一种含有辅酶q10活性多肽的植物油体护肤乳液的制作方法

一种含有辅酶q10活性多肽的植物油体护肤乳液的制作方法
【专利摘要】本发明涉及含有辅酶Q10的植物油体护肤乳液，更具体的说本发明涉及的乳液新配方，包括水相成分，乳化剂为羧乙基纤维素，以红花油体作为基质的油相成分，功效成分为含CoQ10的拟南芥油体，偶合剂PEG600，防腐剂尼泊金甲酯和丙酯，香精为藏红花香精，本发明通过乳化技术，将含有CoQ10的拟南芥油体和红花油体基质均匀的分布在保湿乳液中，通过添加羧乙基纤维素作为乳化剂，能降低界面张力，有利于乳状液的形成及稳定。由于植物油体比表面积相对较大，乳液更容易被皮肤所吸收，可以在皮肤表面形成一层透气保护膜；另外，植物油体作为天然的乳化剂，使CoQ10分配在油体中，使其更容易被皮肤吸收，有效地延缓或抑制皮肤的衰老。
【专利说明】一种含有辅酶Q10活性多肽的植物油体护肤乳液

【技术领域】
[0001] 本发明属于化妆品制造【技术领域】，尤其是涉及一种辅酶QlO活性多肽的植物油体 的护肤乳液。

【背景技术】
[0002] 辅酶 QlO (coenzyme Q，CoQlO)又称泛醌（ubiquinone, UQ，Q)。CoQlO 在呼吸链中 是一种和蛋白质结合不紧密的辅酶，是生物体内广泛存在的脂溶性醌类化合物，在人体呼 吸链中质子移位及电子传递中起重要作用，可作为细胞代谢和细胞呼吸激活剂，还是重要 的抗氧化剂和非特异性免疫增强剂，能抑制线粒体的过氧化，具有促进氧化磷酸化反应，保 护生物膜结构完整性，对免疫有非特异性的增强作用，增加抗体产生，改善T细胞功能。
[0003] CoQlO在很多方面都有广泛的应用，首先CoQlO在医药领域方面的应用包括1、 CoQlO在口腔疾病方面的应用；2、CoQlO在心血管类疾病方面的应用；3、CoQlO在艾滋病方 面的应用；4、CoQlO在糖尿病方面的研究；5、其他方面的应用。近年添加 CoQlO的保健食 品、精华素、乳液及粉底等护肤化妆品迅速走俏市场，作为一种重要的生命营养物质，CoQlO 具有重要功效。UC0QlO具有保护皮肤的功效；CoQlO渗透进入皮肤生长层可以减弱光子的 氧化反应，在生育醇的协助下可以启动特异性的磷酸化酪氨酸激酶，防止DNA的氧化损伤， 抑制紫外光照射下人皮肤成纤维母细胞胶原蛋白酶的表达，保护皮肤免于损伤。2、辅酶QlO 在洗化用品中的应用；辅酶QlO作为一种天然抗氧化剂，可用于清除氧自由基，延缓皮肤衰 老，能有效地深入皮肤，激发细胞活性，改善肤质；具有促进皮肤新陈代谢，修复皮肤皱纹等 方面的功效，可根据化妆品不同功能的需求，调制出各种不同的产品。3、辅酶QlO在口腔 护理用品领域的应用；辅酶QlO能改善微循环，促进组织微循环系统代谢，增强组织细胞活 力，加速细胞更新，利于细胞组织护养、修复；具有强大的的抗氧化能力，预防牙组织细胞的 水肿、膜破裂及死亡，增强牙龈保护能力，预防D -半乳糖所致牙组织衰老退行性病变。
[0004] 由于辅酶QlO在医药、食品添加剂等领域上有极大的使用价值，因而这一产品的 研究及开发引起越来越多人的关注。在工艺方面，近几年来，辅酶QlO的新产品在欧美及日 本等发达国家市场上走红，中国企业也逐渐掌握了生物提取法、半化学合成法以及微生物 发酵提取法等先进技术，因此，在中国加快开发生产这种市场前景极好的产品已成为当务 之急。
