Her2二聚化抑制剂帕妥珠单抗的用途和包含her2二聚化抑制剂帕妥珠单抗的制品的制作方法

Her2二聚化抑制剂帕妥珠单抗的用途和包含her2二聚化抑制剂帕妥珠单抗的制品的制作方法
【专利摘要】本申请描述了HER2二聚化抑制剂类别中第一种，帕妥珠单抗的用途和包含HER2二聚化抑制剂类别中第一种，帕妥珠单抗的制品。具体地，本申请描述了下述方法：延长HER2阳性乳腺癌患者群体中的无进展存活；组合两种HER2抗体来治疗HER2阳性癌症，而不增加心脏毒性；治疗早期HER2阳性乳腺癌；通过共施用来自同一静脉内袋的帕妥珠单抗和曲妥珠单抗的混合物来治疗HER2阳性癌症；治疗HER2阳性转移性胃癌；用帕妥珠单抗、曲妥珠单抗和长春瑞滨来治疗HER2阳性乳腺癌；用帕妥珠单抗、曲妥珠单抗和芳香酶抑制剂来治疗HER2阳性乳腺癌；及治疗低HER3卵巢癌、原发性腹膜癌或输卵管癌。还描述了一种制品，其包含其中有帕妥珠单抗的管形瓶和其上提供安全性和/或功效数据的包装插页；一种制备所述制品的方法；及一种确保与其相关的、帕妥珠单抗的安全和有效使用的方法。另外，本申请描述了一种静脉内(IV)袋，其含有适于对癌症患者施用的、帕妥珠单抗和曲妥珠单抗的稳定混合物。
CRL 10463
1990.05.24

HB-12697
1999.04.08
【专利说明】HER2二聚化抑制剂帕妥珠单抗的用途和包含HER2二聚化 抑制剂帕妥珠单抗的制品
[0001] 这一非临时申请依据37CFR§ I. 53(b)提交，依据35USC§ 119(e)要求2011年10 月14日提交的美国临时申请流水号61/547, 535、2011年12月5日提交的美国临时申请流 水号61/567,015、2012年6月8日提交的美国临时申请流水号61/657,669、2012年8月10 日提交的美国临时申请流水号61/682, 037和2012年8月29日提交的美国临时申请流水 号61/694, 584的权益，其通过提述完整并入。 发明领域
[0002] 本发明涉及HER2二聚化抑制剂类别中第一种，帕妥珠单抗（Pertuzumab)的用途 和包含HER2二聚化抑制剂类别中第一种，帕妥珠单抗（Pertuzumab)的制品。
[0003] 具体地，本发明涉及延长HER2阳性乳腺癌患者群体中的无进展存活；组合两种 HER2抗体来治疗HER2阳性癌症，而不增加心脏毒性；治疗早期HER2阳性乳腺癌；通过共施 用来自同一静脉内袋的帕妥珠单抗和曲妥珠单抗（Trastuzumab)的混合物来治疗HER2阳 性癌症；治疗HER2阳性转移性胃癌；用帕妥珠单抗、曲妥珠单抗和长春瑞?兵（vinorelbine) 来治疗HER2阳性乳腺癌；用帕妥珠单抗、曲妥珠单抗和芳香酶抑制剂来治疗HER2阳性乳腺 癌；及治疗低HER3卵巢癌、原发性腹膜癌或输卵管癌。
[0004] 还涉及一种制品，其包含其中有帕妥珠单抗的管形瓶和其上提供安全性和/或功 效数据的包装插页；一种制备所述制品的方法；和一种确保与其相关的、帕妥珠单抗的安 全和有效使用的方法。
[0005] 另外，本发明涉及一种静脉内（IV)袋，其含有适于对癌症患者施用的、帕妥珠单 抗和曲妥珠单抗的稳定混合物。
[0006] 发明背景
[0007] HER受体酪氨酸激酶家族的成员是细胞生长、分化和存活的重要介导物。该受体 家族包括四种独特的成员，包括表皮生长因子受体（EGFR、ErbBU或HERl)、HER2(ErbB2或 pl85neu)、HER3 (ErbB3)和HER4 (ErbB4或tyro2)。该受体家族的成员已牵连于多种类型的 人恶性肿瘤。
[0008] 鼠抗HER2抗体4D5的重组人源化型式（huMAb4D5-8, rhuMAb HER2,曲妥珠 单抗或HERCEPTIN?;美国专利No. 5, 821，337)在患有过表达HER2的转移性乳 腺癌、已接受过大量在前抗癌疗法的患者中是有临床活性的（Baselga等，J. Clin. Oncol.14:737-744(1996))。
[0009] 曲妥珠单抗在1998年9月25日从食品药品管理局得到上市许可，用于治疗其肿 瘤过表达HER2蛋白的转移性乳腺癌患者。目前，批准曲妥珠单抗在转移性背景中用作单一 药剂或与化疗或激素治疗组合，和作为单一药剂或与化疗组合作为辅助治疗用于患有早期 HER2阳性乳腺癌的患者。基于曲妥珠单抗的疗法现在是用于患有HER2阳性早期乳腺癌、不 具有其使用禁忌证的患者的推荐治疗（Herceptin 1*处方信息；NCCN指南，版本2. 2011)。曲 妥珠单抗加多西他赛（或帕利他赛）是一线转移性乳腺癌（MBC)治疗背景中的经注册的标 准医护（Slamon等，N Engl J Med. 2001 ;344(11) :783-792 ;Marty等，J Clin Oncol. 2005 ; 23(19):4265-4274)。
[0010] 尽管曲妥珠单抗的施用已在乳腺癌治疗中产生很好的结果，但来自拉帕替尼 (Iapatinib)临床试验的最近数据似乎表明即使施用曲妥珠单抗，HER2也在肿瘤生物学中 起着活性作用（Geyer 等，N Engl J Med2006;355:2733-2743)。
[0011] 基于HER2表达为疗法选择用HER2抗体曲妥珠单抗治疗的患者。参见例如， W099/31140(Paton 等）、US2003/0170234Al(Hellmann，S.)和 US2003/0147884(Paton 等）；以及 W001/89566, US2002/0064785 和 US2003/0134344 (Mass 等）。亦参见美国专利 No. 6, 573, 043、美国专利No. 6, 905, 830和US2003/0152987，Cohen等，其涉及用于检测HER2 过表达和扩增的免疫组织化学（IHC)和荧光原位杂交（FISH)。如此，对转移性乳腺癌的最 佳管理现在不仅考虑患者的一般状况、医学史、和受体状态，而且还考虑HER2状态。
[0012] 帕妥珠单抗（亦称为重组人源化单克隆抗体2C4(rhuMAb2C4); Genentech, Inc, South San Francisco)代表称为 HER 二聚化抑制剂（HDI)的一 类新药剂中的第一种，且发挥抑制HER2与其他HER受体（如EGFR/HER1、HER2、 HER3和HER4)形成活性异二聚体或同二聚体的能力的功能。参见例如，Harari和 Yarden 0ncogenel9:6102_14(2000) ;Yarden 和 Sliwkowski. Nat Rev Mol Cell Biol2:127-37(2001);Sliwkowski Nat Struct Bioll0:158-9(2003);Cho 等 Nature421:756-60 (2003);和 Malik 等 Pro Am Soc Cancer Res44:176-7 (2003)。
[0013] 已显示帕妥珠单抗对肿瘤细胞中HER2-HER3异二聚体形成的阻断抑制关键的细 胞信号传导，其导致降低的肿瘤增殖和存活（Agus等Cancer Cel 12:127-37(2002))。
[0014] 帕妥珠单抗已在临床中进彳丁作为单一药剂的试验，即患有晚期癌症的患者的Ia 期试验和患有卵巢癌和乳腺癌以及肺癌和前列腺癌的患者中的II期试验。在I期研究中， 将患有不能治愈的、局部晚期的、再发或转移性实体瘤，已在标准疗法期间或之后进展的患 者用每3周静脉内给药的帕妥珠单抗治疗。帕妥珠单抗一般耐受较好。20位可评估应答 的患者中有3位实现肿瘤消退。确认了 2位患者的部分响应。在21位患者中有6位中观 察到持续超过2. 5个月的稳定疾病（Agus等Pro Am Soc Clin 0ncol22:192(2003))。在 2. 0-15mg/kg的剂量，帕妥珠单抗的药动学为线性，且均值清除范围为2. 69至3. 74mL/d/ kg，均值终末消除半衰期范围为15. 3至27. 6天。未检测到针对帕妥珠单抗的抗体（Allison 等 Pro Am Soc Clin 0ncol22:197(2003))。
[0015] US2006/0034842描述了用抗ErbB2抗体组合来治疗表达ErbB的癌症的方法。 US2008/0102069描述了曲妥珠单抗和帕妥珠单抗在治疗HER2阳性转移性癌症如乳腺癌 中的用途。Baselga 等，J Clin Oncol, 2007ASC0 Annual Meeting Proceedings Part I ，Col. 25, No. 18S (June20Supplement)，2007:1004 报告 了对患有经预治疗的 HER2 阳性 乳腺癌、在用曲妥珠单抗治疗期间已进展的患者的治疗，其使用曲妥珠单抗和帕妥珠单 抗的组合。Portera等，J Clin 0ncol，2007ASC0 Annual Meeting Proceedings Part I. Vol. 25, No. 18S(June 20 Supplement), 2007:1028 评估了曲妥珠单抗 + 帕妥珠单抗组 合疗法在已在基于曲妥珠单抗的疗法上疾病进展的HER2阳性乳腺癌患者中的功效和安全 性。作者得出结论，需要对该组合治疗的功效的进一步评估来定义该治疗方案的总体风险 和益处。
[0016] 帕妥珠单抗已在II期研究中与曲妥珠单抗组合在患有HER2阳性转移性乳腺癌、 先前针对转移性疾病接受过曲妥珠单抗的患者中进行评估。一项由国家癌症研究院（NCI) 进行的研究招募了 11位患有先前治疗过的HER2阳性转移性乳腺癌的患者。11位患者 中有 2 位展现出部分响应（PR) (Baselga 等，J Clin Oncol 2007 ASCO Annual Meeting Proceedings ;25:18S (June 20 Supplement) : 1004。在患有早期 HER2 阳性乳腺癌的女性中 评估帕妥珠单抗和曲妥珠单抗加化疗（多西他赛）的新组合方案效果的II期新辅助研究 的结果（2010年12月8-12日在CTRC-AACR圣安东尼奥乳腺癌学术会议（SABCS)上呈现） 显示，在手术前的新辅助背景中给予两种HER2抗体加多西他赛将乳腺中完全肿瘤消失的 比率（病理学完全响应率，pCR，45.8个百分数）相比于曲妥珠单抗加多西他赛（pCR，29.0 个百分数）显著改进了超过一半，P = 〇· 014。
[0017] 涉及HER2抗体的专利公开文本包括：美国专利No. 5, 677, 171 ;5, 720, 937 ; 5, 720, 954 ；5, 725, 856 ；5, 770, 195 ；5, 772, 997 ；6, 165, 464 ；6, 387, 371 ；6, 399, 063 ； 6, 015, 567 ；6, 333, 169 ；4, 968, 603 ；5, 821, 337 ；6, 054, 297 ；6, 407, 213 ；6, 639, 055 ； 6, 719, 971 ；6, 800, 738 ；8, 075, 890 ；5, 648, 237 ；7, 018, 809 ；6, 267, 958 ；6, 685, 940 ； 6, 821, 515 ；7, 060, 268 ；7, 682, 609 ；7, 371, 376 ；6, 127, 526 ；6, 333, 398 ；6, 797, 814 ； 6, 339, 142 ；6, 417, 335 ；6, 489, 447 ；7, 074, 404 ；7, 531, 645 ；7, 846, 441 ；7, 892, 549 ； 8, 075, 892 ；6, 573, 043 ；6, 905, 830 ；7, 129, 051 ；7, 344, 840 ；7, 468, 252 ；7, 674, 589 ； 7, 919, 254 ；6, 949, 245 ；7, 485, 302 ；7, 498, 030 ；7, 501, 122 ；7, 537, 931 ；7, 618, 631 ； 7, 862, 817 ；7, 041, 292 ；6, 627, 196 ；7, 371, 379 ；6, 632, 979 ；7, 097, 840 ；7, 575, 748 ； 6, 984, 494 ；7, 279, 287 ；7, 811, 773 ；7, 993, 834 ；8, 076, 066 ；8, 044, 017 ；7, 435, 797 ； 7, 850, 966 ；7, 485, 704 ；7, 807, 799 ；8, 142, 784 ；7, 560, 111 ；7, 879, 325 ；8, 241, 630 ； 7, 449, 184 ;8, 163, 287 ;7, 700, 299 ;7, 981，418 ;8, 247, 397 ;和 US2010/0016556 ; US2005/0244929 ；US2001/0014326 ；US2003/0202972 ；US2006/0099201 ；US2010/0158899 ； US2011/0236383 ；US2011/0033460 ；US2008/0286280 ；US2005/0063972 ；US2006/0182739 ； US2009/0220492 ；US2003/0147884 ；US2004/0037823 ；US2005/0002928 ；US2007/0292419 ； US2008/0187533 ；US2011/0250194 ；US2012/0034213 ；US2003/0152987 ；US2005/0100944 ； US2006/0183150 ；US2008/0050748 ；US2009/0155803 ；US2010/0120053 ；US2005/0244417 ； US2007/0026001 ；US2008/0160026 ；US2008/0241146 ；US2005/0208043 ；US2005/0238640 ； US2006/0034842 ；US2006/0073143 ；US2006/0193854 ；US2006/0198843 ；US2011/0129464 ； US2007/0184055 ；US2007/0269429 ；US2008/0050373 ；US2006/0083739 ；US2009/0087432 ； US2006/0210561 ；US2002/0035736 ；US2002/0001587 ；US2008/0226659 ；US2002/0090662 ； US2006/0046270 ；US2008/0108096 ；US2007/0166753 ；US2008/0112958 ；US2009/0239236 ； US2012/0034609 ；US2012/0093838 ；US2004/0082047 ；US2012/0065381 ；US2009/0187007 ； US2011/0159014 ；US2004/0106161 ；US2011/0117096 ；US2004/0258685 ；US2009/0148402 ； US2009/0099344 ；US2006/0034840 ；US2011/0064737 ；US2005/0276812 ；US2008/0171040 ； US2009/0202536 ；US2006/0013819 ；US2012/0107391 ；US2006/0018899 ；US2009/0285837 ； US2011/0117097 ；US2006/0088523 ；US2010/0015157 ；US2006/0121044 ；US2008/0317753 ； US2006/0165702 ；US2009/0081223 ；US2006/0188509 ；US2009/0155259 ；US2011/0165157 ； US2006/0204505 ；US2006/0212956 ；US2006/0275305 ；US2012/0003217 ；US2007/0009976 ； US2007/0020261 ；US2007/0037228 ；US2010/0112603 ；US2006/0067930 ；US2007/0224203 ； US2011/0064736 ；US2008/0038271 ；US2008/0050385 ；US2010/0285010 ；US2011/0223159 ； US2008/0102069 ；US2010/0008975 ；US2011/0245103 ；US2011/0246399 ；US2011/0027190 ； US2010/0298156 ；US2011/0151454 ；US2011/0223619 ；US2012/0107302 ；US2009/0098135 ； US2009/0148435 ；US2009/0202546 ；US2009/0226455 ；US2009/0317387 ；US2011/0044977 ； US2012/0121586。
[0018] 发明概述
[0019] 在第一个方面，本发明涉及一种用于将HER2阳性乳腺癌患者群体中的无进展存 活延长6个月或更长的方法，包括对群体中的患者施用帕妥珠单抗、曲妥珠单抗和化疗（例 如紫杉烷，如多西他赛）。任选地，所述方法导致群体中的患者中客观响应率为80%或更 高。任选地，乳腺癌是转移性或局部再发的、不可切除的乳腺癌，或从头IV期疾病（de novo Stage IV disease)。在一个实施方案中，群体中的患者：未接受先前治疗或在辅助治疗后 复发，在基线处具有> 50%的左心室射血分数（LVEF)，和/或具有0或1的东部肿瘤学协 作组表现状况（Eastern Cooperative Oncology Group performance status) (ECOG PS)。 任选地，HER2阳性乳腺癌定义为免疫组织化学（IHC) 3+和/或荧光原位杂交（FISH)扩增比 > 2. 0。任选地，所述方法将死亡风险相对于用曲妥珠单抗和化疗治疗的患者降低约34% 或更多。
[0020] 在另一个方面，本发明涉及在HER2阳性癌症患者群体中组合两种HER2抗体来治 疗HER2阳性癌症而不增加心脏毒性的方法，包括对所述群体中的患者施用帕妥珠单抗、 曲妥珠单抗和化疗。任选地，针对症状性左心室收缩功能障碍（LVSD)或充血性心力衰竭 (CHF)的发生率或左心室射血分数（LVEF)的降低来监测所述患者群体中心脏毒性。任选 地，HER2阳性癌症为乳腺癌，例如转移性或局部再发的、不可切除的乳腺癌，或从头IV期疾 病。
