结合胰高血糖素的核酸的制作方法

结合胰高血糖素的核酸的制作方法
【专利摘要】本发明涉及能够结合胰高血糖素的核酸分子，其中所述核酸分子选自A型的核酸分子、B型的核酸分子和C型的核酸分子。
【专利说明】结合胰高血糖素的核酸
[0001] 本发明涉及能够结合胰高血糖素的核酸分子、其用于分别制造药剂、诊断剂和检测剂的用途、包含这样的核酸分子的组合物、包含这样的核酸分子的复合物、用于使用这样的核酸分子筛选由胰高血糖素介导的活性的拮抗剂的方法以及用于检测这样的核酸分子的方法。
[0002]糖尿病(缩写DM)显示世界范围内(特别是亚洲)流行的令人震惊的增加，其主要由2型糖尿病(缩写DM2)驱动。美国的数据显示在2001年，相较于1990年的4.9%，有7.9%的18岁及以上的人被诊断为糖尿病。发病率与年龄和人体质量指数相关。数学模型预测对于美国2000年出生的男性，发生糖尿病的概率为33%，对于女性甚至更高，为39%。相同模型预测对于这些男性寿命减损9年，对于女性寿命减损12年。主要风险因子例如肥胖、缺乏体育活动是公知的，但已发现他们极难被影响。令人震惊的趋势使得对适合用于治疗DM2的新型治疗剂的探索更加紧迫。理想的药剂不应当仅降低血糖，而且还应当对于体重而言至少是中性的以及还降低甘油三酯。
[0003]尽管目前可获得数种抗高血糖药，但仍然存在对具有不同作用机制的新型药物的紧迫需要。现有试剂通常是无效的或随时间而变得不太有效和/或与相当大的副作用相关。两种类型的不利事件特别常见，令人不安和潜在地有害:体重增加和低血糖症。例外是试剂二甲双胍和阿卡波糖。然而，它们通常仅用于DM2的早期或不太严重的形式，具有有限的功效，并且通常存在胃肠道副作用。此外，疾病的二甲双胍治疗与威胁生命的乳酸酸中毒的风险相关，特别是在具有慢性肾功能和心脏衰竭的老年患者中。
[0004]除了经典试剂以外，新型药物已在过去十年进入市场。然而，这些药物的大部分受到不太高的功效或在目标群体中值得特别关注的副作用的限制。胰高血糖素样肽(缩写GLP-1)类似物(也称为肠促胰岛素)或GLP-1-降解酶的抑制剂二肽基-肽酶-4 (缩写DPPIV)仅被批准用于其它试剂已证明无效的病例，并且在抗高血糖作用方面仅显示不太高的功效。然而，肠促胰岛素的可注射形式确实至少具有有利的体重变化谱的有利方面(Amori，Lau等人2007)。利用这些试剂的疗法通常需要注射长效胰岛素，来预防空腹高血糖症。另一个相对新的物质种类，用作PPAR激动剂的噻唑烷二酮类最近已成为关注它们的心血管副作用的论述的主题，其已导致欧洲(EMA2010)的上市许可暂停和在美国(FDA2011)对于罗格列酮的更加受控制的处方条例。这由罗格列酮与心力衰竭、心肌梗塞和心力衰竭的死亡的关联性触发(Nissen和Wolski2007)。该类的另一成员曲格列酮因药物诱发的肝损伤而被下市。第三种噻唑烷二酮，吡格列酮的销售在研究表明药物(商标名ActOS?)增加膀胱癌的风险(Takeda press release, 2011年7月11日)后在法国被暂停。
[0005]虽然大部分目前使用的药物着眼于在胰岛素本身或胰岛素活性的相对缺乏上，但许多研究支持DM2为至少双激素障碍(其特征在于与胰岛素缺乏或胰岛素抵抗组合的不适当地高的胰高血糖素水平)的概念(Jiang和Zhang2003)。
[0006]胰高血糖素是与胰岛素一样在胰腺中产生的激素，但其在周缘组织，特别是在肝中具有与胰岛素相反的作用。此处其主要诱导糖原异生和糖原分解以稳定膳食之间的血糖水平。
[0007]在大多数糖尿病患者中，已报导了在混合膳食或碳水化合物摄入后循环胰高血糖素水平的反常升闻(Ohneda, Watanabe等人1978)。这被视为对升闻的餐后血糖水平的主要贡献者，其在DM的微血管和大血管并发症的病理生理学中起着重要作用(Gin和Rigalleau2000)。
[0008]因此，利用不同方法阻断胰高血糖素的作用已被广泛研究。已报导了许多肽基和非肽基小分子胰高血糖素受体拮抗剂(Jiang和Zhang2003)。这些通常具有相当低的对于胰高血糖素受体的小分子拮抗剂中的一些已显示在动物模型中降低空腹血糖或阻断外源胰高血糖素-刺激的血糖升高。已显示非肽基小分子胰高血糖素受体拮抗剂在人体中以剂量依赖性方式阻断胰高血糖素-诱发的肝葡萄糖产生和血糖的升高(Petersen和Sullivan2001)。更近期以来，通过反义寡核苷酸减少db/db-小鼠的胰高血糖素受体表达导致血糖、游离脂肪酸和甘油三酯的减少而不发生低血糖症(Liang, Osborne等人2004)。这些作用对于DM2患者是理想的。[0009]除那以外，发现胰高血糖素受体敲除小鼠是存活的并且显示仅轻度的低血糖症、改善的葡萄糖耐受性和升高的胰高血糖素水平的体征。它们对饮食诱发的肥胖具有抗性(Conarello, Jiang等人2007),并且具有更高的胰岛素敏感性,这在β -细胞缺乏的情况下可以是有益的(Sorensen, Winzell等人2006)。此外,胰高血糖素受体敲除小鼠对链脲霉素-诱发的“I型糖尿病表型”具有抗性，即，它们在空腹状态以及在口服和腹膜内葡萄糖耐受性测试后显示血糖量正常(Lee, Wang等人2011)。
[0010]单克隆抗体对胰高血糖素本身的中和还导致血糖、甘油三酯、HbAlc和肝葡萄糖输出量的急性和持续减少(Brand, Rolin等人1994 ；Sorensen, Brand等人2006)。然而，由于它们潜在的免疫原性，这些和其它抗体可能不是用于DM的长期治疗的可行选择。
[0011]基本上，通过降低胰高血糖素水平/活性进行治疗干预的尝试已产生许多支持胰高血糖素拮抗的概念、但未曾导致具有足够效力的化合物或具有不可接受的肝毒性的化合物的结果。
[0012]激素胃抑肽(缩写GIP)(与胰高血糖素具有序列相似性的42个氨基酸长的肽)从主要位于十二指肠和近端空肠中的K细胞释放。其在营养物、特别是葡萄糖或脂肪摄入后分泌，脂肪是人的GIP分泌的最有力的刺激物。
[0013]GIP受体是具有7个跨膜螺旋的典型G蛋白偶联受体。发现GIP受体基因在胰腺、胃、小肠、脂肪组织、肾上腺皮质、垂体、心脏、睾丸、内皮细胞、骨细胞、气管、脾、胸腺、肺、肾、甲状腺和脑的若干区域中表达。
[0014]GIP正如其名称所示，不仅诱导胰岛素释放，而且还在脂质动态平衡中起作用，并且可能是肥胖发生所必需的，如通过几个动物研究(Asmar2011)显示的:每日施用GIP受体拮抗剂Pro3-GIP，进行50天，在年长的高脂肪饲喂的糖尿病小鼠中产生减轻的体重，减少的脂肪组织的积累，以及葡萄糖、糖化血红蛋白和胰腺胰岛素的水平的显著提高，以及肌肉和肝中的甘油三酯水平的降低。未观察到高脂肪饮食摄取的变化(McClean，Irwin等人2007)。指向相同方向，发现GIP受体敲除小鼠对肥胖的发生具有抗性，然而饲以相同高脂肪饮食的野生型小鼠显示GIP的分泌过多和极度内脏和皮下脂肪沉积，具有胰岛素抵抗(Miyawaki, Yamada等人2002)。然而，口服葡萄糖载荷后早期胰岛素反应被削弱，导致更高的血糖水平(Miyawaki, Yamada等人1999)。GIP对肥胖的贡献的详细描述还可见于Irwin和Flatt的最近的综述(Irwin和Flatt2009)。
[0015]与胰高血糖素序列相关并且从相同基因转录的的其它肽为
[0016]?肠高血糖素
[0017].肠高血糖素-相关多肽
[0018].胃泌酸调节素
[0019].GLP-1 及其活性形式 GLP-1 (7-36)和 GLP-1 (7-37)
[0020].GLP-2
[0021]此外，还存在相关多肽
[0022].前原血管活性肠肽(81-122)(前原-VIP/肠肽PHV-42)
[0023]这些肽的氨基酸序列的比对示于图21中。
[0024]本发明要解决的问题是提供与胰高血糖素和/或GIP特异性相互作用的装置，其中所述装置适合用于 预防和/或治疗糖尿病、糖尿病并发症、糖尿病病况和/或高胰增血糖素血症。
[0025]本发明要解决的这些和其它问题通过所附独立的权利要求的主题得以解决。优选实施方案可采自从属权利要求。
[0026]本发明要解决的问题在也是第一方面、也是第一方面的第一实施方案中通过能够结合胰高血糖素的核酸分子得以解决，其中所述核酸分子选自A型的核酸分子、B型的核酸分子和C型的核酸分子。
[0027]在第一方面的第2实施方案、也是第一方面的第I实施方案的实施方案中，核酸分子为A型的核酸分子，其中A型的核酸分子包含中央核苷酸区段，其中中央核苷酸区段包含如下核苷酸序列:
[0028]5J Bn1AAATGn2GAn3H4GCTAKGn5GGn6Ii7GGAATCTRRRSJ [SEQ ID NO:173]，其中
[0029]Ii1 为 G 或 rG, n2 为 G 或 rG, n3 为 G 或 rG, n4 为 G 或 rG, n5 为 Y 或 rT, n6 为 A 或 rA,n7为A或rA,并且其中
[0030]G、A、T、C、B、K、Y和R的任一个为2’ -脱氧核糖核苷酸，和
[0031]rG, rA和rT的任一个为核糖核苷酸。
[0032]在第一方面的第3实施方案、也是第一方面的第2实施方案的实施方式中，中央核苷酸区段包含核苷酸序列:
[0033]5J Bn1AAATGn2GAn3H4GCTAGGn5GGn6Ii7GGAATCTGARSJ [SEQ ID NO:174]，其中
[0034]Ii1 为 G 或 rG, n2 为 G 或 rG, n3 为 G 或 rG, n4 为 G 或 rG, n5 为 T 或 rT, n6 为 A 或 rA,n7为A或rA,并且其中
[0035]G、A、T、C、B和R的任一个为2’ -脱氧核糖核苷酸，和
[0036]rG、rA和rT的任一个为核糖核苷酸。
[0037]在第一方面的第4实施方案、也是第一方面的第2和第3实施方案的实施方式中，中央核苷酸区段包含选自如下序列的核苷酸序列:
[0038]5J Tn1AAATGn2GAn3H4GCTAGGn5GGn6Ii7GGAATCTGAGSJ [SEQ ID NO:175]，
[0039]5J Tn1AAATGn2GAn3H4GCTAGGn5GGn6Ii7GGAATCTGAASJ [SEQ ID NO:176]，
[0040]5J Cn1AAATGn2GAn3H4GCTAGGn5GGn6Ii7GGAATCTGAGSJ [SEQ ID NO: 177]，和[0041]5J Gn1AAATGn2GAn3H4GCTAGGn5GGn6Ii7GGAATCTGAGSJ [SEQ ID NO:178]，
[0042]其中
[0043]Ii1 为 G 或 rG, n2 为 G 或 rG, n3 为 G 或 rG, n4 为 G 或 rG, n5 为 T 或;rT, n6 为 A 或 rA,n7为A或rA,并且其中
[0044]G、A、T和C的任一个为2’ -脱氧核糖核苷酸，和
[0045]rG、rA和rT的任一个为核糖核苷酸。
[0046]在第一方面的第5实施方案、也是第一方面的第2、第3、和第4实施方案的实施方式中，中央核苷酸区段包含核苷酸序列:
[0047]5J Gn1AAATGn2GAn3H4GCTAGGn5GGn6Ii7GGAATCTGAGSJ [SEQ ID NO:178]，
[0048]其中
[0049]Ii1 为 G 或 rG, n2 为 G 或 rG, n3 为 G 或 rG, n4 为 G 或 rG, n5 为 T 或 rT, n6 为 A 或 rA,n7为A或rA,并且其中
[0050]G、A、T和C的任一个为2’ -脱氧核糖核苷酸，和
[0051]rG、rA和rT的任一个为核糖核苷酸。
[0052]在第一方面的第6实施方案、也是第一方面的第2、3和4实施方案的实施方案中，中央核苷酸区段包含核苷酸序列:
[0053]5J Cn1AAATGn2GAn3H4GCTAGGn5GGn6Ii7GGAATCTGAGSJ [SEQ ID NO:177]，
[0054]其中
[0055]Ii1 为 G 或 rG，n2 为 G 或 rG，n3 为 G 或 rG, n4 为 G 或 rG，n5 为 T 或 rT，n6 为 A 或 rA,n7为A或rA,并且
[0056]G、A、T和C为2’ -脱氧核糖核苷酸，和
[0057]rG、rA和rT为核糖核苷酸。
[0058]在第一方面的第7实施方案、也是第一方面的第2、3、4、5和6实施方案的实施方案中，中央核苷酸区段由2’ -脱氧核糖核苷酸和核糖核苷酸组成。
[0059]在第一方面的第8实施方案、也是第一方面的第2、3、4、5、6和7实施方案的实施方案中，中央核苷酸区段包含选自如下序列的核苷酸序列
[0060]5，GrGAAATGGGAGGGCTAGGTGGAAGGAATCTGAG3，[SEQ ID NO:179],
[0061]5，GGAAATGrGGAGGCTAGGTGGAAGGAATCTGAG3，[SEQ ID NO:180],
[0062]5，GGAAATGGGArGGGCTAGGTGGAAGGAATCTGAG3，[SEQ ID NO:181],
[0063]5，GGAAATGGGAGrGGCTAGGTGGAAGGAATCTGAG3，[SEQ ID NO:182],
[0064]5，GGAAATGGGAGGGCTAGGTGGrAAGGAATCTGAG3，[SEQ ID NO:183],
[0065]5’GGAAATGGGAGGGCTAGGTGGArAGGAATCTGAG3’ [SEQ ID NO:184]；
[0066]5，GGAAATGrGGAGGGCTAGGTGGrAAGGAATCTGAG3，[SEQ ID NO:185],
[0067]5’GGAAATGGGAGGGCTAGGTGGrArAGGAATCTGAG3’ [SEQ ID NO:186],
[0068]5，GGAAATGrGGAGGGCTAGGTGGrArAGGAATCTGAG3，[SEQ ID NO:187],
[0069]5，GGAAATGGGArGGGCTAGGTGGrArAGGAATCTGAG3，[SEQ ID NO:188],
[0070]5，GrGAAATGrGGArGGGCTAGGTGGrArAGGAATCTGAG3，[SEQ ID NO:189],
[0071]5，GrGAAATGrGGArGrGGCTAGGTGGrArAGGAATCTGAG3，[SEQ ID NO:190]和
[0072]5’GrGAAATGrGGArGrGGCTAGGrTGGrArAGGAATCTGAG3’ [SEQ ID NO:191]，[0073]其中
[0074]G、A、T和C的任一个为2’ -脱氧核糖核苷酸，和
[0075]rG、rA和rT的任一个为核糖核苷酸。
[0076]在也是第一方面的第2、3、4、5和6实施方案的实施方案的第一方面的第9实施方案中，中央核苷酸区段由2’ -脱氧核糖核苷酸组成。
[0077]在也是第一方面的第2、3、4、5、7、8和9实施方案的实施方案的第一方面的第10实施方案中，核酸分子以5’ ->3’方向包含第一末端核苷酸区段、中央核苷酸区段和第二末端核苷酸区段，其中
[0078]第一末端核苷酸区段包含I至7个核苷酸，和
[0079]第二末端核苷酸区段包含I至7个核苷酸。
[0080]在也是第一方面的第2、3、4、5、7、8和9实施方案的实施方案的第一方面的第11实施方案中，核酸分子以5’ ->3’方向包含第二末端核苷酸区段、中央核苷酸区段和第一末端核苷酸区段，其中
[0081]第一末端核苷酸区段包含I至7个核苷酸，和
[0082]第二末端核苷酸区段包含I至7个核苷酸。
[0083]在也是第一方面的第10和第11实施方案的实施方案的第一方面的第12实施方案中，第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6VS’并且第二末端核苷酸区段包含核苷酸 5’ BZ7Z8Z9Z1QZnZ123’，
[0084]其中
[0085]Z1为G或不存在，Z2为S或不存在，Z3为V或不存在，Z4为B或不存在，Z5为B或不存在，Z6为V或不存在，Z7为B或不存在，Z8为V或不存在，Z9为V或不存在，Zltl为B或不存在，Z11为S或不存在，并且Z12为C或不存在。
[0086]在也是第一方面的第10、11和12实施方案的第一方面的第13实施方案中，第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6VS’并且第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列 5，BZ7Z8Z9Z1(lZnZ123’，
[0087]其中
[0088]a) Z1 为 G，Z2 为 S，Z3 为 V，Z4 为 B，Z5 为 B，Z6 为 V, Z7 为 B，Z8 为 V, Z9 为 V, Z10 为 B，Z11为S，并且Z12为C，或
[0089]b) Z1 不存在，Z2 为 S，Z3 为 V，Z4 为 B，Z5 为 B, Z6 为 V，Z7 为 B, Z8 为 V，Z9 为 V，Z10 为B，Z11为S，并且Z12为C，或
[0090]c) Z1 为 G，Z2 为 S，Z3 为 V，Z4 为 B，Z5 为 B，Z6 为 V, Z7 为 B，Z8 为 V, Z9 为 V, Z10 为 B，Z11为S，并且Z12不存在，
[0091]优选地
[0092]a) Z1 为 G，Z2 为 C，Z3 为 R，Z4 为 B，Z5 为 Y，Z6 为 R，Z7 为 Y，Z8 为 R，Z9 为 V, Z10 为 Y，Z11为G，并且Z12为C，或
[0093]b) Z1 不存在，Z2 为 C，Z3 为 R，Z4 为 B，Z5 为 Y，Z6 为 R，Z7 为 Y，Z8 为 R，Z9 为 V, Z10 为Y，Z11为G，并且Z12为C，或
[0094]c) Z1 为 G，Z2 为 C，Z3 为 R，Z4 为 B，Z5 为 Y，Z6 为 R，Z7 为 Y，Z8 为 R，Z9 为 V, Z10 为 Y，Z11为G，并且Z12不存在。[0095]在也是第一方面的第13实施方案的第一方面的第14实施方案中，
[0096]a)所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ GCACTGG3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ GCAGTGC3’，或
[0097]b)所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ GCACTGA3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ GCAGTGC3’，或
[0098]c)所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ GCAGTGG3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ TCACTGC3’，或
[0099]d)所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ GCACTGG3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CTACTGC3’，或
[0100]e)所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ GCGCTGG3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ GCAGTGC3’，或
[0101]f)所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ GCGCCAG3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ TCGGCGC3’。
[0102]在也是第一方面的第10、11和12实施方案的实施方案的第一方面的第15实施方案中，第一末端 核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6VS’并且第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列 5，BZ7Z8Z9Z10ZnZ123，，
[0103]其中
[0104]a) Z1 不存在，Z2 为 S，Z3 为 V, Z4 为 B，Z5 为 B，Z6 为 V，Z7 为 B，Z8 为 V，Z9 为 V, Z10 为B, Z11为S，并且Z12不存在，或
[0105]b) Z1 不存在，Z2 为 S，Z3 为 V, Z4 为 B，Z5 为 B，Z6 为 V，Z7 为 B，Z8 为 V，Z9 为 C，Z10 为B，Z11不存在并且Z12不存在，或
[0106]c) Z1 不存在，Z2 不存在，Z3 为 V，Z4 为 B, Z5 为 B，Z6 为 V，Z7 为 B，Z8 为 V，Z9 为 C，Z10为B，Z11为S，并且Z12不存在，
[0107]优选所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6GS’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CZ7Z8Z9Z1(lZnZ123’，
[0108]其中
[0109]a) Z1 不存在，Z2 为 S，Z3 为 V, Z4 为 G，Z5 为 Y，Z6 为 S，Z7 为 B，Z8 为 R，Z9 为 C，Z10 为B, Z11为S，并且Z12不存在，或
[0110]b) Z1 不存在，Z2 为 S，Z3 为 V, Z4 为 G，Z5 为 Y，Z6 为 S，Z7 为 B，Z8 为 R，Z9 为 C，Z10 为B，Z11不存在并且Z12不存在，或
[0111]c) Z1 不存在，Z2 不存在，Z3 为 V，Z4 为 G，Z5 为 Y，Z6 为 S，Z7 为 B，Z8 为 R，Z9 为 C，Z10为B，Z11为S，并且Z12不存在。
[0112]在也是第一方面的第15实施方案的实施方案的第一方面的第16实施方案中，
[0113]a)所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ GCGCGG3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CTGCGC3’，或
[0114]b)所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ GCGCGG3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CCGCGC3’，或
[0115]c)所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ GGGCCG3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CGGCCC3’，或[0116] d)所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ GCGCCG3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CGGCGC3’，或
[0117]e)所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ GAGCGG3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CCGCTC3’，或
