用于治疗癌症的涉及针对密蛋白18.2之抗体的联合治疗的制作方法
【专利摘要】本发明提供了一种用于有效治疗和/或预防与表达CLDN18.2细胞相关之疾病的联合治疗，所述疾病包括癌症疾病，例如胃癌、食管癌、胰腺癌、肺癌、卵巢癌、结肠癌、肝癌、头颈癌和胆囊癌及其转移。DSM ACC273920051019DSM ACC274020051019DSM ACC274120051019DSM ACC274220051019DSM ACC274320051019DSM ACC273820051019DSM ACC273720051019DSM ACC274520051117DSM ACC281020061026DSM ACC280920061026DSM ACC280820061026DSM ACC274620051117DSM ACC274720051117DSM ACC274820051117
【专利说明】用于治疗癌症的涉及针对密蛋白18. 2之抗体的联合治疗
[0001] 胃和食管（胃食管；GE)的癌症属于具有尚未被满足之最高医疗需求的恶性 肿瘤。在世界范围内，胃癌是癌症死亡的第二主要原因。近几十年来，食管癌的发病 率（incidence)有所上升，同时其组织学类型及原发肿瘤部位发生变化。在美国和西 欧，现在食管的腺癌比鳞状细胞癌更普遍，其中大多数肿瘤位于食管远端。胃食管癌的 五年总存活率为20 %至25%，不论与大量副作用相关的已建立之标准治疗的积极性 (aggressiveness)〇
[0002] 大部分患者出现局部晚期或转移疾病，并不得不经受一线化学治疗。治疗方案基 于通常与第三化合物（例如，紫杉烧（taxane)或蒽环类药物（anthracyclines))组合的钼 和氟嘧啶衍生物骨架（backbone)。然而，可预期之最好的中值无进展存活为5至7个月，而 最好的中值总存活为9至11个月。
[0003] 来自多种更新一代用于这些癌症的组合化学治疗方案的主要益处的缺乏刺激了 对革巴向药剂使用的研究。最近，曲妥珠单抗（trastuzumab)已经被批准用于Her2/neu阳性 胃食管癌。然而，由于仅?20%的患者表达该靶标并且适于进行该治疗，因此医疗需求仍然 较闻。
[0004] 紧密连接分子密蛋白18剪接变体2 (密蛋白18. 2 (CLDN18. 2))是紧密连接蛋白质 之密蛋白家族中的一员。CLDN18. 2为27. 8kDa的跨膜蛋白质，其包含四个具有两个小的胞 外环的跨膜结构域。
[0005] 在正常组织中（除胃外），通过RT-PCR检测不到CLDN18. 2的表达。CLDN18. 2特 异性抗体的免疫组织化学显示胃为唯一的阳性组织。
[0006] CLDN18. 2为只在短暂分化的胃上皮细胞上表达的高度选择性胃谱系抗原。 CLDN18. 2保持在恶性转化的过程中，因此频繁在人胃癌细胞的表面上展示。此外，在食管、 胰腺和肺腺癌中，以显著水平异位活化该泛肿瘤抗原（pan-tumoral antigen) XLDN18. 2蛋 白还位于胃癌腺癌的淋巴结转移瘤以及特别是卵巢中的远处转移瘤（distant metastase) (所谓的克鲁肯伯格氏肿瘤（Krukenberg tumor))中。
[0007] Ganymed Pharmaceuticals AG 已开发出针对CLDN18. 2 的 IgGl 嵌合抗体 IMAB362。 IMAB362以高亲和力和特异性识别CLDN18. 2的第一胞外结构域（E⑶1)。IMAB362不与任 何其他密蛋白家族成员结合，包括紧密相关的密蛋白18剪接变体1(CLDN18. 1)。IMAB362 表现出精确的肿瘤细胞特异性，并且组合了四种独立的高度有效的作用机制。靶标结合后， IMAB362通过ADCC、⑶C、诱导通过肿瘤细胞表面上的靶标交联诱导的凋亡以及直接抑制增 殖来介导细胞杀伤。因此，IMAB362有效裂解CLDN18. 2阳性细胞，包括体外和体内的人胃 癌细胞系。具有CLDN18. 2阳性癌细胞系的小鼠具有生存益处，并且当用IMAB362处理时， 多至40%的小鼠表现出其肿瘤的退化。
[0008] 已经在小鼠和食蟹猴（cynomolgus monkey)中对IMAB362的毒性和PK/TK特性进 行了彻底研究，包括确定剂量范围的研究、在食蟹猴中进行28天重复剂量毒性研究以及在 小鼠中进行3个月重复剂量毒性研究。在小鼠（最长处理持续时间3个月，每周施用，最高 剂量水平400mg/kg)和食蟹猴（每周多至5次施加多至100mg/kg)两者中，经静脉注射的 重复剂量的IMAB362被良好耐受。未诱发全身或局部毒性的迹象。具体而言，在任何毒性 研究中均未观察到胃毒性。IMAB362不诱导免疫激活和细胞因子释放。未记录到对雄性或 雌性生殖器官的不良作用。IMAB362不与缺乏靶标的组织结合。小鼠中的生物分布研究表 明缺乏胃毒性的原因最可能是在健康胃上皮中的管腔部位（luminal site)的紧密连接区 室化，这样似乎严重削弱了頂AB362表位的易接近性。一旦恶性转化，则该区室化消失，致 使可通过IMAB362使表位有可药性（drugable)。
[0009] IMAB362用于早期临床测试中。I期临床研究已在人中进行。3名患者的5个剂量 组（33mg/m2、100mg/m2、300mg/m2、600mg/m 2、1000mg/m2)各自接受单次静脉内施用 IMAB362， 并观察28天。IMAB362被良好地耐受，在患者中未观察到相关的安全性后果。在一名患者 中，在治疗后四周内，所测量的全部肿瘤标志物均显著下降。在正在进行的IIa期临床研究 中，重复给予IMAB362。
[0010] 本文所示数据表明，双膦酸/盐/酯（bisphosphonate)(例如唑来膦酸（ZA))，特 别是当与重组白细胞介素-2(IL-2)联合施用时，增强了抗CLDN18. 2抗体（例如IMAB362) 的活性。潜在的机制为活化并扩增高细胞毒性的免疫细胞群（Y9 S 2T细胞）。
