SorCS1在治疗肥胖症及超重中的应用的制作方法
【专利摘要】本发明涉及SorCS1样药剂，包括SorCS1、编码SorCS1及其片段的表达的核酸分子以及含有所述核酸的载体，以及表达SorCS1和所述片段的细胞，用于降低食欲，和/或促进减重和/或治疗肥胖症和/或增加代谢和/或增加产热，和/或将白色脂肪转化为褐色脂肪的方法。
【专利说明】SorCSI在治疗肥胖症及超重中的应用
[0001] 本申请主张2012年4月17日递交的丹麦专利申请No. PA 201270191的优先权。 将该申请和本申请中引用的所有文献全部引入作为参考。
【技术领域】
[0002] 本发明涉及通过给予SorCSl，优选SorCSl多肽及其可溶性片段和变体来降低食 欲、抑制饥饿和/或治疗肥胖症的方法。
【背景技术】
[0003] 肥胖症是身体脂肪已积累到可能对健康产生不利影响的程度的医学状况。在临床 上，世界卫生组织（WHO)将肥胖症定义为身体质量指数（BMI)超过30。在肥胖人群中，可 以基于肥胖症的严重性定义出三个不同的子类，I级肥胖症（BMI 30. 0-34. 9)，II级肥胖症 (BMI 35. 0-39. 9)和III级肥胖症（BMI超过40)，这也是对公共健康行动的渐增问题。据 估计，丹麦全体成年人中高达15%罹患肥胖症（BMI>30)。
[0004] 肥胖症的不良后果是负面的社会形象、心血管疾病和2型糖尿病（Darvall et al. , Eur J Vase Endovasc Surg 2007, Haslam&James, Lancet 2005, Vernochet et al·, FEBS J 2009, Yusuf et al·, Lancet 2004)，以及某些癌症（Roberts et al·, Annu Rev Med 2009)。除这些不利影响外，肥胖症也与一些其他的合并症如精神紊乱和神经紊乱相关 联（Beydoun et al.，Obes Rev 2008, Harney et al.，Pain Med 2007)〇
[0005] 目前，肥胖症是全球范围内造成疾病负担的最重要的危险因素，并且在美国是继 吸烟后第二大可预防的死亡成因 （Mokdad et al.，JAMA 2004)。2005年，11亿成年人和 10%的儿童被归类为超重或肥胖症（Haslam&James，Lancet 2005)。在欧洲，肥胖症的发 病率在不断增加，并可能甚至更严重；儿童肥胖症变得越来越普遍（Livingstone, Public Health Nutr 2011)〇
[0006] 目前的肥胖症治疗包括饮食改变、运动和活动、行为改变、处方减肥药和减肥 手术。在售和在研发中的减肥药包括旨在减少胃肠（GI)道（Orlistat)或各种方式吸 收来限制食物摄入量和抑制饥饿感的分子（Phentermine、Pramlintide、Exenatide、 Liraglutide)。然而，只有Orlistat和Phentermine被批准作为减肥药销售。 Orlistat(Xenical)通过抑制胰脂肪酶来减少肠道对脂肪的吸收。使用Orlistat的一些 副作用包括频繁的油性排便（脂肪泻）。但是，如果饮食中的脂肪减少，通常症状会改善。 Orlistat开始时只是可售处方药，在2007年2月美国FDA批准柜台出售。Phentermine 是一种苯乙胺类的精神兴奋药，药理学与安非他明类似。它被批准作为食欲抑制剂，在短 期使用并配合运动、饮食和行为改变时帮助肥胖症患者减重。Pramlintide(Symlin)是激 素 Amylin的合成类似物，Amylin是正常人响应于进食而由胰腺分泌的。除其他的作用外， Amylin还延缓胃排空并促进饱腹感。许多糖尿病人缺乏Amylin。Symlin只被批准与胰岛 素一起用于1型和2型糖尿病人。然而，目前正在非糖尿病人中检测Symlin对于肥胖症的 治疗。Exenatide(Byetta)是激素 GLP-I的长效类似物，其是肠响应于食物的存在而分泌 的。除其他作用外，GLP-I还延缓胃排空并促进饱腹感。一些肥胖症的人都缺乏GLP-1，并 且节食进一步降低GLP-1。Byetta目前市售用于2型糖尿病的治疗。有些，但不是所有的 患者发现，他们服用Byetta时大量减重。然而，Byetta仅被批准并推荐用于2型糖尿病患 者。Liraglutide(Victoza)是一种长效胰高血糖素样肽-I(GLP-I)类似物。除其他作用 夕卜，Victoza增加胰岛素分泌、延缓胃排空并抑制餐后胰高血糖素分泌。Victoza目前市售 用于2型糖尿病的治疗。有些患者发现，他们服用Victoza时大量减重。然而，Victoza只 被批准并推荐用于2型糖尿病的治疗。
[0007] 减肥手术包括胃旁路手术、腹腔镜可调节胃束带术（LAGB)、胃袖状切除和十二指 肠转位术。
[0008] VpslOp-域（VpslOp-D)受体家族包括受体分选蛋白（Sortilin)、SorLA、 SorCSl、SorCS2和SorCS3。它们都是1型跨膜受体，具有与VpslOp高度序列同一性的 N端VpslOp-域的特征性结构特征，VpslOp是酵母中的一种分选蛋白（10)。最近的研 宄结果显示，分选蛋白和SorLA作为神经元存活和死亡的调控物发挥着重要的作用（11， 12, WO 2004/056385, WO 2008/074329)。令人感兴趣的是，分选蛋白也与调节葡萄糖摄取 的胰岛素相关，因为它可促进葡萄糖转运体GLUT4从细胞内室向血浆膜转移（13,14, WO 2010/142296)。
[0009] SorCSl是一种受体，其除了其他组织外，在脑、胰腺、脂肪组织和肌肉中表 达。遗传研宄表明，SORCSl基因在人类（Nat Genet. 2006Jun ;38 (6) : 688-93)，大鼠 (Genetics. 2006Nov ; 174 (3) : 1565-72)和小鼠（Diabetes. 2007Jul ;56 (7) : 1922-9)中的基 因多态性与2型糖尿病的发展风险相关联。
[0010] SorCSl在VpslOp-D受体中是独特的，因为它以几种不同的剪接变体存在，表示为 SorCSl-a、b、c、c+和d，它们编码相同的细胞外和跨膜部分，以及不同长度和序列的细胞质 域（10，11)。已经证明，除了神经系统以外，SorCSl还在脂肪组织、骨骼肌和胰腺的β细胞 中表达（W0 2010/142296)。
