花生浸提物的应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种花生浸提物的应用。所述花生浸提物用于制备预防、治疗神经退行性疾病的食品和药品。本发明还提供了花生活性组分在制备预防、治疗神经退行性疾病的食品和药品中的应用，花生活性组分为整颗花生或花生局部通过乙醇水溶液浸提、非极性树脂吸附，并经乙醇洗脱、浓缩、干燥步骤制备得到。本发明还提供了花生浸提物、花生活性组分在制备改善认知、学习记忆能力的食品和药品中的应用。本发明花生浸提物、花生活性组分具有显著的拟神经生长因子的活性，能够改善小鼠的认知功能，能够发挥预防、治疗老年性痴呆症、改善认知及学习记忆能力的作用，为制备预防及治疗神经退行性疾病、改善认知及学习记忆能力的食品和药品提供新思路。
【专利说明】花生浸提物的应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及食品、药品用途领域，尤其涉及整颗花生或局部的浸提物、活性组分在制备预防、治疗神经退行性疾病以及改善认知、学习记忆能力的食品和药品中的应用。
【背景技术】
[0002]随着全球社会人口的发展，老年人口的增长是世界性的趋势，而老年性痴呆的患病率和发病率也逐渐增高，老年性痴呆不仅是一个医学难题，而将成为一个突出的社会问题。目前，全球老年性痴呆患者可能已达1700万，随着人口老龄化的进程，老年性痴呆的发病率已上升为常见死亡原因的第4位，仅次于心脑血管病，癌症和中风。老年性痴呆症在我国也已逐渐成为严重威胁老年人健康的顽症。
[0003]老年期痴呆 是指老年期发生的痴呆，包括阿尔茨海默病(AD，Alzheimer’ sDementia),血管性痴呆(Vascular dementia),混合性痴呆(mixed dementia)和其他原因所致痴呆。阿尔茨海默病的病理学特征表现为脑内大量淀粉样老年斑(SP)，神经纤维缠结(NFT)及选择性神经元和突触缺失，多种神经递质尤其是乙酰胆碱严重下降，相应地形成了以β淀粉样蛋白(Αβ )、tau蛋白及神经元缺失三大机制研究领域。
[0004]近年来随着对AD的神经生理、生化、药理等方面不断的深入研究，防治AD的药物开发研究不断取得进展。目前对老年痴呆的药物治疗主要是通过抑制acChE来提高患者体内的乙酰胆碱水平，即乙酰胆碱酯酶(Acetylcholinesterase, AChE)抑制剂,它是临床上用于治疗AD最早最为成熟的一类药物。目前，对于轻、中度AD患者的治疗，经美国FDA批准上市的药品有4种,他克林(tacrine)、多奈哌齐(donepezil)、利斯的明(Rivastigmine)、加兰他敏(Galantamine),均为乙酰胆碱酯酶抑制剂。其他的治疗药物如β、Y分泌酶抑制药，长春胺、尼莫地平等脑代谢调节剂，还有司来吉林、维生素E等影响自由基代谢的药物等。
[0005]目前用于治疗AD的药物品种繁多，适用于不同的作用机制，它们在某种程度上，是起到了缓解老年痴呆的作用，但是无论是上市或者在研的药物，都有一定的毒副作用，目前AD仍为一个没有办法根治的顽疾。因此，寻找针对AD病因的新的有效治疗药物和方法，成为当今研究的热点和难点。在众多的待选药物中，我们把目光投向了神经生长因子。
[0006]神经生长因子(NGF)属于神经营养因子(NTF)家族的成员，维持神经元的数量和存活。NGF对神经系统的正常发育及功能维持，促进损伤神经的再生与修复具有重要作用。NGF作为一种可能治疗AD的有效方法,但目前仍存在下列问题:⑴价格昂贵；(2)相对分子质量大，不能透过血-脑屏障(Blood Brain Barrier, BBB),只可脑室内注射,长期治疗存在许多技术问题。因此，寻找拟NGF活性，并且可以通过血脑屏障的小分子化合物即NGF mimics，已经成为了目前的研究热点。到目前为止，科学家们已经发现了近百种NGFmimics，可以有效的促进神经细胞增长，部分化合物已经完成了结构修饰或是全合成。目前，NGF mimics已有化合物处于三期临床阶段。