[0011] 此外，我们示出这样的数据，其证明化学治疗剂可通过抗CLDN18. 2抗体（例如， IMAB362)来稳定或增加 CLDN18. 2在癌细胞表面上的表达，从而导致CLDN18. 2增强的可药 性。观察到抗CLDN18. 2抗体（例如，IMAB362)与特定的化学治疗方案，特别是用于治疗胃 癌或治疗人实体癌的化学治疗方案的协同效应。用化学治疗预处理的人癌细胞对抗体诱导 的靶特异性杀伤作用更敏感。在小鼠肿瘤模型中，用抗CLDN18. 2抗体加化学治疗控制肿瘤 优于用抗CLDN18. 2抗体作为单一药剂控制肿瘤。
【发明内容】
[0012] 本发明普遍地提供了一种联合治疗，其用于有效治疗和/或预防与表达CLDN18. 2 之细胞相关的疾病，所述疾病包括癌症疾病，例如胃癌、食管癌、胰腺癌、肺癌（例如，非小 细胞肺癌（NSCLC))、卵巢癌、结肠癌、肝癌、头颈癌和胆囊癌及其转移，特别是胃癌转移（例 如，克鲁肯伯格氏肿瘤、腹膜转移和淋巴结转移）。特别优选的癌症疾病为胃、食管、胰管、胆 管、肺和卵巢的腺癌。
[0013] 在一个方面，本发明提供了治疗或预防癌症疾病的方法，所述方法包括向患者施 用能够结合CLDN18. 2的抗体与刺激Y s T细胞之药剂的组合。刺激Y s T细胞的药剂可 在施用能够结合CLDN18. 2的抗体之前、同时或之后施用，或其组合。
[0014] 在一个实施方案中，Y ST细胞为Vy 9V S 2T细胞。在一个实施方案中，刺激Y ST 细胞的药剂为双膦酸/盐/酯，例如，含氮双膦酸/盐/酯（氨基双膦酸/盐/酯）。在一 个实施方案中，刺激Y ST细胞的药剂选自唑来膦酸、氯膦酸、伊班膦酸、帕米膦酸、利塞膦 酸、米诺膦酸、奥帕膦酸、阿仑膦酸、英卡膦酸及其盐。在一个实施方案中，刺激Y S T细胞 的药剂与白细胞介素-2组合施用。
[0015] 在一个实施方案中，本发明方法还包括施用稳定或增加 CLDN18. 2表达的药剂。 CLDN18. 2优选地在癌细胞的细胞表面表达。
[0016] 稳定或增加 CLDN18. 2表达的药剂可为细胞毒剂和/或细胞抑制剂。在一个实施 方案中，稳定或增加 CLDN18. 2表达的药剂包含这样的药剂，其诱导细胞周期停滞或细胞累 积在细胞周期中的一个或更多个时相中，优选在细胞周期除Gl期之外的一个或更多个时 相中。稳定或增加 CLDN18. 2表达的药剂可包括选自以下的药剂：蒽环类药物、钼化合物、核 苷类似物、紫杉烷类和喜树碱类似物或其前药及其组合。稳定或增加 CLDN18. 2表达的药剂 可包括选自表柔比星（epirubicin)、奥沙利钼（oxaliplatin)、顺钼（cisplatin)、5-氟尿 啼陡或其前药（例如，卡培他滨）、多西他赛（docetaxel)、伊立替康（irinotecan)及其组 合的药剂。稳定或增加 CLDN18. 2表达的药剂可包括奥沙利钼与5-氟尿嘧啶或其前药的组 合、顺钼与5-氟尿嘧啶或其前药的组合、至少一种蒽环类药物与奥沙利钼的组合、至少一 种蒽环类药物与顺钼的组合、至少一种蒽环类药物与5-氟尿嘧啶或其前药的组合、至少一 种紫杉烷与奥沙利钼的组合、至少一种紫杉烷与顺钼的组合、至少一种紫杉烷与5-氟尿嘧 啶或其前药的组合或者至少一种喜树碱类似物与5-氟尿嘧啶或其前药的组合。稳定或增 加 CLDN18. 2表达的药剂可为诱导免疫原性细胞死亡的药剂。诱导免疫原性细胞死亡的药 剂可包括选自蒽环类药物、奥沙利钼及其组合的药剂。稳定或增加 CLDN18. 2表达的药剂可 包括表柔比星与奥沙利钼的组合。在一个实施方案中，本发明的方法包括施用至少一种蒽 环类药物、至少一种钼化合物以及至少一种5-氟尿嘧啶和其前药。蒽环类药物可选自表柔 比星、阿霉素、柔红霉素、伊达比星和戊柔比星。优选地，蒽环类药物为表柔比星。钼化合物 可选自奥沙利钼和顺钼。核苷类似物可选自5-氟尿嘧啶和其前药。紫杉烷可选自多西他 赛和紫杉醇。喜树碱类似物可选自伊立替康和拓扑替康。在一个实施方案中，本发明的方 法包括施用（i)表柔比星、奥沙利钼和5-氟尿嘧啶，（ii)表柔比星、奥沙利钼和卡培他滨， (iii)表柔比星、顺钼和5-氟尿嘧啶，（iv)表柔比星、顺钼和卡培他滨，或（V)亚叶酸、奥沙 利钼和5-氟尿嘧啶。
[0017] 本发明的方法还可包括施用至少一种另外的化学治疗剂，所述治疗剂可为细胞毒 剂。
[0018] 能够结合CLDN18. 2的抗体可与活细胞表面上存在的CLDN18. 2的天然表位结合。 在一个实施方案中，能够结合CLDN18. 2的抗体与CLDN18. 2的第一胞外环结合。在一个实 施方案中，能够结合CLDN18. 2的抗体通过以下的一种或更多种来介导细胞杀伤：补体依 赖性细胞毒性（CDC)介导的裂解、抗体依赖性细胞的细胞毒性（ADCC)介导的裂解、诱导凋 亡和抑制增殖。在一个实施方案中，能够结合CLDN18. 2的抗体为单克隆抗体、嵌合抗体或 人源化抗体，或抗体的片段。在一个实施方案中，能够结合CLDN18. 2的抗体为选自以下的 抗体：（i)由以如下登记号保藏的克隆产生的和/或能够从其获得的抗体：DSM ACC2737、 DSM ACC2738、DSM ACC2739、DSM ACC2740、DSM ACC2741、DSM ACC2742、DSM ACC2743、DSM ACC2745、DSM ACC2746、DSM ACC2747、DSM ACC2748、DSM ACC2808、DSM ACC2809 或 DSM ACC2810,（ii) (i)中抗体的嵌合形式或人源化形式的抗体，（iii)具有（i)中抗体的特异性 的抗体，以及（iv)包含（i)中抗体的抗原结合部分或抗原结合位点特别是可变区并且优选 地为具有（i)中抗体的特异性的抗体。在一个实施方案中，抗体与治疗剂（例如毒素、放射 性同位素、药物或细胞毒剂）相偶联。
[0019] 在一个实施方案中，本发明的方法包括以多至lOOOmg/m2的剂量施用能够结合 CLDN18. 2的抗体。在一个实施方案中，本发明的方法包括以300至600mg/m2的剂量重复施 用能够结合CLDN18. 2的抗体。
[0020] 在一个实施方案中，癌症呈CLDN18. 2阳性。在一个实施方案中，癌症疾病选自胃 癌、食管癌、胰腺癌、肺癌、卵巢癌、结肠癌、肝癌、头颈癌、胆囊癌及其转移。癌症疾病可为克 鲁肯伯格氏肿瘤、腹膜转移和/或淋巴结转移。在一个实施方案中，癌症为腺癌，特别是晚 期腺癌。在一个实施方案中，癌症选自胃癌、食管（特别是下段食管）的癌症、食管-胃连 接部（eso-gastric junction)癌和胃食管癌。患者可为HER2/neu阴性患者或具有HER2/ neu阳性状态但不适于进行曲妥珠单抗治疗的患者。
