口腔内细菌的共凝集抑制剂的制作方法
【专利摘要】为了牙周病的预防以及口臭的预防和减少，抑制F.nucleatum和P.intermedia的增殖有重大意义。此外，由于已知这些菌种产生共凝集，因而可以期待通过抑制该共凝集，高效地预防以及减少来源于这些菌种的牙周病以及口臭。其中，由于这些菌种存在于口腔内，要求通过对人体无害的方法进行共凝集的抑制。如果采用以含有乳铁蛋白为特征的F.nucleatum和P.intermedia的共凝集抑制剂，可无害地抑制这些菌种的共凝集。
【专利说明】口腔内细菌的共凝集抑制剂
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种口腔内细菌的共凝集抑制剂。
【背景技术】
[0002]舌苔是口臭的主要产生部位。近年，对于人类，口臭程度高的受试者的舌苔中的总菌数正在增加，作为增加的菌的种类，不只是舌苔局部菌，还检出了属于牙周病原菌的菌种(非专利文献1、2)。此外，即使在没有感染牙周病的受试者的舌苔上，由于口腔清洁的停止，牙周病原菌的比例增加的报告也得到了确认(非专利文献3)。具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum,后称 F.nucleatum)和中间普雷沃菌(Prevotellaintermedia,后称P.1ntermedia)都是牙周病原菌，也是产生作为口臭的原因物质的挥发性硫黄化合物的菌种(非专利文献4、5)。两菌种被报告产生共凝集(非专利文献6)，确认舌苔上的菌数和口气中的挥发性硫黄化合物浓度之间有显著的相关性(参考非专利文献7)。
[0003]现有技术文献
[0004]专利文献
[0005]专利文献1:日本专利特开平3 - 215500号公报
[0006]非专利文献
[0007]非专利文献1:Tyrrell, K.L.，Citron, D.M.，Warren, Y.A.，Nachnani, S.和Goldstein, E.J.,在口腔异味的受试者的舌背培养厌氧菌(Anaerobic bacteriacultured from the tongue dorsum of subjects with oral malodor),《厌氧生物(Anaerobe)》，5，243-246 (2003).[0008]非专利文献2:Riggio, Μ.P.，Lennon, A.，Rolph, H.J.，Hodge, P.J.，Donaldson, A.，Maxwell, A.J.和Bagg，J.,受试者舌背有无口臭细菌的分子鉴定(Molecular identification of bacteria on the tongue dorsum of subjects with andwithout halitosis),《口腔疾病(Oral diseases)》，3，251-258 (2008).[0009]非专利文献3:Faveri, Μ.，Feres, Μ.，Shibli, J.A.，Hayacibara, R.F., Hayacibara, Μ.M.和de Figueiredo, L.C.,菌斑堆积后的舌背部的微生物:一项对人类的实验石开究(Microbiota of the dorsum of the tongue after plaque accumulation:anexperimental study in humans),〈〈牙周病杂志(Journal of periodontology)〉〉，9, 1539-1546(2006).[0010]非专利文献4:Krespi, Y.P., Shrime, M.G.和Kacker, A., 口腔异味和挥发性含硫化合物生产菌之间的关系(The relationship between oral malodor and volatile sulfurcompound-producing bacteria),《头颈外科-耳鼻咽喉(Otolaryngology-Head and NeckSurgery)))，135，671-676 (2006).[0011]非专利文献5:Persson, S., Edlund, M.B., Claesson, R.和 Car Is son, J.，口腔内细菌的硫化氢和甲硫醇的形成(The formation of hydrogen sulfide and methylmercaptan by oral bacteria),《口腔微生物学和免疫学(Oral microbiology andimmunology)》，5,195-201(1990).[0012]非专利文献6:Shen, S.，Samaranayake, L.P.和Yip，H.K.，根面频齿损害菌群的共凝集概况(Coaggregation profiles of the microflora from root surface carieslesions),《口腔生物学档案(Archives of oral biology))), I, 23-32 (2005).[0013]非专利文献7:藤城由希子，品田佳世子，竹内晋，大城晓子，财津崇，大贯茉莉，植野正之，平山知子，数野恵子，森屿清二，山本高司，川口阳子，口呼吸中的硫化氢以及甲硫醇浓度与口腔内细菌的关联(口呼中O硫化水素t/Y>力7°夕 > 濃度i 口腔内細菌i O関連(二。H )，《口腔卫生学会杂志(口腔衛生学会雑誌)》，59，387 (2009).[0014]非专利文献8:Ford, J.E.，Law, B.A.，Marshall, V.M.和 Reiter, B.,人乳的热处理对某些保护性成分的影响(Influence of the heat treatment of human milk on some of itsprotective constituents),《儿科杂志(The Journal of pediatrics))), I, 29-35 (1977).