[0021] 在另一个方面，本发明涉及一种制品，包含其中有帕妥珠单抗的管形瓶和包装插 页，其中所述包装插页提供表3或表4中的安全性数据和/或表2、表5、图8或图10中的 功效数据。
[0022] 本发明另外涉及一种用于制备制品的方法，包括将其中有帕妥珠单抗的管形瓶与 包装插页包装在一起，其中所述包装插页提供表3或表4中的安全性数据和/或表2、表5、 图8或图10中的功效数据。
[0023] 在一个相关方面，本发明涉及一种确保帕妥珠单抗的安全和有效使用的方法，包 括将其中有帕妥珠单抗的管形瓶与包装插页包装在一起，其中所述包装插页提供表3或表 4中的安全性数据和/或表2、表5、图8或图10中的功效数据。
[0024] 任选地，所述制品包含单剂管形瓶，其含有约420mg的帕妥珠单抗。
[0025] 任选地，所述包装插页进一步包含实施例4中的警告框（warning box)。
[0026] 任选地，所述包装插页进一步提供实施例9或表14中的总体存活（OS)功效数据。
[0027] 在另一个方面，本发明涉及一种治疗早期HER2阳性乳腺癌的方法，包括对患有 乳腺癌的患者施用帕妥珠单抗、曲妥珠单抗和化疗，其中所述化疗包含基于蒽环类抗生素 (anthracycline)的化疗（例如5-FU、表柔比星（epirubicin)和环磷酰胺（FEC))，或基于 卡钼的化疗（例如多西他赛和卡钼）。任选地，将帕妥珠单抗与基于蒽环类抗生素的化疗或 基于卡钼的化疗并行施用。在该方法的一个实施方案中，帕妥珠单抗施用相对于没有帕妥 珠单抗的治疗不增加心脏毒性。任选地，这类对早期HER2阳性乳腺癌的治疗包含新辅助或 辅助疗法。
[0028] 本发明还涉及一种治疗患者中HER2阳性癌症的方法，包括对所述患者共施用来 自同一静脉内袋的帕妥珠单抗和曲妥珠单抗的混合物。这类方法任选地还包括对患者施用 化疗。
[0029] 在一个相关方面，本发明提供一种静脉内（IV)袋，其含有适于对癌症患者施用的 帕妥珠单抗和曲妥珠单抗的稳定混合物。任选地，所述混合物在盐水溶液中；例如包含约 0· 9% NaCl 或约(λ 45% NaCl。任选地，IV袋是 250mL0· 9%盐水聚烯烃（saline polyolefin) 或聚氯乙烯输注袋。在一个实施方案中，IV袋含有约420mg或约840mg帕妥珠单抗和约 200mg至约IOOOmg曲妥珠单抗的混合物。在一个实施方案中，所述混合物在5°C或30°C稳 定长达24小时。混合物的稳定性可通过一种或多种选自以下的测定法来评估：颜色、外观 和澄清度（CAC)，浓度和浊度分析，微粒分析，大小排阻层析（SEC)，离子交换层析（IEC)，毛 细管区带电泳（CZE)，成像毛细管等点聚焦（iCIEF)或效力测定法。
[0030] 本发明提供一种针对胃癌的新治疗方案。具体地，本发明涉及用曲妥珠单抗、帕妥 珠单抗和至少一种化疗的组合来治疗人受试者中的HER2阳性胃癌。
[0031] 在一个方面，本发明涉及一种在人受试者中治疗HER2阳性胃癌的方法，包括对所 述受试者施用帕妥珠单抗、曲妥珠单抗和化疗。
[0032] 在一个方面，本发明涉及一种在人受试者中治疗胃癌的方法，包括对患有胃癌的 受试者施用帕妥珠单抗，其中在所有治疗周期中以840mg的剂量施用帕妥珠单抗。
[0033] 在另一个方面，本发明涉及一种改进患有HER2阳性胃癌的人受试者中的存活的 方法，包括对所述受试者施用帕妥珠单抗、曲妥珠单抗和化疗。
[0034] 在又一个方面，本发明涉及帕妥珠单抗，其用于与曲妥珠单抗和化疗组合在人受 试者中治疗HER2阳性胃癌。
[0035] 在再一个方面，本发明涉及帕妥珠单抗在制备用于治疗HER2阳性胃癌的药物中 的用途，其中所述治疗包括与曲妥珠单抗和化疗组合施用帕妥珠单抗。
[0036] 在又一个方面，本发明涉及曲妥珠单抗在制备用于治疗HER2阳性胃癌的药物中 的用途，其中所述治疗包括与帕妥珠单抗和化疗组合施用曲妥珠单抗。
[0037] 在另一个方面，本发明涉及一种包含包括帕妥珠单抗的容器和用法说明书的试剂 盒，所述用法说明书关于与曲妥珠单抗和化疗组合施用帕妥珠单抗以治疗受试者中的HER2 阳性胃癌。
[0038] 在又一个方面，本发明涉及一种包含包括曲妥珠单抗的容器和用法说明书的试剂 盒，所述用法说明书关于与帕妥珠单抗和化疗组合施用曲妥珠单抗以治疗受试者中的HER2 阳性胃癌。
[0039] 在所有方面，胃癌可以是例如不可切除的局部晚期的胃癌，或转移性胃癌，或晚期 的、术后再发的胃癌，其可能不适合由通过已知方法的治愈性治疗处理。在所有方面，胃癌 包括胃或胃食管连接部的腺癌。在所有方面，在一个具体的实施方案中，所述患者未接受针 对转移性胃癌的在前抗癌治疗。在所有方面，在一个具体的实施方案中，化疗包括施用钼和 /或氟嘧啶。在某些实施方案中，所述钼是顺钼。在其他实施方案中，所述氟嘧啶包含卡培 他滨和/或5-氟尿嘧啶（5-FU)。在所有方面，患者的HER2阳性状态可以为例如IHC3+或 IHC2+/ISH+。在所有方面，在具体的实施方案中，所述治疗改进存活，包括总体存活（OS)和 /或无进展存活（PFS)和/或响应率（RR)。在所有方面，在具体的实施方案中，所述患者具 有0-1的ECOG PS。在所有方面，治疗周期一般彼此相隔4周或更短，或相隔3周或更短，或 相隔2周或更短，或相隔1周或更短。
[0040] 在一个具体的方面，本发明涉及一种在未接受针对转移性疾病的在前化疗（除了 在当前治疗前超过6个月完成的在前辅助或新辅助治疗）的人患者中治疗HER2阳性不可 切除的或转移性的胃或胃食管连接部腺癌的方法，包括以改进无进展存活（PFS)和/或总 体存活（OS)的量对所述患者施用帕妥珠单抗、曲妥珠单抗、顺钼和卡培他滨和/或氟尿嘧 啶（5-FU)，其中所述患者具有0-1的ECOG PS。在一个具体的实施方案中，所述患者未接受 过使用钼的在前治疗。
[0041] 在另一个方面，本发明涉及一种在患有HER2阳性不可切除的或转移性的胃或胃 食管连接部腺癌的患者中改进无进展存活的方法，包括与曲妥珠单抗和化疗组合地对所述 患者施用帕妥珠单抗。
[0042] 在一个别的方面，本发明涉及一种在患者中治疗HER2阳性乳腺癌的方法，包括对 所述患者施用帕妥珠单抗、曲妥珠单抗和长春瑞滨。任选地，从单个静脉内袋内对所述患者 共施用帕妥珠单抗和曲妥珠单抗。任选地，乳腺癌是转移性或局部晚期的。在一个实施方 案中，所述患者先前未接受转移性背景中的系统性非激素抗癌疗法。
[0043] 在另一个方面，本发明涉及一种在患者中治疗HER2阳性乳腺癌的方法，包括对所 述患者施用帕妥珠单抗、曲妥珠单抗和芳香酶抑制剂（例如阿那曲唑（anastrazole)或来 曲唑（letrozole))。任选地，所述乳腺癌是激素受体阳性的晚期乳腺癌，其中所述激素受体 例如是雌激素受体（ER)和/或孕酮受体（PgR)。依照本发明的这一实施方案，患者先前未 接受转移性背景中的系统性非激素抗癌疗法。而且，本文中患者任选地接受诱导化疗（例 如包含紫杉烷）。
[0044] 在另一个实施方案中，本发明涉及一种治疗癌症患者的方法，包括对所述患者施 用起始剂量为840mg的帕妥珠单抗，接着其后每3周420mg剂量的帕妥珠单抗，而且如果连 续两剂420mg之间的时间为6周或更长的话,进一步包括对所述患者再施用840mg剂量的 帕妥珠单抗。任选地，所述方法还包括在再施用840mg剂量后每3周施用420mg的帕妥珠 单抗。在一个实施方案中，所述癌症患者患有HER2阳性乳腺癌。
[0045] 在一个别的方面，本发明涉及一种在患者中治疗HER2阳性转移性或局部再发的 乳腺癌的方法，包括对所述患者施用帕妥珠单抗、曲妥珠单抗和类紫杉烷（例如多西他赛、 帕利他赛或nab-帕利他赛），其中所述患者先前已用曲妥珠单抗和/或拉帕替尼作为辅助 或新辅助疗法治疗过。
[0046] 在又一个方面，本发明涉及一种用于在患者中治疗低HER3卵巢癌、原发性腹膜癌 或输卵管癌的方法，包括对所述患者施用帕妥珠单抗和化疗，其中所述化疗包含类紫杉烷 (例如帕利他赛）或托泊替康（topotecan)。
[0047] 在一个另外的方面，本发明涉及一种用于在患者中治疗低HER3卵巢癌、原发性腹 膜癌或输卵管癌的方法，包括对所述患者施用帕妥珠单抗和化疗，其中所述低HER3癌症以 等于或低于约2. 81的浓度比表达HER3 mRNA，如通过聚合酶链式反应（PCR)评估的。在一 个实施方案中，所述化疗包含吉西他滨（gemcitabine)、卡钼、帕利他赛、多西他赛、托泊替 康或PEG化脂质体多柔比星（doxorubicin) (PLD)。任选地，所述化疗包含帕利他赛或托泊 替康。在一个实施方案中，所述癌症是钼抗性或钼不应性的上皮卵巢癌。
[0048] 附图简述
[0049] 图1提供HER2蛋白结构的示意图，及其胞外域的域I-IV的氨基酸序列（分别为 SEQ ID No. 1-4)。
[0050] 图2A和2B绘出以下的氨基酸序列的比对：鼠单克隆抗体2C4的可变轻（VJ (图 2A)和可变重（Vh)(图2B)域（分别为SEQ ID No. 5和6);变体574/帕妥珠单抗的 '和Vh 域（分别为SEQ ID No. 7和8)，及人八和Vh共有框架（humK 1，轻卡帕亚组I ;humIII，重 亚组ΠΙ)(分别为SEQ ID No. 9和10)。星号指示帕妥珠单抗和鼠单克隆抗体2C4的可变 域之间或帕妥珠单抗和人框架的可变域之间的差异。互补决定区（CDR)在括号内。
[0051] 图3A和3B显示帕妥珠单抗轻链（图3A;SEQ ID NO. 11)和重链（图3B ;SEQ ID No. 12)的氨基酸序列。⑶R粗体显示。轻链和重链的计算分子量为23, 526. 22Da和 49, 216. 56Da(半胱氨酸以还原形式）。碳水化合物模块附接于重链的Asn299。
[0052] 图4A和4B分别显示曲妥珠单抗轻链（图4A ;SEQ ID NO. 13)和重链（图4B ;SEQ ID NO. 14)的氨基酸序列。可变轻和可变重域的边界由箭头指示。
[0053] 图5A和5B分别绘出变体帕妥珠单抗轻链序列（图5A ;SEQ ID NO. 15)和变体帕 妥珠单抗重链序列（图5B ; SEQ ID NO. 16)。
[0054] 图6显示实施例1中的研究方案。ECOG =东部肿瘤学协作组；PD =进展性疾病。 注意：曲妥珠单抗、帕妥珠单抗和顺钼通过IV输注在每个3周周期的第1天施用。卡培他 滨每天两次口服施用，在每个3周周期从第1天的傍晚到第15天的上午。（a)HER2阳性肿 瘤定义为IHC3+或IHC2+，其与ISH+组合（即IHC3+/ISH+或IHC2+/ISH+) ; (b)曲妥珠单 抗对于周期1，以8mg/kg的加载剂量，对于后续周期以6mg/kg的剂量；（c)在每个周期的第 1天，帕妥珠单抗对于周期1以840mg的加载剂量，对于周期2-6以420mg的剂量。
[0055] 图7绘出实施例3中的研究中的招募、意图治疗和安全性群体和患者退出。
[0056] 图8是无进展存活（PFS)的卡普兰-迈耶曲线（Kaplan-Meier Curve)，如由独立 审查机构（IRF)针对实施例3中的研究评估的。
[0057] 图9绘出对于实施例3中的研究，按照患者亚组分的PFS。
[0058] 图10绘出对于实施例3中的研究，总体存活。
[0059] 图11是实施例5中具有低心脏风险因子的HER2阳性、新辅助乳腺癌患者中的给 药安排的概览。允许手术后和辅助曲妥珠单抗治疗期间的另外的放疗、激素疗法和化疗，如 果调查人员认为必要的话。
[0060] 图12绘出了对于实施例5中的研究，LVEF (中央读数）中的均值变化。
[0061] 图13显示对于实施例5中的研究的病理学完全响应（pCR)。
[0062] 图14绘出对于实施例5中的研究，按照激素受体状态分的病理学完全响应。
[0063] 图15绘出在30°C在0. 9%盐水PO IV输注袋中帕妥珠单抗/曲妥珠单抗混合物 (840mg)的帕妥珠单抗SEC概况（1)时间=0 ; (2)时间=24小时。展开图；全视图（插 图）。
[0064] 图16显示在30°C在0. 9%盐水PO IV输注袋中帕妥珠单抗/曲妥珠单抗混合物 (840mg)的曲妥珠单抗SEC概况（1)时间=O ; (2)时间=24小时。展开图；全视图（插 图）。
[0065] 图17显示在30°C在0. 9%盐水PO IV输注袋中帕妥珠单抗/曲妥珠单抗混合物 的帕妥珠单抗IEC概况（1)时间=0 ; (2)时间=24小时。全视图。
[0066] 图18绘出在30°C在0. 9%盐水PO IV输注袋中帕妥珠单抗/曲妥珠单抗混合物 的曲妥珠单抗IEC概况（1)时间=0; (2)时间=24小时。展开图；全视图（插图）。
[0067] 图19绘出在30°C在0. 9%盐水PO IV输注袋中帕妥珠单抗/曲妥珠单抗混合物 的CE-SDS LIF非还原概况（1)时间=0 ; (2)时间=24小时。展开图。
[0068] 图20显示在30°C在0. 9%盐水PO IV输注袋中帕妥珠单抗/曲妥珠单抗混合物 的CE-SDS LIF还原概况（1)时间=0 ; (2)时间=24小时。展开图。
[0069] 图21是在30°C在0. 9%盐水PO IV输注袋中帕妥珠单抗/曲妥珠单抗混合物的 CZE(I)时间=0 ; (2)时间=24小时。全视图。
[0070] 图22显示在30°C在0. 9%盐水PO IV输注袋中帕妥珠单抗/曲妥珠单抗混合物 的iCIEF(l)时间=0 ; (2)时间=24小时。全视图。
[0071] 图23显示在0. 9 %盐水PO IV输注袋中帕妥珠单抗/曲妥珠单抗混合物、单独的 帕妥珠单抗和单独的曲妥珠单抗的效力剂量响应曲线（μ g/mL对RFU) (1)时间=0 ; (2)时 间=24小时。
[0072] 图24绘出在0. 9%盐水PO IV输注袋中帕妥珠单抗/曲妥珠单抗混合物（1560mg) 的帕妥珠单抗 SEC 概况（1)P05°C TO ; (2)P05°C T24 小时；（3)P030°C TO ; (4)P030°C T24 小 时；（5)PVC5°C TO ; (6)PVC5°C T24 小时；（7)PVC30°C TO ; (8)PVC30°C T24 小时。展开图；全 视图（插图）。
[0073] 图25显示在0. 9 %盐水PO IV输注袋中帕妥珠单抗/曲妥珠单抗混合物（1560mg) 的曲妥珠单抗 SEC 概况（1)P05°C TO ; (2)P05°C T24 小时；（3)P030°C TO ; (4)P030°C T24 小 时；（5)PVC5°C TO ; (6)PVC5°C T24 小时；（7)PVC30°C TO ; (8)PVC30°C T24 小时。展开图；全 视图（插图）。
[0074] 图26显示在0. 9 %盐水PO IV输注袋中帕妥珠单抗/曲妥珠单抗混合物（1560mg) 的帕妥珠单抗IEC(帕妥珠单抗-快速）概况（1)P05 °C TO ; (2)P05 °C T24小时；（3) P030 °C TO ; (4) P030 °C T24 小时；（5) PVC5 °C TO ; (6) PVC5 °C T24 小时；（7) PVC30 °C TO ; (8) PVC30°CT24小时。全视图。
[0075] 图27显示在0. 9%盐水PO IV输注袋中帕妥珠单抗/曲妥珠单抗混合物（1560mg) 的曲妥珠单抗 IEC 概况（1)P05°C TO ; (2)P05°C T24 小时；（3)P030°C TO ; (4)P030°C T24 小 时；（5)PVC5°C TO ; (6)PVC5°C T24 小时；（7)PVC30°C TO ; (8)PVC30°C T24 小时。全视图。
[0076] 图28绘出实施例7的研究方案。
[0077] 图29显示实施例8的研究设计。
[0078] 图30显示实施例11第1部分的研究设计。
[0079] 图31显示实施例11第2部分的研究设计。
[0080] 图32显示实施例1中IIa期胃癌（GC)研究的所取样品和时间点。
[0081] 图33显示在GC研究的两臂（用420mg (臂A)或840mg (臂B)的帕妥珠单抗治 疗）中的患者群体的人口统计学。
[0082] 图34显示分别在臂A和B中的患者的GC史。
[0083] 图35显示分别在臂A和B中的GC患者部署。
[0084] 图36显示在GC研究的分别的臂A和B中的总体响应率。
[0085] 图37显示胃癌（GC)对转移性乳腺癌（MBC)中帕妥珠单抗第42日浓度评估的 结果。第 42 日 C 谷在 GC(J0SHUA 840/420mg)中相对于 MBC(CLE0840/420mg)低?37%。 J0SHUA840/420mg和840/840mg方案均导致在90 %的患者中第42日C谷彡20 μ g/mL。 了05!1说840/84011^方案导致在6(：中与在]\^(：((：1^0 840/42011^)中观察到的相当的第42日 C谷。
[0086] 发明详述
[0087] 本文中使用的一些缩写的术语表：不良药物反应（ADR)，不良事件（AE)，碱性磷酸 酶（ALP)，绝对嗜中性粒细胞计数（ANC)，浓度-时间曲线下面积（AUC)，毛细管区带电泳 (CZE)，颜色、外观和澄清度（CAC)，对帕妥珠单抗和曲妥珠单抗的临床评估（CLEOPATRA)， 置信区间（Cl)，生色原位杂交（CISH)，最大浓度（C max)，完全响应（CR)，病例报告表（CRF)， 计算机断层照相术（CT)，用于不良事件的通用术语标准（CTCAE)，多西他赛（D)，剂量限 制毒性（DLT)，伦理委员会（EC)，表柔比星，顺钼和5-氟尿嘧啶（ECF)，心回波图（ECHO)， 表皮生长因子受体（EGFR)，欧盟（EU),雌激素受体（ER), 5-氟尿嘧啶，甲氨蝶呤和多柔比 星（FAMTX)，荧光原位杂交（FISH)，5-氟尿嘧啶（5-FU)，危险比（HR)，人表皮生长因子受 体（EGFR)，胃癌（GC)，优良临床实践（GCP)，人表皮生长因子受体2 (HER2)，离子交换层析 (IEC)，免疫组织化学（IHC)，独立审查机构（IRF)，机构审查委员会（IRB)，原位杂交（ISH)， 静脉内（IV)，成像毛细管等电聚焦（iCIEF)，左心室射血分数（LVEF)，丝裂霉素 C，顺钼 和5-氟尿嘧啶（MCF)，磁共振成像（MRI)，转移性乳腺癌（MBC)，多门采集（MUGA)，不显著 (NS)，总体存活（OS)，病理学完全响应（pCR)，聚烯烃（PO)，聚氯乙烯（PVC)，进展性疾病 (H))，无进展存活（PFS)，药动学（PK)，部分响应（PR)，孕酮受体（PgR)，实体瘤中的响应评 估标准（RECIST)，严重不良事件（SAE)，大小排阻层析（SEC)，稳定疾病（SD)，研究管理组 (SMT)，注射用无菌水（SWFI)，距最大血浆浓度的时间（t max)，正常上限（ULN)。