[0021] 根据本发明，CLDN18. 2优选地具有根据SEQ ID NO :1的氨基酸序列。
[0022] 在另一个方面，本发明提供了医药制备物，其包含能够结合CLDN18. 2的抗体和刺 激Y ST细胞的药剂。本发明的医药制备物还可包含稳定或增加 CLDN18. 2表达的药剂。能 够结合CLDN18. 2的抗体和刺激Y S T细胞的药剂以及任选地稳定或增加 CLDN18. 2表达的 药剂可以以混合物或彼此分离的形式存在于医药制备物中。医药制备物可为药盒，所述药 盒包含含有所述能够结合CLDN18. 2之抗体的第一容器和含有所述刺激Y S T细胞之药剂 的容器，以及任选地含有所述稳定或增加 CLDN18. 2表达之药剂的容器。所述医药制备物还 可包含将制备物用于治疗癌症（特别是用于本发明方法的制备物）印刷说明书。医药制备 物不同的实施方案，特别是刺激Y S T细胞的药剂和稳定或增加 CLDN18. 2表达之药剂的不 同的实施方案如上文中对本发明的方法所描述的。
[0023] 本发明还提供了本文所述的药剂，例如，用于本文所述方法中的能够结合 CLDN18. 2的抗体，例如，用于与刺激Y S T细胞的药剂，以及任选地稳定或增加 CLDN18. 2表 达的药剂组合施用。
[0024] 本发明的另一些特征和优点将通过下文的详细描述和权利要求而明显。
【专利附图】
【附图说明】
[0025] 图1.化学治疗对胃癌细胞的作用。将KatoIII细胞培养96个小时导致细胞周期 停滞在G0/G1期且CLDN18. 2下调。导致细胞周期停滞在细胞周期的不同时相的细胞抑制 化合物（S期（5-FU)或G2期（表柔比星））稳定CLDN18. 2表达。
[0026] 图2.化学治疗对胃癌细胞的作用。a/b :化学治疗对胃癌细胞中CLDN18. 2的转 录和蛋白质水平的作用，c :流式细胞术分析结合在经化学治疗剂处理的胃癌细胞上的胞外 IMAB362〇
[0027] 图3.化学治疗对胃癌细胞的作用。导致细胞周期停滞在细胞周期的不同时相的 细胞抑制化合物（S/G2期（伊立替康）或G2期（多西他赛））。
[0028] 图4.经化学治疗剂预处理之后，IMAB362诱导的ADCC介导的胃癌细胞杀伤。
[0029] 图5.化学治疗对胃癌细胞的作用。a:与用培养基培养的靶细胞相比，经伊立替 康、多西他赛或顺钼处理的细胞显示出较低水平的活细胞。b :与用培养基培养的细胞相比， 经伊立替康、多西他赛或顺钼处理的细胞中CLDN18. 2的表达增加。c/d :用伊立替康、多西 他赛或顺钼处理细胞增强了 IMAB362诱导ADCC的效力。
[0030] 图6.化学治疗对IMAB362诱导的⑶C的作用。
[0031] 图7.化学治疗对效应细胞的作用。
[0032] 图8.补充有ZA/IL-2的培养物中PBMC的扩增。
[0033] 图9.补充有ZA/IL-2的PBMC培养物中V Y 9V S 2T细胞的富集。
[0034] 图10.补充有ZA和增加剂量的IL-2的培养基中V Y 9V S 2T细胞的富集。
[0035] 图11.当与ZA脉冲的单核细胞和人癌细胞共孵育时V Y 9V S 2T细胞的扩增和细 胞毒性活性。
[0036] 图12.在PBMC培养物中不同细胞类型的ZA-依赖性发育（development)。
[0037] 图13.经ZA/IL-2处理后，表面标志物在V Y 9V S 2T细胞上的展示。
[0038] 图14?具有IMAB362的V Y 9V S 2T细胞对CLDN18. 2阳性NUGC-4胃癌细胞的ADCC 活性。
[0039] 图15?使用V Y 9V S 2T细胞作为效应细胞的IMAB3 S 2的ADCC。
[0040] 图16. ZA对CLDN18. 2在靶细胞上表面定位的作用。
[0041] 图17.化学治疗和ZA/IL-2处理对效应细胞的作用。
[0042] 图18.小鼠中缀合抗体的生物分布研究。
[0043] 图19. HEK293-CLDN18. 2肿瘤异种移植物的早期治疗。
[0044] 图20.晚期HEK293-CLDN18. 2肿瘤异种移植物的治疗。
[0045] 图21. IMAB362对胃癌异种移植物的皮下肿瘤生长的作用。
[0046] 图22.使用IMAB362的免疫治疗对NCI-N87?CLDN18. 2胃癌异种移植物的作用。
[0047] 图23.使用IMAB362和EOF方案的联合治疗对NCI-N87?CLDN18. 2异种移植物 的作用。
[0048] 图24.使用IMAB362和EOF方案的联合治疗对NUGC-4?CLDN18. 2异种移植物的 作用。
[0049] 图25. ZA/IL-2诱导的V Y 9V S 2T细胞对通过IMAB362控制NSG小鼠中肉眼可见 肿瘤（macroscopic tumor)的作用。
[0050] 图26.使用IMAB362和EOF方案的联合治疗对CLS-103?cldn 18. 2同种异体移 植肿瘤的作用。
【具体实施方式】
[0051] 尽管下文将对本发明作详细描述，但应当理解的是本发明并不局限于本文中所描 述的具体方法学、方案和试剂，因此这些可以变化。还应当理解的是本文中所使用的术语仅 仅是为了描述一些具体的实施方案，并非意图限制本发明的范围，本发明的范围将仅由所 附权利要求限定。除非另有限定，否则本文中使用的所有技术和科学术语的含义与本领域 中普通技术人员通常理解的含义相同。
[0052] 在下文中，将对本发明的要素进行描述。这些要素随具体的实施方案列出，然而， 应当理解的是这些要素可以任意方式和任意数量组合以产生另外的实施方案。各种描述的 实施例和优选实施方案不应解释为将本发明限制于仅明确描述的实施方案。本说明书应当 被理解为支持且涵盖将明确描述的实施方案与任意数量的公开和/或优选要素组合的实 施方案。此外，除非在上下文中另有指出，否则在本申请中所有描述的要素的任意排列和组 合应被认为是由本申请的说明书所公开的。
