艳山姜挥发油滴丸及其制备方法

艳山姜挥发油滴丸及其制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种艳山姜挥发油滴丸及其制备方法。本发明包括艳山姜挥发油、混合基质和助溶剂；艳山姜挥发油与混合基质的质量比为1:2～8，混合基质是由聚乙二醇6000或聚乙二醇6000、聚乙二醇4000以1-7::1-6的质量比配制而成。本发明具有优越的治疗理气开窍，活血通络，行气止痛等心血管疾病的疗效，具有显著的保护血管内皮损伤的作用。同时不仅解决了解决了由于挥发油属于脂溶性成分，不易溶于水溶性基质中而使生物利用度下降的问题，而且使制备的滴丸圆整均匀，色泽一致，无粘连现象。
【专利说明】艳山姜挥发油滴丸及其制备方法

【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种理气开窍，活血通络，行气止痛的，治疗心血管疾病，具有保护血 管内皮细胞损伤、心肌缺血或梗死的艳山姜挥发油滴丸及其制备方法，属于制药【技术领域】。

【背景技术】
[0002] 心血管系统疾病是人类最为常见的一种疾病，是目前威胁人类健康的头号杀手， 已成为当今世界人口的第一大死亡病因。在我国，随着人口老龄化加速，人民生活水平提 高，生活节奏加快，饮食结构向高热、高脂化发展，人群中冠心病、心绞痛等心血管系统疾病 也已成为危害人类健康及生命的严重疾病之一，心血管疾病患者急剧增加，估计我国心血 管病现患人数为2. 9亿，每10秒就有1人死于心血管病，每年约有350万人死于心血管病， 占总死亡原因的41 %，居各种疾病之首，且呈上升趋势。世界银行曾预测，中国心血管病死 亡率高于日本和欧美等发达国家，2005年?2015年，心血管疾病、卒中和糖尿病将给中国 造成约5500亿美元的经济损失。同时，由于饮食结构改变，造成胆固醇摄入量过多，以及工 作、生活压力加大、运动量减少，环境污染等原因，心脑血管疾病发病率呈现年轻化的趋势， 三、四十岁的人患心脑血管病的比例逐年增加，心血管疾病的高发生率与死亡率日益受到 社会的广泛关注。由于冠心病、心绞痛是常见的多发病之一，持续时间长，多为慢性病，需要 长期用药。目前常用的治疗心血管系统疾病，如冠心病、心绞痛，的药品主要是硝酸酯类药 物、β阻滞剂、钙拮抗剂、调血脂药及抗血小板聚集药物，但其具有如头痛、眩晕、血压下降、 心动过速等不良反应，长期使用还会产生耐药性。
[0003] 艳山姜[Alpiniazerumber(Pers· )BurttetSmith]，别名月桃、良姜、土砂仁、虎子 花等，为姜科（Zingiberaceae)、姜亚科（Zingiberoideae)、山姜属（AlpiniaRoxb.)植物， 英文名beautiful galangal，为多年生常绿丛生草本植物。艳山姜的干燥成熟果实，具有温 中燥湿，行气止痛，截疟的功效，是贵州少数民族治疗心腹冷痛，胸腹胀满，消化不良，呕吐 腹泻等症状的习用药材。大量研究结果显示，艳山姜的主要有效成分挥发油，具有广泛的抗 炎、镇痛以及防治心血管系统疾患等多方面的生物活性。据研究报道，艳山姜植物是比较好 的药用植物，具有重要的药用价值，其茎、种子和叶均含有挥发油，同时也是重要的香料植 物、纤维植物及观赏植物，具有重要的经济和观赏价值。艳山姜主要化学成分为挥发油类、 黄酮类和二萜类、有机酸类等化合物，其中β -水芹烯、α -菔烯、β -菔烯、1，8-桉叶油醇、 莰烯含量较高。挥发油类具有抗心肌缺氧，降压，抗炎，镇痛，降血脂，抗动脉粥样硬化，抗氧 化，抗溃疡的作用。前期研究中，课题组已证实艳山姜挥发油可明显提高LPS诱导损伤的 HUVECs的细胞存活率，降低LDH外漏，减少炎症相关细胞因子（TNF-α、IL-1、IL-2、IL-6、 IL-8)的释放，及减少Ang II、ET-1、TXA2的释放，增加NO、PGI2的含量，结果显示E0FAZ对 LPS诱导损伤的HUVECs具有显著保护作用，起到治疗心血管系统疾病。