[0088] I.定义
[0089] 如本文中使用的，术语"化疗"指包含如下文定义的化疗施用的治疗。
[0090] "存活"指患者保持存活，并且包括总体存活以及无进展存活。
[0091] "总体存活"或"0S"指患者自诊断或治疗时间起保持限定时段存活，诸如1年、5年 等。就实施例中描述的临床试验的目的而言，总体存活（OS)定义为从患者群体随机化的日 期起到因任何原因而死亡的日期的时间。
[0092] "无进展存活"或"PFS"指患者保持存活且癌症没有进展或恶化。就实施例中描述 的临床试验的目的而言，无进展存活（PFS)定义为从研究群体随机化到首次记载的进展性 疾病或难管理的毒性或因任何原因的死亡（以先发生者为准）的时间。疾病进展可通过任 何临床接受的方法记载，如例如，如通过实体瘤中的响应评估标准（RECIST)确定的射线照 相进展性疾病（Therasse等，J Natl Ca Inst2000;92(3) :205-216)，通过对脑脊髓液的细 胞学评估诊断的癌性脑膜炎，和/或监测皮下损伤的胸壁再发的医学摄影。
[0093] "延长存活"意味着使依照本发明治疗的患者中总体或无进展存活相对于未治疗 的患者和/或相对于用一种或多种已获批准的抗肿瘤药剂治疗但未接受依照本发明治疗 的患者延长。在一个具体的例子中，"延长存活"意味着使接受本发明的组合疗法（例如用 帕妥珠单抗、曲妥珠单抗和化疗的组合治疗）的癌症患者的无进展存活（PFS)和/或总体 存活（OS)相对于仅用曲妥珠单抗和化疗治疗的患者延长。在另一个具体的例子中，"延长 存活"意味着使接受本发明的组合疗法（例如用帕妥珠单抗、曲妥珠单抗和化疗的组合治 疗）的癌症患者的无进展存活（PFS)和/或总体存活（OS)相对于仅用帕妥珠单抗和化疗 治疗的患者延长。
[0094] "客观响应"指可测量的响应，包括完全响应（CR)或部分响应（PR)。
[0095] "完全响应"或"CR"意指癌症的所有症候响应治疗而消失。这并不总是意味着癌 症得到治愈。
[0096] "部分响应"或"PR"指一处或多处肿瘤或损伤的大小或癌症在身体中的范围响应 治疗而缩小。
[0097] "HER受体"是属于HER受体家族的受体蛋白质酪氨酸激酶，包括EGFR、HER2、HER3 和HER4受体。HER受体通常会包含胞外域，它可结合HER配体和/或与另一个HER受体分 子二聚化；亲脂性跨膜域；保守的胞内酪氨酸激酶域；和含有几个可被磷酸化的酪氨酸残 基的羧基末端信号传导域。HER受体可以是"天然序列"HER受体或其"氨基酸序列变体"。 优选的是，HER受体是天然序列人HER受体。
[0098] 表述"ErbB2"和"HER2"在本文中可互换使用，指例如Semba 等，PNAS (USA) 82:6497-6501 (1985)和 Yamamoto 等 Nature319:230-234 (1986)中描述的人 HER2蛋白（Genebank登录号X03363)。术语"erbB2"指编码人ErbB2的基因，而"neu"指 编码大鼠 pl85neu的基因。优选的HER2是天然序列人HER2。
[0099] 本文中"HER2胞外域"或"HER2ECD"指锚定于细胞膜或处于循环中的在细胞外部 的HER2域，包括其片段。HER2的氨基酸序列显示于图1。在一个实施方案中，HER2的胞外 域可以包含4个域："域I"（约1-195的氨基酸残基；SEQ ID NO: 1)、"域II"（约196-319 的氨基酸残基；SEQ ID NO:2)、"域III"（约320-488的氨基酸残基；SEQ ID NO:3)和"域 IV"（约489-630的氨基酸残基；SEQ ID NO:4)(没有信号肽的残基编号）。参见Garrett 等 Mol. Cell. · 11:495-505(2003)，Cho 等 Nature421:756-760(2003), Franklin 等 Cancer Cell5:317-328 (2004)和 Plowman 等 Proc. Natl. Acad. Sci. 90:1746-1750 (1993)，以及本文 中图6。
[0100] "HER3"或"ErbB3"在本文中指如例如美国专利No. 5, 183, 884和5, 480, 968及 Kraus 等，PNAS (USA) 86:9193-9197 (1989)中公开的受体。
[0101] "低HER3"癌症是以低于该癌症类型中HER3表达的中值水平表达HER3的癌症。 在一个实施方案中，所述低HER3癌症是上皮卵巢癌、腹膜癌或输卵管癌。可评估癌症中的 HER3DNA、蛋白质和/或mRNA水平来确定癌症是否是低HER3癌症。关于低HER3癌症的更 多信息参见例如美国专利No. 7, 981，418。任选地，实施HER3 mRNA表达测定法来确定癌症 是低HER3癌症。在一个实施方案中，评估癌症中的HER3 mRNA水平，例如使用聚合酶链式 反应（PCR)，如定量逆转录PCR(qRT-PCR)。任选地，所述癌症以等于或低于约2. 81的浓度 比表达HER3,如通过qRT-PCR，例如使用COBAS Z480C?)仪评估的。
[0102] "HER二聚体"在本文中指包含至少两个HER受体的非共价联合二聚体。当 表达两种或更多种HER受体的细胞暴露于HER配体时可能形成此类复合物，且可通 过免疫沉淀进行分离及通过SDS-PAGE进行分析，如例如Sliwkowski等，J. Biol. Chem. 269(20):14661-14665(1994)中所述。其它蛋白质，如细胞因子受体亚基（例如 gpl30)可与所述二聚体联合。优选地，所述HER二聚体包含HER2。
[0103] "HER异二聚体"在本文中指包含至少两个不同HER受体的非共价联合异二聚体， 如 EGFR-HER2、HER2-HER3 或 HER2-HER4 异二聚体。
[0104] "HER抗体"是结合HER受体的抗体。任选地，HER抗体进一步干预HER活化或功 能。优选地，HER抗体结合HER2受体。本文中感兴趣的HER2抗体是帕妥珠单抗和曲妥珠 单抗。
[0105] "HER活化"指任一种或多种HER受体的活化或磷酸化。一般而言，HER活化导致 信号转导（例如由HER受体胞内激酶域引起的，磷酸化HER受体或底物多肽中的酪氨酸残 基）。HER活化可由结合包含感兴趣HER受体的HER二聚体的HER配体介导。结合HER二 聚体的HER配体可活化二聚体中一种或多种HER受体的激酶域，并由此导致一种或多种HER 受体中酪氨酸残基的磷酸化和/或其它底物多肽如Akt或MPK胞内激酶中酪氨酸残基的 磷酸化。
[0106] "磷酸化"指一个或多个磷酸基向蛋白质如HER受体或其底物的添加。
[0107] "抑制HER二聚化"的抗体是抑制或干扰HER二聚体形成的抗体。优选地，这类抗体 结合HER2于其异二聚体结合位点处。本文中最优选的二聚化抑制性抗体是帕妥珠单抗或 MAb2C4。抑制HER二聚化的抗体的其他例子包括结合EGFR并抑制其与一种或多种其他HER 受体二聚化的抗体（例如EGFR单克隆抗体806, MAb806,其结合活化或"未栓系"的EGFR ; 参见 Johns 等，J. Biol. Chem. 279 (29) : 30375-30384 (2004));结合 HER3 并抑制其与一种或 多种其他HER受体二聚化的抗体；和结合HER4并抑制其与一种或多种其他HER受体二聚化 的抗体。
[0108] "HER2二聚化抑制剂"是抑制包含HER2的二聚体或异二聚体形成的药剂。
[0109] HER2上的"异二聚体结合位点"指HER2胞外域中在与EGFR、HER3或HER4形成二 聚体时，接触EGFR、HER3或HER4胞外域中某区域或与EGFR、HER3或HER4胞外域中某区域形 成介面的区域。已发现所述区域在HER2的域II中（SEQ ID NO: 15)。Franklin等，Cancer Cell5:317-328(2004)。
[0110] "结合HER2的异二聚体结合位点的"HER2抗体结合域II(SEQ ID N0:2)中的残 基，且任选还结合HER2胞外域的其它域，如域I和III(SEQ ID N0:1和3)中的残基，而且 至少在一定程度上能在空间上阻碍HER2-EGFR、HER2-HER3或HER2-HER4异二聚体的形成。 Franklin 等，Cancer Cell5:317_328(2004)表征了存放在 RCSB 蛋白质数据库（ID Code IS78)的HER2-帕妥珠单抗晶体结构，举例说明了结合HER2的异二聚体结合位点的例示性 抗体。
[0111] "结合HER2的域II"的抗体结合域II(SEQ ID N0:2)中的残基和任选HER2的其 它域，如域I和III (分别为SEQ ID NO: 1和3)中的残基。优选的是，结合域II的抗体结 合HER2域I、II和III之间的连接处。
[0112] 就本文中目的而言，可交换使用的"帕妥珠单抗"和"rhuMAb2C4"指包含分别SEQ ID N0:7和8中的可变轻链和可变重链氨基酸序列的抗体。在帕妥珠单抗是完整抗体的情 况下，它优选包含IgGl抗体；在一个实施方案中，包含SEQ ID NO: 11或15中的轻链氨基 酸序列，和SEQ ID NO: 12或16中的重链氨基酸序列。任选地，所述抗体由重组中国仓鼠卵 巢（CHO)细胞产生。术语"帕妥珠单抗"和"rhuMAb2C4"在本文中覆盖具有美国采用名称 (USAN)或国际非专有名称（INN):帕妥珠单抗的药物的生物类似型式。
[0113] 就本文中目的而言，可交换使用的"曲妥珠单抗"和"rhuMAb4D5"指包含分别来自 SEQ ID NO: 13和14的可变轻链和可变重链氨基酸序列的抗体。在曲妥珠单抗是完整抗体 的情况下，它优选包含IgGl抗体；在一个实施方案中，包含SEQ ID NO: 13中的轻链氨基酸 序列和SEQ ID NO: 14中的重链氨基酸序列。任选地，所述抗体由中国仓鼠卵巢（CHO)细胞 产生。术语"曲妥珠单抗"和"rhuMAb4D5"在本文中覆盖具有美国采用名称（USAN)或国际 非专有名称（INN):曲妥珠单抗的药物的生物类似型式。
[0114] 术语"抗体"在本文中以最广义使用，具体覆盖单克隆抗体、多克隆抗体、多特异性 抗体（例如双特异性抗体）、及抗体片段，只要它们展现期望的生物学活性。
[0115] 非人（例如啮齿类）抗体的"人源化"形式指最低限度包含衍生自非人免疫球蛋白 的序列的嵌合抗体。对于大部分而言，人源化抗体是人免疫球蛋白（受体抗体），其中来自 受体高变区的残基用来自具有期望特异性、亲和力和能力的非人物种（供体抗体）如小鼠、 大鼠、家兔或非人灵长类的高变区的残基替换。在有些情况中，将人免疫球蛋白的框架区 (FR)残基用相应的非人残基替换。此外，人源化抗体可包含在受体抗体或供体抗体中没有 发现的残基。进行这些修饰是为了进一步改进抗体的性能。通常，人源化抗体会包含至少一 个、通常两个基本上整个如下的可变域，其中所有或基本上所有的高变环对应于非人免疫 球蛋白的高变环，且所有或基本上所有的FR是人免疫球蛋白序列的FR。任选的是，人源化 抗体还会包含至少部分的免疫球蛋白恒定区（Fe)，通常是人免疫球蛋白的恒定区。更多细 节参见 Jones 等，Nature321:522_525(1986) ;Riechmann 等，Nature332:323_329(1988); 及 Presta, Curr. Op. Struct. Biol. 2:593-596 (1992)。人源化的 HER2 抗体具体包括曲妥珠 单抗(HERCEPTIN?)，如记载于美国专利5, 821，337 (通过提述明确并入本文）的表3中 和如本文中定义的；和人源化2C4抗体，如本文中描述和定义的帕妥珠单抗。
[0116] "完整抗体"在本文中为包含两个抗原结合区和Fc区的抗体。优选地，完整抗体具 有功能性Fc区。
[0117] "抗体片段"包含完整抗体的一部分，优选包含其抗原结合区。抗体片段的例子包 括Fab、Fab'、F(ab'） 2和Fv片段；双抗体；线性抗体；单链抗体分子；及由抗体片段形成的 多特异性抗体。
[0118] "天然抗体"通常是由两条相同的轻链（L)和两条相同的重链⑶构成的约 150, 000道尔顿的异四聚体糖蛋白。每条轻链通过一个共价二硫键与重链连接，而二硫化物 连接的数目在不同免疫球蛋白同种型的重链间有所变化。每条重链和轻链还具有间隔规律 的链内二硫桥。每条重链在一端具有一个可变域（V h)，接着是多个恒定域。每条轻链具有 在一端的一个可变域（V1)和在另一端的一个恒定域。轻链的恒定域与重链的第一 ;〖亘定域 排列在一起，而轻链的可变域与重链的可变域排列在一起。认为特定的氨基酸残基在轻链 和重链可变域之间形成界面。
[0119] 术语"高变区"在用于本文时指抗体中负责抗原结合的氨基酸残基。高变区通常 包含来自"互补决定区"或"CDR"的氨基酸残基（例如轻链可变域中的残基24-34 (LI)、 50-56 (L2)和 89-97 (L3)及重链可变域中的 31-35 (HI)、50-65(H2)和 95-102 (H3); Kabat 等，Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed.Public Health Service,National Institutes of Health,Bethesda,MD· (1991))和 / 或那些 来自"高变环"的残基（例如轻链可变域中的残基26-32 (LI)、50-52(L2)和91-96 (L3) 及重链可变域中的 26-32(HI)、53-55(H2)和 96-101(H3) ;Chothia 和 Lesk, J. Mol. Biol. 196:901-917(1987))。"框架区"或"FR"残基是本文定义的高变区残基以外的那些可 变域残基。
[0120] 术语"Fc区"在本文中用于定义免疫球蛋白重链的C端区，包括天然序列Fc区和 变体Fc区。尽管免疫球蛋白重链的Fc区的边界可以变化，但人IgG重链Fc区通常定义为 自位置Cys226,或自Pro230处的氨基酸残基延伸至重链的羧基端。可以除去Fc区的C端 赖氨酸（依照EU编号系统的残基447)，例如在抗体的产生或纯化期间，或通过重组工程化 改造编码抗体重链的核酸。因此，完整抗体的组合物可以包含已除去所有K447残基的抗体 群体，未除去任何K447残基的抗体群体，和具有有和无 K447残基的抗体混合物的抗体群 体。
[0121] 除非另有指示，本文中免疫球蛋白重链中残基的编号方式是EU索引的编号方式， 如记载于Kabat 等，Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991)，其通过提述明确 并入本文。"如Kabat中的EU索引"指人IgGlEU抗体的残基编号方式。
[0122] "功能性Fc区"拥有天然序列Fc区的"效应器功能"。例示性的"效应器功能"包 括Clq结合；补体依赖性细胞毒性；Fc受体结合；抗体依赖性细胞介导的细胞毒性（ADCC); 吞噬作用；细胞表面受体（例如B细胞受体；BCR)下调等。此类效应器功能一般要求Fc区 与结合域（例如抗体可变域）联合，而且可使用多种测定法来评估，例如本文中所公开的。
[0123] "天然序列Fc区"包含与自然界中找到的Fc区的氨基酸序列相同的氨基酸序列。 天然序列人Fc区包括天然序列人IgGlFc区（非A和A同种异型）；天然序列人IgG2Fc区； 天然序列人IgG3Fc区；及天然序列人IgG4Fc区，以及其天然存在变体。
[0124] "变异/变体Fc区"包含由于至少一处氨基酸修饰，优选一处或多处氨基酸替代而 与天然序列Fc区的氨基酸序列有所不同的氨基酸序列。优选的是，变异Fc区具有与天然 序列Fc区或与亲本多肽的Fc区相比至少一处氨基酸替代，例如在天然序列Fc区中或在亲 本多肽的Fc区中具有约1处至约10处氨基酸替代，优选约1处至约5处氨基酸替代。变 异Fc区在本文中会优选与天然序列Fc区和/或亲本多肽的Fc区拥有至少约80%的同源 性，最优选与其至少约90 %的同源性，更优选与其至少约95 %的同源性。
[0125] 根据完整抗体的重链恒定域的氨基酸序列，可将其归入不同的"类"。完整抗体有 五种主要的类：IgA、IgD、IgE、IgG和IgM，其中有些可进一步分为"亚类"（同种型），例如 IgGl、IgG2、IgG3、IgG4、IgAl和IgA2。将与不同抗体类对应的重链恒定域分别称作α、δ、 ε、Y和μ。不同类的免疫球蛋白的亚基结构和三维构造是众所周知的。
[0126] "裸抗体"指未偶联异源分子，如细胞毒性模块或放射性标记物的抗体。
[0127] "亲和力成熟的"抗体指在一个或多个其高变区中具有一处或多处改变的抗体， 与不拥有此类改变的亲本抗体相比，此类改变导致该抗体对抗原的亲和力改善。优选的 亲和力成熟的抗体会对靶抗原具有纳摩尔级或甚至皮摩尔级的亲和力。亲和力成熟的抗 体由本领域中已知的规程产生。Marks等Bio/Technologyl0:779_783(1992)描述了通过 VH和VL域改组的亲和力成熟。⑶R和/或框架残基的随机诱变记载于以下=Barbas等 Proc Nat. Acad. Sci，USA91:3809-3813(1994) ;Schier 等 Genel69:147-155(1995) ;Yelton 等 J. Immunol. 155:1994-2004(1995) Jackson 等，J. Immunol. 154(7) :3310-9(1995);和 Hawkins et al，J. Mol. Biol. 226:889-896(1992)。
[0128] "脱酰胺"的抗体是其一个或多个天冬酰胺残基已衍生化为例如天冬氨酸、琥珀酰 亚胺、或异天冬氨酸的抗体。
[0129] 术语"癌症"和"癌性"指向或描述哺乳动物中特征通常为不受调控的细胞生长的 生理疾患。
[0130] "胃癌"具体地包括转移性或局部晚期的不可切除的胃癌，包括但不限于，组织学 确认的胃或胃食管连接部腺癌，其具有不可手术（不可切除）的局部晚期或转移性疾病，不 适合通过治愈性治疗处理，和术后再发的晚期胃癌，如胃或胃食管连接部腺癌，当手术意图 是治愈该疾病时。
[0131] "晚期"癌症指通过局部侵入或转移而扩散到最初的部位或器官之外的癌症。因 此，术语"晚期"癌症包括局部晚期的和转移性的疾病。
[0132] "顽固性/不应性（refractory) "癌症指尽管对癌症患者施用抗肿瘤剂如化疗，仍 然发生进展的癌症。顽固性癌症的一个例子是钼抗性癌症。