[0118]f)所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ GCGTGG3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CCACGC3’，或
[0119]g)所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ GCGTCG3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CGACGC3’。
[0120]在也是第一方面的第10、11和12实施方案的实施方案的第一方面的第17实施方案中，第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6VS’并且第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5，BZ7Z8Z9Z10ZnZ123，，其中
[0121]a) Z1 不存在，Z2 不存在，Z3 为 V，Z4 为 B, Z5 为 B，Z6 为 V，Z7 为 B，Z8 为 V，Z9 为 V，Z10为B，Z11不存在并且Z12不存在，或
[0122]b) Z1 不存在，Z2 不存在，Z3 为 V，Z4 为 B, Z5 为 B，Z6 为 V，Z7 为 B，Z8 为 V，Z9 为 V，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或
[0123]c) Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4为B，Z5为B, Z6为V，Z7为B, Z8为V，Z9为V,Z10为B, Z11不存在并且Z12不存在，
[0124]优选所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6GS’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CZ7Z8Z9ZltlZ11Z1J’，
[0125]其中
[0126]a) Z1 不存在，Z2 不存在，Z3 为 V，Z4 为 G，Z5 为 Y，Z6 为 G，Z7 为 Y，Z8 为 R，Z9 为 C，Zltl为B，Z11不存在并且Z12不存在，或
[0127]b) Z1 不存在，Z2 不存在，Z3 为 V，Z4 为 G，Z5 为 Y，Z6 为 G，Z7 为 Y，Z8 为 R，Z9 为 C，Zltl不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或
[0128]c) Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4为G，Z5为Y，Z6为G，Z7为Y，Z8为R，Z9为C，Z10为B, Z11不存在并且Z12不存在。
[0129]在也是第一方面的第17实施方案的实施方案的第一方面的第18实施方案中，
[0130]a)所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ GGCGG3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CCGCC3’，或
[0131]b)所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CGCGG3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CCGCG3’。
[0132]在也是第一方面的第10、11和12实施方案的实施方案的第一方面的第19实施方案中，第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6VS’并且第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5，BZ7Z8Z9Z10ZnZ123，，其中
[0133]a) Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4为B，Z5为B, Z6为V，Z7为B, Z8为V，Z9为V,Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或
[0134]WZ1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4为B，Z5为B, Z6为V，Z7为B Z8为V，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或
[0135]c) Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4为B，Z5为B, Z6为V，Z7为B, Z8为V，Z9为V,Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，
[0136]优选所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6GS’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CZ7Z8Z9ZltlZ11Z1J’，
[0137]其中
[0138]a) Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4为G，Z5为Y，Z6为G，Z7为Y，Z8为R，Z9为C，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或
[0139]WZ1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4为G，Z5为Y，Z6为G，Z7为Y，Z8为R，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或
[0140]c) Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5为Y，Z6为G，Z7为Y，Z8为R，Z9为C，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在。[0141]在也是第一方面的第19实施方案的实施方案的第一方面的第20实施方案中,所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ GCGG3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CCGC3’。
[0142]在也是第一方面的第10、11和12实施方案的实施方案的第一方面的第21实施方案中，第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6VS’并且第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ BZ7Z8Z9Z1QZnZ123’，其中
[0143]a) Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5为B，Z6为V，Z7为B，Z8为V，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或
[0144]WZ1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5为B，Z6为V，Z7为B, Z8不存在，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或
[0145]^Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5不存在，Z6为V，Z7为B, Z8为V,Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，
[0146]优选地所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6GS’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CZ7Z8Z9ZltlZ11Z1J’，
[0147]其中
[0148]a) Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5为S，Z6为S，Z7为S，Z8为S，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或
[0149]WZ1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5为S，Z6为S，Z7为S Z8不存在，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或
[0150]c)Z,不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5不存在，Z6为S，Z7为S，Z8为S，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在。
[0151]在也是第一方面的第21实施方案的实施方案的第一方面的第22实施方案中，所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’GCG3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列 5’ CGC3’。
[0152]在也是第一方面的第10、11和12实施方案的实施方案的第一方面的第23实施方案中，第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6VS’并且第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5，BZ7Z8Z9Z10ZnZ123，，其中
[0153]a) Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5不存在，Z6为V，Z7为B, Z8不存在，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，[0154]WZ1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5不存在，Z6为V，Z7不存在，Z8不存在，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，
[0155]^Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5不存在，Z6不存在，Z7为B，Z8不存在，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，
[0156](I)Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5不存在，Z6不存在，Z7不存在，Z8不存在，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，
[0157]优选所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6GS’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CZ7Z8Z9ZltlZ11Z1J’，
[0158]其中
[0159]a) Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5不存在，Z6为G，Z7为C，Z8不存在，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或
[0160]WZ1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5不存在，Z6不存在，Z7不存在，Z8不存在，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在。
[0161]在也是第一方面的第 2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22和23实施方案的实施方案的第一方面的第24实施方案中，核酸分子包含选自SEQ IDNO:6和SEQ ID NO:7的核苷酸序列，或
[0162]其中所述核酸分子与包含选自SEQ ID NO:6和SEQ ID NO:7的核苷酸序列的核酸分子具有至少85 %的同一性，或
[0163]其中所述核酸分子与包含选自SEQ ID NO:6和SEQ ID NO:7的核苷酸序列的核酸分子同源，其中所述同源性为至少85%。
[0164]在也是第一方面的第2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22和23实施方案的实施方案的第一方面的第25实施方案中，核酸分子包含选自SEQ IDNO:23, SEQ ID NO:43，SEQ ID NO:47，SEQ ID NO:48，SEQ ID NO:91，SEQ ID NO:92，SEQ IDNO:158和SEQ ID NO:159的核苷酸序列，或
[0165]所述核酸分子与包含选自SEQ ID NO:23，SEQ ID NO:43，SEQ ID NO:47，SEQ IDNO:48, SEQ ID NO:91, SEQ ID NO:92, SEQ ID NO:158 和 SEQ ID NO:159 的核苷酸序列的核酸分子具有至少85%的同一性，或
[0166]所述核酸分子与包含选自SEQ ID NO:43，SEQ ID NO:47，SEQ ID NO:48，SEQ IDNO:91, SEQ ID NO:92, SEQ ID NO:158和SEQ ID NO:159的核苷酸序列的核酸分子同源，其中所述同源性为至少85%。
[0167]在也是第一方面的第I实施方案的实施方案的第一方面的第26实施方案中，核酸分子为B型的核酸分子，其中所述B型的核酸分子包含29至32个核苷酸的中央区段，其中所述中央核苷酸区段包含选自如下序列的核苷酸序列:
[0168]5J -AKGARn1KGTTGSYAffAn2RTTCGn3TTGGAn4TCn5- ‘3 [SEQ ID NO:197]，
[0169]5’-AGAAGGTTGGTAAGTTTCGGTTGGATCTG- ‘3[SEQ ID NO:198],
[0170]5’-AGAAGGTCGGTAAGTTTCGGTAGGATCTG- ‘3[SEQ ID NO:199],
[0171]5，-AGGAAGGTTGGTAAAGGTTCGGTTGGATTCA- ‘3[SEQ ID NO:200],
[0172]5’ -AGGAAAGGTTGGTAAGGTTCGGTTGGATTCA- ‘3[SEQ ID NO:201]和
[0173]5’-AGGAAGGTTGGTAAGGTTCGGTTGGATTCA- ‘3[SEQ ID NO:202],[0174]其中Ii1为A或rA, n2为G或rG, n3为G或rG, n4为T或rU, n5为A或rA,并且其中
[0175]G、A、T、C、K、Y、S、W和R的任一个为2，-脱氧核糖核苷酸，和
[0176]rG、rA和rU的任一个为核糖核苷酸。
[0177]在也是第一方面的第26实施方案的实施方案的第一方面的第27实施方案中，中央核苷酸区段包含核苷酸序列:
[0178]5J AGGAAn1GGTTGGTAAAn2GTTCGn3TTGGAn4TCn5SJ [SEQ ID NO:203],
[0179]其中II1为A或rA, n2为G或rG, n3为G或rG, n4为T或rU, n5为A或rA,并且其中
[0180]G、A、T和C的任一个为2’ -脱氧核糖核苷酸，和
[0181]rG、rA和rU的任一个为核糖核苷酸。
[0182]在也是第一方面的第26和27实施方案的实施方案的第一方面的第28实施方案中，中央核苷酸区段由2’ -脱氧核糖核苷酸和核糖核苷酸组成。
[0183]在也是第一方面的第26、27和28实施方案的实施方案的第一方面的第29实施方案中，中央核苷酸区段包含选自如下序列的核苷酸序列:
[0184]5’AGGAArAGGTTGGTAAAGGTTCGGTTGGATTCA3’ [SEQ ID NO:204]，
[0185]5’AGGAAAGGTTGGTAAArGGTTCGGTTGGATTCA3’ [SEQ ID NO:205]，
[0186]5’AGGAAAGGTTGGTAAAGGTTCGGTTGGArUTCA3’ [SEQ ID NO:206]，
[0187]5’AGGAArAGGTTGGTAAArGGTTCGGTTGGATTCA3’ [SEQ ID NO:207]，
[0188]5’AGGAArAGGTTGGTAAAGGTTCGGTTGGArUTCG3’ [SEQ ID NO:208]，
[0189]5’AGGAArAGGTTGGTAAAGGTTCGGTTGGArUTCA3’ [SEQ ID NO:209]，
[0190]5，AGGAArAGGTTGGTAAArGGTTCGGTTGGArUTCA3，[SEQ ID NO:210]和
[0191]5’AGGAArAGGTTGGTAAArGGTTCGrGTTGGArUTCrA3’ [SEQ ID NO:211]，
[0192]其中G、A、T和C的任一个为2’ -脱氧核糖核苷酸，并且
[0193]rG、rA和rU的任一个为核糖核苷酸。
[0194]在也是第一方面的第26和27实施方案的实施方案的第一方面的第30实施方案中，中央核苷酸区段由2’ -脱氧核糖核苷酸组成。
[0195]在也是第一方面的第26、27、28、29和30实施方案的实施方案的第一方面的第31实施方案中，核酸分子以5’ ->3’方向包含第一末端核苷酸区段、中央核苷酸区段和第二末端核苷酸区段，其中
[0196]第一末端核苷酸区段包含3至9个核苷酸，和
[0197]第二末端核苷酸区段包含3至10个核苷酸。
[0198]在也是第一方面的第26、27、28、29和30实施方案的实施方案的第一方面的第32实施方案中，核酸分子以5’ ->3’方向包含第二末端核苷酸区段、中央核苷酸区段和第一末端核苷酸区段，其中
[0199]第一末端核苷酸区段包含3至9个核苷酸，和
[0200]第二末端核苷酸区段包含3至10个核苷酸。
[0201] 在也是第一方面的第31和32实施方案的实施方案的第一方面的第33实施方案中，第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6SAD’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CKVZ7Z8Z9Z1(lZnZ123’，
[0202]其中
[0203]Z1为C或不存在，Z2为G或不存在，Z3为R或不存在，Z4为B或不存在，Z5为B或不存在，Z6为S或不存在，Z7为S或不存在，Z8为V或不存在，Z9为V或不存在，Zltl为K或不存在，Z11为M或不存在，并且Z12为S或不存在。
[0204]在也是第一方面的第31、32和33实施方案的实施方案的第一方面的第34实施方案中，第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6SAKS’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5，CKVZ7Z8Z9ZltlZ11Z1J’，其中
[0205]a) Z1 为 C，Z2 为 G，Z3 为 R，Z4 为 B，Z5 为 B，Z6 为 S，Z7 为 S，Z8 为 V, Z9 为 N，Z10 为 K，Z11为M，并且Z12为S，或
[0206]b) Z1 不存在，Z2 为 G，Z3 为 R，Z4 为 B，Z5 为 B，Z6 为 S，Z7 为 S，Z8 为 V，Z9 为 N，Z10 为K, Z11为M,并且Z12为S,或
[0207]c) Z1 为 C，Z2 为 G，Z3 为 R，Z4 为 B，Z5 为 B，Z6 为 S，Z7 为 S，Z8 为 V, Z9 为 N，Z10 为 K，Z11为M，并且Z12不存在，
[0208]优选地所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6GAGS ’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CTCZ7Z8Z9Z1(lZnZ123’，
[0209]其中
[0210]a) Zl 为 C，Z2 为 G, Z3 为 R，Z4 为 C，Z5 为 T，Z6 为 C，Z7 为 G，Z8 为 A, Z9 为 G, ZlO为T，Z11为C，并且Ζ12为G，或
[0211]b)Zl 不存在，Z2 为 G，Z3 为 R，Z4 为 C，Z5 为 T，Z6 为 C，Z7 为 G，Z8 为 A，Z9 为 G，ZlO为T，Zll为C，并且Z12为G，或
[0212]c) Z1 为 C，Z2 为 G，Z3 为 R，Z4 为 C，Z5 为 T，Z6 为 C，Z7 为 G，Z8 为 A，Z9 为 G，Z10 为 T，Z11为C，并且Z12不存在。
[0213]在也是第一方面的第34实施方案的实施方案的第一方面的第35实施方案中，
[0214]a)第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CGACTCGAG3’并且第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CTCGAGTCG3’，或
[0215]b)第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CGGCTCGAG3’并且第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CTCGAGTCG3’。
[0216]在也是第一方面的第31、32和33实施方案的实施方案的第一方面的第36实施方案中，第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6SAKS’并且第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列 5，CKVZ7Z8Z9Z10ZnZ123，，
[0217]其中
[0218]a) Z1 不存在，Z2 为 G，Z3 为 R，Z4 为 B，Z5 为 B，Z6 为 S，Z7 为 S，Z8 为 V，Z9 为 N，Z10 为K, Z11为M,并且Z12不存在,或
[0219]b) Z1 不存在，Z2 为 G，Z3 为 R，Z4 为 B，Z5 为 B，Z6 为 S，Z7 为 S，Z8 为 V，Z9 为 N，Z10 为K，Z11不存在并且Z12不存在，或
[0220]c) Z1 不存在，Z2 不存在，Z3 为 R，Z4 为 B，Z5 为 B，Z6 为 S，Z7 为 S，Z8 为 V, Z9 为 N，Z10 为K，Z11为M,并且Z12不存在。