[0005] 利用植物生物反应器生产药用蛋白，近年来越来越受到人们的关注，油体蛋白是 油体中主要的膜蛋白。油体蛋白是碱性的疏水蛋白，三个部分组成油体蛋白：亲脂的C端和 N端，和中间疏水区域，它是通过磷脂膜进入到油体内部。N端和C端则镶嵌在油体表面，暴 露在细胞质中。油体蛋白具有表面活性剂，使其不能与油体结合。油体的这种非结合性非常 适合用作乳化剂。乳化剂能降低互不相溶的液体间的界面张力，使之成为乳浊液。油体乳化 剂是从天然油料种子中提取出来的，油体蛋白的结构以及它的特异性，使油体在生物技术 中得到广泛的应用，例如它可以作为乳化剂，携带和固定重组蛋白等等。它还可以应用于 纯化、重折叠和固定重组蛋白，在油体表面，目的蛋白与油体蛋白通常通过两种方式结合， 分别是与油体蛋白融合在油体中表达和通过配体作为亲和标签与油体蛋白连接。本发明是 根据植物油体特性，使辅酶QlO基因连接在油体蛋白基因的N端或C端，构建融合基因，使 目的蛋白在植物油体中特异性表达，利用油体亲脂疏水的特性，将种子粉碎后，经不同提取 液抽提，回收油相，既可将融合蛋白与细胞内的其他组份分开，简化了分离纯化步骤，降低 了纯化成本与生产成本。
[0006] 近年来，生物基因工程技术长足发展并且影响到了生命科学的方方面面，同时也 给美容化妆品行业都带来了全新的发展机遇，化妆品已经从传统的化学美容、植物美容向 生物美容与基因美容发展。例如，传统的皮肤护理仅局限于油膜覆盖与保持水分等物理方 法，而现在美容护肤理念开始转向细胞水平的护理，因此含高亲和力的生物因子物质的化 妆品应运而生。如今，国际上越来越多的医药及生物工程技术专家投身于该研究领域，许多 国家也都瞄准生物化妆品这一巨大市场，开发生物美容产品。将以生物工程技术制得的生 长因子、透明质酸和核酸等应用于化妆品，这一新的研究动态也使人们认识到生物化妆品 将给化妆品品质带来根本性的变化。
[0007] 生物化妆品是指应用生物工程技术及其制品制得的化妆品，其主要成分生物活性 多肽大部分是细胞生长因子，它们在体内含量极微，但生物活性极高，对多种细胞生理功能 和代谢活动发挥生物调节作用，直接或间接地影响多种类型细胞的生长、分裂、分化、增殖 和迁移，在美容护肤、整形外科、烧伤溃疡以及各种皮肤病的伤口修复与愈合中有重要作 用。细胞生长因子经过稳定的结构修饰或特殊的的保护处理后，以一定的有效浓度添加到 化妆品中，可以有效的与皮肤细胞发生作用，促进上皮细胞营养代谢，保护皮肤，预防由于 各种原因导致的皮肤损伤。正常护肤品种添加活性细胞生长因子还可以有效促进皮下胶原 细胞的功能，加速皮肤胶原细胞的生长，使细胞加速分泌胶原，从而达到抗皱及延缓衰老的 作用。


【发明内容】

[0008] 本发明目的在于提供一种含有辅酶QlO活性多肽的护肤品，包括护肤乳液，充分 发挥辅酶QlO蛋白的油体透皮吸收作用。
[0009] 本发明提供的这种护肤产品通过以下技术方案予以实现：一种含有辅酶 QIO(COQIO)活性多肽的护肤乳液，由以下重量份的原料制成：油性原料20% (其中甘油 10 % )，乳化剂10 %，偶合剂3 %，防腐剂0. 25 %，香精2 %，营养添加剂8 %，维生素 C5 %其 余为去离子水。
[0010] 本发明制备一种含有辅酶QIO(COQIO)活性多肽护肤乳液的制备方法，包括以下 步骤进行制备：首先将植物油体提取出来，然后将水加入到油体中，混合均匀；然后逐级加 入甘油和乳化剂羧乙基纤维素，偶合剂PEG600,搅拌均匀，高剪切在1000rpm-30000rpm下 乳化，在均质机中乳化10_20min ;最后，搅拌均匀后再加入防腐剂尼泊金甲酯和尼泊金丙 酯的混合液和营养添加剂含有辅酶QlO活性多肽的植物油体和维生素 C以及藏红花香精， 搅拌均匀后即成本发明品。