[0133] "再发的"癌症指在对初始治疗如手术的响应之后，在初始部位或远端部位再次生 长的癌症。
[0134] "局部再发的"癌症是治疗后在与先前所治疗癌症相同的位置处返回的癌症。
[0135] "不可切除的"癌症是不能通过手术除去（切除）的。
[0136] "早期乳腺癌"在本文中指尚未扩散到乳腺或腋淋巴结之外的乳腺癌。这类癌症一 般用新辅助或辅助疗法治疗。
[0137] "新辅助疗法"指在手术前给予的系统性疗法。
[0138] "辅助疗法"指在手术后给予的系统性疗法。
[0139] "转移性"癌症指从身体的一个部位（例如乳腺）扩散到身体的另一个部位的癌 症。
[0140] 在本文中，"患者"或"受试者"是人患者。所述患者可以是"癌症患者"，即患有或 有风险患上癌症（特别是胃癌或乳腺癌）的一种或多种症状的患者。
[0141] "患者群体"指一组癌症患者。这类群体可用于证明药物如帕妥珠单抗的统计学显 著的功效和/或安全性。
[0142] "复发的"患者是在消退后具有癌症的症候或症状的患者。任选地，患者在辅助或 新辅助疗法后复发。
[0143] "展示HER表达、扩增或活化"的癌症或生物学样品是在诊断测试中表达（包括过 表达）HER受体，具有扩增的HER基因，和/或以其它方式展现出HER受体活化或磷酸化的 癌症或生物学样品。
[0144] "展示HER活化"的癌症或生物学样品是在诊断测试中显示HER受体活化或磷酸化 的癌症或生物学样品。这类活化可直接（例如通过ELISA来测量HER磷酸化）或间接（例 如通过基因表达概况分析或通过检测HER异二聚体，如本文中描述的）测定。
[0145] "HER受体过表达或扩增"的癌细胞指与同一组织类型的非癌细胞相比，具有显 著更高水平的HER受体蛋白质或基因的癌细胞。此类过表达可以是由基因扩增或者转录 或翻译增加引起的。可在诊断或预后测定法中通过评估细胞表面上存在的HER蛋白水 平的升高（例如通过免疫组化测定法；IHC)来测定HER受体的过表达或扩增。或者/另 夕卜，可测量细胞中编码HER的核酸的水平，例如通过原位杂交（ISH)，包括荧光原位杂交 (FISH;参见1998年10月公布的W098/45479)和生色原位杂交（CISH ;参见例如Tanner 等，Am. J. Pathol. 157 (5) :1467-1472 (2000) ;Bella 等，J. Clin. Oncol. 26: (May20suppl; abstr22147) (2008))、Southern印迹或聚合酶链式反应（PCR)技术，诸如定量实时 PCR(qRT-PCR)。还可通过测量生物学流体诸如血清中的脱落抗原（例如HER胞外域）来 研究HER受体过表达或扩增（参见例如1990年6月12日公告的美国专利No. 4, 933, 294 ; 1991年4月18日公布的W091/05264 ; 1995年3月28日公告的美国专利No. 5,401,638 ;和 Sias等J. Immunol. Methodsl32:73-80 (1990))。在上述测定法之外，熟练从业人员还可利 用多种体内测定法。例如，可将患者体内细胞暴露于任选用可检测标记物例如放射性同位 素标记的抗体，并且可评估该抗体与患者中细胞的结合，例如通过外部扫描放射性或通过 分析取自事先已暴露于所述抗体的患者的活检样品。
[0146] "HER2阳性"癌症包含具有高于正常水平的HER2的癌细胞。HER2阳性癌症的例子 包括HER2阳性乳腺癌和HER2阳性胃癌。任选地，HER2阳性癌症具有2+或3+的免疫组织 化学（IHC)评分和/或彡2. 0的原位杂交（ISH)扩增比。
[0147] 在本文中，"抗肿瘤剂"指用于治疗癌症的药物。本文中的抗肿瘤剂的非限制性例 子包括化疗剂、HER二聚化抑制剂、HER抗体、针对肿瘤相关抗原的抗体、抗激素化合物、细 胞因子、EGFR靶向药物、抗血管发生剂、酪氨酸激酶抑制剂、生长抑制剂和生长抑制性抗体、 细胞毒剂、诱发凋亡的抗体、COX抑制剂、法尼基转移酶抑制剂、结合癌胚蛋白CA125的抗 体、HER2疫苗、Raf或ras抑制剂、多柔比星脂质体、托泊替康、紫杉烧（taxene, taxane)、双 重酪氨酸激酶抑制剂、TLK286、EMD-7200、帕妥珠单抗、曲妥珠单抗、厄洛替尼（erlotinib) 和贝伐单抗（bevacizumab)。
[0148] "表位2C4"是HER2胞外域中抗体2C4所结合的区域。为了筛选基本结合2C4表位 的抗体，可进行常规的交叉阻断测定法，如Antibodies, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory，Ed Harlow 和 David Lane(1988)中所描述的。优选地，抗体将 2C4 对 HER2的结合阻断约50%或更多。或者，可进行表位映射以评估抗体是否基本结合HER2的 2C4表位。表位2C4包含来自HER2胞外域中域II的残基（SEQ ID N0:2)。2C4和帕妥珠单 抗在域1、11和III (分别为SEQ ID NO: 1，2和3)的连接处结合HER2的胞外域。Franklin 等 Cancer Cell5:317-328 (2004)。
[0149] "表位4D5"指HER2胞外域中抗体4D5 (ATCC CRL10463)和曲妥珠单抗所结合的区 域。此表位接近HER2的跨膜域，且在HER2的域IV(SEQ ID N0:4)之内。为了筛选基本结 合4D5表位的抗体，可进行常规的交叉阻断测定法，如Antibodies, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory，Ed Harlow 和 David Lane(1988)中所描述的。或者，可 进行表位映射以评估抗体是否基本结合HER2的4D5表位（例如约第529位残基至约第625 位残基区域内的任何一个或多个残基，包含HER2E⑶；残基编号包括信号肽）。
[0150] "治疗"指治疗性处理和防护性或预防性措施二者。需要治疗的那些包括已经患有 癌症的以及要预防癌症的。因此，本文中待治疗的患者可能已经诊断为患有癌症或者可能 有患上癌症的倾向性或易感性。
[0151] 术语"有效量"指在患者中有效治疗癌症的药物量。药物的有效量可减少癌细胞的 数目；缩小肿瘤的尺寸；抑制（即减缓到一定程度和优选阻止）癌细胞浸润到周围器官中； 抑制（即减缓到一定程度和优选阻止）肿瘤转移；在某种程度上抑制肿瘤生长；和/或在一 定程度上减轻一种或多种与癌症有关的症状。在药物可阻止生长和/或杀死现有癌细胞的 程度上，它可以是抑制细胞的和/或细胞毒性的。有效量可延长无进展存活（例如如通过 实体瘤的响应评估标准RECIST或CA-125变化测量的），导致客观响应（包括部分响应，PR 或完全响应，CR)，增加总体存活时间，和/或改善癌症的一种或多种症状（例如如FOSI评 估的）。
[0152] 如本文中使用的，术语"细胞毒剂"指抑制或阻止细胞的功能和/或引起细胞破坏 的物质。该术语意图包括放射性同位素（例如At 211、I131、I125、Y9°、Re186、Re 188、Sm153、Bi212、 P32和Lu的放射性同位素）、化疗剂、和毒素诸如小分子毒素或者细菌、真菌、植物或动物起 源的酶活毒素，包括其片段和/或变体。
[0153] "化疗剂"指可用于治疗癌症的化学化合物。用于化疗的化疗剂的例子包括 烧化剂类（alkylating agents),如塞替派（thiotepa)和（；:ΥΤΟΧΑ?.环磷酰胺；磺 酸烧基酯类（alkyl sulfonates)，诸如白消安（busulfan)、英丙舒凡（improsulfan) 和哌泊舒凡（piposulfan);氮丙陡类（aziridines)，诸如苯佐替派（benzodepa)、 卡波醌（carboquone)、美妥替派（meturedepa)和乌瑞替派（uredepa);乙撑亚胺类 (ethylenimines)和甲基蜜胺类（methylamelamines)，包括六甲蜜胺（altretamine)、三 乙撑蜜胺（triethylenemelamine)、三乙撑憐醜胺（triethylenephosphoramide)、三乙撑 硫代憐醜胺（triethylenethiophosphoramide)和三轻甲蜜胺（trimethylolomelamine); TLK286 (TELCYTAtm);番荔枝内酯类（acetogenin)(尤其是布拉他辛（bulIatacin)和 布拉他辛酮（bulIatacinone)) ; δ -9-四氢大麻酌·（tetrahydrocannabinol)(屈大 麻酷（dronabinol)，MARINOL?.); β -拉帕醌（Iapachone);拉帕醇（Iapachol); 秋水仙素类（colchicines);白样脂酸（betulinic acid);喜树喊（camptothecin) (包括合成类似物托泊替康（topotecan) (HYCAMTIN?)、CPT-Il (伊立替康 (irinotecan)，CAMPTOSAR? )、乙酰喜树碱、东莨菪亭（scopoletin)和 9-氨 基喜树碱）；苔藓抑素（bryostatin) ;callystatin ;CC-1065(包括其阿多来新 (adozelesin)、卡折来新（carzelesin)和比折来新（bizelesin)合成类似物）；鬼臼 毒素（podophylIotoxin);鬼曰酸（podophyllinic acid);替尼泊苷（teniposide);隐 藻素类（cryptophycins)(特别是隐藻素1和隐藻素8);多拉司他汀（dolastatin); duocarmycin (包括合成类似物，KW-2189 和 CB1-TM1);艾槽塞洛素（eleutherobin); pancratistatin ;sarcodictyin ;海绵抑素(spongistatin);氮芥类(nitrogen mustards)，诸如苯丁 酸氮芥（chlorambucil)、萘氮芥（chlornaphazine)、胆磷酰胺 (cholophosphamide)、雌莫司汀（estramustine)、异环憐醜胺（ifosfamide)、双氯乙基 甲胺（mechlorethamine)、盐酸氧氮芥（mechlorethamine oxide hydrochloride)、美 法仑（melphalan)、新氮芥（novembichin)、苯芥胆甾醇（phenesterine)、泼尼莫司汀 (prednimustine)、曲憐胺（trofosfamide)、尿啼陡氮芥（uracil mustard);亚硝脈类 (nitrosureas，nitrosoureas)，诸如卡莫司汀（carmustine)、氯脈菌素（chlorozotocin)、 福莫司汀（fotemustine)、洛莫司汀（Iomustine)、尼莫司汀（nimustine)和雷莫司汀 (ranimnustine，ranimustine);二膦酸盐类，如氯膦酸盐（clodronate);抗生素类，诸如 烯二炔类（enediyne)抗生素（例如加利车霉素（calicheamicin)，尤其是加利车霉素 Y II 和加利车霉素 ω Il (参见例如 Agnew，Chem Inti. Ed. Engl.，33:183_186 (1"4))和 蒽环类抗生素如annamycin、AD32、alcarubicin、柔红霉素（daunorubicin)、右雷佐生 (dexrazoxane)、DX-52-1、表柔比星（epirubicin)、GPX-100、伊达比星（idarubicin)、 KRN5500、美诺立尔（menogaril)、蒽环类抗生素（dynemicin)，包括 dynemicin A，埃 斯波霉素（esperamicin)，新制癌素（neocarzinostatin)发色团和相关色蛋白烯二 炔类抗生素发色团、阿克拉霉素（aclacinomycin)、放线菌素（actinomycin)、氨茴 霉素（anthramycin)、偶氮丝氨酸（azaserine)、博来霉素（bleomycin)、放线菌素 C(cactinomycin)、carabicin、洋红霉素（carminomycin)、嗜癌霉素（carzinophilin)、 色霉素（chromomycin)、放线菌素 D(dactinomycin)、地托比星（detorubicin)、6_ 二 氮-5-氧-L-正亮氨酸、ADRlAMYCIN?多柔比星（doxorubicin)(包括吗啉代 多柔比星、氰基吗啉代多柔比星、2-吡咯代多柔比星、脂质体多柔比星、和脱氧多柔比 星）、依索比星（esorubicin)、麻西罗霉素（marcellomycin)、丝裂霉素类（mitomycins) 诸如丝裂霉素 C、霉酚酸（mycophenolic acid)、诺拉霉素（nogalamycin)、橄榄霉素 (olivomycin)、培洛霉素（peplomycin)、泊非霉素（potfiromycin) J票呤霉素（puromycin)、 三铁阿霉素（quelamycin)、罗多比星（rodorubicin)、链黑菌素（streptonigrin)、链 佐星（streptozocin)、杀结核菌素（tubercidin)、乌苯美司（ubenimex)、净司他丁 (zinostatin)、和佐柔比星（zorubicin);叶酸类似物，诸如二甲叶酸（denopterin)、 蝶酰三谷氨酸（pteropterin)、和三甲曲沙（trimetrexate) J票呤类似物，诸如氟达拉 滨（fIudarabine)、6_ 疏基票呤（mercaptopurine)、硫咪票呤（thiamiprine)、和硫鸟_ 呤（thioguanine);啼陡类似物，诸如安西他滨（ancitabine)、阿扎胞苷（azacitidine)、 6-氮尿苷、卡莫氟（carmofur)、阿糖胞苷（cytarabine)、双脱氧尿苷（dideoxyuridine)、 去氧氟尿苷（doxifluridine)、依诺他滨（enocitabine)、和氟尿苷（floxuridine);雄激 素类，诸如卡鲁睾酮（calusterone)、丙酸屈他雄酮（dromostanolone propionate)、表 硫雄醇（epitiostanol)、美雄焼（mepitiostane)、和睾内酯（testolactone);抗肾上腺 类，诸如氨鲁米特（aminoglutethimide)、米托坦（mitotane)、和曲洛司坦（trilostane); 叶酸补充剂，诸如亚叶酸（folinic acid) (Ieucovorin);醋葡醒内酯（aceglatone); 抗叶酸抗赘生物药剂如AU.MTA?、LY231514培美曲塞（pemetrexed)，二氢叶酸还 原酶抑制剂如甲氨蝶呤，抗代谢物如5-氟尿嘧啶（5-FU)及其前药如UFT、S-I和卡 培他滨，和胸苷酸合酶抑制剂和甘氨酰胺核糖核苷酸甲酰基转移酶抑制剂如雷替曲塞 (raltitrexed) (TOMUDEX' TDX);双氢嘧啶脱氢酶的抑制剂如恩尿嘧啶（eniluracil); 醒憐酉先胺糖苷（aldophosphamide glycoside);氨基乙酉先丙酸（aminolevulinic acid); 安 口丫陡（amsacrine) ;bestrabucil;比生群（bisantrene);依达曲沙（edatraxate);地 憐酉先胺（defofamine，defosfamide);地美可辛（demecolcine);地卩丫醌（diaziquone); elfornithine;依利醋铵（elliptinium acetate) ;epothilone;依托格鲁（etoglucid); 硝酸镓；轻脲（hydroxyurea);香燕多糖（Ientinan);氯尼达明（Ionidamine);美登木 素生物碱类（maytansinoids)，诸如美登素（maytansine)和安丝菌素（ansamitocin); 米托胍腙（mitoguazone);米托蒽醌（mitoxantrone);莫哌达醇（mopidamol);二胺 硝R丫陡（nitracrine);喷司他丁（pentostatin);蛋氨氮芥（phenamet);卩比柔比星 (pirarubicin);洛索蒽醌（Iosoxantrone) ;2_ 乙基酉先餅（ethylhydrazide);丙卡巴 餅（procarbazine) ;PSK 多糖复合物（JHS Natural Products，Eugene，OR);雷佐生 (razoxane);根霉素（rhizoxin);西索菲兰（sizofiran);螺方宠锗（spirogermanium);细 交链孢菌酮酸（tenuazonic acid);三亚胺醌（triaziquone) ;2,2'，2''-三氯三乙胺；单 端抱菌素类（trichothecenes)(尤其是 T-2 毒素、抚抱菌素（verracurin，verrucarin) A、杆孢菌素（roridin) A和蛇行菌素（anguidine));乌拉坦（urethan);长春地辛 (vindesine)丨丄Ι...)Ι3ΙΝΙ..:;'.Η.::， (mannomustine);二溴甘露醇（mitobronitol);二溴卫矛醇（mitolactol);哌泊溴焼 (pipobroman) ;gacytosine ;阿糖胞苷（arabinoside) ( "Ara_C"）；环憐酸胺；塞替派 (thiotepa);紫杉院（taxanes);苯丁酸氮芥（chlorambucil);吉西他滨（GEMZAR?)； 6-硫鸟票呤（thioguanine);巯基票呤（mercaptopurine);钼；钼类似物或基于钼的 类似物，诸如顺钼（cisplatin)、奥沙利钼（oxaliplatin)和卡钼（carboplatin);长 春碱（vinblastine) (VELBAN?);依托泊苷（etoposide) (VP-16);异环磷酰胺 (ifosfamide);米托蒽醌（mitoxantrone);长春新喊（vincristine) (ONCOVTN?)、 长春花生物喊（vinca alkaloid);长春瑞滨（vinorelbine) (MAVELBINFJ.(); 能灭瘤（novantrone);依达曲沙（edatrexate);道诺霉素（daunomycin);氨基蝶呤 (aminopterin);希罗达（xeloda);伊本膦酸盐（ibandronate);拓扑异构酶抑制剂 RFS2000;二氟甲基鸟氨酸（DMFO);类维 A 酸（retinoids)，诸如维 A 酸（retinoic acid); 及任何上述各项的药学可接受盐、酸或衍生物；以及两种或更多种上述各项的组合，诸如 CHOP(环磷酰胺、多柔比星、长春新碱和泼尼松龙联合疗法的缩写）和FOLFOX(奥沙利钼 (EL0XATIN?)联合5-FU和亚叶酸的治疗方案的缩写）。