[0004] 将艳山姜挥发油制备成片剂或颗粒剂，在贮存过程中挥发油容易析出到片剂的表 面，造成剂量的损失和片剂表面质量的下降，并且片剂起效慢，颗粒剂在冲调过程中可能导 致挥发油挥发而损失；将艳山姜挥发油制备成硬胶囊，容易对胶囊壳造成软化和溶蚀；将 艳山姜挥发油制备成软胶囊，但软胶囊的胶囊壳对药物的释放有一定的阻碍作用，药物释 放较慢。
[0005] 滴丸是指固体或液体药物与基质加热熔化混匀后，滴入不相混溶的冷凝液中，收 缩冷凝而成的制剂。滴丸剂具有服用量少、崩解和溶出迅速等特点，对于提取量较小、脂溶 性较强的中药是很好的剂型。由于载体对药物具有湿润、阻碍聚集、增溶和抑晶的作用，药 物在基质中主要以分子、微晶或胶体状态存在，药物总表面积增大，不仅能增加一些难溶 性中药有效成分的溶解度、溶出速度和吸收速率，而且也提高了有效成分的生物利用度。 因此，将艳山姜挥发油制备成滴丸制剂可以解决其它片剂存在的问题。然而，如果采用常规 组分和方法制备的艳山姜挥发油滴丸，不能使挥发油性质的药物良好的分散在熔融的滴丸 基质中，而影响其吸收，影响了滴丸在滴制时的成形质量和药物疗效。而且滴丸基质配比不 当也容易造成丸圆整度不好、有拖尾、孔隙、松散、滴丸均匀度差的问题。


【发明内容】

[0006] 本发明的目的在于，提供一种艳山姜挥发油滴丸及其制备方法。本发明对血管内 皮细胞损伤具有优越的治疗效果，因此具有治疗理气开窍，活血通络，行气止痛等心血管疾 病的疗效，同时不仅解决了解决了由于挥发油属于脂溶性成分，不易溶于水溶性基质中而 使生物利用度下降的问题，而且使制备的滴丸圆整均匀，色泽一致，无粘连现象。
[0007] 为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案如下：一种艳山姜挥发油滴丸，由 艳山姜挥发油、混合基质、适量助溶剂和适量辅料制备而成；所述的艳山姜挥发油和混合基 质的质量比为1 :2?8,所述的混合基质是聚乙二醇6000或聚乙二醇6000和聚乙二醇4000 以1?7:1?6的质量比配制而成，辅料选自硬脂酸、单硬脂酸甘油酯、虫蜡、氢化植物油、 硬脂醇、鲸蜡醇、半合成脂肪酸酯中的一种或两种。
[0008] 上述的艳山姜挥发油滴丸中，艳山姜挥发油与混合基质的质量比为1:3?5,混合 基质是由聚乙二醇6000与聚乙二醇4000以2-7:1-4的质量比配制而成。
[0009] 前述的艳山姜挥发油滴丸中，所述的助溶剂是吐温类或司盘类助溶剂，助溶剂的 质量为混合基质的0. 01-12%。
[0010] 前述的艳山姜挥发油滴丸的制备方法，将艳山姜果实用水蒸气蒸馏法或超临界萃 取法提取，得艳山姜挥发油，备用；取聚乙二醇6000和聚乙二醇4000组成的混合基质，混合 均匀，然后置49-60°C水浴上保温，加入吐温类助溶剂，搅拌混合均匀后加入艳山姜挥发油， 再搅拌混合均匀；滴入冷凝液中，制成滴丸，拭去滴丸表面的冷凝液，即得成品。
