调控皮肤色素沉着的方法

调控皮肤色素沉着的方法
【专利摘要】本发明涉及用于调控受试者皮肤色素沉着的方法，所述方法包括向需要调控皮肤色素沉着的受试者给予用于抑制小眼转录因子(MITF)的表达或活化的试剂的步骤。
【专利说明】调控皮肤色素沉着的方法
[0001] 相关申请的交叉引用
[0002]根据35U.S.C § 119(e)，本申请要求2011年9月I日提交的美国临时专利申请号61/530, 197的优先权。
【技术领域】
[0003]本发明涉及用于调控受试者皮肤色素沉着的方法，所述方法包括向需要调控皮肤色素沉着(pigmentation)的受试者给予用于抑制小眼转录因子(MicrophthalmiaTranscription Factor, MITF)的表达或活化的试剂的步骤。
【背景技术】
[0004]皮肤色素沉着是人类中最明显且审美学上最突出的表型特征之一。皮肤色素沉着来自于表皮色素中黑色素(melanin pigments)的存在-由黄/红色的褐黑素(pheomelanins)至褐/黑色的真黑色素(eumelanins)的在化学结构方面有所不同的色素。在“红发白肤”的人中最常观察到极浅色皮肤的表型，这类人示出保有特定的基因多态性。本发明人对这种色素沉着表型的大量研究已使得对于理解和操控皮肤色素沉着、以用于人类中的多种潜在应用产生了明显益处。
[0005]色素沉着的控制由表皮内复杂的一系列胞内信号介导。尽管将酪氨酸转化为黑色素的酶学机制存在于黑色素细胞中，然而色素沉着的诸多关键起始信号源自于堆叠的(overlaying)角化细胞(keratinocyte)群。类似地，由于黑色素细胞对黑素体(meIanosomes)进行胞外运输,使得大部分表皮黑色素最终残留在角化细胞中，因此角化细胞在色素沉着的后期步骤中起到关键作用。
[0006]在黑色素细胞内，定性定量地控制色素生成的关键通路是由黑色素细胞刺激素(Melanocyte Stimulating Hormone, MSH)调控的通路。MSH是前肽前体阿黑皮素原(ProOpioMelanoCortin, P0MC)的12氨基酸肽裂解产物。MSH结合至黑色素细胞表面上的受体(黑皮质素-1受体)，该受体是G蛋白偶联受体，活化腺苷酸环化酶以诱导cAMP生成。cAMP水平升高转而导致CREB转录因子的磷酸化，其刺激小眼转录因子(MITF)基因的转录(Lin JY, Fisher DE:Melanocyte biology and skin pigmentation, Nature2007,445:843-850)。
[0007]MITF是黑色素细胞特异性的转录因子，已发现其控制大量调控黑色素生成的基因的表达。由MITF被发现为色素酶基因的转录调控子(Hemesath TJ, Steingrimsson E,McGill G, Hansen MJ, Vaught J, Hodgkinson CA, Arnheiter H, Copeland NG, JenkinsNA, Fisher DE:microphthalmia, a critical factor in melanocyte development,defines a discrete transcription factor family, Genes Devl994,8:2770-2780),发明人发现了大量关于控制MITF表达和转录活性的多条通路。MITF的突变可导致完全脱色或色素的彦页色改变(Lin JY, Fisher DE:Melanocyte biology and skin pigmentation,Nature2007，445:843-850)。MITF启动子受到多个独立地在人色素沉着中显示出关键作用的因子的调控。这些因子包括fct通路(Widlund HR, Horstmann MA, Price ER, Cui J,Lessnick SL,Wu Μ,He X,Fisher DE:Beta-catenin_induced melanoma growth requiresthe downstream target Microphthalmia-associated transcription factor., J CellBiol2002,158:1079-1087.Epub2002Sepl016)、SOXlO (Huber WE, Price ER, Widlund HR,Du J, Davis IJ, Wegner M, Fisher DE:A tissue-restricted cAMP transcriptionalresponse:SOXlOmodulates alpha-melanocyte-stimulating hormone—triggeredexpression of microphthalmia-associated transcription factor in melanocytes.,J Biol Chem 2003，278:45224-45230.Epub42003Aug45227)以及 PAX3(Price ER,Fisher DE:Sensorineural deafness and pigmentation genes:melanocytes and theMitf transcriptional network, Neuron2001,30:15-18) ? MITF、S0X10 和 PAX3 突变在患有Waardenburg综合征的患者中出现，其中患者中的MITF突变显示出“纯的”黑色素细胞表型，而S0X10或PAX3突变则引起黑色素细胞缺陷和其它异常(Price ER，Fisher DE:Sensorineural deafness and pigmentation genes:melanocytes andthe Mitf transcriptional network, Neuron2001, 30:15-18)。MITF 的转录后调控通过 MITF 的憐酸化(Hemesath TJ, Price ER, Takemoto C, Badalian T, Fisher DE:MAPkinase links the transcription factor Microphthalmia to c-Kit signalling inmelanocytes, Naturel998,391:298-301)、泛素化(Wu M, Hemesath TJ, Takemoto CM,Horstmann MA, Wells AG, Price ER, Fisher DZ, Fisher DE:c_Kit triggers dualphosphorylations,which couple activation and degradation of the essentialmelanocyte factor Mi, Genes Dev2000,14:301-312)或 SUMO 化(Miller AJ, Levy C,Davis IJ,Razin E,Fisher DE:SumoyIation of MITF and its related family membersTFE3and TFEB，J Biol Chem2005，280:146-155)发生。现已部分了解这些修饰的功能性结果，而其它细节仍有待研究。总的来说，对MITF表达和活性的多水平控制为色素沉着的小分子调节提供了潜在机会。

【发明内容】

[0008]在黑色素细胞内，对色素沉着的控制显示出主要通过MITF转录因子的调控进行。黑色素细胞内的多个信号通路在这一因子上汇合，所述信号通路包括黑色素细胞刺激素(MSH)通路、内皮素通路、c-Kit通路和c-MET通路。这些信号的来源大部分来自表皮内邻近的角化细胞，并且紫外辐射是部分此类刺激因子的重要触发因素。色素过度沉着是在大量人群中常见并在美容方面令人烦恼的问题。尽管其原因不完全清楚，但包括激素原因、炎症后原因、年龄相关原因和其它病因。目前治疗色素过度沉着的策略很大程度上限于对酪氨酸酶进行抑制，这一策略显示出有限的效果和某些相关的毒性。
[0009]本发明一方面提供了用于调控受试者皮肤色素沉着的方法。在一些实施方式中，所述用于调控受试者皮肤色素沉着的方法包括向需要调控皮肤色素沉着的受试者给予用于抑制小眼转录因子(MITF)的表达或活化的试剂。在一些实施方式中，所述用于抑制MITF的表达或活化的试剂包括使用本发明的小分子筛选而识别的化合物。在一些实施方式中，所述用于抑制MITF的表达或活化的试剂可选自于由下列化合物所组成的组:
[0010]l-[(lS，3R，5R，7S)-3-(3，4-二甲基苯基)金刚烷-1-基]甲胺；[0011]5-氯-7-[(2-氯-6-氟苯基)(吡啶-2-基氨基)甲基]喹啉_8_醇；
[0012](1S，2R，3S，6S)-1-苯甲酰基-6-叔丁基螺[2.5]辛烷 _1，2_ 二甲腈；
[0013]N-[(4-氯苯基)(2-羟基-1-萘基)甲基]-3-甲氧基苯甲酰胺；
[0014]乙基-1-苄基-5-[3_(叔丁基氨基)-2-羟基丙氧基]-2-甲基_1Η_吲哚_3_甲酸酯；
[0015]5-氯-7-[(2，5- 二甲基苯基)(吡啶-2-基氨基)甲基]喹啉_8_醇；
[0016]N-[5-(2，3-二氢-1，4-苯并二氧杂芑-6-基)-2_甲基_3_呋喃甲酰基]甘氨酸；
[0017][3-(1, 3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸；
[0018]N-(2-氟苯基)-2_ {[5-(3-甲基苯基)-1，3，4_噁二唑-2-基]硫代}乙酰胺；
[0019]N-[4-(6-甲基-1，3-苯并噻唑 _2_ 基)苯基]-2_[(5_ 甲基 _1，3,4-噻二唑-2-基)硫代]乙酰胺；
[0020] 2- (2-溴-4-叔丁基苯氧基)-N- (2-甲氧基_5_硝基苯基)乙酰胺；
[0021 ]甲基-5- {[ (4-氟-2-甲基苯基)磺酰基](异烟酰基)氨基} -2-甲基-1-苯并呋喃-3-甲酸酯；
[0022]1-(4-氯苄基)-N-(吡啶-3-基甲基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶_4_胺；
[0023]2-{[5-(4-氯苯基)-4_ (3-甲基苯基)-4H-1，2，4_ 三唑 _3_ 基]硫代}_N-(3_ 甲氧基苯基)乙酰胺；
[0024]N-苯基-3- [ (4-苯基-1，3-噻唑_2_基)硫代]丙酰胺；
[0025]乙基-[3_(1，3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸酯；
[0026]2-甲基-3-[(4-甲基哌啶-1-基)羰基]萘并[2，3-b]呋喃_4，9_ 二酮；
[0027]N- (3-苯丙基)-10H-吩噻嗪-10-甲酰胺；
[0028]5- (4-氯苯基)-2-吡咯烷-1-基-6H-1，3，4_ 噻二嗪；
[0029]7-(4-氟苯基)-1-(2-呋喃基甲基)-5,5-双(三氟甲基)_5，8_ 二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2，4 (1H, 3H) - 二酮；
[0030]3-{[(2-溴-4-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
[0031]3-{[4-(羟甲基)-2-甲氧基苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0032]5-苯基[1,2, 5]噁二唑并[3，4-b]吡嗪；
[0033]2，3，9-三甲氧基_6a，12a-二氢苯并吡喃并[3, 4-b]苯并吡喃-12 (6H)-酮；
[0034]4-[(4-氯苄基)氧基]-3-甲氧基-N_(2-甲基-5-[1，3]噁唑并[4，5_b]吡啶-2-基苯基)苯甲酰胺；
[0035]3-(1, 3-苯并噻唑-2-基硫代)丙酸；
[0036]3-{[(4-乙氧基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
[0037]N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-[(2，5-二甲氧基苯基)磺酰基]哌啶_4_甲酰胺；
[0038]N-[3，5_双(二氣甲基)苯基]-2-[ (5_硝基-1H-苯并咪唑_2_基)硫代]乙酸胺；
[0039]5- [4- (4-叔丁基苯甲酰基)哌嗪-1-基]-2-硝基-N-(吡啶_3_基甲基)苯胺；
[0040]3-{[2-氯-4-(羟甲基)苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0041]{[(2-氯苯基)氨基][(3-氟苄基)硫代]亚甲基}丙二腈；[0042]{[ (4-溴苯基)氨基][(4-氟苄基)硫代]亚甲基}丙二腈；以及
[0043]l-[(lS，3R，5R，7S)-3_(3，4-二甲基苯基)金刚烷-1-基]甲胺；
[0044](3，5- 二叔丁基-4-羟基苯亚甲基)丙二腈；
[0045]2-氨基-N-{5-[6-( 二甲基氨基)-9H_嘌呤-9-基]-4-羟基-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基} -3- (4-甲氧基苯基)丙酰胺；
[0046]1，3，6-三羟基-7-甲氧基-2，8-双(3-甲基丁 _2_烯_1_基)_9H_氧杂蒽_9_酮；
[0047](3S，3aR，4R，6S，6aR，7S，8R，9bR)-6-乙酰氧基 _4_( 丁酰氧基)-3，3a-二羟基-3，6，9-三甲基-8-{[ (2Z)-2-甲基丁 _2_烯酰]氧基}_2_氧代-2，3，3a, 4，5，6，6a, 7，8，9b-十氢奥并[4，5_b]呋喃-7-基己酸酯；
[0048](IE, 5S) -6，6，6_ 三氟 _5_ 羟基-1, 5_ 二苯基己-1-烯 _3_ 酮；
[0049]2-(4-甲氧基苯基)-1,3-苯并噻唑；
[0050]乙基-4-氨基-2-{[(IE)-3-(4-甲基苯基)-3-氧代丙-1-烯-1-基]硫代}嘧啶-5-甲酸酯；
[0051]3-[(5-氯-1，3-苯并噻唑-2_基)硫代]_5，5_ 二甲基环己_2_烯_1_酮；
[0052](2E) -3-[(5-甲基-1H-苯并咪唑_2_基)硫代]_1_苯基丙_2_烯_1_酮；
[0053]11, 12~ _-羟基—3—异丁基—4, 5, 8— 二甲基—3, 3a, 4, 6a, 9, 10, 11, 12~ 八氣—IH-环十一烷并[d]异吲哚-1，15 (2H) - 二酮；
[0054]3-(羟甲基)-6_异丙基-5_[(2-甲基丁 _2_烯酰基)氧基]_2_氧代环己-3-烯-1-基4-羟基-2-甲基丁 -2-烯酸酯；
[0055]I, 11，12-三羟基-2，16-二氧代-11，20-环氧苦味_3_烯-15-基_2_羟基-2-甲基丁酸酯(I, 11, 12-trihydroxy-2, 16-dioxo-ll, 20-epoxypicras-3-en-15-yl-2-hydroxy-2-methylbutanoate)；
[0056]1-[3，5-双(二氟甲基)苯基]-3-[3_氯_4_(异丙基横酸基)_2_噻吩基]服；
[0057]以上化合物的药学上可接受的盐；以及，
[0058]以上化合物的任意组合。
[0059]在一些实施方式中，所述用于抑制MITF的表达或活化的试剂可选自于由下列化合物所组成的组:
[0060]l-[(lS，3R，5R，7S)-3_(3，4-二甲基苯基)金刚烷-1-基]甲胺；
[0061]5-氯_7-[ (2-氯-6-氟苯基)(吡啶-2-基氨基)甲基]喹啉_8_醇；
[0062](1S，2R，3S，6S)-1-苯甲酰基-6-叔丁基螺[2.5]辛烷 _1，2_ 二甲腈；
[0063]N-[(4-氯苯基)(2-羟基-1-萘基)甲基]-3-甲氧基苯甲酰胺；
[0064]乙基-1-苄基-5-[3-(叔丁基氨基)-2_羟基丙氧基]-2-甲基-1H-吲哚_3_甲酸酯；
[0065]5-氯-7-[(2，5- 二甲基苯基)(吡啶_2_基氨基)甲基]喹啉_8_醇；
[0066]N-[5-(2，3-二氢-1，4-苯并二氧杂芑-6-基)-2_甲基_3_呋喃甲酰基]甘氨酸；
[0067][3-(1, 3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸；
[0068]N-(2-氟苯基)-2_ {[5-(3-甲基苯基)_1，3，4_噁二唑_2_基]硫代}乙酰胺；
[0069]N-[4-(6-甲基-1，3-苯并噻唑 _2_ 基)苯基]-2_[(5_ 甲基 _1，3，4_ 噻二唑-2-基)硫代]乙酰胺；[0070]2- (2-溴-4-叔丁基苯氧基)-N- (2-甲氧基_5_硝基苯基)乙酰胺；
[0071 ]甲基-5- {[ (4-氟-2-甲基苯基)磺酰基](异烟酰基)氨基} -2-甲基-1-苯并呋喃-3-甲酸酯；
[0072]1-(4-氯苄基)-N-(吡啶-3-基甲基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶_4_胺；
[0073]2-{[5-(4-氯苯基)-4_ (3-甲基苯基)-4H-1，2，4_ 三唑 _3_ 基]硫代}_N-(3_ 甲氧基苯基)乙酰胺；
[0074]N-苯基-3- [ (4-苯基-1，3-噻唑_2_基)硫代]丙酰胺；
[0075]乙基-[3_(1，3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸酯；
[0076]2-甲基-3-[(4-甲基哌啶-1-基)羰基]萘并[2，3-b]呋喃_4，9_ 二酮；
[0077]N- (3-苯丙基)-10H-吩噻嗪_10_甲酰胺；
[0078]5- (4-氯苯 基)-2-吡咯烷-1-基-6H-1，3，4_ 噻二嗪；
[0079]7-(4-氟苯基)-1-(2-呋喃基甲基)-5,5-双(三氟甲基)_5，8_ 二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2，4 (1H, 3H) - 二酮；
[0080]3-{[(2-溴-4-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
[0081]3-{[4-(羟甲基)-2-甲氧基苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0082]5-苯基[1,2, 5]噁二唑并[3，4-b]吡嗪；
[0083]2，3，9-三甲氧基_6a，12a-二氢苯并吡喃并[3, 4-b]苯并吡喃-12 (6H)-酮；
[0084]4-[(4-氯苄基)氧基]-3-甲氧基-N_(2-甲基-5-[1，3]噁唑并[4，5_b]吡啶-2-基苯基)苯甲酰胺；
[0085]3-(1, 3-苯并噻唑-2-基硫代)丙酸；
[0086]3-{[(4-乙氧基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
[0087]N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-[(2，5-二甲氧基苯基)磺酰基]哌啶_4_甲酰胺；
[0088]N-[3，5_双(二氣甲基)苯基]-2-[ (5_硝基-1H-苯并咪唑_2_基)硫代]乙酸胺；
[0089]5- [4- (4-叔丁基苯甲酰基)哌嗪-1-基]-2-硝基-N-(吡啶_3_基甲基)苯胺；
[0090]3-{[2-氯-4-(羟甲基)苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0091]{[(2-氯苯基)氨基][(3-氟苄基)硫代]亚甲基}丙二腈；
[0092]{[ (4-溴苯基)氨基][(4-氟苄基)硫代]亚甲基}丙二腈；
[0093]l-[(lS，3R，5R，7S)-3_(3，4-二甲基苯基)金刚烷-1-基]甲胺；
[0094]以上化合物的药学上可接受的盐；以及，
[0095]以上化合物的任意组合。
[0096]在一些实施方式中，所述用于抑制MITF的表达或活化的试剂可选自于由下列化合物所组成的组:
[0097](3，5- 二叔丁基-4-羟基苯亚甲基)丙二腈；
[0098]2-氨基-N-{5-[6-( 二甲基氨基)-9H_嘌呤-9-基]-4-羟基-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基} -3- (4-甲氧基苯基)丙酰胺；
[0099]I, 3，6-三羟基-7-甲氧基-2，8_双(3-甲基丁 _2_烯-1-基)_9H_氧杂蒽_9_酮；
[0100](3S，3aR，4R，6S，6aR，7S，8R，9bR)-6-乙酰氧基 _4_( 丁酰氧基)-3，3a- 二羟基-3，6，9-三甲基-8-{[(2Z)_2-甲基丁 _2_烯酰]氧基}_2_氧代-2，3，3a, 4，5，6，6a, 7，8，9b-十氢奥并[4，5_b]呋喃-7-基己酸酯；
[0101](1E，5S)-6，6，6-三氟-5-羟基-1,5-二苯基己-1-烯-3-酮；
[0102]2-(4-甲氧基苯基)-1,3-苯并噻唑；
[0103]乙基-4-氨基-2-{[ (IE)-3-(4-甲基苯基)-3_氧代丙-1-烯-1-基]硫代}嘧啶-5-甲酸酯；
[0104]3-[(5-氯-1，3-苯并噻唑-2_基)硫代]_5，5_ 二甲基环己_2_烯_1_酮；
[0105](2E) -3-[(5-甲基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]_1_苯基丙_2_烯_1_酮；
[0106]11，12-二羟基-3-异丁基-4，5，8-三甲基-3，3a，4，6a，9，10，11，12-八氢 _1Η_ 环十一烷并[d]异吲哚-1，15 (2H) - 二酮；
[0107]3-(羟甲基)-6_异丙基-5_[(2-甲基丁 -2-烯酰基)氧基]_2_氧代环己-3-烯-1-基4-羟基-2-甲基丁 -2-烯酸酯；
[0108]I, 11，12-三羟基-2，16-二氧代-11，20-环氧苦味_3_烯-15-基_2_羟基-2-甲
基丁酸酯；
[0109]1-[3，5_双(二氣甲基)苯基]_3_[3_氣_4_(异丙基横酸基)-2_ B塞吩基]服；
[0110]以上化合物的药学上可接受的盐；以及，
[0111]以上化合物的任意组合。
[0112]在一些实施方式中，所述用于抑制MITF的表达或活化的试剂可选自于由下列化合物所组成的组:
[0113]1，3，6-三羟基-7-甲氧基-2，8-双(3-甲基丁 _2_烯_1_基)_9H_氧杂蒽_9_酮；
[0114](1E，5S)-6，6，6-三氟-5-羟基-1,5-二苯基己-1-烯-3-酮；
[0115]3-(羟甲基)-6_异丙基-5_[(2-甲基丁 -2-烯酰基)氧基]_2_氧代环己-3-烯-1-基4-羟基-2-甲基丁 -2-烯酸酯；
[0116]以上化合物的药学上可接受的盐；以及，
[0117]以上化合物的任意组合。
[0118]MITF在黑色素细胞的分化/色素沉着中起到中心作用。MITF的表达在黑色素细胞刺激素(MSH)的下游由cAMP通路调控，其转录靶标包括酪氨酸酶和大部分活跃参与由酪氨酸生成黑色素的酶。因此，本发明一方面包含识别对于小眼转录因子(MITF)的表达和/或活性具有抑制能力的化合物，所述化合物可用于调控受试者、特别是人的皮肤色素沉着。
[0119]本发明另一方面提供了小分子筛选方法，以识别能够下调MITF转录因子活性的化合物。
【具体实施方式】
[0120]本发明一方面提供了用于调控受试者皮肤色素沉着的方法。调控皮肤色素沉着的一个方式是通过控制黑色素细胞并抑制色素过度沉着。皮肤色素沉着的调控是多种病症中有待解决的课题，所述病症如黑棘皮病(Acanthosis Nigricans)、白化病、色素过度沉着、色素失禁症(incontinentia pigmenti)、肝斑(liver spots)和手部衰老、mcCune-Albright综合征、melisma、进行性色素紫癜、Sturge-Weber综合征、着色性干皮病(Xeroderma pigmentosum)和Waardenburg氏综合征。在黑色素细胞内，对色素沉着的控制显示出主要通过MITF转录因子的调控发生。黑色素细胞内的多个信号通路在这一因子上汇合,所述信号通路包括黑色素细胞刺激素(MSH)通路、内皮素通路、c-Kit通路和c-MET通路。这些信号的来源大部分来自表皮内邻近的角化细胞，并且紫外辐射是部分此类刺激因子的重要触发因素。
[0121]在一些实施方式中，所述用于调控受试者皮肤色素沉着的方法包括向需要调控皮肤色素沉着的受试者给予用于抑制小眼转录因子(MITF)的表达或活化的试剂的步骤。