[0011] 还已证明（W0 2010/142296)，SorCSl可以结合胰岛素受体（IR)并稳定其在肌肉 和脂肪组织中的表达，因此确保了对胰岛素的应答能力。支持这一观点的是，用SorCSl的 胞外域（可溶性SorCSl)进行处理造成db/db小鼠（肥胖症依赖的2型糖尿病小鼠）中血 浆葡萄糖和胰岛素水平都明显降低。
【发明内容】
[0012] SorCSl是哺乳动物VpslOp-域（VpslOp-D)受体家族的五个成员之一，该受体家族 还包括分选蛋白、SorLA、SorCS2和SorCS3。SorCSl在VpslOp-D受体中是独特的，因为它 以几种不同的剪接变体存在。
[0013] 本发明的发明人已经发现向受试者给予SorCSl，并且特别是SorCSl多肽的胞外 结构域（可溶性SorCSl或sSorCSl)造成被治疗的受试者显著减重。
[0014] 因此，本发明的一个目的是提供能够降低食欲，和/或抑制饥饿和/或增加对饥饿 的抑制，和/或增加预期消耗的减少和/或增加食欲的降低，和/或增加饱腹感和/或治疗 肥胖症和/或促进减重，和/或增加代谢，和/或将白色脂肪转化为褐色脂肪的方法和药 剂。后者造成接受SorCSl治疗的受试者的产热增加。因此，本发明还涉及增加受试者产热 的方法。
[0015] 因此，在一个主要方面，本发明的涉及选自下组的药剂：
[0016] a) 一种分离的多肽，包括：
[0017] i) SEQ ID NO : 15的氨基酸序列；或
[0018] ii)i)的氨基酸序列的生物活性序列变体，其中，所述变体与所述SEQ ID NO :15 具有至少60%的序列同一性，
[0019] 至ii)的任一项的至少15个连续氨基酸的生物学活性片段，所述片段与 SEQ ID NO :15在至少15个氨基酸的重叠范围内具有至少60%的序列同一性，
[0020] b)编码如在a)中所限定的多肽的核酸序列；
[0021] c)包含如在b)中所限定的核酸分子的载体，
[0022] d)转化或转导有b)的核酸或c)的载体的分离的宿主细胞，在用于降低食欲，和/ 或用于促进减重和/或治疗肥胖症和/或增加代谢，和/或增加产热，和/或将白色脂肪转 化为褐色脂肪的方法中使用。
[0023] 本发明的药剂可以适合递送至受试者的方式来配制。因此，在一个方面，本发明涉 及一种包括本文上述定义的药剂的药物组合物。在一个方面，本发明涉及包含所述药物组 合物以及使用说明（如向受试者给药的说明书）的试剂盒。
[0024] 发明详细说明
[0025] 定义
[0026] 除非特别说明，本文使用的所有技术和科学术语都具有本发明所属领域技术人员 所理解的常用含义。为了理解本发明，对以下术语进行解释。
[0027] 酷化:如本文使用的术语"酷化"或"酷化基团"是指R-(C = 0)-基团，其中R是选 自直链或支链，饱和或不饱和碳链，任选地包括一个或多个0、N、S或P，如直链或支链的烷 烃羧酸。合适的酰化基团的各种实例描述于W02006/037810、W000/34331、W02006/097537、 W02011/080103。特别是，合适的酰化基团的实例具有结构CH3 (CH2) nCO-，其中η为4-40,例 如8-22,例如选自下组的酰化基团：
[0028] CH3 (CH2) 8C0-、CH3 (CH2) 9C0-、CH3 (CH2) 1(IC0-、CH3 (CH2) UC0-、CH3 (CH2) 12C0-、 CH3 (CH2) 13C0-、CH3 (CH2) 14C0-、CH3 (CH2) 15C0-、CH3 (CH2) 16C0-、CH3 (CH2) #0-、CH3 (CH2) 18C0-、 CH3(CH2) 19C0-、CH3(CH2)2QC〇-、CH 3(CH2)21CO-和 CH3(CH2)22C〇-。合适的酰化基团的进一步 的实例具有结构HOOC-(CH 2)nCO-,其中η是4-40,例如12至20,典型地，HOOC-(CH2) 14C0-、 HOOC- (CH2) 15C0-、H00C- (CH2) 16C0-、H00C- (CH2) 17C0-和 HOOC- (CH2) 18C0-。酰化基团的进一步 实例也参见US5, 905, 140。
[0029] 佐逝:与施予的免疫原决定簇/抗原混合，增强或者改变对所述决定簇的免疫反 应的任意物质。
[0030] 亲和力:大多数配体与它们的结合位点的相互作用可以根据结合亲和力来描述。 一般来说，高亲和力配体结合是由在配体与它的受体之间较大的分子间力而产生的，而低 亲和力配体结合涉及在配体与它的受体之间有较小的分子间力。一般来说，高亲和力结合 与低亲和力结合相比，配体在它的受体结合位点处有更长的保留时间。当某些结合能可以 用于引起受体的构象变化时，配体与受体的高亲和力结合通常在生理学上是很重要的，导 致了相关离子通道或酶的行为发生改变。
[0031] 可以与受体结合、改变受体功能并引发生理反应的配体被称为该受体的激动剂。 与受体结合的激动剂可以根据引发生理反应的程度以及产生该生理反应所需的激动剂的 浓度来描述。高亲和力配体结合意味着相对低浓度的配体就足以最大地占据配体结合位点 并引发生理反应。低亲和力结合意味着需要相对高浓度的配体才能最大地占据结合位点并 达到对该配体的最大生理反应。配体结合通常根据一半受体结合位点被占据时的配体浓度 来表征，称为解离常数（k d)。亲和力也指受体与它们的配体（例如抗体与它的抗原）之间 的结合强度。
[0032] 激动剂:激动剂是能够增加或影响受体活性的化合物。具体地，VpslOp域受体激 动剂是能够结合VpslOp域受体的一个或多个结合位点，从而引发与给定的内源性激动剂 配体化合物相同生理反应的化合物。
[0033] 拮抗剂:拮抗剂在本申请中与抑制剂同义。拮抗剂是能够降低效应体（如受体） 活性的化合物。具体地，VpslOp域受体诘抗剂是能够结合VpslOp域受体的一个或多个结 合位点，从而抑制另一种配体的结合并因此抑制生理反应的化合物。
[0034] 抗述:本文所指的术语"抗体"包括整个抗体和任意抗原结合片段（即"抗原结合 部分"）或其单链。
[0035] 多克隆抗体：多克隆抗体是识别给定的特异性抗原的抗体分子的混合物，因此多 克隆抗体可识别所述抗原内的不同表位。
[0036] 芳香基:术语"芳香基"或"芳基"表示单或多环芳香碳水化合物基团。
[0037] 结合位点:本文使用的术语"结合位点"或"结合口袋"，指分子或分子复合体因其 形状而有利地与另一种分子、分子复合体、化学实体或化合物相联系的区域。如本文所述， 口袋包括至少一个深腔和可选的一个浅腔。
