一种脑靶向肽及其制备方法和用途
【专利摘要】本发明属于医药【技术领域】，提供了一种脑靶向肽，由7个氨基酸组成，序列为FLFRPRN。本发明通过固相合成的方法得到所述多肽，并且通过化学合成的方法与抗肿瘤药物偶联，本发明所述的偶联物具有通过血脑屏障的作用以及抑瘤作用。
【专利说明】一种脑靶向肽及其制备方法和用途
【技术领域】
[0001]本发明属于医药【技术领域】，涉及肿瘤相关的药物领域，具体而言，本发明涉及一种脑靶向多肽，以及该多肽与抗肿瘤药所形成的偶联物。
【背景技术】
[0002]脑瘤及脑转移瘤的发病率逐年上升。在对其治疗方面，血脑屏障被认为是阻止化疗药物进入脑组织进而影响疗效的主要原因。血脑屏障是机体参与固有免疫的内部屏障之一，由介于血循环与脑实质间的软脑膜、脉络丛的脑毛细血管壁和包于壁外的胶质膜所组成，能阻挡病原生物和其他大分子物质由血循环进入脑组织和脑室。基本上100%的大分子药物，包括多肽、重组蛋白、单克隆抗体、基于RNA干扰技术的药物、基因治疗相关药物等都无法穿越血脑屏障，且大于98%的小分子药物也无法穿过血脑屏障。目前，放射性治疗与化学疗法只能延长患者生命4个月，因此本发明致力于研究使现有药物更好的透过血脑屏障。
[0003]多肽由于其具有极性末端和非极性末端，因此在体内有较高的利用度，由于本身是内源性物质所以毒性小，但是多肽直接作为药物受到较大的限制，例如其稳定性差，不能口服。近年来，多肽作为药物辅助功能的应用逐渐成为了新药研制的热点之一。细胞穿膜肽是20世纪中期开始认识到的一类具特殊功能的多肽分子，英文学术名称一般写为cell2-penetrating-peptides (CPPs)。它们通常由5~30个氨基酸组成，典型的一般由8~16个氨基酸构成，具有生物膜穿透功能，还可携带其它分子甚至超分子颗粒进入细胞中。正是因为这种特殊的功能，它们被看作生物活性分子有效的细胞内转运工具，具有广泛的应用前景。
[0004]近些年来多肽和药物通过共价方式形成组合物的例子很多，例如:多肽Penetratin和阿霉素共价耦合用于治疗乳腺癌；多肽TAT和药物P53共价耦合用于治疗眼癌转移；多肽YTA4与甲氨蝶呤共价耦合治疗乳腺癌。
【发明内容】
[0005]以下是本发明的详细描述:
[0006](I)本发明所述的穿膜肽
[0007]本发明所述的脑靶向肽，由7个氨基酸组成，氨基酸序列为:
[0008]FLFRPRN
[0009]该多肽本身不具有生理活性，但是具有透过血脑屏障的作用，本发明还涉及该多肽的制备方法及其应用。
[0010](2)本发明所述的脑靶向肽的制备方法
[0011]本发明所需多肽是采用固相的方法制备的，固相合成是以固相载体树脂为载体，从C端即羧基端向N端即氨基端逐渐添加氨基酸的过程。
[0012]本发明中优选树脂:Fmoc_wang树脂、2-cl-trt树脂，树脂取代度0.24~0.4.[0013]本发明所使用的保护氨基酸为:Fmoc-Phe_0H, Fmoc-1eu (tBu) -OH,Fmoc-Arg (pbf) -OH, Fmoc-Pro-OH, Fmoc-Asn (trt) -OH,反应过程中保护氨基酸 3 ~5 倍过量。
[0014]本发明所使用的脱保护试剂为:哌啶/N，N_ 二甲基甲酰胺，比例为10:90~30:70。
[0015]本发明所使用的偶联试剂为:①苯并三氮唑-N，N，N’，N’ -四甲基脲六氟磷酸盐/1-羟基苯并三唑(HOBT)，②2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N，N, N’，N’ -四甲基脲六氟磷酸酯/1-羟基苯并三唑(HOBT)，③N，N’ - 二异丙基碳二亚胺/1-羟基苯并三唑(HOBT)。
[0016]本发明中，若使用第①或者第②种偶联试剂，那么反应中过程中应添加缚酸剂:DIEA/NMP。
[0017]本发明中所使用的切割试剂为:TFA/茴香硫醚/水/苯酚/1，2-乙二硫醇，比例为:82.5:5:5:5 ；2.5。
[0018]本发明中所使用MS-1T-TOF确定分子量，使用HPLC纯化粗肽
[0019](3)本发明所述多肽与抗肿瘤药物阿霉素的偶联方法
[0020]
【权利要求】
1.一种脑靶向肽，其特征在于，所述的脑靶向肽由7个氨基酸组成，氨基酸序列为:FLFRPRNO
2.一种偶联物，由如权利要求1所述的脑靶向肽与抗肿瘤药物通过化学键形成。
3.根据权利要求2所述的偶联物，其特征在于，所述抗肿瘤药物选自阿霉素、紫杉醇。
4.根据权利要求2所述的偶联物，其特征在于所述化学键为酰胺键。
5.一种制备权利要求1所述的脑靶向肽的方法，包括采用Fmoc固相多肽合成法合成。
6.如权利要求1所 述的脑靶向肽在制备抗肿瘤药物中的用途。
【文档编号】A61P35/00GK104031119SQ201410279992
【公开日】2014年9月10日 申请日期:2014年6月23日 优先权日:2014年6月23日
【发明者】孔维苓, 郑学敏, 龚珉, 周植星, 于冰, 夏广萍, 徐为人 申请人:天津药物研究院