【发明内容】
[0015]发明所要解决的技术问题
[0016]为了牙周病的预防以及口臭的预防和减少，抑制F.nucleatum和P.1ntermedia的增殖有重大意义。此外，由于已知这些菌种产生共凝集，因而可以期待通过抑制该共凝集，高效地预防以及减少来源于这些菌种的牙周病以及口臭。其中，由于这些菌种存在于口腔内，要求通过对人体无害的方法进行共凝集的抑制。
[0017]解决技术问题所采用的技术方案
[0018]针对上述问题，发明人深入研究，结果发现乳铁蛋白对F.nucleatum和P.1ntermedia的共凝集有抑制作用，由此完成了本发明。
[0019]即，本发明涉及 一种以含有乳铁蛋白为特征的F.nucleatum和P.1ntermedia的共凝集抑制剂。
[0020]发明的效果
[0021]如果采用本发明，通过抑制F.nucleatum和P.1ntermedia的共凝集,能够抑制口腔内的这些菌种的增殖，能够高效地预防以及减少牙周病和口臭。此外，由于乳铁蛋白是一直以来在体内摄取的物质，预想在口腔内摄取也对人体无害。
【专利附图】
【附图说明】
[0022]图1是表示通过乳铁蛋白结构的稳定性是否形成共凝集块的实验结果。
【具体实施方式】
[0023]本发明的F.nucleatum和P.1ntermedia的共凝集抑制剂的特征在于,作为有效成分含有乳铁蛋白。
[0024]共凝集抑制剂含有乳铁蛋白的含量优选0.06重量％以上，进一步优选0.09重量％以上，最优选0.6重量％以上。此外，优选乳铁蛋白不由于热等变性。
[0025]本发明的共凝集抑制剂可掺合在洁齿剂、漱口水、吸入剂以及含片剂等口腔组合物，口香糖、糖果、压片糖、软糖、巧克力、饼干以及零食等点心，冰激淋、雪糕以及棒冰等冷饮，饮料、面包、烤饼、乳制品、火腿以及香肠等畜肉制品类，或者鱼糕以及圆筒状鱼糕等魚肉制品，副食品类，布丁，汤或者果酱等饮食品中使用。
[0026]为口腔组合物时，可以含有药理学上可接受的一种或两种以上的载体，还可以根据需要含有其它有效成分。除此之外，还可以含有赋形剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、分散剂、表面活性剂、增塑剂、混悬剂、乳化剂、稀释剂、缓冲剂、抗氧化剂、细菌抑制剂等。
[0027]此外，饮食品也可以含有食品制造上可接受的基材、载体、赋形剂、添加剂、增量剂、着色剂、香料等。
[0028]另外，乳铁蛋白以外的成分也不受上述限定，本发明可以任意地含有公知的任何成分。
[0029]本发明的含有乳铁蛋白的口腔用组合物，在各自【技术领域】中可根据公知的任意的方法制造。其制造过程中，可以通过公知的任何方法添加乳铁蛋白。
[0030]本发明的含有乳铁蛋白的共凝集抑制剂不仅可以对人使用，也可以对人以外的动物(以下简称为非人动物)使用。作为非人动物，可例举哺乳类、爬行类、两栖类、鱼类等人以外的动物。
[0031]此外，由于本发明使用一直以来作为食品添加剂使用的乳铁蛋白，预想在包括口腔内的体内进行摄取 的安全性没有问题。
[0032]实施例
[0033]以下记载了本发明的实施例，但以下的实施例的记载并不对本发明有任何限定。
[0034]实施例1
[0035]试样
[0036]乳铁蛋白使用维赫尔公司(DMV社)制的乳铁蛋白60%制剂，或者森永乳业株式会社(森永乳業株式会社)制的乳铁蛋白90%制剂。
[0037]试骀菌株
[0038]作为牙周病原菌使用F.nucleatum JCM12990 株，P.1ntermedia ATCC25611 株。
[0039]:!--养基
[0040]使用添加了酵母提取物(Yeast extract,碧迪公司(Becton, Dickinson andCompany):以下称 BD)3.0g/L,氯化血红素(Hemin,西格玛)5.0mg/L,甲萘醌(Menadione,西格玛)0.5mg/L的胰酪胨大豆肉汤(Trypticase soy broth, BD)培养基(后称TSB培养基)，在37°C的厌氧条件下(10% CO2,10% H2,80% N2)培养。
[0041]菌的回收
[0042]在放入了 50mL的TSB培养基的带螺纹试验管(IWAKI25X 200mm，61ml容量)内，分别将F.nucleatum、P.1ntermedia培养到指数增生期后期为止。对于各菌株，将培养液放入离心管(IWAKI29X 115mm, 50ml容量)，离心分离(7000rpm, 10min,4°C )集中菌后，舍弃上清，加入表1的组成的缓冲液，进行悬池、清洗。其后，离心分离(7000rpm, IOmin,4°C ),进行I次悬池、清洗，进一步进行离心分离(7000rpm, IOmin,4°C )。离心后，舍弃上清，按照缓冲液中悬浊时的0D660值为0.5的条件配制缓冲液。吸光度测定使用分光光度计(日立(HITACHI)U-3900H)。配制后冷藏保存，在I星期以内用于测定。
[0043][表 I][0044]
【权利要求】
1.一种具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum)和中间普雷沃菌(Prevotellaintermedia)的共凝集抑制剂,其特征在于,含有乳铁蛋白。
2.如权利要求1所述的共凝集抑制剂，其特征在于，乳铁蛋白的含量在0.06重量％以上。
3.如权利要求1或2所述的共凝集抑制剂，其特征在于，乳铁蛋白不变性。
4.一种口腔组合物，其特征在于，含有权利要求1~3中任一项所述的共凝集抑制剂。
5.一种食品，其特 征在于，含有权利要求1~3中任一项所述的共凝集抑制剂。
【文档编号】A61K38/16GK104023738SQ201280064409
【公开日】2014年9月3日 申请日期:2012年12月21日 优先权日:2011年12月26日
【发明者】儿玉悠史, 成濑敦 申请人:罗蒂株式会社