[0221]在也是第一方面的第31、32和33实施方案的实施方案的第一方面的第37实施方案中，第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6SAKS’并且第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列 5’ CKVZ7Z8Z9Z1(lZnZ123’，
[0222]其中
[0223]a) Z1 不存在，Z2 不存在，Z3 为 R，Z4 为 B，Z5 为 B，Z6 为 S，Z7 为 S，Z8 为 V, Z9 为 N，Z10为K，Z11不存在并且Z12不存在，或
[0224]b) Z1 不存在，Z2 不存在，Z3 为 R，Z4 为 B，Z5 为 B，Z6 为 S，Z7 为 S，Z8 为 V, Z9 为 N，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或
[0225]c) Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4为B，Z5为B，Z6为S，Z7为S，Z8为V，Z9为N，Z10为K，Z11不存在并且Z12不存在，
[0226]优选第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6GAGS’并且第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CTCZ7Z8Z9Z1(lZnZ123’，
[0227]其中
[0228]a) Z1 不存在，Z2 不存在，Z3 为 A，Z4 为 C，Z5 为 T，Z6 为 C，Z7 为 G，Z8 为 A，Z9 为 G，Zltl为T，Z11不存在并且Z12不存在，或
[0229]b) Z1 不存在，Z2 不存在，Z3 为 A，Z4 为 C，Z5 为 T，Z6 为 C，Z7 为 G，Z8 为 A，Z9 为 G，Zltl不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或
[0230]c) Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4为C，Z5为T，Z6为C，Z7为G，Z8为A，Z9为G，Z10为T，Z11不存在并且Z12不存在，
[0231]优选Z1不存在，Z2不存在，Z3为A，Z4为C，Z5为T，Z6为C，Z7为G，Z8为A，Z9为G，
Z10为T，Z11不存在并且Z12不存在。
[0232]在也是第一方面的第31、32和33实施方案的第一方面的第38实施方案中，第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6SAKS’并且第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列 5’ CKVZ7Z8Z9Z1QZnZ123’，
[0233]其中
[0234]a) Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4为B，Z5为B, Z6为S，Z7为S，Z8为V，Z9为N，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或
[0235]b) Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5为B，Z6为S，Z7为S，Z8为V，Z9为N，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或
[0236]c) Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4为B，Z5为B, Z6为S，Z7为S，Z8为V，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，
[0237]优选第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6SAGS’并且第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CTSZ7Z8Z9Z1(lZnZ123’，
[0238]其中
[0239]a) Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4为B，Z5为B, Z6为S，Z7为S，Z8为S，Z9为V,Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或
[0240]b) Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5为B，Z6为S，Z7为S，Z8为S，Z9为V, Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或
[0241]^Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4为B，Z5为B, Z6为S，Z7为S，Z8为S，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在。[0242]在也是第一方面的第38实施方案的第一方面的第39实施方案中，
[0243]a)第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ GTCGAG3’并且第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CTCGAC3’，或
[0244]b)第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ TGCGAG3’并且第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CTCGCA3’，或
[0245]c)第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ GGCCAG3’并且第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CTGGCC3’，或
[0246]d)第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ GCCGAG3’并且第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CTCGGC3’，或
[0247]e)第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CTCGAG3’并且第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CTCGAG3’。
[0248]在也是第一方面的第31、32和33实施方案的第一方面的第40实施方案中，第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6SAKS’并且第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列 5’ CKVZ7Z8Z9 Z1QZnZ123’，
[0249]其中
[0250]a) Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5为B，Z6为S，Z7为S，Z8为V，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或
[0251]WZ1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5为B，Z6为S，Z7为S，Z8不存在，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或
[0252]c) Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5不存在，Z6为S，Z7为S，Z8为V,Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，
[0253]其中优选第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6GAGS’并且第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5，CTCZ7Z8Z9ZiciZ11Z1J’，
[0254]其中
[0255]a) Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5为T，Z6为C，Z7为G，Z8为A，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或
[0256]b) Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5为T，Z6为C，Z7为G, Z8不存在，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或
[0257]c) Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5不存在，Z6为C，Z7为G，Z8为A，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在。
[0258]在也是第一方面的第31、32和33实施方案的第一方面的第41实施方案中，第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6SAKS’并且第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列 5’ CKVZ7Z8Z9Z1QZnZ123’，
[0259]其中
[0260]a) Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5不存在，Z6为S，Z7为S，Z8不存在，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或
[0261]WZ1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5不存在，Z6不存在，Z7为S，Z8不存在，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或
[0262]c) Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5不存在，Z6为S，Z7不存在，Z8不存在，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在。
[0263]在也是第一方面的第31、32和33实施方案的第一方面的第42实施方案中，第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6SAKS’并且第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列 5’ CKVZ7Z8Z9Z1QZnZ123’，
[0264]其中Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5不存在，Z6不存在，Z7不存在，Z8不存在，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或
[0265]其中第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6GAGS’并且第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CTCZ7Z8Z9Z1(lZnZ123’，
[0266]其中Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5不存在，Z6不存在，Z7不存在，Z8不存在，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在。
[0267]在也是第一方面的第26、27、28、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41 和 42 实施方案的第一方面第43实施方案中，核酸分子包含选自SEQ ID NO:50,SEQ ID NO:54、SEQID NO:58, SEQ ID NO:59, SEQ ID NO:88 和 SEQ ID NO:155 的核苷酸序列，或
[0268]核酸分子与包含选自SEQ ID NO:50、SEQ ID NO:54、SEQ ID NO:58、SEQ ID NO:59,SEQ ID N0:88和SEQ ID NO:155的核苷酸序列的核酸分子具有至少85%的同一性，或 [0269]核酸分子与包含选自SEQ ID NO:50、SEQ ID NO:54、SEQ ID NO:58、SEQ ID NO:
59、SEQ ID N0:88和SEQ ID NO:155的核苷酸序列的核酸分子同源，其中同源性为至少85%。
[0270]在也是第一方面的第26、27、28、29、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41 和 42 实施方案的实施方案的第一方面的第44实施方案中，核酸分子包含选自SEQ ID NO:7U SEQID NO:81、SEQ ID NO:82、SEQ ID NO:89、SEQ ID NO:90、SEQ ID NO:156 和 SEQ ID NO:157的核苷酸序列，或
[0271]核酸分子与包含选自SEQ ID NO:71、SEQ ID NO:81、SEQ ID NO:82、SEQ ID NO:89、SEQ ID NO:90、SEQ ID NO:156和SEQ ID NO:157的核苷酸的核酸分子具有至少85%的同一性，或
[0272]核酸分子与包含选自SEQ ID NO:71、SEQ ID NO:81、SEQ ID NO:82、SEQ ID NO:89,SEQ ID NO:90,SEQ ID NO:156和SEQ ID NO:157的核苷酸序列的核酸分子同源，其中同源性为至少85%。
[0273]在也是第一方面的第I实施方案的实施方案的第45实施方案中，核酸分子是C型的核酸分子，
[0274]其中C 型的核酸分子包含选自 SEQ ID NO:83 ；SEQ ID NO:84,SEQ ID NO:85、SEQID NO:86, SEQ ID NO:87, SEQ ID NO:97 和 SEQ ID NO:102 的核苷酸序列，或
[0275]其中核酸分子与包含选自SEQ ID NO:83、SEQ ID NO:84，SEQ ID NO:85，SEQ IDNO:86, SEQ ID NO:87, SEQ ID NO:97和SEQ ID NO:102的核苷酸序列的核酸分子具有至少85%的同一性，或
[0276]其中核酸分子与包含选自SEQ ID NO:83、SEQ ID NO:84、SEQ ID NO:85、SEQ IDNO:86,SEQ ID NO:87、SEQ ID NO:97和SEQ ID NO:102的核苷酸序列的核酸分子同源，其中同源性为至少85%。
[0277]在也是第一方面的第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44 和 45
实施方案的实施方案的第一方面的第46实施方案中，核酸分子的核苷酸或形成所述核酸分子的核苷酸为L-核苷酸。
[0278]在也是第一方面的第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44 和 45实施方案的实施方案的第一方面的第47实施方案中，核酸分子为L-核酸分子。
[0279]在也是第一方面的第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46和47实施方案的实施方案的第一方面的第48实施方案中，核酸分子包含至少一个结合部分，其能够结合胰高血糖素，其中这样的结合部分由L-核苷酸组成。
[0280]在也是第一方面的第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47和48实施方案的实施方案的第一方面的第49实施方案中，核酸分子为通过胰高血糖素介导的活性的拮抗剂。
[0281]在也是第一方面的第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48和49实施方案的实施方案的第一方面的第50实施方案中，核酸分子能够结合GIP。
[0282]在也是第一方面的第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49和50实施方案的实施方案的第一方面的第51实施方案中，核酸分子为通过GIP介导的活性的拮抗剂。
[0283]在也是第一方面的第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50和51实施方案的实施方案的第一方面的第52实施方案中，核酸分子包含修饰基团，其中包含修饰基团的核酸分子从生物体的排泄率相较于不包含修饰基团的核酸分子减小。
[0284]在也是第一方面的第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、 48、49、50和51实施方案的实施方案的第一方面第53实施方案中，核酸分子包含修饰基团，其中包含修饰基团的核酸分子相较于不包含修饰基团的核酸分子在生物体中具有增加的停留时间。
[0285]在也是第一方面的第52和53实施方案的实施方案的第一方面的第54实施方案中，修饰基团选自生物可降解的和非生物可降解的修饰，优选修饰基团选自聚乙二醇、线性聚乙二醇、分枝聚乙二醇、羟乙基淀粉、肽、蛋白质、多糖、固醇、聚氧丙烯、聚氧酰胺和聚(2-轻乙基)-L-谷氨酰胺。
[0286]在也是第一方面的第54实施方案的实施方案的第一方面的第55实施方案中，修饰基团为由线性聚乙二醇或分枝聚乙二醇组成的聚乙二醇，其中聚乙二醇的分子量优选为约20，000至约120，OOODa,更优选约30，000至约80，OOODa和最优选约40，OOODa。[0287]在也是第一方面的第54实施方案的实施方案的第一方面的第56实施方案中，修饰基团为羟乙基淀粉，其中羟乙基淀粉的分子量为约50kDa至约1000kDa,更优选约IOOkDa至约700kDa和最优选300kDa至500kDa。
[0288] 在也是第一方面的第52、53、54、55和56实施方案的实施方案的第一方面的第57实施方案中，修饰基团通过接头偶联于核酸分子，其中优选地接头是生物可降解接头。
[0289]在也是第一方面的第52、53、54、55和56实施方案的实施方案的第一方面的第58实施方案中，修饰基团偶联于核酸分子的5’-末端核苷酸和/或核酸分子的3’-末端核苷酸和/或所述核酸分子的5’ -末端核苷酸与所述核酸分子的3’ -末端核苷酸之间的核苷酸。
[0290]在也是第一方面的第52、53、54、55、56、57和58实施方案的实施方案的第一方面的第59实施方案中，生物体是动物体或人体，优选人体。
[0291]本发明要解决的问题在也是第二方面的第一实施方案的第二方面中通过用于治疗和/或预防疾病或障碍或高胰增血糖素血症的方法的核酸分子得以解决，所述核酸分子是根据第一方面的第 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、
48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58和59实施方案的任一个的核酸分子。
[0292]在也是第2方面的第I实施方案的实施方案的第2方面的第2实施方案中，疾病或障碍选自糖尿病、糖尿病并发症和糖尿病病况。
[0293]在也是第2方面的第2实施方案的实施方案的第2方面的第3实施方案中，糖尿病选自I型糖尿病、2型糖尿病和妊娠糖尿病。
[0294]在也是第2方面的第3实施方案的实施方案的第2方面的第4实施方案中，糖尿病并发症或糖尿病病况是选自下列的糖尿病并发症或糖尿病病况:动脉粥样硬化、冠状动脉疾病、糖尿病足疾病、糖尿病视网膜病变、增生型糖尿病视网膜病变、糖尿病黄斑水肿、糖尿病性玻璃体视网膜病变、增生型糖尿病性玻璃体视网膜病变、糖尿病肾病、糖尿病神经病变、葡萄糖耐受不良、心脏病、高血压、高胆固醇、葡萄糖耐量降低、无力、胰岛素抵抗、肾功能衰竭、代谢综合征、非酒精性脂肪肝病、具有或不具有纤维化的非酒精性脂肪性肝炎、外周血管病、减小的葡萄糖敏感性、减小的胰岛素敏感性、肥胖、脂肪肝、高血糖、糖尿病相关性血管炎症、糖尿病酮症酸中毒、高渗性非酮症高血糖昏迷、体重减轻坏死松解性游走性红斑、贫血、在正常凝血功能存在的情况下的静脉血栓形成和神经精神表现。
[0295]本发明要解决的问题在也是第3方面的第I实施方案的第3方面中通过药物组合物得以解决，所述药物组合物包含根据第一方面的第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58 和 59 实施方案的任一个的核酸分子和任选地其它组分，其中所述组分选自药学上可接受的赋形剂、药学上可接受的载体和药物活性剂。
[0296]在也是第三方面的第一实施方案的实施方案的第三方面的第二实施方案中，药物组合物包含根据第一方面的第 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58和59实施方案的任一个的核酸分子以及药学上可接受的载体。
[0297]本发明要解决的问题在也是第4方面的第I实施方案的第4方面中通过核酸分子用于制造药剂的用途得以解决，所述核酸分子是根据第一方面的第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58 和 59
实施方案的任一个核酸分子。
[0298]在也是第4方面的第I实施方案的实施方案的第4方面的第2实施方案中，药剂用于人药剂或用于兽用药剂。[0299]本发明要解决的问题在也是第5方面的第I实施方案的第5方面中通过核酸分子用于制造诊断装置的用途得以解决，所述核酸分子是根据第一方面第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58 和 59
实施方案的任一个的核酸分子。
[0300]在也是第4方面的第I实施方案的实施方案的第4方面的第3实施方案中，药剂用于治疗和/或预防疾病或障碍或高胰增血糖素血症，其中所述疾病或障碍选自糖尿病、糖尿病并发症和糖尿病病况。
[0301]在也是第4方面的第3实施方案的实施方案的第4方面的第4实施方案中，糖尿病选自I型型糖尿病、2型糖尿病和妊娠糖尿病。
