注射用大容量三七止血纳米乳清洗液及其制备方法
【专利摘要】本发明涉及药剂学中新技术与新剂型领域，属于纳米乳载药系统应用于大容量注射液研究，具体涉及一种含有三七的止血纳米乳清洗液及其制备方法，处方中注射用乳化剂/助乳化剂占10.30%～80.60%，注射用油相占1.0%～40.80%，三七占0.10%～14.0%，其余为生理盐水，总组分100%，纳米乳注射液粒径10～100nm，外观透明或半透明，乳滴大小均匀，呈球形，体内止血结果显示，该清洗液能使血小板数量增多，缩短血浆凝血酶原时间及增加红细胞、血红蛋白和白细胞的数量。
【专利说明】注射用大容量三七止血纳米乳清洗液及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及药剂新剂型和新技术及其药学相关领域，具体涉及注射用大容量三七止血纳米乳清洗液及其制备方法和清洗液在动物体内发挥止血作用的相关药理学实验。
【背景技术】
[0002]注射用大容量清洗液是指临床上普遍使用的注射用3000mL生理氯化钠溶液。
[0003]近年来，临床手术及泌尿等科室止血用的大容量清洗液，通常采用大量冰盐水(O~4°C )或冷盐水(4~10°C )直接冲洗或加入血管收缩剂或止血剂进行冲洗或者灌注，以达到止血的目的。此种方法只是暂时性止血，并非通过调节体内止血机制而止血。
[0004]中药三七自古就有“止血神药”的美称，为伞形五加科植物三七的根，又名田七，其主要功效为散瘀止血，消肿定痛。《本草纲目》云:“三七止血，散血，定痛。”《玉揪药解》云:“三七和营止血，通脉行瘀，行瘀血而敛新血”。传统药用其根块，三七全粉入药，主要应用人体内外各种出血之症及跌打损伤、瘀滞肿痛。现代研究证明，三七可使血小板数量增多，缩短血浆凝血酶原时间,还可有效增加红细胞、血红蛋白和白细胞的数量。三七的主要止血成分为三七素(田七素，田七氨酸)，三七素以促使血小板聚集、变形，释放ADP、血小板因子III和钙离子等物质而达到止血作用。三七发挥止血作用的代表药物是云南白药，其主要成分为三七粉。三七粉的优点是易溶于水，但对黏膜有强烈的刺激作用。
[0005]纳米乳载药新技术是药剂学的前沿和热点，主要由油相、表面活性剂、助表面活性剂和水组成的均一、透明、略带蓝光的稳定液体，粘度低，能够避免药物直接接触粘膜，产生刺激。纳米乳粒径小于lOOmn，在体内迅速吸收并作用于靶器官，发挥三七的止血机制。
[0006]本发明旨在研制注射用大容量三七止血纳米乳清洗液，通过动物体内实验证明其止血效果，为临床各种手术及泌尿等科室出血患者止血，提供更有效的止血清洗液。
【发明内容】
[0007]本
【发明内容】
是采用三元相图筛选纳米乳处方，将具有“止血神药”美称的三七研制成注射用大容量止血纳米乳清洗液，进行纳米乳粒径和Zeta电位检测、纳米乳类型鉴别、纳米乳液滴形态电镜照相、纳米乳稳定性及载药量测定等制备方法研究，通过动物出血模型，研究其止血作用产生的时间和效果及止血机制。
[0008]本发明的注射用大容量三七止血纳米乳清洗液，由以下成分组成:
[0009]三七粉
[0010]油相
[0011]表面活性剂
[0012]助表面活性剂
[0013]水
[0014]其中， 油相包括注射用肉豆蘧酸异丙酯(IPM)、注射用橄榄油、注射用红花油、注射用玉米油、注射用大豆油、注射用芝麻油、注射用茶油、注射用油酸乙酯和注射用棉子油等；表面活性剂为注射用豆磷脂(Soya phosphatidylcholine)、注射用卵磷脂(Lipoid E80Purified Ovolecithin)、注射用聚山梨酯80、注射用磷脂(lecithin)、注射用聚氧乙烯35蓖麻油(EL-35)、注射用聚氧乙烯40氢化蓖麻油(RH-40)、注射用泊洛沙姆188和注射用聚乙二醇15-羟基硬脂酸酯等；助表面活性剂为注射用甘油、注射用聚乙二醇400、注射用丙二醇和注射用异丙醇等；水为注射用水、注射用生理盐水和中药提取液等。
[0015]以上各组分的配比为三七0.3~IOg ;油相20~30% ;表面活性剂40~60% ;助表面活性剂20~60% ;其余为注射用水或生理盐水或中药提取液。
[0016]本发明制备注射用大容量三七纳米乳止血清洗液的方法按以下步骤进行:
[0017]A.提供三七粉0.3~IOg ；
[0018]B.将A相溶于注射用水或生理盐水中；
[0019]C.称取处方量的表面活性剂和助表面活性剂，室温下搅拌均匀；
[0020]D.将油相加入到上述C相中，继续搅拌；
[0021]E.用B相滴定D相，直至溶液呈现出蓝色乳光；
[0022]F.用粒径检测仪测定E体系的粒径及zeta电位；
