专利名称：治疗心脑血管疾病的银杏内酯组合物及残留物测定方法
技术领域：
本发明涉及植物提取领域，具体涉及一种治疗心脑血管疾病的银杏内酯组合物中残留物的测定方法。
背景技术：
自上世纪60年代开始，许多国家采用现代分离技术对银杏叶的化学成分进行研究，经药理实验和临床验证，发现银杏叶的多方面生物活性与其所含特定化学成分有关。德国Dr.Willar Schwabe首次注册了银杏叶的 一种简单提取物,于1972年申请了专利(WSchwabe DE176708和DE2117429)，定名为EGb761，用于治疗心脑血管疾病和神经系统疾病，具有显著疗效，且无毒副作用，银杏内酯类化合物(ginkgolids)具有强血小板活化因子(PAF)拮抗作用。银杏制剂被列为治疗药物的国家有德国、法国和中国，其他国家均用为保健食品或非处方用药，美国开发出的银杏保健食品已经获得FDA批准。银杏内酯属于萜类化合物，称为萜类内酯，由倍半萜内酯和二萜内酯组成，是银杏叶中一类重要的活性成分。白果内酯(bilobalide)属倍半職内酯，由R.T.Major于1967年和K.Weinges于1969年分离得到，目前从银杏叶中发现的唯一的一个倍半職内酯化合物，银杏内酯 A、B、C、M、J(ginkgolidA、B、C、M、J)为二萜内酯化合物，于 1932 年由 S.Furukawa首次从银杏叶中分离出来，1967年才由K.Nakanish>M.Maruyama和K.0kabe等人进一步分离和确定其化学结构。从结构上看，白果内酯类分子骨架由15个碳原子组成，具有互相稠合在一起的4个五元环，其中有I个五元碳环，3个五元内酯碳环，五元环上连有I个天然产物中罕见的叔丁基。白果内酯有很强的生物活性，具有促进神经生长的作用，可防止脑细胞线粒体氧化应激引起的功能改变，改善老年记忆功能，防止老年痴呆的发生，以及防止脑、脊髓神经脱髓鞘作用，其神经营养、神经保护作用比银杏内酯强。银杏内酯B有抗炎、抗休克、保护心脑血管、治疗急性胰腺炎等作用。而银杏内酯类化合物的分子骨架由20个碳原子组成，具有6个五元环，其中有2个五元碳环，3个五元内酯环，I个四氢呋喃环，两个五元碳环以螺环的形式连接在一起，其余的环以稠合的方式连接，形成一个刚性茏状的特殊立体化学结构。银杏内酯分子中均具有天然产物中罕见的叔丁基。银杏内酯包括二萜类和倍半萜类内酯，二萜类内酯主要有银杏内酯A、B、C、J、M等，半萜类内酯有白果内酯。自20世纪70年代初发现了PAF后，药理学家对银杏内酯进行了研究，明确银杏萜内酯是强血小板活化因子拮抗剂，免疫系统、中枢神经系统、缺血损伤有保护作用，并有抗休克、抗过敏及抗炎作用。银杏内酯A、B、C、M、J结构差别在于含有的羟基数目和羟基连接的位置不同。银杏内酯均为强血小板活化因子拮抗剂，是银杏叶中特殊生理活性的关键成分。
权利要求
1.治疗心脑血管疾病的银杏内脂组合物中残留物的测定方法，其特征在于: (1)乙醇、乙酸乙酯和正己烷的测定: 供试品溶液的制备:取银杏内酯约0.lg，精密称定，置顶空瓶中，精密加入N，N-二甲基甲酰胺5ml使溶解，密封，作为供试品溶液； 对照品溶液的制备:取乙醇、乙酸乙酯和正己烷适量，精密称定，用N，N-二甲基甲酰胺定量稀释制成每Iml中各约含30 μ g的溶液，精密量取5ml，置顶空瓶中，密封，作为对照品溶液； 测定法:以6%氰丙基苯基-94% 二甲基聚硅氧烷为固定液，起始温度为50°C，维持3分钟，以每分钟40°C的速率升温至160°C，维持3分钟；进样口温度200°C ;检测器温度为2500C ;顶空瓶平衡温度为80°C，平衡时间为30分钟，取对照品溶液顶空进样，各成分峰之间的分离度应符合要求；再取供试品溶液与对照品溶液分别顶空进样，记录色谱图，按外标法以峰面积计算； (2)树脂残留量测定 对照品溶液的制备:取N，N-二甲基乙酰胺适量，精密称定，用水制成每Iml约含0.1mg的溶液，摇匀，作为内标溶液；精密称取己内酰胺适量，加内标溶液制成每Iml约含己内酰胺37.5 μ g的溶液，作为对照品溶液； 供试品溶液的制备:取银杏内酯约2.5g，精密称定，置锥形瓶中，加正己烷25ml，回流2小时，取出，放冷，滤过，用少量正己烷洗涤，合并滤液与洗涤液，于60°C水浴蒸干，残渣加内标溶液Iml使溶解，作为供试 品溶液； 测定法:以PEG-20M聚乙二醇为固定液；起始温度为100°C，维持2分钟，以每分钟40°C的速率升温至160°C，维持3分钟，再以40°C的速率升温至220°C，维持7分钟；进样口温度为240°C ;检测器温度为260°C，精密量取对照品溶液与供试品溶液各I μ 1，注入气相色谱仪，记录色谱图，按内标法以峰面积计算，供试品溶液中己内酰胺峰面积与内标峰面积的比值小于对照品溶液中己内酰胺峰面积与内标峰面积的比值，己内酰胺未检出。
2.根据权利要求1所述的银杏内脂组合物中残留物的测定方法，其特征在于:测定的乙醇和乙酸乙酯均小于0.5%，正己烷小于0.029%。
全文摘要
本发明涉及植物提取领域，具体涉及一种治疗心脑血管疾病的银杏内酯组合物中残留物的测定方法。本发明提取分离方法可得到组分固定的银杏内酯，经测定残留乙醇和乙酸乙酯均小于0.5％，正己烷小于0.029％，树脂残留量测定，己内酰胺未检出。
文档编号A61K127/00GK103239486SQ20131017278
公开日2013年8月14日 申请日期2012年4月23日 优先权日2012年4月23日
发明者孙毅, 朱永红, 童正兵, 王婕 申请人:成都百裕科技制药有限公司