专利名称：一种蒲公英中总黄酮的提取方法
技术领域：
本发明涉及一种生物活性物质的提取方法，具体的是涉及蒲公英中总黄酮的提取方法。
背景技术：
蒲公英，别名蒲公草、黄花地丁、婆婆丁属菊科植物蒲公英属的多种药用蒲公英的统称，是一种中草药。《本草纲目》记载“蒲公英主治妇人乳痈肿，水煮汁饮及封之立消。解食毒，散滞气、清热毒、化食毒、消恶肿、结核。”2005年版中国药典蒲公英项目中表明蒲公英的功能为清热解毒、消肿散结、利尿通淋，用于治疗乳痈、目赤、咽痛、肺痛、肠痛等，很多研究表明蒲公英具有广谱抗菌作用、抗胃损伤作用、保单护肝作用、抗肿瘤作用、抗内毒素作用、免疫调节作用、抗氧化自由基作用。 蒲公英中含有多种活性成分，如蒲公英留醇，蒲公英苦素、黄酮类、咖啡酸、绿原酸和多糖等。其中，蒲公英总黄酮对拟青霉菌和枯草杆菌具有良好的抑菌作用，并具有重要的抗氧化作用，能有效清除超氧阴离子自由基。目前蒲公英总黄酮的提取方法，已经取得了很大进展，归纳起来常用的方法是将蒲公英的醇提取物或水提取物悬浮于水中，依次用不同的溶剂萃取，常用的溶剂有氯仿、乙酸乙酯和饱和正丁醇。利用这种方法制取蒲公英中的总黄酮存在的主要问题是(I)产品成本高，(2)产品中的杂质，特别是有害物质的含量较高，其中重金属含量超过5ppm，农药残留量大于lOppb，超过规定限度，同时不可避免地残留毒性溶剂正丁醇等。中国专利号为CN 102133254的专利公开了一种蒲公英总黄酮的提取方法，该方法蒲公英粉碎后，经20目筛，再与石油醚混合均匀，滤纸过滤后，同30-50%的乙醇溶液按照料液比1:20-30进行混合，摇匀后浸泡I小时，最后在温度60-70°C、超声频率40KHz下提取20-35min得到总黄酮提取物。该专利进行了超声波处理之后未经后处理操作，所得产品纯度不够高，同时，采用超声波处理可能会对提取物的结构造成影响，并且未进行多次提取，导致提取效率偏低。
发明内容
本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供了一种低成本、低毒性、产品结构破坏程度低的蒲公英中总黄酮的提取方法，其步骤如下
a.蒲公英去花粉碎后,过50-70目筛,得到蒲公英粉末，
b.将体积份数为65%-80%的乙醇溶液和a中所得的蒲公英粉末按照体积质量比为3-15L/g混合，加热回流提取1-5小时，过滤，得滤液和滤渣，
c.将b中蒲公英粉末换成b中所得滤渣重复步骤b—次，完成对滤渣的二次提取，得二次提取的滤渣和滤液，
d.将b和c中所得滤液减压浓缩至乙醇浓度为1%_3%，得蒲公英总黄酮流浸膏，
e.步骤d中得到的流浸膏可以进一步加入甘草粉末制颗粒，干燥，经检验合格后整粒。按常规方法制成胶囊剂、颗粒剂、片剂、丸剂等，其中甘草粉末和流浸膏的质量比为1:6-10，如此得到的胶囊剂、颗粒剂、片剂或丸剂中总黄酮含量不少于260mg/100g。
上述的步骤b和步骤c中的乙醇还可以含有体积分数2%_15%的有机酸或者无机酸，所述的有机酸为甲酸、乙酸、甲磺酸、柠檬酸、酒石酸、马来酸、富马酸、苹果酸、乳酸中的至少一种，所述的无机酸为硫酸、盐酸、磷酸、硝酸、氢溴酸、氢碘酸中的至少一种。上述的步骤b和步骤c中的乙醇水溶液的体积分数优选为70%，所述的含的酸性物质优选为8%的乙酸，此优选方案是经过大量实验验证而得的。本方案的有益效果可根据对上述方案的叙述得知，由于在该方案中没有溶剂萃取，从而降低了产品的成本，同时，采用低毒性的有机酸或者无机酸，特别是乙酸的采用，减少了有毒物质的含量，而减压浓缩的提取方法，相对于超声提取等方法，能更好的保持黄酮等结构不被破坏。由此可见，本发明与现有技术相比，具有突出的实质性特点和显著的进步，其实施的有益效果也是显而易见的。
具体实施例方式
下面结合具体实施例对本发明的技术方案进行详细的说明。实施例1:
净选去花适当粉碎的干燥蒲公英，经60目筛后，取2kg置于圆底烧瓶中，加入含有5%甲酸的65%的乙醇15L，加热回流提取3小时，过滤，滤液保留；药渣以5L上述含2%乙酸的65%的乙醇进行二次提取，回流I小时，过滤，合并两次滤液。将滤液减压浓缩得蒲公英流浸膏1. 82kg，经紫外分光光度计检测有效成分蒲公英总黄酮含量为26. 8%。在上述制得的流浸膏中加入甘草粉末0. 30kg制粒、干燥、整粒后制成胶囊剂、片剂或者丸剂，最后得药剂中总黄酮含量为291mg/100g。实施例2