[0023]G.将苏丹红和亚甲蓝分别滴入E体系中，确定体系的类型；
[0024]H.用电镜检测 E体系的形态；
[0025]1.检测E体系的pH值；
[0026]J.离心检测E体系的稳定性；
[0027]K.动物实验考察E体系发挥止血的机制及作用时间和效果。
[0028]本发明有益效果:
[0029]注射用大容量三七纳米乳止血清洗液，以纳米乳作为载药体，将“止血神药”三七研制成注射用大容量清洗液，有以下独特的优点:
[0030]( I)纳米乳中包含油相、水相和表面活性剂，与粘膜结构类似，且粒径为纳米级，能够促进药物迅速吸收，充分发挥三七的止血神效，达到快速止血效果。
[0031](2)该纳米乳大容量清洗液的止血神效，能够保证临床上很多特殊手术能够实施。
[0032]( 3 )改变临床上单独大量使用生理盐水冲洗手术伤口的现状，为患者减轻痛苦。
[0033](4)该纳米乳大容量清洗液使用方便，与目前临床上使用生理盐水冲洗伤口的溶液用量比较，用量明显较少。
[0034](5)纳米乳大容量清洗液为透明液体，利于观察清洗液中出血块的清洗情况。
[0035](6)该纳米乳大容量清洗液可减少药物对粘膜的刺激和生理因素对药物的破坏。
[0036]本发明实现了纳米乳载药系统作为大容量清洗液的一次有益尝试，该清洗液将改变临床上单独大量使用生理盐水冲洗伤口的现状，具有重要的临床应用前景和价值。
【专利附图】
【附图说明】:
[0037]图1注射用大容量三七止血纳米乳清洗液三元相图。
[0038]图2注射用大容量三七止血纳米乳清洗液三元相图。
[0039]图3注射用大容量三七止血纳米乳清洗液粒径图。
[0040]图4注射用大容量三七止血纳米乳清洗液Zeta电位图。
[0041 ] 图5注射用大容量三七止血纳米乳清洗液电镜图片(X 30000 )。【具体实施方式】
[0042]实施例1:
[0043]A.称取三七粉0.3g ；
[0044]B.将三七粉溶于IOOmL注射用水中；[0045]C.称取卵磷脂5.2g, Labosal 13.0g，搅拌均匀，加入丙二醇18.2g，继续搅拌均匀；
[0046]D.将IPM7.8g加入到上述C相中，继续搅拌；
[0047]E.用B相滴定D相，直至溶液呈现出蓝色乳光；
[0048]F.用粒径检测仪测定E体系的粒径及zeta电位；
[0049]G.将苏丹红和亚甲蓝分别滴入E体系中，确定体系的类型；
[0050]H.用电镜检测E体系的形态；
[0051]1.检测E体系的pH值和渗透压；
[0052]J.离心检测E体系的稳定性，含量测定及溶出实验；
[0053]K.动物实验考察E体系发挥止血的机制及作用时间和效果。
[0054]实施例2:
[0055]A.称取三七粉0.3g ；
[0056]B.将三七粉溶于IOOmL生理盐水中；
[0057]C.称取卵磷脂2.9g, Labosal7.4g,搅拌均匀,加入异丙醇20.3g,继续搅拌均匀；
[0058]D.将IPM3.4g加入到上述C相中，继续搅拌；
[0059]E.用B相滴定D相，直至溶液呈现出蓝色乳光；
[0060]F.用粒径检测仪测定E体系的粒径及zeta电位；
[0061]G.将苏丹红和亚甲蓝分别滴入E体系中，确定体系的类型；
[0062]H.用电镜检测E体系的形态；
[0063]1.检测E体系的pH值和渗透压；
[0064]J.离心检测E体系的稳定性，含量测定及溶出实验；
[0065]K.动物实验考察E体系发挥止血的机制及作用时间和效果。
[0066]实施例3:
[0067]A.称取三七粉1.0g ;
[0068]B.将三七粉溶于IOOmL注射用水中；
[0069]C.称取卵磷脂4.0g, Labosall0.0g,搅拌均匀,加入异丙醇27.0g,继续搅拌均匀；
[0070]D.将油酸乙酯4.7g加入到上述C相中，继续搅拌；
[0071]E.用B相滴定D相，直至溶液呈现出蓝色乳光；
[0072]F.用粒径检测仪测定E体系的粒径及zeta电位；
[0073]G.将苏丹红和亚甲蓝分别滴入E体系中，确定体系的类型；
[0074]H.用电镜检测E体系的形态；
[0075]1.检测E体系的pH值和渗透压；
[0076]J.离心检测E体系的稳定性，含量测定及溶出实验；
[0077]K.动物实验考察E体系发挥止血的机制及作用时间和效果。
[0078]实施例4:[0079] A.称取三七粉1.0g ;
[0080]B.将三七粉溶于IOOmL生理盐水中；
[0081]C.称取司803.1g,吐温809.2g，搅拌均匀，加入丙二醇13.0g，继续搅拌均匀；