[0122]为了识别对MITF的表达或活化具有抑制能力的试剂，开发了筛选分析系统。在一些实施方式中，与对照水平或参照水平相比，本文所述的化合物可抑制MITF的表达的至少 5% (例如，5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%,75%,80%,85%,90%,95%,99%,100% )。在一些实施方式中，与对照水平或参照水平相比，本文所述的化合物可抑制MITF的活化的至少5 % (例如，5 %、10 %、15 %、20 %、25%,30%,35%,40%,45%,50%,55%,60%,65%,70%,75%,80%,85%,90%,95%,99%,100% )0将理解的是，无需完全抑制MITF的表达或活化。
[0123]根据所述筛选分析系统，发明人已识别出对小眼转录因子(MITF)的表达或活化具有抑制能力的化合物。
[0124]在一些实施方式中，所述对MITF的表达或活化具有抑制能力的化合物选自于由下列化合物所组成的组:
[0125]l-[(lS，3R，5R，7S)-3_(3，4-二甲基苯基)金刚烷-1-基]甲胺；
[0126]5-氯_7-[ (2-氯-6-氟苯基)(吡啶_2_基氨基)甲基]喹啉_8_醇；
[0127](1S，2R，3S，6S)-1-苯甲酰基-6-叔丁基螺[2.5]辛烷 _1，2_ 二甲腈；
[0128]N-[(4-氯苯基)(2-羟基-1-萘基)甲基]-3-甲氧基苯甲酰胺；
[0129]乙基-1-苄基-5-[3-(叔丁基氨基)-2-羟基丙氧基]-2-甲基_1Η_吲哚_3_甲酸酯；
[0130]5-氯-7-[(2，5- 二甲基苯基)(吡啶-2-基氨基)甲基]喹啉_8_醇；
[0131]N-[5-(2，3-二氢-1，4-苯并二氧杂芑-6-基)-2_甲基_3_呋喃甲酰基]甘氨酸；
[0132][3-(1，3_苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸；
[0133]N-(2_氣苯基)_2_ {[5_ (3_甲基苯基)-1, 3，4_噁二唑_2_基]硫代}乙酸胺；
[0134]N-[4-(6-甲基-1，3-苯并噻唑 _2_ 基)苯基]-2_[(5_ 甲基 _1，3,4-噻二唑-2-基)硫代]乙酰胺；
[0135]2- (2-溴-4-叔丁基苯氧基)-N- (2-甲氧基_5_硝基苯基)乙酰胺；
[0136]甲基-5- {[ (4-氟-2-甲基苯基)磺酰基](异烟酰基)氨基} -2-甲基_1_苯并呋喃-3-甲酸酯；
[0137]1-(4-氯苄基)-N-(吡啶-3-基甲基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶_4_胺；
[0138]2-{[5-(4-氯苯基)-4_ (3-甲基苯基)-4H-1，2，4_ 三唑 _3_ 基]硫代}_N-(3_ 甲氧基苯基)乙酰胺；
[0139]N-苯基-3- [ (4-苯基-1，3-噻唑_2_基)硫代]丙酰胺；
[0140]乙基-[3_(1，3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸酯；
[0141]2-甲基-3-[(4-甲基哌啶-1-基)羰基]萘并[2，3-b]呋喃_4，9_ 二酮；
[0142]N-(3-苯丙基)-10H-吩噻嗪-10-甲酰胺；[0143]5-(4-氯苯基)-2-吡咯烷-1-基-6H-1，3，4_ 噻二嗪；
[0144]7-(4-氟苯基)-1-(2-呋喃基甲基)-5,5-双(三氟甲基)_5，8_ 二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2，4 (1H, 3H) - 二酮；
[0145]3-{[(2-溴-4-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
[0146]3-{[4-(羟甲基)-2-甲氧基苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0147]5-苯基[1,2, 5]噁二唑并[3，4-b]吡嗪；
[0148]2，3，9-三甲氧基_6a，12a-二氢苯并吡喃并[3, 4-b]苯并吡喃-12 (6H)-酮；
[0149]4-[(4_氯苄基)氧基]-3-甲氧基-N_(2-甲基_5_[1，3]噁唑并[4，5_b]吡啶-2-基苯基)苯甲酰胺；
[0150]3-(1, 3-苯并噻唑-2-基硫代)丙酸；
[0151]3-{[(4-乙氧基苯氧 基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
[0152]N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-[(2，5-二甲氧基苯基)磺酰基]哌啶_4_甲酰胺；
[0153]N-[3，5-双(三氟甲基)苯基]-2-[(5-硝基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]乙酰胺；
[0154]5- [4- (4-叔丁基苯甲酰基)哌嗪-1-基]-2-硝基-N-(吡啶_3_基甲基)苯胺；
[0155]3-{[2_氯-4-(羟甲基)苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0156]{[(2-氯苯基)氨基][(3-氟苄基)硫代]亚甲基}丙二腈；
[0157]{[(4-溴苯基)氨基][(4-氟苄基)硫代]亚甲基}丙二腈；以及
[0158]l-[(lS，3R，5R，7S)-3_(3，4-二甲基苯基)金刚烷-1-基]甲胺；
[0159](3，5-二叔丁基-4-羟基苯亚甲基)丙二腈；
[0160]2-氨基-N-{5-[6-( 二甲基氨基)-9H_嘌呤-9-基]-4-羟基-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基} -3- (4-甲氧基苯基)丙酰胺；
[0161]1，3，6-三羟基-7-甲氧基-2，8-双(3-甲基丁 _2_烯_1_基)_9H_氧杂蒽_9_酮；
[0162](3S，3aR，4R，6S，6aR，7S，8R，9bR)-6-乙酰氧基 _4_( 丁酰氧基)-3，3a-二羟基-3，6，9-三甲基-8-{[ (2Z)-2-甲基丁 _2_烯酰]氧基}_2_氧代-2，3，3a, 4，5，6，6a, 7，8，9b-十氢奥并[4，5_b]呋喃-7-基己酸酯；
[0163](1E，5S)-6，6，6-三氟-5-羟基-1,5-二苯基己-1-烯-3-酮；
[0164]2-(4-甲氧基苯基)_1，3-苯并噻唑；
[0165]乙基-4-氨基-2-{[(IE)-3-(4-甲基苯基)-3-氧代丙-1-烯-1-基]硫代}嘧啶-5-甲酸酯；
[0166]3-[(5-氯-1，3-苯并噻唑-2_基)硫代]_5，5_ 二甲基环己_2_烯_1_酮；
[0167](2E) -3-[(5-甲基_1Η_苯并咪唑_2_基)硫代]_1_苯基丙_2_烯_1_酮；
[0168]11, 12- _-羟基-3-异丁基-4，5, 8- 二甲基-3，3a, 4, 6a, 9, 10, 11, 12-八氢-1H-环十一烷并[d]异吲哚-1，15 (2H) - 二酮；
[0169]3-(羟甲基)-6_异丙基-5_[(2-甲基丁 _2_烯酰基)氧基]_2_氧代环己-3-烯-1-基4-羟基-2-甲基丁 -2-烯酸酯；
[0170]I, 11，12-三羟基-2，16-二氧代-11，20-环氧苦味_3_烯-15-基_2_羟基-2-甲
基丁酸酯；[Ο171]1-[3，5-双(二氟甲基)苯基]-3_[3_氯_4_(异丙基横酸基)-2_噻吩基]服；
[0172]以上化合物的药学上可接受的盐；以及，
[0173]以上化合物的任意组合。
[0174]在一些实施方式中，所述对MITF的表达或活化具有抑制能力的化合物选自于由下列化合物所组成的组:
[0175]l-[(lS，3R，5R，7S)-3_(3，4-二甲基苯基)金刚烷-1-基]甲胺；
[0176]5-氯-7-[(2-氯-6-氟苯基)(吡啶_2_基氨基)甲基]喹啉_8_醇；
[0177](1S，2R，3S，6S)-1-苯甲酰基-6-叔丁基螺[2.5]辛烷 _1，2_ 二甲腈；
[0178]N-[(4-氯苯基)(2-羟基-1-萘基)甲基]-3-甲氧基苯甲酰胺；
[0179]乙基-1-苄基-5-[3-(叔丁基氨基)-2-羟基丙氧基]-2-甲基_1Η_吲哚_3_甲酸酯；
[0180]5-氯-7-[(2，5- 二甲基苯基)(吡啶-2-基氨基)甲基]喹啉_8_醇；
[0181]N-[5-(2，3-二氢-1，4-苯并二氧杂芑-6-基)-2_甲基_3_呋喃甲酰基]甘氨酸；
[0182][3-(1，3_苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸；
[0183]N-(2_氣苯基)_2_ {[5_ (3_甲基苯基)-1, 3，4_噁二唑_2_基]硫代}乙酸胺；
[0184]N-[4-(6-甲基-1，3-苯并噻唑 _2_ 基)苯基]-2_[(5_ 甲基 _1，3,4-噻二唑-2-基)硫代]乙酰胺；
[0185]2- (2-溴-4-叔丁基苯氧基)-N- (2-甲氧基_5_硝基苯基)乙酰胺；
[0186]甲基-5- {[ (4-氟-2-甲基苯基)磺酰基](异烟酰基)氨基} -2-甲基_1_苯并呋喃-3-甲酸酯；
[0187]1-(4-氯苄基)-N-(吡啶-3-基甲基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶_4_胺；
[0188]2-{[5-(4-氯苯基)-4_ (3-甲基苯基)-4H-1，2，4_ 三唑 _3_ 基]硫代}_N-(3_ 甲氧基苯基)乙酰胺；
[0189]N-苯基-3- [ (4-苯基-1，3-噻唑_2_基)硫代]丙酰胺；
[0190]乙基-[3_(1，3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸酯；
[0191]2-甲基-3-[(4-甲基哌啶-1-基)羰基]萘并[2，3-b]呋喃_4，9_ 二酮；
[0192]N-(3-苯丙基)-10H-吩噻嗪-10-甲酰胺；
[0193]5-(4-氯苯基)-2_ 吡咯烷-1-基-6H-1，3，4-噻二嗪；
[0194]7-(4-氟苯基)-1-(2-呋喃基甲基)-5,5-双(三氟甲基)_5，8_ 二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2，4 (1H, 3H) - 二酮；
[0195]3-{[(2-溴-4-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
[0196]3-{[4-(羟甲基)-2-甲氧基苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0197]5-苯基[1,2, 5]噁二唑并[3，4-b]吡嗪；
[0198]2，3，9-三甲氧基_6a，12a-二氢苯并吡喃并[3, 4-b]苯并吡喃-12 (6H)-酮；
[0199]4-[(4-氯苄基)氧基]-3-甲氧基-N-(2-甲基_5_[1，3]噁唑并[4，5_b]吡啶-2-基苯基)苯甲酰胺；
[0200]3-(1, 3-苯并噻唑-2-基硫代)丙酸；
[0201]3-{[(4-乙氧基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
[0202] N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-[(2，5-二甲氧基苯基)磺酰基]哌啶_4_甲酰胺；
[0203]N-[3，5-双(三氟甲基)苯基]-2-[(5-硝基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]乙酰胺；
[0204]5- [4- (4-叔丁基苯甲酰基)哌嗪-1-基]-2-硝基-N-(吡啶_3_基甲基)苯胺；[0205]3-{[2-氯-4-(羟甲基)苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0206]{[ (2-氯苯基)氨基][(3-氟苄基)硫代]亚甲基}丙二腈；
[0207]{[ (4-溴苯基)氨基][(4-氟苄基)硫代]亚甲基}丙二腈；以及
[0208]l-[(lS，3R，5R，7S)-3_(3，4-二甲基苯基)金刚烷-1-基]甲胺；
[0209]以上化合物的药学上可接受的盐；以及，
[0210]以上化合物的任意组合。
[0211 ] 在一些实施方式中，所述对MITF的表达或活化具有抑制能力的化合物选自于由下列化合物所组成的组:
[0212](3，5- 二叔丁基-4-羟基苯亚甲基)丙二腈；
[0213]2-氨基-N-{5-[6-( 二甲基氨基)-9H_嘌呤-9-基]-4-羟基-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基} -3- (4-甲氧基苯基)丙酰胺；
[0214]1，3，6-三羟基-7-甲氧基-2，8-双(3-甲基丁 _2_烯_1_基)_9H_氧杂蒽_9_酮；
[0215](3S，3aR，4R，6S，6aR，7S，8R，9bR)-6-乙酰氧基 _4_( 丁酰氧基)-3，3a-二羟基-3，6，9-三甲基-8-{[ (2Z)-2-甲基丁 _2_烯酰]氧基}_2_氧代-2，3，3a, 4，5，6，6a, 7，8，9b-十氢奥并[4，5_b]呋喃-7-基己酸酯；
[0216](1E，5S)-6，6，6-三氟-5-羟基-1,5-二苯基己-1-烯-3-酮；
[0217]2-(4-甲氧基苯基)-1,3-苯并噻唑；
[0218]乙基-4-氨基-2-{[(IE)-3-(4-甲基苯基)-3-氧代丙-1-烯-1-基]硫代}嘧啶-5-甲酸酯；
[0219]3-[(5-氯-1，3-苯并噻唑-2_基)硫代]_5，5_ 二甲基环己_2_烯_1_酮；
[0220](2E) -3-[(5-甲基-1H-苯并咪唑_2_基)硫代]_1_苯基丙_2_烯_1_酮；
[0221 ] 11, 12- _-羟基-3-异丁基-4，5, 8- 二甲基-3，3a, 4, 6a, 9, 10, 11, 12-八氢-1H-环十一烷并[d]异吲哚-1，15 (2H) - 二酮；
[0222]3-(羟甲基)-6_异丙基-5_[(2-甲基丁 _2_烯酰基)氧基]_2_氧代环己-3-烯-1-基4-羟基-2-甲基丁 -2-烯酸酯；
[0223]I, 11，12-三羟基-2，16-二氧代-11，20-环氧苦味_3_烯_15_基_2_羟基_2_甲
基丁酸酯；
[0224]1-[3，5-双(三氟甲基)苯基]-3-[3-氯-4-(异丙基磺酰基)-2_噻吩基]脲；
[0225]以上化合物的药学上可接受的盐；以及，
[0226]以上化合物的任意组合。
[0227]在一些实施方式中，所述对MITF的表达或活化具有抑制能力的化合物选自于由下列化合物所组成的组:
[0228]I, 3，6-三羟基-7-甲氧基_2，8_双(3-甲基丁 _2_烯_1_基)_9H_氧杂蒽_9_酮；
[0229](IE, 5S) -6，6，6_ 三氟 _5_ 羟基-1, 5_ 二苯基己-1-烯 _3_ 酮；
[0230]3-(羟甲基)-6_异丙基-5_[(2-甲基丁 _2_烯酰基)氧基]_2_氧代环己-3-烯-1-基4-羟基-2-甲基丁 -2-烯酸酯；
[0231]以上化合物的药学上可接受的盐；以及，
[0232]以上化合物的任意组合。
[0233]在一些实施方式中，可肠胃外给予所述用于抑制小眼转录因子(MITF)的表达或活化的试剂，并且可将所述试剂制备为例如外用组合物(external composition)。
[0234]药物组合物
[0235]本发明一方面提供了药物组合物，所述药物组合物包含一种以上(例如I种、2种、3种、4种、5种、6种、7种、8种、9种、10种或更多种)本文所述的化合物(或其前药、药学上可接受的盐或其它药学上可接受的形式)，以及任选的药学上可接受的赋形剂(excipient)。在某些实施方式中，这些组合物任选地进一步包含一种以上其它治疗剂。或者，可向有需要的患者给予本发明的化合物并联合给予一种以上其它治疗剂。例如，在皮肤色素沉着的调控中，用于与本发明的化合物共同给药或与本发明的化合物共同包含于药物组合物中的其它治疗剂可以是获批的皮肤色素沉着剂。
[0236]药物组合物中化合物的量可以基于重量、摩尔或体积。在一些实施方式中，药物组合物包含至少0.0001%的本发明的化合物。在一些实施方式中，药物组合物包含至少
0.1 %的本发明的化合物。在一些实施方式中，药物组合物包含至少0.5%的本发明的化合物。在一些实施方式中，药物组合物包含至少I %的本发明的化合物。在一些实施方式中，药物组合物包含至少2%的本发明的化合物。在一些实施方式中，药物组合物包含至少3%的本发明的化合物。在一些实施方式中，药物组合物包含至少4%的本发明的化合物。在一些实施方式中，药物组合物包含至少5%的本发明的化合物。在一些实施方式中，药物组合物包含至少10%的本发明的化合物。在一些实施方式中，药物组合物包含0.01% -99%的本发明的化合物。在一些实施方式中，药物组合物包含0.05% -90%的本发明的化合物。在一些实施方式中，药物组合物包含0.1% -85%的本发明的化合物。在一些实施方式中，药物组合物包含0.5%-80%的本发明的化合物。在一些实施方式中，药物组合物包含I % -75%的本发明的化合物。在一些实施方式中，药物组合物包含2%-70%的本发明的化合物。在一些实施方式中，药物组合物包含3% -65%的本发明的化合物。在一些实施方式中，药物组合物包含4% -60%的本发明的化合物。在一些实施方式中，药物组合物包含5% -50%的本发明的化合物。
[0237] 也能够领会的是，用于治疗时，本发明的某些化合物可以游离形式存在，或适当时，以其药学上可接受的衍生物存在。根据本发明，药学上可接受的衍生物包括但不限于，药学上可接受的盐、酯、此类酯的盐、或者前药、或者本发明化合物的其它加合物或衍生物(当向有需要的患者给予时，其能够直接或间接地提供如本文其它部分所述的化合物、或者它们的代谢产物或残基)。
[0238]如上所述，为适合于所期望的特定剂型，本发明的药物组合物任选地包含药学上可接受的赋形剂；本文所使用的赋形剂包括任何和所有的溶剂、稀释剂或其它液态辅料(vehicle)、分散助剂或悬浮助剂、表面活性剂、等渗剂、增稠剂或乳化剂、防腐剂、抗氧化剂、固态粘合剂、润滑剂等。Remington’s Pharmaceutical Sciences,第16版,E.ff.Martin (Mack Publishing C0., Easton, PA, 1980)公开了用于配制药物组合物的各种赋形剂及用于对其进行制备的已知技术。除非任何常规赋形剂介质与本发明的化合物不相容(诸如通过产生任何不期望的生物学效应或以有毒害的(deleterious)方式与药物组合物中的任何其它组分产生相互作用)，否则其用途将涵盖在本发明的范围内。可作为药学上可接受的赋形剂的材料的一些实例包括但不限于，糖类，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉类，如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素及其衍生物，如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和醋酸纤维素；西黄蓍胶粉(powdered tragacanth);麦芽；明胶；滑石；赋形剂如可可脂和栓蜡(suppository waxes);油类,如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；二醇类(glycols)，如丙烯乙二醇；酯类，如油酸乙酯和月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂，如氢氧化镁和氢氧化铝；海藻酸；无热原水；等渗盐水；林格氏溶液；乙醇；磷酸缓冲液；和其它无毒的相容性润滑剂，如十二烷基硫酸钠和硬脂酸镁；根据配方设计师的判断，着色剂、脱模剂(releasing agents)、涂层剂、甜味剂、调味剂和芳香剂、防腐剂、以及抗氧化剂也可出现在组合物中。
[0239]用于口服给药的液体剂型包括但不限于，药学上可接受的乳剂、微乳剂、溶液剂、混悬剂、糖浆剂和酏剂(elixirs)。除了活性化合物以外，液体剂型可含有在本领域中常用的惰性稀释剂，例如水或其它溶剂、增溶剂和乳化剂，如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1，3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油(特别是棉籽油、落花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢呋喃醇、聚乙二醇和失水山梨糖醇脂肪酸酯，以及上述物质的混合物。除惰性稀释剂外，口服组合物还可含有佐剂(adjuvants)，如润湿剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、调味剂和芳香剂。
[0240]可根据本领域已知的技术，使用合适的分散剂或润湿剂以及悬浮剂，配制可注射的制剂，例如无菌可注射水性或油性悬浮制剂。无菌可注射制剂还可以是在无毒的肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液剂、混悬剂或乳剂，例如在1，3-丁二醇中的溶液剂。可接受的辅料和溶剂可采用水、林格氏溶液、U.S.P.和等渗氯化钠溶液。此外，惯例采用无菌的不挥发性油(fixed oil)作为溶剂或悬浮介质。为这一目的，可采用任何无刺激性的(bland)不挥发性油，包括合成的甘油单酯或甘油二酯。此外，脂肪酸(如油酸)也可用于制备可注射制剂。
[0241]可注射制剂可以是无菌的，例如通过经由细菌滞留过滤器过滤，或通过在临用前加入处于无菌固体组合物形式的无菌剂(所述无菌剂可溶于或分散于无菌水或其它无菌可注射介质中)。
[0242]为了延长药物的作用，通常期望能够减缓来自皮下注射或肌内注射的药物吸收。上述情况可以通过使用水溶性差的液态混悬剂、或结晶材料或无定形材料来实现。药物的吸收速率由此取决于其溶解速率，而其溶解速率又可取决于晶体大小和晶型。或者，通过将药物溶解或悬浮在油性辅料中来实现肠胃外给予的药物形式的延迟吸收。通过在可生物降解的聚合物(如聚丙交酯-聚乙交酯)中形成药物的微囊基质来制备可注射的储库(depot)形式。根据药物与聚合物的比例以及所使用的特定聚合物的性质，可以控制药物释放的速率。其它可生物降解的聚合物的实例包括聚(原酸酯)和聚(酸酐)。还可以通过将药物封装(entrapping)在与身体组织相容的脂质体或微乳剂中来制备储库型可注射制剂。
[0243]用于直肠或阴 道给药的组合物优选栓剂，栓剂可通过将本发明的化合物与合适的无刺激性赋形剂或载体(例如可可脂、聚乙二醇或栓剂蜡)混合而制备，并且所述栓剂在室温下是固体、而在体温下是液体，因此，所述栓剂会在直肠或阴道腔中融化，并释放出活性化合物。
[0244]用于口服给药的固体剂型包括胶囊剂、片剂、丸剂、散剂和颗粒剂。在此类固体剂型中，将活性化合物与至少一种惰性的药学上可接受的赋形剂或载体混合，所述赋形剂或载体例如为柠檬酸钠或磷酸二钙和/或以下物质:a)填充剂(fillers)或增量剂(extenders),如淀粉类、乳糖、鹿糖、葡萄糖、甘露醇和娃酸；b)粘合剂,如例如羧甲基纤维素、海藻酸盐/酯、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶；c)保湿剂(humectant)，例如甘油；d)崩解剂，如琼脂、碳酸钙、马铃薯淀粉或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸盐/酯和碳酸钠；e)溶液阻滞剂(solution retarding agents),如石腊；f)吸收加速剂,如季铵化合物；g)润湿剂，如例如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯；h)吸收剂，如高岭土和膨润土 ；以及i)润滑剂，如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固态聚乙二醇、十二烷基硫酸钠，及以上物质的混合物。在胶囊剂、片剂和丸剂的情况下，剂型还可包含缓冲剂。