[0007]民以食为天，我国地大物博，果蔬鱼肉，山珍海味，十分富饶，人类的生存和繁衍离不开饮食，通过饮食，获得能量及各种营养以满足机体的需要。因此，在日常食物中开发具有药用价值的成分不仅可以避免药品的毒副作用，还能够大大降低药品的研发、生产成本。
【发明内容】
[0008]本发明提供了花生浸提物在制备预防、治疗神经退行性疾病的食品和药品中的应用。
[0009]所述花生浸提物是指水、醇或两者混合液的浸提物。
[0010]花生浸提物具有显著的拟神经生长因子的活性，动物药理学实验也证明花生浸提物能改善小鼠的记忆障碍 ，因此可将花生浸提物作为有效成分，添加药学或食品可接受的载体，制备预防、治疗老年性痴呆症(特别是阿尔茨海默病)等神经退行性疾病的食品和药品O
[0011]所述的食品可接受的载体是指食品领域常规的载体，例如淀粉、蔗糖、微晶纤维素等填充剂，淀粉浆、羟丙纤维素、明胶、聚乙二醇等粘合剂，硬脂酸镁、微粉硅胶、聚乙二醇类等湿润剂，聚山梨脂、卵磷脂等吸收促进剂，伯洛沙姆、脂肪酸山梨坦、聚山梨脂等表面活性剂，另外还可以添加香味剂、甜味剂等其它辅剂。
[0012]所述的药学可接受的载体可参照现有技术。
[0013]将所述的花生浸提物制成药品后，可以以单位剂量形式给用，给药途径可以为肠道或非肠道给药。
[0014]药品的剂型可以是固体制剂、液体制剂或半固体剂型，上述各种剂型可采用现有生产方法进行制备。
[0015]所述花生浸提物具体可通过如下方法制备:
[0016]取整颗花生或局部，粉碎后加溶剂浸提，收集浸提液，除去溶剂，干燥，获得所述浸提物。
[0017]所述溶剂为水、醇或两者的混合，更优选的，所述溶剂为醇和水的混合溶液。
[0018]所述醇与水的体积比为20:80~80:20，优选为40:60~60:40。
[0019]所述醇为乙醇。
[0020]制备花生浸提物时，可以以花生的整体为原料，也可以以花生的局部如花生仁、花生壳或花生衣为原料，可针对不同的人群如儿童、老人等具体需求相应的进行选择。
[0021]将整颗花生或局部粉碎后，有利于浸提过程中原料中的活性成分的释放，一般粉碎至粒度为50~300目，优选为100~150目，更优选为100目。
[0022]通常粒径越小越有利于活性成分析出，但是如果过细，容易造成原料粉末对活性成分和浸提溶剂(水、醇或两者的混合液)的吸附量增加，造成活性成分的损失，同时破碎的细胞过多，浸出的杂质多，也导致后续固液分离困难。
[0023]浸提时间为0.5~120h，优选为5~48小时，更优选为24h。
[0024]浸提温度为20~50°C，优选为25~35°C，更优选为25°C。
[0025]适宜的浸提温度和时间有利于原料中活性成分的浸出，但是浸提时间过长会使杂质浸出量增加，并容易导致已浸出的活性成分的水解。
[0026]浸提液料比为2:1~50:1，优选为3:1~15:1，更优选为10:1。
[0027]本领域人员可以理解，液料比为浸提液的体积(ml)与原料的质量(g)的比。[0028]浓缩可采用常规的方法进行，浓缩结束后，通常干燥至含水量< 5%。
[0029]花生整体或局部的浸提物可进一步纯化，纯化后，多酚类化合物的重量百分含量大于50%。
[0030]本发明还提供了花生浸提物在制备改善认知、学习记忆能力的食品和药物中的应用。实验证明，本发明的花生浸提物能够改善正常小鼠的学习记忆、认知功能，因此，可利用该花生浸提物来制备改善认知、学习记忆能力的食品和药物。所述的花生浸提物即上述“花生浸提物在制备预防、治疗神经退行性疾病的食品和药品中的应用”中所涉及的花生浸提物。
