专利名称：治疗消化道溃疡用的美洲大蠊提取物的提取方法
技术领域：
本发明涉及医药技术领域，尤其涉及一种治疗消化道溃疡用的美洲大蠊提取物的提取方法。
背景技术：
美洲大蠊(Periplaneta americana)是蜚蠊科中体积最大的昆虫,成虫体长29 35毫米，红褐色，翅长于腹部末端。触角很长，前胸背板中间有较大的蝶形褐色斑纹，斑纹的后缘有完整的黄色带纹，原产于南美洲，食性广泛、喜食糖和淀粉、污染食物。美洲大蠊是传统的中药材，以成虫入药。性寒味咸，有毒，有辛辣味、有散瘀、消积、解毒、利水、消肿等功能。现代研究发现，美洲大蠊表皮含有巩膜质、甲壳质、溴、锌、镍、猛、钾、钙、钛、氯、硫、硅、铝、镁等元素，肌肉水解13种氨基酸，身体贮藏微生素BI、B2、烟酸和·抗坏血酸等，淋巴含海藻糖、海藻糖酶、糖蛋白、肌醇、原儿茶酸葡萄甙等，全体含麦角硫因、龙虾肌碱、胡芦巴碱、甘氨酸、甜菜碱、肛碱、三甲胺、腺嘌呤等。美洲大蠊干燥虫体提取物，含有WHF(多元醇类、表皮生长因子)、粘氨酸、粘糖氨酸及多种氨基酸等活性物质，具有抗炎、消肿、促进细胞增殖和新生肉芽组织增长，加速病损组织修复，加快坏死组织脱落，提高机体免疫功能等作用。美洲大蠊目前在治疗烧烫伤、口腔溃疡、胃溃疡、痔疮、肛裂、胃炎和消化性胃溃疡、胃溃疡性结肠炎、妇科疾病、尿布疹、过敏性鼻炎、抗肿瘤等方面均有应用，但是，目前的应用多为传统中药应用方式，部分应用是干燥成虫作为药物组方的一部分，部分是将其提取物与其他药物配伍使用。虽然对美洲大蠊提取物的提取方法有一些公开，但是，美洲大蠊所含成份较多，不同的提取方式得到的成份也有所差异，所得提取物对不同的疾病也有不同的效果。但是，目前公开的技术，对于美洲大蠊特定有效成份提取用于治疗某种疾病的技术工艺尚不成熟，针对治疗特定疾病所进行的深加工和深度提取将成为新的发展趋势。
发明内容
本发明的目的是提供一种治疗消化道溃疡用的美洲大蠊提取物的提取方法，所采用的工艺路线可使美洲大蠊中对治疗消化道溃疡的特定有效成份聚集，从而提高单纯美洲大蠊提取物对治疗消化道溃疡的治疗效果。本发明采用以下技术实现上述目的
治疗消化道溃疡用的美洲大蠊提取物的提取方法，包括以下步骤
A、粉碎将干燥的美洲大蠊虫体粉碎，过24目筛，制得美洲大蠊粗粉；
B、浸泡将步骤A所得美洲大蠊粗粉用浓度90% 95%的乙醇浸泡，使乙醇液面高出粗粉液面5 IOcm密闭保存，制得粗粉混合液；
C、提取将步骤B所得粗粉混合液在70 85°C的温度下进行3 5次回流提取，对粗粉混合液进行第一次提取时，加粗粉重量5 8倍量浓度90% 95%的乙醇，提取时间为4 6小时；第二次以后每次提取加粗粉重量3 6倍量浓度90% 95%的乙醇，提取时间为3 5小时；合并提取液，过滤得乙醇提取液；
D、一级浓缩将步骤C所得乙醇提取液在真空度-O.05 -O. 06MPa、温度50 60°C的条件下减压浓缩，至比重为I. 05 I. 15时，得乙醇浓缩液；
E、脱脂将步骤D所得乙醇浓缩液加入乙醇浓缩液重量7 10倍量的纯化水，边搅拌边升温至85 95 °C后，搅拌10 60分钟，搅拌速度为20 60转/分，然后保温静置I 5小时使油水分层；