[0245]相似类型的固态组分也可以在软填充明胶胶囊和硬填充明胶胶囊(使用此类赋形剂，如乳糖或奶糖，以及高分子量聚乙二醇等)中用作填充剂。片剂、糖衣剂(dragees)、胶囊剂、丸剂和颗粒剂的固体剂型可制备为具有包衣和壳(如肠溶包衣和在药物制剂领域中公知的其它包衣)。所述固体剂型可任选地含有乳池剂(opacifying agents),并且可以是仅在或优先在肠道的某一部分任选地以延迟方式释放活性成分的组合物。可以使用的包埋(embedding)组分的实例包括聚合性物质和蜡。相似类型的固态组分也可以在软填充明胶胶囊和硬填充明胶胶囊(使用此类赋形剂，如乳糖或奶糖，以及高分子量聚乙二醇等)中用作填充剂。
[0246]所述活性化合物也可与一种以上的上述赋形剂处于微囊化(micro-encapsulated)形式。片剂、糖衣剂、胶囊剂、丸剂和颗粒剂的固体剂型可制备为具有包衣和壳(如肠溶包衣、控释包衣和在药物制剂领域中公知的其它包衣)。在此类固体剂型中，活性化合物可与至少一种惰性稀释剂(如蔗糖、乳糖和淀粉)混合。在标准实践中，此类固体剂型还可包含除惰性稀释剂外的其它物质，例如片剂制备润滑剂和其他片剂制备助剂(如硬脂酸镁和微晶纤维素)。在胶囊剂、片剂和丸剂的情况下，所述剂型还可包含缓冲剂。所述剂型可任选地含有乳浊剂，并且可以是仅在或优先在肠道的某一部分任选地以延迟方式释放活性成分的组合物。可以使用的包埋组分的实例包括聚合性物质和蜡。
[0247] 本发明涵盖本发明化合物的药学上可接受的局部制剂。本文所使用的术语“药学上可接受的局部制剂”是指任何如下制剂:其对于通过将所述制剂施用于表皮的本发明化合物的皮内给药而言是药学上可接受的。在本发明的某些实施方式中，所述局部制剂包含赋形剂系统。药学上有效的赋形剂包括但不限于，溶剂(例如醇、多元醇、水)、霜剂(creams)、洗剂(lotions)、软膏剂(ointments)、油、硬膏剂(plasters)、脂质体、散剂、乳剂、微乳剂和缓冲溶液(例如低渗盐水或缓冲盐水)、或本领域已知的用于局部给药的药剂的任何其它赋形剂。对于本领域已知的载体(carver)的更完整的教导由本领域标准参照文献提供，例如由 Mack Publishing Company, Easton, Pennsylvania 出版的 Remington’ sPharmaceutical Sciences,第16版，1980以及第17版，1985 ;以引用的方式将其公开的内容整体并入本文。在某些其它实施方式中，本发明的局部制剂可包含赋形剂。可使用本领域已知的任何药学上可接受的赋形剂制备本发明的药学上可接受的局部制剂。可包含于本发明的局部制剂中的赋形剂的实例包括但不限于，防腐剂、抗氧化剂、保湿剂(moisturizer)、软化剂、缓冲剂、增溶剂、其它渗透剂、皮肤防护剂、表面活性剂和推进剂(propellants)和/或与本发明化合物联用的其它治疗剂。合适的防腐剂包括但不限于，醇、季铵、有机酸、对羟基苯甲酸酯和酚类。合适的抗氧化剂包括但不限于，抗坏血酸及其酯、亚硫酸氢钠、丁基羟基甲苯(butylated hydroxytoluene)、丁基羟基茴香醚(butylated hydroxyarrisole) >生育酚、以及螯合剂如EDTA和柠檬酸。合适的保湿剂包括但不限于，甘油、山梨醇、聚乙二醇、尿素和丙二醇。用于本发明的合适的缓冲剂包括但不限于，柠檬酸缓冲液、盐酸缓冲液和乳酸缓冲液。合适的增溶剂包括但不限于，季铵氯化物、环糊精、苯甲酸苄酯、卵磷脂和聚山梨醇酯。可用于本发明局部制剂的合适的皮肤防护剂包括但不限于，维生素E油、尿囊素(allatoin)、二甲基硅油、甘油、矿脂(petrolatum)和氧化锌。
[0248]在某些实施方式中，本发明的药学上可接受的局部制剂至少包含本发明的化合物和渗透促进剂。局部制剂的选择取决于多种因素，包括待治疗的病症、本发明化合物和存在的其它赋形剂的理化特征、它们在制剂中的稳定性、可用的制造设备以及成本限制。本文所使用的术语“渗透促进剂”是指能够将药理活性化合物转运通过角质层并进入表皮或真皮的试剂，优选地，很少或不被全身性吸收。已评估了多种化合物在提高药物渗透入皮肤速率方面的效果，参见例如，Percutaneous Penetration Enhancers, Maibach H.1.和 Smith
H.E.(编)， CRC Press, Inc.，Boca Raton, Fla.(1995)，该文献调查了多种皮肤渗透促进剂的使用和测试；以及 Buyuktimkin 等，Chemical Means of Transdermal Drug PermeationEnhancement in Transdermal and Topical Drug Delivery Systems,Gosh T.K.,Pfisterff.R.，Yum S.1.(编)，Interpharm Press Inc.，Buffalo Grove, 111.(1997)。在某些不例性的实施方式中，用于本发明的渗透剂包括但不限于，甘油三酯(例如大豆油)、芦荟组合物(例如芦荟凝胶)、乙醇、异丙醇、辛基苯基聚乙二醇、油酸、聚乙二醇400、丙二醇、N-癸基甲基亚砜、脂肪酸酯(例如，肉豆蘧酸异丙酯、月桂酸甲酯、甘油单油酸酯和丙二醇单油酸酯)和N-甲基吡咯烷酮。
[0249]在某些实施方式中，组合物可处于软膏剂、糊剂(pastes)、霜剂、洗剂、凝胶剂、散剂、溶液剂、喷雾剂、吸入剂或贴剂(patches)的形式。在某些示例性的实施方式中，本发明所述组合物的制剂为霜剂，其可进一步含有饱和脂肪酸或不饱和脂肪酸，如硬脂酸、棕榈酸、油酸、棕榈-油酸(palmito-oleic acid)、鲸腊醇或油醇,特别优选硬脂酸。本发明的霜剂还可含有非离子型表面活性剂，例如，硬脂酸聚烃氧(40)酯(polyoxy-40-stearate)。在某些实施方式中，如有需要，在无菌条件下将活性组分与药学上可接受的赋形剂和任何需要的防腐剂或缓冲剂混合。眼用制剂、滴耳剂和滴眼剂也预期落入本发明的范围内。此外，本发明预期使用透皮贴剂，其具有将化合物受控递送至身体的额外优点。此类剂型是通过将化合物溶解或分散于适当介质中来制备的。如上文所讨论的，渗透促进剂也可用于增加化合物穿过皮肤的通量。可通过提供速率控制膜或者通过将化合物分散于聚合物基质(例如，PLGA)或凝胶中来对速率进行控制。
[0250]在某些实施方式中，本发明的组合物可用于外部施用，例如包括软膏剂、霜剂、保护剂、粘性皮肤贴剂、面膜(pack)、化妆水(toner)、乳液、洗剂、浴用剂、洗发剂、润发剂(hair tonic)、整发液(hair liquid)、洗发露(shampoo)和护发素(rinse)。此外,可任选地将外用剂常用的成分(例如美白剂、保湿剂、油性成分、UV吸收剂、表面活性剂、增稠剂、醇、粉末成分、着色材料、水性成分、水和各种皮肤营养剂)共混于试剂中，以增强本方法中使用的氧化还原相关因子的表达。此外，可任选地将外用制剂常用的助剂共混于试剂中，以抑制本方法中使用的MITF的表达，所述助剂例如为金属螯合剂(如乙二胺四乙酸二钠、乙二胺四乙酸三钠、柠檬酸钠、多聚磷酸钠、偏磷酸钠、葡糖酸)；咖啡因、单宁、维拉帕米(verapamil)、氨甲环酸(tranexamic acid),以及上述化合物的衍生物；药剂,如甘草提取物、光甘草定(glabridin)、中国木瓜果实(Chinese quince fruit)的热水提取物、各种草药、生育酚乙酸酯、甘草酸盐/酯，以及上述物质的衍生物或盐；美白剂，如维生素C、抗坏血酸磷酸镁、抗坏血酸葡糖苷、熊果苷、曲酸(kojic acid);糖类，如葡萄糖、果糖、甘露糖、蔗糖和海藻糖；维生素A，如视黄酸、视黄醇、视黄醇乙酸酯和视黄醇棕榈酸酯。
[0251]还应当领会的是，本发明的化合物和药物组合物可配制并用于联合治疗，即所述化合物和药物组合物可与一种以上其它期望的疗法(therapeutics)或医疗手段(medicalprocedures)共同配制，或者在一种以上其它期望的疗法或医疗手段的同时、之前或之后给药。组合方案中采用的治疗(疗法或手段)的特定组合将考虑期望的疗法和/或手段的相容性以及待实现的期望的疗效。还应当领会的是，对于同一疾病，所采用的治疗可实现期望的效果(例如，可同时给予本发明的化合物和另一皮肤色素沉着调控剂)，或者其能够实现不同效果(例如，控制有害效应)。
[0252]例如，可与本发明的化合物联合用于调控皮肤色素沉着的其它疗法或皮肤色素沉着调控剂包括但不限于，来自金鸡纳树的基于喹啉的生物碱，特别是奎宁、氯喹(chloroquinine);青蒿素；以及氨基烷基酹。
[0253]在某些实施方式中，本发明的药物组合物进一步包含一种以上其它治疗活性成分(例如化疗性的和/或姑息性的(palliative))。为了本发明的目的，术语“姑息性的”是指致力于缓解疾病的症状和/或治疗方案的副作用的处理，但其并不是治愈性的。
[0254]此外，本发明提供了本发明的皮肤色素沉着调控化合物的药学上可接受的衍生物以及使用这些化合物、其药物组合物或上述任意一种与一种以上其它治疗剂的组合来治疗受试者的方法。
[0255]还应当领会的是，用于治疗时，本发明的某些化合物可以游离形式存在，或者在适当的情况下以其药学上可接受的衍生物的形式存在。根据本发明，药学上可接受的衍生物包括但不限于，药学上可接受的盐、酯、此类酯的盐、或前药、或本发明化合物的其它加合物或衍生物(当向有需要的患者给予时，其能直接或间接地提供如本文其它部分所述的化合物、或者它们的代谢产物或残基)。
[0256]本发明还提供了上述化合物的前药形式，其中所述前药在体内代谢以生成如上所述的类似物或衍生物。事实上，部分上述类似物或衍生物可以是另一类似物或衍生物的前药。术语“前药”是本领域所公知的，包括在生物系统中转化为药学活性化合物的化合物。例如，参见 Remington’s Pharmaceutical Sciences, 1980,第 16 卷，Mack PublishingCompany, Easton,第 61 和 424 页。
[0257]本发明另一方面涉及用于方便有效地实施本发明所述方法的试剂盒。通常，药物包装(pack)或试剂盒包含一个以上容器，所述容器装有本发明药物组合物的一种以上成分。与这类容器任选相关的可以是管理药品的生产、使用或销售的政府机构所规定形式的提示(notice)，该提示反映用于人类给药的生产、使用或销售的机构的批准。[0258]药学用途和治疗方法
[0259]通常， 使用本发明的化合物的方法包括向有需要的受试者给予治疗有效量的本发明的化合物。
[0260]可通过合适的途径给予本发明的化合物和药物组合物。合适的给药途径包括但不限于口服给药、腹膜内给药、皮下给药、肌肉内给药、透皮给药、直肠给药、舌下给药、静脉内给药、口腔(buccally)给药或吸入给药。优选局部给予本发明的化合物和药物组合物。本发明的药物组合物优选含有此类药学上可接受的赋形剂:所述赋形剂适合于使得所述化合物或混合物能够口服给药、肠胃外给药、静脉内给药、皮内给药、肌肉内给药或皮下给药、直肠给药、通过吸入或通过口腔给药、或者透皮给药。可将活性成分与常规的药学上可接受的赋形剂混合或复合。本领域技术人员将理解的是，可利用常规使用的、对于活性剂呈惰性的给药模式、辅料、赋形剂或载体来制备和给予本发明所述的药物组合物。此类方法、辅料、赋形剂和载体的不例在例如Remington’s Pharmaceutical Sciences,第18版,(1990)中描述，以引用的方式将其公开内容并入本文。在受试者中使用的本发明的制剂包含所述试剂及其一种或多种可接受的赋形剂和任选的其它治疗剂。所述赋形剂在与所述制剂的其它成分的相容性方面必须是“可接受的”且不会损害其接受者。所述制剂可方便地以单位剂型存在，并且可通过药学领域公知的任何方法制备。所有方法均包括使所述试剂与构成一种以上辅助成分的赋形剂相关联的步骤。通常，通过使所述试剂与赋形剂均匀密切地相关联，并且如果需要的话，随后将产物分为其单位剂量，以制备所述制剂。
[0261]适合口服给药的形式包括通过本领域公认的方法制备的片剂、含片(troches)、胶囊剂、酏剂、混悬剂、糖衆剂、糯米纸包剂(wafers)、口香糖等。此类治疗有益的组合物或制剂中活性化合物的量为使得将获得合适剂量的量。糖浆制剂通常由化合物或盐在液态载体(例如乙醇、甘油或水)中的混悬液或溶液组成，并含有调味剂或着色剂。当组合物为片剂形式时，可使用常规用于制备固体制剂的一种以上药用赋形剂。该赋形剂的实例包括硬脂酸镁、淀粉、乳糖和蔗糖。当组合物为胶囊剂形式时，使用常规包封技术通常是合适的，例如在硬明胶胶囊壳中使用上述赋形剂。当组合物为软明胶壳胶囊形式时，可以考虑常规用于制备分散剂或混悬剂的药用赋形剂(例如水性树胶、纤维素、硅酸盐或油)，并且将所述赋形剂并入软明胶胶囊壳中。
[0262]适合肠胃外给药的制剂方便地包括优选与接受者血液等渗的无菌水性制剂。合适的赋形剂溶液包括磷酸盐缓冲盐水、盐水、水、乳酸林格氏液或右旋葡萄糖(5%，于水中)。可通过将试剂与水混合从而产生溶液或悬浮液，将其装入无菌容器并密封防止细菌污染，从而方便地制备此类制剂。优选地，在无菌制造条件下使用无菌材料，从而避免需要最后无菌化。此类制剂可以任选地含有一种或多种其它成分，所述成分可包括防腐剂，如羟苯甲酯、氯甲酚、间甲酚、苯酚和苯扎氯铵。当制剂存在于多剂量容器中时，此类材料特别有用。
[0263]还可以含有缓冲液，从而为制剂提供合适的pH值。合适的缓冲物质包括磷酸钠和醋酸钠。氯化钠或甘油可用于使制剂与血液等渗。
[0264]如果期望的话，可在非活性气氛(如氮气)下将制剂装入容器，该制剂可方便地以单位剂量形式或多剂量形式存在，例如，存在于密封的安瓿中。
[0265]本领域技术人员将意识到，根据本发明的方法向受试者给予的本发明组合物的各种成分的量取决于上文所述的那些因素。[0266]典型的栓剂制剂包含在以这一方式给药时有活性的化合物或其药学上可接受的盐，以及粘合剂和/或润滑剂，例如聚二醇、明胶、可可脂或者其它低熔点植物蜡或脂肪。典型的透皮制剂包括常规的水性或非水性辅料，例如霜剂、软膏剂、洗剂或糊剂，或者处于含药的塑料、贴片或膜的形式。
[0267]典型的吸入式组合物处于溶液剂、混悬剂或乳剂的形式，其可使用常规的推进剂(诸如二氯二氟甲烷或三氯氟甲烷)以气雾剂(aerosol)的形式给药。
[0268]在每种情况下，本发明的化合物或药物组合物的治疗有效量取决于多个因素，例如待治疗受试者的健康、年龄、性别、身材和状态，预期的给药模式以及受试者接受预期剂型的能力。活性剂的治疗有效量是足以对所治疗的病症具有期望效果的量。
[0269]本文所使用的术语“治疗(treatment) ”包括对动物、特别是哺乳动物、更特别是人的病症或疾病进行的任何治疗，包括:(i)预防尚未诊断出患病的受试者出现疾病或病症，Qi)抑制疾病或病症，即阻滞其发展；减轻疾病或病症，即使得病症消退；或减轻疾病导致的病症，即疾病的症状。例如，在调控皮肤色素沉着的方法中，期望的效果是在皮肤色素沉着调控存在问题的哺乳动物、例如人中，部分或全部地抑制、推迟或预防疾病或病症的进程；抑制、推迟或防止疾病或病症的复发；或预防疾病或病症的发生或发展。
[0270]术语“治疗有效量”指的是当给予需要这种治疗的哺乳动物时，足以实现本文定义的有效治疗的量。治疗有效量可随着待治疗的受试者和疾病状态、患病的程度和给药的方式而变化，并且可由本领域普通技术人员常规确定。
[0271]可在细胞培养或实验动物中通过标准药学程序测定有效量、毒性和疗效，例如测定LD50 (使50%的群体致死的剂量)和ED50 (对50 %的群体在治疗上有效的剂量)。剂量可随所使用的剂型和所用的给药途径而变化。毒性和疗效之间的剂量比为治疗指数(therapeutic index),可以用LD50/ED50的比值来表示。优选显示出高治疗指数的组合物和方法。可由细胞培养分析初步评估治疗有效剂量。还可在动物模型中配制达到循环血浆浓度范围的剂量，所述范围包括在细胞培养或合适的动物模型中测定的IC50(即，达到症状的半最大抑制(half-maximum inhibition)的本发明化合物的浓度)。可通过例如高效液相色谱测定血浆中的水平。可通过合适的生物分析监测任何特定剂量的效果。可由医师确定剂量，并可在有必要的情况下将剂量调整至适合所观察到的治疗效果。
[0272]在某些实施方式中，可一次性给予患者有效剂量的含有本文所述的本发明化合物的组合物。在某些实施方式中，可重复给予患者有效剂量的含有本发明化合物的组合物。可给予患者治疗量的含有本发明化合物的组合物，所述治疗量例如0.lmg/kg、0.5mg/kg、1.0mg/kg、2.0mg/kg、2.5mg/kg、5mg/kg、10mg/kg、15mg/kg、20mg/kg、25mg/kg、30mg/kg、40mg/kg、50mg/kg或以上。可在一段时间(如在5分钟、10分钟、15分钟、20分钟或25分钟的时间内)给予含有本发明化合物的组合物。如有保证，例如可按规律重复给药，如按小时给药3小时、6小时、12小时或以上，或如按两周(即每两周)给药I个月、2个月、3个月、4个月或以上。在一些实例中，在初步治疗方案后，可基于降低的频率给予治疗。例如，在每两周给药3个月后，可每月一次地重复给药，共给药6个月或I年以上。
[0273] 可由医师确定本文所述的组合物的剂量，并可在有必要的情况下将剂量调整至适合所观察到的治疗效果。关于治疗持续时间和频率，对熟练的临床医师而言，一般对受试者进行监测以确定所述治疗何时提供治疗效益，并确定是否增加或减少剂量、是否增加或减少给药频率、是否中止治疗、是否恢复治疗或是否对治疗方案进行其它改变。给药计划可根据多个临床因素(如，受试者对本发明化合物的敏感性)在一周一次至一天一次的范围内变动。
[0274]在一些实施方式中，本文所述的技术涉及本文所述的含有本发明化合物的药物组合物，以及任选的药学上可接受的载体。药学上可接受的载体和稀释剂包括盐水、水性缓冲液、溶剂和/或分散介质。此类载体和稀释剂的使用为本领域所熟知。可作为药学上可接受的载体的物质的一些非限定性实例包括:(I)糖类，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；(2)淀粉类，如玉米淀粉和马铃薯淀粉；(3)纤维素及其衍生物，如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、乙基纤维素、微晶纤维素和醋酸纤维素；(4)西黄蓍胶粉；(5)麦芽；(6)明胶；(7)润滑剂，如硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠和滑石；(8)赋形剂，如可可脂和栓蜡；(9)油类，如花生油、棉籽油、向日葵油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；(10) 二醇类，如丙二醇；(11)多元醇类,如甘油、山梨醇、甘露醇和聚乙二醇(PEG) ；(12)酯类，如油酸乙酯和月桂酸乙酯；
(13)琼脂；(14)缓冲剂，如氢氧化镁和氢氧化铝；(15)海藻酸；(16)无热原水；(17)等渗盐水；(18)林格氏溶液；(19)乙醇；(20) pH缓冲液；(21)聚酯类、聚碳酸酯类和/或聚酸酐类；(22)膨松剂(bulking agents)，如多肽和氨基酸；(23)血清组分，如血清白蛋白、HDL和LDL;(24)C2-C12醇类，如乙醇；以及(25)其它在药物制剂中使用的非毒性相容性物质。湿润剂、着色剂、脱模剂、涂层剂、甜味剂、调味剂、芳香剂、防腐剂和抗氧化剂也可出现在制剂中。术语如“赋形剂”、“载体”、“药学上可接受的载体”等在本文中均可相互替换使用。在一些实施方式中，载体抑制活性剂(例如本文所述的本发明化合物)的降解。
[0275]不希望被理论所束缚，在某些实施方式中，本发明的化合物选择性地抑制肝期寄生虫。
[0276]根据本发明，可调控皮肤色素沉着。
[0277]定义
[0278]为了方便起见，此处收集了在说明书、实施例和所附权利要求中所用的若干术语。除非另有说明或在上下文中有所暗示，下列术语和短语包括下文提供的含义。除非另有明确说明或从上下文中可明显看出，下列术语和短语不排除在其所属领域已具有的含义。提供所述定义以辅助描述【具体实施方式】，而由于本发明的范围仅受权利要求所限，因此并不意味着限制所请求保护的发明。除非另有定义，本文中使用的所有技术术语和科学术语具有与该发明所属【技术领域】中的普通技术人员通常认为的意思相同的意思。
[0279]本文所使用的术语“生物活性”指的是具有天然存在分子的结构功能、调控功能或生化功能，并在细胞分析和/或体内分析中表现出该分子的活性的蛋白质。
[0280]本文所使用的术语“异构体”指的是具有相同分子式、但具有不同结构式的化合物。除非具有相同的官能团，否则异构体不必须具有相似的性质。存在着多种不同类别的异构体，如立体异构体、对映异构体、几何异构体(geometrical isomers)等。存在着异构的两类主要形式:结构异构和立体异构(空间异构)。
[0281]标记“R”和“S”用于表明分子关于其手性中心的绝对构型。所述标记可作为前缀或后缀存在；所述标记能够或不能通过连字号使其与异构体相分离；所述标记能够或不能带有连字号；并且所述标记能够或不能以括号括出。
[0282]本文所使用的术语“S异构体”指的是根据对其每一取代基各自指定优先级的系统，具有S手性中心的对映异构体；根据Cahn-1ngold-Prelog(CIP)优先规则,基于原子序数，其原子序数的优先级沿逆时针方向降低则为S对映异构体(来自于拉丁文Sinestra，意为“左”)。不希望被理论所限，如果中心的取向使得4个基团中最低优先级的方向背离观察者，观察者可得出两种可能:若剩余的三个取代基的优先级沿顺时针方向降低，则该中心标记为R(来自于拉丁文Rectus，意为“右”);若沿逆时针方向降低，则为S (来自于拉丁文Sinestra,意为“左”)。
[0283]本文所使用的术语“治疗(treating) ”指的是改变被治疗的受试者的疾病进程。治疗的疗效包括但不限于，预防疾病的发生或复发、减轻症状、降低疾病直接或间接的病理结果、减缓疾病发展的速度、改善或缓和疾病的状态、以及缓解或改善预后。
[0284]本文所使用的术语“药学上可接受的赋形剂”是指与本发明药物组合物的活性成分(例如，本发明的化合物)相容(优选能够稳定所述活性成分)、且不损害待治疗受试者的载体和辅料。例如，可将与本发明化合物形成特定并更具溶解性的复合物的增溶剂用作递送所述化合物的药物赋形剂。合适的载体和辅料是本领域普通技术人员已知的。本文所使用的术语“赋形剂”将包括全部的此类载体、佐剂、稀释剂、溶剂或其它非活性添加剂。合适的药学上可接受的赋形剂包括但不限于，水、盐溶液、醇、植物油、聚乙二醇、明胶、乳糖、直链淀粉、硬脂酸镁、滑石、硅酸、粘性石蜡、芳香油、脂肪酸甘油单酯和甘油二酯、石油醚脂肪酸酯(petroethral fatty acid ester)、轻甲基纤维素、聚乙烯吡咯烧酮等。还可对本发明的药物组合物进行无菌化，如有需要，可将本发明的药物组合物与助剂混合，所述助剂例如润滑剂、防腐齐?、稳定齐?、湿润齐?、乳化齐?、影响渗透压的盐、缓冲齐?、着色剂、调味剂和/或芳香物质等，所述助剂非破坏性地与本发明的活性化合物反应。
[0285]术语“盐”和“药学上可接受的盐”是指本文公开的化合物、化合物的立体异构体或化合物的前药的有机盐和无机盐。因此，本文所使用的术语“药学上可接受的盐”是由本发明化合物的酸性或碱性基团形成的盐。示例性的盐包括但不限于，硫酸盐、柠檬酸盐、乙酸盐、草酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、硝酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、酸式磷酸盐、异烟酸盐、乳酸盐、水杨酸盐、酸式柠檬酸盐、酒石酸盐、油酸盐、鞣酸盐、泛酸盐、酒石酸氢盐、抗坏血酸盐、琥拍酸盐、马来酸盐、龙胆酸盐(gentisinate)、富马酸盐、葡糖酸盐(gluconate)、葡萄糖醒酸盐(glucaronate)、糖酸盐(saccharate)、甲酸盐、苯甲酸盐、谷氨酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐、及双羟萘酸盐(pamoate)。