[0011] 上述的艳山姜挥发油滴丸的制备方法中，艳山姜果实150g,水蒸气蒸馏法，或超临 界萃取法提取，得艳山姜挥发油，将挥发油离心弃水层，再加入无水硫酸钠以吸尽水分，备 用；取艳山姜挥发油质量的2. 38倍的聚乙二醇6000和1. 12倍的聚乙二醇4000,混合均匀， 至无气泡，完全熔融，然后置49-60°C水浴上保温，然后加入基质4%倍量的吐温80,混合均 匀，再加入艳山姜挥发油，使完全溶解，搅拌混合均匀，滴入冷凝液中，制成滴丸，拭去滴丸 表面的冷凝液，即得成品。
[0012] 前述的艳山姜挥发油滴丸的制备方法中，取艳山姜挥发油质量的2. 38倍的聚乙 二醇6000和1. 12倍的聚乙二醇4000,充分搅拌，混合均匀，然后置49-60°C水浴上保温，然 后加入滴丸基质6%倍量的吐温80,混合均匀，再加入艳山姜挥发油，使完全溶解，搅拌混 合均匀，滴入冷凝液中，制成滴丸，拭去滴丸表面的冷凝液，即得成品。
[0013] 前述的艳山姜挥发油滴丸的制备方法中，取艳山姜药材150g置超临界流体萃取 机的萃取釜中萃取，收集艳山姜挥发油，将挥发油离心弃水层，再加入无水硫酸钠以吸尽水 分，备用；艳山姜挥发油用装有能切割5万-1000分子量超滤膜的超滤装置过滤，将膜上液 与膜下液分离，膜上液弃去，膜下液为艳山姜挥发油备用。
[0014] 前述的艳山姜挥发油滴丸的制备方法中，取艳山姜挥发油的质量的1-5倍的聚乙 二醇6000和1-3倍的聚乙二醇4000,在60-100°C水浴充分搅拌，至无气泡，完全熔融，然后 置49-60°C水浴上保温，然后加入吐温或司盘类助溶剂，混合均匀，加入上述艳山姜挥发油， 使完全溶解，搅拌混合均匀，滴入冷凝液中，制成滴丸，拭去滴丸表面的冷凝液，即得成品。
[0015] 前述的艳山姜挥发油滴丸的制备方法中，取艳山姜药材150g置超临界流体萃取 机的萃取釜中萃取，收集提取物，得艳山姜挥发油，将挥发油离心弃水层，再加入无水硫酸 钠以吸尽水分，备用；取上述提取物重量2. 38倍量的聚乙二醇6000和1. 12倍量的聚乙二 醇4000,在60-KKTC水浴充分搅拌，至无气泡，完全熔融，然后置49-60°C水浴上保温，然后 加入滴丸基质〇. 1 %倍量的司盘40,混合均匀，加入上述提取物，使完全溶解，搅拌混合均 匀，滴入冷凝液中，制成滴丸，拭去滴丸表面的冷凝液，即可成品。
[0016] 与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：本发明对混合基质的组成和配比作 了改进，使艳山姜挥发油更稳定，使用更安全，易溶解、更易吸收、作用更快、更强，从而达到 温中燥湿，行气止痛，理气开窍，活血化瘀，的功效，用于气阴两虚，心悸脉结代，胸闷不舒， 胸痛及冠心病心绞痛和短暂性脑缺血见有上述症状者，含服效果更佳。本发明实验时采用 现有的滴丸基质，不能使挥发油性质的药物良好的分散在熔融的滴丸基质中，而影响其吸 收。众所周知，药物要在体内溶解后才能吸收，药物在滴丸中由于固体分散的原因，呈微细 结晶，无定形微粒或分子状态存在，所以难溶性药物滴丸的作用快、疗效高。因此，药物在熔 融的滴丸基质中的溶解度成为本发明制备成滴丸制剂、使其达到疗效的关键。本发明中提 取出来的挥发油成分，用常规的水溶性滴丸基质，虽然可以将挥发油完全溶解在熔融的滴 丸基质中，但是一定程度影响了滴丸在滴制时的成形质量和药物疗效；通过实验选择，我们 发现本发明使用的：水溶性与非水溶性基质混合作为本发明滴丸的基质，可以增加药物熔 融时的溶解量，两种溶解性各异的基质，具有相差较大的极性和介电常数，可相互调节成与 药物相近的极性和介电常数。本发明在滴丸基质中加入一定量的助溶剂，从而增加药物的 溶解量，提高药物的载药量，并使药物与胃肠道体液间接触角变小，增加了药物的润湿性， 因而使药物加速溶解，吸收增多。同时，由于在滴丸基质中加入药物，滴丸基质的性质发生 了变化，不同的滴丸基质配比，在冷凝液中收缩冷凝的程度不同，导致滴丸成型的质量，本 发明通过实验研究，优选出了最适宜制备艳山姜挥发油的基质的组成及其配比，使制备的 滴丸圆整均匀，色泽一致，无粘连现象。再进一步地，本发明还对艳山姜挥发油的提取方法 作了进一步优选，不仅可以高效率地获取活性成分，而且可以最大程度地保证艳山姜挥发 油的药性。