[0302]在也是第4方面的第3实施方案的实施方案的第4方面的第5实施方案中，糖尿病并发症或糖尿病病况是选自下列的糖尿病并发症或糖尿病病况:动脉粥样硬化、冠状动脉疾病、糖尿病足疾病、糖尿病视网膜病变、增生型糖尿病视网膜病变、糖尿病黄斑水肿、糖尿病性玻璃体视网膜病变、增生性糖尿病性玻璃体视网膜病变、糖尿病肾病、糖尿病神经病变、葡萄糖耐受不良、心脏病、高血压、高胆固醇、葡萄糖耐量降低、无力、胰岛素抵抗、肾功能衰竭、代谢综合征、非酒精性脂肪肝病、具有或不具有纤维化的非酒精性脂肪性肝炎、外周血管病、减小的葡萄糖敏感性、减小的胰岛素敏感性、肥胖、脂肪肝、高血糖、糖尿病相关性血管炎症、糖尿病酮症酸中毒、高渗性非酮症高血糖昏迷、体重减轻坏死松解性游走性红斑、贫血、在正常凝血功能存在的情况下的静脉血栓形成和神经精神表现。
[0303]本发明要解决的问题在也是第6方面的第一实施方案的第6方面中通过包含权利要求I至59的任一项的核酸分子和胰高血糖素和/或GIP的复合物得以解决，其中优选所述复合物是晶体复合物。
[0304]本发明要解决的问题在也是第7方面的第一实施方案的第7方面中通过核酸分子用于检测胰高血糖素和/或GIP的用途得以解决，所述核酸分子是根据第一方面的第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、
56、57、58和59实施方案的任一个核酸分子。
[0305]本发明要解决的问题在也是第8方面的第一实施方案的第8方面中通过方法得以解决，所述方法用于筛选由胰高血糖素和/或GIP介导的活性的拮抗剂，其包括下列步骤:
[0306]-提供由胰高血糖素和/或GIP介导的活性的候选拮抗剂，
[0307]-提供第一方面的第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58和59实施方案的任一个中定义的核酸分子，
[0308]-提供在胰高血糖素和/或GIP介导的活性的拮抗剂存在的情况下提供信号的测试系统，和
[0309]-确定由胰高血糖素和/或GIP介导的活性的候选拮抗剂是否是由胰高血糖素和/或GIP介导的活性的拮抗剂。
[0310]本发明要解决的问题在也是第9方面的第一实施方案的第9方面中通过试剂盒得以解决，所述试剂盒用于检测胰高血糖素，其包含根据第一方面的第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、
35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58和 59
实施方案的任一个的核酸分子。
[0311]本发明要解决的问题在也是第10方面的第一实施方案的第10方面中通过方法得以解决，所述方法用于检测样品中的第一方面的第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58 和 59 实施方案的任一个
中定义的核酸，其中所述方法包括步骤:
[0312]a)提供捕获探针，其中所述捕获探针与第一方面的第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、
36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58和 59 实施方案的任一个中定义的核酸分子的第一部分至少部分互补，和检测探针，其中检测探针与第一方面的第 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58和59实施方案的任一个中定义的核酸分子的第二部分至少部分互补；或者，捕获探针与第一方面的第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58 和 59 实施方案的至少一个中定义的核酸分子的第二部分至少部分互补，以及检测探针与第一方面的第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51，52，53，54、55、56、57、58 和 59实施方案的任一个中定义的核酸分子的第一部分至少部分互补；
[0313]b)将捕获探针和检测探针分别地或组合地添加至样品，所述样品包含第一方面的第 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、 29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58和59实施方案的任一个中定义的核酸分子或假定包含第一方面的第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58和59实施方案的任一个中定义的核酸分子；
[0314]c)使捕获探针和检测探针同时或以任意顺序依次与核酸分子或其部分反应，所述核酸分子是如第一方面的第 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58 和 59 的任一个中定义的；
[0315]d)任选地检测捕获探针是否与核酸分子杂交，所述核酸分子是如步骤a)中提供的第一方面的第 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、
50、51、52、53、54、55、56、57、58和59实施方案的任一个中定义的；和
[0316]e)检测步骤c)中形成的由核酸分子与捕获探针和检测探针组成的复合物，所述核酸分子是如第一方面的第 1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、
46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58 和 59 实施方案的任一个中定义的。
[0317]在也是第10方面的第I实施方案的实施方案的第10方面的第2实施方案中，检测探针包括检测装置， 和/或其中捕获探针被固定于载体，优选固体载体。
[0318]在也是第10方面的第I和2实施方案的实施方案的第10方面的第3实施方案中，从反应物除去不为步骤c)中形成的复合物的部分的任何检测探针以便在步骤e)中仅检测是所述复合物的部分的检测探针。
[0319]在也是第10方面的第1、2和3实施方案的实施方案的第10方面的第4实施方案中，步骤e)包括步骤:比较当捕获探针与检测探针在第一方面或的第1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58 和 59
实施方案的任一个中定义的核酸分子或其部分存在的情况下，和在所述核酸分子或其部分不存在的情况下杂交时，通过检测装置产生的信号。
[0320]然而不希望受任何理论束缚，本发明人已发现根据本发明的核酸分子以高亲和力特异性结合胰高血糖素，从而抑制胰高血糖素对其胰高血糖素受体的结合和/或从而，直接或间接用于糖尿病、糖尿病并发症、糖尿病病况和/或高胰增血糖素血症和用于其治疗。此外，本发明人已发现根据本发明的核酸分子适合阻断胰高血糖素与胰高血糖素受体的相互作用。根据本发明的核酸分子还可被视为胰高血糖素受体的拮抗剂和作为胰高血糖素的作用、特别是胰高血糖素对其受体的作用的拮抗剂。
[0321]胰高血糖素的拮抗剂是结合胰高血糖素的分子-例如根据本发明的核酸分子-并且抑制胰高血糖素的功能，特别是在实施例中描述的体外测定或体内模型中。
[0322]对于可通过使用根据本发明的核酸分子或组合物，优选包含所述核酸分子的药物组合物治疗或预防的各种疾病、病况和障碍，必须认识到这样的疾病、病况和障碍是本文中描述的那些疾病、病况和障碍，包括特别地本申请的引文部分描述和所示的那些疾病、况和障碍。说明书的各个段落和说明书的引文部分形成了本公开内容的完整部分，该部分教导本发明的核酸分子用于所述疾病、病况和障碍的预防和治疗的适合性。
[0323]此外，根据本发明的核酸分子是优选的，如果胰高血糖素-胰高血糖素受体的生理作用与更高水平的血浆胰高血糖素相关的话。
[0324]如本文中所用，术语胰高血糖素是指任何胰高血糖素，包括但不限于哺乳动物胰高血糖素。优选地，哺乳动物胰高血糖素选自人、大鼠、小鼠、猴、猪、兔、仓鼠、狗、绵羊、鸡和牛胰高血糖素(参见图22的胰高血糖素种类比对)。更优选地，胰高血糖素是人胰高血糖素。各种胰高血糖素的氨基酸序列对于本领域技术人员来说是已知的，除其它以外，示于图22中。
[0325]胰高血糖素的拮抗剂是结合胰高血糖素的分子-例如根据本发明的核酸分子-并且优选在实施例中描述的体外测定或体内模型中抑制胰高血糖素的功能。
[0326]此外，本发明人已发现根据本发明的B型的核酸分子抑制胰高血糖素对其胰高血糖素受体的结合以及GIP对其受体的结合。此外，根据本发明的B型的核酸分子适合于阻断胰高血糖素与胰高血糖素受体以及GIP与GIP受体的相互作用。根据本发明的B型的核酸分子还可被视为胰高血糖素受体的拮抗剂和GIP受体的拮抗剂。
[0327]GIP的拮抗剂是结合GIP的分子-例如根据本发明的核酸分子_并且优选在实施例中描述的体外测定或体内模型中抑制GIP的功能。
[0328]如本文中所用，术语GIP是指任何GIP，包括但不限于哺乳动物GIP。更优选，GIP为人GIP。GIP的氨基酸序列对于本领域技术人员来说是已知的，除其它以外，示于本文中公开的 SEQ ID NO:168。
[0329]在本发明内的是根据本发明的核酸是核酸分子。在这个范围内，术语核酸和核酸分子在本文中以同义的方式使用，如果无相反说明的话。此外，这样的核酸优选在本文中也被称为根据本发明的核酸分子，根据本发明的核酸，本发明核酸或本发明核酸分子。
[0330]如本文中描 述的根据本发明的核酸的性质可在其中单独地或以任意组合地使用所述核酸的本发明的任何方面中实现。
[0331]如本文中更详细概述的，本发明人已鉴定了许多不同的胰高血糖素结合性核酸分子，其中可根据在本文中也称为如所公开的核苷酸的区段表征所述核酸分子(参见实施例1)。如实施例8中在实验上显示的，本发明人可令人惊讶地在几个系统中显示根据本发明的核酸分子适合用于治疗糖尿病。
[0332]结合胰高血糖素和/或GIP的本发明的胰高血糖素结合性核酸分子的不同类型的每一个包括3个不同的核苷酸的区段:第一末端核苷酸区段、中央核苷酸区段和第二末端核苷酸区段。一般而言，本发明的胰高血糖素结合性核酸分子在其5’ -末端和3’ -末端各自包含核苷酸的末端区段之一，即第一末端核苷酸区段或和第二末端核苷酸区段(也称为核苷酸的5’ -末端区段和核苷酸的3’ -末端区段)。第一末端核苷酸区段和第二末端核苷酸区段可因其碱基互补而在原则上彼此杂交，从而在杂交后，形成双链结构。然而，这样的杂交在生理和/或非生理条件下在分子中不一定实现。胰高血糖素结合性核酸分子的核苷酸的3个区段-第一末端核苷酸区段、中央核苷酸区段和第二末端核苷酸区段-彼此以5’一 3’-方向排列:第一末端核苷酸区段-中央核苷酸区段-第二末端核苷酸区段。或者，第二末端核苷酸区段、中央核苷酸区段和第一末端核苷酸区段以彼此以5’ 一 3’ -方向排列。
[0333]不同的胰高血糖素结合性核酸分子之间的确定的区段的序列的差异可影响对胰高血糖素和/或GIP的结合亲和力。基于本发明的不同胰高血糖素结合性核酸分子的结合分析，中央区段和形成中央区段的核苷酸单个地、更优选在其整体上对于对胰高血糖素和/或GIP的结合是必需的。
[0334]术语‘区段’和‘核苷酸的区段’在本文中以同义的方式使用，如果没有相反指明的话。[0335]在优选实施方案中，根据本发明的核酸分子是单个核酸分子。在其它实施方案中，单个核酸分子以许多单个核酸分子或以许多单个核酸分子种类的形式存在。
[0336]本领域技术人员将认识到根据本发明的核酸分子优选由彼此共价连接(优选通过磷酸二酯键)的核苷酸组成。
[0337]在本发明的范围内的是，根据本发明的核酸分子包含两个或更多个区段或其部分，所述区段原则上可彼此杂交。在这样的杂交后，形成双链结构。本领域技术人员将认识到，这样的杂交可以存在或可以不存在，特别地在体外和/或体内条件下。同样的，在杂交的情况下，这样的杂交不一定在两个区段的整个长度上存在，其中，至少基于碱基配对法贝U，这样的杂交和从而双链结构的形成在原则上可以发生。如本文中优选使用的，双链结构是核酸分子的部分或通过两个或更多个单独的链或核酸分子的单链的两个空间上分开的区段形成的结构，其中至少一个，优选2或更多个优选按照沃尔森-克里克碱基配对法则进行碱基配对的碱基对存在。本领域技术人员还将认识到，其它碱基配对例如Hoogsten碱基配对可存在于这样的双链结构中或可形成这样的双链结构。还将认识到，两个区段杂交的特性优选地显示这样的杂交假定因两个区段的碱基互补性而发生，无论这样的杂交在体内和/或体外实际上是否发生。
[0338]在优选实施方案中，如本文中所用，术语排列意指与本文中公开的核酸分子相关的本文中描述的结构或功能特性或元件的顺序或序列。
[0339]本领域技术人员将认识到，根据本发明的核酸分子能够结合胰高血糖素和/或GIP0不希望受任何理论束缚，本发明人假定胰高血糖素结合和/或GIP结合因本发明的核酸分子的三维结构特性或元件的组合而导致，所述三维结构特性或元件是由形成这样的特性或元件的本发明的核酸分子的核苷酸的一级序列的取向和折叠模式导致的，其中优选地这样的特性或元件是本发明的核酸分子的第一末端核苷酸区段、中央核苷酸区段和/或第二末端核苷酸区段。很明显，单个特性或元件可通过各种不同的单个序列形成，其变化的程度可取决于这样的元件或特性必需形成以介导本发明的核酸分子对胰高血糖素和/或GIP的结合的三维结构。本发明的核酸的总体结合特性分别地由各种元件和特性的相互作用而引起，这最终导致本发明的核酸分子分别地与其靶即胰高血糖素和GIP的相互作用。再次不希望受任何理论束缚，作为本发明的核酸的特征的中央核苷酸区段对于介导本发明的核酸分子与胰高血糖素和/或GIP的结合是非常重要的。因此，根据本发明的核酸分子能够与胰高血糖素相互作用。同样地，本领域技术人员将认识到，根据本发明的核酸分子是胰高血糖素和/或GIP的拮抗剂。由此，根据本发明的核酸分子适合用于分别地治疗和预防与胰高血糖素和/或GIP相关或由其引发的任何疾病或病况。这样的疾病和病况可来自于确定胰高血糖素和/或GIP分别地参与所述疾病和病况或与其相关的现有技术，并将所述技术通过引用并入本文，从而提供关于本发明的核酸分子的治疗性用途的科学原理。
[0340]根据本发明的核酸分子还包括与本文中公开的特定核苷酸序列基本上同源的核酸分子。术语大体上同源的应当被理解为例如同源性为至少75%，优选至少85%，更优选至少90%，最优选超过至少95%、96%、97%、98%或99%。
[0341]根据本发明的核酸分子中存在的同源核苷酸的实际百分比将取决于存在于核酸中的核苷酸的总数。百分比变化可基于存在于核酸分子中的核苷酸的总数。
[0342]可如本领域技术人员已知的，测定两个核酸分子之间的同源性。更具体地，序列比较算法可用于基于指定的程序参数计算测试序列相对于参照序列的百分比序列同源性。测试序列优选是被认为针对不同核酸分子是同源的或待测试其是否是同源的，并且如果是，达到什么程度的序列或核酸分子，其中这样的不同核酸分子也称为参照序列。在一个实施方案中，参照序列是如本文中描述的核酸分子，优选具有根据SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:43, SEQ ID NO: 47, SEQ ID NO: 48、SEQ ID NO:9USEQ ID NO:92、SEQ ID NO:
71、SEQ ID NO:81、SEQ ID NO:82、SEQ ID NO:88、SEQ ID NO:89、SEQ ID NO:90、SEQ IDNO:50, SEQ ID NO:54或SEQ ID NO:59的任一个的序列的核酸分子。用于比较的序列的最佳比对可以例如通过Smith&Waterman的局部同源性算法(Smith&Waterman, 1981),通过Needleman&Wunsch 的同源性比对算法(Needleman&Wunsch, 1970),通过 Pearson&Lipman的相似性搜索法(Pearson&Lipman, 1988),通过这些算法的计算机化执行(WisconsinGenetics 软件包，Genetics Computer Group, 575Science Dr., Madison, ffis.中的 GAP、BESTFIT、FASTA和TFASTA)，或通过目测观察来进行。
[0343]适合用于测定百分比序列同一性的算法的一个实例是用于基本局部比对搜索工具(在下文中称为"BLAST")中的算法，参见，例如，Altschul等人(Altschul等人1990和Altschul等人，1997)。用于进行BLAST分析的软件是可通过国家生物技术信息中心(在下文中称为"NCBI")公共获得的。用于使用可从NCBI获得的软件例如BLASTN(用于核苷酸序列)和BLASTP (用 于氨基酸序列)测定序列同一性的缺省参数描述于McGinnis等人(McGinnis 等人，2004)中。
[0344]根据本发明的核酸分子还将包括根据其核苷酸序列确定的相对于本文中公开的本发明的核酸具有一定程度的同一性的核酸分子。更优选地，本发明还包括根据其核苷酸序列确定的相对于本发明的核酸分子具有至少75%,优选至少85%,更优选至少90%,最优选超过至少95 %、96 %、97 %、98 %或99 %的同一性的那些核酸分子或其部分。
[0345]术语本发明的核酸或根据本发明的核酸分子还可包括这样的核酸分子或其部分，所述核酸分子或其部分包含本文中公开的核酸序列(例如根据本发明的核酸的代谢物或衍生物)，优选达到所述核酸分子或所述部分参与或能够结合胰高血糖素的程度。这样的核酸分子可通过例如截短从本文中公开的核酸分子产生。截短可涉及本文中公开的本发明的核酸分子的一个或两个末端。同样地，截短还可涉及核苷酸的内部序列，即其可分别地涉及5’末端核苷酸与3’末端核苷酸之间的一个或数个核苷酸。此外，截短可包括小至单个核苷酸从本文中公开的本发明的核酸分子的序列的缺失。截短还可涉及本发明的核酸分子的超过一个核苷酸的区段，其中核苷酸的区段可小至I个核苷酸长。可由本领域技术人员使用常规实验或通过使用或采用本文中描述的方法，优选在本文中实施例部分描述的方法来测定根据本发明的核酸分子的结合。
[0346]根据本发明的核酸分子可以是D-核酸分子或L-核酸分子。优选地,根据本发明的核酸分子为L-核酸分子。
[0347]还在本发明内的是,在一个实施方案中，本文中描述的核酸分子的每一个和任一个根据其核酸序列在其整体性上限定于特定指定的核苷酸序列。换句话说，术语“包含”或“含有”在这样的实施方案中应当以包括或由……组成的含义来解释。
[0348]也在本发明内的是根据本发明的核酸分子是更长的核酸的部分，其中该更长的核酸包含几个部分，其中至少一个这样的部分为本发明的核酸分子或其部分。这样的更长的核酸的其它部分可以是一个或数个D-核酸或L-核酸。可将任意组合与本发明结合使用。这些更长核酸的其它部分可显示与结合、优选与对胰高血糖素和/或GIP的结合不同的功能。一个可能的功能是允许与其它分子相互作用，其中这样的分子优选与胰高血糖素不同，例如用于固定、交联、检测或扩增。在其它实施方案中，根据本发明的核酸分子包括几个本发明的核酸分子作为单个部分或组合部分。这样的包含几个本发明的核酸分子的核酸也包括在术语更长的核酸内。
[0349]如本文中所用，L-核酸为由L-核苷酸组成，优选完全由L-核苷酸组成的核酸或核酸分子。
[0350]如本文中所用，D-核酸为由D-核苷酸组成，优选完全由D-核苷酸组成的核酸或核酸分子。
[0351 ] 术语核酸和核酸分子在本文中以可互换的方式使用，如果未明确地指出相反的话。
[0352]同样的，如果无相反说明的话，任何核苷酸序列在本文中以5’ 一 3’方向显示。
[0353]如本文中优选使用的，核苷酸的任何位置是相对于包含这样的核苷酸的序列、区段或子区段的5’末端测定的或提及的。因此，第二核苷酸为分别从序列、区段和子区段的5’末端计数的第二核苷酸。同样地，与其一致地，倒数第二核苷酸为分别从序列、区段和子区段的3’末端计数的第二核苷酸。
[0354]不论本发明的核酸分子由D-核苷酸、L-核苷酸组成还是由两者的组合组成(所述组合为由至少一个L-核苷酸和至少一个D-核酸组成的区段的随机组合或确定的序列)，核酸都可由脱氧核糖核苷酸、核糖核苷酸或其组合组成。
[0355]也在本发明内的是核酸分子由核糖核苷酸和2’脱氧核糖核苷酸组成。2’脱氧核糖核苷酸和核糖核苷酸示于图29和30A-B中。为了区分根据本发明的核酸分子的序列中的核糖核苷酸与2’脱氧核糖核苷酸，在本文中使用下列参考码。
[0356]根据本发明的核酸分子主要由2’脱氧核糖核苷酸组成，其中优选地
[0357]G为2’脱氧-鸟苷-5’ -单磷酸，
[0358]C为2’脱氧-胞苷-5’ -单磷酸，
[0359]A为2 ’脱氧-腺苷-5 ’ -单磷酸，
[0360]T为2 ’脱氧-胸苷-5 ’ -单磷酸，
[0361]rG为鸟苷-5’ -单磷酸，
[0362]rC为胞苷5’-单磷酸，
[0363]rA为腺苷-5’ -单磷酸，
[0364]rU为尿苷-5’ -单磷酸，
[0365]rT为胸苷-5’ -单磷酸。
[0366]根据本发明的核酸分子主要由核糖核苷酸组成,其中优选地
[0367]G为鸟苷-5’-单磷酸，
[0368]C为胞苷5’ -单磷酸，
[0369]A为腺苷-5’-单磷酸，
[0370]U为尿苷-5’单磷酸，
[0371] dG为2’脱氧-鸟苷-5’ -单磷酸，[0372]dC为2 ’脱氧-胞苷-5，单磷酸，
[0373]dA为2 ’脱氧-腺苷-5 ’ -单磷酸，
[0374]dT为2’脱氧-胸苷-5’ -单磷酸。
[0375]将本发明的核酸分子设计为L-核酸分子因若干原因是优选的。L-核酸分子是天然存在的核酸的对映体。然而，D-核酸分子在水溶液中，特别地在生物系统或生物样品中因核酸酶的广泛存在而不是特别稳定。天然存在的核酸酶，特别地来自动物细胞的核酸酶不能降解L-核酸。因此，L-核酸分子的生物半衰期在这样的系统包括动物和人身体中显著增加。由于缺乏L-核酸分子的降解能力，无核酸酶降解产物产生，从而在这样的系统包括动物和人身体中未观察到从其产生的副作用。这个方面可使L-核酸分子区别于实际上所有其它用于牵涉胰高血糖素的存在的疾病和/或障碍的治疗的化合物。通过与沃森-克里克碱基配对不同的机制特异性结合靶分子的L-核酸分子，或部分地或完全地由L-核苷酸组合成的适体，特别地对于参与适体对祀分子的结合的适体的那些部分，也称为spiegelmer。适体和spiegelmer同样地对于本领域技术人员来说也是已知的，并且除其它以外描述于‘The Aptamer Handbook，(eds.Klussmann, 2006)中。
[0376]也在本发明内的是本发明的核酸分子，不论其以D-核酸、L-核酸还是D，L-核酸存在，或不论其为DNA还是RNA，都可以单链或双链核酸分子的形式存在。通常地，核酸分子是单链核酸分子，其因其一级序列而显示确定的二级结构，从而也可形成三级结构。然而，核酸分子还可以是双 链的，意即彼此互补或部分互补的两条链彼此杂交。
[0377]可修饰本发明的核酸分子。这样的修饰可涉及核酸分子的单个核苷酸，并在本领域是公知的。这样的修饰的实例除其它以外由Venkatesan等人(Venkatesan, Kim等人2003)和Kusser (Kusser2000)进行了描述。这样的修饰可以是所有组成核酸分子的单个核苷酸的一个、数个的2’位置上的H原子、F原子或O-CH3基团和或NH2-基团。同样地，根据本发明的核酸分子可包含至少一个LNA核苷酸。在一个实施方案中，根据本发明的核酸分子由LNA核苷酸组成。