F、二级浓缩将步骤E所得下层水液放出，经滤纸过滤后，滤液在温度60 80°C、真空度-O. 05 -O. 06MPa条件下减压浓缩，浓缩至比重为I. 25 I. 35时，得治疗消化道溃疡用的美洲大蠊提取物。优选地，步骤C可以采用以下技术方案将步骤B所得粗粉混合液在75 80°C的·温度下进行4次回流提取，对粗粉混合液进行第一次提取时，加粗粉5倍量浓度92%的乙醇，提取时间为5小时；第二次以后每次提取加粗粉4倍量浓度92%的乙醇，提取时间为4小时，合并三次提取液，过滤得乙醇提取液。更优选地，步骤E可以采用以下技术方案将步骤D所得乙醇浓缩液加入乙醇浓缩液重量8倍量的纯化水，边搅拌边升温至85 95°C后，搅拌40分钟，搅拌速度为40转/分，然后保温静置4小时使油水分层。本发明的有益效果
本发明所述方法致力于由纯中药应用向特定疾病、特定有效成份应用方向发展，所采用的工艺路线可使美洲大蠊中对治疗消化道溃疡的特定有效成份聚集，从而提高单纯美洲大蠊提取物对治疗消化道溃疡的治疗效果。具体技术具有的有益效果如下
I、采用本工艺路线进行提取，可有效去除美洲大蠊中含有的大量蛋白质，除脂率高，得到的提取物油脂含量(石油醚提取物)以A (吸收度)/W (重量)计不得过O. 30。2、用浓度90% 95%的乙醇浸泡粗粉，不仅可防止微生物繁殖导致美洲大蠊粗粉腐败变质，延长保存时间，而且可以提高治疗消化道溃疡的特定有效成份得率。3、采用本发明所述工艺流程，治疗消化道溃疡的特定有效成份得率含量可高达13% 22%，而采用本提取物制备的治疗消化道溃疡的药物，其对消化道溃疡的治愈率可达55% 70%，总有效率可达97% 99%。其中，对口腔溃疡治愈率可达60% 75%，总有效率可达99%以上；对胃及十二指肠溃疡治愈率可达45% 65%，总有效率可达95%以上。4、采用本发明所述工艺路线进行提取，因各工艺参数控制合理，故可防止提取物中对治疗消化道溃疡的活性物质水解，提高其药物疗效。5、本发明所用工艺路线简短，可以降低生产成本，提高生产效率。6、取上述发明所得美洲大蠊提取物，加入适量药剂辅料，可以制成临床上适用的制剂(片剂、胶囊、合剂、口服液、微丸剂、滴丸剂、喷雾剂、气雾剂、凝胶剂等)，用于消化道溃疡(内服或喷涂)的治疗。
具体实施例实施例I
治疗消化道溃疡用的美洲大蠊提取物的提取方法，包括以下步骤A、粉碎将200Kg干燥的美洲大蠊虫体粉碎，过24目筛，制得美洲大蠊粗粉；
B、浸泡将步骤A所得美洲大蠊粗粉用浓度95%的乙醇浸泡，使乙醇液面高出粗粉液面5cm密闭保存，制得粗粉混合液；
C、提取将步骤B所得粗粉混合液投入提取罐内，在70 85°C的温度下进行3次回流提取，对粗粉混合液进行第一次提取时，加IOOOKg浓度95%的乙醇，提取时间为4小时；第二次以后每次提取加600Kg浓度95%的乙醇，提取时间为3小时；合并提取液，过滤得乙醇提取液；
D、一级浓缩将步骤C所得乙醇提取液放入单效浓缩器，在真空度-O.05 -O. 06MPa、温度50 60°C的条件下减压浓缩，至比重为I. 08时，得乙醇浓缩液；
E、脱脂将步骤D所得乙醇浓缩液移入脱脂罐内，加入380Kg纯化水，边搅拌边升温至85 95°C后，搅拌10分钟，搅拌速度为60转/分，然后保温静置I小时使油水分层；·
F、二级浓缩将步骤E所得下层水液放出，经滤纸过滤后，滤液移入浓缩器，在温度60 80°C、真空度-O. 05 -O. 06MPa条件下减压浓缩，浓缩至比重为I. 28时，得治疗消化道溃疡用的美洲大蠊提取物25. 2Kg。采用上述工艺流程，主要用于生产治疗(口腔溃疡、胃及十二指肠溃疡)的药物提取物，提取收率达12. 6%，各工艺对治疗(口腔溃疡、胃及十二指肠溃疡)的特定有效成份得率含量可高达16. 3%，其对(口腔溃疡、胃及十二指肠溃疡)的治愈率可达63. 4%，总有效率可达98. 9%。油脂含量(石油醚提取物)以A/W计为O. 24。实施例2