[0038] 牛物活件剂或牛物活件的或牛物活件:本f所用的术语指本申请中可伸用的具有 本发明的治疗或其他用途的任何化合物或物质的作用。
[0039] 静电相互作用:本文使用的术语"静电相互作用"指当带相反电荷的成分相互吸引 时，带电成分、分子或离子之间由于吸引力而发生的任意相互作用。实施例包括但不限于： 离子相互作用、共价相互作用、离子和偶极（离子和极性分子）之间的相互作用，两个偶极 (极性分子的部分电荷）之间的相互作用，氢键和London分散键（可极化分子的诱导偶 极）。因此，例如，"离子相互作用"或"静电相互作用"是指第一、正电荷分子与第二、负电 荷分子之间的吸引。例如，离子或者静电相互作用包括负电荷生物活性剂之间的吸引。
[0040] Fc片段:如本文所使用的术语"哺乳动物抗体的Fc片段"是指恒定区，即哺乳动物 抗体或其片段的Fc片段，其中这样的哺乳动物抗体可选自来自哺乳动物，如灵长类动物， 如人类，猩猩或猿类；马科动物，如马的IgM、IgG、IgA、IgD和IgE。哺乳动物抗体的典型的 Fc片段是人抗体的重组Fc片段，例如人IgG抗体的重组Fc片段。
[0041 ] 在本文的上下文，如本文使用的术语"哺乳动物抗体的Fc片段的变体"或"Fc变 体"（在整个本说明书中可互换使用）指哺乳动物抗体的Fc片段，其中Fc片段的一个或多 个氨基酸残基，如1-10个氨基酸残基已被其它的氨基酸残基取代和/或其中一个或多个氨 基酸残基，如1-10个氨基酸残基已被从Fc片段删除和/或其中一个或多个氨基酸残基，如 1-10个氨基酸残基已被添加到Fc片段和/或其中在Fc片段中的一个或多个氨基酸残基， 如1-10个氨基酸残基已被修饰。这样的氨基酸残基的添加或删除可以例如发生在Fc片段 的N-末端和/或Fe片段的C-末端。天然的指没有被人类修饰的Fe片段。W096/32478描 述了示例性的Fe变体。因此，在一个实施方式中，术语"Fc变体"包括了由非人的天然Fe 人源化的分子或序列。此外，天然的Fe包括可被除去的位点，因为它们提供了本发明的融 合分子不需要的结构特征或生物活性。
[0042] 丑段:本发明的多肽片段包括它的任意功能等同物，在一个实施方式中可包括氨 基酸序列的少于500个氨基酸残基，例如少于450个氨基酸残基，例如少于400个氨基酸残 基，例如少于350个氨基酸残基，例如少于300个氨基酸残基，例如少于250个氨基酸残基， 例如少于240个氨基酸残基，例如少于225个氨基酸残基，例如少于200个氨基酸残基，例 如少于180个氨基酸残基，例如少于160个氨基酸残基，例如少于150个氨基酸残基，例如 少于140个氨基酸残基，例如少于130个氨基酸残基，例如少于120个氨基酸残基，例如少 于110个氨基酸残基，例如少于100个氨基酸残基，例如少于90个氨基酸残基，例如少于 85个氨基酸残基，例如少于80个氨基酸残基，例如少于75个氨基酸残基，例如少于70个 氨基酸残基，例如少于65个氨基酸残基，例如少于60个氨基酸残基，例如少于55个氨基酸 残基，例如少于50个氨基酸残基，例如少于45个氨基酸残基，例如少于40个氨基酸残基， 例如35个氨基酸残基，例如30个氨基酸残基，例如25个氨基酸残基，例如20个氨基酸残 基，例如15个氨基酸残基，例如10个氨基酸残基，例如5个连续的氨基酸残基；所述氨基酸 序列选自：SEQ ID N0:l、2、3、4、5、6、7、8、9、10、ll、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、 23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、 48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63 和 64,或者与所述序列至少 70% (例如，至少85%、90%、95%、97%、98%或99%)同一性的变体。此外，本发明的多肽片段 包括它们的任意功能的等同物，在一种实施方式中可包括氨基酸序列的5个以上氨基酸残 基，例如10个以上氨基酸残基，例如15个以上氨基酸残基，例如20个以上氨基酸残基，例 如25个以上氨基酸残基，例如50个以上氨基酸残基，例如75个以上氨基酸残基，例如100 个以上氨基酸残基，例如125个以上氨基酸残基，例如150个以上氨基酸残基，例如175个 以上氨基酸残基，例如200个以上氨基酸残基，例如225个以上氨基酸残基，例如250个以 上氨基酸残基，例如275个以上氨基酸残基，例如300个以上氨基酸残基，例如325个以上 氨基酸残基，例如350个以上氨基酸残基，例如375个以上氨基酸残基，例如400个以上氨 基酸残基，例如425个以上氨基酸残基，例如450个以上氨基酸残基，例如475个以上氨基 酸残基，例如500个以上氨基酸残基，例如525个以上氨基酸残基，例如550个以上氨基酸 残基，例如575个以上氨基酸残基，例如600个以上氨基酸残基，例如625个以上氨基酸残 基，例如650个以上氨基酸残基，例如675个以上氨基酸残基，例如700个以上氨基酸残基； 所述氨基酸序列选自：SEQ ID N0:l、2、3、4、5、6、7、8、9、10、ll、12、13、14、15、16、17、18、19、 20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、 45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63 和 64,或者与所述序列 至少60%(例如至少65%、70%、80%、85%、90%、95%、97%、98%或至少99%)同一性 的变体。活性片段的实例包括下述一种或多种：SEQ ID NO:Iaa 103-124、SEQ ID NO:Iaa 125-143,SEQ ID NO ：Iaa 144-162,SEQ ID NO ：Iaa 197-218,SEQ ID N0：laa 391-409,SEQ ID N0:laa 661-684、SEQ ID N0:laa 763-783 或 SEQ ID N0:laa 859-876。所述片段长度 可以是5至500个氨基酸，例如5至400、10至300、20至250、15至50、5至15、7至15、10 至25、10至20以及7至25个氨基酸长度。
[0043] 功能等同物:根据一种优诜实施方式，本发明中使用的"功能等同物"是通过参考 序列的预定片段的相应功能来确立的。