[0154] 还包括在该定义内的是作用于调节或抑制激素对肿瘤作用的抗激素剂如抗 雌激素和选择性雌激素受体调控物（SERM)，包括例如，他莫昔芬（tamoxifen)(包括 NOLVADEX?他莫昔芬）、雷洛昔芬（raloxifene)、屈洛昔芬（diOloxifendd-羟 基他莫昔芬、曲沃昔芬（trioxifene)、那洛昔芬（keoxifene)、LY117018、奥那司酮 (onapristone)和FARRSTONH'托瑞米芬（toremifene);芳香酶抑制剂类；和抗雄激素 类如如氟他米特（flutamide)、尼鲁米特（nilutamide)、比卡米特（bicalutamide)、亮丙瑞 林（Ieuprolide)、和戈舍瑞林（goserelin);以及曲沙他滨（troxacitabine) (1，3-二氧戊 环核苷胞嘧啶类似物）；反义寡核苷酸类，特别是那些抑制涉及异常细胞增殖的信号传导 途经中的基因表达的，诸如例如PKC-alpha、Raf、H-Ras和表皮生长因子受体（EGF-R);疫苗 类，如基因疗法疫苗，例如ALLOVECTIN?疫苗、LEUVECTIN?疫苗和VAXID?疫 苗；PROLEUKIN? rlL-2 ; LURTOTECAN?拓扑异构酶 1 抑制剂；ABARELIX? HIiRH ;及任何上述物质的药学可接受的盐、酸或衍生物。
[0155] "紫杉烷类"是一种抑制有丝分裂并干扰微管的化疗。紫杉烷类的例子包 括帕利他赛（TAXOL?; Bristol-Myers Squibb Oncology, Princeton, N. J.);不 含克列莫佛（Cremophor)，清蛋白工程化的纳米颗粒剂型帕利他赛或nab-帕利他赛 (ABRAXANE? ；American Pharmaceutical Partners, Schaumberg, Illinois);及多西他赛 (TAXOTFRf.%; RhdneJ0ulenc Rorer，^
[0156] "蒽环类抗生素"是一种抗生素类型，其来自真菌Streptococcus peucetius，例子 包括：柔红霉素、多柔比星和表柔比星等。
[0157] "基于蒽环类抗生素的化疗"指组成为或包含一种或多种蒽环类抗生素的化疗方 案。例子包括5-FU、表柔比星和环磷酰胺（FEC) ;5-FU、多柔比星和环磷酰胺（FAC);多柔比 星和环磷酰胺（AC);表柔比星和环磷酰胺（EC)等。
[0158] 就本文中目的而言,"基于卡钼的化疗"指组成为或包含一种或多种卡钼的化疗方 案。例子是TCH (多西他赛/ TAXOLiK卡钼和曲妥珠单抗/ HERCEPTIN? )。
[0159] "芳香酶抑制剂"抑制芳香酶，其调节肾上腺中的雌激素产生。芳香酶抑制 剂的例子包括：4 (5)-咪唑、氨鲁米特、MEGASE?乙酸甲地孕酮（megestrol)、 AR0MASIN?依西美坦（exemestane)、甲酚苯丙胺（formestanie)、法倔挫 (fadrozole)、RJVISOR? 伏氯挫（vorozole)、FEMARA? 来曲挫（Ietrozole)和 /\RllVin_.)F:X::士阿那曲唑（anastrozole)。在一个实施方案中，本文中所述芳香酶抑制剂是 来曲唑或阿那曲唑。
[0160] "抗代谢物类化疗"是使用结构上与代谢物相似但不能被身体以生产性方式 利用的药剂。许多抗代谢物类化疗干扰核酸，RNA和DNA的生成。抗代谢物类化疗剂 的例子包括吉西他滨（gemcitabine) (GEMZAR?)、5-氟尿啼陡（5-FU)、卡培他滨 (capecitabine) (XELODAtm)、6_ 疏基噪呤、甲氨碟呤（methotrexate)、6_ 硫鸟噪呤、培美 曲塞（pemetrexed)、雷替曲塞（raltitrexed)、阿糖胞苷（arabinosylcytosine ARA-C cytarabine) (CYT0SAR-U?)、达卡巴嗪（dacarbazine) (DTIC-DOME?)、 偶氮胞啼陡（azocytosine)、脱氧胞啼陡（deoxycytosine)、pyridmidene、氟达拉滨 (fIudarabine) (FLUDARA⑩)、克拉屈滨（cladrabine)、2_脱氧-D-葡萄糖等。
[0161] "化疗抗性"癌症指癌症患者在接受化疗方案时癌症有进展（即患者是"化疗不应 性"的），或者患者在完成化疗方案后12个月内（例如6个月内）有进展。
[0162] 术语"钼"用于本文指基于钼的化疗，包括但不限于，顺钼、卡钼和奥沙利钼。
[0163] 术语"氟嘧啶"用于本文指一种抗代谢物化疗，包括但不限于，卡培他滨、氟尿苷和 氟尿嘧啶（5-FU)。
[0164] 本文中，化疗剂的"固定的"（fixed)或"不变的"（flat)剂量指不考虑患者的体重 (WT)和体表面积（BSA)而施用于人类患者的剂量。因此，固定的或不变的剂量不是作为mg/ kg剂量或mg/m2剂量提供的，而是作为治疗剂的绝对量提供的。
[0165] "加载"（loading)剂量在本文中一般包括施用于患者的治疗剂的初始剂量,后续 其一个或多个维持剂量。一般而言，施用单个加载剂量，但本文中也涵盖多个加载剂量。通 常，所施用的加载剂量的量超过所施用的维持剂量的量，和/或加载剂量的施用比维持剂 量更频繁，从而比使用维持剂量更早达到化疗剂的期望稳态浓度。
[0166] "维持" (maintenance)剂量在本文中指在治疗期间施用于患者的一个或多个剂量 的治疗剂。通常，维持剂量以一定的治疗间隔施用，例如大约每周一次，大约每两周一次，大 约每三周一次，或大约每四周一次，优选每三周一次。
[0167] "输注"指将含药物的溶液经过血管引入体内以用于治疗目的。一般地，这是经由 静脉内（IV)袋实现的。
[0168] "静脉内袋"或"IV袋"是能装存可经由患者静脉施用的溶液的袋。在一个实施方 案中，所述溶液是盐水溶液（例如约〇. 9%或约0. 45% NaCl)。任选地，所述IV袋由聚烯烃 或聚氯乙烯形成。
[0169] "共施用"意指在同一施用期间静脉内施用两种（或更多种）药物，而非连续输注 这两种或更多种药物。一般地，这将牵涉将两种（或更多种）药物在其共施用之前组合到 同一 IV袋中。
[0170] "心脏毒性"指自药物或药物组合的施用产生的任何毒性副作用。心脏毒性可基于 以下任一种或多种评估：症状性左心室收缩功能障碍（LVSD)或充血性心力衰竭（CHF)的发 生率，或左心室射血分数（LVEF)的降低。
[0171] 短语"未增加心脏毒性"对于包含帕妥珠单抗的药物组合指等于或低于在药物组 合中使用帕妥珠单抗以外的药物治疗的患者中所观察到的心脏毒性发生率（例如等于或 低于从施用曲妥珠单抗和化疗例如多西他赛得到的）。
[0172] "管形瓶（vial)"是一种适用于装存液体或冻干制备物的容器。在一个实施方案 中，管形瓶是一次性管形瓶，例如带有塞子的20-cc -次性管形瓶。
[0173] "包装插页"是由食品和药物监督管理局或其他管理机构命令的、必须放置在每个 处方药的包装内的散页印刷品。该散页印刷品一般包含药物的商标、其通用名、及其作用机 制；说明其适应证、禁忌证、警告、预防、不良作用和剂量形式；而且包括用于推荐剂量、时 间和施用路径的用法说明。
[0174] 表述"安全性数据"涉及在受控的临床试验中获得的数据，其显示不良事件的流行 性和严重性以在药物安全性方面指导使用者，包括如何监测和预防对药物的不良反应的指 导。本文中表3和表4提供帕妥珠单抗的安全性数据。安全性数据包含表3和4中最常见 的不良事件（AE)或不良反应（ADR)的任意一种或多种（例如两种、三种、四种或更多种）。 例如，所述安全性数据包含关于嗜中性白细胞减少、发热性嗜中性白细胞减少、腹泻和/或 如本文中公开的心脏毒性的信息。
[0175] "功效数据"指在受控的临床试验中获得的数据，其显示药物有效治疗疾病，如癌 症。在本文的实施例中提供帕妥珠单抗的功效数据。对于HER2阳性转移性或局部再发的、 不可切除的乳腺癌，帕妥珠单抗的功效数据见于本文中表2、表5、图8和图10。该安全性 数据包含表2、表5、图8和图10中的主要终点（无进展存活，PFS，由IRF)和/或次要终 点（总体存活（OS);无进展存活（PFS)，由研究者；客观响应率（ORR)，包括完全应答（CR)， 部分响应（PR)，稳定疾病（SD)和进展性疾病（PD)，和/或响应持续时间）的任一种或多种 (例如两种、三种、四种或更多种）。例如，功效数据包含关于如本文中公开的无进展存活 (PFS)和/或总体存活（OS)的信息。
[0176] "稳定混合物"在指代两种或更多种药物如帕妥珠单抗和曲妥珠单抗的混合物时 意指混合物中的每种药物在混合物中基本保留其物理和化学稳定性，如通过一种或多种分 析测定法评估的。针对此目的的例示性分析测定法包括：颜色、外观和澄清度（CAC)，浓度 和浊度分析、微粒分析、大小排阻层析（SEC)、离子交换层析（IEC)、毛细管区带电泳（CZE)、 成像毛细管等电聚焦（iCIEF)和效力测定法。在一个实施方案中，已显示混合物在5°C或 30°C稳定达长达24小时。
[0177] 与一种或多种其他药物"同时"施用的药物是在同一治疗周期期间，在与所述一种 或多种其他药物治疗的同一天，且任选地，在与所述一种或多种其他药物的同一时间施用 的。例如，对于每3周给予的癌症疗法，同时施用的药物各在3周周期的第1天施用。
[0178] II.抗体和化疗组合物
[0179] 要用于生产抗体的HER2抗原可以是例如可溶形式的HER2受体胞外域或 其部分，其含有期望的表位。或者，在其细胞表面处表达HER2的细胞（例如经转化 以过表达HER2的NIH-3T3细胞；或癌细胞系如SK-BR-3细胞，参见Stancovski等 PNAS(USA)88:8691-8695(1991))可用于生成抗体。可用于生成抗体的HER2受体的其他形 式对于本领域技术人员来说将是明显的。
[0180] 本领域中存在多种用于制备本文中单克隆抗体的方法。例如，可使用Kohler 等，Nature，256:495(1975)首次描述的杂交瘤方法，通过重组DNA方法（美国专利 No. 4, 816, 567)来制备单克隆抗体。
[0181] 依照本发明使用的抗HER2抗体曲妥珠单抗和帕妥珠单抗是商品化的。
[0182] ⑴人源化抗体
[0183] 本领域已经记载了用于将非人抗体人源化的方法。优选的是，人源化抗体具有一 个或多个从非人来源引入的氨基酸残基。这些非人氨基酸残基常常称作"输入"残基，它 们典型的取自"输入"可变域。人源化可基本上遵循Winter及其同事的方法进行（Jones 等，Nature321:522-525(1986) ;Riechmann 等，Nature332:323-327(1988) ;Verhoeyen 等，Science239:1534-1536 (1988))，通过用高变区序列替代人抗体的相应序列。因此，此 类"人源化"抗体是嵌合抗体（美国专利No. 4, 816, 567)，其中基本上少于整个人可变域用 来自非人物种的相应序列替代。在实践中，人源化抗体典型的是其中一些高变区残基和可 能的一些FR残基用来自啮齿类抗体中类似位点的残基替代的人抗体。
[0184] 用于构建人源化抗体的人可变域的选择，包括轻链和重链二者，对于降低抗原 性非常重要。依照所谓的"最适"（best-fit)方法，用啮齿类抗体的可变域序列对已知 的人可变域序列的整个文库进行筛选。然后选择与啮齿类序列最接近的人序列作为人 源化抗体的人框架区（FR) (Sims 等，J. Immunol. 151:2296 (1993) ;Chothia 等，J. Mol. Biol. 196:901(1987))。另一种方法使用由特定轻链或重链亚组的所有人抗体的共有序列 衍生的特定框架区。同一框架可用于数种不同的人源化抗体（Carter等，Proc. Natl. Acad. Sci. USA89:4285 (1992) ;Presta 等，J. Immunol. 151:2623 (1993))。
[0185] 更为重要的是，抗体在人源化后保持对抗原的高亲和力和其它有利的生物学特 性。为了实现这一目标，依照一种优选的方法，通过使用亲本和人源化序列的三维模型分析 亲本序列和各种概念性人源化产物的方法来制备人源化抗体。三维免疫球蛋白模型是普遍 可获的且为本领域技术人员所熟悉。可获得图解和显示所选候选免疫球蛋白序列的可能三 维构象结构的计算机程序。检查这些显示图像容许分析残基在候选免疫球蛋白序列行使功 能中的可能作用，即分析影响候选免疫球蛋白结合其抗原的能力的残基。这样，可以从受体 和输入序列选出FR残基并进行组合，从而获得期望的抗体特征，诸如对靶抗原的亲和力提 高。一般而言，高变区残基直接且最实质的涉及对抗原结合的影响。
[0186] 美国专利No. 6, 949, 245描述了例示性人源化HER2抗体的产生，该抗体结合HER2 并阻断HER受体的配体活化。
[0187] 人源化HER2抗体具体包括如美国专利5, 821，337 (通过提述明确并入本文）表3 中描述的和本文中定义的曲妥珠单抗(HERCEPTIN?);以及如本文中描述和定义的人源 化2C4抗体如帕妥珠单抗。
[0188] 本文中的人源化抗体可以例如，包含掺入人可变重域的非人高变区残基，且 还可以包含在选自下组的位置处的框架区（FR)取代：69H、71H和73H，其利用Kabat 等,Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda,MD(1991)中所列的可变域编号系 统。在一个实施方案中，所述人源化抗体包含在69H、7IH和73H中的两个或所有位置处的 FR取代。
[0189] 本文中感兴趣的例示性人源化抗体包含可变重域互补决定残基GFTFTDYTMX(SEQ ID N0:17)，其中 X 优选是 D 或 S;DVNPNSGGSIYNQRFKG(SEQ ID N0:18);和 / 或 NLGPSFYFDY(SEQ ID NO: 19)，任选包含那些⑶R残基的氨基酸修饰，例如其中修饰基本上保 持或改善抗体的亲和力。例如，用于本发明方法的抗体变体可在上述可变重CDR序列中具 有约1个至约7个或者约5个氨基酸替代。此类抗体变体可通过亲和力成熟来制备，例如 如下文所述。
[0190] 例如，在前一段中的那些可变重域⑶R残基之外，人源化抗体还可包含可变轻域 互补决定残基KASQDVSIGVA(SEQ ID勵:20);545￥乂1￥，其中乂1优选是1?或1^，乂 2优选是 Y 或 E，而 X3 优选是 T 或 S(SEQ ID N0:21);和 / 或 QQYYIYPYT(SEQ ID N0:22)。此类人源 化抗体任选包含上述CDR残基的氨基酸修饰，例如其中修饰基本上保持或改善抗体的亲和 力。例如，目的抗体变体可在上述可变轻CDR序列中具有约1个至约7个或者约5个氨基 酸替代。此类抗体变体可通过亲和力成熟来制备,例如如下文所述。
[0191] 本申请还涵盖结合HER2的亲和力成熟的抗体。亲本抗体可以是人抗体或人源化 抗体，例如包含轻链和/或重链可变区序列分别为SEQ ID N0:7和8的抗体（即包含帕妥 珠单抗的VL和/或VH)。帕妥珠单抗的亲和力成熟的变体优选以优于鼠2C4或帕妥珠单抗 的亲和力结合HER2受体（例如根据使用HER2胞外域（ECD)ELISA的评估，例如亲和力提高 约2倍或约4倍至约100倍或约1000倍）。例示性的用于取代的重链可变区CDR残基包括 H28、H30、H34、H35、H64、H96、H99,或者两个或多个的组合（例如这些残基中的2个、3个、 4个、5个、6个或7个）。用于改变的轻链可变区CDR残基的例子包括L28、L50、L53、L56、 L91、L92、L93、L94、L96、L97,或者两个或多个的组合（例如这些残基中的2个至3个、4个、 5个或直到约10个）。
[0192] 将鼠4D5抗体人源化以生成其人源化变体，包括曲妥珠单抗，记载于美国专利 No. 5, 821，337、6, 054, 297、6, 407, 213、6, 639, 055、6, 719, 971 和 6, 800, 738 以及 Carter 等 PNAS (USA) ,89:4285-4289 (1992)。HuMAb4D5-8(曲妥珠单抗）对 HER2 抗原结合比小鼠 4D5 抗体紧密3倍，且具有允许人源化抗体在存在人效应器细胞情况下的定向细胞毒性活性的 次级免疫功能（ADCC)。HuMAb4D5-8包含掺入Vc亚组I共有框架的可变轻（WDR残基， 和掺入Vh亚组III共有框架的可变重（V h)⑶R残基。该抗体还包含在以下位置处的框架区 (FR)取代：Vh的71、73、78和93 (FR残基的Kabat编号）；和在八的位置66处的FR取代 (FR残基的Kabat编号）。曲妥珠单抗包含非A同种异型人Y IFc区。
[0193] 涵盖各种形式的人源化抗体或亲和力成熟的抗体。例如，人源化抗体或亲和力成 熟的抗体可以是抗体片段。或者，人源化抗体或亲和力成熟的抗体可以是完整抗体，诸如完 整的IgGl抗体。
[0194] (ii)帕妥珠单抗组合物
[0195] 在HER2抗体组合物的一个实施方案中，该组合物包含主要种类帕妥珠单抗抗体 及其一种或多种变体的混合物。本文中帕妥珠单抗主要种类抗体的优选实施方案是包含 SEQ ID No. 7和8中的轻链和重链可变域氨基酸序列，最优选包含SEQ ID No. 11的轻链氨 基酸序列及SEQ ID No. 12的重链氨基酸序列的抗体（包括那些序列的脱酰胺和/或氧化 变体）。在一个实施方案中，组合物包含主要种类帕妥珠单抗抗体及其包含氨基末端前导延 伸的氨基酸序列变体的混合物。优选的是，所述氨基末端前导延伸位于抗体变体的轻链上 (例如位于抗体变体的一条或两条轻链上）。所述主要种类HER2抗体或抗体变体可以是全 长抗体或抗体片段（例如Fab或F(ab'） 2片段），但优选二者都是全长抗体。本文中的抗 体变体可以在其任何一条或多条重链或轻链上包含氨基末端前导延伸。优选的是，所述氨 基末端前导延伸位于抗体的一条或两条轻链上。所述氨基末端前导延伸优选包含VHS-或 由其组成。组合物中氨基末端前导延伸的存在可通过多种分析技术来检测，包括但不限于 N-末端序列分析、电荷异质性的测定法（例如阳离子交换层析或毛细管区带电泳）、质谱 等。组合物中抗体变体的量通常在如下范围内，从构成用于检测变体的任何测定法（优选 N-末端序列分析）的检出限的量至少于主要种类抗体量的量。通常，组合物中约20%或更 少（例如从约1 %至约15 %，例如从5 %至约15% )的抗体分子包含氨基末端前导延伸。这 样的百分比量优选使用定量N-末端序列分析或阳离子交换分析（优选使用高分辨率、弱阳 离子交换柱，诸如PR0PACWCX-10?阳离子交换柱）来测定。在氨基末端前导延伸变体之外， 还涵盖主要种类抗体和/或变体的氨基酸序列改变，包括但不限于在其一条或所有两条重 链上包含C-末端赖氨酸残基的抗体、脱酰胺抗体变体等。
