冬凌草提取物在制备降糖药物中的应用的制作方法
【专利摘要】本发明涉及冬凌草提取物在制备降糖药物中的应用，有效解决高血糖的治疗用药问题，冬凌草提取物在制备降糖药物中的应用，所述的提取物为，冬凌草粉碎成粗粉，用石油醚回流提取，弃去石油醚液，冬凌草药渣挥干石油醚，再用乙醇浸泡，回流提取，得滤液，滤液减压回收乙醇至无醇味，浓缩成浓缩液，浓缩液加蒸馏水分散得含生药量0.1g/ml的分散液；分散液上AB-8型大孔吸附树脂柱，用蒸馏水洗脱，弃去水液，继用乙醇洗脱，弃去乙醇液，再用乙醇洗脱，乙醇洗脱液减压回收乙醇，干燥，即得，本发明具有降糖作用，有效用于制备降糖药物，实现冬凌草提取物在制备降糖药物中的应用。
【专利说明】冬凌草提取物在制备降糖药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及医药，特别是一种冬凌草提取物在制备降糖药物中的应用。
【背景技术】
[0002] 冬凌草又名冰凌草，为唇形科香茶属多年生草本或亚灌木，小灌木，系唇形科香茶 菜属植物碎米桠变种，因其植株凝结薄如蝉翼、形态各异的蝶状冰凌片而得名。全株结满银 白色冰片，风吹不落，随风摇曳，日出后闪闪发光，展现出神奇的自然景观，具有独到的观赏 作用。具有清热解毒、消炎止痛、健胃活血之效。药用部位是全株。现虽有关于冬凌草的多 方面研究，但至今未见有冬凌草提取物在制备降糖药物中的应用。
【发明内容】
[0003] 针对上述情况，为克服现有技术之缺陷，本发明之目的就是提供一种冬凌草提取 物在制备降糖药物中的应用，可有效解决高血糖的治疗用药问题。
[0004] 本发明解决的技术方案是，冬凌草提取物在制备降糖药物中的应用，所述的提取 物为，冬凌草粉碎成粗粉，用石油醚回流提取，弃去石油醚液，冬凌草药渣挥干石油醚，再用 乙醇浸泡，回流提取，得滤液，滤液减压回收乙醇至无醇味，浓缩成浓缩液，浓缩液加蒸馏水 分散得含生药量0. lg/ml的分散液；分散液上AB-8型大孔吸附树脂柱，先用蒸馏水洗脱，弃 去水液，继用质量浓度为10 %的乙醇洗脱，弃去质量浓度为10 %的乙醇液,再用质量浓度 为50%的乙醇洗脱，收集质量浓度为50%的乙醇洗脱液，减压回收乙醇，干燥，得冬凌草提 取物，冬凌草提取物中总黄酮含量58%以上。
[0005] 本发明制备方法简单，原材料丰富，所制备的冬凌草提取物具有降糖作用，可有效 用于制备降糖药物，实现冬凌草提取物在制备降糖药物中的应用，开拓了冬凌草在制备治 疗高血糖引起的糖尿病药物中的新用途。
【具体实施方式】
[0006] 以下结合具体情况对本发明的【具体实施方式】作详细说明。
[0007] 本发明在具体实施中，是由以下方式实现。
[0008] 冬凌草提取物在制备降糖药物中的应用，所述的冬凌草提取物是，冬凌草粉碎为 过20-30目筛的粗粉，加冬凌草10倍重量的石油醚回流提取2次，每次lh，弃去石油醚液， 冬凌草药渣挥干石油醚，冬凌草药渣再加冬凌草10倍重量质量浓度为50%的乙醇浸泡 0. 5h，回流提取3次，每次lh，过滤，合并滤液，减压回收乙醇至无醇味，并浓缩至50°C时相 对密度为1. 10?1. 20的浓缩液，浓缩液加蒸馏水分散得含生药量0. lg/ml的分散液；分散 液上AB-8型大孔吸附树脂柱，先用4倍柱体积蒸馏水洗脱，弃去水液，继用4倍柱体积的质 量浓度为10%的乙醇洗脱，弃去质量浓度为10%的乙醇液，再用8倍柱体积的质量浓度为 50%的乙醇洗脱，收集质量浓度为50%的乙醇洗脱液，减压回收乙醇，50°C干燥粉碎，得冬 凌草提取物，冬凌草提取物中总黄酮质量含量58%以上。
[0009] 本发明冬凌草提取物具有降糖作用，可有效用于制备降糖药物，实现冬凌草提取 物在制备降糖药物中的应用，进而实现冬凌草提取物在制备治疗糖尿病药物中的应用，并 经试验得到了有效证明，有关试验资料如下。
[0010] 1.实验材料
[0011] 1.1实验试剂
[0012] 本发明冬凌草提取物（冬凌草总黄酮质量含量58%以上）；盐酸二甲双胍片：市 售；生理盐水：河南双鹤华利药业有限公司；羧甲基纤维素钠：天津市恒兴化学试剂制造有 限公司；链脲佐菌素：sigma公司提供；柠檬酸：天津市致远化学试剂有限公司；柠檬酸钠： 天津市致远化学试剂有限公司；葡萄糖测定试剂盒：由中生北控生物科技股份有限公司生 产提供；肝糖原测定试剂盒：由南京建成生物工程研究所生产；胰岛素：R&D公司生产；糖 化血清蛋白：由南京建成生物工程研究所生产；甲醛：烟台市双双化工有限公司；浓硫酸 ： 上海振企化学试剂有限公司。