[0044] SorCSl多肽或其片段的功能等同物或变体可理解为：随着插入、缺失和替代（包 括保守替代）的数目与范围增大，表现出氨基酸序列分别逐步与优选的预定SorCSl多肽或 SorCSl片段序列不同，但仍保持本申请中SorCSl多肽的生物活性。这种区别可通过优选的 预定序列与片段或功能等同物之间同一性的降低来衡量。
[0045] 如果含有功能类似的氨基酸侧链的残基被替代，通过一个或多个氨基酸残基的替 代而获得的功能变体可能更好地表现出某些形式或程度的天然SorCSl活性，只是同源性 较小。在这方面，功能相似是指侧链的主要特征，如疏水性、碱性、中性或酸性，或者是否存 在立体位阻。因此，本发明的一种实施方式中，同一性的程度并不是衡量一个片段是否是本 发明的优选预定片段的变体或功能等同物的主要量度。
[0046] 除了在优选的预定SorCSl多肽或其片段的任意位置引入保守替代外，还可以在 这种SorCSl多肽或其片段的任意一个或多个位置中引入非保守替代。
[0047] 导致形成SorCSl多肽或其片段的功能等同物片段的非保守取代会例如i)极性显 著不同，例如，带有非极性侧链的残基（Ala、Leu、Pro、Trp、Val、lie、Leu、Phe或Met)替代 带极性侧链的残基，如Gly、Ser、Thr、Cys、Tyr、Asn或Gln，或带电荷氨基酸，如Asp、Glu、 Arg或Lys ;或者带电荷或者极性的残基替代非极性的残基；和/或ii)对多肽骨架定向的 影响显著不同，例如Pro或Gly被另一种残基替代；和/或iii)电荷显著不同，例如，负电 荷残基如Glu或Asp替代正电荷残基如Lys、His或Arg(反之亦然）；和/或iv)空间位阻 显著不同，例如，大体积的残基如His、Trp、Phe或Tyr替代具有一种小侧链的残基如Ala、 Gly或Ser (反之亦然）。
[0048] 在一种优选实施方式中，基于疏水性和亲水性数值以及氨基酸侧链替代的相对相 似度，包括电荷、大小等，通过氨基酸替代得到变体。考虑到上述不同特征的示范性氨基酸 替代对本领域技术人员来说是已知的，包括：精氨酸和赖氨酸；谷氨酸和天冬氨酸；丝氨酸 和苏氨酸；谷氨酸和天冬酰胺；以及缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸。
[0049] 优选的预定SorCSl多肽或其片段的突变可以通过进行氨基酸插入来实现，通常 约为1至10个氨基酸残基的级别，优选1至5个氨基酸残基；或者通过缺失约1至10个残 基，例如约2至5个残基来实现。
[0050] 在一种实施方式中，结合位点1、2或3的配体是通过自动化合成而合成的寡肽。可 以采用任意商业可得的固相技术，例如Merrifield固相合成法，其中氨基酸按顺序添加到 增长的氨基酸链（参见 Merrif ield, J. Am. Chem. Soc. 85:2149-2146, 1963)。
[0051] 多肽自动化合成设备可以从供应商商业获得，如Applied Biosystems Inc (Foster City, Calif)，通常可根据制造商的说明书进行操作。固相合成可以将所需的 替代氨基酸加入到本发明SorCSl的任意片段中。可以理解的是，替代、缺失、插入或其任意 亚组合可以相结合以获得最终序列的功能等同物。插入应该理解为包括氨基端和/或羧基 端的融合，例如与疏水性或免疫原性蛋白或载体融合，例如所述载体为任意多肽或能够发 挥载体作用的框架结构。
[0052] 低聚体也在本发明中提供并属于本发明的范围，低聚体包括本发明分选蛋白抑制 剂片段的二聚体，包括同型二聚体和异质二聚体。SorCSl多肽和片段及其功能等同物和变 体可以与其他氨基酸序列或者与天然分选蛋白抑制剂序列生成为同型二聚体和异质二聚 体。异质二聚体包括含有免疫反应活性的分选蛋白抑制片段和不需要具有或显示任何生物 活性的分选蛋白抑制片段的二聚体。
[0053] SorCSl多肽或其片段和变体可以在体外和体内合成。体外合成的方法是众所周知 的，适合或适于在体内合成分选蛋白抑制剂的方法也是现有技术中已有描述的。当体内合 成时，宿主细胞用含有编码分选蛋白肽抑制剂或其片段的DNA的载体进行转化。载体定义 为一种可复制的核酸结构。载体用于调节SorCSl多肽和/或片段或变体的表达。表达载 体是可复制的DNA结构，其中可以在体内表达的编码预定分选蛋白抑制片段或其任意功能 等同物的核酸序列可操作地与适宜的控制序列连接，该控制序列能够影响所述片段或等同 物在适宜宿主内的表达。这种控制序列是本领域众所周知的。原核细胞和真核细胞都可以 用于合成配体。
[0054] 然而，源自多细胞生物体的细胞的培养物代表着优选的宿主细胞。原则上，任意 较高级的真核细胞培养物都是可行的，无论是脊椎动物还是无脊椎动物培养物。有用的宿 主细胞系的实施例是VERO和HeLa细胞，中国仓鼠卵巢（CHO)细胞系和WI38、BHK、C0S-7、 293和MDCK细胞系。优选的宿主细胞是已经知晓的合成内源性分选蛋白抑制剂的真核细 胞。这种宿主细胞的培养物可以被分离并用作片段的源，或者用于治疗的治疗性方法中，包 括旨在促进或抑制生长状态的治疗性方法，或者用于在人或动物体上实施的诊断方法中。
[0055] 体外/体内:该术语按照它们通常的含义使用。
[0056] -种物质、化合物或生物分子，例如蛋白质，包括受体；它能够与（第二）生 物分子结合并形成复合体以发挥生物用途。狭义上，配体是一种信号引发分子，通过分子间 作用力如离子键、氢键或范德华力与目标蛋白的位点结合。对接（结合）通常是可逆的（解 离）。配体与它的目标分子之间的实际不可逆的共价键合在生物系统内是很少见的。与金 属有机和无机化学中的意义相反，在血红蛋白中，无论配体是否实际地结合在金属位点上 都没有关系。与受体结合的配体可改变受体蛋白的化学构象，即受体蛋白的三维形状。受体 蛋白的构象状态决定受体的功能状态。结合的趋势或者强度称为亲和力。配体包括底物、 抑制剂、激活剂、非自身受体、共受体和神经传递素。
[0057] 接头:如本文所使用的术语"接头"是指使SorCSl剂和缀合于SorCSl的药学上 可接受的分子分离，并导致半衰期增加（例如血浆半衰期增加）的共价键或多官能基团 (moiety)(如双官能基团）。