[0196] 此外，主要种类抗体或变体还可包含糖基化变异，其非限制性例子包括包含附着 于其Fc区的Gl或G2寡糖结构的抗体、包含附着于其轻链的碳水化合物模块的抗体（例如 一种或两种碳水化合物模块，诸如葡萄糖或半乳糖附着于抗体的一条或两条轻链，例如附 着于一个或多个赖氨酸残基）、包含一条或两条非糖基化重链的抗体、或包含附着于其一条 或两条重链的唾液酸化寡糖的抗体等。
[0197] 组合物可从表达HER2抗体的基因工程细胞系回收，例如中国仓鼠卵巢（CHO)细胞 系，或者可通过肽合成来制备。
[0198] 关于例示性帕妥珠单抗组合物的更多信息，参见美国专利No. 7, 560, 111和 7, 879, 325 以及 US2009/0202546A1。
[0199] (iii)曲妥珠单抗组合物
[0200] 曲妥珠单抗组合物通常包含主要种类抗体（分别包含SEQ ID NO: 13和14的轻 链和重链序列）及其变体形式，特别是酸性变体（包括脱酰胺化变体）的混合物。优选 地，组合物中的这类酸性变体的量低于约25 %，或低于约20%，或低于约15 %。参见美国 专利 No. 6, 339, 142。亦参见 Harris 等，J. Chromatography, B752:233-245 (2001)，其涉及 可通过阳离子交换层析解析的曲妥珠单抗形式，包括峰A(Asn30在两条轻链中脱酰胺化 为Asp);峰B(Asn55在一条重链中脱酰胺化为异Asp);峰l(Asn30在一条轻链中脱酰胺 化为Asp);峰2 (Asn30在一条轻链中脱酰胺化为Asp，且Aspl02在一条重链中异构化为异 Asp);峰3 (主要峰形式，或主要种类抗体）；峰4 (Aspl02在一条重链中异构化为异Asp); 峰C(Aspl02在一条重链中琥珀酰亚胺（Asu))。这类变体形式和组合物包含在本文的发明 中。
[0201] (iv)5_FU 和顺钼
[0202] 对于晚期胃癌没有单一的、标准的、全世界公认的化疗方案，但5-氟尿嘧啶 (5-FU)加顺钼被广泛用于该适应证。在没有在前化疗的患者的II期研究中，5-FU+顺 钼产生约40%的响应率和7-10.6个月的中值总体存活（Lacave AJ，Baron FJ，Anton LM，等 Ann 0ncoll991;2:751_ 754;Rougier P，Ducreux M，Mahjoubi M，等 Eur J Cancerl994;30A:1263 - 1269;Vanhoefer U，Wagner T，Lutz M，等 Eur J Cancer2001; 37Suppl6: abstract S27)〇
[0203] (V)卡培他滨
[0204] 已在患有晚期胃癌的患者中大量测试卡培他滨。卡培他滨单一疗法的II期功效 结果显示19 %和26 %的响应率，和8. 1和10. 0个月的总体存活（在Koizumi等2003的 研究中，〖〇1211111；[￥，1(111'；[11&四]\1，3&8&;[1'，等0&11。61'1993;72:658 - 62;3&1^1]1〇1:〇了，〇1；[11 K, Kondo K,等Anti-Cancer Drugs2006; 17:2331 - 6)。对于与钼组合的卡培他滨，有许多 研究显示响应率范围为28%至65%，距进展的时间为5. 8至9个月，总体存活为10. 1至12 个月（Kang Y，Kang WK，Shin DB,等J Clin 0ncology2006 ;24Suppll8:abstract LBA4018 ; Park Y, Kim B, Ryoo B,等 Proc Am Soc Clin 0ncol2006;24Suppll8:abstract4079;Kim TW，Kang YK，Ahn JH，等 Ann 0ncol2002;13:1893 - 8;Park YH，Kim BS，Ryoo BY,等 Br J Cancer2006 ；94:959 - 63)0
[0205] III.选择用于疗法的患者
[0206] HER2检测可用来选择用于依照本发明治疗的患者。有几种FDA批准的商业测定 法用于鉴定HER2阳性癌症患者。这些方法包括HeiGEPTES了 & (Dako)和PATHWAY? HER2(免疫组织化学（IHC)测定法）和PathVysion^nHER2FISH pharmDX?(FISH测定法）。 使用者应参照特定测定试剂盒的包装插页中关于每种测定法的验证和性能的信息。
[0207] 例如，HER2过表达可通过IHC分析，例如使用nERCTiPTFST (Dako)。可将来 自肿瘤活组织检查的石蜡包埋的组织切片进行IHC测定，并对照如下的HER2蛋白染色强度 标准：
[0208] 得分0 :未观察到染色或者在少于10%的肿瘤细胞中观察到膜染色。
[0209] 得分1+ :在超过10%的肿瘤细胞中检测到微弱的/刚刚可察觉的膜染色。所述细 胞只在其部分膜中有染色。
[0210] 得分2+ :在超过10%的肿瘤细胞中观察到微弱至中等的完全膜染色。
[0211] 得分3+ :在超过10%的肿瘤细胞中观察到中等至强烈的完全膜染色。
[0212] 那些HER2过表达评估得分为0或1+的肿瘤可表征为HER2阴性，而那些得分为2+ 或3+的肿瘤可表征为HER2阳性。
[0213] HER2过表达的肿瘤可根据对应于每个细胞表达的HER2分子拷贝数的免疫组化得 分进行定级，并且可通过生化方法测定：
[0214] 0 = 0-10, 000 个拷贝 / 细胞，
[0215] 1+=至少约200, 000个拷贝/细胞，
[0216] 2+=至少约500, 000个拷贝/细胞，
[0217] 3+=至少约2, 000, 000个拷贝/细胞。
[0218] 导致酪氨酸激酶的配体独立性活化的3+水平的HER2过表达（Hudziak等，Proc. Natl. Acad. Sci. USA84:7159-7163(1987))发生于约30 %的乳腺癌中，而且在这些患 者中，无复发存活和总体存活减少（Slamon等，Science244:707-712 (1989) ;Slamon 等，Science235:177-182(1987))。
[0219] HER2蛋白过表达的存在和基因扩增高度相关，因此，或者/另外地，使用原位杂 交（ISH)例如荧光原位杂交（FISH)，用于检测基因扩增的测定法也可以用于选择适用于 依照本发明治疗的患者。可对福尔马林固定、石蜡包埋的肿瘤组织进行FISH测定法如 INFORM?(由 Ventana, Arizona 销售）或 PatllVysion* (Vysis, Illinois)以测定肿瘤中 HER2扩增的程度（如果有的话）。
[0220] 最常见的是，使用档案性石蜡包埋的肿瘤组织，利用任一种前述方法来确认HER2 阳性状态。
[0221] 优选地，选择具有IHC得分为2+或3+或FISH或ISH阳性的HER2阳性患者用于 依照本发明的治疗。
[0222] 亦参见美国专利No. 7, 981，418和实施例11中的筛选患者用于帕妥珠单抗治疗的 其他测定法。
[0223] IV.药物制剂
[0224] 制备依照本发明使用的HER2抗体的治疗性制剂用于存储，其通过将具有 期望纯度的抗体与任选的药学可接受的载体、赋形剂或稳定剂混合（Remington's Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. Ed. (1980)), 一般以冻干剂型或水溶液 的形式。还涵盖抗体晶体（参见美国专利申请2002/0136719)。可接受的载体、赋形剂或 稳定剂在所采用的剂量和浓度对接受者是无毒的，包括缓冲剂，诸如磷酸盐、柠檬酸盐和其 它有机酸；抗氧化剂，包括抗坏血酸和甲硫氨酸；防腐剂（如十八烷基二甲基苄基氯化铵； 氯化六甲双铵（hexamethonium chloride);氯化苯甲煙铵（benzalkonium chloride);氯 化节乙铵（benzethonium chloride);酚、丁醇或苯甲醇；烧基对轻基苯甲酸酯如对轻基苯 甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯；儿茶酚；间苯二酚；环己醇；3-戊醇；和间甲酚）；低分子量 (低于约10个残基）多肽；蛋白质，如血清清蛋白、明胶、或免疫球蛋白；亲水性聚合物如 聚乙烯吡咯烷酮；氨基酸如甘氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、组氨酸、精氨酸或赖氨酸；单糖、 二糖、和其它碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合剂如EDTA ;糖如蔗糖、甘露醇、 海藻糖或山梨糖醇；形成盐的反荷离子如钠；金属复合物（例如Zn-蛋白复合物）；和/或 非离子型表面活性剂如TWEEN?、PLUR0NICS?或聚乙二醇（PEG)。冻干的抗体剂型记载于 W097/04801，其通过提述明确并入本文。
[0225] 冻干的抗体剂型记载于美国专利No. 6, 267, 958、6, 685, 940和6, 821，515,其通过 提述明确并入本文。优选的:HERCEPTINi"++ (曲妥珠单抗）制剂是一种针对静脉内（IV) 施用的无菌、白色到浅黄色的无防腐剂冻干粉末，包含440mg曲妥珠单抗、400mg α，α -海 藻糖脱水物、9.9mg L-组氨酸-HCl、6.4mg L-组氨酸和1.8mg聚山梨醇酯20，USP。用含有 1. 1%苯甲醇作为防腐剂的20mL抑菌性注射用水（BWFI)的重建，得到含有21mg/mL曲妥珠 单抗、pH为约6. 0的多剂量溶液。更多细节参见曲妥珠单抗处方信息。
[0226] 用于治疗用途的优选帕妥珠单抗制剂包含20mM组氨酸乙酸盐、120mM蔗糖、 0.02%聚山梨醇酯20，？册.0中3011^/1^的帕妥珠单抗。备选的帕妥珠单抗制剂包含2511^/ mL帕妥珠单抗、IOmM组氨酸-HCl缓冲剂、240mM蔗糖、0. 02%聚山梨醇酯20, pH6. 0。
[0227] 在实施例中所述临床试验中使用的安慰剂制剂等同于无活性剂的帕妥珠单抗。
[0228] 本文中制剂还可以含有待治疗的特定适应证所必需的超过一种活性化合物，优选 具有不会彼此不利影响的互补活性的那些活性成分。可与HER二聚化抑制剂组合的多种药 物在下文方法部分描述。这类分子以对意图目的有效的量适宜地组合存在。
[0229] 用于体内施用的制剂必须无菌。这可容易地通过经由无菌滤膜过滤而实现。
[0230] V.治疗方法
[0231] 在本文治疗方法的第一个方面，提供一种用于将HER2阳性乳腺癌患者群体中的 无进展存活（PFS)延长6个月或更长的方法，其包括对群体中的患者施用帕妥珠单抗、曲妥 珠单抗和化疗（例如紫杉烷如多西他赛）。任选地，所述患者群体包含适宜数目的患者（例 如200以上，300以上，或400以上患者），从而可以评估统计学显著的PFS延长。
[0232] 下文实施例3中的III期CLEOPATRA临床数据显示，由研究者评估的中值PFS对 于安慰剂加曲妥珠单抗加多西他赛为12. 4个月，而对于帕妥珠单抗加曲妥珠单抗加多西 他赛为18. 5个月，如此相对于未接受帕妥珠单抗的患者（即仅接受曲妥珠单抗和多西他赛 的患者），中值PFS的改进为6个月或更长（例如6. 1个月）。
[0233] 在一个另外或备选的实施方案中，提供一种获得HER2阳性乳腺癌患者群体中 80 %或更高的客观响应率的方法，包括对群体中的患者施用帕妥珠单抗、曲妥珠单抗和化 疗（例如紫杉烷，如多西他赛）。
[0234] 在一个相关的方面，提供一种在HER2阳性癌症患者群体中将两种HER2抗体组合 来治疗HER2阳性癌症而不增加心脏毒性的方法，包括对群体中的患者施用帕妥珠单抗、曲 妥珠单抗和化疗。任选地，所述患者群体包含适宜数目的患者（例如200以上,300以上,或 400以上患者），从而可以进行对从该组合产生的缺少心脏毒性的统计学显著的评估。下文 实施例3中的III期CLEOPATRA临床数据显示，将帕妥珠单抗和曲妥珠单抗组合不加剧心 脏毒性。可就症状性左心室收缩功能障碍（LVSD)或充血性心力衰竭（CHF)的发生率，或左 心室射血分数（LVEF)降低来监测心脏毒性，例如如下文实施例3中公开的。
[0235] 任选地，所述乳腺癌是转移性或局部再发的、不可切除的乳腺癌或从头IV期疾 病，限定为免疫组织化学（IHC) 3+和/或荧光原位杂交（FISH)扩增比彡2. 0。
[0236] 任选地，群体中的患者未接受先前治疗或在辅助治疗后复发，具有基线处> 50% 的左心室射血分数（LVEF)，和/或具有0或1的东部肿瘤学协作组表现状况（ECOG PS)。
[0237] 在一个备选的实施方案中，本发明涉及一种治疗早期HER2阳性乳腺癌的方法， 包括对患有乳腺癌的患者施用帕妥珠单抗、曲妥珠单抗和化疗，其中所述化疗包含基于蒽 环类抗生素的化疗或基于卡钼的化疗。本发明的这一方面得到实施例5中临床数据的支 持。在一个实施方案中，所述化疗包含基于蒽环类抗生素的化疗，例如包含5-FU、表柔比星 和环磷酰胺（FEC)。在一个备选的实施方案中，所述化疗包含基于卡钼的化疗，例如除了 nERCEFTiN'K:/曲妥珠单抗以夕卜还包含紫杉烧（例如多西他赛）、卡钼（例如TCH方案）。 在一个实施方案中，帕妥珠单抗与基于蒽环类抗生素的化疗或基于卡钼的化疗同时施用， 例如其中帕妥珠单抗、曲妥珠单抗和化疗以3周周期施用，帕妥珠单抗、曲妥珠单抗和化疗 在每个周期的第1天施用。本文实施例中的数据证明帕妥珠单抗施用不增加相对于没有帕 妥珠单抗治疗（即相对于曲妥珠单抗与基于蒽环类抗生素的化疗（例如FEC)且无帕妥珠 单抗；或相对于曲妥珠单抗与基于卡钼的化疗且无帕妥珠单抗（即TCH))的心脏毒性。本 文中涵盖的早期HER2阳性乳腺癌疗法包括新辅助和辅助疗法。
[0238] 本文中的发明还涉及一种在患者中治疗HER2阳性癌症的方法，包括对患者共施 用来自同一静脉内袋的帕妥珠单抗和曲妥珠单抗的混合物。该实施方案适用于治疗任意 HER2阳性癌症，包括HER2阳性乳腺癌、HER2阳性胃癌、HER2阳性转移性或局部再发的、不 可切除的乳腺癌、或从头IV期疾病、早期HER2阳性乳腺癌等。任选地，该方法还包括对患 者施用化疗。
[0239] 在再一个实施方案中，本发明的治疗方法包括、基本组成、或组成为：施用帕妥珠 单抗、曲妥珠单抗和化疗如钼（例如顺钼）和/或氟嘧啶（例如卡培他滨和/或5-氟尿嘧 啶（5-FU))来治疗HER2阳性胃癌。
[0240] 具体地，本发明的治疗方法包括、基本组成、或组成为：对患有转移性胃癌，不可切 除的局部晚期胃癌，或术后复发胃癌的患者施用帕妥珠单抗、曲妥珠单抗和化疗，如钼和/ 或氟嘧啶，例如顺钼和/或卡培他滨和/或5-氟尿嘧啶（5-FU)。在某些实施方案中，所述 胃癌不能由治愈性疗法处理。
[0241] 在一个备选的实施方案中，提供一种治疗患者中HER2阳性乳腺癌的方法，包括对 患者施用帕妥珠单抗、曲妥珠单抗和长春瑞滨。依照该实施方案的乳腺癌任选为转移性或 局部晚期的。任选地，所述患者先前未接受过在转移性背景中的系统性非激素抗癌疗法。
[0242] 在另一个方面，本发明提供一种治疗患者中HER2阳性乳腺癌的方法，包括对患者 施用帕妥珠单抗、曲妥珠单抗和芳香酶抑制剂（例如阿那曲唑或来曲唑）。依照该实施方 案，所述乳腺癌是晚期乳腺癌，包括激素受体阳性乳腺癌如雌激素受体（ER)阳性和/或孕 酮受体（PgR)阳性乳腺癌。任选地，所述患者先前未接受过在转移性背景中的系统性非激 素抗癌疗法。该治疗方法任选地还包括对患者施用诱导化疗（例如包含紫杉烷）。
[0243] 依照本发明的疗法延长所治疗患者的无进展存活（PFS)和/或总体存活（OS)。
[0244] 将所述抗体和化疗治疗物依照已知方法对人患者施用。特定的施用方案和制剂记 载于本文实施例中。
[0245] 依照一个实施方案，以在接受帕妥珠单抗和曲妥珠单抗的90%的患者中稳定态C 最小彡20 μ g/mL的剂量施用帕妥珠单抗。
[0246] 依照本发明的一个具体的实施方案，施用约840mg(加载剂量）的帕妥珠单抗，接 着是一剂或多剂的约420mg(维持剂量）的该抗体。维持剂量优选约每3周施用达总计至 少2剂，直至临床进展疾病或难管理的毒性，优选多达约6、或7、或8、或9、或10、或11、或 12、或13、或14、或15、或16、或17剂或更多剂。还涵盖包括更多治疗周期的更长的治疗时 段。
[0247] 依照另一个具体的实施方案，对于所有治疗周期以840mg的剂量施用帕妥珠单 抗。
[0248] 曲妥珠单抗通常以约8mg/kg的静脉内加载剂量施用，接着在后续周期中以6mg/ kg剂量施用。曲妥珠单抗通常每3周施用直至临床进展疾病或难管理的毒性，优选多达约 17剂或更多剂量。
[0249] 在一个具体的实施方案中，曲妥珠单抗以静脉内（IV)输注在每个治疗周期的第1 天施用直至研究者评估的疾病进展或难管理的毒性，在周期1以8mg/kg的加载剂量而对于 后续周期以6mg/kg的剂量。
[0250] 在另一个具体的实施方案中，帕妥珠单抗以IV输注在每个治疗周期的第1天施 用，达到总计6个周期或直至研究者评估的疾病进展或难管理的毒性（以先发生者为准）， 其在周期1以840mg的加载剂量而对于后续周期以420mg的剂量，或者在周期1以840mg 的加载剂量而对于后续周期以840mg的剂量。
[0251] 为了治疗胃癌，顺钼80mg/m2通常以IV输注在每个治疗周期的第1天施用，达到 总计至少6个周期。
[0252] 为了治疗胃癌，卡培他滨1000mg/m2通常每日两次地口服施用，从每个周期第1天 的傍晚到第15天的上午，达总计至少6个周期。卡培他滨施用可在对个体患者的仔细风 险-受益评估后根据主治医师的判断而延长。
[0253] 用于治疗HER2阳性乳腺癌的化疗的剂量和安排在下文实施例中公开，但其他剂 量和安排也是已知的且涵盖在依照本文的发明中的。
[0254] VI.制品
