专利名称：赤芍总苷的一种制备方法
技术领域：
本发明属于生物化学技术领域，具体涉及一种提取纯化赤芍总苷的制备方法。
背景技术：
赤苟为毛茛科苟药(Paeonialactiflora Pali.)或川赤苟(P. veitchii Lynch)的干燥根，味苦，微寒，归肝经，具有清热凉血，散瘀镇痛之功效。赤芍总苷(Total PaeonyGlycoside, TPG)为赤芍的总提取物，主要为单萜苷类化合物，包括芍药苷(3. I %-7. 0% )、芍药内酯苷(O. 1%)、羟基芍药苷(O. 06%)、苯甲酰芍药苷(0.01%)等组成。赤芍总苷的药理作用有以下几个方面1.对血液的作用，包括抗凝血、抗血栓作用、抗内毒素作用、改善微循环；2.对缺血性损伤的保护作用，TPG对多种组织器官的缺血性损伤有保护作用，包括对肾缺血的保护作用、对缺血心肌的保护作用、对脑缺血性损伤的保护作用；3.抗肿瘤 的作用；4.肝脏保护作用，其作用机制可能与抗脂质过氧化有关；5.改善小鼠学习记忆能力；6.抗抑郁作用，因此，赤芍总苷可作为治疗多种疾病的原料药，市场前景广阔。赤芍总苷质量由于受药材来源、生产工艺及质量分析方法等多种因素的影响，以致其质量不统一。赤芍总苷提取工艺多为水提或醇提后萃取分离，或以乙醇提取后经大孔吸附树脂分离，这些技术无法完全破坏细胞壁的束缚，无法最大限度地提取出有效成分并进行充分的分离，因而所得产品纯度不高。本发明采用微波辅助提取技术制备赤芍总苷，再经微滤和大孔吸附树脂联用精制产品，克服现有技术不足，操作简单，同时提高产品的纯度和产率，有利于大规模工业化生产。
发明内容
本发明的目的在于提供一种简单有效，产品纯度高的赤芍总苷的制备方法，以克服现有技术生产率低，产品纯度差，不利于推广生产等问题。为实现上述目的，本发明提供了一种赤芍总苷的制备方法，具体步骤如下(I)粉碎取赤芍根去杂质，干燥，粉碎至60-80目；(2)微波提取向赤芍粉末中加入5-15倍水，搅拌均匀，功率为250-350W条件下微波提取30-60s ；(3)离心提取液6000-8000r/min离心10_20min,收集上清液；(4)微滤离心后上清液过孔径为O. 2μπι的无机陶瓷微滤膜，操作压力
O.08-0. 15Mpa,以错流速度O. 6-1. Om/s进行循环微滤,收集滤液；(5)大孔吸附树脂分离滤液过非极性大孔吸附树脂，先以蒸馏水4-6BV，再以30%乙醇4-8BV洗脱，洗脱流速3-6ml/min，收集洗脱液；(6)冷冻干燥在-50°C条件下冷冻干燥，得赤芍总苷。本发明的有益效果为(I)在提取过程中以水为提取溶剂，与传统的乙醇回流提取相比较，使用加工设备少，同时采用微波辅助技术，使原料中有效成分更充分和更容易地被提取出来，赤芍总苷得率达6. 5%，使提取工艺具有快捷、高效、节能等特点；(2)采用微滤和大孔吸附树脂联用精制赤芍总苷，与传统的单一大孔吸附树脂分离相比较，可以有效地除去杂质，选择性地保留有效成分，提高产品纯度，使赤芍总苷纯度达88%以上,为大规|旲生广提供新的工艺思路。
附图I是以赤芍为原料，首先将赤芍根粉碎，加适量水，用微波辅助提取，然后将提取液高速离心分离，收集上清液，无机陶瓷膜微滤，滤液上大孔吸附树脂柱洗脱，冷冻干燥制得赤芍总苷的工艺流程图。
具体实施方式
提出以下实例用于说明本发明，但本发明的内容并不局限于此。实施例I(I)粉碎取赤芍根lOOOg，去杂质，干燥，粉碎至60目；(2)微波提取向赤芍粉末中加入5倍水，搅拌均匀，功率280W条件下微波提取30s ；(3)离心提取液8000r/min离心IOmin,收集上清液；(4)微滤离心后上清液过孔径为O. 2μπι的无机陶瓷微滤膜，操作压力O. OSMpa,以错流速度O. 6m/s进行循环微滤,收集滤液；(5)大孔吸附树脂分离滤液过非极性大孔吸附树脂HPD100，先以蒸馏水4BV，再以30%乙醇5BV洗脱，洗脱流速3ml/min，收集洗脱液；(6)冷冻干燥在_50°C条件下冷冻干燥，得赤芍总苷32. 56g，纯度88. 9%。实施例2(I)粉碎取赤芍根lOOOg，去杂质，干燥，粉碎至60目；(2)微波提取向赤芍粉末中加入8倍水，搅拌均匀，功率为300W条件下微波提取40s ；(3)离心提取液7000r/min离心15min,收集上清液；(4)微滤离心后上清液过孔径为0. 2 μ m的无机陶瓷微滤膜，操作压力0. OSMpa,以错流速度0. 8m/s进行循环微滤，收集滤液；(5)大孔吸附树脂分离滤液过非极性大孔吸附树脂HPD100，先以蒸馏水4BV，再以30%乙醇5BV洗脱，洗脱流速3ml/min，收集洗脱液；(6)冷冻干燥在_50°C条件下冷冻干燥，得赤芍总苷34. Ig,纯度90. I %。实施例3(I)粉碎取赤芍根lOOOg，去杂质，干燥，粉碎至80目；(2)微波提取向赤芍粉末中加入10倍水，搅拌均匀，功率为300W条件下微波提取 40s ；(3)离心提取液7000r/min离心15min，收集上清液；(4)微滤离心后上清液过孔径为0. 2μπι的无机陶瓷微滤膜，操作压力0. IOMpa,以错流速度0. 8m/s进行循环微滤，收集滤液；
