免疫核糖核酸组合物冻干粉针的制作方法
【专利摘要】本发明提供一种免疫核糖核酸组合物冻干粉针，涉及药品及药品制造【技术领域】，包含以下重量份原料成分：免疫核糖核酸100g～500g，壳聚糖纳米粒20g～100g，10mmol/L的硫酸钠1000mL，海藻糖100g～500g，注射用水1000mL。本发明的优点是：（1）此发明为临床开发的药物新制剂；（2）靶向制剂，延长药物吸收的有效时间，降低给药量；（3）见效快，在特定吸收部位药物浓度高，提高生物利用度和疗效；（4）毒副作用小、使用安全、疗效确切、质量可控；(5)剂量准确、使用方便。
【专利说明】免疫核糖核酸组合物冻干粉针
【技术领域】:
[0001]本发明涉及药品及药品制造【技术领域】，尤其涉及一种免疫核糖核酸组合物冻干粉针。
【背景技术】:
[0002]免疫核糖核酸，又名免疫增强剂，主要用于恶性肿瘤如肾癌、肺癌、消化道癌及神经母细胞瘤和骨肉瘤等的辅助治疗，也曾试用于慢性乙型肝炎和流行性乙脑，可使部分细胞免疫功能低下的病人恢复正常，除直接可用于临床药物外，核糖核酸还是其它许多药物的前体，经过加工、修饰、改造可直接作用于靶细胞，根据碱基互补配对原则，能与靶细胞的RNA或DNA杂交。与DNA结合可抑制DNA的复制，达到阻止靶细胞增殖的目的；与mRNA相结合，可阻断蛋白质的合成，干扰基因的正常表达，从基因水平上控制肿瘤或病毒的繁殖与扩散，达到治疗疾病的目的。
[0003]免疫核糖核酸(Immune RNA，iRNA)是动物体内一种具有转移免疫性功能的生物大分子，是一种重要的免疫触发剂或免疫调节剂。1967年Alexander通过用肉瘤免疫绵羊制取的淋巴细胞核糖核酸对大鼠进行实验，发现核糖核酸能抑制大鼠同一肿瘤的生长，甚至消除，首次证实了免疫核糖核酸能传递免疫信息，1982年林单坤等人把从免疫羊肝中提取得到的免疫核糖核酸做成制剂注入体内，发现对肿瘤与癌症有明显的疗效并能提高机体的免疫功能，而且未出现不良的副作用；作为临床药物，只要能解决好其在体内的运载及透膜能力，药物在细胞内的稳定性、亲和力等问题，其应用前景十分诱人。
[0004]壳聚糖又称可溶性甲壳素、甲壳胺，由蟹、虾等水产加工废弃物提取精制甲壳素后经过脱乙酰基而制取，是天然多糖中唯一的碱性多糖，具有许多独特的物理化学特性和生物功能。壳聚糖无毒、来源丰富、有良好生物相容性及生物可降解性。近年来，随着新型药物给药系统的发展，壳聚糖作为一种新辅料取得了良好的效果，尤其是在药物控释、缓释、靶向智能释药中的应用受到广泛关注。壳聚糖在酸性条件下膨胀形成凝胶，结构中游离氨基结合氢离子成为带正电荷的多聚物，能成为核酸分子的载体材料，与带有负电荷的RNA分子形成纳米复合物，目前文献报道的壳聚糖载体药物粒径均较大，药物包封率和含量均较低。
【发明内容】
:
[0005]本发明经过试验摸索，研制成可以靶向给药、易于携带和运输、临床使用方便的免疫核糖核酸组合物的冻干乳剂，降低临床给药剂量，保证了临床用药的安全性。
[0006]本发明所述的免疫核糖核酸组合物为冻干乳剂，包括以下组分:免疫核糖核酸，壳聚糖纳米粒、海藻糖，其中海藻糖用于冻干时保护壳聚糖纳米粒，pH调节剂为氢氧化钠，免疫核糖核酸与壳聚糖的比重为1:0.2~1:0.5。
[0007]一种免疫核糖核酸组合物冻干粉针，其特征在于，包含以下重量份原料成分:
[0008]免疫核糖核酸l()0g~500g
壳聚糖纳米粒20g~100g
10mmol/L 的硫酸钠1000mL
海藻糖K)()g~5()0g
注射用水1000mU
