专利名称：一种协同提高抗细菌性腹泻作用的葎草与生姜药对制剂的制作方法
技术领域：
本发明所属医药产品研究开发技术领域。本发明涉及一种协同提高抗细菌性腹泻作用的潷草一生姜药对制剂。
背景技术：
_草为桑科植物_草Humulus scandens (Lour.) Merr的全草,一年生或多年生草本植物。别名很多，主要有拉拉秧、拉拉藤、锯子草、五爪龙、降龙草等，始载于《唐本草》。潷草生命力顽强，资源丰富，广泛分布于全国(除青海、新疆以外)各地区，日本、朝鲜、北美洲等也有分布。具有清热解毒、利尿消肿等功效，可用于治疗肺结核潮热、胃肠炎、痢疾、淋证、痔疮、小便不利、皮肤瘙痒等证.据报道潷草全草含青兰苷、天门冬素、挥发油、鞣质及树脂；潷草叶含木犀草素葡萄糖苷、大波斯菊苷、牡荆素等黄酮类成分。在研究草提取物的抗菌作用时发现，其水提取液对革兰阳性菌具有较强的抗菌活性，并证实抗菌作用与潷草中所含的黄酮类成分有关。据报道不同月份的潷草中黄酮的含量不同，本实验采用了黄酮含量最高的9月份的潷草。生姜(Zingiberofficinale Roscoe)又名姜，属姜科(Zingiberaceae)多年生草本宿根植物，其根茎肥厚，具有芳香和辛辣味，是最常用的香辛料之一。亚洲、非洲、拉丁美洲等地均有种植。我国是世界上最大的生姜出口国之一，生姜在我国南方广东、浙江栽培较为普遍，其次是江西、安徽、四川、云南、湖南、湖北等；在北方则以山东为主要产地，还有河南、陕西等。生姜的化学组分很复杂，主要有挥发油、姜辣素、姜油酮、姜烯酚、姜醇、水茴香烯、龙脑和桉精油和二苯基庚烷及黄酮类化合物等。本实验通过实验研究了潷草、生姜以及潷草-生姜药对对一些弓I起细菌性腹泻的细菌的抑菌的活性研究，并确定了潷草、生姜以及潷草-生姜药对抑菌的最低抑菌浓度，潷草-生姜药对抑菌 的最佳浓度配比等。为生活中的细菌性腹泻的治疗提供了科学依据。
发明内容
1、一种协同提高抗细菌性腹泻作用的潷草-生姜药对制剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤:(I)精确称取干燥且经粉碎的潷草和生姜各10g，分别加入280ml72%的乙醇，于800C下回流提取l_2h，然后分别用8层纱布过滤，滤渣再分别加入280ml72%的乙醇回流提取l_2h，分别过滤，得滤液；(2)将(I)中的滤液分别合并，分别回收乙醇，分别浓缩至10mL，再分别按照潷草:生姜为1:1的比例配比潷草-生姜药对的浓缩液，置4°C冰箱保存，备用。2、一种潷草-生姜药对制剂用于制备具有协同提高抗细菌性腹泻作用的药物制剂。
具体实施方式
本发明所述的一种协同提高抗细菌性腹泻作用的潷草-生姜药对制剂包括以下实施例，下面的实施例可进一步说明本发明，但不以任何方式限制本发明。实施例1:1、一种协同提高抗细菌性腹泻作用的潷草-生姜药对制剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤:(1)精确称取干燥且经粉碎的潷草和生姜各10g，分别加入280ml72%的乙醇，于80°C下回流提取lh，然后分别用8层纱布过滤，滤渣再分别加入280ml72%的乙醇回流提取lh，分别过滤，得滤液；(2)将(I)中的滤液分别合并，分别回收乙醇，分别浓缩至10mL，再分别按照潷草:生姜为1:1的比例配比潷草-生姜药对的浓缩液，置4°c冰箱保存，备用。2、一种潷草-生姜药对制剂用于制备具有协同提高抗细菌性腹泻作用的药物制剂。实施例2:1、一种协同提高抗细菌性腹泻作用的潷草-生姜药对制剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤:(1)精确称取干燥且经粉碎的潷草和生姜各10g，分别加入280ml72%的乙醇，于80°C下回流提取2h，然后分别用8层纱布过滤，滤渣再分别加入280ml72%的乙醇回流提取2h，分别过滤，得滤液；(2)将(I)中的滤液分别合并，分别回收乙醇，分别浓缩至10mL，再分别按照潷草:生姜为1:1的比例配比潷草-生姜药对的浓缩液，置4°c冰箱保存，备用。2、一种潷草-生姜药对制剂用于制备具有协同提高抗细菌性腹泻作用的药物制剂。药理试验一种协同提高抗细菌性腹泻作用的潷草-生姜药对制剂的试验I实验材料及仪器1.1实验材料潷草采自山东大学(威海)校园，经山东大学韩晓弟副教授鉴定为桑科潷草属_草；生姜买自威海市利群购物广场；大肠埃希氏菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus Rosenbach)均由山东大学(威海)海洋学院提供；小白鼠(18-22g，购自绿叶制药厂)；乙醇、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、氯化钠等均为分析纯。