[0011] 本发明是利用镶嵌于油体表面的油体蛋白与辅酶QlO的融合表达产物可直接作 为活性成分用于护肤品的开发，简化了生长因子与乳化剂（或保护剂）混合的加工工艺， 降低了生产成本。同时可以保护辅酶QlO蛋白的生物活性，将辅酶QlO活性多肽利用油体 蛋白的特性，通过植物油体包裹，定位在油体表面，通过乳化均质技术，可以使辅酶QlO蛋 白很均匀地分布在护肤乳液中，通过油体的透皮吸收作用，使其容易发挥作用。本发明工艺 简单，功效显著，成本降低，所以本发明的技术方案为优质的技术方案。

【专利附图】

【附图说明】
[0012] 图1油体表达CoQlO基因的载体不意图（油体表达辅酶QlO基因的载体不意图）
[0013] 图2红花油体显微图
[0014] 图3含有CoQlO蛋白的拟南芥油体的直观图（含有辅酶QlO蛋白的拟南芥油体的 直观图）
[0015] 图4含有CoQlO蛋白的拟南芥油体的活性检测（含有辅酶QlO蛋白的的拟南芥油 体的活性检测）
[0016] 图5含有CoQlO植物油体的乳液直观图（含有辅酶QlO护肤乳液的直观图） 具体实施例
[0017] 实施例1辅酶QlO蛋白在植物油体中表达
[0018] 根据植物密码子的偏好性对从GENBANK中找到的辅酶QlOCoQlO的核苷酸序列进 行改造，将植物中含量较少的稀有氨基酸密码子替换成植物偏好的密码子。根据密码子的 简并性消除在本实验中所用到的酶切位点，送去上海生工生物工程有限公司进行人工合成 重组辅酶QlO基因 （SEQ ID NO. 1)。
[0019] 实施例2克隆菜豆种子特异启动子与终止子
[0020] 克隆菜豆启动子和终止子基因，为了从菜豆基因组序列中克隆种子特异启动子 与终止子，利用引物，采用标准的多聚酶链式反应（PCR)，从菜豆基因组DNA中扩增得到 1548bp和1220bp的DNA片段，扩增的片段经限制性内切酶消化，克隆到pUC57克隆载体中， 保存备用。经测序，其喊基序列如序列表SEQ ID NO. 2和SEQ ID NO. 3所不。
[0021] 菜豆启动子引物
[0022] Primer5F ：GAATTCATTGTACTCCCAG
[0023] Primer5R ：AGTAGAGTAGTATTGAATATGAG
[0024] 菜豆终止子引物
[0025] tem5F ：AATAAGTATGAACTAAAATGC
[0026] tem5R ： TTAGTTGGTAGGGTGCTAGGAA
[0027] 实施例3构建植物特异表达载体pOBT
[0028] 将pUC57-菜豆启动子的克隆载体用限制性内切酶pstl和NcoI消化，回收目的片 段菜豆启动子序列，同时用pstl和NcoI消化基本质粒p0 (以pl301为基本骨架，将其T-DNA 区进行改造，除了保留有T-DNA区的NOS基因外其余基因均被35S和Bar基因替换，以pEGAD 质粒为模板，利用 35S-F 上游引物 47bp cggggtaccAtccgtcaacatggtggagcacgacacgcttgtc tact 和 Bar-R 下游弓I物 54bpcggaattcactagttcagatctcggtgacgggcaggaccggacggggcggaa cc进行PCR，扩增得到35S-Bar基因，利用kpnl和SpeI酶切位点将其插入到pCAMBIA1301 载体T-DNA区的NOS基因前，构建了 pl301-35S-Bar-N0S基本质粒，简写为p0质粒），将菜 豆启动子（用来启动油体蛋白与辅酶QlO的融合基因）与基本质粒PO连接，转化大肠杆菌， 获得pOB中间载体；将pUC57-终止子的克隆载体用HindIII和kpnl消化，回收目的片段菜 豆终止子，同时用这两个酶消化pOB中间载体，将终止子与酶切后的pOB载体连接，转化大 肠杆菌，获得植物特异表达载体P〇BT。