净选去花适当粉碎的干燥蒲公英，经70目筛后，取2kg置于圆底烧瓶中，加入含有2%乙酸的75%的乙醇20L，加热回流提取4小时，过滤，滤液保留；药渣以6L上述含2%乙酸的75%的乙醇进行二次提取，回流I小时，过滤，合并两次滤液。将滤液减压浓缩得蒲公英流浸膏1. 95kg，经紫外分光光度计检测有效成分蒲公英总黄酮含量为29. 5%。在上述制得的流浸膏中加入甘草粉末0. 32kg制粒、干燥、整粒后制成胶囊剂、片剂或者丸剂，最后得药剂中总黄酮含量为289mg/100g。实施例3
净选去花适当粉碎的干燥蒲公英，经80目筛后，取2kg置于圆底烧瓶中，加入含有2%乙酸的65%的乙醇15L，加热回流提取5小时，过滤，滤液保留；药渣以5L上述含2%乙酸的65%的乙醇进行二次提取，回流I小时，过滤，合并两次滤液。将滤液减压浓缩得蒲公英流浸膏1. 98kg，经紫外分光光度计检测有效成分蒲公英总黄酮含量为32. 1%。在上述制得的流浸膏中加入甘草粉末0.33kg制粒、干燥、整粒后制成胶囊剂、片剂或者丸剂，最后得药剂中总黄酮含量为287mg/100g。实施例4
净选去花适当粉碎的干燥蒲公英，经80目筛后，取2kg置于圆底烧瓶中，加入含有2%乙酸的65%的乙醇25L，加热回流提取5小时，过滤，滤液保留；药渣以5L上述含2%乙酸的65%的乙醇进行二次提取，回流5小时，过滤，合并两次滤液。将滤液减压浓缩得蒲公英流浸膏1. 90kg，经紫外分光光度计检测有效成分蒲公英总黄酮含量为34. 6%。
在上述制得的流浸膏中加入甘草粉末0. 31kg制粒、干燥、整粒后制成胶囊剂、片剂或者丸剂，最后得药剂中总黄酮含量为296mg/100g。
本发明并不仅限于上述具体实施方式
，本领域普通技术人员在本发明的实质范围内做出的变化、改型、添加或替换，也应属于本发明的保护范围。
权利要求
1.一种蒲公英中总黄酮的提取方法，其特征是，该方法包括以下步骤 a.蒲公英去花粉碎后,过50-70目筛,得到蒲公英粉末，b.将a中蒲公英粉末和乙醇溶液混合，加热回流提取1-5小时，过滤，得滤液和滤渣，c.将b中所得滤渣和乙醇溶液混合，加热回流提取1-5小时，过滤，得滤液和滤渣，d.将b和c中所得滤液减压浓缩至乙醇浓度为1%_3%，得蒲公英总黄酮流浸膏。
2.根据权利要求1所述的蒲公英中总黄酮的提取方法，其特征是所述的步骤b中乙醇和蒲公英粉末的体积重量比为3-15L/kg。
3.根据权利要求1所述的蒲公英中总黄酮的提取方法，其特征是所述的步骤b和步骤c中的乙醇溶液的体积份数为65%-80%。
4.根据权利要求1所述的蒲公英中总黄酮的提取方法，其特征是所述的步骤b和步骤c中的乙醇还含有体积分数2%-15%的有机酸。
5.根据权利要求1所述的蒲公英中总黄酮的提取方法，其特征是所述的步骤b和步骤c中的乙醇水溶液的体积分数为70%。
6.根据权利要求4所述的蒲公英中总黄酮的提取方法，其特征是所述的有机酸为甲酸、乙酸、甲磺酸、柠檬酸、酒石酸、马来酸、富马酸、苹果酸、乳酸中的至少一种。
7.根据权利要求1所述的蒲公英中总黄酮的提取方法，其特征是所述的步骤b和步骤c中乙醇还含有体积分数2%-15%的无机酸。
8.根据权利要求7所述的蒲公英中总黄酮的提取方法，其特征是所述的无机酸为硫酸、盐酸、磷酸、硝酸、氢溴酸、氢碘酸中的至少一种。
9.根据权利要求1所述的蒲公英中总黄酮的提取方法，其特征是所述的步骤b和步骤c中的乙醇还含有体积分数8%的乙酸。
10.根据权利要求1所述的蒲公英中总黄酮的提取方法，其特征是所述的步骤d中得到的总黄酮流浸膏，可以与甘草粉末按质量比为6-10 1制粒、干燥、整粒后制成胶囊剂、片剂或者丸剂。
全文摘要
本发明涉及一种生物活性物质的提取方法，具体的是涉及蒲公英中总黄酮的提取方法，其步骤为先将蒲公英去花粉碎后，过筛，得到蒲公英粉末；再将所得的蒲公英粉末和乙醇溶液混合，加热回流提取，过滤，得滤液和滤渣，然后将滤渣重复提取一次，得二次提取的滤渣和滤液，最后将两次过滤所得滤液减压浓缩至乙醇浓度为1%-3%，得蒲公英总黄酮流浸膏，所得的流浸膏可以进一步加入甘草粉末制颗粒，干燥，经检验合格后整粒。按常规方法制成胶囊剂、颗粒剂、片剂、丸剂等。本方法具有低成本、低毒性、产品结构破坏程度低的特点。
文档编号A61K36/288GK102988448SQ20121052187
公开日2013年3月27日 申请日期2012年12月7日 优先权日2012年12月7日
发明者张成如 申请人:山东大学