1.2实验仪器电热鼓风干燥箱(杭州汇尔仪器设备有限公司)；分析天平((上海楚柏实验室设备有限公司)；SWB5200型超声清洗机(上海必能信超声有限公司)；RE-52AA旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)，DK-8AD电热恒温水槽(上海精密仪器仪表有限公司)，高压蒸汽灭菌锅(上海博迅实业有限公司)，超净工作台(上海精密仪器仪表有限公司)，电热恒温培养箱(上海精密仪器仪表有限公司)。2实验方法2.1供试样品液的制备及阳性对照止泻药精确称取干燥且经粉碎的潷草和生姜各10g，分别加入280ml72%的乙醇，于80°C下回流提取lh，然后分别用8层纱布过滤，滤渣再分别加入280ml72%的乙醇回流提取lh，分别过滤，得滤液；将滤液分别合并，分别回收乙醇，分别浓缩至IOmL,再分别按照潷草:生姜为3: 7、4: 6、1: 1、6: 4、7: 3的比例配比潷草-生姜药对的浓缩液，置4°C冰箱保存，备用。阳性对照止泻药为市售止泻药止痢宁。2.2培养基的制备牛肉膏蛋白胨培养基:牛肉膏3g，蛋内胨10g，氯化钠5g，蒸馏水lOOOmL，琼脂20g，水 IOOOmL0 PH:7.0 7.2。2.3供菌悬液的制备 将供试菌种接种于相应的试管斜面培养基上。37°C恒温箱中培养18 24h进行活化2-3代。用接种环分别挑取少量活化后的菌体于装有无菌生理盐水的试管内。震荡均匀，制成菌悬液。调整菌悬液的浓度，用平板菌落计数法测定其菌液浓度，并用生理盐水将菌液稀释至IO5 106cfu/ml。2.4抑菌圈的测定中草药提取物液抑菌圈的测定采用滤纸片法。在超净工作台上按无菌操作的方式往无菌培养皿中倒入适量培养基，待培养基凝固后，用无菌移液管吸取0.1ml菌悬液于相应的营养平板上，用无菌涂布棒将菌悬液涂布均匀。然后按照无菌操作方式取出各溶液浸泡后的滤纸片(直径6_)，尽量使乙醇挥发完全。按培养皿的标号，将滤纸片放入培养基表面相应位置，每个培养皿等距放3个滤纸片，每个浓度做3组平行。并用无菌生理盐水做空白对照。放入恒温培养箱37°C下倒置培养24h。24h后取出测出滤纸片抑菌圈直径大小，t匕较抑菌效果。2.5小鼠腹泻实验选用健康小鼠60只，随机分组，每组10只；设空白组，模型组，潷草提取液组、生姜提取液组、潷草生姜药对提取液组，阳性对照组；模型组、潷草提取液组、生姜提取液组、潷草生姜药对提取液组、阳性对照组均腹腔注射大肠杆菌菌悬液(0.3ml/10g)造成严重腹泻模型，空白组腹腔注射等量生理盐水。3h后，空白组和模型组小鼠灌胃生理盐水(0.lml/10g);潷草提取液组、生姜提取液组、潷草-生姜药对提取液组，小鼠分别灌胃潷草提取液、生姜提取液、潷草-生姜药对提取液，阳性对照组灌胃市售止泻药止痢宁水悬液。观察腹腔注射大肠杆菌注射液3h内小鼠腹泻情况及给药后3h内模型组和治疗组小鼠腹泻情况(包括稀便次数、总便次数、稀便级)，并计算出腹泻指数。3结果及分析3.1抑菌效力的测定采用滤纸片扩散法研究潷草、生姜、潷草-生姜药对提取液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抑制效果，以抑菌圈直径的大小为指标。表I潷草提取液抑菌圈平均直径(mm)
权利要求
1.一种协同提高抗细菌性腹泻作用的潷草-生姜药对制剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤: (1)精确称取干燥且经粉碎的潷草和生姜各10g，分别加入280ml72%的乙醇，于80°C下回流提取l_2h，然后分别用8层纱布过滤，滤渣再分别加入280ml72%的乙醇回流提取l_2h，分别过滤，得滤液； (2)将(I)中的滤液分别合并，分别回收乙醇，分别浓缩至10mL，再分别按照潷草:生姜为1:1的比例配比潷草-生姜药对的浓缩液，置4°C冰箱保存，备用。
2.如权利要求1所述方法制备的一种潷草-生姜药对制剂的用途，其特征在于用于制备具有协同提高 抗细菌性腹泻作用的药物制剂。
全文摘要
本发明所属医药产品研究开发技术领域。本发明涉及一种协同提高抗细菌性腹泻作用的葎草-生姜药对制剂。精确称取干燥且经粉碎的葎草和生姜各10g，分别加入280ml72％的乙醇，于80℃下回流提取1-2h，然后分别用8层纱布过滤，滤渣再分别加入280ml72％的乙醇回流提取1-2h，分别过滤，得滤液；将滤液分别合并，分别回收乙醇，分别浓缩至10mL，再分别按照葎草∶生姜为1∶1的比例配比葎草-生姜药对的浓缩液，置4℃冰箱保存，备用。该制剂具有协同提高抗细菌性腹泻作用。
文档编号A61P1/12GK103100070SQ20131001948
公开日2013年5月15日 申请日期2013年1月4日 优先权日2013年1月4日
发明者张崇禧, 陆波, 张成城, 李玲玉, 侯欣池 申请人:山东大学(威海)