[0286] 术语“药学上可接受的盐”还指由本文公开的具有酸性官能团(如羧酸官能团)的化合物和药学上可接受的无机碱或有机碱制备的盐。合适的碱包括但不限于，碱金属(如钠、钾和锂)的氢氧化物、碱土金属(如钙和镁)的氢氧化物、其它金属(如铝和锌)的氢氧化物、氨和有机胺(如未取代或羟基取代的单烷基胺、二烷基胺或三烷基胺；二环己基胺；二丁基胺；吡卩定;N-甲基胺、N-乙基胺；二乙胺；二乙胺；单-(2-羟基-低级烧基胺)、双-(2-羟基-低级烷基胺)或三-(2-羟基-低级烷基胺)，例如单-(2-羟乙基)胺、二-(2-羟乙基)胺、三-(2-羟乙基)胺、2-羟基-叔丁基胺或三-(羟甲基)甲胺；N，N- 二-低级烷基-N-(羟基低级烷基)-胺，例如N，N- 二甲基-N-(2-羟乙基)胺或三-(2-轻乙基)胺；N-甲基-D-葡糖胺(N-methyl-D-glucamine);以及氨基酸，如精氨酸、赖氨酸等)。其它药学上可接受的盐在Handbook of Pharmaceutical Salts.Properties, Selection, and Use (P.Heinrich Stahl 和 C.Wermuth 编，Verlag HelveticaChica Acta, Zurich, Switzerland(2002))中描述。在其它实施方式中，术语“药学上可接受的盐”是由本发明化合物的酸性或碱性基团形成的盐。示例性的盐包括但不限于，硫酸盐、柠檬酸盐、乙酸盐、草酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、硝酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、酸式磷酸盐、异烟酸盐、乳酸盐、水杨酸盐、酸式柠檬酸盐、酒石酸盐、油酸盐、鞣酸盐、泛酸盐、酒石酸氢盐、抗坏血酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、龙胆酸盐、富马酸盐、葡糖酸盐、葡萄糖醛酸盐、糖酸盐、甲酸盐、苯甲酸盐、谷氨酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐、及双轻萘酸盐。
[0287]本文所使用的术语“受试者”是指脊椎动物，优选哺乳动物、更优选灵长类动物、进一步更优选人。哺乳动物包括但不限于，人、灵长类动物、野生动物、野化动物(feralanimals)、农场动物(farm animals)、体育动物(sport animals)和宠物。在一些实施方式中，受试者包括驯养的和市售的农场动物，例如但不限于，牛、猪、马和其它市售动物。在一些实施方式中，受试者为雄性受试者；然而，受试者还可包括雌性受试者以及由雌性变性为雄性的受试者。灵长类动物包括黑猩猩、食蟹猴、蜘蛛猴和猕猴(如恒河猴)。啮齿动物包括小鼠、大鼠、旱獭(woodchucks)、雪紹(ferrets)、兔和仓鼠。驯养和狩猎动物包括奶牛、马、猪、鹿、野牛、水牛、猫科物种(如家猫)、犬科物种(如狗、狐狸、狼)、鸟类(如鸡、鸸鹋、能鸟)和鱼类(如鳟鱼(trout)、It鱼和鲑鱼)。患者或受试者包括前面所述的任何子集，例如，上述所有。在本文描述方面的某些实施方式中，所述受试者是哺乳动物，例如，灵长类动物、如人类。术语“患者”和“受试者”在本文中可互换使用。此外，本文所述的方法和组合物可用于治疗驯养动物和/或宠物。
[0288]术语“前药”是指配制为前体化合物的化合物，该前体化合物于给药后在体内通过化学或生理学过程(例如通过被引入生理学pH下或通过酶活性)而活化或释放化合物的活性成分。对于前药的合成和使用的讨论在Higuchi和Stella, Prodrugs as NovelDelivery Systems, the ACS Symposium Series 第 14 卷；以及 Bioreversible Carriersin Drug Design, Edward B.Roche 编，American Pharmaceutical Association andPergamon Press, 1987中提供。据此,术语“前药”意味着能够通过一些化学或生理过程(例如酶过程和代谢水解)转化为非活性形式、并且该非活性形式能够通过一些共化合物(co-compound)或特定环境因素(例如pH等)在体内活化的化合物。当给予受试者时，前药可以是非活性的(即酯)，但能够在体内转化为活性化合物(例如通过水解为游离的羧酸或游离的羟基)。前药化合物通常提供了在机体内有利的溶解性、组织相容性或缓释性。术语“前药”还意味着包括任何共价结合的载体，当给予受试者所述前药时，所述载体能够在体内释放活性化合物。
[0289]本文所用的术语“治疗有效量”是指治疗时足以产生有益的或所期望的临床结果的量。如本领域技术人员所公认的，治疗有效量依赖于所治疗的特定疾病、给药途径、选用的赋形剂和组合疗法的可能性而变化。
[0290]确定治疗有效量完全为本领域技术人员能力所及。通常，治疗有效量可随受试者的病史、年龄、状况、性别、严重程度以及受试者的医疗条件类型、以及其它药物活性剂的给予而变化。此外，如本领域技术人员所公认的，治疗有效量还依赖于所治疗的特定疾病、给药途径、选用的赋形剂和组合疗法的可能性而变化。
[0291]本文所使用的术语“皮肤”是指动物的表皮和/或真皮。[0292]本文所使用的术语“降低/减少(decrease/reduced/reduction) ”或“抑制(inhibit) ”通常都意味着降低了有统计学显著性的量。然而，为避免疑义，“减少”或“降低”或“抑制”表示相对于参比水平降低至少10%，例如降低至少约20%、或至少约30%、或至少约40%、或至少约50%、或至少约60%、或至少约70%、或至少约80%、或至少约90%、或上至并包括降低100% (如，相对于参比样品而言的缺乏水平)、或相对于参比水平(例如不存在本发明化合物时)的降低在10%到100%间的任意量。
[0293]本文使用的术语“增加/增强(increased/increase/enhance) ”或“活化(activate)”通常都意味着增加了有统计学显著性的量；为避免任何疑义，术语“增加”或“增强”或“活化”表示相对于参比水平增加至少10%，例如增加至少约20%、或至少约30%、或至少约40%、或至少约50%、或至少约60%、或至少约70%、或至少约80%、或至少约90%、或上至并包括增加100%、或相对于参比水平的增加在10%到100%之间的任意量；或相对于参比水平(例如不存在本发明化合物时)存在至少约2倍、或至少约3倍、或至少约4倍、或至少约5倍、或至少约10倍的增加、或存在2倍到10倍之间的任意量的增加、或是更大量的增加。
[0294] 术语“统计学显著的(statistically significant)”或“显著地(significantly)”表示统计学显著性，并且通常意味着比正常标记物的浓度低至少两个标准差(2SD)或更低。这个术语表示存在差异的统计学证据。它被定义为当无效假设实际上是真时作出拒绝该无效假设决定的可能性。通常用P值来作出决定。
[0295]本文所使用的术语“实质上(substantially) ”意味着至少约60%的部分,或优选至少约70%、或至少约80%、或至少约90%、或至少约95%、或至少约97%、或至少约99%或以上的部分，或70%至100%之间的任意整数的部分。
[0296]本文所使用的术语“包含/包括(comprising/comprises) ”表示对本发明必要的组合物、方法及其各自的组成部分，并且无论是否必要都仍然对未指定的要素保持开放。
[0297]本文所使用的术语“基本上由…组成”涉及给定的实施方式所需的那些元素。该术语允许存在实质上不影响本发明实施方式的基础和新颖性或起作用的特征的其它要素。
[0298]术语“由…组成”涉及本文所述的组合物、方法及其各自的组成部分，排除没有在实施方式描述中详述的任何要素。
[0299]除非文中明确地另有所指，本说明书和所附权利要求中所用的单数术语“一 (a/an)”和“该/所述(the)”涵盖复数的所指物。因此，例如，提及“所述方法/该方法(themethod) ”时，其包括一种或多种本文中所述的方法和/或步骤类型和/或本领域技术人员在阅读本公开等后将变得显而易见的方法和/或步骤类型。
[0300]除了在操作实施例中或另有指示的地方,本文所用的表示成分的量或反应条件的全部数值在所有情况下都应该被理解为被术语“约”修饰。与百分比相连使用的术语“约”可意味着±1%。
[0301]除非另有说明，本申请和权利要求中单数的使用包括复数。另外，除非另有说明，在本申请中，“或”的使用意味着“和/或”。此外，术语“包括/包含(including) ”以及其它形式(例如“includes”和“included”)的使用是非限制性的。同样，除非另有明确说明，术语“要素”或“成分/组分”均涵盖包含一个单位的要素和成分/组分以及包含多于一个单位的要素和成分/组分。[0302]除非本文中另有定义，本申请中使用的科学术语和技术术语具有与该发明所属【技术领域】中的普通技术人员通常认为的意思相同的意思。应理解的是，本发明不限于本文所述的特定的方法、方案或试剂等，其可以变化。本文所使用的术语仅用于描述【具体实施方式】，并不旨在限制本发明的范围，本发明的范围仅受权利要求所限。免疫学和分子生物学的惯用术语的定义可在如下出版物中找到:“The Merck Manual of Diagnosis andTherapy”，第 18 版，Merck Research Laboratories 出版，2006(ISBNO-911910-18-2)；Robert S.Porter 等(编)，The Encyclopedia of Molecular Biology, BlackwellScience Ltd.出版，1994 (ISBN0-632-02182-9);以及 Robert A.Meyers (编)，MolecularBiology and Biotechnology:a Comprehensive Desk Reference，由 VCH Publishers, Inc.出版，1995(ISBN1-56081-569-8) ；Werner Luttmann 著，Elsevier 出版的 Immunology，2006。分子生物学中的惯用术语的定义还可在下列出版物中找到！Benjamin Lewin，Genes IX，由 Jones&Bartlett Publishing 出版，2007 (ISBN-13:9780763740634) ；Kendrew等(编)，Blackwell Science Ltd.出版的 The Encyclopedia of Molecular Biology,1994 (ISBN0-632-02182-9)；以及 Robert A.Meyers (编)，Maniatis 等，MolecularCloning:A Laboratory Manual， Cold Spring Harbor Laboratory Press， Cold SpringHarbor，N.Y.，USA(1982) ;Sambrook 等，Molecular Cloning:A Laboratory Manual (第 2片反)，Cold Spring Harbor Laboratory Press，Cold Spring Harbor，N.Y.，USA (1989)；Davis 等，Basic Methods in Molecular Biology, Elsevier Science PublishingInc.，New York, USA (1986);或 Methods in Enzymology:Guide to Molecular CloningTechniques,第 152 卷，S.L.Berger 和 A.R.Kimmerl 编，Academic Press Inc., San Diego,USA (1987) ；Current Protocols in Molecular Biology (CPMB) (Fred M.Ausubel 等编，JohnWiley and Sons, Inc.), Current Protocols in Protein Science (CPPS) (John E.Coligan等编，John Wiley and Sons, Inc.)和 Current Protocols in Immunology (CPI) (JohnE.Coligan等编，John Wiley and Sons, Inc.),以引用的方式将其全部并入本文。
[0303]应当理解的是，上述详细说明及下面的实施例仅是说明性的，并不作为对本发明保护范围的限制。对本领域人员显而易见的是，可在不脱离本发明的精神和保护范围的情况下对所公开的实施方式进行各种变化和改进。此外，为了描述和公开的目的，通过引用的方式将所标明的所有专利、专利申请以及出版物明确并入本文，例如，此类出版物中描述的可与本发明一起使用的方法学。这些出版物仅仅由于它们的公开早于本申请的申请日而提供。在这一方面不应当视作承认本发明人没有权利借助于先前的发明或因为任何其它原因而将公开的内容提前。所有关于这些文件的日期的声明或这些文件的内容的表述是基于 申请人:可得的信息，并且不构成关于这些文件的日期或内容的正确性的任何承认。筛选分析方法
[0304]在又一方面，本文公开了对能够调节MITF的表达或活性的化合物进行识别的方法。所述方法通常包括使细胞与测试化合物相接触，并将报告子的表达与对照或参照相比较。相对于对照或参照而言，报告 子的表达、量或活性的变化表明该化合物能够调节MITF的表达或活性。对照可以是不与化合物接触的样品。对照可以是用已知的MITF表达或活性调节剂处理的样品。这一对照可作为阳性对照。阳性对照可以是用已知的MITF抑制剂处理的样品。[0305]在所述分析方法的实施方式中，所述细胞能够产生MITF，并包含报告基因，所述报告基因可操作地连接至MITF的直接转录靶标的启动子。所述细胞能够由内源基因产生MITF0或者(或此外)，细胞可以是含有外源MITF基因的转化细胞。
[0306]本文所使用的术语“报告基因”指的是表达产生可检测的响应或信号的分子的基因。本文所使用的术语“可检测的”涉及允许对所述分子的存在进行检测、成像和/或监测的分子或分子中的元素或官能团。可检测的响应通常是指通过观测或仪器能够检测的信号变化或发生。不受限制地，可直接地检测所表达的分子，或所述分子能够在存在某试剂时产生可检测的信号。此外，可使用确定培养物中的报告子的量的任何可用方法。在一些实施方式中，可检测的响应是光学信号，即报告子是光学报告子。合适的光学报告子包括但不限于荧光报告子和化学发光基团。
[0307]在一些实施方式中，所述可检测的响应为荧光或荧光的变化，例如，荧光强度的变化、荧光激发或发射波长分布的变化、荧光寿命的变化和/或荧光偏振的变化。在一些实施方式中，报告基因表达能够催化由试剂产生可检测的信号的酶。
[0308]在一些实施方式中,所述报告基因表达萤光素酶(Iuciferase)。
[0309]在一些实施方式中，所述报告基因表达荧光蛋白。适用的荧光蛋白的实例包括但不限于，绿色荧光蛋白、红色荧光蛋白(例如，DsRed)、黄色荧光蛋白、青色荧光蛋白、蓝色荧光蛋白，及它们的变体(参见，例如，美国专利N0.6，403，374、N0.6，800，733以及N0.7，157，566)。GFP变体的具体实例包括但不仅限于:增强型GFP(EGFP)、不稳定EGFP、在 Doan 等，Mol.Microbiol，55:1767-1781 (2005)中描述的 GFP 变体、在 Crameri 等，Nat.Biotechnol.，14:315319 (1996)中描述的 GFP 变体、在 Rizzo 等，Nat.Biotechnol,22:445(2004)和 Tsien，Annu.Rev.Biochem.,67:509(1998)中描述的天蓝色荧光蛋白、以及在Nagal等，Nat.Biotechnol.，2087-90 (2002)中描述的黄色荧光蛋白。DsRed变体在例如 Shaner 等，Nat.Biotechnol., 22:1567-1572 (2004)中有所描述，并包括 mStrawberry、mCherry、mOrange、mBanana、mHoneydew 和 mTangerine。其它 DsRed 变体在例如 Wang 等，Proc.Natl.Acad.Sc1.U.S.A.,101:16745-16749 (2004)中有所描述，并包括 mRaspberry 和mPlum。DsRed 变体的其它实例包括在 Fischer 等，FEBS Lett.，577:227-232 (2004)中描述的 mRFPmars 以及在 Fischer 等，FEBS Lett, 580:2495-2502 (2006)中描述的 mRFPruby。
[0310]荧光蛋白的其它非限制性实例包括AceGFP、AcGFPU AmCyanU AQ143、AsRed2、Azam1-Green (mAG)、Cerulean、Cerulean、Citrine、cOFP、CopGFP> Cyan、CyPet> Dronpa、DsRed/DsRed2/DsRed_Express、DsRed-Monomer、EBFP、ECFP、EGFP、Emerald、eqFP611、EYFP、GFPs、HcRedl、HcRed_tandem、J-RecU Kaede、KFP、KikGR、mBanana、mCFP、mCherry、mCitrine、mEosEP、mHoneydew> MiCy> mKO、mOrange、mPlum、mRaspberry> mRFPl、mStrawberry、mTangerine、mYFP、mYFP、mYFP、PA-GFP, PA-mRFP、PhiYFP, PS-CFP-2、Renilla、tdEosFP、tdTomato、T-Sapphire> TurboGFP> UV-T-Sapphire> Venus、YPet> ZsYellowl,以及它们的衍生物和类似物。在一个实施方式中，所述荧光蛋白是绿色荧光蛋白(GFP)。
[0311] 本领域已知的检测荧光(例如从荧光团或荧光蛋白而来的荧光)的具体装置或方法包括但不限于:体内近红外突光(参见，例如，Frangioni, Curr.0pin.Chem.Biol，7:626-634 (2003))、MaestroTM 体内荧光成像系统(CambridgeResearch&Instrumentation, Inc.；ffoburn, Mass.)、使用飞点扫描装置(flying-spotscanner)进行的体内突光成像(参见，例如，Ramanujam等，IEEE Transactions onBiomedical Engineering,48:1034-1041 (2001))等。其它用于检测光学响应的方法或装置不受限制地包括目视检查、(XD相机、摄影机、成像胶片(photographic film)、激光扫描装置、突光计、光电二极管、量子计数器、落射突光显微镜(epifluorescence microscopes)、扫描显微镜、流式细胞仪、突光微板读取仪(fluorescence microplate readers)、或使用光电倍增管进行信号放大。
[0312]可将报告基因可操作地连接至作为MITF的直接转录靶标的启动子。“作为MITF的直接转录靶标的启动子”指的是由MITF直接调节的任何基因启动子。该调节可以是由MITF与启动子的直接相互作用所致。在一些实施方式中，作为MITF的直接转录靶标的启动子是TRPMl基因的启动子。
[0313]对于所述分析方法，任选地可使细胞在与测试化合物接触前生长一段时间。在一些实施方式中，实际工作者可获得已经在合适的器皿中接种并允许其生长一定时间的细胞。在其它实施方式中，实际工作者可将细胞接种在合适的器皿中，并允许细胞在与测试化合物接触前生长一段时间，例如至少一天、至少两天、至少三天、至少四天、至少五天、至少六天、至少七天或以上。
[0314]在测试化合物与细胞接触足够长的一段时间后，测定报告子(例如，表达或活性)的量并与对照或参照进行比较。例如，接触时间可为数秒至数天或数周。实际工作者可对接触时间进行优化，从而得到最佳的信噪比、时间约束(time constraints)、待测试的测试化合物的量、细胞数目、测试体积、所述分析方法可用的试剂等。
[0315]本文所用的术语“测试化合物”指的是其对运动神经元存活的刺激和/或提高和/或促进能力有待筛选的化合物和/或组合物。所述测试化合物可包括各种不同的化合物，包括化合物和化合物的混合物，例如有机小分子或无机小分子；糖类；寡糖；多糖；生物大分子，例如肽、蛋白质、以及肽类似物和衍生物；模拟肽；核酸；核酸类似物和衍生物；由生物材料(如细菌、植物、真菌或动物细胞、动物组织)制得的提取物；天然存在的组合物或合成的组合物；以及以上化合物的任意组合。在一些实施方式中，所述测试化合物是小分子。
[0316]可能的测试化合物的数量达到数百万。开发基于小分子、聚合物和基因组的文库的方法在例如 Ding 等，J Am.Chem.Soc.124:1594-1596 (2002)和 Lynn 等，J.Am.Chem.Soc.123:8155-8156 (2001)中描述。可商购的化合物文库可通过例如ArQule、Pharmacopia>graffinity>Panvera>Vitas-M Lab、Biomol International 和 Oxford 获得。可用本文所述的筛选装置和方法对这些文库进行筛选。也可使用例如来自NIH Roadmap、Molecular Libraries Screening Centers Network(MLSCN)的化合物文库。www.broad,harvard, edu/chembio/platform/screening/compound_libraries/ind in.htm 上可找至丨J化合物文库的详细列表。化学品文库或化合物文库是通常最终用于高通量筛选或工业生产的储备的化学品的集合。所述化学品文库可简单地由一系列储备的化学品组成。各化学品的相关信息存储在收录了如下信息的一些类型的数据库中:如化合物的化学结构、纯度、量、以及物理化学特征。
[0317]根据所实践的【具体实施方式】，测试化合物可以溶液中的游离形式提供，或者可以附着于载体或固体支持物(例如，珠子)。大量适当的固体支持物可用于固定测试化合物。适当的固体支持物的实例包括琼脂糖、纤维素、葡聚糖(例如作为Sephadex、Sepharose可商购)、羧甲基纤维素、聚苯乙烯、聚乙二醇(PEG)、滤纸、硝化纤维素、离子交换树脂、塑料膜、聚胺甲基乙烯基醚(polyaminemethylvinylether)马来酸共聚物、玻璃珠、氨基酸共聚物、乙烯-马来酸共聚物、尼龙和丝等。另外，对于本文所述的方法，测试化合物可以单独筛选或成组筛选。在预期有效测试化合物的命中率(hit rates)低至预期给定组中不会有超过I个阳性结果的情况下，成组筛选特别有用。
[0318]可在任何所希望的浓度下对测试化合物进行测试。例如，可在0.01nM至约IOmM的终浓度下对所述测试化合物进行测试。此外，可在2个以上(例如，2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个或更多个)不同浓度下进行测试。如果测试化合物仅在某浓度范围内具有活性，则该测试是有用的。当在2个以上不同浓度下对所述测试化合物进行测试时，浓度差别的范围可以是10倍-10，000倍(例如，10倍-5000倍、10倍-1000倍、10倍-500倍或10倍-250倍)。
[0319]在一些实施方式中，对测试化合物进行多于一次的所述分析方法，并且若其可重现地调节MITF的表达或活性，则对其进行选择。
[0320]在一些实施方式中，所述分析方法进一步包括确定所述化合物在任何其它筛选中的得分的步骤。这可通过检查描述多种分析方法中化合物活性的多个化学数据库而实现。这一步骤有助于识别对本分析方法而言独有的(unique)化合物。例如,可使用BroadInstitute的ChemBank分析工具。ChemBank是小分子筛选结果的数据库，只要在BroadInstitute中进行，不考 虑筛选的具体性质。在一些实施方式中，选出的化合物是在少于3个(例如，3、2、1或O)其它筛选中得分(scores)的化合物。
[0321]在一些实施方式中，选出的测试化合物表现出剂量依赖性地调节MITF的表达或活性。在一些实施方式中，选出的测试化合物在所述分析方法中表现出最大地调节MITF的表达或活性。由于一些高效力的调节子(基于IC50)仅能实现弱的最大阻抑，而其它效力较低的调节子(基于IC50)即使在低于其IC50的剂量时仍能够产生明显更高的阻抑，因此这样可以是有用的。
[0322]药物的分配系数(distribution coefficient)极大地影响药物到达其在体内的预期靶标的难易程度、一旦其到达靶标将会产生多强的效果以及其将以活性形式停留在体内多长时间。LogP是在药物化学中使用的一个用来评估给定分子的类药性(druglikeness)的标准,并用于计算亲脂性效率(lipophilic efficiency)(效力与LogP的函数，用于评估所研究的化合物的质量)。可使用本领域公知的方法实验性地确定LogP值。或者(或此外)，可由化合物的化学结构预测LogP值。LogP值的预测方法也是本领域公知的。参见例如，Ghose 和 Crippen (J.Comp.Chem.9,80 (1988))。