治疗消化道溃疡用的美洲大蠊提取物的提取方法，包括以下步骤
A、粉碎将200Kg干燥的美洲大蠊虫体粉碎，过24目筛，制得美洲大蠊粗粉；
B、浸泡将步骤A所得美洲大蠊粗粉用浓度92%的乙醇浸泡，使乙醇液面高出粗粉液面8cm密闭保存，制得粗粉混合液；
C、提取将步骤B所得粗粉混合液投入提取罐内，在70 85°C的温度下进行4次回流提取，对粗粉混合液进行第一次提取时，IOOOKg浓度92%的乙醇，提取时间为5小时；第二次以后每次提取加SOOKg浓度92%的乙醇，提取时间为4小时；合并提取液，过滤得乙醇提取液；
D、一级浓缩将步骤C所得乙醇提取液放入单效浓缩器，在真空度-O.05 -O. 06MPa、温度50 60°C的条件下减压浓缩，至比重为I. 11时，得乙醇浓缩液；
E、脱脂将步骤D所得乙醇浓缩液移入脱脂罐内，加入416Kg纯化水，边搅拌边升温至85 95°C后，搅拌40分钟，搅拌速度为40转/分，然后保温静置4小时使油水分层；
F、二级浓缩将步骤E所得下层水液放出，经滤纸过滤后，滤液移入浓缩器，在温度60 80°C、真空度-O. 05 -O. 06MPa条件下减压浓缩，浓缩至比重为I. 32时，得治疗消化道溃疡用的美洲大蠊提取物31. 4Kg。采用上述工艺流程，主要用于生产治疗(口腔溃疡、胃及十二指肠溃疡)的药物提取物，提取收率达15. 7%，各工艺对治疗(口腔溃疡、胃及十二指肠溃疡)的特定有效成份得率含量可高达17. 1%，其对(口腔溃疡、胃及十二指肠溃疡)的治愈率可达59. 5%，总有效率可达97. 2%。油脂含量(石油醚提取物)以A/W计为O. 19。实施例3治疗消化道溃疡用的美洲大蠊提取物的提取方法，包括以下步骤
A、粉碎将200Kg干燥的美洲大蠊虫体粉碎，过24目筛，制得美洲大蠊粗粉；
B、浸泡将步骤A所得美洲大蠊粗粉用浓度90%的乙醇浸泡，使乙醇液面高出粗粉液面IOcm密闭保存，制得粗粉混合液；
C、提取将步骤B所得粗粉混合液投入提取罐内，在70 85°C的温度下进行5次回流提取，对粗粉混合液进行第一次提取时，1600Kg浓度90%的乙醇，提取时间为6小时；第二次以后每次提取加1200Kg浓度90%的乙醇，提取时间为5小时；合并提取液，过滤得乙醇提取液；
D、一级浓缩将步骤C所得乙醇提取液放入单效浓缩器，在真空度-O.05 -O. 06MPa、温度50 60°C的条件下减压浓缩，至比重为I. 14时，得乙醇浓缩液；
E、脱脂将步骤D所得乙醇浓缩液移入脱脂罐内，加入430Kg纯化水，边搅拌边升温至·85 95°C后，搅拌60分钟，搅拌速度为20转/分，然后保温静置5小时使油水分层；
F、二级浓缩将步骤E所得下层水液放出，经滤纸过滤后，滤液移入浓缩器，在温度60 80°C、真空度-O. 05 -O. 06MPa条件下减压浓缩，浓缩至比重为I. 26时，得治疗消化道溃疡用的美洲大蠊提取物32. IKgo采用上述工艺流程，主要用于生产治疗(口腔溃疡、胃及十二指肠溃疡)的药物提取物，提取收率达16. 1%，各工艺对治疗(口腔溃疡、胃及十二指肠溃疡)的特定有效成份得率含量可高达15. 7%，其对(口腔溃疡、胃及十二指肠溃疡)的治愈率可达63. 8%，总有效率可达99. 1%。油脂含量(石油醚提取物)以A/W计为O. 21。实施例4
治疗消化道溃疡用的美洲大蠊提取物制备的药物及治疗病例