[0082]D.将IPM4.3g加入到上述C相中，继续搅拌；
[0083]E.用B相滴定D相，直至溶液呈现出蓝色乳光；
[0084]F.用粒径检测仪测定E体系的粒径及zeta电位；
[0085]G.将苏丹红和亚甲蓝分别滴入E体系中，确定体系的类型；
[0086]H.用电镜检测E体系的形态；
[0087]1.检测E体系的pH值和渗透压；
[0088]J.离心检测E体系的稳定性，含量测定及溶出实验；
[0089]K.动物实验考察E体系发挥止血的机制及作用时间和效果。
[0090]实施例5:
[0091 ]A.称取二七粉 0.3g ；
[0092]B.将三七粉溶于IOOmL注射用水中；
[0093]C.称取豆磷脂4.5g，聚氧乙烯40氢化蓖麻油11.4g，搅拌均匀，加入丙二醇31.0g，继续搅拌均匀；
[0094]D.将IPM5.6g加入到上述C相中，继续搅拌；
[0095]E.用B相滴定D相，直至溶液呈现出蓝色乳光；
[0096]F.用粒径检测仪测定E体系的粒径及zeta电位；
[0097]G.将苏丹红和亚甲蓝分别滴入E体系中，确定体系的类型；
[0098]H.用电镜检测E体系的形态；
[0099]1.检测E体系的pH值和渗透压；
[0100]J.离心检测E体系的稳定性，含量测定及溶出实验；
[0101]K.动物实验考察E体系发挥止血的机制及作用时间和效果。
[0102]实施例6:
[0103]A.称取二七粉 0.3g ；
[0104]B.将三七粉溶于IOOmL生理盐水中；
[0105]C.称取司盘804.6g，泊洛沙姆18811.9g，搅拌均匀，加入异丙醇32.0g，继续搅拌均匀；
[0106]D.将橄榄油5.7g加入到上述C相中，继续搅拌；
[0107]E.用B相滴定D相，直至溶液呈现出蓝色乳光；
[0108]F.用粒径检测仪测定E体系的粒径及zeta电位；
[0109]G.将苏丹红和亚甲蓝分别滴入E体系中，确定体系的类型；
[0110]H.用电镜检测E体系的形态；
[0111]1.检测E体系的pH值和渗透压；
[0112]J.离心检测E体系的稳定性，含量测定及溶出实验；
[0113]K.动物实验考察E体系发挥止血的机制及作用时间和效果。
[0114]
【权利要求】
1.ー种注射用大容量三七止血纳米乳清洗液及其制备方法，其特征在于:它是由下述重量百分比的原料组成:
2.根据权利1所述，其特征在于: 乳化剂包括注射用卵磷脂(lecithin)、注射用大豆磷脂(Soyaphosphatidylcholine)、注射用胆固醇、注射用阿拉伯胶、和注射用白蛋白等天然乳化剂或注射用合成乳化剂，如:注射用鹿糖酷、Sodiumcaprylate、月桂酸型鹿糖酯(LWA-1570)、聚乙二醇40氢化蓖麻油Cremophor RH40)、注射用聚山梨酯80 (Tween80)、注射用辛酸癸酸聚乙二醇甘油酯(Labrasol)、注射用泊洛沙姆188等中的任何ー种或多种。
3.根据权利1所述，其特征在于: 乳化剂中还可以加入注射用丙二醇、注射用正丁醇、注射用聚乙二醇和注射用甘油等短链醇及pentanol、Transcutol中的任一种或是几种的混合物作为助乳化剂。
4.根据权利1所述，其特征在于: 油相为注射用肉豆蘧酸异丙酯(十四酸异丙酷)、注射用十六酸异丙酯、丙二醇二癸酸酷(Captex?200)、注射用LabrafilM1944、注射用棕榈酸异丙酯、注射用丙二醇单辛酸酷、注射用大豆油、注射用中长链的甘油三酷、注射用维生素E等中的任何ー种或多种。
5.根据权利1所述，其特征在于: 处方中以注射用水、注射用生理盐水等为水相。
6.根据权利1所述，其特征在于: 三七为三七有效成分或三七全粉。
7.根据权利1所述，其特征在于:制备注射用大容量三七止血纳米乳清洗液的方法按以下步骤进行: A.筛选最佳乳化剂、助乳化剂和油相； B.根据origin软件绘制三元相图,确定km值和最佳处方； C.制备方法: 按比例称取处方量的三七，溶入乳化剂和助乳化剂混合液中，加入油相混匀，室温下缓慢滴加水相，搅拌，直至形成澄清透明略带蓝色荧光的注射用大容量三七止血纳米乳清洗液； D.纳米乳粒径、电位和渗透压的測定；E.纳米乳电镜扫描測定注射用大容量三七止血纳米乳清洗液中的液滴形态； F.纳米乳稳定性考察，含量測定及溶出实验； G.动物实验研究，測定止血因子和止血时间等实验数据。
【文档编号】A61K9/107GK103599152SQ201310600587
【公开日】2014年2月26日 申请日期:2013年11月22日 优先权日:2013年11月22日
【发明者】丁志英, 张越, 丁钰洋, 卢泽原 申请人:吉林大学