[0031]本发明还提供了花生活性组分在制备预防、治疗神经退行性疾病的食品和药品中的应用，所述花生活性组分通过如下方法制备:取整颗花生或局部，用乙醇和水的混合溶液浸提，收集浸提液，浸提液过滤后用非极性树脂进行吸附，水洗后，用乙醇洗脱，收集洗脱液，将洗脱液浓缩、干燥后制得所述的花生活性组分，其中，所述的局部为花生壳或花生仁。 [0032]动物药理学实验证明，本发明的花生活性组分能改善小鼠的认知功能，因此可将花生活性组分作为有效成分，添加药学或食品可接受的载体，制备预防、治疗老年性痴呆症(特别是阿尔茨海默病)等神经退行性疾病的食品和药品。其中，药学或食品可接受的载体可参照上述涉及的相关载体。
[0033]在提取花生活性组分的过程中，浸提的时间为0.5~120h，优选为5~48小时，更优选为24h，浸提的温度为20~50°C，优选为25~35°C，更优选为25°C。浸提的液料比为3:1~15:1，更优选为10:1，浸提时，乙醇和水的体积比为20:80~80:20，优选为40:60~60:40,更优选为40:60o
[0034]浸提、过滤后，可以先将滤液浓缩后再用树脂吸附，一般滤液浓缩至1/50体积。
[0035]所述的非极性树脂可以为XAD、HP、SP等系列的能用于食品和药品生产的品种。通过非极性树脂能够洗脱浸提物中的糖类等极性较强的成分，对活性成分进一步浓缩，同时去除糖类更加适用于老年人，具体的，所述的非极性树脂可以为HP-20树脂或XAD16树脂，最好为XAD16树脂(罗门哈斯(Amberlite)公司)。
[0036]洗脱时，用乙醇作为洗脱剂，洗脱时，乙醇与非极性树脂的体积比为2:1~5:1，更优选为4:1。
[0037]本发明还提供了花生活性组分在制备改善认知、学习记忆能力的食品和药物中的应用，所述花生活性组分通过如下方法制备:取整颗花生或局部，用乙醇和水的混合溶液浸提，收集浸提液，浸提液过滤后用非极性树脂进行吸附，水洗后，用乙醇洗脱，收集洗脱液，将洗脱液浓缩、干燥后制得所述的花生活性组分，其中，所述的局部为花生壳或花生仁。实验证明，本发明的花生活性组分能够改善正常小鼠的学习记忆、认知功能，因此，可利用该花生活性组分来制备改善认知、学习记忆能力的食品和药物。所述的花生活性组分即上述“花生活性组分在制备预防、治疗神经退行性疾病的食品和药品中的应用”中所涉及的花生活性组分。
[0038]与现有技术相比，本发明的有益效果为:
[0039](I)本发明提供了花生浸提物的一种新用途，花生浸提物具有显著的拟神经生长因子的活性，能够发挥预防和治疗老年性痴呆症的作用，为制备预防、治疗老年痴呆症等神经退行性疾病的食品和药品提供新的思路。[0040](2)花生浸提物以日常所食的花生为基本原料，产品安全性高，对人体无毒副作用，且原料来源广，成本低廉，同时花生浸提物的制备方法简单、快速，大大降低了产品的研发和生产成本。
[0041] (3)本发明还对花生浸提物进一步纯化，纯化的花生活性组分具有显著的拟神经生长因子的活性，能够发挥预防和治疗老年性痴呆症的作用。
[0042](4)本发明提供了花生浸提物、花生活性组分在制备改善认知、学习记忆能力的食品和药品的应用。
【专利附图】
【附图说明】
[0043]图1A为48小时后，其中一部分不同处理对PC12细胞神经突起分化影响的显微照片。
[0044]图1B为48小时后，另一部分不同处理对PC12细胞神经突起分化影响的显微照片;
[0045]其中，图1A~图1B中；
[0046]a-1 % DMSO,阴性对照；b_40ng/mL NGF,阳性对照；
[0047]C-花生衣 100% 水提物(HSY，lug/mL) ;d_ 花生衣 20% 醇提物(HSY20，lug/mL)；