取上述(实施例I)美洲大蠊提取物7g，加甘油100ml、苯甲酸钠2. 5g，加纯化水至800ml，加热至沸腾，搅拌，趁热过滤，滤液再加水1000ml。灌装成IOOml/瓶的合剂，或IOml/支的口服液。病例资料及分组79例，经胃纤维内镜确诊为胃溃疡或胃与十二指肠复合性溃疡；均无并发症；分为治疗组45例和对照组34例。治疗组男28例，女17例；年龄15 62岁；病程6个月 17年；胃溃疡38例(84. 4%)，复合性溃疡7例(15. 6%)。对照组男20例，女14例，年龄16 60岁；病程6个月 15年；胃溃疡26例(76. 5%)，复合性溃疡8例(23. 5%)ο方法对照组采用三联疗法(1999年海南全国幽门螺杆菌科研协作会议推荐的三联疗法方案)奥美拉唑20mg+阿莫西林Ig+替硝唑O. 5g，每日2次，早、晚饭前服用。治疗组在对照组治疗基础上加上述口服液IOm服用，每日3次，早晚饭前及睡前各I次，与前三联药物间隔至少40分钟服用。两组病例用药均为2周，服药期间忌烟、酒及酸辣刺激性食物。治疗结束后4周及I年进行复查。疗效判断标准(I)治愈自觉症状及体征消失，溃疡面愈合；(2)好转自觉症状和体征明显减轻，溃疡面缩小50%以上；(3)无效自觉症状及体征未见减轻，溃疡面未见缩小；(4)复发治愈或好转后出现治疗前的部分或全部症状，并经胃纤维内镜检查病变阳性者。(I)治愈加(2)好转为有效。结果:治疗组治愈30例(66. 7%)，好转14例(31. 1%)，无效I例(2.2%)，有效率97. 8%。对照组治愈15 M (44. 1%)，好转13例(38. 2%)，无效6例(17. 6%)，有效率82. 4%。治疗组治愈率高于对照组。实施例5
治疗消化道溃疡用的美洲大蠊提取物制备的药物及治疗病例
取上述(实施例2)美洲大蠊提取物140g，加淀粉670g、糊精220g，加适当浓度酒精制软材，制粒，干燥，加硬脂酸镁2g整粒，得颗粒lOOOg，按每粒装O. 25g填充胶囊。病例资料及分组62例，经胃镜检查确诊为胃溃疡，其中男性例41，女性21例，发病年龄17 70岁，病程3月 7年。临床表现口燥咽干，饥不欲食，院部隐痛，大便干结，小便短少，嗳气吞酸，舌红少津，脉细而数，辨证属胃阴虚证型消化性溃疡。随机分为治疗组35例和对照组27例。方法治疗组给予上述胶囊口服，每次2粒，每日3次，对照组给予法莫替丁片，每·次20mg，早晚各I次。而对HP阳性的患者均加服阿莫西林，每次lg，每日2次，痢特灵每次
O.lg，每日2次。青霉素过敏者未列人本观察范围。两组均治疗4周为I疗程，I疗程结束后进行胃镜复查。疗效判断标准胃镜疗效(1)治愈溃疡及周围炎症全部消失；(2)好转溃疡消失，仍有炎症；(3)有效溃疡面积缩小> 50% ； (4)无效溃疡无改变或缩小< 50%。临床症候疗效治疗后临床症状、体征消失或基本消失，证候积分较治疗前减少> 95%为临床痊愈；治疗后临床症状明显改善，证候积分减少> 70%为显效；治疗后临床症状好转,证候积分减少> 30%为有效；治疗后临床症状无明显改善，证候积分减少不足30%为无效。结果治疗组和对照组在中医症候疗效比较上无显著差异(P > O. 05)。表明两药在中医证候疗效改善方面均有显著作用，见下表I。两组在胃镜疗效比较上，治疗组总有效率达94. 9%，对照组总有效率为85. 2%，治疗组明显高于对照组，见表2。表I两组中医症候疗效比较
i且别卜I临床疫愈(％) I显效(％)I有效(％) I无效(％) I总有效率(％)—
治疗组 ~9(25·7%)T6~(45.7%) ~9 (25.7%) 1(2.9%) 97. 1%^