(5)大孔吸附树脂分离滤液过非极性大孔吸附树脂AB-8，先以蒸馏水5BV，再以30%乙醇6BV洗脱，洗脱流速4ml/min，收集洗脱液；(6)冷冻干燥在_50°C条件下冷冻干燥，得赤芍总苷35. 4g，纯度92. 5%。实施例4(I)粉碎取赤芍根lOOOg，去杂质，干燥，粉碎至80目；(2)微波提取向赤芍粉末中加入10倍水，搅拌均匀，功率为300W条件下微波提取 50s ；(3)离心提取液8000r/min离心12min,收集上清液；
(4)微滤离心后上清液过孔径为O. 2 μ m的无机陶瓷微滤膜，操作压力O. IMpa,以错流速度I. Om/s进行循环微滤，收集滤液；(5)大孔吸附树脂分离滤液过非极性大孔吸附树脂AB-8，先以蒸馏水5BV，再以30%乙醇7BV洗脱，洗脱流速5ml/min，收集洗脱液；(6)冷冻干燥在_50°C条件下冷冻干燥，得赤芍总苷31. 9g，纯度90. 4%。实施例5(I)粉碎取赤芍根lOOOg，去杂质，干燥，粉碎至70目；(2)微波提取向赤芍粉末中加入13倍水，搅拌均匀，功率为320W条件下微波提取 50s ；(3)离心提取液6000r/min离心20min,收集上清液；(4)微滤离心后上清液过孔径为0. 2μπι的无机陶瓷微滤膜，操作压力0. 15Mpa，以错流速度0. 9m/s进行循环微滤，收集滤液；(5)大孔吸附树脂分离滤液过非极性大孔吸附树脂D101，先以蒸馏水4BV，再以30%乙醇6BV洗脱，洗脱流速5ml/min，收集洗脱液；(6)冷冻干燥在_50°C条件下冷冻干燥，得赤芍总苷35. 2g,纯度89. 8%。
权利要求
1.一种赤芍总苷的制备方法，其特征在于，包括以下步骤 (1)粉碎取赤苟根去杂质,干燥,粉碎； (2)微波提取加适量水，微波辅助提取； (3)离心将提取液进行高速离心，收集上清液； (4)微滤上清液用微滤机以错流方式进行循环微滤，收集滤液； (5)大孔吸附树脂分离滤液上大孔吸附树脂柱，用水洗脱，再以一定浓度的乙醇洗脱，收集洗脱液； (6)冷冻干燥滤液冷冻干燥，即得赤芍总苷。
2.根据权利要求I所述的制备赤芍总苷的方法，其特征在于步骤(I)所述赤芍粉碎至60-80 目。
3.根据权利要求I所述的制备赤芍总苷的方法，其特征在于步骤(2)所述的加水量为5-15 倍。
4.根据权利要求I所述的制备赤芍总苷的方法，其特征在于步骤(2)所述的微波辅助提取功率为250-350W，时间为30-60s。
5.根据权利要求I所述的制备赤芍总苷的方法，其特征在于步骤(3)所述的离心转速为 6000-8000r/min，处理 10_20min。
6.根据权利要求I所述的制备赤芍总苷的方法，其特征在于步骤(4)所述的无机陶瓷微滤膜孔径为O. 2 μ m，错流速度O. 6-1. Om/s，操作压力O. 08-0. 15MPa。
7.根据权利要求I所述的制备赤芍总苷的方法，其特征在于步骤(5)所述的大孔吸附树脂选用非极性树脂。
8.根据权利要求I所述的制备赤芍总苷的方法，其特征在于步骤(5)所述的大孔吸附树脂洗脱先以蒸馏水4-6BV，再以30%乙醇4-8BV洗脱，洗脱流速3_6ml/min。
9.根据权利要求I所述的制备赤芍总苷的方法，其特征在于步骤(6)所述的冷冻干燥温度为_50°C。
10.根据权利要求I所述的制备赤芍总苷的方法，其特征在于得纯度达88%以上的赤芍总苷。
全文摘要
本发明公开了一种赤芍总苷的制备方法，以药材赤芍为原料，采用微波辅助提取技术，再经无机陶瓷膜微滤和大孔吸附树脂联用精制，冷冻干燥后制得纯度达到88％以上的赤芍总苷。本发明采用微波辅助技术，使原料中有效成分更充分和更容易地被提取出来，采用微滤和大孔吸附树脂联用精制赤芍总苷，整个工艺具有产品纯度高，得率高，操作简便等特点。
文档编号A61P9/10GK102861140SQ20121037830
公开日2013年1月9日 申请日期2012年10月9日 优先权日2012年10月9日
发明者张丽云, 群英措姆 申请人:西藏瑞阳藏药技术开发有限公司