[0058] 聚合物:如本文所使用的术语"聚合物"是指由两种或更多种单体的共价连接形成 的分子，其中没有任何单体是氨基酸残基，除非该聚合物是人白蛋白或另一种丰富的血浆 蛋白。该术语"聚合物"可以与术语"聚合物分子"互换使用。该术语意在覆盖通过体外糖 基化所结合的碳水化合物分子。将通过体内糖基化（如N-或0-糖基化）所结合的碳水化 合物分子（如下面进一步描述的）在此统称为"寡糖基团"。除非对聚合物分子的数目有明 确指示，否则本发明中每提及"聚合物"，"聚合物分子"，"所述聚合物"或"所述聚合物分子" 应指一种或多种聚合物分子。聚合物可以是水溶性的或水不溶性的聚合物，如PEG基团。 PEG基团可具有选自500Da到200. OOODa的范围的平均尺寸，例如从500Da至100. OOODa， 例如从2000Da至50. OOODa。这样的PEG分子可以获自例如Shearwater Inc。
[0059] 药物剂:术语"药物剂"或者"药品"或者"药物"指本发明具有治疗或预防用途的 任意物质，该物质可以用于治疗（包括预防、诊断、缓解或者治愈）患者的弊病、痛苦、病症、 疾病或伤害。治疗上有用的遗传决定簇、肽、多肽以及多核苷酸都属于术语药剂或药品的含 义。根据该定义，"治疗剂"、"药物剂"、或"药品"或者"药物"是一类生物活性物质。
[0060] 药物组合物:或者药品、药物或者药剂指在适当地施予患者时，能够诱导所需的治 疗效果的任意化学或生物物质、化合物或组分。某些药品以一种非活性的形式销售，其在体 内转化成具有药理活性的代谢物。为此，术语"药剂组合物"和"药品"优选地包括本身活 性物质、或者非活性药品和活性代谢物。
[0061] 纯化抗述:术语"纯化抗体"是这样的抗体，其重量的至少60%不含有与它天然 相关的多肽及天然有机分子。优选地，制剂包括至少75%重量百分比的抗体，更优选至少 90 %重量百分比，最优选至少99 %重量百分比。
[0062] 序列同一性:如本文所使用的术语"序列同一性"或"相同的"指通过比较序列 来确定的两个或更多个蛋白质的序列之间的关系。两个序列之间的同一性百分比的确 定可以使用数学算法来完成。用于比较两个序列的数学算法的优选但非限制性的实例是 Karlin 和 Altschul 算法（1990)Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87:2264-2268,在 Karlin and Altschul (1993)Proc. Natl. Acad Sci. USA 90:5873-5877 中进行了修改。这样的算法被整 合到 Altschul, et al. (1990) J. Mol. Biol. 215:403-410 的 BLASTN 和 BLASTP 程序中。
[0063] 为了表征同一性，将目的序列进行比对，从而获得最高顺序的同源性（匹配）。 根据这些一般原则，两个核酸序列的"同一性百分比"可利用从美国国家生物技术信息 中心（NCBI)网站（http://www. ncbi. nlm. nih. gov)上获得的 BLASTN 算法[Tatiana A.Tatusova, Thomas L. Madden:Blast 2sequences-a new tool for comparing protein and nucleotide sequences ;FEMS Microbiol. Lett. 1999174247-250]，并使用本文建议的 默认设置（即匹配奖励=I ;错配罚分=-2 ;链选择=两条链；空位=5 ;空位延伸=2 ;空 位罚分x_dropofT = 50 ;预期=10 ;字长=11 ;过滤）进行测定。BLASTN算法测定在两个 比对的核苷酸序列之间一系列重叠的序列同一性％。
[0064] 用于序列比较的数学算法的另一个优选但非限制性的实例是CLUSTAL W(l. 7) 比对算法（Thompson, J. D.，Higgins, D. G. and Gibson, Τ· J. (1994) CLUSTAL W: improving the sensitivity of progressive multiple sequence alignment through sequence weighting, positions-specific gap penalties and weight matrix choice. Nucleic Acids Research, 22:4673-4680. )。CLUSTAL W 能够被用于优选使用 BL0SUM62 评分矩阵的 多重序列比对。当计算序列同一性时，CLUSTAL W包括由参照序列的长度比对所产生的任 何空位。因此，在图2中，虽然参照序列（hMETRNL)仅仅长311个氨基酸，但具有空位的比 对序列的总长度为322。序列同一性是通过将匹配数除以具有空位的比对序列的长度来计 算的。
[0065] 高水平的序列同一性表示第一序列源自第二序列的可能性。氨基酸序列同一性要 求两个比对序列间相同的氨基酸序列。因此，与参照序列共享70%的氨基酸同一性的候选 序列要求在比对后，候选序列中的70%的氨基酸与参照序列中的相应氨基酸是相同的。
[0066] 追症:本文使用的术语"治疗"指涉及治疗的方法，对包括人和动物体在内的个体 的临床状况的外科诊疗。治疗可以是缓解、治愈或预防，即减低精神和行为的症状。
[0067] 变体:本文使用的术语"变体"指氨基酸序列变体，所述变体优选地与任意的预定 序列具有至少60%同一 1性，例如至少63%同一1性，例如至少66%同一1性，例如至少70%同 一性，例如至少72%序列同一性，例如至少75%序列同一性，例如至少80%序列同一性，例 如至少85%序列同一性，例如至少90%序列同一性，例如至少91 %序列同一性，例如至少 92%序列同一性，例如至少93%序列同一性，例如至少94%序列同一性，例如至少95%序 列同一性，例如至少96%序列同一性，例如至少97%序列同一性，例如至少98%序列同一 性，例如至少99%序列同一性。
[0068] 表达迪上週:一种导致基因，优选地为内源性基因，表达增加的过程。
【专利附图】
【附图说明】
[0069] 图 l:SorCSl 的比对
[0070] 源自人类（Homo sapiens)、黑渥渥（Pan troglodytes)、牛（Bos Taurus)、小鼠 (Mus musculus)、大鼠 （Rattus norvegicus)、狗（Canis lupus familiaris)和鸡（Gallus gallus)的SorCSl序列比对。序列同一"性如表2所示。
[0071] 表2 :人SorCSl的序列同一性
[0072]
【权利要求】