[0378]在实施方案中，根据本发明的核酸分子可以是多部分核酸分子。如本文中所用，多部分核酸分子是由至少两个单独的核酸链组成的核酸分子。这至少两个核酸链形成功能单位，其中功能单位为靶分子的配体，优选地，靶分子的拮抗剂，在本情况下为胰高血糖素和/或GIP的拮抗剂。至少两个核酸链可通过切割本发明的核酸分子以产生至少两条链来从本发明的核酸分子的任一个产生，或通过合成一个对应于本发明的全长核酸分子的第一部分的核酸分子和对应于本发明的全长核酸分子的另一部分的另一个核酸分子来产生。取决于形成全长核酸分子的部分的数目，合成对应数目的具有需要的核苷酸序列的部分。应认识到切割法和合成法都可被用于产生其中存在超过两个上文例举的链的多部分核酸分子。换句话说，至少两条单独的核酸链通常与彼此互补和杂交的两条链不同，尽管所述至少两个单独的核酸链之间可存在一定程度的互补性以及由这样的互补性可导致所述单独的链的杂父。
[0379]最后，也在本发明内的是实现了根据本发明的核酸分子的完全闭合的，即环状结构，即根据本发明的核酸分子在实施方案中是封闭的，优选地通过共价连接，其中更优选这样的共价连接在本文中公开的本发明的核酸分子或其任何衍生物的核酸序列的5’末端与3’末端之间产生。[0380]测定根据本发明的核酸分子的结合常数的可能性是使用实施例3和4中描述的方法，所述方法确认根据本发明的核酸显示有利的Kd值范围的上述发现。为了表达单个核酸分子与靶(在本案例中为胰高血糖素)之间的结合强度的适当量度是所谓的Kd值，该值本身以及用于其测定的方法对于本领域技术人员来说是已知的。
[0381]优选地，根据本发明的核酸显示的Kd值低于I μ M。约I μ M的Kd值被认为是核酸对靶的非特异性结合的特征。如将由本领域技术人员认识到的，一组化合物例如根据本发明的核酸分子的不同实施方案的Kd值在一定范围之内。约I μ M的上述Kd是Kd值的优选上限。靶结合核酸例如本发明的核酸分子之间的Kd的下限可小至约10皮摩或可更高。在本发明内的是单个核酸结合胰高血糖素的Kd值优选在该范围内。Kd值的优选范围可通过选择该范围内的任意第一数值和该范围内的任意第二数值来界定。优选上限Kd值为250ηΜ和ΙΟΟηΜ，优选下限Kd值为50nM、IOnM, InM、IOOpM和ΙΟρΜ。更优选上限Kd值为ΙΟηΜ，更优选下限Kd值为ΙΟΟρΜ。
[0382]除了根据本发明的核酸分子的结合性质以外，根据本发明的核酸分子还抑制各自靶分子(在本情况下为胰高血糖素和/或GIP)的功能。胰高血糖素和/或GIP的功能-例如先前描述的各自受体的刺激-通过根据本发明的核酸分子对胰高血糖素和/或GIP的结合并形成根据本发明的核酸分子和胰高血糖素和/或GIP的复合物来实现。本发明的核酸分子与胰高血糖素和/或GIP的这样的复合物不能刺激通常被胰高血糖素和/或GIP刺激(即不以与本发明的核酸分子的复合物形式存在的胰高血糖素和/或GIP)的受体。因此，根据本发明的核酸分子对受体功能的抑制不依赖可被胰高血糖素和/或GIP刺激的各自受体，相反这样的抑制因根据本发明的核酸分子阻止胰高血糖素和/或GIP对受体的刺激而引起。
[0383]测定根据本发明的核酸分子的抑制常数的可能性是实施例5中描述的方法的使用，所述方法确认了上述发现:根据本发明的核酸显示允许在治疗性治疗方案中使用所述核酸分子的有利的抑制常数。表达单个核酸分子对靶(其在本案例中为胰高血糖素)与各自受体的相互作用的抑制作用的强度的适当量度为所谓的半最大抑制浓度(缩写IC5tl),所述半最大抑制浓度以及用于其测定的方法对于本领域技术人员来说是已知的。
[0384]优选地，根据本发明的核酸分子显示的IC5tl值低于ΙμΜ。约ΙμΜ的IC5tl值被认为是靶功能的非特异性抑制，优选地通过核酸分子产生的对靶对靶受体的激活的抑制的特征。如将由本领域技术人员认识到的，一组化合物例如根据本发明的核酸分子的不同实施方案的IC5tl值在一定范围之内。约I μ M的上述IC5tl是IC5tl值的优选上限。本发明的靶结合核酸分子之间的IC5tl的下限可小至约10皮摩或可更高。在本发明内的是本发明的单个核酸结合胰高血糖素的IC5tl值优选在该范围内。优选范围可通过选择该范围内的任意第一数值和该范围内的任意第二数值来界定。优选上限IC5tl值为250ηΜ和ΙΟΟηΜ，优选下限IC5tl值为50nM、IOnM, InM、IOOpM和ΙΟρΜ。更优选上限IC5tl值为5nM，更优选下限IC5tl值为InM。
[0385]根据本发明的核酸分子可具有任意长度，只要其仍然能够结合靶分子(其在本案例中为胰高血糖素和/或GIP)。在本领域应认识到，存在根据本发明的核酸分子的优选长度。通常地，长度为15至120个核苷酸。本领域技术人员将认识到，15与120之间的任意整数为根据本发明的核酸分子的可能长度。根据本发明的核酸分子的长度的更优选范围为约20至100个核 苷酸，约20至80个核苷酸，约20至60个核苷酸，约20至54个核苷酸以及约39至44个核苷酸。
[0386]在本发明内的是本发明的核酸分子包含部分，所述部分优选为高分子量部分和/或优选允许除其它以外，在动物身体优选人身体中的停留时间方面修饰核酸分子的特征。这样的修饰的特别优选实施方案为根据本发明的核酸的PEG化和HES化。如本文中所用，PEG代表聚(乙二醇)，HES代表羟乙基淀粉。如本文中优选地使用的，PEG化为根据本发明的核酸分子的修饰，其中这样的修饰由连接于根据本发明的核酸分子的PEG部分组成。如本文中优选地使用的，HES化为根据本发明的核酸分子的修饰，其中这样的修饰由连接于根据本发明的核酸分子的HES部分组成。这些修饰以及使用这样的修饰来修饰核酸分子的方法描述于欧洲专利申请EP1306382中，将其公开内容通过引用整体并入本文。
[0387]在PEG为这样的高分子量部分的情况下，分子量优选为约20，000至约120，OOODa,更优选约30，000至约80，OOODa,最优选约40，OOODa0在HES为这样的高分子量部分的情况下，分子量优选为约50kDa至约1000kDa,更优选约IOOkDa至约700kDa和最优选200kDa至500kDa。HES显示0.1对1.5，更优选地I对1.5的摩尔置换，并且显示表达为约0.1至15，优选约3至10的C2/C6比率的置换等级。HES修饰的方法例如描述于德国专利申请DE12004006249.8中，将其公开内容通过引用整体并入本文。
[0388]原则上可在其任意位置上对本发明的核酸分子进行修饰。优选地对核酸分子的5’ -末端核苷酸、3’ -末端核苷酸和/5’核苷酸与3’核苷酸之间的任意核苷酸进行这样的修饰。
[0389]可直接或间接地，优选通过接头间接地将修饰、优选PEG和/或HES部分连接于本发明的核酸分子。也在本发明内的是根据本发明的核酸分子包含一个或多个修饰，优选一个或多个PEG和/或HES部分。在实施方案中，单个接头分子将超过一个PEG部分或HES部分连接于根据本发明的核酸分子。与本发明组合使用的接头可本身为线性的或分枝的。该类型的接头对于本领域技术人员来说是已知的，并进一步描述于国际专利申请W02005/074993 和 TO2003/035665。
[0390]在优选实施方案中，接头为生物可降解接头。生物可降解接头允许除其它以外在动物身体，优选人身体中的停留时间方面(因修饰从根据本发明的核酸分子的释放)修饰根据本发明的核酸分子的特征。生物可降解接头的使用可允许更好地控制根据本发明的核酸分子的停留时间。这样的生物可降解接头的优选实施方案为但不限于在国际专利公布W02006/052790、W02008/034122、W02004/092191 和 W02005/099768 中所描述的生物可降解接头。
[0391] 在本发明内的是修饰或修饰基团为生物可降解修饰，其中可直接或间接地，优选通过接头间接地将生物可降解修饰连接于本发明的核酸分子。生物可降解修饰允许除其它以外在动物身体，优选人身体中的停留时间方面(因修饰从根据本发明的核酸分子的释放或降解)修饰根据本发明的核酸分子的特征。生物可降解接头的使用可允许更好地控制根据本发明的核酸分子的停留时间。这样的生物可降解接头的优选实施方案为但不限于在国际专利公布 W02002/065963、W02003/070823、W02004/113394 和 W02000/41647 中，优选地在W02000/41647,第18页，第4至24行中所描述的生物可降解接头。
[0392]除了上述修饰外，可将其它修饰用于修饰根据本发明的核酸分子的特征，其中这样的其它修饰可选自蛋白质、脂质例如胆固醇和糖链例如淀粉酶、葡聚糖等。[0393] 不希望受任何理论束缚，通过用高分子量部分例如聚合物，更具体地一个或数个本文中公开的聚合物修饰根据本发明的核酸分子(优选所述聚合物是生理上可接受的)，改变本发明的所修饰的核酸分子的排泄动力学。更具体地，由于本发明的修饰的核酸分子的增加的分子量以及由于本发明的核酸分子未经历代谢(特别地当以L型存在时，即为L-核酸分子时)，从动物身体，优选从哺乳动物身体，更优选从人体的排泄减少。由于排泄通常通过肾发生，因此本发明人假定所修饰的核酸分子的肾小球滤过率相较于不具有该类型的高分子量修饰的核酸分子显著减小，这导致修饰的核酸分子在动物体内的停留时间增加。与其相关，特别值得注意的是，尽管存在这样的高分子量修饰，但根据本发明的核酸分子的特异性不以有害方式受到影响。在这个范围内，根据本发明的核酸分子除其它以外具有令人惊讶的特征-所述特征通常不能从药学活性化合物预期-提供持续释放的药物制剂不是提供根据本发明的核酸分子的持续释放所必需的。相反地，包含高分子量部分的以其修饰形式存在的根据本发明的核酸分子因其修饰而本身已被用作正如其充当的持续释放制剂，已如同其从持续释放制剂释放一样。在这个范围内，本文中公开的根据本发明的核酸分子的修饰和所修饰的根据本发明的核酸分子以及包含所述修饰核酸分子的任何组合物提供了其独特的，优选受控的药代动力学及生物分布。这还包括在动物和人体的循环中的停留时间，以及至这样的动物和人的组织的分布。这样的修饰进一步描述于专利申请W02003/035665 中。
[0394]然而，也在本发明内的是根据本发明的核酸分子不包含任何修饰，特别地无高分子量修饰例如PEG或HES。当根据本发明的核酸分子显示至身体的任何靶器官或组织的优先分配时或当期望在施用后从身体快速清除根据本发明的核酸分子时，这样的实施方案是特别优选地。具有至身体的任何靶器官或组织的优先分布的本文中公开的根据本发明的核酸分子可允许在靶组织中建立有效的局部浓度，同时使核酸分子的全身性浓度保持低水平。这可允许低剂量，这不仅从经济的观点来看是有有益的，而且还减少其它组织对核酸分子的不必要暴露，从而减小副作用的潜在风险。除其它以外在体内成像或使用根据本发明的核酸分子或包含所述核酸分子的药剂的特异疗法给药需要的情况下可能期望施用后根据本发明的核酸分子从身体的快速清除。
[0395]根据本发明的核酸分子和/或根据本发明的拮抗剂可用于产生或制造药剂。这样的药剂或根据本发明的药物组合物包含至少一个种类的能够结合胰高血糖素和/或GIP的本发明的核酸分子(任选地与其它药物活性化合物一起)，其中本发明的核酸分子优选本身用作药物活性化合物。这样的药剂在优选实施方案中包含至少药学上可接受的载体。这样的载体可以是例如水、缓冲液、PBS、葡萄糖溶液，优选地5%的葡萄糖，盐平衡溶液、柠檬酸盐、淀粉、糖、明胶或任何其它可接受的载体物质。这样的载体对于本领域技术人员来说通常是已知的。本领域技术人员将认识到，本发明的药剂的或与其相关的任何实施方案、用途和方面也适用于本发明的药物组合物并且反之亦然。
[0396]利用根据本发明的或根据本发明制备的核酸分子、药物组合物和药剂治疗和/或预防的适应症、疾病和障碍因胰高血糖素直接或间接牵涉于各自的发病机制而引起。
[0397]基于胰高血糖素牵涉于与糖尿病相关或牵涉糖尿病的途径，很明显本发明的核酸分子、包含本发明的核酸分子的一个或数个种类的药物组合物以及包含其的一个或数个种类的药剂可用于治疗和/或预防所述疾病、障碍和患病状态。因此，这样的疾病和/或障碍和/或患病状态包括但不限于I型糖尿病、2型糖尿病(包括妊娠糖尿病)、糖尿病并发症、糖尿病病况和/或糖尿病和高胰增血糖素血症以及因其它原因引起的Alstrdm -综合征的后遗症，其中所产生的并发病选自动脉粥样硬化、冠状动脉疾病、糖尿病足疾病、糖尿病视网膜病变、增生型糖尿病视网膜病变、糖尿病黄斑水肿、糖尿病性玻璃体视网膜病变、增生型糖尿病性玻璃体视网膜病变、糖尿病肾病、糖尿病神经病变、妊娠糖尿病、葡萄糖耐受不良、心脏病、高血压、高胆固醇、葡萄糖耐量降低、无力、胰岛素抵抗、肾功能衰竭、代谢综合征、非酒精性脂肪肝病、具有或不具有纤维化的非酒精性脂肪性肝炎、外周血管病、减小的葡萄糖敏感性、减小的胰岛素敏感性、肥胖、脂肪肝、高血糖症、糖尿病酮症酸中毒、以及高渗性非酮症高血糖昏迷、体重减轻坏死松解性游走性红斑(NME)、贫血、在正常凝血功能存在的情况下的静脉血栓形成和神经精神表现(抑郁症、痴呆、失眠症、共济失调)。
[0398]当然，因为根据本发明的胰高血糖素结合性核酸分子与胰高血糖素和/或GIP相互作用或与其结合，因此本领域技术人员通常理解，根据本发明的胰高血糖素结合性核酸分子可容易地用于治疗、预防和/或诊断本文中描述的人和动物的任何疾病。与此有关地，应认识到根据本发明的核酸分子可用于治疗和预防本文中描述的任何疾病、障碍或病况，不论这样的疾病、障碍和病况深层的作用模式如何。[0399]在下文中，提供了将根据本发明的核酸分子与各种疾病、障碍和病况结合使用的合理性，从而使得要求保护的根据本发明的核酸分子的治疗、预防和诊断适用性是合理的。为了避免任何不必要的重复，应当认识到由于胰高血糖素-胰高血糖素受体轴和/或GIP-GIP受体轴的参与(如与其相关地概述的)，所述轴可通过根据本发明的核酸分子来寻址，以便实现所要求保护的治疗、预防和诊断作用。还应当认识到，可将患者的疾病、障碍和病况的特性和结合其描述的治疗方案的任何细节经历本申请的优选实施方案。
[0400]在大部分糖尿病患者中，已报导了在混合膳食或碳水化合物摄入后循环胰高血糖素水平的反常升闻(Ohneda, Watanabe等人1978)。这被视为对升闻的餐后血糖水平的主要贡献者，其在DM的微血管和大血管并发症的病理生理学中起着重要作用(Gin和Rigalleau2000)。
[0401]已报导了大量肽基和非肽基小分子胰高血糖素受体拮抗剂(Jiang和Zhang2003)。这些小分子拮抗剂中的一些(通常具有相当低的对于胰高血糖素受体的亲和力)已显示会降低空腹血糖或在动物模型中阻断外源胰高血糖素-刺激的血糖的升高。非肽基小分子胰高血糖素受体拮抗剂显示以剂量依赖性方式阻断胰高血糖素-诱发的人的肝葡萄糖产量和血糖的升高(Petersen和Sullivan2001)。更近期以来,通过反义寡核苷酸减少db/db-小鼠的胰高血糖素受体表达导致血糖、游离脂肪酸和甘油三酯的减少而不发生低血糖症(Liang, Osborne等人2004)。这些作用对于DM2患者是理想的。
[0402]除那以外，发现胰高血糖素受体敲除小鼠存活并且显示仅轻度的低血糖症、改善的葡萄糖耐受性和升高的胰高血糖素水平的体征。它们对饮食诱发的肥胖具有抗性(Conarello, Jiang等人2007),并且具有更高的胰岛素敏感性,这在β -细胞缺乏的情况下可以是有益的(Sorensen, Winzell等人2006)。此外,胰高血糖素受体敲除小鼠对链脲霉素-诱发的“I型糖尿病表型”具有抗性，即，它们在空腹状态以及在口服和腹膜内葡萄糖耐受性测试中显示血糖量正常(Lee, Wang等人2011)。
[0403]单克隆抗体对胰高血糖素本身的中和还导致血糖、甘油三酯、HbAlc和肝葡萄糖输出量的急性和持续减少(Brand, Rolin等人1994 ；Sorensen, Brand等人2006)。然而，由于它们潜在的免疫原性，这些和其它抗体可能不是用于DM的长期治疗的可行选择。
[0404]基本上，通过降低胰高血糖素水平/活性进行治疗干预的尝试已产生许多支持胰高血糖素拮抗的概念的结果。然而，这样的尝试已产生不具有足够效力的化合物或具有不可接受的肝毒性的化合物。
[0405]I型糖尿病(DMl)的特征在于胰岛素缺乏，所述胰缺乏与DM2相反，不是因胰岛素抵抗而引起的功能缺乏而是因胰腺细胞丢失而引起的绝对缺乏。DMl通常被称为青少年糖尿病，因为其主要在儿童和青少年中发生。在最近公布的研究中，胰高血糖素受体敲除小鼠对链脲霉素-诱导的“I型糖尿病表型”具有抗性，即它们在空腹状态以及在口服和腹膜内葡萄糖耐受性测试后显示血糖量正常(Lee, Wang等人2011)。
[0406]在DMl患者中缺乏胰高血糖素的胰岛素依赖性餐后抑制削弱了葡萄糖耐受性。DM的急性威胁生命的并发症和胰高血糖素-胰岛素-不平衡的直接后果是在过量酮体产生后的糖尿病酮症酸中毒(缩写DKA)和糖尿病并发症如高渗性非酮症高血糖昏迷(缩写HHNK)。在HHNK中，糖尿的渗透作用导致受损的肾脏NaCl，和从而导致水重吸收，从而导致高钠血症(Wahid, Naveed等人2007)。还可在DM2的胰岛素依赖性病例中观察到DKA和HHNK。
[0407]神经内分泌瘤是罕见肿瘤，其可导致通常由它们所源自的细胞产生的各自激素的过表达。因此,高胰增血糖素血症由胰高血糖素-生成细胞的增生或肿瘤形成(胰高血糖素瘤)，例如α-细胞来源的肿瘤引起。同样地，其中肠高血糖素、胃泌酸调节素和GLP-1从胰高血糖素基因转录物产生的肠郎格尔汉斯细胞的肿瘤形成可导致这些肽的过表达或胰高血糖素的过表达(如果处理偏移的话)。
[0408]高胰增血糖素血症可导致并发症例如糖尿病、酮酸症和体重减轻坏死松解性游走性红斑(缩写NME)、贫血、在正常凝血功能存在的情况下的静脉血栓形成、神经精神表现(抑郁症、痴呆、失眠症、共济失调)和其它症状(Griffing，Odeke等人2011)，
[0409]GIP正如其名称所示，不仅诱导胰岛素释放，而且还在脂质动态平衡中起作用，并且可能是肥胖发生所必需的，如通过几个动物研究(Asmar2011)显示的:在年长的高脂肪饲喂的糖尿病小鼠中每日施用GIP受体拮抗剂Pro3-GIP，进行50天，产生减轻的体重，减少的脂肪组织的积累，以及葡萄糖、糖化血红蛋白和胰腺胰岛素的水平的显著提高，连同肌肉和肝中的甘油三酯水平的降低。未观察到高脂肪饮食摄取的变化(McClean，Irwin等人2007)。指向相同方向，发现GIP受体敲除小鼠对肥胖的发生具有抗性，然而饲以相同高脂肪饮食的野生型小鼠显示GIP的分泌过多以及极度内脏和皮下脂肪沉着，具有胰岛素抵抗(Miyawaki, Yamada等人2002)。然而，口服葡萄糖载荷后早期胰岛素反应被削弱，导致更高的血糖水平(Miyawaki, Yamada 等人 1999)。
[0410]在其它实施方案中，药剂包含其它药物活性剂。这样的其它药物活性化合物，除其它以外，是(但不限于)用于治疗和/或预防糖尿病优选DM2和糖尿病并发症的化合物，其中化合物选自磺酰脲药物、双胍类，α -葡萄糖苷酶抑制剂、噻唑烷二酮、DPP4抑制剂、氯茴苯酸类、胰高血糖素-样肽类似物、胃抑肽类似物、淀粉素类似物、肠降血糖素类似物、胰岛素和用于治疗胰岛 素抵抗和/或DM2或用于预防胰岛素抵抗和/或DM2的其它治疗剂等。本领域技术人员应理解，鉴于可利用根据本发明的核酸分子按照本发明解决的各种适应征，所述其它药物活性剂可以是原则上适合用于治疗和/或预防这样的疾病的任何药物活性剂。根据本发明的核酸分子，特别地当存在或用作药剂时，优选与磺酰脲药物、双胍类，α-葡萄糖苷酶抑制剂、噻唑烷二酮，氯茴苯酸类，胰高血糖素-样肽类似物，胃抑肽类似物，淀粉素类似物、肠降血糖素模拟物、DPP4抑制剂，胰岛素和用于治疗DM1、胰岛素抵抗和/或DM2或用于预防胰岛素抵抗和/或DM2的其它治疗剂等组合。
[0411]在本发明内的是药剂原则上可选择地或另外地结合用于治疗所述疾病的药剂的使用来用于预防公开的疾病中的任何疾病。因而，各自的标志物即针对各自的疾病，对于本领域技术人员来说是已知的。优选地，各自的标志物为高胰增血糖素血症。或者和/或另外地，各自的标志物选自胃泌酸调节素、肠高血糖素和GIP (对于GIP结合性核酸分子)。其它组的标志物选自强烈的口渴、高饮水体积、尿频、极度饥饿感、HbAlc值、血浆胰岛素水平、OGT后血浆葡萄糖水平、餐后空腹血浆葡萄糖水平、空腹血浆葡萄糖水平、尿液葡萄糖水平、体重、血压、无力、疲劳、在饮食不存在的情况下体重减轻、体重增加、频繁的细菌或真菌感染、伤口愈合不良、手足麻痹和视觉损伤。
[0412]在本发明的药剂的一个实施方案中，将这样的药剂与用于本文中公开的疾病中的任何疾病的其它治疗，特别地可对其使用本发明的药剂的那些治疗组合使用。
[0413]〃联合治疗〃(或〃协同治疗(co-therapy)")包括本发明的药剂和至少第二或其它试剂的施用(作为意在从这些治疗剂(即本发明的药剂和所述第二或其它试剂)的协同作用提供至少有益作用的特异治疗方案的部分)。组合的有益作用包括但不限于由治疗有效试剂的组合产生的药代动力学或药效共同作用。通过在一段确定的时间(通常数分钟、数小时、数天或数周，取决于选择的组合)内进行这些治疗有效试剂的组合施用。
[0414]〃联合治疗〃可能，但通常不期望包括这些治疗有效试剂的两种或更多种(作为分开的单一疗法方案的部分)的施用。"联合治疗"意欲包括以连续方式施用这些治疗有效试剂，即，其中在不同的时间施用每种治疗有效试剂，以及以大体上同时的方式施用这些治疗有效试剂，或所述治疗有效试剂的至少两种。大体上同时的施用可以例如通过给受试者施用具有固定比率的每一种治疗有效试剂的单个胶囊或多个每个具有一种治疗有效试剂的单个胶囊。
[0415]每一种治疗有效试剂的连续或大体上同时施用可通过任何适当的途径来实现，所述途径包括但不限于局部途径、口服途径、静脉内途径、肌内途径和通过粘膜组织的直接吸收。治疗剂可通过相同途径或通过不同途径施用。例如，选择的组合的第一治疗有效试剂可通过注射施用，而组合的其它治疗有效试剂可局部施用。
[0416]或者，例如，可局部施用所有治疗有效试剂，或可通过注射施用所有治疗有效试剂。除非另外指出，否则施用治疗有效试剂所按的顺序不是至关重要的。"联合治疗"还可包括与其它生物活性成分进一步组合的上述治疗有效试剂的施用。当联合治疗还包括非药物治疗时，可在任何适当的时间进行非药物治疗，只要可从治疗有效试剂与非药物治疗的组合的共同作用获得有益作用。例如，在适当的情况下，当从治疗有效试剂的施用暂时移除非药物治疗(可能数天或甚至数周)时，仍可获得有益作用。
[0417]如 上述一般术语中概述的，根据本发明的药剂原则上可以以本领域技术人员已知的任何形式施用。优选施用途径为全身性施用，更优选通过胃肠外施用，优选通过注射。或者，可局部施用药剂。其它施用途径包括肌内、腹膜内和皮下、口服、鼻内、气管内或经肺，优先考虑侵入性最小然而确保功效的施用途径。
[0418]胃肠外施用通常用于皮下、肌内或静脉内注射和输注。此外，用于胃肠外施用的一个方法使用缓释或持续释放系统的植入，这确保了剂量的恒定水平得到维持，这对于本领域技术人员来说是公知的。
[0419]此外，本发明的优选药剂可通过适当的鼻内媒介物、吸入剂的局部使用以鼻内形式施用，或使用对于本领域技术人员来说是公知的经皮贴剂的那些形式通过经皮肤途径来施用。为了以透皮递送系统的形式施用，剂量施用当然在给药方案中从始至终是连续的而非间歇性的。其它优选局部用制剂包括乳膏剂、软膏、洗剂、气溶胶喷雾剂和凝胶。
[0420]有利地响应本发明的方法、核酸分子、药物组合物和药剂的受试者包括医学和兽医学受试者，通常包括人类和人患者。除其它以外，这样的受试者优选选自猫、狗、大型动物、禽类例如鸡等。
[0421]本发明的药剂通常包含有效量的用于治疗的活性组分，包括但不限于本发明的核酸分子，其溶解于或分散在药学上可接受的介质中。药学上可接受的介质或载体包括任何和所有溶剂、分散介质、包衣、抗菌和抗真菌剂、等渗剂和吸收延迟剂等。这样的介质和试剂用于药物活性物质的用途在本领域是公知的。还可将补充活性成分掺入本发明的药剂。
[0422]在其它方面，本发明涉及药物组合物。这样的药物组合物包含至少一种根据本发明的核酸分子和优选药 学上可接受的赋形剂。这样的粘合剂可以是本领域使用和/或已知的任何赋形剂。更具体地，这样的赋形剂是与本文中公开的药剂的制备结合起来论述的任何赋形剂。在其它实施方案中，药物组合物包含其它药物活性剂。
