复方青蒿素多相脂质体注射液及其制备方法
【专利摘要】本发明属于兽药领域，具体为复方青蒿素多相脂质体注射液及其制备方法。该注射液包括药用成分和注射液辅料成分，其中，药用成分由青蒿素和三氮脒制成，注射液辅料成分由卵磷脂、胆固醇、吐温-80、磷酸缓冲液和无水乙醇组成。其中卵磷脂1～30份、胆固醇0.5～10份、吐温-80：0.1～5份、青蒿素0.5～5份、三氮脒0.5～5份、无水乙醇1～15份、磷酸缓冲液5～90份。根据本发明制成复方青蒿素多相脂质体，运用于兽医临床治疗畜禽的附红细胞体病疗效显著，且安全性高、本发明中将几种方法的有机结合，即采用乙醇注入-超声-乳匀法，该法制备的产品包封率高、稳定性好，且操作性强，适合于工业大生产。
【专利说明】复方青蒿素多相脂质体注射液及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明属于兽药领域，具体为一种包封率高、稳定性好、安全性高、疗效显著的复方青蒿素多相脂质体注射液及其制备方法。
【背景技术】
[0002]青蒿素是于20世纪70年代初首次由中国科学家从黄花蒿中分离得到的一种化合物，是目前世界上公认的最有效治疗脑型疟疾和抗氯喹恶性疟疾的药物，已成为世界卫生组织(WHO)推荐的治疗疟疾的首选药物。
[0003]药理研究证实，青蒿素除具有抗疟作用外，还具有抗孕、抗纤维化、抗血吸虫、抗弓形虫、抗心律失常和肿瘤细胞毒性等作用。在兽医临床上，青蒿素对畜禽附红细胞体、球虫、血吸虫、弓形虫、肺孢子虫等具有较强的作用。
[0004]近年来，对青蒿素及其青蒿其他有效成分脂质体的研究主要集中于对青蒿素脂质体、青蒿酯脂质体、青蒿油多相脂质体、青蒿琥酯纳米脂质体、二氢青蒿素脂质体的研究。这些研究均为人医药领域的研究，而兽医领域还是空白。并且这些研究也仅限于对青蒿有效成分中的某种单一成分脂质体的研究。其采用的制备方法有乙醇注入法、薄膜-超声法等，这些制备方法在实验室虽然能取得较高的包封率，但由于方法自身的缺陷，比如乙醇注入法最终得到脂质体大多为大室脂质体，其粒径大，不适合静脉注射，需乳匀若干次，方可得到单室脂质体。
[0005]而薄膜-超声法:需将容器不断的旋转和蒸发，以便将有机溶剂挥发后形成一层薄膜，然后加水搅拌制备脂质体。该法耗能、产量小。
[0006]逆相蒸发法、冷冻干燥法等对设备要求高，设备昂贵。
[0007]总之，以上方法适合实验室制备，在大生产中应用还存在一定的难度。
【发明内容】
[0008]本发明的目的是提供一种包封率高的，在兽医临床治疗畜禽的附红细胞体病疗效显著的复方青蒿素多相脂质体注射液。，且安全性高
[0009]本发明的另一目的是提供一种工艺简单，操作性强、稳定性高的复方青蒿素多相脂质体注射液的制备方法。
[0010]本发明的具体技术方案为:
[0011]复方青蒿素多相脂质体注射液，该注射液包括药用成分和注射液辅料成分，其中，药用成分由青蒿素和三氮脒制成，注射液辅料成分由卵磷脂、胆固醇、吐温-80、磷酸缓冲液和无水乙醇组成，磷酸缓冲液的PH值为6.5。
[0012]该注射液中各组分的重量份为:卵磷脂I~30份、胆固醇0.5~10份、吐温-800.1~5份、青蒿素0.5~5份、三氮脒0.5~5份、无水乙醇I~15份、磷酸缓冲液5~90份。
[0013]复方青蒿素多相脂质体注射液，该注射液中各组分的重量份为:卵磷脂10份、胆固醇5份、吐温-802份、青蒿素2份、三氮脒2份、无水乙醇10份、磷酸缓冲液50份。
[0014]一种复方青蒿素多相脂质体注射液的制备方法，该制备方法包括以下步骤:
[0015]①以重量份计，将卵磷脂I~30份、胆固醇0.5~10份、吐温-800.1~5份、青蒿素0.5~5份按比例分别溶于10份的无水乙醇中；
[0016]②另将重量份为三氮脒0.5~5份溶于磷酸缓冲液中保温，在50°C的条件下进行搅拌，将无水乙醇I~15份混合液缓慢注入50°C的磷酸盐缓冲液中，继续搅拌，搅拌的速度20~IOOr除去无水乙醇,保温水合3h,探头超声,探头超声的时间2~20min,加磷酸缓冲液至全量，通过乳匀机，乳匀I~5次，即得。
[0017]复方青蒿素多相脂质体注射液的规格为IOmL/支，其中组分中卵磷脂与胆固醇的质量比为3~12:1，脂药的质量比为3~12:1，分别含有青蒿素150mg、三氮脒250mg。
[0018]本发明的积极效果体现在:本发明将青蒿素与三氮脒组合，制成复方青蒿素多相脂质体，运用于兽医临床治疗畜禽的附红细胞体病疗效显著，且安全性高。该法制备的复方青蒿素多相脂质体包封率高、稳定性好，且操作性强，适合于工业大生产。
【具体实施方式】