[0013] 1.2实验仪器
[0014] AL204系列电子天平，梅特勒一托利多仪器（上海）有限公司；VIS-7220N可见 分光光度计，北京瑞利分析仪器有限公司；TGL-16G台式离心机，上海安亭科学仪器厂生 产；HHS型电热恒温水浴锅，上海博讯实业有限公司医疗设备厂；KDC-160HR高速冷冻离心 机，科大创新股份有限公司中佳分公司生产；TES-1380PH酸度计，泰仕电子工业股份有限 公司；酶标仪，美国BI0-RAD公司，型号680 ;可调式移液枪，上海雷勃分析仪器有限公司； OLYMPUS BX61电动显微镜，日本OLYMPUS公司生产；TES-1380PH酸度计，泰仕电子工业股份 有限公司。
[0015] 1.3实验动物
[0016] 昆明种小鼠，雄性，体重18?22g，由山东鲁抗医药股份有限公司提供，合格证号： 0017170 ;实验室合格证号SYXK (豫）2010-001。
[0017] 2.实验方法
[0018] 2.1造模与给药
[0019] 取体重18_22g的昆明种小鼠108只，雄性，适应性饲养后，根据体重随机挑选12 只作为空白组，其余为造模组，造模组于实验开始前称重后尾静脉注射柠檬酸-柠檬酸钠 缓冲溶液配制成的链脲佐菌素80mg/kg, 7天后，尾部采血，测定血糖，选取16. 7mmol/L〈血 糖值<21mm〇l/L，并明显具有多饮多食多尿症状的小鼠60只。随机分为5组，分别为模型 组、二甲双胍组，冬凌草提取物大、中、小剂量组，每组12只。根据组别分别灌服相应药物， 空白组和模型组灌服同体积的〇. 5% CMC-Na(0. lml/10g)，盐酸二甲双胍片组（375mg/kg， 为临床剂量的15倍，用0. 5%的CMC-Na配制，0. lml/10g)，冬凌草提取物大、中、小剂量组 (400、200、100mg/kg，用 0.5% 的 CMC-Na 配制，0· lml/10g)，每天一次，连续给药 30 天，分别 于给药后的第10、20、30天时尾部采血，测定血糖值。于第31天，灌胃后2h，取血，分离血 清，测血清中胰岛素、糖基化血清蛋白的含量，取肝脏适量，测肝糖原含量；取胰脏、肾脏甲 醛固定，做组织病理切片，观察病理组织变化。
[0020] 柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液的配制：分别称取500. 4mg柠檬酸和501. 2柠檬酸钠 溶于50ml的容量瓶中，此溶液即为ph = 4. 2的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液。为确保其准 确性可用PH计校正。临用前配制（由于链脲佐菌素不十分稳定，且对血管刺激较大，用缓 冲液配制链脲佐菌素可减轻这些负面影响
[0021] 3.统计方法
[0022] 数据分析用SPSS 17. 0 for windows医用统计包进行数据资料的统计学处理，计 量资料用平均数土标准差U±s)表示，各组间比较采用单因素方差分析，方差检验齐者 用最小显著差数（LSD)法，方差不齐者用Games-Howell法检验，等级资料采用Ridit检验。
[0023] 4.实验结果与小结
[0024] 表1冬凌草提取物对链脲佐菌素致小鼠糖尿病模型血糖的影响（i±s)
[0025]
【权利要求】
1. 一种冬凌草提取物在制备降糖药物中的应用，所述的冬凌草提取物是，冬凌草粉碎 为过20-30目筛的粗粉，加冬凌草10倍重量的石油醚回流提取2次，每次lh，弃去石油醚 液，冬凌草药渣挥干石油醚，冬凌草药渣再加冬凌草10倍重量质量浓度为50%的乙醇浸泡 0. 5h，回流提取3次，每次lh，过滤，合并滤液，减压回收乙醇至无醇味，并浓缩至50°C时相 对密度为1. 10?1. 20的浓缩液，浓缩液加蒸馏水分散得含生药量0. lg/ml的分散液；分 散液上AB-8型大孔吸附树脂柱，先用4倍柱体积蒸馏水洗脱，弃去水液，继用4倍柱体积的 质量浓度为10%的乙醇洗脱，弃去质量浓度为10%的乙醇液，再用8倍柱体积的质量浓度为 50%的乙醇洗脱，收集质量浓度为50%的乙醇洗脱液，减压回收乙醇，50°C干燥粉碎，得冬凌 草提取物，冬凌草提取物中总黄酮质量含量58%以上。
【文档编号】A61K36/53GK104083436SQ201410355714
【公开日】2014年10月8日 申请日期:2014年7月24日 优先权日:2014年7月24日
【发明者】苗明三, 苗艳艳, 王灿 申请人:河南中医学院