专利名称:钼在制备增强雄鼠生殖能力的药物中的应用的制作方法
技术领域:
本发明涉及医药技术领域,具体地说是钥在制备增强雄鼠生殖能力的药物中的应用。
背景技术:
钥为人体及动植物必须的微量元素。为银白色金属,硬而坚韧。人体各种组织都含钥,成人体内总量为9mg,肝、肾中含量最高。钥在机体的主要功能是参与硫、铁、铜之间的相互反应。钥是黄嘌呤氧化酶、醛氧化酶和亚硫酸氧化酶发挥生物活力的必需因子,对机体氧化还原过程中的电子传递、嘌呤物质与含硫氨基酸的代谢具有一定的影响。在这三种酶中,钥以喋呤由来性辅助因子的形式存在。钥还能抑制小肠对铁、铜的吸收,其机制可能是钥可竞争性抑制小肠粘膜刷状缘上的受体,或形成不易被吸收的铜-钥复合物、硫-钥复合物或硫钥酸铜(Cu-MoS)并使之不能与血浆铜蓝蛋白等含铜蛋白结合。钥为多种酶的组成部分,钥的缺乏会导致龋齿、肾结石、克山病、大骨节病、食道癌等疾病。钥还被用于治疗长期依赖静脉高营养的患者和奶牛饲料中,但有关低钥增强雄鼠生殖能力的研究还未见相关文献报道。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供了钥的新用途,即钥在制备增强雄鼠生殖能力的药物中的应用。本发明为解决上述技术问题所采用的技术方案是:钥在制备增强雄鼠生殖能力的药物中的应用,所述钥每天的摄入量为0.056mg"0.135mgo本发明的有益效果是:本发明提供的一定量的钥可以有效地用于增强雄鼠生殖能力中,对于雄鼠生殖能力的增强效果显著,无明显不良反应。
图1为精液抹片示意 图2为饮水染钥后所致小鼠精子畸形照片;
图中标记:A、尾部卷曲;B、正常形态;C、无头;D、双主段;E、短主段;F、无主段;G、小头;H、大头;1、连接部崎形;J、头部崎形。图3为不同浓度钥对精子参数的影响。
具体实施例方式钥在制备增强雄鼠生殖能力的药物中的应用,所述钥每天的摄入量为
0.056mg 0.135mg0本发明中,钥制成的药物中钥的浓度为12.5 30mg/L,每只小鼠每天饮用4.5ml含有钥的药物。
实验例
1.选用性成熟ICR雄鼠(8周龄)60只,体重25-30 g。饲养环境温度25±2°C。小鼠自由采食,自由饮用不同钥(Mo)含量的蒸馏水,每天14 h光照,10 h黑暗条件。2.将小鼠随机分为六组,每组10只,分别让其自由饮用钥浓度为0、12.5、25、50、100、200 mg/L的蒸馏水4.5ml,攻毒时间为2周。3.2周之后,先给小鼠称重,脊椎脱日法致死小鼠后,立即剪开腹腔,分离并摘取双侧附睾,迅速去除多余的脂肪组织,在电子天平上称取附睾的质量,用以计算附睾系数(附睾系数=附睾重量/体重)。然后,把附睾放到含37°C预热的生理盐水小平皿中,用眼科剪在附睾尾剪口,用移液器轻轻吹打1-2次,在37°C水浴锅上孵育,30min后,测定精子参数(包括精子活力、精子密度和精子畸形率)。4.精子活力和密度测定:将擦干净的细胞计数板放于显微镜的载物台上,盖上盖玻片,预温;取20uL稀释好的精液滴在计数板盖玻片的边缘使精液自动渗进计数室,25-30°C的环境中,在10X20倍镜下,计数左上角至右下角五个中方格的总精子数,以精子的头部为准,依“数上不数下,数左不数右”的原则进行计数位于格线上的精子,先求出五个大方格中非直线运动的精子数,然后人为致死精子,计数五个大方格(80个小方格)中总精子数,根据公式,即可得出精子活力和每毫升的精子数。精子活力=(总精子数-非直线前进运动精子数)/总精子数 每毫升所含精子数=(X/80) X 400 X稀释倍数X10000
为了减少误差,必须进行两次计数,如果前后两次误差大于10%,应作第三次检查。最后在三次检查中取两次误差不超过10%,求出平均数,即为所确定的精子数。5.精子畸形率测定:取20uL精子悬液,滴于清洁载玻片上,右手拿一载玻片或盖玻片,使其与左手拿的载玻 片呈向右的45度角,并使其接触面在精液滴的左侧。将载玻片向右拉至精液刚好进入两载玻片形成的角缝中,然后平稳地推至左边(不得再向回拉),做成精液抹片(见图1)。必须注意精液抹片不要太厚,同时要防止用力过大而造成人为的畸形精子数增多。抹片后,使其自然风干。晾干后用甲醇固定5min,用1%伊红染色3-5min,水洗,待干后镜检。载玻片放在400 X显微镜下进行观察,随机计数若干个视野200个左右的精子。然后按下列公式计算出畸形精子的百分数:
精子畸形率=(非正常精子数/计数的总精子数)X100%
结果
不同浓度钥对精子参数的影响见图3 ;
注:图3中*表示与O mg/L组相比在P < 0.05水平差异显著;**表示与O mg/L组相比在P〈 0.01水平差异显者。由图3可得,当钥的浓度为25mg/L时,附睾系数、精子活力和密度显著高于Omg/LMo浓度组(P < 0.01),精子畸形率显著低于Omg/L Mo浓度(P < 0.01),精子畸形的图片见图2。钥的浓度彡100mg/L时,与Omg/L Mo组相比,附睾系数、精子活力和密度显著降低(P < 0.01),精子畸形率显著升高(P < 0.01)。钥浓度为12.5和50 mg/L时,生殖参数没有发生显著变化。这表明25mg/L Mo对雄性小鼠生殖能力有增加作用,但100mg/L Mo对雄性小鼠生殖有明显的毒性作用。
权利要求
1.钥在制备增强雄鼠生殖 能力的药物中的应用,所述钥每天的摄入量为0.056mg .0.135mg
全文摘要
钼在制备增强雄鼠生殖能力的药物中的应用,所述钼每天的摄入量为0.056mg~0.135mg。本发明提供的一定量的钼可以有效地用于增强雄鼠生殖能力中,对于雄鼠生殖能力的增强效果显著,无明显不良反应。
文档编号A61K33/24GK103099815SQ20131002467
公开日2013年5月15日 申请日期2013年1月23日 优先权日2013年1月23日
发明者刘凤军, 张玉玲, 翟小伟, 陈晓丽, 王玉琴, 靳丽军, 麻雪刚, 杨自军 申请人:河南科技大学