[0017] 本发明药效研究实验：
[0018] 实验分组及方法：
[0019] 实验分成三个组：空白组（ControlDose，Contr. )、LPS 模型组（ModelDose，LPS)、 中剂量艳山姜挥发油滴丸药组（MediumDose，M. D.)。空白组加无血清DMEM和生理盐水，LPS 模型组加无血清DMEM和LPS (15 μ g/ml)，M. D组加艳山姜挥发油滴丸和LPS (15 μ g/ml)。除 空白对照组外，各组分别给予相应药物干预保护lh后，再给予LPS复制HUVECs炎性损伤模 型。
[0020] 苏木素-伊红染色（HE染色）：
[0021] 将形态完好的细胞接种到3孔板内，长满后上述方法分组给药。各组细胞用PBS 浸洗3次，每次5分钟，加4%的多聚甲醛固定15min，弃去多聚甲醛，PBS浸洗3次，每次5 分钟，待孔内干燥后，加苏木精染液染色15-20min，PBS浸洗3次，每次5分钟，HCL-乙醇 (75%乙醇配制1% HCL)分化30秒，PBS浸洗3次，每次5分钟，95%乙醇润洗5秒，伊红染 液染色（5-10)分钟，70%乙醇洗2次。镜检着色满意后观察细胞，拍照。
[0022] 取生长良好的传代培养的HUVECs，制成细胞悬液，以每孔IX 104个接种于96孔培 养板（每孔100 μ 1)，培养至细胞基本融合，换成无血清的DMEM培养液继续培养24h，使细 胞同步化，按上述方法分组给药。再加入MTT(5mg/ml)20l·! 1，继续孵育4h，终止培养。小心 吸去孔内培养液，每孔加入150μ 1二甲基亚砜，低速震荡lOmin，使结晶物充分溶解。在酶 联免疫检测仪490nm波长处测量各孔吸光值，结果以0D值表示。细胞存活率=实验组0D 值/对照组0D值X100%。
[0023] 乳酸脱氢酶（LDH)的测定：
[0024] 将HUVECs按2. 4. 1项下方法分组给药处理后，收集24孔板培养液，吸出培养 液，-20°C冰箱保存，备测。
[0025] (1)分析原理：LDH能够催化乳酸生成丙酮酸，丙酮酸与2,4_二硝基苯肼反应在碱 性环境下形成棕红色苯腙化合物，在440nm波长测定，通过比色求出酶的活力。
[0026] (2)分析方法：根据试剂盒说明书完成。取样：
[0027]

【权利要求】
1. 艳山姜挥发油滴丸，其特征在于：主要由艳山姜挥发油、混合基质和适量助溶剂制 备而成；所述的艳山姜挥发油和混合基质的质量比为1 :2?8,所述的混合基质是聚乙二醇 6000或聚乙二醇6000和聚乙二醇4000以1?7:1?6的质量比配制而成的混合基质。
2. 根据权利要求1所述的艳山姜挥发油滴丸，其特征在于：艳山姜挥发油与混合基质 的质量比为1:3?5,混合基质是由聚乙二醇6000与聚乙二醇4000以2?7:1?4的质量 比配制而成。
3. 根据权利要求1所述的艳山姜挥发油滴丸，其特征在于：所述的助溶剂是吐温类或 司盘类助溶剂，助溶剂的质量为混合基质的〇. 01-12%。