1. 一种选自下组的药剂： a) 分离的多肤，包括： USEQ ID NO ;15的氨基酸序列；或 ii) i)的氨基酸序列的生物活性序列变体，其中，所述变体与所述SEQ ID NO ;15具有 至少60%的序列同一性， iii) i)至ii)的任一项的至少15个连续氨基酸的生物学活性片段，所述片段与SEQ ID NO ; 15在至少15个氨基酸的重叠范围内具有至少60%的序列同一性， b) 编码在a)中所限定的多肤的核酸序列； C)包含在b)中所限定的核酸分子的载体， d)转化或转导有b)的核酸或C)的载体的分离的宿主细胞， 在用于降低食欲，和/或治疗肥胖症和/或促进减重和/或增加代谢，和/或增加产热， 和/或将白色脂肪转化为褐色脂肪的方法中的应用。
2. 根据权利要求1所述的药剂，其中所述药剂是多肤，其中所述多肤是包括选自SEQ ID NO ;15、5、1、2、3、4、6、7、8、9、10、11、12、13、14、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、 27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、 55、56、57、58、59、60、61、62、63和64的氨基酸序列的生物活性序列变体。
3. 根据权利要求1所述的药剂，其中所述药剂是多肤，其中所述多肤是具有选自SEQ ID NO ;15、5、1、2、3、4、6、7、8、9、10、11、12、13、14、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、 27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、 55、56、57、58、59、60、61、62、63和64的氨基酸序列的生物活性序列变体。
4. 根据权利要求1所述的药剂，其中所述多肤是选自SEQ ID N0;15、5、l、2、3、4、6、7、 8、9、10、11、12、13、14、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、 35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、55、56、57、58、59、60、61、62、63 和64的序列的天然发生的等位基因变体。
5. 根据权利要求1所述的药剂，其中所述多肤包括选自SEQ ID N0;15、5、63、62、21、 27、33、37、39、43、47、51的可溶性SorCSl的氨基酸序列。
6. 根据前面任一项权利要求所述的药剂，其中所述多肤是其中所述的变体多肤，其中 在选择的序列中指定的任意氨基酸被改变W提供保守性替代，前提是不超过200个氨基酸 被如此改变。
7. 根据前面任一项权利要求所述的药剂，其中所述多肤是其中所述的变体多肤，其中 在选择的序列中指定的任意氨基酸被改变W提供保守性替代，前提是不超过100个氨基酸 被如此改变。
8. 根据前面任一项权利要求所述的药剂，其中所述多肤是其中所述的变体多肤，其中 在选择的序列中指定的任意氨基酸被改变W提供保守性替代，前提是不超过50个氨基酸 被如此改变。
9. 根据前面任一项权利要求所述的药剂，其中所述多肤是其中所述的变体多肤，其中 在选择的序列中指定的任意氨基酸被改变W提供保守性替代，前提是不超过25个氨基酸 被如此改变。
10. 根据前面任一项权利要求所述的药剂，其中所述多肤与选自SEQ ID N0;15、5、 1、2、3、4、6、7、8、9、10、11、12、13、14、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、 31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、55、56、57、58、 59、60、61、62、63和64组成组的氨基酸序列具有至少65%，更优选至少70%，更优选至少 75 %，优选至少80 %，更优选至少85 %，更优选至少90 %，更优选至少91 %，更优选至少 92 %，更优选至少93 %，更优选至少94 %，更优选至少95 %，更优选至少96 %，更优选至少 97%，更优选至少98%，更优选至少99%的序列同一性。
11. 根据前面任一项权利要求所述的药剂，其中所述药剂是多肤，其中所述多肤选自 沈QID側；1、2、3、4、6、7、8、9、11、12、13、14、61和62组成组。
12. 根据前面任一项权利要求所述的药剂，其中所述多肤选自SEQ ID NO;16、17、18、 19、20、22、26、28、29、30、31 和 32 组成组。
13. 根据前面任一项权利要求所述的药剂，其中所述药剂是选自SEQ ID NO;61、62、63 和64组成组的多肤。
14. 根据前面任一项权利要求所述的药剂，其中所述药剂是选自SEQ ID NO;55、56、57、 58、59和60组成组的多肤。
15. 根据前面任一项权利要求所述的药剂，其中所述药剂是选自SEQ ID NO ;62和64组 成组的多肤。
16. 根据权利要求1所述的药剂，其中所述药剂是生物活性片段，其中所述片段包含选 自由沈Q ID NO ;1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、 25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、 50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63和64组成组的氨基酸序列中任一种的小 于500个连续氨基酸残基，例如少于450个连续氨基酸残基，例如少于400个连续氨基酸残 基，例如少于350个连续氨基酸残基，例如少于300个连续氨基酸残基，例如少于250个连 续氨基酸残基，例如少于240个连续氨基酸残基，例如少于225个连续氨基酸残基，例如少 于200个连续氨基酸残基，例如小于180个连续氨基酸残基，例如少于160个连续氨基酸残 基，例如少于150个连续氨基酸残基，例如少于140个连续氨基酸残基，例如少于130个连 续氨基酸残基，例如少于120个连续氨基酸残基，例如少于110个连续氨基酸残基，例如少 于100个连续氨基酸残基，例如少于90个连续氨基酸残基，例如少于85个连续氨基酸残 基，例如少于80个连续氨基酸残基，例如少于75个连续氨基酸残基，例如少于70个连续氨 基酸残基，例如少于65个连续氨基酸残基，例如少于60个连续氨基酸残基，例如少于55个 连续氨基酸残基，例如少于50个连续氨基酸残基，例如少于45个连续氨基酸残基，例如少 于40个连续氨基酸残基，如35个连续氨基酸残基，例如30个连续氨基酸残基，如25个连 续的氨基酸残基，如20个连续氨基酸残基，例如15个连续的氨基酸残基。