[0423]根据本公开内容，本发明的药剂和药物组合物的制备对于本领域技术人员来说是已知的。通常地，可将这样的组合物制备为可注射液体溶液或悬浮液；适合在注射之前在液体中以溶液或悬浮液的形式使用的固定形式；片剂或用于口服施用的其它固体；定时释放胶囊；或目前使用的任何其它形式，包括滴眼剂、乳膏、洗剂、软膏、吸入剂等。由外科医生、内科医生或医护人员使用无菌制剂处理手术区的特定区域，例如基于盐水的洗涤也可以是特别有用的。还可通过微装置、微粒或海绵递送组合物。
[0424]配制后，以与剂量配方相容的方式，以这样的药理学上有效的量施用药剂。以多种剂型例如上述可注射溶液的类型容易地施用制剂，但也可使用药物释放胶囊等。
[0425]本发明的药剂还可以以口服剂型如缓释和持续释放片剂或胶囊、丸剂、粉剂、粒齐?、酏剂、酊剂、悬浮液、糖浆剂和乳剂进行施用。有利地从脂肪乳剂或悬浮剂配制栓剂。
[0426]药物组合物或药剂可被灭菌和/或包含佐剂例如防腐剂、稳定剂、润湿剂或乳化剂、溶液促进剂、用于调节渗透压的盐和/或缓冲剂。此外，它们还可包含其它治疗上有价值的物质。组合物可按照常规技术(包括混合、粒化或涂膜法)来制备，通常包含约0.1%至75%，优选地约1%至50%的活性成分。
[0427]液体，特别地可注射组合物可以例如通过溶解、分散等来制备。将活性化合物溶解在药用纯溶剂(例如水、盐水、含水葡萄糖、甘油、乙醇等)中或与其混合，从而形成可注射溶液或悬浮液。此外，可配制适合在注射之前溶解于液体中的固体形式。
[0428]还可将本发明的药剂和核酸分子分别地以脂质体递送系统的形式例如小的单层囊泡、大的单层囊泡以及多层囊泡施用。脂质体可从多种磷脂形成，包括胆固醇、硬脂酰胺或磷脂酰胆碱。在一些实施方案中，利用药物的水溶液水化脂质组分的薄膜以形成封装药物的脂质层，这对于本领域技术人员来说是公知的。例如，可以以使用本领域已知的方法构建的亲脂化合物或非免疫原性高分子量化合物的复合物的形式提供本文中公开的本发明的核酸分子。此外，脂质体在其表面上具有本发明的核酸分子，以将细胞毒素剂靶向和运载至内部，从而介导细胞杀伤。核酸缔合的复合物的实例提供于美国专利号6，011，020。
[0429]本发明的药剂和核酸分子分别地还可用可溶性聚合物如可靶向药物载体偶联。这样的聚合物可包括聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羟基丙基-甲基丙烯酰胺-苯酚、聚羟基乙基天冬酰胺苯酚或被棕榈酰基残基取代的聚乙烯基氧基聚赖氨酸。此外，本发明的药剂和核酸分子分别地可偶联至一类用于实现药物的受控释放的生物可降解聚合物，例如聚乳酸、聚ε -己内酯、聚羟基丁酸、多正酯类、缩醛树脂、聚二氢吡喃、聚腈基丙烯酸酯和水凝胶的交联的或两亲性嵌段共聚物。
[0430]必要时，待施用的本发明的药物组合物和药剂分别地还可包含少量无毒辅助物质例如湿润剂或乳化剂、pH缓冲剂以及其它物质例如醋酸钠和三乙醇胺油酸酯。
[0431]分别地使用本发明的核酸分子和药剂的给药方案按照多个因素来选择，所述因素包括患者的类型、物种、年龄、体重、性别和医学状况；待治疗的病况的严重度；施用途径；患者的肾和肝功能；以及使用的本发明的特定核酸或其盐。普通熟练医生或兽医可容易地确定和开出防止、抵御或停止病况的进展所需的药物的有效量。
[0432]在本文中公开的疾病的任何疾病的治疗中，根据本发明的核酸的有效血浆水平范围优选在500fM 与200 μ Μ,优选地InM与20 μ Μ，更优选地5ηΜ与20 μ Μ，最优选50ηΜ与20 μ M之间。
[0433]本发明的核酸分子和药剂分别地可优选地以单个日剂量、每两天或每三天一次、每周一次、每两周一次、以单个月剂量或每三个月一次来进行施用。
[0434]在本发明内的是本文中描述的药剂组成本文中公开的药物组合物。
[0435]在其它方面，本发明涉及用于治疗需要这样的治疗的受试者的方法，其中所述方法包括施用药物活性量的至少一个种类的本发明的核酸分子。在实施方案中，受试者患有疾病或处于发生这样的疾病的风险中，其中所述疾病为本文中公开的那些疾病的任何疾病，特别地结合根据本发明的核酸分子的任一种用于制造药剂的用途公开的那些疾病的任何疾病。
[0436]应理解，根据本发明的核酸以及拮抗剂不仅可用作药剂或用于制造药剂，而且还可用于化妆品目的，特别地在胰高血糖素参与局部发炎皮肤病变方面。
[0437]如本文中优选地使用的，诊断剂或诊断试剂或诊断装置-如果无相反指明则以可互换的方式使用所有三个术语-适合用于直接或间接地检测胰高血糖素，优选如本文中与本文中描述的各种障碍和疾病结合描述的各种胰高血糖素。诊断剂适合用于分别地检测和/或跟踪本文中描述的障碍和疾病的任何一种。这样的检测可通过根据本发明的核酸分子对胰高血糖素的结合来进行。这样的结合可被直接或间接地检测。各自的方法和装置对于本领域技术人员来说是已知的。除其它以外，根据本发明的核酸分子可包含允许检测根据本发明的核酸分子，优选结合于胰高血糖素的核酸的标记。这样的标记优选选自放射性标记、酶促标记和荧光标记。原则上，针对抗体开发的所有已知测定可被采用于根据本发明的核酸分子，然而靶结合抗体被替代成靶结合核酸，在使用未标记靶结合抗体的抗体-测定中，检测优选通过利用第二抗体来进行，所述第二抗体已用放射性标记、酶促标记和荧光标记修饰，并且在其Fe-片段上结合靶结合抗体。在核酸分子、优选根据本发明的核酸分子的情况下，利用这样的标记修饰核酸分子，其中优选地这样的标记选自生物素、Cy-3和Cy-5，并且这样的标记通过针对这样的标记的抗体例如抗-生物素抗体、抗_Cy3抗体或抗_Cy5抗体来检测，或在标记是生物素的情况下-标记通过天然地结合生物素的链霉抗生物素蛋白或抗生物素蛋白来检测。这样的抗体、链霉抗生物素蛋白或抗生物素蛋白继而优选地利用各自的标记例如放射性标记、酶促标记或荧光标记(如第二抗体)来修饰。
[0438]在其它实施方案中，通过第二检测装置检测或分析根据本发明的核酸分子，其中所述检测装置为分子信标。分 子信标的方法对于本领域技术人员来说是已知的并且Mairal等人进行了综述(Mairal等人，2008)。
[0439]应认识到使用根据本发明的核酸分子进行的胰高血糖素的检测特别允许检测本文中定义的胰高血糖素。
[0440]与胰高血糖素的检测相结合，优选方法包括下列步骤:
[0441](a)提供将测试其膜闻血糖素的存在的样品，
[0442](b)提供根据本发明的核酸分子，
[0443](C)将样品优选地在反应容器中与核酸分子反应
[0444]其中可在步骤(b)之前进行步骤(a)，或可在步骤(a)之前进行步骤(b)。
[0445]在优选实施方案中，提供了另外的步骤d)，所述步骤在于检测样品与核酸分子的反应。优选地，将步骤b)的核酸分子固定于表面。表面可以是反应容器例如反应管、板的孔的表面，或这样的反应容器例如珠粒中包含的装置的表面。核酸分子至表面的固定可通过本领域技术人员已知的任何方式包括但不限于非共价或共价连接来进行。优选地，连接通过表面与核酸分子之间的共价化学键来建立。然而，也在本发明中的是将核酸分子间接固定于表面，其中这样的间接固定包括其它组分或一对相互作用伴侣的使用。这样的其它组分优选为与待固定的核酸分子特异性相互作用，所述组分也被称为相互作用伴侣，从而介导核酸分子至表面的连接。相互作用伴侣优选选自核酸、多肽、蛋白质和抗体。优选地，相互作用伴侣为抗体，更优选单克隆抗体。或者，相互作用伴侣为核酸分子，优选功能性核酸分子。更优选，这样的功能性核酸分子选自适体、spiegelmer和与所述核酸至少部分互补的核酸分子。在其它可选择的实施方案中，核酸分子对表面的结合由多部分相互作用伴侣介导。这样的多部分相互作用伴侣优选为一对相互作用伴侣或由第一成员和第二成员组成的相互作用伴侣，其中第一成员由核酸分子包含或连接于所述核酸分子，并且第二成员连接于表面或被表面包含。多部分相互作用伴侣优选选自成对的相互作用伴侣，包括生物素与抗生物素蛋白、生物素与链霉抗生物素蛋白以及生物素与neutravidin。优选地，相互作用伴侣对的第一成员为生物素。
[0446]这样的方法的优选结果为胰高血糖素与核酸分子的固定复合物的形成，其中更优选检测到所述复合物。在实施方案内的是从复合物检测到胰高血糖素。
[0447]顺从该要求的各自检测装置是例如特异于胰高血糖素的那部分/那些部分的任何检测装置。特别优选的检测装置为选自核酸分子、多肽、蛋白质和抗体的检测装置，所述检测装置的产生对于本领域技术人员来说是已知的。
[0448]用于检测胰高血糖素的方法还包括从已优选地用于进行步骤c)的反应容器除去样品。[0449]方法还在其它实施方案中包括将胰高血糖素的相互作用伴侣固定在表面，优选上文中定义的表面上的步骤，其中相互作用伴侣是如本文中定义的，优选如上文中结合各自方法定义的，更优选在它们的各种实施方案中包括核酸分子、多肽、蛋白质和抗体。在本实施方案中，特别优选的检测装置为根据本发明的核酸分子，其中这样的核酸分子可优选地是标记的或非标记的。如果这样的核酸分子被标记，则其可被直接或间接检测。这样的检测还可包括使用第二检测装置，其优选地也选自本文中描述的核酸分子、多肽和蛋白质。这样的检测装置优选特异于根据本发明的核酸分子。在更优选实施方案中，第二检测装置为分子信标。核酸分子或第二检测装置或两者可在优选实施方案中包含检测标记。检测标记优选选自生物素、溴代脱氧尿苷标记、地高辛标记、荧光标记、UV-标记、放射性-标记和螯合剂分子。或者，第二检测意指与优选由核酸包含的，由核酸包括的或连接于核酸的检测标记的相互作用。特别优选的组合如下:
[0450]检测标记是生物素并且第二检测装置为针对生物素的抗体，或其中
[0451]检测标记是生物素并且第二检测装置为抗生物素蛋白或具有抗生物素蛋白的分子，或其中
[0452]检测标记是生物素并且第二检测装置为链霉抗生物素蛋白或具有链霉抗生物素蛋白的分子，或其中
[0453]检测标记是生物素并且第二检测装置为neutravidin或具有neutravidin的分子，或
[0454]其中检测标记 为溴代脱氧尿苷并且第二检测装置为针对溴代脱氧尿苷的抗体，或其中
[0455]检测标记为地高辛并且第二检测装置针对地高辛的抗体，或其中
[0456]检测标记是螯合剂，并且第二检测装置为放射性核素，其中优选地所述检测标记连接于核酸分子。应认识到该类型的组合也适用于其中核酸分子连接于表面的实施方案。在这样的实施方案中，优选检测标记连接于相互作用伴侣。
[0457]最后，也在本发明内的是使用第三检测装置检测第二检测装置，优选第三检测装置为酶，更优选在第二检测装置的检测后显示酶促反应，或第三检测装置为用于检测放射线的装置，更优选由放射性核素发射的放射线。优选地，第三检测装置特异性地检测第二检测装置和/或与其相互作用。
[0458]同样地在实施方案中，通过将胰高血糖素的相互作用伴侣固定在表面上和将根据本发明的核酸分子添加至在相互作用伴侣与胰高血糖素之间形成的复合物，可从反应物，更优选从其中进行步骤c)和/或d)的反应容器除去样品。
[0459]在实施方案中，根据本发明的核酸分子包括突光部分，并且其中突光部分的突光在核酸分子与胰高血糖素和与游离胰高血糖素之间的复合物形成后不同。
[0460]在其它实施方案中，核酸分子是根据本发明的核酸分子的衍生物，其中核酸分子的衍生物包含至少一个替代腺苷的腺苷的荧光衍生物。在优选实施方案中，腺苷的荧光衍生物为亚乙烯基腺苷。
[0461]在其它实施方案中，使用荧光检测由根据本发明的核酸分子的衍生物和胰高血糖素组成的复合物。
[0462]在方法的实施方案中，信号在步骤(C)或步骤(d)中产生，优选信号与样品中的胰闻血糖素浓度相关。
[0463]在优选实施方案中，可在96孔板中进行测定，其中如上所述将组分固定在反应容器中，孔用作反应容器。
[0464]本发明的核酸分子还可用作用于药物发现的起始材料。大体上存在两个可能的方法。一个方法是筛选化合物文库，其中这样的化合物文库优选是低分子量化合物文库。在其实施方案中，筛选是高通量筛选。优选地，高通量筛选是在基于靶的测定中进行的化合物的快速、高效的试错评价。在最佳情况下通过比色计测量进行分析。与其结合使用的文库对于本领域技术人员来说是已知的。
[0465]在筛选化合物文库的情况下，例如通过使用本领域技术人员已知的竞争性测定，可发现适当的胰高血糖素类似物、胰高血糖素激动剂或胰高血糖素拮抗剂。这样的竞争性测定可如下建立。本发明的核酸分子，优选地spiegelmer，即本发明的L-核酸，偶联于固相。为了鉴定胰高血糖素类似物，可将标记的胰高血糖素添加至测定。潜在类似物可与胰高血糖素分子竞争对本发明的核酸分子的结合，这可伴随通过各自标记获得的信号的减弱。激动剂或拮抗剂的筛选可包括本领域技术人员已知的细胞培养测定的使用。
[0466]根据本发明的试剂盒可包括至少一个或数个种类的本发明的核酸分子，优选用于检测胰高血糖素，更优选用于检测胰高血糖素。此外，试剂盒可包括至少一个或数个阳性或阴性对照。阳性对照可以例如是胰高血糖素，特别地本发明的核酸分子是针对其选择的或其所结合的胰高血糖素，优选地其以液体形式存在。阴性对照可以例如是按照与胰高血糖素相似的生物物理性质定义的但不被本发明的核酸分子识别的肽。此外，所述试剂盒还可包括一种或数中缓冲液。干燥或冻干的形式存在的或溶解于液体中的各种成分可包含在试剂盒中。在其它实施方案中，试剂盒包括给用户提供关于如何使用试剂盒及其各种成分的信息的说明或说明书。
[0467]根据本发明的核酸的药物和生物分析测定对于其在人或非人身体的几种肿瘤、组织和器官中的药代动力学和生物动力学特征谱的估量是非常重要的。为此目的，可使用本文中公开的或本领域技术人员已知的检测法的任何检测法。在本发明的其它方面，提供了用于检测根据本发明的核酸分子的夹心杂交。在检测测定内，使用捕获探针和检测探针。捕获探针与根据本发明的核酸分子的第一部分互补，并且检测探针与其第二部分互补。捕获探针被固定在表面或基质上。检测探针优选具有可如本文中先前所述检测的标志分子或标记。
[0468]可如下进行根据本发明的核酸分子的检测:
[0469]根据本发明的核酸分子以其末端之一与捕获探针杂交并以另一末端与检测探针杂交。随后，通过例如一次或数次洗涤步骤除去未结合的检测探针。可随后测量优选具有标记或标志物分子的结合检测探针的量，如例如在W0/2008/052774 (将其通过引用并入本文)中更详细概述的。
[0470]如本文中优选使用的，术语治疗，在优选实施方案中，包括额外地或可选择地预防和/或随防。
[0471]如本文中优选地使用的，术语疾病和障碍应当以可互换的方式使用，如果没有相反指明的话。
[0472]如本文中所用，术语包括优选地不限于由这样的术语跟随或描述的主题。然而，在可选择的实施方案中，术语包括应当理解为意指包含，从而理解为限定由这样的术语跟随或描述的主题。
[0473] 不同的SEQ ID NOs:,根据本发明的核酸分子的化学性质，其实际序列和内部指称编号概述于下表中。
【权利要求】
1.能够结合胰高血糖素的核酸分子，其中所述核酸分子选自A型的核酸分子、B型的核酸分子和C型的核酸分子。
2.权利要求1的核酸分子，其中所述核酸分子为A型的核酸分子，其中所述A型的核酸分子包含中央核苷酸区段，其中所述中央核苷酸区段包含核苷酸序列:
5J Bn1AAATGn2GAn3H4GCTAKGn5GGn6Ii7GGAATCTRRRSJ [SEQ ID NO: 173]，其中Ii1 为 G 或 rG, n2 为 G 或 rG, n3 为 G 或 rG, n4 为 G 或 rG, n5 为 Y 或 rT, n6 为 A 或 rA, n7为A或rA,并且其中 G、A、T、C、B、K、Y和R的任一个为2’ -脱氧核糖核苷酸，并且 rG、rA和rT的任一个为核糖核苷酸。
3.权利要求2的核酸分子，其中所述中央核苷酸区段包含核苷酸序列
5J Bn1AAATGn2GAn3H4GCTAGGn5GGn6Ii7GGAATCTGARSJ [SEQ ID NO: 174]，其中Ii1 为 G 或 rG, n2 为 G 或 rG, n3 为 G 或 rG, n4 为 G 或 rG, n5 为 T 或 rT, n6 为 A 或 rA, n7为A或rA,并且其中 G、A、T、C、B和R的任一个为2’ -脱氧核糖核苷酸，并且 rG、rA和rT的任一个为核糖核苷酸。
4.权利要求2至3的任一项的核酸分子，其中所述中央核苷酸区段包含选自下列序列的核苷酸序列
5’ TniAAATGr^GAr^r^GCTAGGnsGGrv^GGAATCTGAGS’ [SEQ ID NO:175]，
5’ TniAAATGr^GAr^r^GCTAGGnsGGrv^GGAATCTGAAS，[SEQ ID NO:176]，
5’ CniAAATGr^GAr^r^GCTAGGnsGGrwGGAATCTGAGS’ [SEQ ID NO: 177]，和
5J Gn1AAATGn2GAn3H4GCTAGGn5GGn6Ii7GGAATCTGAGSJ [SEQ ID NO:178]， 其中
Ii1 为 G 或 rG, n2 为 G 或 rG, n3 为 G 或 rG, n4 为 G 或 rG, n5 为 T 或 rT, n6 为 A 或 rA, n7为A或rA,并且其中 G、A、T和C的任一个为2’ -脱氧核糖核苷酸，并且 rG、rA和rT的任一个为核糖核苷酸。
5.权利要求2至4的任一项的核酸分子，其中所述中央核苷酸区段包含如下核苷酸序列:
5J Gn1AAATGn2GAn3H4GCTAGGn5GGn6Ii7GGAATCTGAGSJ [SEQ ID NO:178]， 其中
Ii1 为 G 或 rG, n2 为 G 或 rG, n3 为 G 或 rG, n4 为 G 或 rG, n5 为 T 或 rT, n6 为 A 或 rA, n7为A或rA,并且其中 G、A、T和C的任一个为2’ -脱氧核糖核苷酸，并且 rG、rA和rT的任一个为核糖核苷酸。
6.权利要求2至4的任一项的核酸分子，其中所述中央核苷酸区段包含如下核苷酸序列:
5’ CniAAATGr^GAr^r^GCTAGGnsGGrv^GGAATCTGAGS’ [SEQ ID NO:177]， 其中
Ii1 为 G 或 rG, n2 为 G 或 rG, n3 为 G 或 rG, n4 为 G 或 rG, n5 为 T 或 rT, n6 为 A 或 rA, n7为A或rA,并且 G、A、T和C为2’ -脱氧核糖核苷酸，并且 rG、rA和rT为核糖核苷酸。
7.权利要求2至6的任一项的核酸分子，其中所述中央核苷酸区段由2’-脱氧核糖核苷酸和核糖核苷酸组成。
8.权利要求2至7的任一项的核酸分子，其中所述中央核苷酸区段包含选自如下序列的核苷酸序列:
5’GrGAAATGGGAGGGCTAGGTGGAAGGAATCTGAG3’ [SEQ ID NO:179],
5’GGAAATGrGGAGGCTAGGTGGAAGGAATCTGAG3’ [SEQ ID NO:180]，
5’GGAAATGGGArGGGCTAGGTGGAAGGAATCTGAG3’ [SEQ ID NO:181],
5’GGAAATGGGAGrGGCTAGGTGGAAGGAATCTGAG3’ [SEQ ID NO:182],
5’GGAAATGGGAGGGCTAGGTGGrAAGGAATCTGAG3’ [SEQ ID NO:183],
5，GGAAATGGGAGGGCTAGGTGGArAGGAATCTGAG3’ [SEQ ID NO:184]；
5’GGAAATGrGGAGGGCTAGGTGGrAAGGAATCTGAG3’ [SEQ ID NO: 185]，
5’GGAAATGGGAGGGCTA GGTGGrArAGGAATCTGAG3’ [SEQ ID NO:186],
5’GGAAATGrGGAGGGCTAGGTGGrArAGGAATCTGAG3’ [SEQ ID NO:187],
5’GGAAATGGGArGGGCTAGGTGGrArAGGAATCTGAG3’ [SEQ ID NO: 188]，
5’GrGAAATGrGGArGGGCTAGGTGGrArAGGAATCTGAG3’ [SEQ ID NO:189]，
5’ GrGAAATGrGGArGrGGCTAGGTGGrArAGGAATCTGAG3’ [SEQ ID NO:190]和
5’GrGAAATGrGGArGrGGCTAGGrTGGrArAGGAATCTGAG3’ [SEQ ID NO:191]， 其中 G、A、T和C的任一个为2’ -脱氧核糖核苷酸，并且 rG、rA和rT的任一个为核糖核苷酸。
9.权利要求2至6的任一项的核酸分子，其中所述中央核苷酸区段由2’-脱氧核糖核苷酸组成。
10.权利要求2至9的任一项的核酸分子，其中所述核酸分子以5’->3’的方向包含第一末端核苷酸区段、中央核苷酸区段和第二末端核苷酸区段，其中 第一末端核苷酸区段包含I至7个核苷酸，和 第二末端核苷酸区段包含I至7个核苷酸。
11.权利要求2至9的任一项的核酸分子，其中所述核酸分子以5’->3’的方向包含第二末端核苷酸区段、中央核苷酸区段和第一末端核苷酸区段，其中 第一末端核苷酸区段包含I至7个核苷酸，和 第二末端核苷酸区段包含I至7个核苷酸。
12.权利要求10至11的任一项的核酸分子，其中所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6VS ’并且第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ BZ7Z8Z9Z1(lZnZ123’， 其中 Z1为G或不存在，Z2为S或不存在，Z3为V或不存在，Z4为B或不存在，Z5为B或不存在，Z6为V或不存在，Z7为B或不存在，Z8为V或不存在，Z9为V或不存在，Z10为B或不存在，Z11为S或不存在，并且Z12为C或不存在。
13.权利要求10至12的任一项的核酸分子，其中所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6VS ’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’BZ7Z8Z9Z1(lZnZ123’， 其中
a)Z1 为 G，Z2 为 S，Z3 为 V，Z4 为 B，Z5 为 B，Z6 为 V, Z7 为 B，Z8 为 V, Z9 为 V, Z10 为 B，Z11为S，并且Z12为C，或
b)Z1 不存在，Z2 为 S，Z3 为 V，Z4 为 B，Z5 为 B, Z6 为 V，Z7 为 B, Z8 为 V，Z9 为 V，Z10 为 B，Z11为S，并且Z12为C，或
c)Z1 为 G，Z2 为 S，Z3 为 V，Z4 为 B，Z5 为 B，Z6 为 V, Z7 为 B，Z8 为 V, Z9 为 V, Z10 为 B，Z11为S，并且Z12不存在， 优选地
a)Z1 为 G，Z2 为 C，Z3 为 R，Z4 为 B，Z5 为 Y，Z6 为 R，Z7 为 Y，Z8 为 R，Z9 为 V，Z10 为 Y，Z11为G，并且Z12为C，或
b)Z1 不存在，Z2 为 C，Z3 为 R，Z4 为 B，Z5 为 Y，Z6 为 R，Z7 为 Y，Z8 为 R，Z9 为 V，Z10 为 Y，Z11为G，并且Z12为C，或
c)Z1 为 G，Z2 为 C，Z3 为 R，Z4 为 B，Z5 为 Y，Z6 为 R，Z7 为 Y，Z8 为 R，Z9 为 V, Z10 为 Y，Z11为G，并且Z12不存在。