[0255] 本文中制品的一个实施方案包含一种静脉内（IV)袋，其含有适用于对癌症患者 施用的帕妥珠单抗和曲妥珠单抗的稳定混合物。任选地，所述混合物是盐水溶液；例如包含 约0. 9% NaCl或约0. 45% NaCl。例示性IV袋是聚烯烃或聚氯乙烯输注袋，例如250mL IV 袋。依照本发明的一个实施方案，所述混合物包含约420mg或约840mg的帕妥珠单抗,和约 200mg至约IOOOmg的曲妥珠单抗（例如约400mg至约900mg的曲妥珠单抗）。
[0256] 任选地，IV袋中的混合物在5°C或30°C稳定长达24小时。混合物的稳定性可通 过一种或多种选自下组的测定法评估：颜色、外观和澄清度（CAC)，浓度和浊度分析，微粒 分析，大小排阻层析（SEC)，离子-交换层析（IEC)，毛细管区带电泳（CZE)，成像毛细管等电 聚焦（iCIEF)和效力测定法。
[0257] 在一个备选的实施方案中，本发明提供一种制品，包含其中具有帕妥珠单抗的管 形瓶和包装插页，其中所述包装插页提供表3或表4中的安全性数据和/或表2、表5、图8 或图10中的功效数据。任选地，所述试剂瓶是单剂量试剂瓶，其含有约420mg帕妥珠单抗。 在一个实施方案中，所述试剂瓶在纸板箱（cardboard carton)中提供。
[0258] 在一个相关方面，本发明涉及一种制备制品的方法，包括将其中具有帕妥珠单抗 的试剂瓶与包装插页包装在一起，其中所述包装插页提供表3或表4中的安全性数据和/ 或表2、表5、图8或图10中的功效数据。
[0259] 在一个另外的相关方面，本发明提供一种确保帕妥珠单抗的安全和有效使用的方 法，包括将其中具有帕妥珠单抗的试剂瓶与包装插页包装在一起，其中所述包装插页提供 表3或表4中的安全性数据和/或表2、表5、图8或图10中的功效数据。
[0260] VII.生物材料保藏
[0261] 以下杂交瘤细胞系已保藏在美国典型培养物保藏中心，10801University Boulevard, Manassas, VA20110-2209, USA(ATCC)：
[0262] 抗体名 ATCC No. 保藏日期
[0263] 4D5 ATCC CRL10463 1990 年 5 月 24 日
[0264] 2C4 ATCC HB-12697 1999 年 4 月 8 日
[0265] 本发明的进一步的细节由以下非限制性实施例例示。说明书中所有引用的公开内 容均通过提述明确并入本文。 实施例
[0266] 实施例1 :在患有HER2阳性晚期胃癌的患者中评估与曲妥珠单抗和化疗组合的帕 妥珠单抗的IIa期研究
[0267] 尽管在20世纪的下半叶胃癌发病率在全球范围内急剧下降且死亡率降低，但它 仍然是继肺癌之后的世界第二大癌症死亡原因（Parkin, D. 0ncogene23:6329-40 (2004))。 胃癌的发病率根据地理区域而广泛变化（Kelley等J Clin Epidemi〇156:l-9(2003); Plummer 等 Epidemiology of gastric cancer. In:Butlet 等编.Mechanisms of carcinogenesis: contribution of molecular epidemiology. Lyon:IARC Scientific Publications N〇157，IARC(2004))。在日本、韩国、中国和中南美的一些国家，发病率为每 100, 000人20至95例。相比之下，在美国、印度和泰国，发病率为每100, 000人4至8例。 西欧的发病率范围为每100, 〇〇〇人37例（在意大利的一些地方）到每100, 000人12例 (在法国）。女性中的发病率遵循相似的地理学模式但比男性低约50%。在定位于胃贲门 (胃食管连接部）的癌症与定位于胃其余部位的癌症之间有清楚的流行病学差异。贲门的 癌症占据美国白人中39%的胃癌病例，但在日本人的胃癌中仅占据4%。由于尚不清楚的 原因，胃贲门和下部食管的癌症自1970年代以来在发达国家中快速增加。
[0268] 迄今为止，胃癌的唯一潜在治愈性治疗是手术。胃癌的存活率最近若干 年来在日本得到显著改善，这是更早期检测和更好的手术技术的结果（Inoue等 Postgrad Med J81:419-24(2005))。然而，在西欧和北美，胃癌常常在更后期的 阶段诊断，这时切除已不再可能。因此，这些群体中的总体5年存活不超过25 % (Ajani，J.The OncologistlOSuppl3:49_58 (2005) ;Catalano 等 Clin Rev Oncol/ Hematol54:209-41(2005))。
[0269] 不考虑其地理区域，患有不可切除疾病的患者由于局部晚期的生长或转移性 扩散具有较差的预后，总体5年存活在5%-15%的范围内（Cunningham等，Annals of Onco Iogy 16Supp11: i22-3 (2005))。对于在诊断时患有不可切除疾病的患者和患有术后 复发疾病的患者，主要的治疗选项是化疗（National Comprehensive Cancer Network. NCCN clinical practice guidelines in oncology. Gastric cancer. Versionl. National Comprehensive Cancer Network, (2006))。已显不意图姑息而给予的化疗 在患有晚期胃癌的患者中优于最佳维持护理（supportive care) (Wagner等J Cl in Oncol24:2903-9(2006))。
[0270] 研究B018255 (ToGA)是一项随机化的、开放标签、多中心、国际性、比较性的III期 试验，其设计为评估与化疗组合的曲妥珠单抗相比于单独化疗作为一线治疗在患有不可手 术、局部晚期或复发的和/或转移性的胃或胃食管连接部的HER2阳性腺癌的患者中的功效 和安全性。该研究的主要目的是比较用曲妥珠单抗组合氟嘧啶（5-FU或卡培他滨）加顺钼 治疗的患者的总体存活。来自研究B018255的结果显示当与化疗组合在患有胃癌的患者中 使用曲妥珠单抗时的显著临床益处。相比于单独化疗的臂，主要终点总体存活在曲妥珠单 抗加化疗臂中显著改善（P = 〇. 0045,对数秩检验；危险比，0. 74)。中值存活时间在曲妥珠 单抗加化疗臂中为13. 8个月，而在单独化疗臂中为11. 1个月，且死亡风险对于曲妥珠单抗 加化疗臂中的患者降低了 26%。所有其他的次要终点均显示具有相似危险比和优势比的临 床显著性。（参见例如 Bang 等，Lancet28 ;376 (9742) : 687-97 (2010))。
[0271] 该研究的结果为，现在（包括欧盟和美国）指示需要曲妥珠单抗与顺钼加卡培他 滨或5-FU组合用来治疗患有HER2阳性转移性胃或胃食管连接部腺癌、未接受过针对转移 性疾病的在前治疗的患者。
[0272] 目前对于晚期胃癌没有单一、标准、全世界接受的化疗方案。尽管ToGA试验取得 成功，但对于提供针对这一严重疾患的新的且有效的治疗选项仍有极大需要。具体地，需要 新的治疗办法，其目标是避免治疗相关的发病和/或增加胃癌患者的存活。因此，本实施例 是一项随机化、多中心、开放标签的研究，其在患有胃或胃食管连接部的HER2阳性腺癌的 患者中评估帕妥珠单抗的两种不同剂量。患者以1:1比率随机化为两个治疗臂。臂A中的 患者对于周期1接受840mg的帕妥珠单抗加载剂量，对于周期2-6接受420mg的剂量，而臂 B中的患者对于所有6个周期均接受帕妥珠单抗840mg。两个治疗臂中的患者均接受曲妥 珠单抗、顺钼和卡培他滨。研究方案在图6中。研究的长度为约24个月（4个月用于招募， 和招募最后一位患者后20个月的随访）。研究结束将是当在所有患者中发生进展性疾病 时，或者所有患者均从研究退出或停止时，以先到者为准。
[0273] 目标群体
[0274] 该试验涉及约30位患者。
[0275] 患者必须滿足以下标准以讲入研究：
[0276] ?组织学确认的胃或胃食管连接部的腺癌，具有不能手术的局部晚期或转移性疾 病，不可由治愈性疗法处理。
[0277] ?呈现术后复发（当手术目的是治愈时）的患有晚期疾病的患者也具有进入资 格。
[0278] ?可测量疾病，依照实体瘤中的响应评估标准（RECIST)vl. 1，使用成像技术（计 算机断层照相术（CT)或磁共振成像（MRI))评估，或者可随访的不可测量疾病。
[0279] ?限定为与ISH+组合的IHC3+或IHC2+的HER2阳性肿瘤，如由中心实验室对原发 性或转移性肿瘤评估的。ISH阳性定义为HER2基因拷贝数与CEP17信号数的比率> 2. 0。
[0280] ?必须可获得有至少5mm侵入性肿瘤的福尔马林固定、石蜡包埋的（FFPE)组织以 用于中心确认HER2合格。
[0281] ?东部肿瘤学协作组（ECOG)表现状况为0或1。
[0282] ?基线左心室射血分数（LVEF)彡55% (通过心回波图（ECHO)或多门采集（MUGA) 扫描测量）。
[0283] ?生命预期至少3个月。
[0284] ?男性或女性。
[0285] ?年龄彡18岁。
[0286] ?签署知情同意书。
[0287] ?对于有分娩潜力的女性和有具有分娩潜力的配偶的男性参与者：患者和/或配 偶同意使用一种高度有效的非激素避孕形式或两种有效的非激素避孕形式。
[0288] ?避孕使用必须在研究治疗持续时间持续且持续至最后一剂研究药物后至少6 个月。
[0289] 棑除滿足仵何以下标准的患者讲入研究：
[0290] ?有针对晚期或转移性疾病的先前化疗，例外的情况是，当在完成辅助或新辅助 疗法与招募到研究之间已过去至少6个月时则允许在前的辅助或新辅助疗法。
[0291] ?不允许使用钼的辅助或新辅助疗法。
[0292] ?缺少上部胃肠道的实体完整性或吸收不良综合症（例如，有部分或总体胃切除 的患者可进入研究，但有空肠造口术探子（probe)的那些患者不能进入）。
[0293] ?活跃（重大或不受控）的胃肠出血。
[0294] ?来自先前疗法的残余相关毒性（例如神经毒性> 2级（NCI CTCAE))，脱发例外。
[0295] ?过去5年内的其他恶性，宫颈原位癌或基底细胞癌除外。
[0296] ?在紧接随机化之前的以下任一种异常实验室测试：
[0297] 血清总胆红素>1. 5倍正常上限（ULN)，或对于已知患有Gilbert综合症的患者，血 清总胆红素>2x ULN
[0298] 对于无肝或无骨转移的患者：
[0299] AST 或 ALT>2. 5 X ULN 和碱性磷酸酶（ALP) >2. 5x ULN
[0300] 在具有肝转移而无骨转移的患者中：AST或ALT>5x ULN和ALP>2. 5x ULN
[0301] 在具有肝转移和骨转移的患者中：AST或ALT>5x ULN和ALP>10x ULN
[0302] 在具有骨转移而无肝转移的患者中：AST或ALT>2. 5x ULN和ALP>10x ULN
[0303] 清蛋白 <25g/L
[0304] 肌酸酐清除率<60mL/min
[0305] 总白细胞（WBC)计数〈2500/ μ L(〈2. 5x109/L)
[0306] 绝对嗜中性粒细胞计数（ANC)〈1500/ μ L(〈l. 5x109/L)
[0307] 血小板〈100, 000/μ L(〈100x109/L)
[0308] ?严重的心脏病或医学疾患，包括但不限于：
[0309] 有记录的心力衰竭或收缩功能障碍（LVEF〈50% )的病史；
[0310] 高风险的不受控的心律不齐，如在休息时心率> 100/min的房性心动过速；
[0311] 重大的室性心律不齐（室性心动过速）或更高级别的AV阻滞（二度AV阻滞2型 (Mobitz II)或三度AV阻滞）；
[0312] 需要抗心绞痛药物的心绞痛；
[0313] 临床重大的瓣膜性心脏病；
[0314] ECG上透壁性梗塞的证据；不良控制的高血压（例如收缩血压>180mmHg或舒张血 压 >100mmHg);
[0315] 由于晚期恶性的并发症或其他疾病在休息时呼吸困难或需要补充氧气治疗；
[0316] 使用长期或高剂量皮质类留醇疗法的治疗；
[0317] 允许吸入性类固醇和短过程的口服类固醇用于抗呕吐或作为胃口刺激物；
[0318] 临床重大的听觉异常；已知的二氢嘧啶脱氢酶缺陷；
[0319] 脑转移的病史或临床证据；严重的不受控的系统性间发病（systemic intercurrent illness)(例如感染或不良控制的糖尿病）。
[0320] ?怀孕或哺乳
[0321] 有分娩潜力的女性必须在随机化前7天内具有阴性血清怀孕测试，不管使用哪种 避孕方法。
[0322] ?在研究治疗开始前4周内，或在研究治疗开始前2周内的放疗（如果对骨转移 部位周围给予姑息放疗且患者从任何急性毒性恢复）。
[0323] ?研究治疗开始前4周内的大手术，没有完全恢复。
[0324] ?已知的HIV、乙肝病毒或丙肝病毒的活性感染。
[0325] ?对任一种研究药物的已知过敏。
[0326] ?不能依从随访测试或规程，如由研究者确定的。
[0327] 研究件医学产品：剂量、路径和方案
[0328] 治疗周期长为3周。
[0329] ?曲妥珠单抗以静脉内（IV)输注在每个周期的第1天施用，直至研究者评估的疾 病进展或难管理的毒性，对于周期1以8mg/kg的加载剂量而对于后续周期以6mg/kg的剂 量。
[0330] ?帕妥珠单抗以静脉内（IV)输注在每个周期的第1天施用，达总计6个周期或直 至研究者评估的疾病进展或难管理的毒性（以先发生者为准），对于每个臂如下：
[0331] 臂A :患者对于周期1以840mg的加载剂量接受帕妥珠单抗，对于周期2-6接受 420mg剂量。
[0332] 臂B :患者对于周期1-6接受840mg的帕妥珠单抗。
[0333] 非研究件医学产品
[0334] 治疗周期长为3周。
[0335] ?顺钼80mg/m2以IV输注在每个周期的第1天施用，达总计6个周期。
[0336] ?卡培他滨lOOOmg/m2每日两次地口服施用，从每个周期第1天的傍晚到第15天 的上午，达总计6个周期。（卡培他滨施用可在对个体患者的仔细风险-受益评估后根据研 究者的判断而延长）。
[0337] MM
[0338] 帕妥珠单抗的制剂
[0339] 针对临床目的生产的每批重组抗体均满足病毒安全性要求以及美国药典和欧洲 药典对无菌性的要求。每批均满足对于身份、纯度和效力所要求的规格。
[0340] 以一次性制剂提供帕妥珠单抗，该制剂含有在20-mM L-组氨酸-乙酸盐（pH6. 0)、 120-1111鹿糖和0.02(%聚山梨醇酯20中配制的3011^/1111^帕妥珠单抗。每个20-(^管形瓶 (14. OmL溶液每管形瓶）含有约420mg的帕妥珠单抗。
[0341] 曲妥珠单抗的制剂
[0342] 研究性曲妥珠单抗供应为冻干的制备物，在大多数国家以150mg每管形瓶的名义 含量（管形瓶大小随国家而变化）。
[0343] 曲妥珠单抗在组氨酸、海藻糖和聚山梨醇酯20中配制。一旦重建，每份溶液含有 在pH约6. 0的21mg/mL的活性药物。
[0344] Wfe
[0345]
[0346] 研究者评估的肿瘤响应将用于汇总每个治疗臂在周期3和6结束时的最佳总体响 应，限定为具有由RECIST确定的完全或部分响应的患者。
[0347] 安全件
[0348] 安全性将经由不良事件、实验室测试结果的变化和生命体征的变化的汇总来评 估。
[0349] 药动学/药效学
[0350] 将评估对于帕妥珠单抗在第43天的最小（槽）血清浓度（C^、）。另外，将估计 PK参数如CL、Vss、AUC和半衰期。从收集直至第43天的数据的PK参数评估将使得能对预 测在90%的患者中稳定态槽> 20 μ g/mL的估测剂量建模和模拟。
[0351] 统计学分析
[0352] 药动学分析
[0353] 个体和均值血清帕妥珠单抗浓度-时间数据将根据剂量水平列表和绘图。帕妥珠 单抗的血清药动学将通过估测总暴露（曲线下面积（AUC))、最大血清浓度（C 4±)、最小血 清浓度（c4/>)、稳定态前时间、总血清清除、分布体积和消除半衰期αν 2)来汇 总。将根据描述性统计对这些参数的估值进行列表和汇总（均值、标准偏差、最小和最大）。 根据观察到的帕妥珠单抗血清浓度-时间数据，可将群体PK办法用于估测将实现PK目标 浓度的剂量。
[0354] 对曲妥珠单抗观察到的C4大和C4/>将通过描述性统计对每个指定的PK取样时间 点列表和汇总。对于所有PK分析，将使用样品收集的实际时间（而非安排的时间）。
[0355] 将使用非区室方法计算帕妥珠单抗的PK参数（AUC、C最大、tV2)，且系统性清除率 将通过标准方法自血浆浓度得到。
[0356] 分析群体
[0357] 意图治疗群体
[0358] 所有接受至少一剂研究药物的患者将纳入意图治疗群体（患者将分配给随机化 用于分析目的的治疗组）。
[0359] 安全性群体
[0360] 所有接受至少一种研究药物剂量的随机化的患者将纳入安全性可评估群体（患 者将分配给治疗的治疗组）
[0361] 样品大小
[0362] 该研究的目的是在接受两种不同帕妥珠单抗剂量方案的患者中评估第43天时帕 妥珠单抗的c 4/>。然后将使用群体PK模型分析这些数据以鉴定出一种帕妥珠单抗剂量， 其将在约90%的晚期胃癌患者中实现PK目标稳定态槽浓度>20 μ g/mL。使用帕妥珠单抗 在晚期胃癌中行为类似于曲妥珠单抗的假定的分析表明，使用每臂15位患者的样品大小 (该研究中共30位患者），可以可接受的准确度估测实现期望目标浓度的剂量（变异系数 <15% ) 〇
[0363] 临床结果
[0364] 该IIa期胃癌（GC)研究的临床结果显示于图32-37。
[0365] 图32显示所取样品和时间点。
[0366] 图33显示在GC研究的两臂（用420mg (臂A)或840mg (臂B)的帕妥珠单抗治 疗）中患者群体的人口统计学。
[0367] 图34显示分别在臂A和B中的患者的GC病史。
[0368] 图35显示分别在臂A和B中的患者分布。
[0369] 图36显示分别在臂A和B中的总体响应率。
[0370] 安全件数据
[0371] 腹泻是在90%的受试者中发生的最普遍事件，且通常为1和2级，开始于周期1 ; 没有患者因腹泻而停止治疗。
[0372] >3级的不良事件（AE) (>13% )包括腹泻、口腔炎、疲劳/衰弱、胃口变小、低钠血 症、贫血和嗜中性白细胞减少。除了嗜中性白细胞减少和低钠血症（在臂A中更高）和胃 口减小（在臂B中更高）之外，这些事件的发生率在标准和高剂量帕妥珠单抗臂中均相似。
[0373] 射血分数（EF)中的无症状性变化、嗜中性白细胞减少发热、皮疹、和药物过敏反 应均与更高的帕妥珠单抗剂量无关。