[0048]e-花生衣 40 % 醇提物(HSY40，lug/mL) ； f-花生衣 60 % 醇提物(HSY60，lug/mL)；
[0049]g-花生衣 80% 醇提物(HSY80，lug/mL) ；h-花生衣 100% 醇提物(HSY100，0.3ug/mL)；
[0050]1-花生壳 100%水提物(HSK，lug/mL) ；j-花生壳 20%醇提物(HSK20，lug/mL)；
[0051]k-花生壳 40% 醇提物(HSK40，lug/mL) ;1_ 花生壳 60% 醇提物(HSK60，lug/mL)；
[0052]m-花生壳 80% 醇提物(HSK80，lug/mL) ；n-花生壳 100% 醇提物(HSK100，0.3ug/mL)；
[0053]ο-花生 100%水提物(HS，3ug/mL) ;p_ 花生 20%醇提物(HS20，3ug/mL)；
[0054]q-花生 40%醇提物(HS40，3ug/mL) ;r_ 花生 60%醇提物(HS60，10ug/mL)；
[0055]s-花生 80%醇提物(HS80，lug/mL) ；t-花生 100%醇提物(HS100，lug/mL)；
[0056]u-花生仁 100%水提物(HSR，lug/mL) ；v-花生仁 20%醇提物(HSR20，lug/mL)；
[0057]w-花生仁40%醇提物(HSR40，10ug/mL) ；χ-花生仁60%醇提物
[0058](HSR60,10ug/mL)；
[0059]y-花生仁80%醇提物(HSR80，lug/mL) ；z-花生仁100%醇提物
[0060](HSR100, lug/mL)。
[0061]图2a为24和48小时后一部分不同花生衣浸提物对PC12细胞的神经突起分化率的影响。
[0062]图2b为24和48小时后另一部分不同花生衣浸提物对PC12细胞的神经突起分化
率的影响。
[0063]图2c为24和48小时后一部分不同花生壳浸提物对PC12细胞的神经突起分化率的影响。
[0064]图2d为24和48小时后另一部分不同花生壳浸提物对PC12细胞的神经突起分化
率的影响。[0065]图2e为24和48小时后一部分不同花生浸提物对PC12细胞的神经突起分化率的影响。
[0066]图2f为24和48小时后另一部分不同花生浸提物对PC12细胞的神经突起分化率的影响。
[0067]图2g为24和48小时后一部分不同花生仁浸提物对PC12细胞的神经突起分化率的影响。
[0068]图2h为24和48小时后另一部分不同花生仁浸提物对PC12细胞的神经突起分化
率的影响。
[0069]图3a为花生衣浸提物对小鼠的Y迷宫试验影响结果图。
[0070]图3b为花生衣浸提物对小鼠的新奇物体辨别实验影响结果图；
[0071]图3c为花生衣浸提物对小鼠的水迷宫试验影响结果图。
[0072]图4a为花 生壳浸提物对小鼠的Y迷宫试验影响结果图。
[0073]图4b为花生壳浸提物对小鼠的新奇物体辨别实验影响结果图。
[0074]图4c为花生壳浸提物对小鼠的水迷宫试验(登台潜伏期)影响结果图。
[0075]图4d为花生壳浸提物对小鼠的水迷宫试验(穿台次数)影响结果图。
[0076]图5为48小时后，花生壳活性组分处理对PC12细胞神经突起分化影响的显微照片。
[0077]图6a为花生壳组分对小鼠的Y迷宫试验影响结果图。
[0078]图6b为花生壳组分对小鼠的新奇物体辨别实验影响结果图。
[0079]图6c为花生壳组分对小鼠的水迷宫试验(登台潜伏期)影响结果图。
[0080]图7a为花生仁浸提物对小鼠的Y迷宫试验影响结果图。
[0081]图7b为花生仁浸提物对小鼠的新奇物体辨别实验影响结果图。