14.权利要求13的核酸分子，其中 a)所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’GCACTGG3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ GCAGTGC3’，或 b)所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’GCACTGA3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ GCAGTGC3’，或 c)所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’GCAGTGG3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ TCACTGC3’，或 d)所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’GCACTGG3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CTACTGC3’，或 e)所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’GCGCTGG3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ GCAGTGC3’，或 f)所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’GCGCCAG3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ TCGGCGC3’。
15.权利要求10至12的任一项的核酸分子，其中所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6VS ’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ BZ7Z8Z9Z1(lZnZ123’， 其中
a)Z1 不存在，Z2 为 S，Z3 为 V，Z4 为 B，Z5 为 B, Z6 为 V，Z7 为 B, Z8 为 V，Z9 为 V，Z10 为 B，Z11为S，并且Z12不存在，或
b)Z1 不存在，Z2 为 S，Z3 为 V，Z4 为 B，Z5 为 B, Z6 为 V，Z7 为 B, Z8 为 V，Z9 为 C，Z10 为 B，Z11不存在并且Z12不存在，或 c）Z1不存在，Z2不存在，Z3为V，Z4为B, Z5为B，Z6为V，Z7为B，Z8为V，Z9为C，Z10为B，Z11为S，并且Z12不存在， 优选所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6GS’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CZ7Z8Z9Z1(lZnZ123’， 其中
a)Z1 不存在，Z2 为 S，Z3 为 V，Z4 为 G，Z5 为 Y，Z6 为 S，Z7 为 B, Z8 为 R，Z9 为 C，Z10 为 B，Z11为S，并且Z12不存在，或
b)Z1 不存在，Z2 为 S，Z3 为 V，Z4 为 G，Z5 为 Y，Z6 为 S，Z7 为 B, Z8 为 R，Z9 为 C，Z10 为 B，Z11不存在并且Z12不存在，或 ^Z1不存在，Z2不存在，Z3为V，Z4为G，Z5为Y，Z6为S，Z7为B，Z8为R，Z9为C，Z10为B，Z11为S，并且Z12不存在。
16.权利要求15的核酸分子,其中 a)所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’GCGCGG3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CTGCGC3’，或 b)所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’GCGCGG3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CCGCGC3’，或 c)所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’GGGCCG3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CGGCCC3’，或 d)所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’GCGCCG3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CGGCGC3’，或 e)所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’GAGCGG3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CCGCTC3’，或 f)所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’GCGTGG3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CCACGC3’，或 g)所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’GCGTCG3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CGACGC3’。
17.权利要求10至12的任一项的核酸分子，其中所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6VS ’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ BZ7Z8Z9Z1(lZnZ123’， 其中 a)Z1不存在，Z2不存在，Z3为V，Z4为B, Z5为B，Z6为V，Z7为B，Z8为V，Z9为V，Z10为B，Z11不存在并且Z12不存在，或 WZ1不存在，Z2不存在，Z3为V，Z4为B, Z5为B，Z6为V，Z7为B，Z8为V，Z9为V，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或 c)Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4为B，Z5为B, Z6为V，Z7为B, Z8为V，Z9为V，Z10为B，Z11不存在并且Z12不存在， 优选所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6GS’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5，CZ7Z8Z9Z10ZnZ123，， 其中 a)Z1不存在，Z2不存在，Z3为V，Z4为G，Z5为Y，Z6为G，Z7为Y，Z8为R，Z9为C，Z10为B，Z11不存在并且Z12不存在，或 WZ1不存在，Z2不存在，Z3为V，Z4为G，Z5为Y，Z6为G，Z7为Y，Z8为R，Z9为C，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或c)Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4为G，Z5为Y，Z6为G，Z7为Y，Z8为R，Z9为C，Z10为B, Z11不存在并且Z12不存在。
18.权利要求17的核酸分子，其中 a)所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’GGCGG3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CCGCC3’，或 b)所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’CGCGG3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CCGCG3’。
19.权利要求10至12的任一项的核酸分子，其中所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6VS ’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ BZ7Z8Z9Z1(lZnZ123’， 其中 a)Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4为B，Z5为B, Z6为V，Z7为B, Z8为V，Z9为V，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或 b)Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4为B，Z5为B, Z6为V，Z7为B, Z8为V，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或 C) Z1不存在，Z2不 存在，Z3不存在，Z4为B，Z5为B, Z6为V，Z7为B, Z8为V，Z9为V，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在， 优选所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6GS’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5，CZ7Z8Z9Z10ZnZ123，， 其中 a)Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4为G，Z5为Y，Z6为G，Z7为Y，Z8为R，Z9为C，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或 b)Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4为G，Z5为Y，Z6为G，Z7为Y，Z8为R，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或 C)Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5为Y，Z6为G，Z7为Y，Z8为R，Z9为C，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在。
20.权利要求19的核酸分子，其中 所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ GCGG3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CCGC3’。
21.权利要求10至12的任一项的核酸分子，其中所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6VS ’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ BZ7Z8Z9Z1(lZnZ123’， 其中 a)Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5为B，Z6为V，Z7为B，Z8为V，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或 WZ1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5为B，Z6为V，Z7为B, Z8不存在，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或 ^Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5不存在，Z6为V，Z7为B，Z8为V，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在， 优选地所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6GS ’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5，CZ7Z8Z9ZltlZ11Z1J’，其中 a)Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5为S，Z6为S，Z7为S，Z8为S，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或 WZ1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5为S，Z6为S，Z7为S，Z8不存在，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或 ^Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5不存在，Z6为S，Z7为S，Z8为S，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在。
22.权利要求21的核酸分子，其中 所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’GCG3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CGC3’。
23.权利要求10至12的任一项的核酸分子，其中所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6VS ’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ BZ7Z8Z9Z1(lZnZ123’， 其中 a)Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5不存在，Z6为V，Z7为B,Z8不存在，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在， b)Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5不存在，Z6为V，Z7不存在，Z8不存在，Z9不存在，Z10不存在， Z11不存在并且Z12不存在， c)Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5不存在，Z6不存在，Z7为B，Z8不存在，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在， CDZ1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5不存在，Z6不存在，Z7不存在，Z8不存在，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在， 优选所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6GS’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5，CZ7Z8Z9Z10ZnZ123，， 其中 a)Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5不存在，Z6为G，Z7为C，Z8不存在，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或 WZ1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5不存在，Z6不存在，Z7不存在，Z8不存在，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在。
24.权利要求2至6和9至23的任一项的核酸分子，其中所述核酸分子包含选自SEQID NO:6和SEQ ID NO:7的核苷酸序列，或 其中所述核酸分子与包含选自SEQ ID NO:6和SEQ ID NO:7的核苷酸序列的核酸分子具有至少85%的同一性，或 其中所述核酸分子与包含选自SEQ ID NO:6和SEQ ID NO:7的核苷酸序列的核酸分子同源，其中所述同源性为至少85%。
25.权利要求2至8和10至23的任一项的核酸分子，其中所述核酸分子包含选自SEQID NO:23、SEQ ID NO:43、SEQ ID NO:47、SEQ ID NO:48、SEQ ID NO:91、SEQ ID NO:92、SEQ ID NO:158和SEQ ID NO:159的核苷酸序列，或 其中所述核酸分子与包含选自SEQ ID NO:23、SEQ ID NO:43、SEQ ID NO:47、SEQ IDNO:48、SEQ ID NO:91，SEQ ID NO:92、SEQ ID NO:158 和 SEQ ID NO:159 的核苷酸序列的核酸分子具有至少85%的同一性，或 其中所述核酸分子与包含选自SEQ ID NO:43、SEQ ID NO:47、SEQ ID NO:48、SEQ IDNO:91、SEQ ID NO:92、SEQ ID NO:158和SEQ ID NO:159的核苷酸序列的核酸分子同源，其中所述同源性为至少85%。
26.权利要求1的核酸分子，其中所述核酸分子为B型的核酸分子，其中所述B型的核酸分子包含29至32个核苷酸的中央区段，其中所述中央核苷酸区段包含选自如下序列的核苷酸序列:
5’-AKGARn1KGTTGSYAWAn2RTTCGn3TTGGAn4TCn5- ‘3 [SEQ ID NO:197],
5’ -AGAAGGTTGGTAAGTTTCGGTTGGATCTG- ‘3[SEQ ID NO:198],
5’ -AGAAGGTCGGTAAGTTTCGGTAGGATCTG- ‘3[SEQ ID NO:199],
5’ -AGGAAGGTTGGTAAAGGTTCGGTTGGATTCA- ‘3[SEQ ID NO:200],
5’ -AGGAAAGGTTGGTAAGGTTCGGTTGGATTCA- ‘3[SEQ ID NO:201]和
5’ -AGGAAGGTTGGTAAGGTTCGGTTGGATTCA- ‘3[SEQ ID NO:202], 其中Ii1为A或rA, n2为G或rG, n3为G或rG, n4为T或rU, n5为A或rA,并且其中 G、A、T、C、K、Y、S、W和R的任一个为2’ -脱氧核糖核苷酸，并且 rG、rA和rU的任一 个为核糖核苷酸。
27.权利要求26的核酸分子，其中所述中央核苷酸区段包含如下核苷酸序列:
5J AGGAAn1GGTTGGTAAAn2GTTCGn3TTGGAn4TCn5SJ [SEQ ID NO:203]， 其中Ii1为A或rA, n2为G或rG, n3为G或rG, n4为T或rU, n5为A或rA,并且其中 G、A、T和C的任一个为2’ -脱氧核糖核苷酸，并且 rG、rA和rU的任一个为核糖核苷酸。
28.权利要求26至27的任一项的核酸分子，其中所述中央核苷酸区段由2’-脱氧核糖核苷酸和核糖核苷酸组成。
29.权利要求26至28的任一项的核酸分子，其中所述中央核苷酸区段包含选自如下序列的核苷酸序列:
5’AGGAArAGGTTGGTAAAGGTTCGGTTGGATTCA3’ [SEQ ID NO:204]，
5’AGGAAAGGTTGGTAAArGGTTCGGTTGGATTCA3’ [SEQ ID NO:205],
5’AGGAAAGGTTGGTAAAGGTTCGGTTGGArUTCA3’ [SEQ ID NO:206],
5’AGGAArAGGTTGGTAAArGGTTCGGTTGGATTCA3’ [SEQ ID NO:207],
5’AGGAArAGGTTGGTAAAGGTTCGGTTGGArUTCG3’ [SEQ ID NO:208],
5’AGGAArAGGTTGGTAAAGGTTCGGTTGGArUTCA3’ [SEQ ID NO:209]，
5’ AGGAArAGGTTGGTAAArGGTTCGGTTGGArUTCA3’ [SEQ ID NO:210]和
5’AGGAArAGGTTGGTAAArGGTTCGrGTTGGArUTCrA3’ [SEQ ID NO:211]， 其中G、A、T和C的任一个为2’ -脱氧核糖核苷酸，并且 rG、rA和rU的任一个为核糖核苷酸。
30.权利要求26至27的任一项的核酸分子，其中所述中央核苷酸区段由2’-脱氧核糖核苷酸组成。
31.权利要求26至30的任一项的核酸分子,其中所述核酸分子以5’->3’的方向包含第一末端核苷酸区段、中央核苷酸区段和第二末端核苷酸区段，其中第一末端核苷酸区段包含3至9个核苷酸,和 第二末端核苷酸区段包含3至10个核苷酸。
32.权利要求26至30的任一项的核酸分子,其中所述核酸分子以5’->3’的方向包含第二末端核苷酸区段、中央核苷酸区段和第一末端核苷酸区段，其中 第一末端核苷酸区段包含3至9个核苷酸,和 第二末端核苷酸区段包含3至10个核苷酸。
33.权利要求31至32的任一项的核酸分子，其中所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6SAD’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CKVZAZgZioZnZ』’， 其中 Z1为C或不存在，Z2为G或不存在，Z3为R或不存在，Z4为B或不存在，Z5为B或不存在，Z6为S或不存在，Z7为S或不存在，Z8为V或不存在，Z9为V或不存在，Z10为K或不存在，Z11为M或不存在，并且Z12为S或不存在。
34.权利要求31至33的任一项的核酸分子，其中所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6SAD’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CKVZ7Z8Z9Z1QZnZ123’，其中
a)Z1 为 C，Z2 为 G，Z3 为 R，Z4 为 B，Z5 为 B，Z6 为 S，Z7 为 S，Z8 为 V, Z9 为 N，Z10 为 K，Z11为M，并且Z12为S，或
b)Z1 不存在，Z2 为 G，Z3 为 R，Z4 为 B，Z5 为 B, Z6 为 S，Z7 为 S，Z8 为 V，Z9 为 N，Z10 为 K，Z11为M，并且Z12为S，或
c)Z1 为 C，Z2 为 G，Z3 为 R，Z4 为 B，Z5 为 B，Z6 为 S，Z7 为 S，Z8 为 V, Z9 为 N，Z10 为 K，Z11为M，并且Z12不存在， 优选地所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6GAGS’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CTCZ7Z8Z9Z1(lZnZ123’， 其中
a)Z1 为 C，Z2 为 G，Z3 为 R，Z4 为 C，Z5 为 T，Z6 为 C，Z7 为 G，Z8 为 A，Z9 为 G，Z10 为 T，Z11为C，并且Z12为G，或