[0009]一种免疫核糖核酸组合物冻干粉针的制备方法，其特征在于，包括如下步骤:
[0010](一)壳聚糖纳米粒的制备:
[0011](I)将壳聚糖粉末粉碎后经过100目筛网过筛；
[0012](2)称取上述过100目筛网的壳聚糖粉末100g，室温下加入0.lmol/L乙酸溶液40L，磁力搅拌，使壳聚糖完全溶解，得壳聚糖乙酸溶液；
[0013](3 )用 l%Na0H 调节 ρΗ=5.0 ；
[0014](4)搅拌下加入1%三聚磷酸钠1667g至壳聚糖乙酸溶液中，得胶体溶液，使壳聚糖/三聚磷酸钠质量比为6: 1，通过阴阳离子的静电作用交联成纳米粒；
[0015](5)将上述胶体溶液4°C高速离心30min，收集下层沉淀，用纯水洗涤3次后，冷却并置减压干燥箱中干燥得到壳聚糖纳米粒，水分低于2%，粒径< lOOnm，zeta电位约为15mv ；
[0016](二)免疫核糖核酸组合物冻干粉针的制备:
[0017](I)依照上述处方比例称取免疫核糖核酸100g~500g，缓慢加入1000mL的50 V~70 °C注射用水，60 V条件下搅拌至溶解并用醋酸调节pH至4~6，然后加入0.05%~
0.15%的活性炭搅拌30min，滤除活性炭，药液再经0.45 μ m和0.22 μ m微孔滤膜过滤；
[0018](2)将配制的10mmol/L的硫酸钠溶液1000mL,加入壳聚糖纳米粒20g~100g和海藻糖100g~500g,保温20min,混合两组溶液,继续搅拌20min ；
[0019](3)按每瓶2mL装入5mL西林瓶中，半压塞后送入冷冻干燥机中，降温至-40°C ±2°C，保温2h~4h，然后抽真空至冷冻干燥箱压强低于20Pa，然后缓慢升温至-25°C ±2°C升华干燥，保温6~8h，升温至25°C~30°C，保温3h，冷冻干燥结束，出箱。
[0020]本发明的有益效果为:
[0021]本发明提供一种粒径极小的壳聚糖纳米粒与免疫核糖核酸的组合物冻干粉针，壳聚糖纳米粒是一种粒径小于IOOnm的微粒，以它作为药物载体粒子，连接免疫核糖核酸，从而实现癌细胞特异性识别，进行靶向和缓控释作用。本发明的优点是:(1)此发明为临床开发的药物新制剂；(2)靶向制剂，延长药物吸收的有效时间，降低给药量；(3)见效快，在特定吸收部位药物浓度高，提高生物利用度和疗效；(4)毒副作用小、使用安全、疗效确切、质量可控；(5)剂量准确、使用方便。
【具体实施方式】:
[0022]下面结合实施例对本发明作详细说明，但本发明的范围非限于这些实施例的范围。
[0023]实施例1免疫核糖核酸组合物冻干粉针的制备(以1000支)[0024]1.处方
[0025]
免疫核糖核酸100g
壳聚糖纳米粒20g
硫酸钠适量
海藻糖100g
注射川水2000mL
[0026]2.制备工艺
[0027](I)依照上述处方比例称取免疫核糖核酸100g，缓慢加入1000mL的60°C注射用水，边加入边搅拌至溶解并用醋酸调节pH至5.5，然后加入0.05%的活性炭搅拌30min，滤除活性炭，药液再经0.45 μ m和0.22 μ m微孔滤膜过滤；
[0028](2)采用同样注射用水配制10mmol/L的硫酸钠溶液1000mL,加入壳聚糖纳米粒20g和海藻糖100g,保温20min,混合两组溶液,继续搅拌20min。
[0029](3)按每瓶2mL装入5mL西林瓶中，半压塞后送入冷冻干燥机中，降温至-40°C ±2°C，保温3h，然后抽真空至冷冻干燥箱压强低于20Pa，然后缓慢升温至-25°C ±2°C升华干燥，保温6h，升温至25°C~30°C，`保温3h，冷冻干燥结束，出箱。