[0053] 优选地，如 "A multilingual glossary of biotechnological terms : (IUPAC Recommendations) " , H.G.W.Leuenberger, B. Nagel,和 H. K5lbl, Eds. , Helvetica Chimica Acta，CH_4010Basel，Switzerland，（1995)中所述定义本文中使用的术语。
[0054] 除非另有指出，否则本发明的实践将采用化学、生物化学、细胞生物学、免疫学 和重组DNA技术中的常规方法，这些方法在本领域的文献中进行了解释（参见，例如， Molecular Cloning ：A Laboratory Manual,第 2 版，J. Sambrook 等编辑，Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor 1989)〇
[0055] 除非上下文另有要求，否则在整个本说明书和所附权利要求中，词语"包括/包 含"及其变化形式将被理解为意指包括/包含所述成员、整数（integer)或步骤或者成员、 整数或步骤的组，但不排除任何其它的成员、整数或步骤或者成员、整数或步骤的组，尽管 在一些实施方案中可能不包括这样其它的成员、整数或步骤或者成员、整数或步骤的组， 艮P，主题在于包括所述成员、整数或步骤或者成员、整数或步骤的组。除非在本文中另有指 出或明显地与上下文矛盾，否则在描述本发明的上下文中（特别是在权利要求的上下文 中）使用的没有数量词修饰的名词应被解释为涵盖单数和复数两者。本文中引用的数值范 围仅仅旨在用作分别指落入该范围的每个单独值的简写方法。除非在本文中另有指出，否 则每个单独的值都被并入说明书，就像其在本文中被单独引用一样。除非在本文中另有指 出或明显地与上下文矛盾，否则本文中描述的所有方法均可以以任何合适的顺序进行。除 非另有要求，否则本文中提供的任何和所有实例，或示例性语言（例如，"例如"）的使用仅 旨在更好地说明本发明，并非对本发明的范围设定限制。说明书中的语言不应被解释为表 示对实施本发明必不可少的任何未要求保护的要素。
[0056] 贯穿本说明书的正文，引用了几篇文献。本文中引用的每一篇文献（包括所有专 利、专利申请、科学出版物、制造商说明书、说明等），无论上文中还是下文中，均通过引用以 其整体并入本文。本文中没有任何内容应被解释为承认本发明由于先前的发明而无权早于 该公开内容。
[0057] 术语"CLDN18"指密蛋白18,并且包括任意变体，包括密蛋白18剪接变体1(密蛋 白18. I (CLDN18. 1))和密蛋白18剪接变体2 (密蛋白18. 2 (CLDN18. 2))。
[0058] 术语"CLDN18. 2"优选指人CLDN18. 2,并且特别指包含优选由根据序列表的SEQ ID NO :1的氨基酸序列或所述氨基酸序列的变体组成的蛋白质。
[0059] 术语"CLDN18. 1"优选指人CLDN18. 1，并且特别指包含优选由根据序列表的SEQ ID NO :2的氨基酸序列或所述氨基酸序列的变体组成的蛋白质。
[0060] 根据本发明，术语"变体"特别指突变体、剪接变体、构象、同种型、等位基因变体、 种变体（species variant)和种同源物（species homolog)，特别是天然存在的那些。等位 基因变体指基因的正常序列中发生了改变，其显著性通常不明显。对于给定的基因，全基因 测序通常鉴定出多种等位基因变体。种同源物是与给定的核酸或氨基酸序列具有不同物种 来源的核酸或氨基酸序列。术语"变体"应涵盖任何经翻译后修饰的变体和构象变体。
[0061] 根据本发明，术语"CLDN18. 2阳性癌症"意指涉及表达CLDN18. 2之癌细胞的癌症， 优选在所述癌细胞的表面上表达CLDN18. 2。
[0062] "细胞表面"根据其在本领域中的通常含义使用，并因此包括易于被蛋白质和其他 分子结合的细胞外部。
[0063] 如果CLDN18. 2位于细胞的表面并且易于被添加到所述细胞的CLDN18. 2特异性抗 体结合，则CLDN18. 2在所述细胞表面上表达。
[0064] 根据本发明，如果与胃细胞或胃组织中的表达相比，表达水平较低，则CLDN18. 2 在所述细胞中基本不表达。优选地，表达水平为胃细胞或胃组织中的表达的低于10%，优 选地低于5%、3%、2%、1%、0. 5%、0. 1%或0. 05%，或甚至更低。优选地，如果表达水平 超过非癌组织（除胃外）中表达水平不超过2倍，优选1.5倍，并且优选地不超过所述非癌 组织中的表达水平，则CLDN18. 2在所述细胞中基本不表达。优选地，如果表达水平低于检 测界限和/或如果表达水平太低以致于不能被添加至细胞的CLDN18. 2特异性抗体结合，则 CLDN18. 2在所述细胞中基本上不表达。
[0065] 根据本发明，如果表达水平超过非癌组织（除胃外）中表达水平优选2倍以上，优 选10倍、100倍、1000倍或10000倍以上，则CLDN18. 2在细胞中表达。优选地，如果表达水 平高于检测界限和/或如果表达水平足够高使得能够被添加至细胞的CLDN18. 2特异性抗 体结合，则CLDN18. 2在所述细胞中表达。优选地，在细胞中表达的CLDN18. 2在所述细胞表 面上表达或暴露。
[0066] 根据本发明，术语"疾病"指任何病理状态，包括癌症，特别是本文中所描述的那些 形式的癌症。任何本文中提及的癌症或癌症的特别形式还包括其癌症转移。在一个优选实 施方案中，根据本申请，待治疗的疾病涉及表达CLDN18. 2的细胞。
[0067] 根据本发明，"与表达CLDN18. 2之细胞相关的疾病"或类似表达意指CLDN18. 2在 病态组织或器官的细胞中表达。在一个实施方案中，与健康组织或器官中的状况相比，病 态的组织或器官中的CLDN18. 2表达增加。增加指增加至少10%，特别是至少20%、至少 50%、至少100%、至少200%、至少500%、至少1000%、至少10000%，或甚至更多。在一 个实施方案中，表达仅见于病态的组织，而健康组织中的表达被抑制。根据本发明，与表达 CLDN18. 2之细胞相关的疾病包括癌症疾病。此外，根据本发明，癌症疾病优选地为其中癌细 胞表达CLDN18. 2的那些。