17. 根据权利要求1所述的药剂，其中所述药剂是生物活性片段，其中所述片段包含选 自由沈Q ID NO ;1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、 25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、 50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63和64组成组的氨基酸序列中任一种的至 少15个连续氨基酸残基，如大于20个连续氨基酸残基，例如超过25个连续氨基酸残基，例 如大于50个连续氨基酸残基，如超过75个连续氨基酸残基，例如多于100个连续氨基酸残 基，如大于125个连续氨基酸残基，例如超过150个连续氨基酸残基，如大于175个连续氨 基酸残基，例如超过200个连续氨基酸残基，如大于225个连续氨基酸残基，例如超过250 个连续氨基酸残基，如大于275个连续氨基酸残基，例如超过300个连续氨基酸残基，如大 于325个连续氨基酸残基，例如超过350个连续氨基酸残基，如大于375个连续氨基酸残 基，例如超过400个连续氨基酸残基，如大于425个连续氨基酸残基，例如超过450个连续 氨基酸残基，如超过475个连续连续氨基酸残基，例如大于500个连续氨基酸残基，如大于 525个连续氨基酸残基，例如超过550个连续氨基酸残基，如大于575个连续氨基酸氨基酸 残基，例如大于600个连续氨基酸残基，如大于625个连续氨基酸残基，例如超过650个连 续氨基酸残基，如大于675个连续氨基酸残基，如大于700个连续氨基酸残基。
18. 根据前面任一项权利要求所述的药剂，其中所述多肤是被糖基化的。
19. 根据权利要求18所述的药剂，其中所述多肤在对应于SEQ ID NO;l的氨基酸位置 184、352、433、765、776、816、847、908和929的一或多个天冬酷胺氨基酸残基被N糖基化。
20. 根据前面任一项权利要求所述的药剂，其中所述多肤包括下述序列中的一种或多 种： 沈Q ID NO ;laa 103-124 沈Q ID NO ;laa 125-143 沈Q ID NO ;laa 144-162 沈Q ID NO ;laa 197-218 沈Q ID NO ;laa 391-409 沈Q ID NO ;laa 661-684 沈Q ID NO ;laa 763-783 沈Q ID NO ;laa 859-876。
21. 根据权利要求1所述的药剂，其中信号肤被异源信号肤取代。
22. 根据前面任一项权利要求所述的药剂，其中所述多肤能够形成至少一个分子内脱 氨酸桥。
23. 根据前面任一项权利要求所述的药剂，包括通过至少一个分子内脱氨酸桥连接的 所述多肤的二聚体。
24. 根据前面任一项权利要求所述的药剂，其中所述多肤进一步包括亲和标签，例如多 聚组氨酸标签、GST标签、HA标签、Flag标签、C-myc标签、服V标签、V5标签、麦芽糖结合蛋 白标签、纤维素结合域标签。
25. 根据权利要求1的药剂，其中所述载体进一步包括有效地与所述核酸序列连接的 启动子。
26. 根据权利要求25所述的药剂，其中所述启动子选自CMV、人化iC、RSV、Tet-可调控 启动子、]?〇-]\〇^￥-1；11?、]\^1、6。-1〇、口〇6。0和〔3瓶11。
27. 根据权利要求1所述的药剂，其中所述载体选自源自逆转录病毒科家族的载体，包 括慢病毒、HIV、SIV、FIV、EAIV、CIV。
28. 根据权利要求1所述的药剂，其中所述载体选自腺相关病毒、腺病毒、甲病毒、杆状 病毒、单纯瘤疹病毒、冠状病毒、牛乳头状瘤病毒、M〇-MLV、
29. 根据权利要求1所述的药剂，其中所述载体是腺相关病毒AAV。
30. 根据权利要求1所述的药剂，其中所述宿主细胞选自酿酒酵母、大肠杆菌、曲霉和 昆虫细胞如Sf9昆虫细胞。
31. 根据权利要求1所述的药剂，其中所述宿主细胞选自人、猫科、猪、猿类、犬科、小鼠 和大鼠细胞的哺乳动物细胞。
32. 根据权利要求31所述的药剂，其中所述哺乳动物细胞选自肌肉细胞、肝细胞、脂肪 细胞和膜腺细胞、如a细胞、0细胞和5细胞。
33. 根据权利要求1所述的药剂，其中所述宿主细胞选自CHO、CH0-K1、肥I193T、 肥K293、COS、PC12、HiB5、RN33b 和 BHK 细胞。
34. 根据权利要求1所述的药剂，其中所述受试者没有罹患膜岛素抵抗和/或2型糖尿 病。
35. 根据前面任一项权利要求所述的药剂，其中所述药剂被化学修饰W在给予患者时 增加半衰期，特别是其血浆半衰期。
36. 根据前面任一项权利要求所述的药剂，其中所述药剂被化学修饰W在给予患者时 增加半衰期，特别是其血浆半衰期。
37. 根据前面任一项权利要求所述的药剂，其中所述药剂进一步包括与所述药剂缀合 的基团，由此产生基团-缀合药剂。
38. 根据权利要求37所述的药剂，其中所述基团-缀合药剂的血浆和/或血清半衰期 大于非基团-缀合药剂的血浆和/或血清半衰期。
39. 根据权利要求37所述的药剂，其中所述基团促进跨血脑屏障的运输。
40. 根据权利要求37所述的药剂，其中所述基团是来自骆驼科动物物种的抗体，例如 来自单峰骆驼、骆驼、美洲驼、羊驼、驼马、或原驼的重组或天然的单链抗体。
41. 根据权利要求37-40中任一项所述的药剂，其中缀合于所述药剂的基团是选自白 蛋白、脂肪酸、聚己二醇（PEG)、酷化基团、抗体和抗体片段组成组中的基团的一种或多种。
42. 根据权利要求37-41中任一项所述的药剂，其中所述药剂与所述基团通过接头彼 此缀合。
43. 根据权利要求37-41中任一项所述的药剂，其中一个W上的基团缀合于所述药剂。
44. 根据权利要求42和43中任一项所述的药剂，其中所述接头是具有选自SEQ ID NO ; 65、66、67、68和69的氨基酸序列的肤。
45. -种药物组合物，包括前面任一项权利要求所述的药剂。
46. 根据权利要求45所述的药物组合物，进一步包括药学上可接受的载体。
47. 根据权利要求45和46中任一项所述的药物组合物，其中所述组合物的抑为抑4 和抑10之间。
48. 根据权利要求45-47中任一项所述的药物组合物，其中所述组合物配置成胃肠外 给药。
49. 根据权利要求45-47中任一项所述的药物组合物，其中所述组合物配置成口服给 药。