[0029] 实施例4拟南芥油体蛋白基因的克隆
[0030] 取拟南芥种子，提取DNA基因组，用引物：
[0031] I：CCATGGCGGATACAGCTAGAGG
[0032] 2 ：CACCGGGTGGAGTAGTGTGCTGG
[0033] 进行扩增拟南芥油体蛋白基因，经测序，其喊基序列如序列表SEQ ID NO. 4所不； 扩增的片段经限制性内切酶（NcoI酶和EcoRI酶）消化，克隆到pUC57克隆载体中，保存备 用。
[0034] 实施例5构建含有拟南芥油体蛋白与辅酶QlO融合基因的植物油体特异表达载 体 P〇BT-C〇Q10
[0035] 以克隆得到的拟南芥油体蛋白基因和重组辅酶QlO基因为模板，设计融合基因引 物，通过融合PCR技术，获得oleosin-CoQlO融合基因，经测序，其碱基序列如序列表SEQ ID NO. 5所示。将融合基因用限制性内切酶NcoI与HindIII进行酶切，同时用这两个酶 对pOBT载体进行酶切，然后将融合基因与酶切后的pOBT载体连接，转化大肠杆菌，产生 P〇BT-C〇Q10植物油体表达载体。
[0036] 拟南芥油体蛋白与辅酶QlO融合基因引物
[0037] I：CCATGGCGGATACAGCTAGAGG
[0038] 2 ：CAGCCCAAGCCATAGTAGTGTGC
[0039] 3 ：CAGCACACTACTATGGCTTGGGC
[0040] 4：TTATCTCAGTTCCCACCACTTCAGG
[0041] 实施例6 Flora dip方法进行的遗传转化
[0042] 首先，侵染前一天将野生型拟南芥和亚麻芥植株浇水浇透；将农杆菌工程菌株接 种至 50ml 含有三抗（100yg/ml Rif、50yg/ml Str 和 50yg/ml Kan)的 YEP 液体培养基 中，进行预培养（180rpm/min，28°C ):取预培养的农杆菌7ml加入到含有三抗的YEP液体 培养基中，进行扩大培养，直至0D5900 = 1.0?1.2 ;把农杆菌菌液移到离心管中，20°C， 4000rpm离心20min，收集菌体，去除三抗培养基。用Flora-Dip Buffer重悬菌体，使其 0D590达到0.8?0.9。转化前剪掉种荚、开花和露白的花芽。在钵体四周插上适当高度的 竹签，以便支撑倒过来进行侵染的钵体。将拟南芥的茎部和叶片基部浸入重悬的农杆菌菌 液中，静置7分钟，然后吸弃过多的菌液。平放转化后的钵体，用塑料薄膜等保湿过夜，第二 天可稍露一小缝，第三天正常放置。一周后可进行第二次侵染。待种子成熟后，可隔天采 摘发黄成熟的荚，收获种子。
[0043] 实施例7筛选表达量高的转基因株系
[0044] 转基因株系在温室或大田经生长与发育，然后开花结籽，形成转基因 Tl代种子， 当Tl代种子收获后，每株转基因植株取200-1000mg，在提取液中抽提油体蛋白与辅酶QlO 的融合蛋白，经酶联免疫技术检测重组辅酶QlO的表达量，筛选出高表达的转基因株系，高 表达的株系表达量达到2875. 64pg/ml。