[0068] 如本文所用，"癌症疾病"或"癌症"包括具有如下特征的疾病：异常调节性细胞生 长、增殖、分化、粘附和/或迁移。"癌细胞"意指其通过迅速、不受控制的细胞增殖生长并且 能在起始新生长的刺激停止后继续生长的异常细胞。优选地，"癌症疾病"以表达CLDN18. 2 的细胞为特征并且癌细胞表达CLDN18. 2。表达CLDN18. 2的细胞优选地为癌细胞，优选地为 本文所述癌症的癌细胞。
[0069] "腺癌"为源自腺组织的癌症。该组织也是称为上皮组织的一大类组织的一部分。 上皮组织包括皮肤、腺体以及内衬于身体的腔和器官的多种其他组织。在胚胎学上，上皮来 自外胚层、内胚层和中胚层。被归类为腺癌的细胞并不一定必须是腺体的一部分，只要它们 具有分泌特性即可。该形式的癌症可发生在一些包括人在内的高等哺乳动物中。高度分化 的腺癌趋向于与其所来源的腺组织类似，而低分化的腺癌则可能不是这样。通过染色来自 活检的细胞，病理学家将确定肿瘤是腺癌还是一些其他类型的癌症。由于腺体在体内普遍 存在的性质，腺癌可在身体的许多组织中发生。尽管每种腺体可以不分泌相同的物质，但只 要细胞具有外分泌功能，它就可被认为是腺性的，并且它的恶性形式因而被命名为腺癌。只 要有充足的时间，恶性腺癌就侵袭其它组织并且常常转移。卵巢腺癌是最常见的卵巢癌类 型。其包括浆液和粘液腺癌、透明细胞腺癌和子宫内膜样腺癌。
[0070] "转移"是指癌细胞从其初始部位扩散至身体的其它部位。转移的形成是非常复杂 的过程，并依赖于恶性细胞从原发肿瘤脱离，侵袭胞外基质，穿透内皮基底膜进入体腔和血 管，并随后在被血液运输后，浸润靶器官。最后，新肿瘤在靶部位的生长依赖于血管发生。由 于肿瘤细胞或组分可残留并发展出转移潜力，因此即使在去除原发肿瘤后仍经常发生肿瘤 转移。在一个实施方案中，根据本发明的术语"转移"指"远处转移"，其指远离原发肿瘤和 局部淋巴结系统的转移。在一个实施方案中，根据本发明的术语"转移"指淋巴结转移。使 用本发明的治疗可治疗的转移中的一个特定形式为源自胃癌（作为原发部位）的转移。在 一些优选实施方案中，这样的胃癌转移为克鲁肯伯格氏肿瘤、腹膜转移和/或淋巴结转移。
[0071] 克鲁肯伯格氏肿瘤为一种不常见的卵巢转移性肿瘤，占全部卵巢肿瘤的1%至 2%。克鲁肯伯格氏肿瘤的预后仍然很差，并且未建立起用于克鲁肯伯格氏肿瘤的治疗。克 鲁肯伯格氏肿瘤为卵巢转移性指环状细胞（signet ring cell)腺癌。在大多数克鲁肯伯 格氏肿瘤病例（70%)中，胃为原发部位。结肠、阑尾和乳房（主要为侵入性小叶癌）的癌 是第二最常见的原发部位。已报道极少数的克鲁肯伯格氏肿瘤病例源自胆囊、胆管、胰腺、 小肠、法特壶腹（ampulla of Vater)、子宫颈和膀胱/脐尿管的癌。在诊断原发性癌和随后 发现卵巢参与之间的间隔通常为6个月或更短，但已报道过更长的时期。在很多病例中，原 发肿瘤非常小并且可避开检测。在仅20 %至30%的病例中可得到胃或其它器官先前的癌 病史。
[0072] 克鲁肯伯格氏肿瘤为胃-卵巢轴中最普遍的癌症选择性扩散的一个实例。该肿瘤 扩散轴在历史上引起了许多病理学家的注意，特别是当发现胃瘤可在不涉及其它组织的情 况下选择性地转移至卵巢。长期以来，胃癌转移至卵巢的途径一直是个谜，但现在明显的是 逆行淋巴扩散是最可能的转移途径。
[0073] 对患有转移癌的患者来说，患有克鲁肯伯格氏肿瘤的女性不通常趋于为年轻人， 因为她们一般处于她们生命的第五个十年，平均年龄为45岁。该年轻年龄分布可能部分与 年轻女性中胃指环状细胞癌频率升高有关。出现的常见症状通常涉及卵巢参与，其中最常 见的症状为腹部疼痛和膨胀（主要是由于通常两侧的和常常大的卵巢质量）。其余患者具 有非特异性胃肠症状或无症状。此外，据报道，克鲁肯伯格氏肿瘤与由卵巢基质产生激素导 致的男性化有关。腹水存在于50%的病例中并且通常显示恶性细胞。
[0074] 在超过80%的已报道病例中，克鲁肯伯格氏肿瘤是两侧的。卵巢通常不对称地扩 大，并具有有圆凸的轮廓。切面为黄色或白色；它们通常为实心的，但偶为囊状的。重要的 是，具有克鲁肯伯格氏肿瘤的卵巢的囊状表面通常为光滑的并且无粘附或腹膜沉积物。注 意到，其它至卵巢的转移肿瘤倾向与表面移植有关。这可能解释了为什么克鲁肯伯格氏肿 瘤的总体形态可欺骗性地看起来好像原发卵巢肿瘤。然而，克鲁肯伯格氏肿瘤的两侧对称 与其转移性质一致。
[0075] 患有克鲁肯伯格氏肿瘤的患者具有显著高的总死亡率。大多数的患者在2年内死 亡（中值存活为14个月）。几项研究表明当原发肿瘤在发现转移至卵巢之后被鉴定时，预 后差，且如果原发肿瘤保持隐藏，预后变得更差。
[0076] 文献中尚未明确建立针对克鲁肯伯格氏肿瘤的最佳治疗策略。还未充分解决是否 应进行手术切除。化学治疗或放射治疗对患有克鲁肯伯格氏肿瘤的患者的预后无显著作 用。
[0077] "治疗"意指向对象施用化合物或组合物或者化合物或组合物的组合以预防或消 除疾病，包括减小对象中的肿瘤大小或肿瘤数目、停滞或减缓对象中的疾病、抑制或减缓对 象中新疾病的发展、降低目前患有或以前曾患有疾病的对象中症状和/或复发的频率或严 重程度，和/或延长，即增加对象的寿命。
[0078] 特别地，术语"疾病的治疗"包括疾病或其症状的治愈、缩短持续时间、减轻、预防、 减缓或抑制发展或恶化，或者预防或延迟发生。
[0079] 根据本发明，术语"患者"意指治疗对象，特别是患病的对象，包括人类、非人灵长 类或其它动物，特别是哺乳动物，例如，牛、马、猪、绵羊、山羊、狗、猫或啮齿目动物（例如， 小鼠和大鼠）。在一个特别优选实施方案中，患者为人类。
[0080] Y s T细胞（伽马德耳塔T细胞）表示T细胞中在其表面上具有不同T细胞受体 (TCR)的小亚类。大多数T细胞具有由两个糖蛋白链（称为a-TCR和P-TCR链）构成的 TCR。相比之下，在Y ST细胞中，TCR由一个Y链和一个S链构成。该组T细胞通常比a 3T细胞不常见得多。人Y ST细胞在应激-监督应答（stress-surveillance response) (例如，感染性疾病和自身免疫）中起着重要作用。肿瘤中转化诱导的改变还表明造成了由 Y S T细胞介导的应激-监督应答并且增强抗肿瘤免疫。重要的是，在抗原接合后，病变部 位中被活化的Y ST细胞提供介导其它效应细胞募集的细胞因子（例如，INFy、TNFa)和 /或趋化因子，并且表现出立即的效应功能例如细胞毒性（通过死亡受体和溶细胞颗粒途 径）和ADCC。