[0082]图7c为花生仁浸提物对小鼠的水迷宫试验(登台潜伏期)影响结果图。
[0083]图7d为花生仁浸提物对小鼠的水迷宫试验(穿台次数)影响结果图。
[0084]图8为48小时后，花生仁组分处理对PC12细胞神经突起分化影响的显微照片。
[0085]图9为花生仁组分对小鼠的水迷宫试验影响结果图。
[0086]图10为全花生浸提物对小鼠的水迷宫试验影响结果图。
[0087]图11为48小时后，全花生组分处理对PC12细胞神经突起分化影响的显微照片。
[0088]图12为全花生组分对小鼠的水迷宫试验影响结果图。
【具体实施方式】
[0089]下面结合具体实施例进一步阐释本发明。
[0090]实施例1花生衣浸提物的制备
[0091](I)取IOg花生衣粉碎至100目后，用IOOmL不同乙醇含量的水溶液室温(25°C )浸提24小时，抽滤，得到浸提液；
[0092](2)将花生衣浸提液浓缩、干燥至含水量为4%后得到花生衣浸提物。
[0093]样品名、花生衣质量、料液比、乙醇含量及浸提物质量的对应关系参见表1。
[0094]表1实验因素对花生衣浸提物质量的影响
【权利要求】
1.花生浸提物在制备预防、治疗神经退行性疾病的食品和药品中的应用。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述花生浸提物通过如下方法制备: 取整颗花生或局部，粉碎后加溶剂浸提，收集浸提液，除去溶剂，干燥，获得所述花生浸提物。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述溶剂为水、醇或两者的混合。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述溶剂为醇和水的混合溶液。
5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述醇与水的体积比为20:80~80:20o
6.如权利要求3~5任一项所述的应用，其特征在于，所述醇为乙醇。
7.如权利要求2所述的应用，其特征在于，花生局部为花生衣、花生仁或花生壳。
8.如权利要求2所述的应用，其特征在于，浸提时间为0.5~120h，浸提温度为20~50。。。
9.如权利要求2所述的应用，其特征在于，浸提液料比为2:1~50:1。
10.花生浸提物在制备改善认知、学习记忆能力的食品和药物中的应用。
11.花生活性组分在制备预防、治疗神经退行性疾病的食品和药品中的应用，所述花生活性组分通过如下方法制备:取整颗花生或局部，用乙醇和水的混合溶液浸提，收集浸提液，浸提液过滤后用非极性树脂进行吸附，水洗后，用乙醇洗脱，收集洗脱液，将洗脱液浓缩、干燥后制得所述的花生活性组分，其中，所述的局部为花生壳或花生仁。
12.如权利要求11所述的应用，其特征在于，浸提时间为0.5~120h，浸提温度为20~50。。。
13.如权利要求11所述的应用，其特征在于，浸提时，乙醇与水的体积比为20:80~80: 20 ο
14.如权利要求11所述的应用，其特征在于，所述的非极性树脂为HP-20树脂或XAD16树脂。
15.花生活性组分在制备改善认知、学习记忆能力的食品和药物中的应用，所述花生活性组分通过如下方法制备:取整颗花生或局部，用乙醇和水的混合溶液浸提，收集浸提液，浸提液过滤后用非极性树脂进行吸附，水洗后，用乙醇洗脱，收集洗脱液，将洗脱液浓缩、干燥后制得所述的花生活性组分，其中，所述的局部为花生壳或花生仁。
【文档编号】A61K36/48GK103933111SQ201410175140
【公开日】2014年7月23日 申请日期:2014年4月28日 优先权日:2013年5月2日
【发明者】戚建华 申请人:杭州耐奇睿生物医药科技有限公司