对照组丨27|6 (22.2%)|l0 (37.0%) |θ (33.3%) \2 (7.4%) \92.6%^
表2两组病人胃镜疗效比较
别In I临床疫愈(％) I显效(％)I有效(％)I无效(％)I总有效率(％)
^疗组(51.4%)~(28.6%).5(14.3%) 2(5.7%)94~9%
it 照组丨27丨13 (48. 1%)丨6 (22.2%)丨4(14.8%) 丨4 (14.8%)|δ5.2%
权利要求
1.治疗消化道溃疡用的美洲大蠊提取物的提取方法，其特征在于包括以下步骤 A、粉碎将干燥的美洲大蠊虫体粉碎，过24目筛，制得美洲大蠊粗粉； B、浸泡将步骤A所得美洲大蠊粗粉用浓度90% 95%的乙醇浸泡，使乙醇液面高出粗粉液面5 IOcm密闭保存，制得粗粉混合液； C、提取将步骤B所得粗粉混合液在70 85°C的温度下进行3 5次回流提取，对粗粉混合液进行第一次提取时，加粗粉重量5 8倍量浓度90% 95%的乙醇，提取时间为4 6小时；第二次以后每次提取加粗粉重量3 6倍量浓度90% 95%的乙醇，提取时间为3 5小时；合并提取液，过滤得乙醇提取液； D、一级浓缩将步骤C所得乙醇提取液在真空度-O.05 -O. 06MPa、温度50 60°C的条件下减压浓缩，至比重为I. 05 I. 15时，得乙醇浓缩液； E、脱脂将步骤D所得乙醇浓缩液加入乙醇浓缩液重量7 10倍量的纯化水，边搅拌边升温至85 95°C后，搅拌10 60分钟，搅拌速度为20 60转/分，然后保温静置I 5小时使油水分层； F、二级浓缩将步骤E所得下层水液放出，经滤纸过滤后，滤液在温度60 80°C、真空度-O. 05 -O. 06MPa条件下减压浓缩，浓缩至比重为I. 25 I. 35时，得治疗消化道溃疡用的美洲大蠊提取物。
2.根据权利要求I所述的治疗消化道溃疡用的美洲大蠊提取物的提取方法，其特征在于，所述步骤C可以采用以下技术方案将步骤B所得粗粉混合液在75 80°C的温度下进行4次回流提取，对粗粉混合液进行第一次提取时，加粗粉5倍量浓度92%的乙醇，提取时间为5小时；第二次以后每次提取加粗粉4倍量浓度92%的乙醇，提取时间为4小时，合并三次提取液，过滤得乙醇提取液。
3.根据权利要求I或2所述的治疗消化道溃疡用的美洲大蠊提取物的提取方法，其特征在于，所述步骤E可以采用以下技术方案将步骤D所得乙醇浓缩液加入乙醇浓缩液重量8倍量的纯化水，边搅拌边升温至85 95°C后，搅拌40分钟，搅拌速度为40转/分，然后保温静置4小时使油水分层。
全文摘要
本发明提供一种治疗消化道溃疡用的美洲大蠊提取物的提取方法，包括步骤A、粉碎；B、浸泡；C、提取；D、一级浓缩；E、脱脂；F、二级浓缩。采用方法提取，可有效去除美洲大蠊中含有的大量蛋白质，除脂率高；且用浓度90%～95%的乙醇浸泡粗粉，既延长保存时间，又提高了治疗消化道溃疡的特定有效成份得率。因各工艺参数控制合理，可防止提取物中对治疗消化道溃疡的活性物质水解，提高其药物疗效。采用本发明工艺，生产成本低、生产效率高。取上述发明所得美洲大蠊提取物，加入适量药剂辅料，可以制成临床上适用的制剂(片剂、胶囊、合剂、口服液、微丸剂、滴丸剂、喷雾剂、气雾剂、凝胶剂等)，用于消化道溃疡(内服或喷涂)的治疗。
文档编号A61P1/04GK102885857SQ201210446618
公开日2013年1月23日 申请日期2012年11月10日 优先权日2012年11月10日
发明者何道峰, 郝振平 申请人:昆明赛诺制药有限公司