[0081] 在外周血中，大多数Y ST细胞表达Vy 9V S 2T细胞受体（TCRy 8)。VY 9V S 2T 细胞是人类和灵长类动物特有的，并且由于V Y 9V S 2T细胞在很多急性感染中显著扩增并 且可在几日内超过诸如以下病中的所有其他淋巴细胞，例如，结核病、沙门菌病、埃里希菌 病、布氏菌病、土拉菌病、利斯特菌病、弓形体病和疟疾，因此被认为在通过侵入病原体感知 "危险"中起着早期和必要作用。
[0082] Y S T细胞对小的非肽磷酸化抗原（磷酸抗原）产生应答，例如，细菌中合成的焦 磷酸盐和哺乳动物细胞中通过甲羟戊酸途径产生的异戊烯基焦磷酸（IPP)。尽管正常细胞 中的IPP产生不足以活化Y ST细胞，肿瘤细胞中甲羟戊酸途径的调节异常导致IPP的累 积和Y ST细胞活化。IPP还可通过氨基双膦酸/盐/酯在治疗上增加，这抑制甲羟戊酸 途径酶法呢焦磷酸合酶（FPPS)。其中，唑来膦酸（zoledronic acid) (ZA，唑来膦酸盐/酯， Zometa?，Novartis)是这种氨基双磷酸盐的代表，其已向患者临床施用来治疗骨质疏松症 和转移性骨疾病。当体外治疗PBMC时，ZA特别由单核细胞摄取。IPP在单核细胞中累积 并且它们分化成刺激Y S T细胞发育的抗原呈递细胞。在这种情况下，优选添加白细胞介 素-2 (IL-2)作为活化的Y ST细胞的生长和存活因子。最后，已经描述了一些体外活化 V Y 9V S 2T细胞的烷基化胺，不过仅以毫摩尔的浓度。
[0083] 根据本发明，术语"刺激Y S T细胞的药剂"指在体外和/或体内，特别是通过诱 导Y S T细胞的活化和扩增来刺激Y S T细胞，特别是V Y 9V S 2T细胞发育的化合物。优 选地，该术语指在体外和/或体内，优选通过抑制甲羟戊酸途径酶法呢焦磷酸合酶（FPPS) 来增加哺乳动物细胞中产生的异戊烯基焦磷酸（IPP)的化合物。
[0084] 刺激Y S T细胞的一组特定的化合物为双膦酸/盐/酯，特别是含氮双膦酸/盐 /酯（N-双膦酸/盐/酯；氨基双膦酸/盐/酯）。
[0085] 例如，适用于本发明中的双膦酸/盐/酯可包括下列化合物中的一种或更多种，所 述化合物包括类似物和衍生物、药用盐、水合物、酯、缀合物及其前药：
[0086] [1-羟基-2_(1H-咪唑-1-基）乙烷-1，1_二基]双（膦酸），唑来膦酸，例如，唑 来膦酸盐/酯；
[0087](二氯_膦酰基_甲基）膦酸，例如，氯膦酸盐/酯；
[0088] {1-羟基-3-[甲基（戊基）氨基]丙烷-1，1_二基}双（膦酸），伊班膦酸，例如， 伊班膦酸盐/酯；
[0089] (3-氨基-1-羟基丙烷-I，1-二基）双（膦酸），帕米膦酸，例如，帕米膦酸盐/酯；
[0090] (1 一羟基-1-膦酰基-2-吡啶-3-基-乙基）膦酸，利塞膦酸，例如，利塞膦酸盐 /醋；
[0091] (1-羟基-2-咪唑并[l，2-a]吡啶-3-基-1-膦酰基乙基）膦酸，米诺膦酸；
[0092] [3_(二甲基氨基）-1_羟基丙烷-1，1_二基]双（膦酸），奥帕膦酸（olpadronic acid)；
[0093] [4-氨基-1-羟基-1-(羟基-氧代-磷酰基）_ 丁基]膦酸，阿仑膦酸，例如，阿仑 膦酸盐/酯；
[0094][(环庚基氨基）亚甲基]双（膦酸），英卡膦酸；
[0095] (1-羟基乙烷-1，1-二基）双（膦酸），羟乙膦酸，例如，羟乙膦酸盐/酯；以及
[0096] {[(4-氯苯基）硫代]亚甲基}双（膦酸），替鲁膦酸。
[0097] 根据本发明，唑来膦酸（INN)或唑来膦酸盐/酯（由Novartis以商品名Zometa、 Zomera、Aclasta和Reclast市售）为特别优选的双膦酸/盐/酯。Zometa用于预防患有 癌症（例如，多发性骨髓瘤和前列腺癌）的患者骨折以及治疗骨质疏松症。其还可用于治 疗恶性高钙血症并且可有益于治疗来自骨转移的疼痛。
[0098] 在一个特别优选的实施方案中，根据本发明刺激Y S T细胞的药剂与IL-2组合施 用。已表明，该组合可特别有效地介导Y9 S 2T细胞的扩增和活化。
[0099] 白细胞介素-2(IL_2)为一种白细胞介素，即免疫系统中的一类细胞因子信号转 导分子。其是一种吸引淋巴细胞的蛋白质，并且为对微生物感染以及区分外源（非自身） 和自身的身体自然应答的一部分。IL-2通过与淋巴细胞表达的IL-2受体结合来介导其效 应。
[0100] 根据本发明使用的IL-2可为任何支持或能够刺激Y ST细胞的IL-2,并且可来自 任何物种，优选人。IL-2可为分离的、重组产生的或合成的IL-2,还可为天然存在或修饰的 IL-2。
[0101] 术语"稳定或增加 CLDN18. 2表达的药剂"指药剂或药剂组合，其中，与不向细胞提 供药剂或药剂组合的情况相比，向细胞提供所述药剂或药剂组合导致CLDN18. 2的RNA和/ 或蛋白质水平提高，优选地导致细胞表面的CLDN18. 2蛋白质水平提高。优选地，细胞为癌 细胞，特别是表达CLDN18. 2的癌细胞，例如，本文所述癌症类型的细胞。术语"稳定或增加 CLDN18. 2表达的药剂"特别指药剂或药剂组合，其中，与不向细胞提供药剂或药剂组合的情 况相比，向细胞提供所述药剂或药剂组合导致所述细胞表面上具有更高密度的CLDN18. 2。 "稳定CLDN18. 2的表达"包括，特别是，药剂或药剂组合防止CLDN18. 2表达降低或减小 CLDN18. 2表达降低的情况，例如，在不提供药剂或药剂组合的情况下，CLDN18. 2的表达将 降低，并且提供药剂或药剂组合防止CLDN18. 2表达的所述降低或减小CLDN18. 2表达的所 述降低。"增加 CLDN18. 2的表达"包括，特别是，药剂或药剂组合增加 CLDN18. 2表达的情况， 例如，在不提供药剂或药剂组合的情况下，CLDN18. 2的表达将降低、基本保持不变或增加， 而与不提供药剂或药剂组合的情况相比，提供药剂或药剂组合增加 CLDN18. 2的表达，使得 与在不提供药剂或药剂组合下，CLDN18. 2的表达将降低、基本保持不变或增加的情况相比， 得到的表达更高。