50. 根据权利要求48所述的药物组合物，其中所述胃肠外给药是通过注射。
51. 根据权利要求48和49中任一项所述的药物组合物，其中所述给药是静脉内、肌肉 内、脊柱内、腹膜内、皮下、推注或连续给药。
52. 根据权利要求45至51中任一项所述的药物组合物，其中所述给药W 30分钟至24 小时的间隔进行，例如W 1至6小时的间隔，例如一天S次。
53. 根据权利要求45至52中任一项所述的药物组合物，其中治疗的持续期为6至72 小时。
54. 根据权利要求45至52中任一项所述的药物组合物，其中治疗的持续期为24小时 至7天。
55. 根据权利要求45至52中任一项所述的药物组合物，其中治疗的持续期为4天至 150 天。
56. 根据权利要求45至52中任一项所述的药物组合物，其中治疗的持续期为终生。
57. 根据权利要求35至43中任一项所述的药物组合物，其中活性成分的剂量为每kg 体重10 y g至500mg之间，例如每kg体重50 y g至250mg之间。
58. -种试剂盒，包括根据权利要求45至57中任一项所述的药物组合物，W及使用说 明书。
59. -种选自下组的药剂； a) 分离的多肤，包括： USEQ ID NO ;15的氨基酸序列；或 ii) i)的氨基酸序列的生物活性序列变体，其中，所述变体与所述SEQ ID NO ;15具有 至少60%的序列同一性， iii) i)至ii)的任一项的至少15个连续氨基酸的生物学活性片段，所述片段与SEQ ID NO ;15在至少15个氨基酸的重叠范围内具有至少60%的序列同一性， b) 编码在a)中所限定的多肤的核酸序列； C)包含在b)中所限定的核酸分子的载体， d)转化或转导有b)的核酸或C)的载体的分离的宿主细胞， 在制备用于降低食欲，和/或用于促进减重和/或增加代谢，和/或增加产热，和/或 将白色脂肪转化为褐色脂肪的的药物中的应用。
60. -种用于降低食欲，和/或促进减重和/或增加代谢，和/或增加产热，和/或将白 色脂肪转化为褐色脂肪的方法，所述方法包括向有需要的受试者给予治疗有效量的选自下 组的药剂： a) 分离的多肤，包括： USEQ ID NO ;15的氨基酸序列；或 ii) i)的氨基酸序列的生物活性序列变体，其中，所述变体与所述SEQ ID NO ;15具有 至少60%的序列同一性， iii) i)至ii)的任一项的至少15个连续氨基酸的生物学活性片段，所述片段与SEQ ID NO ;15在至少15个氨基酸的重叠范围内具有至少60%的序列同一性， b) 编码在a)中所限定的多肤的核酸序列； C)包含在b)中所限定的核酸分子的载体， d)转化或转导有b)的核酸或C)的载体的分离的宿主细胞。
61. -种治疗肥胖症的方法，所述方法包括向有需要的受试者给予治疗有效量的选自 下组的药剂： a)分离的多肤，包括： USEQ ID NO ;15的氨基酸序列；或 ii) i)的氨基酸序列的生物活性序列变体，其中，所述变体与所述SEQ ID NO ;15具有 至少60%的序列同一性， iii) i)至ii)的任一项的至少15个连续氨基酸的生物学活性片段，所述片段与SEQ ID NO ;15在至少15个氨基酸的重叠范围内具有至少60%的序列同一性， b)编码在a)中所限定的多肤的核酸序列； C)包含在b)中所限定的核酸分子的载体， d)转化或转导有b)的核酸或C)的载体的分离的宿主细胞。
62. -种增加代谢的方法，所述方法包括向有需要的受试者给予治疗有效量的选自下 组的药剂： a) 分离的多肤，包括： USEQ ID NO ;15的氨基酸序列；或 ii) i)的氨基酸序列的生物活性序列变体，其中，所述变体与所述SEQ ID NO ;15具有 至少60%的序列同一性， iii) i)至ii)的任一项的至少15个连续氨基酸的生物学活性片段，所述片段与SEQ ID NO ; 15在至少15个氨基酸的重叠范围内具有至少60%的序列同一性， b) 编码在a)中所限定的多肤的核酸序列； C)包含在b)中所限定的核酸分子的载体， d)转化或转导有b)的核酸或C)的载体的分离的宿主细胞。
63. -种增加哺乳动物产热的方法，所述方法包括向哺乳动物给予治疗有效量的选自 下组的药剂： a) 分离的多肤，包括： USEQ ID NO ;15的氨基酸序列；或 ii) i)的氨基酸序列的生物活性序列变体，其中，所述变体与所述SEQ ID NO ;15具有 至少60%的序列同一性， iii) i)至ii)的任一项的至少15个连续氨基酸的生物学活性片段，所述片段与SEQ ID NO ;15在至少15个氨基酸的重叠范围内具有至少60%的序列同一性， b) 编码在a)中所限定的多肤的核酸序列； C)包含在b)中所限定的核酸分子的载体， d)转化或转导有b)的核酸或C)的载体的分离的宿主细胞。
64. -种将白色脂肪转化为褐色脂肪的体内方法，所述方法包括向哺乳动物给予治疗 有效量的选自下组的药剂： a) 分离的多肤，包括： USEQ ID NO ;15的氨基酸序列；或 ii) i)的氨基酸序列的生物活性序列变体，其中，所述变体与所述SEQ ID NO ;15具有 至少60%的序列同一性， iii) i)至ii)的任一项的至少15个连续氨基酸的生物学活性片段，所述片段与SEQ ID NO ; 15在至少15个氨基酸的重叠范围内具有至少60%的序列同一性， b) 编码在a)中所限定的多肤的核酸序列； C)包含在b)中所限定的核酸分子的载体， d)转化或转导有b)的核酸或C)的载体的分离的宿主细胞。
65.-种将白色脂肪转化为褐色脂肪的体外方法，所述方法包括向使细胞接触有效量 的选自下组的药剂： a) 分离的多肤，包括： USEQIDNO;15的氨基酸序列；或 ii)i)的氨基酸序列的生物活性序列变体，其中，所述变体与所述SEQIDNO;15具有 至少60%的序列同一性， iii) i)至ii)的任一项的至少15个连续氨基酸的生物学活性片段，所述片段与SEQID NO; 15在至少15个氨基酸的重叠范围内具有至少60%的序列同一性， b) 编码在a)中所限定的多肤的核酸序列； C)包含在b)中所限定的核酸分子的载体， d)转化或转导有b)的核酸或C)的载体的分离的宿主细胞。
【文档编号】A61K38/17GK104470532SQ201380032064
【公开日】2015年3月25日 申请日期:2013年4月17日 优先权日:2012年4月17日
【发明者】K-M·彼泽森, A·尼克尔, M·F·科尔比 申请人:奥胡斯大学