[0030]实施例2免疫核糖核酸组合物冻干粉针的制备(以1000支)
[0031]1.处方
[0032]
免疫核糖核酸300g
壳聚糖纳米粒60g
硫酸钠适量
海藻糖300g
注射川水2()00mL
[0033]2.制备工艺
[0034](I)依照上述处方比例称取免疫核糖核酸300g，缓慢加入1000mL的60°C注射用水，边加入边搅拌至溶解并用醋酸调节pH至5.5，然后加入0.05%的活性炭搅拌30min，滤除活性炭，药液再经0.45 μ m和0.22 μ m微孔滤膜过滤；
[0035](2)采用同样注射用水配制10mmol/L的硫酸钠溶液1000mL,加入壳聚糖纳米粒60g和海藻糖300g,保温20min,混合两组溶液,继续搅拌20min。
[0036](3)按每瓶2mL装入5mL西林瓶中，半压塞后送入冷冻干燥机中，降温至-40°C ±2°C，保温3h，然后抽真空至冷冻干燥箱压强低于20Pa，然后缓慢升温至-25°C ±2°C升华干燥，保温7h，升温至25°C~30°C，保温3h，冷冻干燥结束，出箱
[0037]实施例3免疫核糖核酸组合物冻干粉针的制备(以1000支)
[0038]1.处方
[0039]
【权利要求】
1.一种免疫核糖核酸组合物冻干粉针，其特征在于，包含以下重量份原料成分:免疫核糖核酸100g~500g壳聚糖纳米粒20g~100g.10mmol/L 的硫酸钠1000mL海藻糖100g~500g注射川水lOOOmL.
2.—种权利要求1所述免疫核糖核酸组合物冻干粉针的制备方法，其特征在于，包括如下步骤: (一)壳聚糖纳米粒的制备: (1)将壳聚糖粉末粉碎后经过100目筛网过筛； (2)称取上述过100目筛网的壳聚糖粉末100g，室温下加入0.lmol/L乙酸溶液40L，磁力搅拌，使壳聚糖完全溶解，得壳聚糖乙酸溶液；
(3)用l%NaOH 调节 pH=5.0 ； (4)搅拌下加入1%三聚磷酸钠1667g至壳聚糖乙酸溶液中，得胶体溶液，使壳聚糖/三聚磷酸钠质量比为6:1， 通过阴阳离子的静电作用交联成纳米粒； (5)将上述胶体溶液4°C高速离心30min，收集下层沉淀，用纯水洗涤3次后，冷却并置减压干燥箱中干燥得到壳聚糖纳米粒，水分低于2%,粒径< lOOnm, zeta电位约为15mv ； (二)免疫核糖核酸组合物冻干粉针的制备: (1)依照上述处方比例称取免疫核糖核酸100g~500g，缓慢加入1000mL的50°C~70°C注射用水，60°C条件下搅拌至溶解并用醋酸调节pH至4~6，然后加入0.05%~0.15%的活性炭搅拌30min，滤除活性炭，药液再经0.45 μ m和0.22 μ m微孔滤膜过滤； (2)将配制的10mmol/L的硫酸钠溶液1000mL,加入壳聚糖纳米粒20g~100g和海藻糖100g~500g,保温20min,混合两组溶液,继续搅拌20min ； (3)按每瓶2mL装入5mL西林瓶中，半压塞后送入冷冻干燥机中，降温至_40°C±2°C，保温2h~4h，然后抽真空至冷冻干燥箱压强低于20Pa，然后缓慢升温至-25V ±2°C升华干燥，保温6~8h，升温至25°C~30°C，保温3h，冷冻干燥结束，出箱。
【文档编号】A61K9/19GK103536553SQ201310481656
【公开日】2014年1月29日 申请日期:2013年10月15日 优先权日:2013年10月15日
【发明者】汪六一, 汪金灿, 郝结兵 申请人:海南卫康制药(潜山)有限公司