[0102] 根据本发明，术语"稳定或增加 CLDN18. 2表达的药剂"包括化学治疗剂或化学治 疗剂（例如，细胞抑制剂）的组合。化学治疗剂可以以下列方式中的一种来影响细胞：（1) 损伤细胞DNA使其再不能复制，（2)抑制新DNA链的合成，使得不能进行细胞复制，（3)阻止 细胞的有丝分裂过程，使得细胞不能分裂成两个细胞。
[0103] 根据本发明，术语"稳定或增加 CLDN18. 2表达的药剂"优选指药剂或药剂的组合 (例如，细胞抑制化合物或细胞抑制化合物的组合），向细胞（特别是癌细胞）提供所述药 剂或药剂组合导致细胞停滞或累积在细胞周期的一个或更多个时相中，优选细胞周期中除 Gl期和GO期之外，优选在除Gl期之外的一个或更多个时相中，优选在细胞周期G2期或S 期中的一个或更多个中（例如，细胞周期中的G1/G2期、S/G2期、G2期或S期）。术语"细 胞停滞或累积在细胞周期的一个或更多个时相中"意指处于所述细胞周期的一个或更多个 时相中的细胞的百分数增加。每个细胞经历包含四个时相的周期以自我复制。称为Gl的 第一时相为细胞准备复制其染色体时。第二时相称为S，在此时相发生DNA合成且DNA进行 复制。下一时相为G2期,此时RNA和蛋白质复制。最后时相为M期,其为实际细胞分裂的 时相。在此最后时相中，已复制的DNA和RNA分开（split)并且向细胞分开的端部移动，细 胞实际上分裂为两个相同的功能性细胞。化学治疗剂，即DNA损伤剂，通常导致细胞在Gl 期和/或G2期累积。通过干扰DNA合成来阻断细胞生长的化学治疗剂（例如，抗代谢物） 通常导致细胞在S期的累积。这些药物的实例为6-巯基嘌呤和5-氟尿嘧啶。
[0104] 根据本发明，术语"稳定或增加 CLDN18. 2表达的药剂"包括蒽环类药物，例如表柔 比星、钼化合物（例如，奥沙利钼和顺钼）、核苷类似物（例如，5-氟尿嘧啶或其前药）、紫杉 烷类（例如，多西他赛）和喜树碱类似物（例如，伊立替康和拓扑替康）以及药物的组合， 例如，包含一种或更多种蒽环类药物（例如，表柔比星）、奥沙利钼和5-氟尿嘧啶的组合，例 如，包含奥沙利钼和5-氟尿嘧啶的药物组合或本文所述的其它药物组合。
[0105] 在一个优选实施方案中，"稳定或增加 CLDN18. 2表达的药剂"为"诱导免疫原性细 胞死亡的药剂"。
[0106] 在特定情况下，癌细胞可进入与时空限定的信号组合之发出相关联的致死应激途 径（lethal stress pathway),所述途径可通过免疫系统解码以激活肿瘤特异性免疫应答 (Zitvogel L.等.（2010)Celll40:798-804)。在这种情况下，癌细胞被触发以发出信号，该 信号可被先天免疫效应器（例如，树突细胞）感知从而触发与CD8+T细胞和IFN-Y信号传 导相关的同源免疫应答，使得肿瘤细胞死亡可引发有效的（productive)抗癌免疫应答。这 些信号包括凋亡前内质网（ER)伴侣钙网蛋白（CRT)暴露在细胞表面、凋亡前ATP的分泌和 凋亡后核蛋白HMGBl的释放。总之，这些过程构成了免疫原性细胞死亡（ICD)的分子决定 因素。蒽环类药物、奥沙利钼和Y辐射能够诱导所有限定ICD的信号，而例如顺钼，不能诱 导CRT从ER向死亡细胞表面转位（需要ER应激的过程）需要通过毒胡萝卜素（一种ER 应激诱导物）互补。
[0107] 根据本发明，术语"诱导免疫原性细胞死亡的药剂"指这样的药剂或药剂组合，当 向细胞（特别是癌细胞）提供所述药剂或药剂组合时，其能够诱导细胞进入最后导致肿瘤 特异性免疫应答的致死应激途径。特别地，当向细胞提供诱导免疫原性细胞死亡的药剂 时，其诱导细胞发出时空限定的信号组合，包括，特别是，凋亡前内质网（ER)伴侣钙网蛋白 (CRT)暴露在细胞表面、凋亡前ATP的分泌和凋亡后核蛋白HMGBl的释放。
[0108] 根据本发明，术语"诱导免疫原性细胞死亡的药剂"包括蒽环类药物和奥沙利钼。
[0109] 蒽环类药物是一类通常用于癌症化学治疗中的药物，其也为抗生素。在结构上，所 有的蒽环类药物共有四环7,8,9,10-四氢并四苯-5,12-醌结构并且通常需要在特异位点 进行糖基化。
[0110] 蒽环类药物优选进行下列作用机制中的一种或更多种：1.通过插入DNA/RNA链的 碱基对之间来抑制DNA和RNA的合成，从而防止迅速生长的癌细胞的复制；2.抑制拓扑异 构酶II，防止超螺旋DNA松弛并由此阻断DNA转录和复制；3.产生铁介导的损伤DNA和细 胞膜的游离氧自由基。
[0111] 根据本发明，术语"蒽环类药物"优选指优选通过抑制DNA与拓扑异构酶II再结 合来诱导凋亡的药剂，优选抗癌药剂。
[0112] 优选地，根据本发明，术语"蒽环类药物"一般指具有以下环结构的一类化合物，
[0113]
【权利要求】
1. 一种治疗或预防癌症疾病的方法，其包括向患者施用能够结合CLDN18. 2的抗体与 刺激Y ST细胞的药剂的组合。
2. 权利要求1的所述方法，其中所述Y S T细胞为V y 9V S 2T细胞。
3. 权利要求1或2所述的方法，其中所述刺激y S T细胞的药剂为双膦酸/盐/酯。
4. 权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述刺激y ST细胞的药剂为含氮双膦 酸/盐/酯（氨基双膦酸/盐/酯）。
5. 权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述刺激y S T细胞的药剂选自唑来膦 酸、氯膦酸、伊班膦酸、帕米膦酸、利塞膦酸、米诺膦酸、奥帕膦酸、阿仑膦酸、英卡膦酸及其 盐。
6. 权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述刺激y S T细胞的药剂与白细胞介 素-2组合施用。
7. 权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述方法还包括施用稳定或增加 CLDN18. 2表达的药剂。