[0045] 实施例8含有辅酶QlO活性多肽的油体制备
[0046] 从含有辅酶QlO蛋白的转基因油料作物种子中提取含有辅酶QlO蛋白的油体，保 存备用，具体方法如下：（1)取0. Img转基因种子，放入研钵中，加入Iml PBS，用研棒充分研 磨。直至溶液变浑浊，看不见种粒。放入离心机l〇〇〇〇rpm，4°C，离心IOmin ; (2)离心后溶液 分为三层，即表层为白色油状层，中间层液体，和底层沉淀。将上层油体部分和液体部分混 合均匀，全部吸出，注意不要吸出底层沉淀，将吸出的液体转移至另一离心管中，加 PBS，离 心10000rpm，4°C，lOmin，重复1、2步骤，3?4次。（3)将重复1、2步骤离心后吸出的液体 加500μ 1的PBS混匀，在离心机中4°C，lOOOOrpm，离心lOmin。（4)此时离心后分为两层， 为上层油脂部分和下层液体部分，将下层液体吸出，弃掉。再重复3、4步骤，3?4次。
[0047] 实施例9油体中辅酶QlO蛋白的含量测定
[0048] 转基因株系在温室或大田经生长与发育，然后开花结籽，形成转基因 Tl代种子， 当Tl代种子收获后，每株转基因植株取200-1000mg，在提取液中抽提油体蛋白与辅酶QlO 蛋白的融合蛋白，采用ELISA法，按照ELISA试剂盒（长春百金生物科技有限公司）说明 书操作，检测油体中辅酶QlO蛋白的表达量，经计算，拟南芥油体中辅酶QlO的表达量为 2875. 64pg/ml。
[0049] 实施例10油体中辅酶QlO蛋白的活性检测
[0050] 1、收集对数期细胞NIH3T3细胞使用细胞计数板计数，96孔平底板中每孔加入 IOOul细胞液，细胞数为6000个左右。
[0051] 2.、37°C，5% C02培养24h，置显微镜下观察细胞单层铺满孔底。此时，轻倒出96 孔板中的完全培养基，每孔加入IOOul的饥饿培养基。
[0052] 3.、5%C02,37C培养24小时，设7个梯度加药，每孔lOOul，设2个复孔。同时使 用纯品蛋白bFGF作为阳性对照，野生型拟南芥种子油体作为阴性对照。
[0053] 4、5% C02,37°C培养48小时，每孔加25ul浓度为0· 5%的MTT溶液，
[0054] 5、5% C02, 37°C继续培养4h后终止培养，弃培养液。
[0055] 6、每孔加入120ulDMS0,低速振荡lOmin，紫色结晶充分溶解后用酶联免疫检测仪 在570nm波长下测定。结果见图4。
[0056] 实施例11红花油体的提取
[0057] (1)取200?IOOOmg野生型红花种子，放入研钵中，加入Iml Buffer A，用研棒充 分研磨。直至溶液变浑池，看不见种粒。放入离心机12000rpm，4°C，离心30min;
[0058] (2)离心后溶液分为三层，即表层为白色油状层，中间层液体，和底层沉淀。将上层 油体部分和液体部分混合均匀，全部吸出，注意不要吸出底层沉淀，将吸出的液体转移至另 一离心管中，加 BufferB,离心18000rpm，4°C，IOmin,重复1、2步骤，3?4次。
[0059] (3)将重复1、2步骤离心后吸出的液体加500 μ 1的Buffer C混勻，在离心机中 4°C，18000rpm，离心 lOmin。
[0060] (4)此时离心后分为两层，为上层油脂部分和下层液体部分，将下层液体吸出，弃 掉。再重复3、4步骤，3?4次。
[0061] Buffer A：0. 6M Sucrose,0. 5M NaCl,0. 05M Tris-HCl(pH = 7. 0)；