b)Z1 不存在，Z2 为 G，Z3 为 R，Z4 为 C，Z5 为 T，Z6 为 C，Z7 为 G，Z8 为 A，Z9 为 G，Z10 为 T，Z11为C，并且Z12为G，或
c)Z1 为 C，Z2 为 G，Z3 为 R，Z4 为 C，Z5 为 T，Z6 为 C，Z7 为 G，Z8 为 A，Z9 为 G，Z10 为 T，Z11为C，并且Z12不存在。
35.权利要求34的核酸分子， a)其中所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’CGACTCGAG3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CTCGAGTCG3’，或 b)其中所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’CGGCTCGAG3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CTCGAGTCG3’。
36.权利要求31至33的任一项的核酸分子，其中所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6SAD’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CKVZAZgZioZnZ』’，其中
a)Z1 不存在，Z2 为 G，Z3 为 R，Z4 为 B，Z5 为 B, Z6 为 S，Z7 为 S，Z8 为 V，Z9 为 N，Z10 为 K，Z11为M，并且Z12不存在，或
b)Z1 不存在，Z2 为 G，Z3 为 R，Z4 为 B，Z5 为 B, Z6 为 S，Z7 为 S，Z8 为 V，Z9 为 N，Z10 为 K，Z11不存在并且Z12不存在，或 ^Z1不存在，Z2不存在，Z3为R，Z4为B, Z5为B，Z6为S，Z7为S，Z8为V，Z9为N，Z10为K，Z11为M，并且Z12不存在。
37.权利要求31至33的任一项的核酸分子，其中所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6SAD’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CKVZAZgZioZnZ』’， 其中 a)Z1不存在，Z2不存在，Z3为R，Z4为B, Z5为B，Z6为S，Z7为S，Z8为V，Z9为N, Z10为K，Z11不存在并且Z12不存在，或 b)Z1不存在，Z2不存在，Z3为R，Z4为B, Z5为B，Z6为S，Z7为S，Z8为V，Z9为N, Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或 c)Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4为B，Z5为B, Z6为S，Z7为S，Z8为V，Z9为N，Z10为K，Z11不存在并且Z12不存在， 优选所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6GAGS ’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CTCZ7Z8Z9Z1QZnZ123’， 其中 a)Z1不存在，Z2不存在，Z3为A，Z4为C，Z5为T，Z6为C，Z7为G，Z8为A，Z9为G，Z10为T，Z11不存在并且Z12不存在，或 b)Z1不存在，Z2不存在，Z3为A，Z4为C，Z5为T，Z6为C，Z7为G，Z8为A，Z9为G，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或 c)Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4为C，Z5为T，Z6为C，Z7为G，Z8为A，Z9为G，Z10为T，Zn不存在并且Z12不存在， 优选Z1不存在，Z2不存在，Z3为A，Z4为C，Z5为T，Z6为C，Z7为G，Z8为A，Z9为G，Z10为Τ，Ζη不存在并且Z12不存在。
38.权利要求31至33的任一项的核酸分子，其中所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6SAD’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CKVZ7Z8Z9Z10Z11Z123,, 其中 a)Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4为B，Z5为B, Z6为S，Z7为S，Z8为V，Z9为N，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或 WZ1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5为B，Z6为S，Z7为S，Z8为V，Z9为N，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或 C) Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4为B，Z5为B, Z6为S，Z7为S，Z8为V，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在， 优选所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6SAGS ’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CTSZ7Z8Z9Z1(lZnZ123’， 其中 a) Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4为B，Z5为B, Z6为S，Z7为S，Z8为S，Z9为V，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或 WZ1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5为B，Z6为S，Z7为S，Z8为S，Z9为V,Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或 C) Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4为B，Z5为B, Z6为S，Z7为S，Z8为S，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在。
39.权利要求38的核酸分子， a)其中所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’GTCGAG3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CTCGAC3’，或 b)其中所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’TGCGAG3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CTCGCA3’，或 c)其中所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’GGCCAG3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CTGGCC3’，或 d)其中所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’GCCGAG3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CTCGGC3’，或 e)其中所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’CTCGAG3’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CTCGAG3’。
40.权利要求31至33的任一项的核酸分子，其中所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6SAD’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CKVZ7Z8Z9Z10ZnZ123，， 其中 a) Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5为B，Z6为S，Z7为S，Z8为V，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或 WZ1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5为B，Z6为S，Z7为S，Z8不存在，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或 ^Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5不存在，Z6为S，Z7为S，Z8为V，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在， 其中优选所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6GAGS’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CTCZ7Z8Z9Z1(lZnZ123’， 其中 a) Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5为T，Z6为C，Z7为G，Z8为A，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或 WZ1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5为T，Z6为C，Z7为G，Z8不存在，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或 ^Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5不存在，Z6为C，Z7为G，Z8为A，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在。
41.权利要求31至33的任一项的核酸分子，其中所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6SAD’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CKVZAZgZioZnZ』’， 其中 a)Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5不存在，Z6为S，Z7为S，Z8不存在，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或 b)Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5不存在，Z6不存在，Z7为S，Z8不存在，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或 C) Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5不存在，Z6为S，Z7不存在，Z8不存在，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在。
42.权利要求31至33的任一项的核酸分子，其中所述第一末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6SAD’并且所述第二末端核苷酸区段包含核苷酸序列5’ CKVZAZgZioZnZ』’， 其中Z1不存在，Z2不存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5不存在，Z6不存在，Z7不存在，Z8不存在，Z9不存在，Z10不存在，Z11不存在并且Z12不存在，或 其中所述第一末端核苷酸区段包含5’ Z1Z2Z3Z4Z5Z6GAGS’的核苷酸序列并且所述第二末端核苷酸区段包含5’ CTCZ7Z8Z9ZiciZ11Z1J’的核苷酸序列， 其中Z1不存在，Z2不 存在，Z3不存在，Z4不存在，Z5不存在，Z6不存在，Z7不存在，Z8不存在，Z9不存在，Z10不 存在，Z11不存在并且Z12不存在。
43.权利要求26至28和30至42的任一项的核酸分子，其中所述核酸分子包含选自SEQ ID NO:50, SEQ ID NO: 54、SEQ ID NO: 58、SEQ ID NO: 59、SEQ ID N0:88 和 SEQ ID NO:.155的核苷酸序列，或 其中所述核酸分子与包含选自SEQ ID NO:50、SEQ ID NO:54、SEQ ID NO:58、SEQ IDNO:59,SEQ ID N0:88和SEQ ID NO:155的核苷酸序列的核酸分子具有至少85%的同一性，或 其中所述核酸分子与包含选自SEQ ID NO:50、SEQ ID NO:54、SEQ ID NO:58、SEQ IDNO:59,SEQ ID N0:88和SEQ ID NO:155的核苷酸序列的核酸分子同源，其中同源性为至少85%。
44.权利要求26至29和31至42的任一项的核酸分子，其中所述核酸分子包含选自SEQ ID NO:7U SEQ ID NO:8USEQ ID NO: 82, SEQ ID NO: 89, SEQ ID NO: 90, SEQ ID NO:.156和SEQ ID NO:157的核苷酸序列，或 其中所述核酸分子与包含选自SEQ ID NO:71、SEQ ID NO:81、SEQ ID NO:82、SEQ IDNO:89, SEQ ID NO:90、SEQ ID NO:156和SEQ ID NO:157的核苷酸的核酸分子具有至少.85%的同一性，或 其中所述核酸分子与包含选自SEQ ID NO:71、SEQ ID NO:81、SEQ ID NO:82、SEQ IDNO:89、SEQ ID NO:90、SEQ ID NO:156和SEQ ID NO:157的核苷酸序列的核酸分子同源，其中同源性为至少85%。
45.权利要求的核酸分子1，其中所述核酸分子是C型的核酸分子，其中所述C型的核酸分子包含选自 SEQ ID NO:83,SEQ ID NO:84,SEQ ID NO:85、SEQ ID NO:86、SEQ ID NO:.87、SEQ ID NO:97 和 SEQ ID NO:102 的核苷酸序列，或其中所述核酸分子与包含选自SEQ ID NO:83、SEQ ID NO:84、SEQ ID NO:85、SEQ IDNO:86, SEQ ID NO:87, SEQ ID NO:97和SEQ ID NO:102的核苷酸序列的核酸分子具有至少85%的同一性，或 其中所述核酸分子与包含选自SEQ ID NO:83、SEQ ID NO:84、SEQ ID NO:85、SEQ IDNO:86,SEQ ID NO:87、SEQ ID NO:97和SEQ ID NO:102的核苷酸序列的核酸分子同源，其中同源性为至少85%。
46.权利要求1至45的任一项的核酸分子，其中所述核酸分子的核苷酸或形成所述核酸分子的核 苷酸为L-核苷酸。
47.权利要求1至45的任一项的核酸分子,其中所述核酸分子为L-核酸分子。
48.权利要求1至47的任一项的核酸分子，其中所述核酸分子包含至少一个结合部分，其能够结合胰高血糖素，其中这样的结合部分由L-核苷酸组成。
49.权利要求1至48的任一项的核酸分子，其中所述核酸分子为通过胰高血糖素介导的活性的拮抗剂。
50.权利要求1至49的任一项的核酸分子，其中所述核酸分子能够结合GIP。
51.权利要求1至50的任一项的核酸分子，其中所述核酸是通过GIP介导的活性的拮抗剂。
52.权利要求1至51的任一项的核酸分子，其中所述核酸分子包含修饰基团，其中包含所述修饰基团的核酸分子从生物体的排泄率相较于不包含所述修饰基团的核酸分子减小。
53.权利要求1至51的任一项的核酸分子，其中所述核酸分子包含修饰基团，其中包含所述修饰基团的核酸分子相较于不包含所述修饰基团的核酸分子在生物体中具有增加的停留时间。
54.权利要求52和53的任一项的核酸分子，其中所述修饰基团选自生物可降解的和非生物可降解的修饰，优选所述修饰基团选自聚乙二醇、线性聚乙二醇、分枝聚乙二醇、羟乙基淀粉、肽、蛋白质、多糖、固醇、聚氧丙烯、聚氧酰胺和聚(2-羟乙基)-L-谷氨酰胺。
55.权利要求54的核酸分子，其中所述修饰基团为由线性聚乙二醇或分枝聚乙二醇组成的聚乙二醇，其中所述聚乙二醇的分子量优选为约20，000至约120，OOODa，更优选约30，000 至约 80，OOODa 和最优选约 40，OOODa0
56.权利要求54的核酸分子，其中所述修饰基团为羟乙基淀粉，其中所述羟乙基淀粉的分子量为约50kDa至约1000kDa，更优选约IOOkDa至约700kDa和最优选300kDa至500kDao
57.权利要求52至56的任一项的核酸分子，其中所述修饰基团通过接头偶联于所述核酸分子，其中优选地所述接头是生物可降解接头。
58.权利要求52至56的任一项的核酸分子，其中所述修饰基团偶联于所述核酸分子的5’ -末端核苷酸和/或所述核酸分子的3’ -末端核苷酸和/或所述核酸分子的5’ -末端核苷酸与所述核酸分子的3’ -末端核苷酸之间的核苷酸。
59.权利要求52至58的任一项的核酸分子，其中所述生物体是动物体或人体，优选人体。
60.权利要求1至59的任一项的核酸分子，其用于治疗和/或预防疾病或障碍或高胰增血糖素血症的方法。
61.权利要求60的核酸分子，其中所述疾病或障碍选自糖尿病、糖尿病并发症和糖尿病病况。
62.权利要求61的核酸分子，其中所述糖尿病选自I型糖尿病、2型糖尿病和妊娠糖尿病。
63.权利要求62的核酸分子，其中所述糖尿病并发症或糖尿病病况为选自下列的糖尿病并发症或糖尿病病况:动脉粥样硬化、冠状动脉疾病、糖尿病足疾病、糖尿病视网膜病变、增生型糖尿病视网膜病变、糖尿病黄斑水肿、糖尿病性玻璃体视网膜病变、增生性糖尿病性玻璃体视网膜病变、糖尿病肾病、糖尿病神经病变、葡萄糖耐受不良、心脏病、高血压、高胆固醇、葡萄糖耐量降低、无力、胰岛素抵抗、肾功能衰竭、代谢综合征、非酒精性脂肪肝病、具有或不具有纤维化的非酒精性脂肪性肝炎、外周血管病、减小的葡萄糖敏感性、减小的胰岛素敏感性、肥胖、脂肪肝、高血糖、糖尿病相关性血管炎症、糖尿病酮症酸中毒、高渗性非酮症高血糖昏迷、体重减轻坏死松解性游走性红斑、贫血、在正常凝血功能存在的情况下的静脉血栓形成和神经精神表现。
64.一种药物组合物，其包含权利要求1至59的任一项中定义的核酸分子和任选地其它组分，其中所述其它组分选自药学上可接受的赋形剂、药学上可接受的载体和药物活性剂。
65.权利要求64的药物组合物，其中所述药物组合物包含权利要求1至59的任一项中定义的核酸分子和药学上可接受的载体。
66.权利要求1至59的任一项的核酸分子用于制造药剂的用途。
67.权利要求66的用途，其中所述药剂用于人药剂或用于兽用药剂。
68.权利要求1至59的任一项的核酸分子用于制造诊断装置的用途。
69.权利要求66的用途，其中所述药剂用于治疗和/或预防疾病或障碍或高胰增血糖素血症,其中所述疾病或障碍选自糖尿病、糖尿病并发症和糖尿病病况。
70.权利要求69的核酸分子，其中所述糖尿病选自I型糖尿病、2型糖尿病和妊娠糖尿病。
71.权利要求69的核酸分子，其中所述糖尿病并发症或糖尿病病况是选自下列的糖尿病并发症或糖尿病病况:动脉粥样硬化、冠状动脉疾病、糖尿病足疾病、糖尿病视网膜病变、增生型糖尿病视网膜病变、糖尿病黄斑水肿、糖尿病性玻璃体视网膜病变、增生性糖尿病性玻璃体视网膜病变、糖尿病肾病、糖尿病神经病变、葡萄糖耐受不良、心脏病、高血压、高胆固醇、葡萄糖耐量降低、无力、胰岛素抵抗、肾功能衰竭、代谢综合征、非酒精性脂肪肝病、具有或不具有纤维化的非酒精性脂肪性肝炎、外周血管病、减小的葡萄糖敏感性、减小的胰岛素敏感性、肥胖、脂肪肝、高血糖、糖尿病相关性血管炎症、糖尿病酮症酸中毒、高渗性非酮症高血糖昏迷、体重减轻坏死松解性游走性红斑、贫血、在正常凝血功能存在的情况下的静脉血栓形成和神经精神表现。
72.包含权利要求1至59的任一项的核酸分子和胰高血糖素和/或GIP的复合物，其中优选地所述复合物为结晶复合物。
73.权利要求1至59的任一项的核酸分子用于检测胰高血糖素和/或GIP的用途。
74.用于筛选通过胰高血糖素和/或GIP介导的活性的拮抗剂的方法，所述方法包括下列步骤:-提供通过胰高血糖素和/或GIP介导的活性的候选拮抗剂， -提供权利要求1至59的任一项中定义的核酸分子， -提供测试系统，所述系统在通过胰高血糖素和/或GIP介导的活性的拮抗剂存在的情况下提供信号，和 -确定通过胰高血糖素和/或GIP介导的活性的候选拮抗剂是否是通过胰高血糖素和/或GIP介导的活性的拮抗剂。
75.用于检测胰高血糖素的试剂盒，其包含权利要求1至59的任一项的核酸分子。
76.用于检测样品中的权利要求1至59的任一项中定义的核酸的方法，其中所述方法包括步骤: a)提供捕获探针和检测探针，其中所述捕获探针与权利要求1至59的任一项中定义的核酸分子的第一部分至少部分互补，其中所述检测探针与权利要求1至59的任一项中定义的核酸分子的第二部分至少部分互补；或者，所述捕获探针与权利要求1至59的任一项中定义的核酸分子的第二部分至少部分互补并且所述检测探针与权利要求1至59的任一项中定义的核酸分子的第一部分至少部分互补； b)将所述捕获探针和所述检测探针分别地或组合地添加至包含权利要求1至59的任一项中定义的核酸分子或假定包含权利要求1至59的任一项中定义的核酸分子的样品； c)使所述捕获探针和所述检测探针同时或以任意顺序依次与权利要求1至59的任一项中定义的核酸分子或其部分反应； d)任选地检测所述捕获探针是否与步骤a)中提供的权利要求1至59的任一项中定义的核酸分子杂交；和 e)检测步骤c)中形成的由权利要求1至59的任一项中定义的核酸分子与捕获探针和检测探针组成的复合物。
77.权利要求76的方法，其中所述检测探针包含检测装置，和/或其中所述捕获探针被固定于支持物，优选固体支持物。
78.权利要求76或77的方法，其中从反应中除去不是步骤c)中形成的复合物的部分的任何检测探针，以便在步骤e)中仅检测是所述复合物的部分的检测探针。
79.权利要求76至78的任一项的方法，其中步骤e)包括如下步骤:比较当所述捕获探针与所述检测探针在权利要求1至59的任一项中定义的核酸分子或其部分存在的情况下和在所述核酸分子或其部分不存在的情况下杂交时，通过所述检测装置产生的信号。
【文档编号】A61K31/7088GK103958682SQ201280058153
【公开日】2014年7月30日 申请日期:2012年10月22日 优先权日:2011年10月21日
【发明者】W·普尔施克, S·塞尔, A·沃特, K·布赫纳, C·马什, S·克吕斯曼 申请人:诺松制药股份公司