[0323]通常，具有的LogP值范围为0.7-5.9的化合物渗透皮肤，然而，如果log POW值高于5.5，则皮肤渗透性会减弱。据此，在一些实施方式中，选出的测试化合物具有的LogP小于或等于6 (例如，小于或等于5、小于或等于4、小于或等于3、小于或等于2、或者小于或等于I)。在一些实施方式中，选出的化合物具有的LogP值范围为0.5-6 (例如，0.5-5.5,0.5)。
[0324]在一个实施方式中，选出的化合物具有的LogP值范围为约0.7至约6。
[0325]不受限制地，可以任意密度接种或培养细胞，从而提供最佳的信噪比。例如，可以1，000-20, 000细胞/孔的密度将细胞接种或培养在384孔板中。在一些实施方式中，可以
I,000细胞/孔、2，000细胞/孔、4，000细胞/孔、8，000细胞/孔、12，000细胞/孔、16，000细胞/孔或20，000细胞/孔的密度将运动神经元接种在384孔板中。基于上述内容，本领域普通技术人员能够调整其它细胞培养器皿中的接种密度。例如，能够计算384孔板和待使用的器皿中孔的规格、并基于384孔板和待使用的器皿中孔的体积比或表面积比来按比例决定待接种细胞的数目。
[0326]可使用本领域技术人员可得的用于细胞培养的任何合适的容器或装置进行所述分析方法。例如，可在24孔板、96孔板或384孔板中进行所述分析方法。在一个实施方式中，在384孔板中进行所述分析方法。
[0327]可由本领域技术人员可得的任何资源获得本文公开的方面的细胞。此外，所述细胞可以是任何来源。据此，在一些实施方式中，所述细胞来自哺乳动物来源。在一些实施方式中，所述细胞是黑色素细胞或来自于黑色素瘤细胞系。在一个实施方式中，所述细胞来自于人黑色素瘤细胞系Skmel5。
[0328]在一些实施方式中，所述细胞来自于受试者，例如患者。在一些实施方式中，受试者(例如患者)是需要调控其皮肤色素沉着的受试者。
[0329] 在一些实施方式中，筛选方法是高通量筛选。高通量筛选(HTS)是采用机器人、数据处理和控制软件、液体操作装置以及灵敏性检测器的用于科学实验的方法。高通量筛选或HTS使得研究者快速进行数百万的生化、遗传或药理学测试。高通量筛选是本领域技术人员公知的，例如，在美国专利号5，976，813,6, 472，144,6, 692，856,6, 824，982和7，091，048中有所描述，以引用的方式将每一以上文献的整体并入本文。
[0330]HTS使用自动化对候选化合物文库进行分析筛选。分析方法是对特定活性(通常为对生化机制或生物机制的抑制或刺激)的测试。典型的HTS筛选文库或“数据库组(decks) ”可包含100，000至多于2，000，000个化合物。
[0331]HTS的关键实验设备或测试器皿为微滴定板:通常为一次性并由塑料制成的小型容器，其特征在于具有格状排列的小的开放的隔断(divot)，称为孔。用于HTS的现代微板一般具有384个、1536个或3456个孔。它们均为96的倍数，对应于最初的具有8 X 12、9mm间隙的96孔微板。
[0332]为了准备分析方法，研究者将他/她希望利用其进行试验的合适的反应物(如运动神经元细胞群)填入板上的每一孔中。在经过一段培养时间，允许反应物吸收、结合孔中的化合物或者与孔中的化合物反应(或不能反应)后，手动或通过机器对板上的全部孔进行测定。当研究者使用显微镜(例如)寻找计算机自身难以检测的变化时，手动测量经常是必须的。或者，专用的自动分析仪可对这些孔实施大量实验，例如比色测定、放射性计数等。在这种情况下，机器以数值网格输出每一实验的结果，每一数值映射至由单个孔获得的结果。高容量分析仪器可在几分钟的间隙内像这样测定数十块板，极快地生成数以千计的实验数据点。
[0333]另一方面，本发明提供了通过本文所述的筛选分析方法选出的化合物。将理解的是，本文也要求保护通过本文所述的筛选分析方法选出的化合物的类似物、衍生物、异构体、以及药学上可接受的盐。
[0334]在一些实施方式中，本发明可由任何编号段落进行描述:
[0335]1.一种调控皮肤色素沉着的方法，所述方法包括:向有需要的受试者给予药物组合物，所述药物组合物包含抑制小眼转录因子(MITF)的表达或活化的治疗剂。[0336]2.如段I所述的方法，其中，所述治疗剂选自于由下列治疗剂所组成的组:
[0337]l-[(lS，3R，5R，7S)-3_(3，4-二甲基苯基)金刚烷-1-基]甲胺；
[0338]5-氯_7-[ (2-氯-6-氟苯基)(吡啶_2_基氨基)甲基]喹啉_8_醇；
[0339](1S，2R，3S，6S)-1-苯甲酰基-6-叔丁基螺[2.5]辛烷 _1，2_ 二甲腈；
[0340]N-[(4-氯苯基)(2-羟基-1-萘基)甲基]-3-甲氧基苯甲酰胺；
[0341]乙基-1-苄基-5-[3-(叔丁基氨基)-2-羟基丙氧基]-2-甲基_1Η_吲哚_3_甲酸酯；
[0342]5-氯-7-[(2，5- 二甲基苯基)(吡啶_2_基氨基)甲基]喹啉_8_醇；
[0343]N-[5-(2，3-二氢-1，4-苯并二氧杂芑-6-基)-2_甲基_3_呋喃甲酰基]甘氨酸；
[0344][3-(1, 3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸；
[0345]N- (2-氟苯基)-2- {[5- (3_甲基苯基)_1，3，4_噁二唑_2_基]硫代}乙酰胺；
[0346]N-[4-(6-甲基-1，3-苯并噻唑 _2_ 基)苯基]-2_[(5_ 甲基 _1，3，4_ 噻二唑-2-基)硫代]乙酰胺；
[0347]2- (2-溴-4-叔丁基苯氧基)-N- (2-甲氧基_5_硝基苯基)乙酰胺；
[0348]甲基-5- {[ (4-氟-2-甲基苯基)磺酰基](异烟酰基)氨基} -2-甲基_1_苯并呋喃-3-甲酸酯；
[0349]1-(4-氯苄基)-N-(吡啶-3-基甲基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶_4_胺；
[0350]2-{[5-(4-氯苯基)-4_ (3-甲基苯基)-4H-1，2，4_ 三唑 _3_ 基]硫代}_N-(3_ 甲氧基苯基)乙酰胺；
[0351 ]N-苯基-3- [ (4-苯基-1，3-噻唑_2_基)硫代]丙酰胺；
[0352]乙基-[3_(1，3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸酯；
[0353]2-甲基-3-[(4-甲基哌啶-1-基)羰基]萘并[2，3-b]呋喃_4，9_ 二酮；
[0354]N- (3-苯丙基)-10H-吩噻嗪-10-甲酰胺；
[0355]5- (4-氯苯基)-2-吡咯烷-1-基-6H-1，3，4_ 噻二嗪；
[0356]7-(4-氟苯基)-1-(2-呋喃基甲基)-5,5-双(三氟甲基)_5，8_ 二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2，4 (1H, 3H) - 二酮；
[0357]3-{[(2-溴-4-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
[0358]3-{[4-(羟甲基)-2-甲氧基苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0359]5-苯基[1,2, 5]噁二唑并[3，4-b]吡嗪；
[0360]2，3，9-三甲氧基_6a，12a-二氢苯并吡喃并[3, 4-b]苯并吡喃-12 (6H)-酮；
[0361]4-[(4-氯苄基)氧基]-3-甲氧基-N-(2-甲基_5_[1，3]噁唑并[4，5_b]吡啶-2-基苯基)苯甲酰胺；
[0362]3-(1, 3-苯并噻唑-2-基硫代)丙酸；
[0363]3-{[(4-乙氧基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
[0364]N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1- [(2，5-二甲氧基苯基)磺酰基]哌啶_4_甲酰胺；
[0365]N-[3，5-双(三氟甲基)苯基]-2-[(5-硝基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]乙酰胺；
[0366]5- [4- (4-叔丁基苯甲酰基)哌嗪-1-基]-2-硝基-N-(吡啶_3_基甲基)苯胺；[0367]3-{[2-氯-4-(羟甲基)苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0368]{[ (2-氯苯基)氨基][(3-氟苄基)硫代]亚甲基}丙二腈；
[0369]{[ (4-溴苯基)氨基][(4-氟苄基)硫代]亚甲基}丙二腈；以及
[0370]l-[(lS，3R，5R，7S)-3_(3，4-二甲基苯基)金刚烷-1-基]甲胺；
[0371](3，5-二叔丁基-4-羟基苯亚甲基)丙二腈；
[0372]2-氨基-N-{5-[6-( 二甲基氨基)-9H_嘌呤-9-基]-4-羟基-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基} -3- (4-甲氧基苯基)丙酰胺；
[0373]I, 3，6-三羟基-7-甲氧基_2，8_双(3-甲基丁 _2_烯_1_基)_9H_氧杂蒽_9_酮；
[0374](3S，3aR，4R，6S，6aR，7S，8R，9bR)-6-乙酰氧基 _4_( 丁酰氧基)-3，3a-二羟基-3，6，9-三甲基-8-{[ (2Z)-2-甲基丁 _2_烯酰]氧基}_2_氧代-2，3，3a, 4，5，6，6a, 7，8，9b-十氢奥并[4，5_b]呋喃-7-基己酸酯；
[0375](IE, 5S) -6，6，6_ 三氟 _5_ 羟基-1, 5_ 二苯基己-1-烯 _3_ 酮；
[0376]2-(4-甲氧基苯基)-1,3-苯并噻唑；
[0377]乙基-4-氨基-2-{[(IE)-3-(4-甲基苯基)-3-氧代丙-1-烯-1-基]硫代}嘧啶-5-甲酸酯；
[0378]3-[(5-氯-1，3-苯并噻唑-2_基)硫代]_5，5_ 二甲基环己_2_烯_1_酮；
[0379](2E) -3-[(5-甲基_1Η_苯并咪唑_2_基)硫代]_1_苯基丙_2_烯_1_酮；
[0380]11, 12- _-羟基-3-异丁基-4，5, 8- 二甲基-3，3a, 4, 6a, 9, 10, 11, 12-八氢-1H-环十一烷并[d]异吲哚-1，15 (2H) - 二酮；
[0381]3-(羟甲基)-6_异丙基-5_[(2-甲基丁 _2_烯酰基)氧基]_2_氧代环己-3-烯-1-基4-羟基-2-甲基丁 -2-烯酸酯；
[0382]I, 11，12-三羟基-2，16-二氧代-11，20-环氧苦味_3_烯_15_基_2_羟基_2_甲
基丁酸酯；
[0383]1-[3，5_双(二氣甲基)苯基]_3_ [3_氣_4_ (异丙基横酸基)_2_喔吩基]服；
[0384]以上化合物的药学上可接受的盐；以及，
[0385]以上化合物的任意组合。
[0386]3.如段2所述的方法，其中，所述治疗剂选自于由下列治疗剂所组成的组:
[0387]l-[(lS，3R，5R，7S)-3_(3，4-二甲基苯基)金刚烷-1-基]甲胺；
[0388]5-氯-7_[ (2-氯_6_氟苯基)(吡唳~2~基氨基)甲基]喹啉-8-醇；
[0389] (1S，2R，3S，6S)-1-苯甲酰基-6-叔丁基螺[2.5]辛烷 _1，2_ 二甲腈；
[0390]N-[(4-氯苯基)(2-羟基-1-萘基)甲基]-3-甲氧基苯甲酰胺；
[0391]乙基-1-苄基-5-[3-(叔丁基氨基)-2-羟基丙氧基]-2-甲基_1Η_吲哚_3_甲酸酯；
[0392]5-氯-7-[(2，5- 二甲基苯基)(吡啶_2_基氨基)甲基]喹啉_8_醇；
[0393]N-[5-(2，3-二氢-1，4-苯并二氧杂芑-6-基)-2_甲基_3_呋喃甲酰基]甘氨酸；
[0394][3-(1, 3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸；
[0395]N-(2-氟苯基)-2_ {[5-(3-甲基苯基)_1，3，4_噁二唑_2_基]硫代}乙酰胺；
[0396]N-[4-(6-甲基-1，3-苯并噻唑 _2_ 基)苯基]-2_[(5_ 甲基 _1，3，4_ 噻二唑-2-基)硫代]乙酰胺；[0397]2- (2-溴-4-叔丁基苯氧基)-N- (2-甲氧基_5_硝基苯基)乙酰胺；
[0398]甲基-5- {[ (4-氟-2-甲基苯基)磺酰基](异烟酰基)氨基} -2-甲基_1_苯并呋喃-3-甲酸酯；
[0399]1-(4-氯苄基)-N-(吡啶-3-基甲基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶_4_胺；
[0400]2-{[5-(4-氯苯基)-4-(3-甲基苯基)-4H-1，2，4_ 三唑 _3_ 基]硫代}_N-(3_ 甲氧基苯基)乙酰胺；
[0401 ]N-苯基-3- [ (4-苯基-1，3-噻唑_2_基)硫代]丙酰胺；
[0402]乙基-[3_(1，3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸酯；
[0403]2-甲基-3-[(4-甲基哌啶-1-基)羰基]萘并[2，3-b]呋喃_4，9_ 二酮；
[0404]N- (3-苯丙基)-10H-吩噻嗪-10-甲酰胺；
[0405]5- (4-氯苯基)-2-吡咯烷-1-基-6H-1，3，4_ 噻二嗪；
[0406]7-(4-氟苯基)-1-(2-呋喃基甲基)-5,5-双(三氟甲基)_5，8_ 二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2，4 (1H, 3H) - 二酮；
[0407]3-{[(2-溴-4-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
[0408]3-{[4-(羟甲基)-2-甲氧基苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0409]5-苯基[1,2, 5]噁二唑并[3，4-b]吡嗪；
[0410]2，3，9-三甲氧基_6a，12a-二氢苯并吡喃并[3, 4-b]苯并吡喃-12 (6H)-酮；
[0411]4-[(4_氯苄基)氧基]-3-甲氧基-N_(2-甲基_5_[1，3]噁唑并[4，5_b]吡啶-2-基苯基)苯甲酰胺；
[0412]3-(1, 3-苯并噻唑-2-基硫代)丙酸；
[0413]3-{[(4-乙氧基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
[0414]N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-[(2，5-二甲氧基苯基)磺酰基]哌啶_4_甲酰胺；
[0415]N-[3，5-双(三氟甲基)苯基]-2-[(5-硝基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]乙酰胺；
[0416]5- [4- (4-叔丁基苯甲酰基)哌嗪-1-基]-2-硝基-N-(吡啶_3_基甲基)苯胺；
[0417]3-{[2_氯-4-(羟甲基)苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0418]{[(2-氯苯基)氨基][(3-氟苄基)硫代]亚甲基}丙二腈；
[0419]{[(4-溴苯基)氨基][(4-氟苄基)硫代]亚甲基}丙二腈；以及
[0420]l-[(lS，3R，5R，7S)-3_(3，4-二甲基苯基)金刚烷-1-基]甲胺；
[0421]以上化合物的药学上可接受的盐；以及，
[0422]以上化合物的任意组合。
[0423]4.如段2所述的方法，其中，所述治疗剂选自于由下列治疗剂所组成的组:
[0424](3，5- 二叔丁基-4-羟基苯亚甲基)丙二腈；
[0425]2-氨基-N-{5-[6-( 二甲基氨基)-9H_嘌呤-9-基]-4-羟基-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基} -3- (4-甲氧基苯基)丙酰胺；
[0426]I, 3，6-三羟基-7-甲氧基_2，8_双(3-甲基丁 _2_烯_1_基)_9H_氧杂蒽_9_酮；
[0427](3S，3aR，4R，6S，6aR，7S，8R，9bR)-6-乙酰氧基 _4_( 丁酰氧基)-3，3a-二羟基-3，6，9-三甲基-8-{[ (2Z)-2-甲基丁 _2_烯酰]氧基}_2_氧代-2，3，3a, 4，5，6，6a, 7，8，9b-十氢奥并[4，5_b]呋喃-7-基己酸酯；
[0428](IE, 5S) -6，6，6_ 三氟 ~5~ 羟基-1, 5_ 二苯基己-1-烯 _3_ 酮；
[0429]2-(4-甲氧基苯基)-1,3-苯并噻唑；
[0430]乙基-4-氨基-2-{[(IE)-3-(4-甲基苯基)-3-氧代丙-1-烯-1-基]硫代}嘧啶-5-甲酸酯；
[0431]3-[(5-氯-1，3-苯并噻唑-2_基)硫代]_5，5_ 二甲基环己_2_烯_1_酮；
[0432](2E) -3-[(5-甲基-1H-苯并咪唑_2_基)硫代]_1_苯基丙_2_烯_1_酮；
[0433]11, 12- _-羟基-3-异丁基-4，5, 8- 二甲基-3，3a, 4, 6a, 9, 10, 11, 12-八氢-1H-环十一烷并[d]异吲哚-1，15 (2H) - 二酮；
[0434]3-(羟甲基)-6_异丙基-5_[(2-甲基丁 _2_烯酰基)氧基]_2_氧代环己-3-烯-1-基4-羟基-2-甲基丁 -2-烯酸酯；
[0435]I, 11，12-三羟基-2，16-二氧代-11，20-环氧苦味_3_烯-15-基_2_羟基_2_甲
基丁酸酯；
[0436]1-[3，5_双(二氣甲基)苯基]_3_ [3_氣_4_ (异丙基横酸基)_2_喔吩基]服；
[0437]以上化合物的药学上可接受的盐；以及，
[0438]以上化合物的任意组合。
[0439]5.如段2所述的方法，其中，所述治疗剂选自于由下列治疗剂所组成的组:
[0440]1，3，6-三羟基-7-甲氧基-2，8-双(3-甲基丁 _2_烯_1_基)_9H_氧杂蒽_9_酮；
[0441](1E，5S)-6，6，6-三氟-5-羟基-1,5-二苯基己-1-烯-3-酮；
[0442]3-(羟甲基)-6_异丙基-5_[(2-甲基丁 _2_烯酰基)氧基]_2_氧代环己-3-烯-1-基4-羟基-2-甲基丁 -2-烯酸酯；
[0443]以上化合物的药学上可接受的盐；以及，
[0444]以上化合物的任意组合。
[0445]6.如段1-4中任一项所述的方法，其中，所述药物组合物包含其它治疗剂。
[0446]7.如段I所述的方法，其中，所述药物组合物包含0.001%-99%的抑制MITF的表达或活化的所述治疗剂。
[0447]8.如段I所述的方法，其中，所述药物组合物被配制为局部制剂。
[0448]9.如段I所述的方法，其中，所述药物组合物被配制为肠胃外制剂。
[0449]10.如段I所述的方法，其中，所述药物组合物被配制为口服制剂。
[0450]11.如段I所述的方法，其中，每天给予一次所述药物组合物。
[0451]12.一种药物组合物，所述药物组合物包含:
[0452]l-[(lS，3R，5R，7S)-3_(3，4-二甲基苯基)金刚烷-1-基]甲胺；
[0453]5-氯_7-[ (2-氯-6-氟苯基)(吡啶_2_基氨基)甲基]喹啉_8_醇；
[0454](1S，2R，3S，6S)-1-苯甲酰基-6-叔丁基螺[2.5]辛烷 _1，2_ 二甲腈；
[0455]N-[(4-氯苯基)(2-羟基-1-萘基)甲基]_3_甲氧基苯甲酰胺；
[0456]乙基-1-苄基-5-[3-(叔丁基氨基)-2-羟基丙氧基]-2-甲基_1Η_吲哚_3_甲酸酯；
[0457]5-氯-7-[(2，5- 二甲基苯基)(吡啶_2_基氨基)甲基]喹啉_8_醇；
[0458]N-[5-(2，3-二氢-1，4-苯并二氧杂芑-6-基)-2_甲基_3_呋喃甲酰基]甘氨酸；[0459][3-(1, 3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸；
[0460]N- (2-氟苯基)-2- {[5- (3_甲基苯基)_1，3，4_噁二唑_2_基]硫代}乙酰胺；
[0461]N-[4-(6-甲基-1，3-苯并噻唑 _2_ 基)苯基]-2_[(5_ 甲基 _1，3,4-噻二唑-2-基)硫代]乙酰胺；
[0462]2- (2-溴-4-叔丁基苯氧基)-N- (2-甲氧基_5_硝基苯基)乙酰胺；
[0463]甲基-5- {[ (4-氟-2-甲基苯基)磺酰基](异烟酰基)氨基} -2-甲基_1_苯并呋喃-3-甲酸酯；
[0464]1-(4-氯苄基)-N-(吡啶-3-基甲基)-1H-吡唑并[3，4_d]嘧啶_4_胺；
[0465]2-{[5-(4-氯苯基)-4_ (3-甲基苯基)-4H-1，2，4_ 三唑 _3_ 基]硫代}_N-(3_ 甲氧基苯基)乙酰胺；
[0466]N-苯基-3- [ (4-苯基-1，3_噻唑_2_基)硫代]丙酰胺；
[0467]乙基-[3_(1，3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸酯；
[0468]2-甲基-3-[(4-甲基哌啶-1-基)羰基]萘并[2，3_b]呋喃_4，9_ 二酮；
[0469]N- (3-苯丙基)-10H-吩噻嗪_10_甲酰胺；
[0470]5- (4-氯苯基)-2-吡咯烷-1-基-6H-1，3，4_ 噻二嗪；
[0471]7-(4-氟苯基)-1-(2-呋喃基甲基)-5,5-双(三氟甲基)_5，8_ 二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2，4 (1H, 3H) - 二酮；
[0472]3-{[(2-溴-4-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
[0473]3-{[4-(羟甲基)-2-甲氧基苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0474]5-苯基[1,2, 5]噁二唑并[3，4_b]吡嗪；
[0475]2，3，9-三甲氧基_6a，12a-二氢苯并吡喃并[3，4_b]苯并吡喃-12 (6H)-酮；
[0476]4-[(4-氯苄基)氧基]-3-甲氧基-N-(2-甲基_5_[1，3]噁唑并[4，5_b]吡啶-2-基苯基)苯甲酰胺；
[0477]3-(1, 3-苯并噻唑-2-基硫代)丙酸；
[0478]3-{[(4-乙氧基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
[0479]N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-[(2，5-二甲氧基苯基)磺酰基]哌啶_4_甲酰胺；
[0480]N-[3，5-双(三氟甲基)苯基]-2-[(5-硝基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]乙酰胺；
[0481 ]5- [4- (4-叔丁基苯甲酰基)哌嗪-1-基]-2-硝基-N-(吡啶_3_基甲基)苯胺；
[0482]3-{[2-氯-4-(羟甲基)苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0483]{[ (2-氯苯基)氨基][(3-氟苄基)硫代]亚甲基}丙二腈；
[0484]{[ (4-溴苯基)氨基][(4-氟苄基)硫代]亚甲基}丙二腈；以及
[0485]l-[(lS，3R，5R，7S)-3_(3，4-二甲基苯基)金刚烷-1-基]甲胺；
[0486] (3，5- 二叔丁基-4-羟基苯亚甲基)丙二腈；
[0487]2-氨基-N-{5-[6-( 二甲基氨基)-9H_嘌呤-9-基]-4-羟基-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基} -3- (4-甲氧基苯基)丙酰胺；
[0488]I, 3，6-三羟基-7-甲氧基_2，8_双(3-甲基丁 _2_烯-1-基)_9H_氧杂蒽_9_酮；
[0489](3S，3aR，4R，6S，6aR，7S，8R，9bR)-6-乙酰氧基 _4_( 丁酰氧基)-3，3a- 二羟基-3，6，9-三甲基-8-{[(2Z)_2-甲基丁 _2_烯酰]氧基}_2_氧代-2，3，3a, 4，5，6，6a, 7，8，9b-十氢奥并[4，5_b]呋喃-7-基己酸酯；