[0374] 严重不良事件（SAE)在60%的患者中发生，且发生率与高剂量帕妥珠单抗无关。
[0375] 尽管更多的患者从臂B中的治疗退出，但不清楚这是否是由于更高的帕妥珠单抗 剂量，因为导致治疗停止的事件是不相同的。
[0376] 药动学（PK)结果
[0377] 图37显示在胃癌（GC) (JOSHUA)对转移性乳腺癌（MBC) (CLEOPATRA)中帕妥珠单 抗第42天浓度评估的结果。
[0378] 结果：T总
[0379] -帕妥珠单抗槽浓度在GC中比在MBC中低。
[0380] ?周期间浓度（即第7、14天）与预期的MBC浓度一致，因为清除率在这些更高浓 度是线性的。
[0381] ?使用840/420mg剂量的槽水平比CLEOPATRA试验（实施例3)低约37%，很可能 是由于在更低浓度时的非线性清除率所致（不完全受体饱和）。
[0382] -GC中的840/840mg剂量提供类似于MBC中840/420mg剂量的槽浓度。
[0383] -协变量对PK无影响。
[0384] 结论
[0385] 基于6(：中的帕妥珠单抗？1(，将840/84〇1^剂量用于治疗胃癌。预期该剂量在90% 的患者中将槽水平维持于目标>20 μ g/mL之上，并提供与在MBC中观察到的那些相似的槽 水平。
[0386] 实施例2 :在患有HER2阳性晚期胃癌的患者中评估与曲妥珠单抗和化疗组合的帕 妥珠单抗的III期研究
[0387] 这是一项III期、随机化、开放标签、多中心的临床研究，其设计为评估帕妥珠单 抗与曲妥珠单抗和化疗组合在患有HER2阳性、局部晚期的或转移性胃癌的患者中的功效。
[0388] 治疗臂中的患者接受曲妥珠单抗、顺钼和卡培他滨和/或5-氟尿嘧啶。在另一臂 中，对患者给予安慰剂或帕妥珠单抗。
[0389] 治疗方案：
[0390] 帕妥珠单抗：
[0391] 对于周期1-6为840mg剂量。
[0392] 曲妥珠单抗
[0393] 8mg/kg加载剂量继之以6mg/kg q3w
[0394] 卡培他滨
[0395] 1000mg/m2bid dl-14q3w x6
[0396] 5-氟尿嘧啶
[0397] 800mg/m2/ 天连续 iv 输注 dl_5q3w x6
[0398] 顺钼
[0399] 800mg/m2q3w x6
[0400] 丰要终点：
[0401] 总体存活（OS)
[0402] 次要终点：
[0403] 无进展存活（PFS)、疾病进展前时间（TTP)、客观响应率（ORR)、临床受益率、响应 持续时间、Q〇 1、安全性、疼痛强度、止痛剂消耗、重量变化、药动学。
[0404] 丰要患者诜择标准
[0405] 纳入标准：
[0406] ?胃或GEJ的腺癌
[0407] ?不能手术的、局部晚期和/或转移性疾病
[0408] ?可测量（RECIST),或不可测量的可评估疾病
[0409] · HER2 阳性肿瘤：IHC2+ 或 3+ 和 / 或 ISH+
[0410] ?适当的器官功能和ECOG表现状况彡2
[0411] ?书面知情同意书
[0412] 棑除标准
[0413] · 6个月内的在前辅助化疗
[0414] ?针对晚期疾病的化疗
[0415] ?充血性心力衰竭或基线LVEF〈50%
[0416] ?肌酸酐清除率<60mL/min
[0417] 预期本文中描述的治疗方法（包括施用帕妥珠单抗、曲妥珠单抗和化疗例如顺钼 和卡培他滨）将达到主要终点（OS)。具体地，预期本文中的治疗方法将在所治疗的胃癌患 者中为治疗有效的，例如，通过相对于仅使用曲妥珠单抗和化疗的治疗延长存活，包括总体 存活（OS)和/或无进展存活（PFS)和/或疾病进展前时间（TTP)和/或客观响应率（ORR)。
[0418] 实施例3 :在患有先前未治疗过的HER2阳性转移性乳腺癌的患者中评估安慰剂+ 曲妥珠单抗+多西紫杉醇相对于帕妥珠单抗+曲妥珠单抗+多西紫杉醇的功效和安全性的 III期、随机化、双盲、安慰剂对照的登记试验（CLEOPATRA)的结果
[0419] 用于评估HER2阳性转移性乳腺癌中帕妥珠单抗的方案见于http:// clinicaltrials. g〇v/ct2/show/NCT00567190 和 US 2009/0137387 以及 TO2009/154651。
[0420] 本实施例涉及在患有HER2阳性MBC、未接受过针对其转移性疾病的化疗或生物疗 法的患者中的随机化、双盲、安慰剂对照的III期试验中获得的临床数据。将患者以1:1随 机化以接受安慰剂加曲妥珠单抗加多西紫杉醇或帕妥珠单抗加曲妥珠单抗加多西紫杉醇。 主要终点为基于肿瘤评估的无进展存活（PFS)。PFS定义为从随机化至依照实体瘤中的响 应评估标准（RECIST)版本I. 0的首次记录的射线照相进展性疾病（PD) (Therasse等J Natl Cancer Inst92:205-16 (2000))或任何原因的死亡（如果在患者最后一次肿瘤评估 的18周以内的话）的时间。次要终点包括总体存活（OS)、由研究者评估的PFS、客观响应 率（ORR)和安全性。
[0421] 患者：合格的患者已中心确认了 HER2阳性（限定为免疫组织化学（IHC) 3+和/ 或突光原位杂交（FISH)扩增比>2.0) (Carlson 等 J Natl Compr Canc Netw4 Suppl 3:Sl-22 (2006))，局部复发、不可切除的或转移性的乳腺癌、或从头IV期疾病。患者年龄 彡18岁，具有基线处彡50%的左心室射血分数（LVEF)(通过心回波图或多门采集测定）， 和0或1的东部肿瘤学协作组表现状况（ECOGPS)。患者在随机化前可以已接受过针对MBC 的一种激素治疗，或新辅助或辅助系统性乳腺癌治疗（包括曲妥珠单抗和/或紫杉烷），只 要他们在完成新辅助或辅助治疗与转移性疾病诊断之间经历> 12个月的无疾病间期。排 除标准包括针对MBC的治疗（除上述以外）；中枢神经系统转移；暴露于>360 mg/m2的多柔 比星或其等同物的累积剂量的经历；在在前曲妥珠单抗治疗期间或之后LVEF降低至〈50% 的经历；目前不受控的高血压；受损的心脏机能病史；受损的骨髓、肾或肝功能；目前已知 的HIV、HBV、或HCV感染；怀孕；哺乳；和拒绝使用非激素避孕法。
[0422] 规程：患者接受8 mg/kg曲妥珠单抗的加载剂量，接着是每3周6 mg/kg的维持剂 量直至研究者评估的射线照相或临床H)，或难管理的毒性。多西紫杉醇以75mg/m2的起始 剂量每3周施用，如果耐受扩大到100mg/m 2。按照方案，研究者能将剂量降低25%至55mg/ m2或75mg/m2(如果患者已进行剂量扩大）以管理耐受性。推荐患者接受至少6个周期的 多西紫杉醇。帕妥珠单抗或安慰剂以840mg的固定加载剂量继之以420mg每3周给药直至 研究者评估的射线照相或临床ro或难管理的毒性。在由于累积毒性而化疗停用的情况中， 继续抗体疗法直至ro、不可接受的毒性或同意退出。所有药物均静脉内施用。
[0423] 评估：通过标准RECIST接受的方法学每9周由每个中心和IRF评估PFS直至IRF 评估的PD。对LVEF的评估在基线处、治疗时期期间每9周、治疗停止时、治疗停止后第一年 的每6个月、然后在随访期中每年至长达3年进行。实验室参数和ECOG状态在每个周期评 估。持续监测不良事件（AE)并依照NCI-CTCAE版本3.0分级。随访在治疗停止时进行中 的所有心脏事件和严重不良事件（SAE)，直至在最终剂量后长达1年时消除或稳定。在治疗 后发作的心脏事件和治疗相关的SAE。
[0424] 结果
[0425] 研究群体：总计招募808位患者并随机化以接受安慰剂加曲妥珠单抗加多西紫杉 醇（η = 406)或帕妥珠单抗加曲妥珠单抗加多西紫杉醇（η = 402)(图7)。基线特征在治 疗臂之间类似（表1)。
[0426] 表I :意图治疗群体的基线特征
[0427]
【权利要求】
1. 一种用于将ffiR2阳性乳腺癌患者群体中的无进展存活延长6个月或更长的方法，其 包括对所述群体中的患者施用帕妥珠单抗（Pertuzumab)、曲妥珠单抗（Trastuzumab)和化 疗。
2. 权利要求1的方法，其导致所述群体中的患者中客观响应率为80%或更高。
3. 权利要求1或权利要求2的方法，其中所述化疗包含紫杉烷（taxane)。
4. 权利要求3的方法，其中所述紫杉烷是多西他赛（Docetaxel)。
5. 权利要求1至4中任一项的方法，其中所述乳腺癌是转移性或局部再发的、不可切除 的乳腺癌，或从头IV期疾病（de novo Stage IV disease)。
6. 权利要求1至5中任一项的方法，其中所述群体中的患者未接受过先前治疗或在辅 助治疗后复发。
7. 权利要求1至6中任一项的方法，其中所述HER2阳性乳腺癌定义为免疫组织化学 (IHC) 3+和/或荧光原位杂交（FISH)扩增比彡2. 0。
8. 权利要求1至7中任一项的方法，其中所述群体中的患者在基线处具有> 50%的左 心室射血分数（LVEF)。
9. 权利要求1至8中任一项的方法，其中所述群体中的患者具有0或1的东部肿瘤学 协作组表现状况（ECOG PS)。
10. -种在HER2阳性癌症患者群体中组合两种HER2抗体来治疗HER2阳性癌症而不增 加心脏毒性的方法，其包括对所述群体中的患者施用帕妥珠单抗、曲妥珠单抗和化疗。
11. 权利要求10的方法，其中针对症状性左心室收缩功能障碍（LVSD)或充血性心力衰 竭（CHF)的发生率，或左心室射血分数（LVEF)的降低来监测所述患者群体中的心脏毒性。
12. 权利要求10或权利要求11的方法，其中所述HER2阳性癌症是乳腺癌。
13. 权利要求10至12中任一项的方法，其中所述乳腺癌是转移性或局部再发的、不可 切除的乳腺癌，或从头IV期疾病。
14. 一种制品，其包含其中有帕妥珠单抗的管形瓶和包装插页，其中所述包装插页提供 表3或表4中的安全性数据。
15. 权利要求14的制品，其中所述包装插页提供表2、表5、图8或图10中的功效数据。
16. 权利要求14或权利要求15的制品，其中所述管形瓶是单剂管形瓶，其含有约 420mg的帕妥珠单抗。
17. -种制备制品的方法，其包括将其中有帕妥珠单抗的管形瓶与包装插页包装在一 起，其中所述包装插页提供表3或表4中的安全性数据。
18. -种确保帕妥珠单抗的安全和有效使用的方法，其包括将其中有帕妥珠单抗的管 形瓶与包装插页包装在一起，其中所述包装插页提供表3或表4中的安全性数据和表2、表 5、图8或图10中的功效数据。
19. 一种治疗早期HER2阳性乳腺癌的方法，其包括对具有乳腺癌的患者施用帕妥珠单 抗、曲妥珠单抗和化疗，其中所述化疗包含基于蒽环类抗生素（anthracycline)的化疗或 基于卡钼（carboplatin)的化疗。
20. 权利要求19的方法，其中所述化疗包含基于蒽环类抗生素的化疗，其包含5-FU、表 柔比星（epirubicin)和环磷酰胺（FEC)。
21. 权利要求20的方法，其中帕妥珠单抗与基于蒽环类抗生素的化疗并行施用。
22. 权利要求19的方法，其中所述化疗包含基于卡钼的化疗，其包含多西他赛和卡钼。
23. 权利要求22的方法，其中帕妥珠单抗与基于卡钼的化疗并行施用。
24. 权利要求19至23中任一项的方法，其中帕妥珠单抗施用相对于没有帕妥珠单抗的 治疗不增加心脏毒性。
25. 权利要求19至24中任一项的方法，其包含新辅助或辅助疗法。
26. -种在患者中治疗HER2阳性癌症的方法，其包括对所述患者共施用来自同一静脉 内袋的帕妥珠单抗和曲妥珠单抗的混合物。
27. 权利要求26的方法，其进一步包括对所述患者施用化疗。
28. -种静脉内（IV)袋，其含有适用于对癌症患者施用的帕妥珠单抗和曲妥珠单抗的 稳定混合物。
29. 权利要求28的IV袋，其中所述混合物在盐水溶液中。
30. 权利要求29的IV袋，其中所述盐水溶液包含约0. 9% NaCl或约0. 45% NaCl。
31. 权利要求28至30中任一项的IV袋，其为250mL0. 9 %盐水聚烯烃（saline polyolefin)或聚氯乙烯输注袋。
32. 权利要求28至31中任一项的IV袋，其含有约420mg或约840mg的帕妥珠单抗和 约200mg至约lOOOmg的曲妥珠单抗的混合物。
33. 权利要求28至32中任一项的IV袋，其中所述混合物在5°C或30°C稳定达长达24 小时。
34. 权利要求28至33中任一项的IV袋，其中稳定性已通过选自下组的测定法评估： 颜色、外观和澄清度（CAC)，浓度和浊度分析，微粒分析，大小排阻层析（SEC)，离子交换层 析（IEC)，毛细管区带电泳（CZE)，成像毛细管等点聚焦（iCIEF)和效力测定法。
35. -种在人受试者中治疗HER2阳性胃癌的方法，其包括对具有HER2阳性胃癌的受试 者施用帕妥珠单抗、曲妥珠单抗和化疗。
36. 权利要求35的方法，其中所述胃癌包括不可切除的、局部晚期的胃癌，或转移性胃 癌，或晚期术后再发的胃癌，其可能不适合通过已知方法的治愈性疗法处理，或胃或胃食管 连接部的腺癌。
37. 权利要求35或权利要求36的方法，其中所述患者未接受过针对转移性胃癌的在前 抗癌治疗，具有0-1的东部肿瘤学协作组表现状况（ECOG PS)，或具有IHC3+或IHC2+/ISH+ 的HER2阳性状态。
38. 权利要求35至37中任一项的方法，其中所述化疗包含钼（顺钼（cisplatin))和 /或氟啼陡（卡培他滨（capecitabine)或5-氟尿啼陡（5-FU))。
39. 权利要求38的方法，其中施用帕妥珠单抗、曲妥珠单抗、顺钼、和卡培他滨或5-FU。
40. 权利要求35至39中任一项的方法，其中帕妥珠单抗在所有治疗周期中以840mg的 剂量施用。
41. 权利要求35至40中任一项的方法，其相对于仅用曲妥珠单抗和化疗治疗的患者改 善总体存活（0S)，或相对于仅用曲妥珠单抗和化疗的治疗改善无进展存活（PFS)或响应率 (RR) 〇
42. -种在人受试者中治疗胃癌的方法，其包括对具有胃癌的受试者施用帕妥珠单抗， 其中在所有治疗周期中以840mg的剂量施用帕妥珠单抗。
43. 权利要求42的方法，其中对于6个治疗周期以840mg的剂量施用帕妥珠单抗。
44. 权利要求42或权利要求43的方法，其维持所述受试者中帕妥珠单抗谷水平 (trough level)在约 2〇li g/mL 以上。
45. 权利要求42至44中任一项的方法，其进一步包括对所述受试者施用曲妥珠单抗和 化疗。
46. -种在除当前治疗之前超过6个月已完成的辅助或新辅助疗法外未接受过针对转 移性疾病的在前化疗的人患者中治疗HER2阳性不可切除或转移性的胃或胃食管连接部腺 癌的方法，其包括对所述患者以改善无进展存活（PFS)和/或总体存活（0S)的量施用帕妥 珠单抗、曲妥珠单抗、顺钼、和卡培他滨或氟尿嘧啶（5-FU)，其中所述患者具有0-1的东部 肿瘤学协作组表现状况尺度（ECOG PS)。
47. -种改善具有HER2阳性不可切除或转移性的胃或胃食管连接部腺癌的人患者中 的无进展存活（PFS)的方法，其包括与曲妥珠单抗和化疗组合对所述患者施用帕妥珠单 抗。
48. -种在患者中治疗HER2阳性乳腺癌的方法，其包括对所述患者施用帕妥珠单抗、 曲妥珠单抗和长春瑞滨（vinorelbine)。
49. 权利要求48的方法，其中对所述患者共施用来自单个静脉内袋的帕妥珠单抗和曲 妥珠单抗。
50. 权利要求48或权利要求49的方法，其中所述乳腺癌是转移性或局部晚期的。
51. 权利要求48至50中任一项的方法，其中所述患者先前未接受过转移性背景中的系 统性非激素抗癌疗法。
52. -种在患者中治疗HER2阳性乳腺癌的方法，其包括对所述患者施用帕妥珠单抗、 曲妥珠单抗和芳香酶抑制剂。
53. 权利要求52的方法，其中所述芳香酶抑制剂是阿那曲唑（anastrazole)或来曲唑 (letrozole)〇
54. 权利要求52或权利要求53的方法，其中所述乳腺癌是激素受体阳性的晚期乳腺 癌。
55. 权利要求54的方法，其中所述激素受体是雌激素受体（ER)和/或孕酮受体（PgR)。
56. 权利要求52至55中任一项的方法，其中所述患者先前未接受过转移性背景中的系 统性非激素抗癌疗法。
57. 权利要求52至56中任一项的方法，其中所述患者接受诱导化疗。
58. 权利要求57的方法，其中所述诱导化疗包含紫杉烷。
59. 权利要求17或权利要求18的方法，其中所述包装插页进一步包含实施例4中的警 告框。
60. -种治疗癌症患者的方法,其包括对所述患者施用起始剂量为840mg的帕妥珠单 抗，继之以其后每3周剂量为420mg的帕妥珠单抗，并进一步包括如果连续两剂420mg之间 的时间为6周或更长的话，再施用840mg剂量的帕妥珠单抗。
61. 权利要求60的方法，其进一步包括在再施用840mg剂量之后每3周施用420mg的 帕妥珠单抗。
62. 权利要求60或权利要求61的方法，其中所述癌症患者具有HER2阳性乳腺癌。
63. 权利要求1至13中任一项的方法，其将死亡风险相对于用曲妥珠单抗和化疗治疗 的患者降低约34%或更多。
64. 权利要求17或权利要求18的方法，其中所述包装插页进一步提供实施例9或表 14中的总体存活（0S)功效数据。
65. -种在患者中治疗HER2阳性转移性或局部再发的乳腺癌的方法，其包括对所述患 者施用帕妥珠单抗、曲妥珠单抗和类紫杉烷（taxoid)，其中所述患者先前已用曲妥珠单抗 和/或拉帕替尼（lapatinib)作为辅助或新辅助疗法治疗过。
66. 权利要求65的方法，其中所述类紫杉烧是多西他赛、帕利他赛（Paclitaxel)或 nab-帕利他赛。
67. 权利要求65的方法，其中所述类紫杉烧是帕利他赛或nab-帕利他赛。
68. 权利要求65至67中任一项的方法，其中所述患者先前已用曲妥珠单抗作为新辅助 疗法治疗过。
69. -种在患者中治疗低HER3卵巢癌、原发性腹膜癌或输卵管癌的方法，其包括对所 述患者施用帕妥珠单抗和化疗，其中所述低HER3癌症以等于或低于约2. 81的浓度比率表 达HER3 mRNA，如通过聚合酶链式反应（PCR)评估的。
70. 权利要求69的方法，其中所述化疗包含吉西他滨（gemcitabine)、卡钼、帕利他赛、 多西他赛、托泊替康（topotecan)、或PEG化脂质体多柔比星（doxorubicin) (PLD)。
71. 权利要求70的方法，其中所述化疗包含帕利他赛或托泊替康。
72. 权利要求69至71中任一项的方法，其中所述癌症是钼抗性或钼不应性的上皮卵巢 癌。
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