脉络宁酚及其制备方法和用途
【专利摘要】本发明涉及医药【技术领域】，提供了一种具有治疗心血管疾病的酚类新化合物——脉络宁酚(1-(7-甲氧基乙基)-3，4-邻苯二酚)(1-(7-methoxy?ethyl)-3，4-catechol)，结构式如下：。本发明还涉及该化合物的制备方法及其该化合物具有直接抑制LPS诱导的NO释放增加，此结果与脉络宁酚抑制LPS诱导的RAW264.7细胞的生长和增殖活性有关，0.1μM吲哚美辛抑制率达到63.1％，而0.625μM脉络宁酚剂量组抑制率与其基本持平，达到59.7％，由此推测脉络宁酚具有更好的抗炎活性，可用于制备治疗心血管疾病的药物。
【专利说明】脉络宁酚及其制备方法和用途
一、【技术领域】:
[0001]本发明涉及医药【技术领域】，是一种具有治疗心血管疾病的酚类新化合物一脉络宁酚(1-(7-甲氧基乙基)-3，4-邻苯二酚)的制备方法和在医药领域中的治疗心血管疾病的用途。具体涉及从脉络宁注射液中提取分离得到的一种酚类新化合物，该化合物具有直接抑制LPS诱导的NO释放增加，此结果与脉络宁酚抑制LPS诱导的RAW264.7细胞的生长和增殖活性有关，0.1 μ M吲哚美辛抑制率达到63.1 %，而0.625 μ M脉络宁酚剂量组抑制率与其基本持平，达到59.7%，由此推测脉络宁酚具有更好的抗炎活性，可用于制备治疗心血管疾病的药物。
二、技术背景:
[0002]中药复方制剂脉络宁注射液是在著名医方“四妙勇安汤”临床应用的基础上研究开发出来的、具有自立知识产权的，并于1985年正式批准生产的中药复方静脉注射剂，由中药石斛、玄参、牛膝、金银花、山银花经科学提取精制而成。具有活血化淤、行气止痛、养阴通络和补益肝肾的功效，主要用于治疗缺血性中风急性期、血栓闭塞性脉管炎、下肢深静脉血栓形成、动脉硬化性闭塞症、脑梗塞、心绞痛、心肌梗死、血液循环障碍及其后遗症等疾病，总有效率可达94.5%，与同类药品比较具有见效快、疗效高、疗程短、价格低廉、副作用少、安全性高等优点。
[0003]单核-巨噬细胞包括骨髓中的前单核细胞、外周血中的单核细胞、以及组织内的巨噬细胞(:Μφ:)。Μφ主要来源于血液中的单核细胞，单核-巨噬细胞是自体重要的免疫细胞，具有抗感染、抗肿瘤和免疫调节等重要作用。当机体遭受细菌、病毒或异物攻击，以及人体产生的衰老、损伤细胞和坏死组织等刺激后，巨噬细胞被激活，进入相应的组织中发挥强大的吞噬和分泌功能，吞噬死亡的细胞和侵入体内的细菌，在免疫反应中起重要作用。所以，单核-巨噬细胞又被誉为“人体健康的卫士”。然而巨噬细胞也促进了许多疾病的发生发展。动脉粥样硬化斑块的形成是许多炎症反应激活的结果，包括单核细胞进入血管壁并被激活，内皮细胞激活，细胞因子和趋化因子等炎症介质上调。Hosono M等研究证实，人冠状动脉粥样硬化斑块内含大量巨噬细胞和激活的T淋巴细胞，尤其是在不稳定心绞痛的斑块内。由巨噬细胞表达的组织因子和基质金属蛋白酶，可致纤维帽消化和斑块破裂，脱落的斑块易于形成血栓，堵塞冠脉血管，造成急性心肌梗塞。因此，研究影响炎症过程中巨噬细胞活力的药物，对于防治高血压、血脂紊乱等代谢性疾病具有重要的意义。
三、
【发明内容】
:
[0004]本发明提供一种具有显著抑制LPS诱导的巨噬细胞中一氧化氮(NO)的产生等作用的酚类新化合物——脉络宁酚的制备方法和在医药领域中治疗心血管疾病的用途。
[0005]本发明公开了该化合物的结构式(见摘要附图)
[0006]分子式为=C9H12O3,不饱和度为4,分子量:168。
[0007]命名为:脉络宁酌.(1_ (7_甲氧基乙基)_3，4_邻苯二酌.)。[0008]本发明中上述化合物的制备方法如下:
[0009]其特征在于以脉络宁注射液为原料，经反复通过硅胶或球形硅胶、SephadexLH-20(Sep.)凝胶柱层析、反相材料ODS中的一种或几种柱层析和重结晶等手段分离纯化得到该化合物。
[0010]本发明的新化合物及其衍生物与医学上可接受的药用辅料组成药物制剂用于治疗心血管疾病。可制备的剂型有:片剂、胶囊剂、颗粒剂和注射剂。
四、【专利附图】
【附图说明】:
[0011]以下图可作为附件材料上报。
[0012]图1、化合物的1H-NMR谱图2、化合物的13C-NMR谱
[0013]图3、化合物的1H-1H COSY的谱图4、化合物的HSQC谱
[0014]图5、化合物的HMBC谱图6、化合物的ROESY谱
[0015]图7、化合物的ES1-MS谱
五、【具体实施方式】:
[0016]结合【具体实施方式】对本发明作进一步说明，但本发明的内容并不仅仅限于所列举的实施方式。
[0017]实施例1.从脉络宁注射液中分离和鉴定该新化合物