[0490](IE, 5S) -6，6，6_ 三氟 ~5~ 羟基-1, 5_ 二苯基己-1-烯 _3_ 酮；
[0491]2-(4-甲氧基苯基)-1,3-苯并噻唑；
[0492]乙基-4-氨基-2-{[(IE)-3-(4-甲基苯基)-3-氧代丙-1-烯-1-基]硫代}嘧啶-5-甲酸酯；
[0493]3-[(5-氯-1，3-苯并噻唑-2_基)硫代]_5，5_ 二甲基环己_2_烯_1_酮；
[0494](2E) -3-[(5-甲基-1H-苯并咪唑_2_基)硫代]-1-苯基丙_2_烯-1-酮；
[0495]11，12-二羟基-3-异丁基-4，5，8_ 三甲基 _3，3a, 4，6a, 9，10，11，12-八氢 _1Η_ 环十一烷并[d]异吲哚-1，15 (2H) - 二酮；
[0496]3-(羟甲基)-6_异丙基-5_[(2-甲基丁 _2_烯酰基)氧基]_2_氧代环己-3-烯-1-基4-羟基- 2-甲基丁 -2-烯酸酯；
[0497]I, 11，12-三羟基-2，16-二氧代-11，20-环氧苦味_3_烯-15-基_2_羟基_2_甲
基丁酸酯；
[0498]1-[3，5_双(二氣甲基)苯基]_3_ [3_氣_4_ (异丙基横酸基)_2_喔吩基]服；
[0499]以上化合物的药学上可接受的盐；以及，
[0500]以上化合物的任意组合。
[0501]13.如段12所述的药物组合物，所述药物组合物包含:
[0502]l-[(lS，3R，5R，7S)-3_(3，4-二甲基苯基)金刚烷-1-基]甲胺；
[0503]5-氯_7-[ (2-氯-6-氟苯基)(吡啶_2_基氨基)甲基]喹啉_8_醇；
[0504](1S，2R，3S，6S)-1-苯甲酰基-6-叔丁基螺[2.5]辛烷 _1，2_ 二甲腈；
[0505]N-[(4-氯苯基)(2-羟基-1-萘基)甲基]-3-甲氧基苯甲酰胺；
[0506]乙基-1-苄基-5-[3-(叔丁基氨基)-2-羟基丙氧基]-2-甲基_1Η_吲哚_3_甲酸酯；
[0507]5-氯-7-[(2，5- 二甲基苯基)(吡啶_2_基氨基)甲基]喹啉_8_醇；
[0508]N-[5-(2，3-二氢-1，4-苯并二氧杂芑-6-基)-2_甲基_3_呋喃甲酰基]甘氨酸；
[0509][3-(1, 3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸；
[0510]N-(2-氟苯基)-2_ {[5-(3-甲基苯基)-1，3，4_噁二唑-2-基]硫代}乙酰胺；
[0511]N-[4-(6-甲基-1，3-苯并噻唑 _2_ 基)苯基]-2_[(5_ 甲基 _1，3,4-噻二唑-2-基)硫代]乙酰胺；
[0512]2-(2-溴-4-叔丁基苯氧基)-N-(2-甲氧基_5_硝基苯基)乙酰胺；
[0513]甲基-5- {[ (4-氟-2-甲基苯基)磺酰基](异烟酰基)氨基} -2-甲基_1_苯并呋喃-3-甲酸酯；
[0514]1-(4-氯苄基)-N_(吡啶-3-基甲基)-1Η-吡唑并[3，4_d]嘧啶_4_胺；
[0515]2-{[5-(4-氯苯基)-4-(3-甲基苯基)-4H-1，2，4_ 三唑 _3_ 基]硫代}_N-(3_ 甲氧基苯基)乙酰胺；
[0516]N-苯基-3- [ (4-苯基-1，3-噻唑_2_基)硫代]丙酰胺；
[0517]乙基-[3_(1，3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸酯；
[0518]2-甲基-3-[(4-甲基哌啶-1-基)羰基]萘并[2，3_b]呋喃_4，9_ 二酮；[0519]N-(3-苯丙基)-10H-吩噻嗪-10-甲酰胺；
[0520]5- (4-氯苯基)-2-吡咯烷-1-基-6H-1，3，4_ 噻二嗪；
[0521]7-(4-氟苯基)-1-(2-呋喃基甲基)-5,5-双(三氟甲基)_5，8_ 二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2，4 (1H, 3H) - 二酮；
[0522]3-{[(2-溴-4-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
[0523]3-{[4-(羟甲基)-2-甲氧基苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0524]5-苯基[1,2, 5]噁二唑并[3，4_b]吡嗪；
[0525]2，3，9-三甲氧基_6a，12a-二氢苯并吡喃并[3，4_b]苯并吡喃-12 (6H)-酮；
[0526]4-[(4-氯苄基)氧基]-3-甲氧基-N-(2-甲基_5_[1，3]噁唑并[4，5_b]吡啶-2-基苯基)苯甲酰胺；
[0527]3-(1, 3-苯并噻唑-2-基硫代)丙酸；
[0528]3-{[(4-乙氧基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
[0529]N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-[(2，5-二甲氧基苯基)磺酰基]哌啶_4_甲酰胺；
[0530]N-[3，5-双(三氟甲基)苯基]-2-[(5-硝基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]乙酰胺；
[0531 ]5- [4- (4-叔丁基苯甲酰基)哌嗪-1-基]-2-硝基-N-(吡啶_3_基甲基)苯胺；
[0532]3-{[2-氯-4-(羟甲基)苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0533]{[ (2-氯苯基)氨基][(3-氟苄基)硫代]亚甲基}丙二腈；
[0534]{[ (4-溴苯基)氨基][(4-氟苄基)硫代]亚甲基}丙二腈；以及
[0535]l-[(lS，3R，5R，7S)-3_(3，4-二甲基苯基)金刚烷-1-基]甲胺；
[0536]以上化合物的药学上可接受的盐；以及，
[0537]以上化合物的任意组合。
[0538]14.如段12所述的药物组合物，所述药物组合物包含:
[0539](3，5- 二叔丁基-4-羟基苯亚甲基)丙二腈；
[0540]2-氨基-N-{5-[6-( 二甲基氨基)-9H_嘌呤-9-基]-4-羟基-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基} -3- (4-甲氧基苯基)丙酰胺；
[0541]1，3，6-三羟基-7-甲氧基-2，8-双(3-甲基丁 _2_烯_1_基)_9H_氧杂蒽_9_酮；
[0542](3S，3aR，4R，6S，6aR，7S，8R，9bR)-6-乙酰氧基 _4_( 丁酰氧基)-3，3a-二羟基-3，6，9-三甲基-8-{[ (2Z)-2-甲基丁 _2_烯酰]氧基}_2_氧代-2，3，3a, 4，5，6，6a, 7，8，9b-十氢奥并[4，5_b]呋喃-7-基己酸酯；
[0543](IE, 5S) -6，6，6_ 三氟 _5_ 羟基-1, 5_ 二苯基己-1-烯 _3_ 酮；
[0544]2-(4-甲氧基苯基)_1，3-苯并噻唑；
[0545]乙基-4-氨基-2-{[(IE)-3-(4-甲基苯基)-3-氧代丙-1-烯-1-基]硫代}嘧啶-5-甲酸酯；
[0546]3-[(5-氯-1，3-苯并噻唑-2_基)硫代]_5，5_ 二甲基环己_2_烯_1_酮；
[0547](2E) -3-[(5-甲基_1Η_苯并咪唑_2_基)硫代]_1_苯基丙_2_烯_1_酮；
[0548]11, 12~ 二羟基 _3_ 异丁基 _4，5, 8— 二甲基 _3，3a, 4, 6a, 9, 10, 11, 12~ 八氣—IH-环十一烷并[d]异吲哚-1，15 (2H) - 二酮；[0549]3-(羟甲基)-6-异丙基-5_[(2-甲基丁 _2_烯酰基)氧基]_2_氧代环己-3-烯-1-基4-羟基-2-甲基丁 -2-烯酸酯；
[0550]I, 11，12-三羟基-2，16-二氧代-11，20-环氧苦味_3_烯-15-基_2_羟基-2-甲
基丁酸酯；
[0551]1-[3，5_双(二氟甲基)苯基]-3_[3_氯_4_(异丙基横酸基)-2_噻吩基]服；
[0552]以上化合物的药学上可接受的盐；以及，
[0553]以上化合物的任意组合。
[0554]15.如段12所述的药物组合物，所述药物组合物包含:
[0555]I, 3，6-三羟基-7-甲氧基_2，8_双(3-甲基丁 _2_烯_1_基)_9H_氧杂蒽_9_酮；
[0556](IE, 5S) -6，6，6_ 三氟 ~5~ 羟基-1, 5_ 二苯基己-1-烯 _3_ 酮；
[0557]3-(羟甲基)-6_异丙基-5_[(2-甲基丁 _2_烯酰基)氧基]_2_氧代环己-3-烯-1-基4-羟基-2-甲基丁 -2-烯酸酯；
[0558]以上化合物的药学上可接受的盐；以及，
[0559]以上化合物的任意组合。
[0560]16.如段12-15中任一项所述的药物组合物，其中，所述药物组合物进一步包含其它治疗剂。
[0561]17.一种用于调控皮肤色素沉着的化合物，所述化合物选自于:
[0562]l-[(lS，3R，5R，7S)-3_(3，4-二甲基苯基)金刚烷-1-基]甲胺；
[0563]5-氯_7-[ (2-氯-6-氟苯基)(吡啶_2_基氨基)甲基]喹啉_8_醇；
[0564](1S，2R，3S，6S)-1-苯甲酰基-6-叔丁基螺[2.5]辛烷 _1，2_ 二甲腈；
[0565]N-[(4-氯苯基)(2-羟基-1-萘基)甲基]_3_甲氧基苯甲酰胺；
[0566]乙基-1-苄基-5-[3-(叔丁基氨基)-2-羟基丙氧基]-2-甲基_1Η_吲哚_3_甲酸酯；
[0567]5-氯-7-[(2，5- 二甲基苯基)(吡啶_2_基氨基)甲基]喹啉_8_醇；
[0568]N-[5-(2，3-二氢-1，4-苯并二氧杂芑-6-基)-2_甲基_3_呋喃甲酰基]甘氨酸；
[0569][3-(1, 3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸；
[0570]N-(2-氟苯基)-2_ {[5-(3-甲基苯基)_1，3，4_噁二唑_2_基]硫代}乙酰胺；
[0571]N-[4-(6-甲基-1，3-苯并噻唑 _2_ 基)苯基]-2_[(5_ 甲基 _1，3,4-噻二唑-2-基)硫代]乙酰胺；
[0572]2- (2-溴-4-叔丁基苯氧基)-N- (2-甲氧基_5_硝基苯基)乙酰胺；
[0573]甲基-5- {[ (4-氟-2-甲基苯基)磺酰基](异烟酰基)氨基} -2-甲基_1_苯并呋喃-3-甲酸酯；
[0574]1-(4-氯苄基)-N-(吡啶-3-基甲基)-1H-吡唑并[3，4_d]嘧啶_4_胺；
[0575]2-{[5-(4-氯苯基)-4_ (3-甲基苯基)-4H-1，2，4_ 三唑 _3_ 基]硫代}_N-(3_ 甲氧基苯基)乙酰胺；
[0576]N-苯基-3- [ (4-苯基-1，3_噻唑_2_基)硫代]丙酰胺；
[0577]乙基-[3_(1，3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸酯；
[0578]2-甲基-3-[(4-甲基哌啶-1-基)羰基]萘并[2，3_b]呋喃_4，9_ 二酮；
[0579]N- (3-苯丙基)-10H-吩噻嗪_10_甲酰胺；[0580]5- (4-氯苯基)-2-吡咯烷-1-基-6H-1，3，4_ 噻二嗪；
[0581]7-(4-氟苯基)-1-(2-呋喃基甲基)-5,5-双(三氟甲基)_5，8_ 二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2，4 (1H, 3H) - 二酮；
[0582]3-{[(2-溴-4-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
[0583]3-{[4-(羟甲基)-2-甲氧基苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0584]5-苯基[1,2, 5]噁二唑并[3，4_b]吡嗪；
[0585]2，3，9-三甲氧基_6a，12a-二氢苯并吡喃并[3，4_b]苯并吡喃-12 (6H)-酮；
[0586]4-[(4-氯苄基)氧基]-3-甲氧基-N-(2-甲基_5_[1，3]噁唑并[4，5_b]吡啶-2-基苯基)苯甲酰胺；
[0587]3-(1, 3-苯并噻唑-2-基硫代)丙酸；
[0588]3-{[(4-乙氧基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
[0589]N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-[(2，5-二甲氧基苯基)磺酰基]哌啶_4_甲酰胺；
[0590]N-[3，5-双(三氟甲基)苯基]-2-[(5-硝基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]乙酰胺；
[0591 ] 5- [4- (4-叔丁基苯甲酰基)哌嗪-1-基]-2-硝基-N-(吡啶_3_基甲基)苯胺；
[0592]3-{[2-氯-4-(羟甲基)苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0593]{[ (2-氯苯基)氨基][(3-氟苄基)硫代]亚甲基}丙二腈；
[0594]{[ (4-溴苯基)氨基][(4-氟苄基)硫代]亚甲基}丙二腈；以及
[0595]l-[(lS，3R，5R，7S)-3_(3，4-二甲基苯基)金刚烷-1-基]甲胺；
[0596](3，5- 二叔丁基-4-羟基苯亚甲基)丙二腈；
[0597]2-氨基-N-{5-[6-( 二甲基氨基)-9H_嘌呤-9-基]-4-羟基-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基} -3- (4-甲氧基苯基)丙酰胺；
[0598]I, 3，6-三羟基-7-甲氧基_2，8_双(3-甲基丁 _2_烯_1_基)_9H_氧杂蒽_9_酮；
[0599](3S，3aR，4R，6S，6aR，7S，8R，9bR)-6-乙酰氧基 _4_( 丁酰氧基)-3，3a-二羟基-3，6，9-三甲基-8-{[ (2Z)-2-甲基丁 _2_烯酰]氧基}_2_氧代-2，3，3a, 4，5，6，6a, 7，8，9b-十氢奥并[4，5_b]呋喃-7-基己酸酯；
[0600](IE, 5S) -6，6，6_ 三氟 ~5~ 羟基-1, 5_ 二苯基己-1-烯 _3_ 酮；
[0601]2-(4-甲氧基苯基)_1，3-苯并噻唑；
[0602]乙基-4-氨基-2-{[(1E)-3-(4-甲基苯基)-3-氧代丙-1-烯-1-基]硫代}嘧啶-5-甲酸酯；
[0603]3-[(5-氯-1，3-苯并噻唑-2_基)硫代]_5，5_ 二甲基环己_2_烯_1_酮；
[0604](2E) -3-[(5-甲基-1H-苯并咪唑_2_基)硫代]_1_苯基丙_2_烯_1_酮；
[0605]11，12-二羟基-3-异丁基-4，5，8_ 三甲基 _3，3a, 4，6a, 9，10，11，12-八氢 _1Η_ 环十一烷并[d]异吲哚-1，15 (2H) - 二酮；
[0606]3-(羟甲基)-6_异丙基-5_[(2-甲基丁 _2_烯酰基)氧基]_2_氧代环己-3-烯-1-基4-羟基-2-甲基丁 -2-烯酸酯；
[0607]I, 11，12-三羟基-2，16-二氧代-11，20-环氧苦味_3_烯-15-基_2_羟基_2_甲
基丁酸酯；[0608]1-[3，5_双(二氣甲基)苯基]_3_ [3_氣_4_ (异丙基横酸基)_2_喔吩基]服；
[0609]以上化合物的药学上可接受的盐；以及，
[0610]以上化合物的任意组合。
[0611]18.如段17所述的用于调控皮肤色素沉着的化合物，所述化合物选自于:
[0612]l-[(lS，3R，5R，7S)-3_(3，4-二甲基苯基)金刚烷-1-基]甲胺；
[0613]5-氯_7-[ (2-氯-6-氟苯基)(吡啶_2_基氨基)甲基]喹啉_8_醇；
[0614](1S，2R，3S，6S)-1-苯甲酰基-6-叔丁基螺[2.5]辛烷 _1，2_ 二甲腈；
[0615]N-[(4-氯苯基)(2-羟基-1-萘基)甲基]-3-甲氧基苯甲酰胺；
[0616]乙基-1-苄基-5-[3-(叔丁基氨基)-2-羟基丙氧基]-2-甲基_1Η_吲哚_3_甲酸酯；
[0617] 5-氯-7-[(2，5-二甲基苯基)(吡啶-2-基氨基)甲基]喹啉_8_醇；
[0618]N-[5-(2，3-二氢-1，4-苯并二氧杂芑-6-基)-2-甲基_3_呋喃甲酰基]甘氨酸；
[0619][3-(1，3_苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸；
[0620]N-(2-氟苯基)-2-{[5-(3-甲基苯基)_1，3，4_噁二唑_2_基]硫代}乙酰胺；
[0621]N-[4-(6-甲基-1，3-苯并噻唑 _2_ 基)苯基]-2_[(5_ 甲基 _1，3,4-噻二唑-2-基)硫代]乙酰胺；
[0622]2- (2-溴-4-叔丁基苯氧基)-N- (2-甲氧基_5_硝基苯基)乙酰胺；
[0623]甲基-5- {[ (4-氟-2-甲基苯基)磺酰基](异烟酰基)氨基} -2-甲基_1_苯并呋喃-3-甲酸酯；
[0624]1-(4-氯苄基)-N-(吡啶-3-基甲基)-1H-吡唑并[3，4_d]嘧啶_4_胺；
[0625]2-{[5-(4-氯苯基)-4_ (3-甲基苯基)-4H-1，2，4_ 三唑 _3_ 基]硫代}_N-(3_ 甲氧基苯基)乙酰胺；
[0626]N-苯基-3- [ (4-苯基-1，3_噻唑_2_基)硫代]丙酰胺；
[0627]乙基-[3_(1，3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸酯；
[0628]2-甲基-3-[(4-甲基哌啶-1-基)羰基]萘并[2，3_b]呋喃_4，9_ 二酮；
[0629]N- (3-苯丙基)-10H-吩噻嗪-10-甲酰胺；
[0630]5- (4-氯苯基)-2-吡咯烷-1-基-6H-1，3，4_ 噻二嗪；
[0631]7-(4-氟苯基)-1-(2-呋喃基甲基)-5,5-双(三氟甲基)_5，8_ 二氢嘧啶并[4，5-d]嘧啶-2，4 (1H, 3H) - 二酮；
[0632]3-{[(2-溴-4-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
[0633]3-{[4-(羟甲基)-2-甲氧基苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0634]5-苯基[1,2, 5]噁二唑并[3，4_b]吡嗪；
[0635]2，3，9-三甲氧基_6a，12a-二氢苯并吡喃并[3，4_b]苯并吡喃-12 (6H)-酮；
[0636]4-[(4-氯苄基)氧基]-3-甲氧基-N-(2-甲基_5_[1，3]噁唑并[4，5_b]吡啶-2-基苯基)苯甲酰胺；
[0637]3-(1, 3-苯并噻唑-2-基硫代)丙酸；
[0638]3-{[(4-乙氧基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；
[0639]N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-[(2，5-二甲氧基苯基)磺酰基]哌啶_4_甲酰胺；[0640]N-[3，5-双(三氟甲基)苯基]-2-[(5-硝基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]乙酰胺；
[0641] 5- [4- (4-叔丁基苯甲酰基)哌嗪-1-基]-2-硝基-N-(吡啶_3_基甲基)苯胺；
[0642]3-{[2-氯-4-(羟甲基)苯氧基]甲基}苯甲酸；
[0643]{[ (2-氯苯基)氨基][(3-氟苄基)硫代]亚甲基}丙二腈；
[0644]{[ (4-溴苯基)氨基][(4-氟苄基)硫代]亚甲基}丙二腈；以及
[0645]l-[(lS，3R，5R，7S)-3_(3，4-二甲基苯基)金刚烷-1-基]甲胺；
[0646]以上化合物的药学上可接受的盐；以及，
[0647]以上化合物的任意组合。
[0648]19.如段17所述的用于调控皮肤色素沉着的化合物，所述化合物选自于:
[0649](3，5- 二叔丁基-4-羟基苯亚甲基)丙二腈；
[0650]2-氨基-N-{5-[6-( 二甲基氨基)-9H_嘌呤-9-基]-4-羟基-2-(羟甲基)四氢呋喃-3-基} -3- (4-甲氧基苯基)丙酰胺；
[0651]1，3，6-三羟基-7-甲氧基-2，8-双(3-甲基丁 _2_烯_1_基)_9H_氧杂蒽_9_酮；
[0652](3S，3aR，4R，6S，6aR，7S，8R，9bR)-6-乙酰氧基 _4_( 丁酰氧基)-3，3a-二羟基-3，6，9-三甲基-8-{[ (2Z)-2-甲基丁 _2_烯酰]氧基}_2_氧代-2，3，3a, 4，5，6，6a, 7，8，9b-十氢奥并[4，5_b]呋喃-7-基己酸酯；
[0653](IE, 5S) -6，6，6_ 三氟 _5_ 羟基-1, 5_ 二苯基己-1-烯 _3_ 酮；
[0654]2-(4-甲氧基苯基)_1，3-苯并噻唑；
[0655]乙基-4-氨基-2-{[(IE)-3-(4-甲基苯基)-3-氧代丙-1-烯-1-基]硫代}嘧啶-5-甲酸酯；
[0656]3-[(5-氯-1，3-苯并噻唑-2_基)硫代]_5，5_ 二甲基环己_2_烯_1_酮；
[0657](2E) -3-[(5-甲基_1Η_苯并咪唑_2_基)硫代]_1_苯基丙_2_烯_1_酮；
[0658]11, 12~ _-羟基—3—异丁基—4, 5, 8— 二甲基—3, 3a, 4, 6a, 9, 10, 11, 12~ 八氣—IH-环十一烷并[d]异吲哚-1，15 (2H) - 二酮；
[0659]3-(羟甲基)-6_异丙基-5_[(2-甲基丁 _2_烯酰基)氧基]_2_氧代环己-3-烯-1-基4-羟基-2-甲基丁 -2-烯酸酯；
[0660]I, 11，12-三羟基-2，16-二氧代-11，20-环氧苦味_3_烯-15-基_2_羟基_2_甲
基丁酸酯；
[0661]1-[3，5_双(二氟甲基)苯基]-3_[3_氯_4_(异丙基横酸基)-2_噻吩基]服；
[0662]以上化合物的药学上可接受的盐；以及，
[0663]以上化合物的任意组合。
[0664]20.如段17所述的用于调控皮肤色素沉着的化合物，所述化合物选自于:
[0665]I, 3，6-三羟基-7-甲氧基_2，8_双(3-甲基丁 _2_烯_1_基)_9H_氧杂蒽_9_酮；
[0666](IE, 5S) -6，6，6_ 三氟 ~5~ 羟基-1, 5_ 二苯基己-1-烯 _3_ 酮；
[0667]3-(羟甲基)-6_异丙基-5_[(2-甲基丁 _2_烯酰基)氧基]_2_氧代环己-3-烯-1-基4-羟基-2-甲基丁 -2-烯酸酯；
[0668]以上化合物的药学上可接受的盐；以及，
[0669]以上化合物的任意组合。[0670]21.一种用于识别调节小眼转录因子(MITF)的表达或活性的化合物的分析方法，所述方法包括:
[0671](iii)使细胞与测试化合物相接触，其中，所述细胞包含报告基因，所述报告基因可操作地连接至MITF的直接转录靶标的启动子，并且其中，所述细胞能够产生MITF ;以及
[0672](iv)在与所述测试化合物孵育后，确定所述报告基因的表达量，
[0673]其中，与对照或参照相比，所述报告基因表达的变化表明所述化合物调节MITF的表达或活性。
[0674]22.如段21所述的分析方法，其中，与对照或参照相比，所述测试化合物抑制MITF的表达或活性。
[0675]23.如段21或22所述的分析方法，其中，所述启动子是TRPMl基因的启动子。
[0676]24.如段21-23中任一项所述的分析方法，其中，所述报告基因是萤光素酶基因。
[0677]25.如段21-24中任一项所述的分析方法，其中，所述细胞内源性产生MITF。
[0678]26.如段21-25中任一项所述的分析方法，其中，所述细胞是黑色素细胞或来自于黑色素瘤细胞系。
[0679]27.如段21-26中任一项所述的分析方法，其中，在0.01nM至约IOmM的终浓度下对所述测试化合物进行孵育。
[0680]28.如段21-27中任一项所述的分析方法，其中，在2个以上不同浓度下对所述测试化合物进行测试。
[0681]29.如段28所述的分析方法，其中，在10倍-10，000倍范围内的2个以上不同浓度下对所述测试化合物进行测试。
