)2007-0005 ;动物分笼饲养于空调温室内，温度25±2° C，湿度40~60% ;用颗粒饲料喂养，自由饮水。
[0042]药材及试剂:尼尔雌醇，上海华联制药有限公司(批号:960301);药材:随机选取实施例1-5制备得到的龙仙组方，100% (按生药计)，使用时以蒸馏水溶解稀释。
[0043]2.实验方法
[0044]动物分组:将雌性SD大鼠60只(180-220g),按体重随机分为6组，每组10只，一组作为给生理盐水的假手术组(SHAM，10ml/kg)，其它5组大鼠进行卵巢切除手术，为骨质疏松模型组(0VX，给生理盐水10ml/kg)，尼尔雌醇阳性对照组(Nyl，lmg/kg/w)和龙仙组方(1.8g/kg、3.6g/kg和7.2g/kg)3个剂量组。后恢复5天后，连续灌胃给药3个月。
[0045]造模方法:各组大鼠用10%水合氯醛350mg/kg腹腔注射麻醉，在腹部切开1.5cm大小的切口，分离腹部肌肉，暴漏腹膜，剪开腹膜后取出双侧卵巢。假手术组切开腹部后将不做任何处理，缝合创口，消毒；手术组将双侧卵巢结扎后切除，缝合创口，消毒。
[0046]观察指标:
[0047](I)体重:每周称量大鼠一次体重。
[0048](2)脏器系数:大鼠处死后，迅速剥离其心、肝、脾、肺、肾和子宫的附属组织及脂肪，随即进行称重。脏器系数公式:脏器系数=脏器重量(mg)/体重(g)
[0049](3)血钙、血磷、血清雌二醇及碱性磷酸酶
[0050]眼眶取血，置于抗凝剂肝素钠管中，以3000转离心10分钟，分离血清，冻于-80° C备用。依据试剂盒方法检测。
[0051](4)骨密度
[0052] 大鼠处死后，剥离左侧股骨，剔除骨周围附属组织，用生理盐水擦洗干净，用锡箔纸包好，-80° C冻存，用于检测骨密度。
[0053]( 5 )骨组织形态计量学
[0054]取胫骨近心端，沿胫骨粗隆行额状面切开暴露骨髓腔，置于10%的磷酸福尔马林缓冲液中固定24h，乙醇逐级脱水，二甲苯脱脂，用甲基丙烯酸甲酯进行不脱钙骨包埋。4 μ m切片经Goldner’ s Trichrome染色,考察骨组织形态计量学静态参数.[0055](6)骨力学指标
[0056]大鼠处死后，剥离右侧股骨，剔除骨周围附属组织，用生理盐水擦洗干净，用于三点力学弯曲实验检测。将股骨置于WD-1型电子万能实验机作三点弯曲力学实验，跨距25mm,加载速度2mm/min,记录载荷-变形曲线。从曲线上计算最大载荷、最大烧度、抗弯刚度、能量吸收。[0057]3.实验结果
[0058]3.1对体重和脏器系数的影响
[0059]如表1所示，去卵巢模型组大鼠体重增加值明显高于Sham组，阳性药尼尔雌醇组与空白组接近，显著改善去卵巢模型组增加的体重重量，龙仙组方的体重增加量与模型组相比较无显著性差异。
[0060]如表1所示，去卵巢模型组大鼠各主要脏器系数(心、肝、脾、肺、肾)明显低于Sham组，阳性药尼尔雌醇组能使降低的脏器系数基本恢复到Sham组水平，龙仙组方组与模型组相比较主要脏器系数(心、肝、脾、肺、肾)无显著性变化。子宫系数在NYL干预下基本恢复正常水平，显示了明显的子宫增生副作用，龙仙组方没有出现这样的现象。
[0061]表1.龙仙组方对去卵巢大鼠主要脏器系数的影响
[0062]
【权利要求】
1.一种防治骨质疏松的中药制剂，其特征在于，该中药制剂是由如下重量份的原料药制成的药剂:海龙1-10份；淫羊藿10-50份；菟丝子10-50份。