8. 权利要求7所述的方法，其中CLDN18. 2在癌细胞的细胞表面表达。
9. 权利要求7或8所述的方法，其中所述稳定或增加 CLDN18. 2表达的药剂包含这样的 药剂，其诱导细胞周期停滞或者细胞累积在细胞周期的一个或更多个时相中，优选地在细 胞周期中除G1期之外的一个或更多个时相中，更优选地在G2期和/或S期中。
10. 权利要求7至9中任一项所述的方法，其中所述稳定或增加 CLDN18. 2表达的药剂 包含选自以下的药剂：蒽环类药物、钼化合物、核苷类似物、紫杉烷类和喜树碱类似物或其 前药及其组合。
11. 权利要求7至10中任一项所述的方法，其中所述稳定或增加 CLDN18. 2表达的药剂 包含选自以下的药剂：表柔比星、奥沙利钼、顺钼、5-氟尿嘧陡或其前药、多西他赛、伊立替 康及其组合。
12. 权利要求7至11中任一项所述的方法，其中所述稳定或增加 CLDN18. 2表达的药剂 包含：奥沙利钼与5-氟尿嘧啶或其前药的组合、顺钼与5-氟尿嘧啶或其前药的组合、至少 一种蒽环类药物与奥沙利钼的组合、至少一种蒽环类药物与顺钼的组合、至少一种蒽环类 药物与5-氟尿嘧啶或其前药的组合、至少一种紫杉烷与奥沙利钼的组合、至少一种紫杉烷 与顺钼的组合、至少一种紫杉烷与5-氟尿嘧啶或其前药的组合，或者至少一种喜树碱类似 物与5-氟尿嘧啶或其前药的组合。
13. 权利要求7至12中任一项所述的方法，其中所述稳定或增加 CLDN18. 2表达的药剂 为诱导免疫原性细胞死亡的药剂。
14. 权利要求13所述的方法，其中所述诱导免疫原性细胞死亡的药剂包含选自蒽环类 药物、奥沙利钼及其组合的药剂。
15. 权利要求7至14中任一项所述的方法，其中所述稳定或增加 CLDN18. 2表达的药剂 包含表柔比星与奥沙利钼的组合。
16. 权利要求7至15中任一项所述的方法，其中所述方法包括施用至少一种蒽环类药 物、至少一种钼化合物和至少一种5-氟尿嘧啶及其前药。
17. 权利要求10至16中任一项所述的方法，其中所述蒽环类药物选自表柔比星、阿霉 素、柔红霉素、伊达比星和戊柔比星，并且优选表柔比星。
18. 权利要求10至17中任一项所述的方法，其中所述钼化合物选自奥沙利钼和顺钼。
19. 权利要求10至18中任一项所述的方法，其中所述核苷类似物选自5-氟尿嘧啶及 其前药。
20. 权利要求10至19中任一项所述的方法，其中所述紫杉烷选自多西他赛和紫杉醇。
21. 权利要求10至20中任一项所述的方法，其中所述喜树碱类似物选自伊立替康和拓 扑替康。
22. 权利要求7至21中任一项所述的方法，其中所述方法包括施用（i)表柔比星、奥沙 利钼和5-氟尿嘧啶，（ii)表柔比星、奥沙利钼和卡培他滨，（iii)表柔比星、顺钼和5-氟尿 嘧啶，（iv)表柔比星、顺钼和卡培他滨或者（v)亚叶酸、奥沙利钼和5-氟尿嘧啶。
23. 权利要求1至22中任一项所述的方法，其中所述能够与CLDN18. 2结合的抗体与 CLDN18. 2的第一胞外环结合。
24. 权利要求1至23中任一项所述的方法，其中所述能够与CLDN18. 2结合的抗体通过 以下的一种或更多种来介导细胞杀伤：补体依赖性细胞毒性（CDC)介导的裂解、抗体依赖 性细胞的细胞毒性（ADCC)介导的裂解、诱导凋亡和抑制增殖。
25. 权利要求1至24中任一项所述的方法，其中所述能够与CLDN18. 2结合的抗体为 选自以下的抗体：（i)由以登录号 DSM ACC2737、DSM ACC2738、DSM ACC2739、DSM ACC2740、 DSM ACC2741、DSM ACC2742、DSM ACC2743、DSM ACC2745、DSM ACC2746、DSM ACC2747、DSM ACC2748、DSM ACC2808、DSM ACC2809或DSM ACC2810保藏的克隆产生和/或能够从其获得 的抗体；（ii) (i)中所述抗体的嵌合或人源化形式的抗体；（iii)具有（i)中所述抗体的特 异性的抗体；以及（iv)包含（i)中所述抗体的抗原结合部分或抗原结合位点特别是可变区 并优选具有（i)中所述抗体的特异性的抗体。
26. 权利要求1至25中任一项所述的方法，其中所述方法包括以多至1000mg/m2的剂 量施用所述能够与CLDN18. 2结合的抗体。
27. 权利要求1至26中任一项所述的方法，其中所述方法包括以300mg/m2至600mg/m2的剂量重复施用所述能够与CLDN18. 2结合的抗体。
28. 权利要求1至27中任一项所述的方法，其中所述癌症呈CLDN18. 2阳性。
29. 权利要求1至28中任一项所述的方法，其中所述癌症为腺癌，特别是晚期腺癌。
30. 权利要求1至29中任一项所述的方法，其中所述癌症选自胃癌、食管癌，特别是下 段食管癌、食管-胃连接部癌和胃食管癌。
31. 权利要求1至30中任一项所述的方法，其中所述患者为HER2/neu阴性患者或者具 有HER2/neu阳性状态但不适于进行曲妥珠单抗治疗的患者。
32. 权利要求1至31中任一项所述的方法，其中CLDN18. 2具有根据SEQ ID NO :1的 氨基酸序列。
33. -种医药制备物，其包含能够与CLDN18. 2结合的抗体和刺激y ST细胞的药剂。
34. 权利要求33所述的医药制备物，其还包含稳定或增加 CLDN18. 2表达的药剂。
35. 权利要求33或34所述的医药制备物，其为包含以下的药盒：含有所述能够与 CLDN18. 2结合之抗体的第一容器和含有所述刺激y ST细胞之药剂的容器，以及任选地含 有稳定或增加 CLDN18. 2表达之药剂的容器。
36. 权利要求33至35中任一项所述的医药制备物，其还包含将所述制备物用于治疗癌 症的印刷说明书。
【文档编号】A61K45/06GK104427999SQ201380026898
【公开日】2015年3月18日 申请日期:2013年5月21日 优先权日:2012年5月23日
【发明者】乌尔·沙欣, 厄兹莱姆·图雷奇, 里塔·米特纳赫特-克劳斯, 斯特凡·丹尼斯·雅各布斯, 玛格达列娜·雅德维加·乌奇, 科妮莉亚·阿德里安娜·马里亚·海因茨, 克里斯蒂亚娜·雷吉娜·斯塔德勒 申请人:加尼梅德药物公司, 约翰·古腾堡大学美因兹医学大学转化肿瘤学公司