[0062] Buffer B ：0. 4M Sucrose,0. 5M NaCl,0. 05M Tris-HCl (pH = 7. 0)；
[0063] Buffer C :20mM Na2HPO4, 20mM NaCl (pH = 7. 0)。
[0064] 实施例12护肤乳液配方筛选
[0065] 一种含有辅酶QlO活性多肽的护肤乳液，由以下重量份的原料制成：5% -25% 保湿剂（红花油体），10%甘油，10 % -25%乳化剂（羧乙基纤维素），1.5% -8 %偶合剂 (PEG600)，0. 05% -0. 5%防腐剂（尼泊金甲酯和尼泊金丙酯混合液），1% -10%营养添加剂 (含有辅酶QlO蛋白的拟南芥油体）和5% -20%维生素 C，适量香精，其余为去离子水，本 发明设计了正交实验，通过稳定性实验和活性检测，确定出最佳的乳液配方为10%油性原 料（红花油体），1〇%甘油，1〇%乳化剂（羧乙基纤维素），3%偶合剂饰6600)，0.25%防腐 剂（尼泊金甲酯和尼泊金丙酯混合液），〇. 5%香精，8%营养添加剂（含有辅酶QlO蛋白的 拟南芥油体），5%维生素 C。
[0066] 实施例13护肤乳液制备方法
[0067] 本发明制备一种含有辅酶QlO活性多肽护肤乳液的制备方法，包括以下步骤进行 制备：首先将植物油体提取出来，然后将水加入到油体中，混合均匀；然后逐级加入甘油和 乳化剂羧乙基纤维素，偶合剂PEG600,搅拌均匀，高剪切在1000rpm-30000rpm下乳化，在均 质机中乳化10_20min ;最后，搅拌均匀后再加入防腐剂尼泊金甲酯和尼泊金丙酯的混合液 和营养添加剂含有辅酶QlO活性多肽的植物油体和维生素 C以及藏红花香精，搅拌均匀后 即成本发明品。
[0068] 实施例14护肤乳液稳定性实验
[0069] (1)在40°C电热恒温培养箱中放置30-50天，恢复室温后观察，并没有分层现象， 稳定性良好；
[0070] (2)24小时之内，在0°C -50°c之间来回频繁变化，如此反复操作15-30天，恢复室 温后观察，没有分层现象，稳定性良好；
[0071] (3)在-5°c冰箱和40°C的电热恒温培养箱中各放1天，如此反复操作5-7天，恢复 室温后观察，没有出现分层现象，稳定性良好；
[0072] (4)在40°C的电热恒温培养箱中放置5-7天，然后在(TC -5°C冰箱中放置5-7天， 接下来再放入40°C _50°C的电热恒温培养箱中放置30天，恢复室温后观察，稳定性良好。
[0073] 通过上述实验观察，油性原料10%，甘油10%，乳化剂10%，偶合剂3%，防腐剂 0. 25 %，香精0. 5 %，营养添加剂8 %，维生素 C5 %，这一乳液配方的稳定性较好。
[0074] 实施例15含有辅酶QlO油体的护肤乳液功效
[0075] 首先对护肤乳液进行抗氧化功效检测，选用邻苯三酚法检测对超氧阴离子自由基 的清除作用，结晶紫法检测对轻自由基的清除作用，DPH法检测对总自由基的清除作用。
[0076] 然后对美白功效进行检测，采用酪氨酸酶抑制法，取4支试管分别编号为Cl、C2、 Tl、T2,按照表1的顺序在各管中加入相应的试剂，CUTl在加入酪氨酸酶之前先放入37°C 水浴锅内l〇min，然后再加入酪氨酸酶，然后将Cl、C2、ΤΙ、T2共同放入共同放入37°C水浴 锅内lOmin，取出分别测定Cl、C2、ΤΙ、T2各管在475nm处的吸光度值，做三次平行。