[0682]30.如段21-29中任一项所述的分析方法，其中，所述测试化合物选自于由下列化合物所组成的组:有机小分子或无机小分子；糖；寡糖；多糖；生物大分子，例如肽、蛋白质、以及肽类似物和衍生物；模拟肽；核酸、核酸类似物和衍生物，包括但不限于siRNA、shRNA、反义RNA、核酶和适配子；由生物材料制得的提取物，所述生物材料如细菌、植物、真菌或动物细胞、动物组织；天然存在的组合物或合成的组合物；以及以上化合物的任意组合。
[0683]31.如段21-30中任一项所述的分析方法，其中，所选出的化合物的1gP值小于7。
[0684]32.如段21-31中任一项所述的分析方法，其中，所选出的化合物表现出对MITF的表达或活性进行剂量依赖性的调节。
[0685]33.如段21-32中任一项所述的分析方法，其中，所述分析方法为高通量筛选(HTS)分析方法。
[0686]34.由段21-33中任一项所述的分析方法所选出的化合物。
[0687]实施例
[0688] 为了成功实施MITF拮抗剂的筛选，发明人采用TRPMl-萤光素酶报告子。发明人观察到，TRPMl基因含有多个MITF结合位点，并表现出响应于MITF转录活化的极稳健的上调。因此，稳定整合入黑色素瘤细胞的TRPMl-萤光素酶报告子可有效地用于所述筛选分析方法。尽管黑色素瘤细胞的使用与原代人黑色素细胞相比并不完美相关，然而其为筛选提供了速度和重现性方面的优势。另外，大部分的人黑色素瘤细胞系表现出cAMP信号的基线(baseline)，该基线不依赖于外源提供的黑色素细胞刺激素或cAMP激动剂，由此对该分析系统的一致性做出了进一步贡献。
[0689]为了设计广泛阻抑MITF的活性(通过阻抑MITF的表达，或通过抑制MITF的活性)的筛选，发明人采用了含有MITF的强直接转录靶标(即TRPMl基因)的启动子的萤光素酶报告子，发明人识别出对小眼转录因子(MITF)的表达或活化具有抑制能力的活性成分，以提供药用或美学益处。之前，发明人已将TRPMl基因(也称为“Melastatin”)识别为MITF的直接靶标，TRPMl基因含有多个MITF结合位点，并以强有力的方式直接响应于MITF过表达(Miller AJ, Du J, Rowan S, Hershey CL, Widlund HR, Fisher DE:Transcriptionalregulation of the melanoma prognostic marker melastatin(TRPMl)by MITF inmelanocytes and melanoma, Cancer Res2004,64:509-516)。TRPMl 表达还与人黑色素瘤细胞系中以及临床中的色素沉着病变(痣和黑色素瘤)中的MITF表达密切相关。
[0690]将TRPMl启动子与萤光素酶基因连接，并插入逆转录病毒载体和慢病毒载体中。使用慢病毒载体感染原代人黑色素细胞，随后使用BroadChemical Genetics核心筛选设备(core screening facility)及其天然产物/提取物文库对所述细胞进行初筛。作为备选，将逆转录病毒载体稳定整合入黑色素瘤细胞得基因组，这可用于进行同一小分子筛选。使用毛喉素(forskolin)和MSH作为阳性对照小分子(其上调cAMP和MITF表达(D’OrazioJA, Nobuhisa T, Cui R, Arya M, Spry M, Wakamatsu K, Igras V, Kunisada T, Granter SR,Nishimura EK,Ito S, Fisher DE:Topical drug rescue strategy and skin protectionbased on the role of Mclr in UV-1nduced tanning, Nature2006,443:340-344))进行筛选优化。阻抑MSH诱导的TRPMl-萤光素酶而不改变细胞数目或生存力的小分子代表本次筛选的初步“命中物”。阴性对照在相同细胞内包含组成型萤光素酶载体(例如由组成型启动子(如胸苷激酶启动子)驱动)，从而对本底转录机制的非特异性抑制剂进行控制，其将在对候选命中物的二次/三次分析中进行具体评价。
[0691]筛选设计
[0692]由于Skmel5有利的生长性质以及Skmel5表达典型水平的MITF蛋白这一发明人的已有经验，采用人黑色素瘤细胞系Skmel5。此外，发明人的已有经验表明，MITF水平与MITF的多个色素沉着目标基因的表达相关，这强烈表明通过MITF对色素沉着通路的转录控制在该细胞系中保持完好。因此，生成了整合的TRPMl-萤光素酶报告子，随后(连续)两次克隆细胞以保证报告子细胞群的纯度。在药物选择中维持细胞，以保证萤光素酶报告子的维持(当去除药物时，观测到萤光素酶信号最终丧失)。再次克隆后，如小分子筛选所要求的，选择明显的隔离群(isolates)以基于在384孔板上的克隆源性(clonogenic)生长作进一步使用。阻抑TRPMl-萤光素酶信号的阳性对照采用了:编码针对MITF的shRNA的慢病毒载体。这一载体产生可重现的MITF mRNA水平的下调，以及萤光素酶测定中的相应(>90%)降低。对接种效率的每日变化进行分析，在选出用于在筛选中进一步使用的系中发现非常强的重现性。
[0693]以来自Broad Institute的文库进行筛选，该文库包含了天然产物、已知的生物活性剂以及其它化合物的混合(总量约13，000种化合物)。表1中总结了最初阶段的数据采集和分析。如所指出的，用TRPMl-萤光素酶活性的阻抑定义“命中物”，所述命中物包含了约I %的筛选分子(约130种化合物)。进行了其它分析/验证步骤，以进一步评估在该筛选中阻抑报告子的候选命中物的可重现性、剂量依赖性以及效果的效能/量级(potency/magnitude of the effects)。
[0694]分析的第一步是对可重现性进行直接测试。值得继续进行分析的化合物需要在重复的筛选中有相似表现。其次，采用了 Broad Institute的ChemBank分析工具。ChemBank是小分子筛选结果的数据库，只要在Broad Institute中进行，就不考虑筛选的具体性质。在该数据集中检查候选命中物行为的价值在于，其将有助于发明人快速确定该命中物是否对于该筛选是独特的，或所述命中物是否还在其它无关的筛选中“得分”。从ChemBank数据集内包含的数百个筛选中，仅当候选命中物在3个以下的列于ChemBank上的其它筛选(共几百个筛选，该数字还在持续增长)中得分时，发明人才选择保留候选命中物。第三项验证标准为在剂量滴定分析中的行为。
[0695]仅当其表现出剂量依赖性地阻抑TRPMl-萤光素酶信号时，候选命中物才是可接受的。尽管各命中物之中的剂量响应的形状可以变化，然而发明人仍选择囊括全部可产生剂量依赖性效果的候选物。确定的第四项标准为IC50(以qAC50的形式描述)，其表示半最大阻抑剂量(half-maximal suppression dose)。在该标准中，大部分候选命中物位于高纳摩尔至低微摩尔的范围(全部这些验证数据均在表1中列出)。第五项标准为(任何剂量下的)最大阻抑，该标准表示不考虑实现阻抑所需的剂量而能够达到的阻抑的量级(magnitude)。由于一些高效力的抑制剂(基于IC50)仅能实现弱的最大阻抑，而其它低效力的抑制剂(基于IC50)即使在低于其IC50的剂量也能够产生明显更高的阻抑，因此该标准是有价值的。第六项待确定的标准为LogP分配系数，该系数是对亲脂性的预期。为此，发明人使用Ghose和Crippen的方法计算预期的辛醇-水分配系数(partitioncoefficient) (J.Comp.Chem.9,80(1988))。虽然这仅为对皮肤渗透潜能的评估,但由于该分析在理论上有助于对可能的局部有效性进行优化，因而仍实施该分析。第七项标准为采用突光生存力探针(CellTiter-Fluo?Cell Viability Assay(Promega))进行的毒性分析。由于端点(endpoint)表示药物处理组与对照组的差别(variation)除以标准误的综合(composite)这一事实，因此对该端点的解释较为复杂。示于表1中的结果指出了满足上述概括的全部标准的34个候选分子。具体而言，这些化合物可重现地表现出对TRPMl-萤光素酶的阻抑，并表现出剂量响应行为。这些化合物的效力(potencies)大部分略低于或略高于ΙμΜ。尽管其亲脂性得分对皮肤渗透能力的预测仍有缺憾。然而，该数字>3时更可能渗透。从表1中的数据可以看出，大量命中物符合该标准。
[0696]表1
[0697]
【权利要求】
1.一种调控皮肤色素沉着的方法，所述方法包括:向有需要的受试者给予药物组合物，所述药物组合物包含抑制小眼转录因子(MITF)的表达或活化的治疗剂。
2.如权利要求1所述的方法，其中，所述治疗剂选自于由下列治疗剂所组成的组: 1-[(lS，3R，5R，7S)-3-(3，4-二甲基苯基)金刚烷_1_ 基]甲胺； 5-氯_7-[ (2-氯-6-氟苯基)(吡啶-2-基氨基)甲基]喹啉-8-醇； (IS, 2R, 3S, 6S)-1-苯甲酰基-6-叔丁基螺[2.5]辛烷-1，2- 二甲腈； N- [ (4-氯苯基)(2-羟基-1-萘基)甲基]-3-甲氧基苯甲酰胺； 乙基-1-苄基-5- [3-(叔丁基氨基)-2-羟基丙氧基]-2-甲基-1H-吲哚-3-甲酸酯； 5-氯-7-[(2，5- 二甲基苯基)(吡啶-2-基氨基)甲基]喹啉-8-醇； N-[5-(2，3-二氢-1，4-苯并二氧杂芑-6-基)-2-甲基_3_呋喃甲酰基]甘氨酸； [3-(1, 3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸； N-(2-氟苯基)-2-{[5-(3-甲基苯基)-1，3，4-噁二唑-2-基]硫代}乙酰胺； N-[4-(6-甲基-1,3-苯并噻唑-2-基)苯基]-2-[(5-甲基-1，3，4-噻二唑-2-基)硫代]乙酰胺； 2-(2-溴-4-叔丁基苯氧基)-N- (2-甲氧基-5-硝基苯基)乙酰胺； 甲基-5-{[(4-氟-2-甲基苯基)磺酰基](异烟酰基)氨基}-2_甲基-1-苯并呋喃-3-甲酸酯； 1-(4-氯苄基)-N-(吡啶-3-基甲基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺； 2-{[5-(4-氯苯基)-4-(3-甲基苯基)-4Η-1，2，4-三唑-3-基]硫代}_N-(3_甲氧基苯基)乙酰胺； N-苯基-3-[ (4-苯基-1，3-噻唑-2-基)硫代]丙酰胺； 乙基-[3-(1,3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸酯； 2-甲基-3-[(4-甲基哌啶-1-基)羰基]萘并[2，3-b]呋喃-4，9-二酮； N-(3-苯丙基)-1OH-吩噻嗪-10-甲酰胺； 5- (4-氯苯基)-2-吡咯烷-1-基-6H-1, 3，4-噻二嗪； 7-(4-氟苯基)-1-(2-呋喃基甲基)-5，5-双(三氟甲基)_5，8-二氢嘧啶并[4，5_d]嘧啶-2，4(1H，3H)-二酮； 3-{[(2-溴-4-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸； 3-{[4-(羟甲基)-2-甲氧基苯氧基]甲基}苯甲酸； 5-苯基[I, 2，5]噁二唑并[3，4-b]吡嗪； 2，3，9-三甲氧基-6a，12a-二氢苯并吡喃并[3，4_b]苯并吡喃-12 (6H)-酮； 4-[(4-氯苄基)氧基]-3-甲氧基-N-(2-甲基-5-[1，3]噁唑并[4，5_b]吡啶_2_基苯基)苯甲酰胺； 3-(1, 3-苯并噻唑-2-基硫代)丙酸； 3- {[ (4-乙氧基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸； N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-[(2，5-二甲氧基苯基)磺酰基]哌啶-4-甲酰胺； N-[3，5-双(三氟甲基)苯基]-2-[(5-硝基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]乙酰胺； 5-[4-(4-叔丁基苯 甲酰基)哌嗪-1-基]-2-硝基-N-(吡啶-3-基甲基)苯胺； 3-{[2_氯-4-(羟甲基)苯氧基]甲基}苯甲酸；{[(2-氯苯基)氨基][(3-氟苄基)硫代]亚甲基}丙二腈； {[(4-溴苯基)氨基][(4-氟苄基)硫代]亚甲基}丙二腈；以及 . 1-[(lS，3R，5R，7S)-3-(3，4-二甲基苯基)金刚烷_1_ 基]甲胺； (3，5-二叔丁基-4-羟基苯亚甲基)丙二臆； 2-氨基-N-{5-[6- ( 二甲基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-4-羟基_2_ (羟甲基)四氢呋喃-3-基} -3- (4-甲氧基苯基)丙酰胺； . 1,3，6-三羟基-7-甲氧基-2，8-双(3-甲基丁 -2-烯-1-基)-9H-氧杂蒽-9-酮； (3S，3aR，4R，6S，6aR，7S，8R，9bR)-6-乙酰氧基 _4_( 丁酰氧基)_3，3a_ 二羟基-3，6，9-三甲基-8-{[(2Z)-2-甲基丁 -2-烯酰]氧基}_2_氧代-2，3，3a, 4，5，6，6a, 7，8，9b-十氢奥并[4，5_b]呋喃-7-基己酸酯； (IE, 5S) -6，6，6-三氟-5-羟基-1, 5- 二苯基己-1-烯 _3_ 酮； .2-(4-甲氧基苯基)-1,3-苯并噻唑； 乙基-4-氨基-2- {[ (IE) -3- (4-甲基苯基)-3-氧代丙-1-烯_1_基]硫代}嘧啶_5_甲酸酯； .3-[(5-氯-1，3-苯并噻唑-2-基)硫代]-5，5- 二甲基环己-2-烯-1-酮； (2E) -3-[(5-甲基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]-1-苯基丙_2_烯-1-酮； .11,12- 二羟基-3-异丁基-4，5，8- 二甲基-3，3a, 4, 6a, 9, 10, 11, 12-八氧-1H-环十一烷并[d]异吲哚-1，15(2H)_ 二酮； . 3-(羟甲基)-6-异丙基-5- [ (2-甲基丁 -2-烯酰基)氧基]-2-氧代环己-3-烯-1-基.4-羟基-2-甲基丁 -2-烯酸酯； . 1,11，12-三羟基-2，16-二氧代-11,20-环氧苦味-3-烯-15-基-2-羟基-2-甲基丁酸酯； . 1-[3，5-双(二氟甲基)苯基]-3_[3_氯_4_(异丙基横酸基)-2_噻吩基]服； 以上化合物的药学上可接受的盐；以及， 以上化合物的任意组合。
3.如权利要求2所述的方法，其中，所述治疗剂选自于由下列治疗剂所组成的组: .1-[(lS，3R，5R，7S)-3-(3，4-二甲基苯基)金刚烷_1_ 基]甲胺；. . 5-氯_7-[ (2-氯-6-氟苯基)(吡啶-2-基氨基)甲基]喹啉-8-醇； (IS, 2R, 3S，6S)-1-苯甲酰基-6-叔丁基螺[2.5]辛烷_1，2-二甲腈； N- [ (4-氯苯基)(2-羟基-1-萘基)甲基]-3-甲氧基苯甲酰胺； 乙基-1-苄基-5- [3-(叔丁基氨基)-2-羟基丙氧基]-2-甲基-1H-吲哚-3-甲酸酯； .5-氯-7-[(2，5-二甲基苯基)(吡啶-2-基氨基)甲基]喹啉-8-醇； N-[5-(2，3-二氢-1，4-苯并二氧杂芑-6-基)-2-甲基_3_呋喃甲酰基]甘氨酸； [3-(1, 3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸； N-(2-氟苯基)-2-{[5-(3-甲基苯基)-1，3，4-噁二唑-2-基]硫代}乙酰胺； N-[4-(6-甲基-1,3-苯并噻唑-2-基)苯基]-2-[(5-甲基-1，3，4-噻二唑-2-基)硫代]乙酰胺； . 2-(2-溴-4-叔丁基苯氧基)-N- (2-甲氧基-5-硝基苯基)乙酰胺； 甲基-5-{[(4-氟-2-甲基苯基)磺酰基](异烟酰基)氨基}-2_甲基-1-苯并呋喃-3-甲酸酯； . 1-(4-氯苄基)-N-(吡啶-3-基甲基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺； . 2-{[5-(4-氯苯基)-4-(3-甲基苯基)-4Η-1，2，4-三唑-3-基]硫代}_N-(3_甲氧基苯基)乙酰胺； N-苯基-3-[ (4-苯基-1，3-噻唑-2-基)硫代]丙酰胺； 乙基-[3-(1,3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸酯； . 2-甲基-3-[(4-甲基哌啶-1-基)羰基]萘并[2，3-b]呋喃-4，9-二酮； N- (3-苯丙基)-1OH-吩噻嗪-10-甲酰胺； . 5- (4-氯苯基)-2-吡咯烷-1-基-6H-1, 3，4-噻二嗪； . 7-(4-氟苯基)-1-(2-呋喃基甲基)-5，5-双(三氟甲基)_5，8-二氢嘧啶并[4，5_d]嘧啶-2，4(1H，3H)-二酮； .3-{[(2-溴-4-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸； .3-{[4-(羟甲基)-2-甲氧基苯氧基]甲基}苯甲酸； . 5-苯基[I, 2，5]噁二唑并[3，4-b]吡嗪；. 2，3，9-三甲氧基-6a，12a-二氢苯并吡喃并[3，4_b]苯并吡喃-12 (6H)-酮； . 4-[(4-氯苄基)氧基]-3-甲氧基-N-(2-甲基-5-[1，3]噁唑并[4，5_b]吡啶_2_基苯基)苯甲酰胺；. 3-(1, 3-苯并噻唑-2-基硫代)丙酸；. . 3-{[ (4-乙氧基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸； N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-[(2，5-二甲氧基苯基)磺酰基]哌啶-4-甲酰胺； N-[3，5-双(三氟甲基)苯基]-2-[(5-硝基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]乙酰胺； . 5-[4- (4-叔丁基苯甲酰基)哌嗪-1-基]-2-硝基-N-(吡啶-3-基甲基)苯胺； . 3-{[2_氯-4-(羟甲基)苯氧基]甲基}苯甲酸； {[(2-氯苯基)氨基][(3-氟苄基)硫代]亚甲基}丙二腈； {[(4-溴苯基)氨基][(4-氟苄基)硫代]亚甲基}丙二腈；以及 1-[(lS，3R，5R，7S)-3-(3，4-二甲基苯基)金刚烷_1_ 基]甲胺； 以上化合物的药学上可接受的盐；以及， 以上化合物的任意组合。
4.如权利要求2所述的方法，其中，所述治疗剂选自于由下列治疗剂所组成的组: (3，5-二叔丁基-4-羟基苯亚甲基)丙二臆； . 2-氨基-N-{5-[6- ( 二甲基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-4-羟基_2_ (羟甲基)四氢呋喃-3-基} -3- (4-甲氧基苯基)丙酰胺； . 1,3，6-三羟基-7-甲氧基-2，8-双(3-甲基丁 -2-烯-1-基)-9H-氧杂蒽-9-酮；(3S，3aR，4R，6S，6aR，7S，8R，9bR)-6-乙酰氧基 _4_( 丁酰氧基)_3，3a_ 二羟基-3，6，9-三甲基-8-{[(2Z)-2-甲基丁 -2-烯酰]氧基}_2_氧代-2，3，3a, 4，5，6，6a, 7，8，9b-十氢奥并[4，5_b]呋喃-7-基己酸酯； (IE, 5S) -6，6，6-三氟-5-羟基-1, 5- 二苯基己-1-烯 _3_ 酮； .2-(4-甲氧基苯基)-1,3-苯并噻唑； 乙基-4-氨基-2- {[ (IE) -3- (4-甲基苯基)-3-氧代丙-1-烯_1_基]硫代}嘧啶_5_甲酸酯； .3-[(5-氯-1，3-苯并噻唑-2-基)硫代]-5，5- 二甲基环己-2-烯-1-酮； (2E) -3-[(5-甲基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]-1-苯基丙_2_烯-1-酮； .11,12- 二羟基-3-异丁基-4，5, 8- 二甲基-3，3a, 4, 6a, 9, 10, 11, 12-八氧-1H-环十一烷并[d]异吲哚-1，15(2H)_ 二酮； .3-(羟甲基)-6-异丙基-5- [ (2-甲基丁 -2-烯酰基)氧基]-2-氧代环己-3-烯-1-基.4-羟基-2-甲基丁 -2-烯酸酯； .1, 11，12-三羟基-2，16-二氧代-11,20-环氧苦味-3-烯-15-基-2-羟基-2-甲基丁酸酯； .1-[3，5-双(二氟甲基)苯基]-3_[3_氯_4_(异丙基横酸基)-2_噻吩基]服； 以上化合物的药学上可接受的盐；以及， 以上化合物的任意组合。
5.如权利要求2所述的方法，其中，所述治疗剂选自于由下列治疗剂所组成的组: .1, 3，6-三羟基-7-甲氧基-2，8-双(3-甲基丁 -2-烯-1-基)-9H-氧杂蒽-9-酮； (IE, 5S) -6，6，6-三氟-5-羟基-1, 5- 二苯基己-1-烯 _3_ 酮； .3-(羟甲基)-6-异丙基-5- [ (2-甲基丁 -2-烯酰基)氧基]-2-氧代环己-3-烯-1-基.4-羟基-2-甲基丁 -2-烯酸酯； 以上化合物的药学上可接受的盐；以及， 以上化合物的任意组合。
6.如权利要求1-4中任一项所述的方法，其中，所述药物组合物包含其它治疗剂。
7.如权利要求1所述的方法，其中，所述药物组合物包含0.001% -99%的抑制MITF的表达或活化的所述治疗剂。
8.如权利要求1所述的方法，其中，所述药物组合物被配制为局部制剂。
9.如权利要求1所述的方法，其中，所述药物组合物被配制为肠胃外制剂。
10.如权利要求1所述的方法，其中，所述药物组合物被配制为口服制剂。
11.如权利要求1所述的方法，其中，每天给予一次所述药物组合物。
12.一种药物组合物，所述药物组合物包含: .1-[(lS，3R，5R，7S)-3-(3，4-二甲基苯基)金刚烷_1_ 基]甲胺； .5-氯_7-[ (2-氯-6-氟苯基)(吡啶-2-基氨基)甲基]喹啉-8-醇； (IS, 2R, 3S，6S)-1-苯甲酰基-6-叔丁基螺[2.5]辛烷_1，2-二甲腈； N- [ (4-氯苯基)(2-羟基-1-萘基)甲基]-3-甲氧基苯甲酰胺； 乙基-1-苄基-5- [3-(叔丁基氨基)-2-羟基丙氧基]-2-甲基-1H-吲哚-3-甲酸酯； .5-氯-7-[(2，5-二甲基苯基)(吡啶-2-基氨基)甲基]喹啉-8-醇； N-[5-(2，3-二氢-1，4-苯并二氧杂芑-6-基)-2-甲基_3_呋喃甲酰基]甘氨酸； [3-(1, 3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸； N-(2-氟苯基)-2-{[5-(3-甲基苯基)-1，3，4-噁二唑-2-基]硫代}乙酰胺； N-[4-(6-甲基-1,3-苯并噻唑-2-基)苯基]-2-[(5-甲基-1，3，4-噻二唑-2-基)硫代]乙酰胺； . 2-(2-溴-4-叔丁基苯氧基)-N- (2-甲氧基-5-硝基苯基)乙酰胺；甲基-5-{[(4-氟-2-甲基苯基)磺酰基](异烟酰基)氨基}-2_甲基-1-苯并呋喃-3-甲酸酯； .1-(4-氯苄基)-N-(吡啶-3-基甲基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺； .2-{[5-(4-氯苯基)-4-(3-甲基苯基)-4Η-1，2，4-三唑-3-基]硫代}_N-(3_甲氧基苯基)乙酰胺； N-苯基-3-[ (4-苯基-1，3-噻唑-2-基)硫代]丙酰胺； 乙基_[3-(1，3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸酯； .2-甲基-3-[(4-甲基哌啶-1-基)羰基]萘并[2，3-b]呋喃-4，9-二酮； N-(3-苯丙基)-1OH-吩噻嗪-10-甲酰胺； .5- (4-氯苯基)-2-吡咯烷-1-基-6H-1, 3，4-噻二嗪； .7-(4-氟苯基)-1-(2-呋喃基甲基)-5，5-双(三氟甲基)_5，8-二氢嘧啶并[4，5_d]嘧啶-2，4(1H，3H)-二酮； .3-{[(2-溴-4-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸； .3-{[4-(羟甲基)-2-甲氧基苯氧基]甲基}苯甲酸； .5-苯基[I, 2，5]噁二唑并[3，4-b]吡嗪； .2，3，9-三甲氧基-6a，12a-二氢苯并吡喃并[3，4_b]苯并吡喃-12 (6H)-酮； .4-[(4-氯苄基)氧基]-3-甲氧基-N-(2-甲基-5-[1，3]噁唑并[4，5_b]吡啶_2_基苯基)苯甲酰胺； .3-(1, 3-苯并噻唑-2-基硫代)丙酸； .3-{[ (4-乙氧基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸； N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-[(2，5-二甲氧基苯基)磺酰基]哌啶-4-甲酰胺； N-[3，5-双(三氟甲基)苯基]-2-[(5-硝基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]乙酰胺； .5-[4- (4-叔丁基苯甲酰基)哌嗪-1-基]-2-硝基-N-(吡啶-3-基甲基)苯胺； .3-{[2_氯-4-(羟甲基)苯氧基]甲基}苯甲酸； {[(2-氯苯基)氨基][(3-氟苄基)硫代]亚甲基}丙二腈； {[(4-溴苯基)氨基][(4-氟苄基)硫代]亚甲基}丙二腈；以及 1-[(lS，3R，5R，7S)-3-(3，4-二甲基苯基)金刚烷_1_ 基]甲胺； (3，5-二叔丁基-4-羟基苯亚甲基)丙二臆； .2-氨基-N-{5-[6- ( 二甲基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-4-羟基_2_ (羟甲基)四氢呋喃-3-基} -3- (4-甲氧基苯基)丙酰胺； .1,3，6-三羟基-7-甲氧基-2，8-双(3-甲基丁 -2-烯-1-基)-9H-氧杂蒽-9-酮；(3S，3aR，4R，6S，6aR，7S，8R，9bR)-6-乙酰氧基 _4_( 丁酰氧基)_3，3a_ 二羟基-3，6，9-三甲基-8-{[(2Z)-2-甲基丁 -2-烯酰]氧基}_2_氧代-2，3，3a, 4，5，6，6a, 7，8，9b-十氢奥并[4，5_b]呋喃-7-基己酸酯； (IE, 5S) -6，6，6-三氟-5-羟基-1, 5- 二苯基己-1-烯 _3_ 酮； .2-(4-甲氧基苯基)-1,3-苯并噻唑； 乙基-4-氨基-2- {[ (IE) -3- (4-甲基苯基)-3-氧代丙-1-烯_1_基]硫代}嘧啶_5_甲酸酯； .3-[(5-氯-1，3-苯并噻唑-2-基)硫代]-5，5- 二甲基环己-2-烯-1-酮；(2E) -3-[(5-甲基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]-1-苯基丙_2_烯-1-酮；