4. 根据权利要求1至3任一项所述的艳山姜挥发油滴丸，其特征在于：制备原料还包 括辅料，艳山姜挥发油和辅料的质量比为1 :〇. 1?5 ;且辅料选自硬脂酸、单硬脂酸甘油酯、 虫蜡、氢化植物油、硬脂醇、鲸蜡醇、半合成脂肪酸酯中的一种或两种。
5. 根据权利要求1至4任一项所述的艳山姜挥发油滴丸的制备方法，其特征在于： 将艳山姜果实用水蒸气蒸馏法或超临界萃取法提取，得艳山姜挥发油，备用；取聚乙二醇 6000和聚乙二醇4000组成的混合基质，混合均匀，然后置49-60°C水浴上保温，加入吐温类 助溶剂，搅拌混合均匀后加入艳山姜挥发油，再搅拌混合均匀；滴入冷凝液中，制成滴丸，拭 去滴丸表面的冷凝液，即得成品。
6. 根据权利要求5所述的艳山姜挥发油滴丸的制备方法，其特征在于：取艳山姜果实 150g，水蒸气蒸馏法，或超临界萃取法提取，得艳山姜挥发油，将挥发油离心弃水层，再加入 无水硫酸钠以吸尽水分，备用；再取艳山姜挥发油质量的2. 38倍的聚乙二醇6000和1. 12 倍的聚乙二醇4000,混合均匀，至无气泡，完全熔融，然后置49-60°C水浴上保温，然后加入 基质4%倍量的吐温80,混合均匀，再加入艳山姜挥发油，使完全溶解，搅拌混合均匀，滴入 冷凝液中，制成滴丸，拭去滴丸表面的冷凝液，即得成品。
7. 如权利要求5所述的艳山姜挥发油滴丸的制备方法，其特征在于：按重量份取1份 艳山姜挥发油、2. 38份聚乙二醇6000、1. 12份聚乙二醇4000和0. 5份，充分搅拌，混合均 匀，然后置49-60°C水浴上保温，然后加入聚乙二醇6000和聚乙二醇4000的混合基质的 6%倍量的吐温80,混合均匀，再加入艳山姜挥发油，使完全溶解，搅拌混合均匀，滴入冷凝 液中，制成滴丸，拭去滴丸表面的冷凝液，即得成品。
8. 如权利要求5所述的艳山姜挥发油滴丸的制备方法，其特征在于：艳山姜挥发油 的制备方法是，取艳山姜药材置超临界流体萃取机的萃取釜中萃取，收集艳山姜挥发油， 将挥发油离心弃水层，再加入无水硫酸钠以吸尽水分，备用；艳山姜挥发油用装有能切割5 万-1000分子量超滤膜的超滤装置过滤，将膜上液与膜下液分离，膜上液弃去，膜下液为艳 山姜挥发油备用。
9. 如权利要求5所述的艳山姜挥发油滴丸的制备方法，其特征在于：按重量份取1份 艳山姜挥发油、1-5份聚乙二醇6000、1-3份的聚乙二醇4000和0. 5-3份单硬脂酸甘油酯， 在60-KKTC水浴充分搅拌，至无气泡，完全熔融，然后置49-60°C水浴上保温，然后加入吐 温或司盘类助溶剂，混合均匀，加入上述艳山姜挥发油，使完全溶解，搅拌混合均匀，滴入冷 凝液中，制成滴丸，拭去滴丸表面的冷凝液，即得成品。
10. 如权利要求5所述的艳山姜挥发油滴丸的制备方法，其特征在于：取艳山姜药材 150g置超临界流体萃取机的萃取釜中萃取，收集提取物，得艳山姜挥发油备用；取上述提 取物重量2. 38倍量的聚乙二醇6000、1. 12倍量的聚乙二醇4000、0. 1-0. 5倍量的硬脂醇和 0. 2-4. 9倍量的鲸蜡醇在60-KKTC水浴充分搅拌，至无气泡，完全熔融，然后置49-60°C水 浴上保温，然后加入滴丸基质0. 1 %倍量的司盘40,混合均匀，加入上述提取物，使完全溶 解，搅拌混合均匀，滴入冷凝液中，制成滴丸，拭去滴丸表面的冷凝液，即可成品。
【文档编号】A61K36/9062GK104056159SQ201410341087
【公开日】2014年9月24日 申请日期:2014年7月17日 优先权日:2014年7月17日
【发明者】沈祥春, 陶玲, 张彦燕, 令狐克刚, 林丹 申请人:沈祥春, 陶玲