[0077] 采用上述这种方法测定以下不同配方的护肤品的超氧阴离子自由基的清除率、羟 自由基清除率、总自由基清除率、酪氨酸酶抑制率。
[0078] 组成1 (本发明）：油性原料（红花油体）10%，甘油10%，乳化剂（羧乙基纤维 素）10%，偶合剂（PEG600)3%，防腐剂（尼泊金甲酯和尼泊金丙酯混合液）0. 25%，香精 (藏红花香精）〇· 5 %，营养添加剂（含有23005. 12pg辅酶QlO蛋白的拟南芥油体）8 %，维 生素 C5% ;
[0079] 组成2 :油性原料（红花油体）10%，甘油10%，乳化剂（羧乙基纤维素）10%， 偶合剂（PEG600)3 %，防腐剂（尼泊金甲酯和尼泊金丙酯混合液）0. 25%，香精（藏红花香 精）0. 5%，维生素 C5% ;
[0080] 组成3:油性原料（甘油）20%，乳化剂（羧乙基纤维素）10%，偶合剂 (PEG600)3 %，防腐剂（尼泊金甲酯和尼泊金丙酯混合液）0.25%，香精（藏红花香 精）0. 5 %，营养添加剂（含有23005. 12pg辅酶QlO蛋白的拟南芥油体）8 %，维生素 C5 %;
[0081] 组成4:油性原料（甘油）20%，乳化剂（羧乙基纤维素）10%，偶合剂 (PEG600)3 %，防腐剂（尼泊金甲酯和尼泊金丙酯混合液）0.25%，香精（藏红花香 精）0.5%，营养添加剂（23005. 12pgCoQ10纯品）8%，维生素 C5% ;
[0082] 比较这四种组成配方的护肤品对超氧阴离子自由基的清除率、羟自由基清除率、 总自由基清除率、酪氨酸酶抑制率，结果如下。
[0083] 表1反应液组成与体积

【权利要求】
1. 一种含有辅酶Q10的植物油体，其特征在于：利用重组DNA技术将构建了含有CoQlO 基因的植物油体特异性表达载体P〇BT-C〇Q10,转化至油料作物中，经筛选鉴定获得转基因 受体植物，经过培养收获转基因种子，从转基因种子中分离提取含有辅酶Q10的植物油体。
2. -种含有辅酶QlO(CoQlO)活性多肽的植物油体护肤乳液，其特征在于：它包括下列 重量百分比的各成分 保湿剂 5%-25% 甘油 10% 乳化剂 10°/。-25% 偶合剂 1.5%-6% 防腐剂 0.05%-0.5% 营养添加剂1%-10°/〇 维生素C5%-20% 香精 适量 其余为去离子水。
3. 根据权利要求2所述的护肤乳液，其特征在于：保湿剂为红花油体和甘油，营养添加 剂为辅酶Q10活性多肽的拟南芥油体和维生素C。
4.根据权利要求2所述的护肤乳液，其特征在于：所述的防腐剂为尼泊金甲酯和尼泊 金丙酯的混合物，偶合剂为PEG600,乳化剂为羧乙基纤维素，香精为藏红花香精。
5.根据权利要求2所述的护肤乳液，其特征在于：按照以下步骤进行制备：首先将植 物油体提取出来，然后将水加入到油体中，混合均匀；然后逐级加入甘油和乳化剂羧乙基 纤维素，偶合剂PEG600,搅拌均匀，高剪切在1000rpm-30000rpm下乳化，在均质机中乳化 10-20min;最后，搅拌均匀后再加入防腐剂尼泊金甲酯和尼泊金丙酯的混合液和营养添加 剂辅酶Q10活性多肽的植物油体以及藏红花香精，搅拌均匀后即成本发明品。
【文档编号】A61K8/64GK104274336SQ201310300892
【公开日】2015年1月14日 申请日期:2013年7月9日 优先权日:2013年7月9日
【发明者】杨晶, 李校堃, 李海燕, 王艳芳, 王文慧, 王沥浩, 郭咏昕 申请人:吉林农业大学