.11,12- 二羟基-3-异丁基-4，5, 8- 二甲基-3，3a, 4, 6a, 9, 10, 11, 12-八氧-1H-环十一烷并[d]异吲哚-1，15(2H)_ 二酮；.3-(羟甲基)-6-异丙基-5- [ (2-甲基丁 -2-烯酰基)氧基]-2-氧代环己-3-烯-1-基.4-羟基-2-甲基丁 -2-烯酸酯； .1,11，12-三羟基-2，16-二氧代-11,20-环氧苦味-3-烯-15-基-2-羟基-2-甲基丁酸酯； . 1-[3，5-双(二氟甲基)苯基]-3_[3_氯_4_(异丙基横酸基)-2_噻吩基]服； 以上化合物的药学上可接受的盐；以及， 以上化合物的任意组合。
13.如权利要求12所述的药物组合物，所述药物组合物包含: . 1-[(lS，3R，5R，7S)-3-(3，4-二甲基苯基)金刚烷_1_ 基]甲胺； . 5-氯_7-[ (2-氯-6-氟苯基)(吡啶-2-基氨基)甲基]喹啉-8-醇； (1S, 2R, 3S，6S)-1-苯甲酰基-6-叔丁基螺[2.5]辛烷_1，2-二甲腈； N- [ (4-氯苯基)(2-羟基-1-萘基)甲基]-3-甲氧基苯甲酰胺； 乙基-1-苄基-5- [3-(叔丁基氨基)-2-羟基丙氧基]-2-甲基-1H-吲哚-3-甲酸酯； .5-氯-7-[(2，5-二甲基苯基)(吡啶-2-基氨基)甲基]喹啉-8-醇； N-[5-(2，3-二氢-1，4-苯并二氧杂芑-6-基)-2-甲基_3_呋喃甲酰基]甘氨酸； [3-(1, 3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸； N-(2-氟苯基)-2-{[5-(3-甲基苯基)-1，3，4-噁二唑-2-基]硫代}乙酰胺； N-[4-(6-甲基-1,3-苯并噻唑-2-基)苯基]-2-[(5-甲基-1，3，4-噻二唑-2-基)硫代]乙酰胺； . 2-(2-溴-4-叔丁基苯氧基)-N- (2-甲氧基-5-硝基苯基)乙酰胺； 甲基-5-{[(4-氟-2-甲基苯基)磺酰基](异烟酰基)氨基}-2_甲基-1-苯并呋喃-3-甲酸酯； . 1-(4-氯苄基)-N-(吡啶-3-基甲基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺； . 2-{[5-(4-氯苯基)-4-(3-甲基苯基)-4Η-1，2，4-三唑-3-基]硫代}_N-(3_甲氧基苯基)乙酰胺； N-苯基-3-[ (4-苯基-1，3-噻唑-2-基)硫代]丙酰胺； 乙基_[3-(1，3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸酯； .2-甲基-3-[(4-甲基哌啶-1-基)羰基]萘并[2，3-b]呋喃-4，9-二酮； N-(3-苯丙基)-10H-吩噻嗪-10-甲酰胺； .5-(4-氯苯基)-2-吡咯烷-1-基-6H-1, 3，4-噻二嗪； .7-(4-氟苯基)-1-(2-呋喃基甲基)-5，5-双(三氟甲基)_5，8-二氢嘧啶并[4，5_d]嘧啶-2，4(1H，3H)-二酮； . 3-{[(2-溴-4-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸； .3-{[4-(羟甲基)-2-甲氧基苯氧基]甲基}苯甲酸； .5-苯基[I, 2，5]噁二唑并[3，4-b]吡嗪； .2，3，9-三甲氧基-6a，12a-二氢苯并吡喃并[3，4_b]苯并吡喃-12 (6H)-酮；4-[(4-氯苄基)氧基]-3-甲氧基-N-(2-甲基-5-[1，3]噁唑并[4，5_b]吡啶_2_基苯基)苯甲酰胺； 3-(1, 3-苯并噻唑-2-基硫代)丙酸； 3-{[ (4-乙氧基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸； N-[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-[(2，5-二甲氧基苯基)磺酰基]哌啶-4-甲酰胺； N-[3，5-双(三氟甲基)苯基]-2-[(5-硝基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]乙酰胺； 5-[4- (4-叔丁基苯甲酰基)哌嗪-1-基]-2-硝基-N-(吡啶-3-基甲基)苯胺； 3-{[2_氯-4-(羟甲基)苯氧基]甲基}苯甲酸； {[(2-氯苯基)氨基][(3-氟苄基)硫代]亚甲基}丙二腈； {[(4-溴苯基)氨基][(4-氟苄基)硫代]亚甲基}丙二腈；以及 1-[(lS，3R，5R，7S)-3-(3，4-二甲基苯基)金刚烷_1_ 基]甲胺； 以上化合物的药学上可接受的盐；以及， 以上化合物的任意组合。
14.如权利要求12所述的药物组合物，所述药物组合物包含: (3，5-二叔丁基-4-羟基苯亚甲基)丙二臆； 2-氨基-N-{5-[6- ( 二甲基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-4-羟基_2_ (羟甲基)四氢呋喃-3-基} -3- (4-甲氧基苯基)丙酰胺； I,3，6-三羟基-7-甲氧基-2，8-双(3-甲基丁 -2-烯-1-基)-9H-氧杂蒽-9-酮； (3S，3aR，4R，6S，6aR，7S，8R，9bR)-6-乙酰氧基 _4_( 丁酰氧基)_3，3a_ 二羟基-3，6，9-三甲基-8-{[(2Z)-2-甲基丁 -2-烯酰]氧基}_2_氧代-2，3，3a, 4，5，6，6a, 7，8，9b-十氢奥并[4，5_b]呋喃-7-基己酸酯； (IE, 5S) -6，6，6-三氟-5-羟基-1, 5- 二苯基己-1-烯 _3_ 酮； 2-(4-甲氧基苯基)-1,3-苯并噻唑； 乙基-4-氨基-2- {[ (IE) -3- (4-甲基苯基)-3-氧代丙-1-烯_1_基]硫代}嘧啶_5_甲酸酯； 3_[ (5-氯-1，3-苯并噻唑-2-基)硫代]-5，5- 二甲基环己-2-烯-1-酮； (2E) -3-[(5-甲基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]-1-苯基丙_2_烯-1-酮； II,12- 二羟基-3-异丁基-4，5，8- 二甲基-3，3a, 4, 6a, 9, 10, 11, 12-八氧-1H-环十一烷并[d]异吲哚-1，15(2H)_ 二酮； 3-(羟甲基)-6-异丙基-5-[ (2-甲基丁 -2-烯酰基)氧基]-2-氧代环己-3-烯-1-基4-羟基-2-甲基丁 -2-烯酸酯； I, 11，12-三羟基-2，16-二氧代-11,20-环氧苦味-3-烯-15-基-2-羟基-2-甲基丁酸酯； 1-[3，5-双(二氟甲基)苯基]-3_[3_氯_4_(异丙基横酸基)-2_噻吩基]服； 以上化合物的药学上可接受的盐；以及， 以上化合物的任意组合。
15.如权利要求12所述的药物组合物，所述药物组合物包含: I, 3，6-三羟基-7-甲氧基-2，8-双(3-甲基丁 -2-烯-1-基)-9H-氧杂蒽-9-酮； (IE, 5S) -6，6，6-三氟-5-羟基-1, 5- 二苯基己-1-烯 _3_ 酮；3-(羟甲基)-6-异丙基-5- [ (2-甲基丁 -2-烯酰基)氧基]-2-氧代环己-3-烯-1-基4-羟基-2-甲基丁 -2-烯酸酯； 以上化合物的药学上可接受的盐；以及， 以上化合物的任意组合。
16.如权利要求12-15中任一项所述的药物组合物，其中，所述药物组合物进一步包含其它治疗剂。
17.一种用于调控皮肤色素沉着的化合物，所述化合物选自于: 1-[(1S，3R，5R，7S)-3-(3，4-二甲基苯基)金刚烷_1_ 基]甲胺； 5-氯_7-[ (2-氯-6-氟苯基)(吡啶-2-基氨基)甲基]喹啉-8-醇； (IS, 2R, 3S, 6S)-1-苯甲酰基-6-叔丁基螺[2.5]辛烷-1，2- 二甲腈； N- [ (4-氯苯基)(2-羟基-1-萘基)甲基]-3-甲氧基苯甲酰胺； 乙基-1-苄基-5- [3-(叔丁基氨基)-2-羟基丙氧基]-2-甲基-1H-吲哚-3-甲酸酯； 5-氯-7-[(2，5- 二甲基苯基)(吡啶-2-基氨基)甲基]喹啉-8-醇； N-[5-(2，3-二氢-1，4-苯并二氧杂芑-6-基)-2-甲基_3_呋喃甲酰基]甘氨酸； [3-(1, 3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸； N-(2-氟苯基)-2-{[5-(3-甲基苯基)-1，3，4-噁二唑-2-基]硫代}乙酰胺； N-[4-(6-甲基-1,3-苯并噻唑-2-基)苯基]-2-[(5-甲基-1，3，4-噻二唑-2-基)硫代]乙酰胺； 2-(2-溴-4-叔丁基苯氧基)-N- (2-甲氧基-5-硝基苯基)乙酰胺； 甲基-5-{[(4-氟-2-甲基苯基)磺酰基](异烟酰基)氨基}-2_甲基-1-苯并呋喃-3-甲酸酯； 1-(4-氯苄基)-N-(吡啶-3-基甲基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺； 2-{[5-(4-氯苯基)-4-(3-甲基苯基)-4Η-1，2，4-三唑-3-基]硫代}_N-(3_甲氧基苯基)乙酰胺； N-苯基-3-[ (4-苯基-1，3-噻唑-2-基)硫代]丙酰胺； 乙基-[3-(1,3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸酯； 2-甲基-3-[(4-甲基哌啶-1-基)羰基]萘并[2，3-b]呋喃-4，9-二酮； N-(3-苯丙基)-1OH-吩噻嗪-10-甲酰胺； 5- (4-氯苯基)-2-吡咯烷-1-基-6H-1, 3，4-噻二嗪； 7-(4-氟苯基)-1-(2-呋喃基甲基)-5，5-双(三氟甲基)_5，8-二氢嘧啶并[4，5_d]嘧啶-2，4(1H，3H)-二酮； 3-{[(2-溴-4-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸； 3-{[4-(羟甲基)-2-甲氧基苯氧基]甲基}苯甲酸； 5-苯基[I, 2，5]噁二唑并[3，4-b]吡嗪；2，3，9-三甲氧基-6a，12a-二氢苯并吡喃并[3，4_b]苯并吡喃-12 (6H)-酮； 4-[(4-氯苄基)氧基]-3-甲氧基-N-(2-甲基-5-[1，3]噁唑并[4，5_b]吡啶_2_基苯基)苯甲酰胺； 3-(1, 3-苯并噻唑-2-基硫代) 丙酸； 3-{[ (4-乙氧基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸；N- [4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-[ (2，5- 二甲氧基苯基)磺酰基]哌啶-4-甲酰胺； N-[3，5-双(三氟甲基)苯基]-2-[(5-硝基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]乙酰胺； 5-[4- (4-叔丁基苯甲酰基)哌嗪-1-基]-2-硝基-N-(吡啶-3-基甲基)苯胺； 3-{[2_氯-4-(羟甲基)苯氧基]甲基}苯甲酸； {[(2-氯苯基)氨基][(3-氟苄基)硫代]亚甲基}丙二腈； {[(4-溴苯基)氨基][(4-氟苄基)硫代]亚甲基}丙二腈；以及 1-[(lS，3R，5R，7S)-3-(3，4-二甲基苯基)金刚烷_1_ 基]甲胺； (3，5-二叔丁基-4-羟基苯亚甲基)丙二臆； 2-氨基-N-{5- [6- ( 二甲基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-4-羟基_2_ (羟甲基)四氢呋喃-3-基} -3- (4-甲氧基苯基)丙酰胺； I,3，6-三羟基-7-甲氧基-2，8-双(3-甲基丁 -2-烯-1-基)-9H-氧杂蒽-9-酮； (3S，3aR，4R，6S，6aR，7S，8R，9bR)-6-乙酰氧基 _4_( 丁酰氧基)_3，3a_ 二羟基-3，6，9-三甲基-8-{[(2Z)-2-甲基丁 -2-烯酰]氧基}_2_氧代-2，3，3a, 4，5，6，6a, 7，8，9b-十氢奥并[4，5_b]呋喃-7-基己酸酯； (IE, 5S) -6，6，6-三氟-5-羟基-1, 5- 二苯基己-1-烯 _3_ 酮； 2-(4-甲氧基苯基)-1,3-苯并噻唑； 乙基-4-氨基-2- {[ (IE) -3- (4-甲基苯基)-3-氧代丙-1-烯_1_基]硫代}嘧啶_5_甲酸酯； 3-[(5-氯-1，3-苯并噻唑-2-基)硫代]-5，5-二甲基环己-2-烯-1-酮； (2E) -3-[(5-甲基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]-1-苯基丙_2_烯-1-酮；
II,12- 二羟基-3-异丁基-4，5, 8- 二甲基-3，3a, 4, 6a, 9, 10, 11, 12-八氧-1H-环十一烷并[d]异吲哚-1，15(2H)_ 二酮；3-(羟甲基)-6-异丙基-5- [ (2-甲基丁 -2-烯酰基)氧基]-2-氧代环己-3-烯-1-基4-羟基-2-甲基丁 -2-烯酸酯； I, 11，12-三羟基-2，16-二氧代-11,20-环氧苦味-3-烯-15-基-2-羟基-2-甲基丁酸酯； 1-[3，5-双(二氟甲基)苯基]-3_[3_氯_4_(异丙基横酸基)-2_噻吩基]服； 以上化合物的药学上可接受的盐；以及， 以上化合物的任意组合。
18.如权利要求17所述的用于调控皮肤色素沉着的化合物，所述化合物选自于: l-[(lS，3R，5R，7S)-3-(3，4-二甲基苯基)金刚烷 _1_ 基]甲胺； 5-氯_7-[ (2-氯-6-氟苯基)(吡啶-2-基氨基)甲基]喹啉-8-醇； (IS, 2R, 3S, 6S)-1-苯甲酰基-6-叔丁基螺[2.5]辛烷-1，2- 二甲腈； N- [ (4-氯苯基)(2-羟基-1-萘基)甲基]-3-甲氧基苯甲酰胺； 乙基-1-苄基-5- [3-(叔丁基氨基)-2-羟基丙氧基]-2-甲基-1H-吲哚-3-甲酸酯； 5-氯-7-[(2，5-二甲 基苯基)(吡啶-2-基氨基)甲基]喹啉-8-醇； N-[5-(2，3-二氢-1，4-苯并二氧杂芑-6-基)-2-甲基_3_呋喃甲酰基]甘氨酸； [3-(1, 3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸； N-(2-氟苯基)-2-{[5-(3-甲基苯基)-1，3，4-噁二唑-2-基]硫代}乙酰胺；N-[4-(6-甲基-1,3-苯并噻唑-2-基)苯基]-2-[(5-甲基-1，3，4-噻二唑-2-基)硫代]乙酰胺； . 2- (2-溴-4-叔丁基苯氧基)-N- (2-甲氧基-5-硝基苯基)乙酰胺； 甲基-5-{[(4-氟-2-甲基苯基)磺酰基](异烟酰基)氨基}-2_甲基-1-苯并呋喃-3-甲酸酯； . 1-(4-氯苄基)-N-(吡啶-3-基甲基)-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-胺； . 2-{[5-(4-氯苯基)-4-(3-甲基苯基)-4Η-1，2，4-三唑-3-基]硫代}_N-(3_甲氧基苯基)乙酰胺； N-苯基-3-[ (4-苯基-1，3-噻唑-2-基)硫代]丙酰胺； 乙基-[3-(1,3-苯并噻唑-2-基)苯氧基]乙酸酯；. 2-甲基-3-[(4-甲基哌啶-1-基)羰基]萘并[2，3-b]呋喃-4，9-二酮； N-(3-苯丙基)-1OH-吩噻嗪-10-甲酰胺；. 5-(4-氯苯基)-2-吡咯烷-1-基-6H-1, 3，4-噻二嗪；. 7-(4-氟苯基)-1-(2-呋喃基甲基)-5，5-双(三氟甲基)_5，8-二氢嘧啶并[4，5_d]嘧啶-2，4(1H，3H)-二酮；. 3-{[(2-溴-4-甲基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸； . 3-{[4-(羟甲基)-2-甲氧基苯氧基]甲基}苯甲酸；. 5-苯基[I, 2，5]噁二唑并[3，4-b]吡嗪；. 2，3，9-三甲氧基-6a，12a-二氢苯并吡喃并[3，4_b]苯并吡喃-12 (6H)-酮； . 4-[(4-氯苄基)氧基]-3-甲氧基-N-(2-甲基-5-[1，3]噁唑并[4，5_b]吡啶_2_基苯基)苯甲酰胺； . 3-(1, 3-苯并噻唑-2-基硫代)丙酸；. 3-{[ (4-乙氧基苯氧基)乙酰基]氨基}苯甲酸； N- [4-氯-3-(三氟甲基)苯基]-1-[ (2，5- 二甲氧基苯基)磺酰基]哌啶-4-甲酰胺； N-[3，5-双(三氟甲基)苯基]-2-[(5-硝基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]乙酰胺； . 5-[4- (4-叔丁基苯甲酰基)哌嗪-1-基]-2-硝基-N-(吡啶-3-基甲基)苯胺； . 3-{[2_氯-4-(羟甲基)苯氧基]甲基}苯甲酸； {[(2-氯苯基)氨基][(3-氟苄基)硫代]亚甲基}丙二腈； {[(4-溴苯基)氨基][(4-氟苄基)硫代]亚甲基}丙二腈；以及 . 1-[(lS，3R，5R，7S)-3-(3，4-二甲基苯基)金刚烷_1_ 基]甲胺； 以上化合物的药学上可接受的盐；以及， 以上化合物的任意组合。
19.如权利要求17所述的用于调控皮肤色素沉着的化合物，所述化合物选自于: (3，5-二叔丁基-4-羟基苯亚甲基)丙二臆；. 2-氨基-N-{5-[6- ( 二甲基氨基)-9H-嘌呤-9-基]-4-羟基_2_ (羟甲基)四氢呋喃-3-基} -3- (4-甲氧基苯基)丙酰胺； I,3，6-三羟基-7-甲氧基-2，8-双(3-甲基丁 -2-烯-1-基)-9H-氧杂蒽-9-酮；(3S，3aR，4R，6S，6aR，7S，8R，9bR)-6-乙酰氧基 _4_( 丁酰氧基)_3，3a_ 二羟基-3，6，9-三甲基-8-{[(2Z)-2-甲基丁 -2-烯酰]氧基}_2_氧代-2，3，3a, 4，5，6，6a, 7，8，9b-十氢奥并[4，5_b]呋喃-7-基己酸酯； (IE, 5S) -6，6，6-三氟-5-羟基-1, 5- 二苯基己-1-烯 _3_ 酮； .2-(4-甲氧基苯基)-1,3-苯并噻唑； 乙基-4-氨基-2- {[ (IE) -3- (4-甲基苯基)-3-氧代丙-1-烯_1_基]硫代}嘧啶_5_甲酸酯； .3-[(5-氯-1，3-苯并噻唑-2-基)硫代]-5，5- 二甲基环己-2-烯-1-酮； (2E) -3-[(5-甲基-1H-苯并咪唑-2-基)硫代]-1-苯基丙_2_烯-1-酮； .11,12- 二羟基-3-异丁基-4，5，8- 二甲基-3，3a, 4, 6a, 9, 10, 11, 12-八氧-1H-环十一烷并[d]异吲哚-1，15(2H)_ 二酮； .3-(羟甲基)-6-异丙基-5-[ (2-甲基丁 -2-烯酰基)氧基]-2-氧代环己-3-烯-1-基.4-羟基-2-甲基丁 -2-烯酸酯； I, 11，12-三羟基-2，16-二氧代-11,20-环氧苦味-3-烯-15-基-2-羟基-2-甲基丁酸酯； .1-[3，5-双(二氟甲基)苯基]-3_[3_氯_4_(异丙基横酸基)-2_噻吩基]服； 以上化合物的药学上可接受的盐；以及， 以上化合物的任意组合。
20.如权利要求17所述的用于调控皮肤色素沉着的化合物，所述化合物选自于: I, 3，6-三羟基-7-甲氧基-2，8-双(3-甲基丁 -2-烯-1-基)-9H-氧杂蒽-9-酮； (IE, 5S) -6，6，6-三氟-5-羟基-1, 5- 二苯基己-1-烯 _3_ 酮； .3-(羟甲基)-6-异丙基-5- [ (2-甲基丁 -2-烯酰基)氧基]-2-氧代环己-3-烯-1-基.4-羟基-2-甲基丁 -2-烯酸酯； 以上化合物的药学上可接受的盐；以及， 以上化合物的任意组合。
21.一种用于识别调节小眼转录因子(MITF)的表达或活性的化合物的分析方法，所述方法包括: (iii)使细胞与测试化合物相接触，其中，所述细胞包含报告基因，所述报告基因可操作地连接至MITF的直接转录靶标的启动子，并且其中，所述细胞能够产生MITF ;以及 (iv)在与所述测试化合物孵育后，确定所述报告基因的表达量， 其中，与对照或参照相比，所述报告基因表达的变化表明所述化合物调节MITF的表达或活性。
22.如权利要求21所述的分析方法，其中，与对照或参照相比，所述测试化合物抑制MITF的表达或活性。
23.如权利要求21或22所述的分析方法，其中，所述启动子是TRPMl基因的启动子。
24.如权利要求21-23中任一项所述的分析方法，其中，所述报告基因是萤光素酶基因。
25.如权利要求21-24中任一项所述的分析方法，其中，所述细胞内源性产生MITF。
26.如权利要求 21-25中任一项所述的分析方法，其中，所述细胞是黑色素细胞或来自于黑色素瘤细胞系。
27.如权利要求21-26中任一项所述的分析方法，其中，在0.01nM至约IOmM的终浓度下对所述测试化合物进行孵育。
28.如权利要求21-27中任一项所述的分析方法，其中，在2个以上不同浓度下对所述测试化合物进行测试。
29.如权利要求28所述的分析方法，其中，在10倍-10，OOO倍范围内的2个以上不同浓度下对所述测试化合物进行测试。
30.如权利要求21-29中任一项所述的分析方法，其中，所述测试化合物选自于由下列化合物所组成的组:有机小分子或无机小分子；糖；寡糖；多糖；生物大分子，例如肽、蛋白质、以及肽类似物和衍生物；模拟肽；核酸、核酸类似物和衍生物，包括但不限于siRNA、shRNA、反义RNA、核酶和适配子；由生物材料制得的提取物，所述生物材料如细菌、植物、真菌或动物细胞、动物组织；天然存在的组合物或合成的组合物；以及以上化合物的任意组合。
31.如权利要求21-30中任一项所述的分析方法，其中，所选出的化合物的1gP值小于7。
32.如权利要求21-31中任一项所述的分析方法，其中，所选出的化合物表现出对MITF的表达或活性进行剂量依赖性的调节。
33.如权利要求21-32中任一项所述的分析方法，其中，所述分析方法为高通量筛选(HTS)分析方法。
34.由权利要求21-33中任一项所述的分析方法所选出的化合物。
【文档编号】A61K31/4709GK103917229SQ201280054160
【公开日】2014年7月9日 申请日期:2012年8月31日 优先权日:2011年9月1日
【发明者】戴维·E·费希尔, 里兹万·哈克, 汉斯·拉格纳·瓦尔德马·维德隆德 申请人:通用医疗公司