[0018]开启脉络宁注射液700支约7000mL，经S印hadex LH-20柱(7.5 X 120cm)，50%乙醇洗脱，共收集10个流份，流份1、2色素重，流份3、4、5分别反复经硅胶柱、S^hadex LH-20柱、反相柱层析从脉络宁注射液中得到该单体化合物，通过理化性质、波谱方法鉴定为脉络宁酚，经文献检索该化合物是新化合物。
[0019]该化合物结构经核磁共振谱鉴定如下:
[0020]无色晶体，刮出后为白色粉末，易溶于甲醇、丙酮等有机溶剂。TLC浓硫酸-香草醛显淡紫色(加热)，FeCl3显色反应呈阳性，说明含有酚羟基。ES1-MS显示化合物的分子离子峰为166.9 ([M-H] _)，335 ([2M-H] 0，高分辨MS显示的准分子离子峰为167.0757 ([M-H]-)，计算值为167.0758，计算出其分子量为168，结合碳谱和氢谱的碳氢信号数据得出该化合物的分子式为C9H12O3，不饱和度为4。
[0021]1H-NMR(CD3OD, 500MHz, 8，ppm)的放大图，三个氢原子信号 6:6.73 (1H, d，Ja =8.1),6.61 (1H，dd，Ja = 2.0,8.1), 6.74 (1H，d，Ja = 2.1),从化学位移及耦合关系和裂分规律上看，这三个氢原子都是苯环上ABX系统的氢原子信号，进而确定了这三个氢原子的位置。
[0022]根据HSQC谱得到其对应的碳原子的化学位移分别为S 6.73的氢和S 116.1的碳直接相连；S 6.61的氢和S 119.1的碳直接相连；S 6.74的氢和S 114.2的碳直接相连。
[0023]氢谱中有化学位移为3.16且为单峰的三个氢原子,显示化合物中有甲氧基。氢谱中化学位移为4.16的单个氢原子为四重峰，Ja = 6.6HZ，说明其碳原子应该与一个甲基相连，甲基三个氢的化学位移为1.35，二重峰，Ja = 6.5HZ。而且1H-1H COSY相关谱显示的6 4.16 (lH，q，Ja = 6.6Hz)与 6 1.35 (3H, d, Ja = 6.5Hz)有相关，进一步证实了化合物中存在与一个甲基相连的叔碳原子。HSQC谱显示5 4.16的氢与5 80.7的碳直接相连，6 1.35的氢与δ 23.9的碳直接相。
[0024]HMBC谱中显示甲氧基氢原子和叔碳原子明显相关，与甲基碳原子弱相关，推测甲氧基与叔碳原子相连；ROESY谱的δ 4.16氢原子和δ 3.16氢原子相关说明甲氧基氢原子和叔碳氢原子空间上接近，从而进一步证实了甲氧基与叔碳原子相连。所以，可以确定化合物的叔碳原子与一个甲氧基和一个甲基相连。
[0025]HMBC谱显示连接在叔碳原子上δ 4.16的氢原子与苯环上化学位移为119.1和114.2两个碳原子明显相关，推测叔碳原子连接在这两个碳原子之间的苯环碳原子上；ROESY谱可以看出，化学位移δ 4.16氢原子和δ 6.61的氢原子相关，δ 4.16氢原子和δ 6.74的氢原子相关，也在空间上进一步证实了这一点。
[0026]根据分子式算出还剩两个羟基，只能分别连接在苯环剩余的两个位置上，化学位移分别为145.9,146.3。该化合物的碳氢谱归属见下表。
[0027]脉络宁酚的1H-NMR(SOOMHz)，13C-NMR(125MHz)的信号全归属及相互间相关关系
[0028]
【权利要求】
1.一种新的酚类化合物及其制备方法和用途，其特征在于该化合物化学名为1-(7-甲氧基乙基)-3,4_ 邻苯二酹(l-(7-methoxy ethyl) _3,4-catechol),化学结构式为:
2.制备权利要求1所述化合物的方法，其特征在于以金陵药业股份有限公司生产的脉络宁注射液为原料，通过多次硅胶柱层析，经石油醚-乙酸乙酯-丙酮溶剂系统或者氯仿-甲醇分离，再经Sephadex LH-20或ODS反相柱层析，甲醇、乙醇或者甲醇-水、乙醇-水不同比例的溶液洗脱而得。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于所述的柱层析用担体选自硅胶、凝胶、反相硅胶中的一种或几种。
4.权利要求1所述的化合物与医学上可接受的药用辅料组成药物制剂。
5.根据权利要求4所述的制剂剂型是片剂、胶囊剂、颗粒剂和注射剂。
6.权利要求1所述的化合物在制备治疗心脑血管疾病药物方面的用途。
【文档编号】A61P29/00GK103694089SQ201310724769
【公开日】2014年4月2日 申请日期:2013年12月25日 优先权日:2013年12月25日
【发明者】王奇志, 汤卫国, 冯煦, 徐向阳, 单宇, 印敏, 陈雨, 王鸣, 管福琴, 赵友谊, 张建华 申请人:江苏省中国科学院植物研究所