[0019]下面结合实施例对本发明进一步说明，但不限制本发明的范围。
[0020]实施例1:
[0021]复方青蒿素多相脂质体注射液，包括药用成分和注射液辅料成分，其中，药用成分由青蒿素和三氮脒制成，注射液辅料成分由卵磷脂、胆固醇、吐温-80、磷酸缓冲液和无水乙醇组成。
`[0022]其中组分以重量份计为:卵磷脂1份、胆固醇0.5份、吐温-805份、青蒿素5份、三氮脒5份、无水乙醇10份、磷酸缓冲液50份。
[0023]实施例2:
[0024]复方青蒿素多相脂质体注射液，包括药用成分和注射液辅料成分，其中，药用成分由青蒿素和三氮脒制成，注射液辅料成分由卵磷脂、胆固醇、吐温-80、磷酸缓冲液和无水乙醇组成。
[0025]其中组分以重量份计为:卵磷脂10份、胆固醇5份、吐温-803份、青蒿素5份、三氮脒4份、无水乙醇8份、磷酸缓冲液45份。
[0026]实施例3:
[0027]复方青蒿素多相脂质体注射液，包括药用成分和注射液辅料成分，其中，药用成分由青蒿素和三氮脒制成，注射液辅料成分由卵磷脂、胆固醇、吐温-80、磷酸缓冲液和无水乙醇组成。
[0028]其中组分以重量份计为:卵磷脂30份、胆固醇10份、吐温-800.5份、青蒿素1份、三氮脒3份、无水乙醇7份、磷酸缓冲液55份。
[0029]实施例4:
[0030]复方青蒿素多相脂质体的制备
[0031]①将9份卵磷脂、1.2份胆固醇、0.2份吐温_80、1份青蒿素溶于10份无水乙醇中；
[0032]②另将3份三氮脒溶于80份pH值为6.5灭菌的磷酸缓冲液(PBS)保温，在恒温及搅拌下，将无水乙醇混合液缓慢注入50°C PBS液中，继续搅拌，除去无水乙醇，保温水合3小时，探头超声，加灭菌的磷酸缓冲液至全量，通过乳匀机3次，即得复方青蒿素多相脂质体注射液。
[0033]实施例1-实施例3中的复方青蒿素多相脂质体均可采用实施例4中的方法来制备，只改变原料比例关系即可。
[0034]实验检验:
[0035]包封率的测定
[0036]采用葡聚糖凝胶(Sephadex)柱分离法，精密吸取复方青蒿素多相脂质体0.5mL上柱，以PBS溶液为流动相洗脱，控制流速，根据S印hadex G_50对大分子先被洗脱出来，小分子后出来的顺序，收集包封的药物，检测包封的青蒿素，
[0037]取适量复方青蒿素多相脂质体注射剂作处理样品，并检测青蒿素的含量(C,6)。
[0038]按以下式计算包封率:
[0039]包封率(W包)=C包/C总X100%。
[0040]采用均匀设计法，以脂质体包封率为考察指标，对包封率影响较大的卵磷脂与胆固醇的比(A)、脂药比(B)、超声时间(C)、搅拌速度(D)、乳匀次数(E)5因素。各因素水平不完全是11水平，需进行拟合，如下:
[0041]`
【权利要求】
1.复方青蒿素多相脂质体注射液，其特征在于:该注射液包括药用成分和注射液辅料成分，其中，药用成分由青蒿素和三氮脒制成，注射液辅料成分由卵磷脂、胆固醇、吐温-80、磷酸缓冲液和无水乙醇组成。
2.根据权利要求1所述的复方青蒿素多相脂质体注射液，其特征在于该注射液中各组分的重量份为:卵磷脂I~30份、胆固醇0.5~10份、吐温-80 0.1~5份、青蒿素0.5~5份、三氮脒0.5~5份、无水乙醇I~15份、磷酸缓冲液5~90份。
3.复方青蒿素多相脂质体注射液的制备方法，其特征在于:该制备方法包括以下步骤: ①以重量份计，将卵磷脂I~30份、胆固醇0.5~10份、吐温-80 0.1~5份、青蒿素0.5~5份按比例分别溶于10份的无水乙醇中； ②另将重量份为三氮脒0.5~5份溶于磷酸缓冲液中保温，在50°C的条件下进行搅拌，将无水乙醇I~15份混合液缓慢注入50°C的磷酸盐缓冲液中，继续搅拌，除去无水乙醇，保温水合3h，探头超声，加磷酸缓冲液至全量，通过乳匀机，即得。
4.根据权利要求1所述的复方青蒿素多相脂质体注射液的制备方法，其特征在于:步骤②中搅拌的速度20~IOOr.mirT1，探头超声的时间超声2~20min，乳匀I~5次。
5.一种根据权利要求3所述的制备方法制得的复方青蒿素多相脂质体注射液的应用，其特征在于:该注射液的规格为IOmL/支，分别含有青蒿素150mg、三氮脒250mg。
6.根据权利要求1或权利要求2中所述的复方青蒿素多相脂质体注射液，其特征在于:所述的磷酸缓冲液的PH值为6`.5。
【文档编号】A61K9/127GK103550229SQ201310554788
【公开日】2014年2月5日 申请日期:2013年11月8日 优先权日:2013年11月8日
【发明者】张槐, 黄玉伟, 陈强, 黄声全, 张德萍, 卢朝华 申请人:四川维尔康动物药业有限公司