2.一种防治骨质疏松的中药制剂，其特征在于，该中药制剂是由如下重量份的原料药制成的药剂:海龙干粉1-10份；淫羊藿提取物2-10份；菟丝子提取物2-10份。
3.一种防治骨质疏松的中药制剂，其特征在于，该中药制剂是由如下重量份的原料药制成的药剂:海龙干粉1-10份；总黄酮质量分数达50%的淫羊藿提取物1-5份；总黄酮质量分数达50%的菟丝子提取物1-5份。
4.一种防治骨质疏松的中药制剂，其特征在于，该中药制剂是由如下重量份的原料药制成的药剂:海龙提取物0.01-0.1份；总黄酮质量分数达50%的淫羊藿提取物1-5份；总黄酮质量分数达50%的菟丝子提取物1-5份。
5.根据权利要求1-4中任何一项所述的防治骨质疏松的中药制剂，其特征在于，该中药制剂为片剂、胶囊剂、颗粒剂、泡腾片、口含片或口服液。
6.权利要求1或2所述的防治骨质疏松的中药制剂的制备方法，其特征在于，该方法包括如下步骤: 按配比称取海龙，粉碎，过60目筛，搅拌均匀，制得海龙干粉，备用； 按配比称取淫羊藿叶，加10-20倍重量体积夫人水煎煮2-4次，每次1-2小时，过滤，合并滤液，减压干燥成固体，粉碎，过60目筛，制得淫羊藿提取物，备用； 按配比称取菟丝子，粉碎，过40目筛，粉末加10-20倍重量体积夫人水提取2-4次，每次1-2小时，过滤，合并滤液，减压干燥成固体，粉碎，过60目筛，制得菟丝子提取物，备用；` 将海龙干粉、淫羊藿提取物和菟丝子提取物混匀，加入赋形剂制成临床可接受的片剂、胶囊剂、颗粒剂、泡腾片、口含片或口服液。
7.权利要求3或4所述的防治骨质疏松的中药制剂的制备方法，其特征在于，该方法包括如下步骤: 按配比称取海龙，粉碎，过60目筛，搅拌均匀，制得海龙干粉，备用；海龙干粉用10-20倍重量、体积浓度为20-95%的乙醇提取1-3次，每次1-2小时，过滤，合并滤液，减压干燥成固体，粉碎，过60目筛，制得到海龙提取物，备用； 按配比称取淫羊藿叶粉末或菟丝子粉末，过40目筛，用10-20倍重量的水煎煮2-4次，每次1-2小时，过滤，合并滤液，将滤液减压浓缩至相对密度为1.00-1.05，加入体积浓度为60% -95%的乙醇浸泡12-48h，取上清液回收乙醇至无醇味；用DM301大孔吸附树脂精制回收乙醇后的上清液:取无醇味的上清液上柱，用10倍上样量的蒸馏水洗去杂质，然后用体积浓度为40% -80%的乙醇洗脱，收集洗脱液，干燥成固体，粉碎，过60目筛，制得总黄酮质量分数达50%的淫羊藿提取物或总黄酮质量分数达50%的菟丝子提取物； 将海龙干粉或海龙提取物、总黄酮质量分数达50%的淫羊藿提取物和总黄酮质量分数达50%的菟丝子提取物混匀，加入赋形剂制成临床可接受的片剂、胶囊剂、颗粒剂、泡腾片、口含片或口服液。
8.根据权利要求7所述的防治骨质疏松的中药制剂的制备方法，其特征在于，大孔吸附树脂条件为:径高比1:5-20 ;树脂量和上样量之比为1-4:1 ;洗脱溶剂和上样量之比为5-20:1 ;洗脱速度为 0.5-2.0mL/min。
【文档编号】A61P19/10GK103655670SQ201210359162
【公开日】2014年3月26日 申请日期:2012年9月17日 优先权日:2012年9月17日
【发明者】秦路平, 蒋益萍, 薛黎明, 黄宝康 申请人:中国人民解放军第二军医大学