一种从人心果叶子提取天然抗氧化物质的方法
【专利摘要】本发明公开了一种从人心果叶子提取天然抗氧化物质的方法，包括：以新鲜的人心果叶子为原料，以55～65％(v/v)乙醇为溶剂，采用匀浆一负压空化技术进行联合提取，得到乙醇水提取液；所述乙醇水提取液经离心或抽滤分离，得到分离液；重复所述匀浆一负压空化和离心或抽滤步骤至少2次，并合并所述分离液；合并的上述分离液进行真空浓缩后，用水溶解，并经过超声震荡制得料液浓度为10～15mg/mL的混悬液；然后用大孔吸附树脂对所述混悬液进行富集分离，并用70～80％(v/v)的乙醇水溶液作为洗脱剂进行洗脱，并收集洗脱液；将所述洗脱液蒸馏得到天然抗氧化物质浓缩溶液；所述天然抗氧化物浓缩溶液经真空冷冻干燥得到固体的天然抗氧化物质提取物。得到的提取物主要为酚酸类化合物；且提取物具有较强的体外抗氧化能力和抑菌能力。
【专利说明】一种从人心果叶子提取天然抗氧化物质的方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于天然抗氧化物质的提取领域，具体涉及从人心果叶子提取天然抗氧化 物质的方法。
【背景技术】
[0002] 人心果（Manikara zapodiIla)亦称吴凤柿、沙漠吉拉，为山榄科（Sapotaceae)铁 线子属（Manilkara Adans)的常绿果树，原产墨西哥南部中美洲、西印度群岛一带，因人心 果外形长得像人的心脏，故因而得名。我国于1990年首先引种至福建，此后广东、台湾相继 引种成功。目前人心果主要分布在台湾、海南、福建、广东、广西等省份。果实可食，味甜可 口，富含多种营养成分，具有降血脂、抗炎和抗肿瘤等多种保健功效；树干之乳汁为口香糖 原料；种仁含油率20% ;树皮含植物碱，可治热症。
[0003] 长期以来，人们为了保鲜和防止氧化，大多使用合成的抗菌剂和抗氧化剂。但是人 工合成的抗菌剂、抗氧化剂虽然具有高效的特点，但是其高毒性慢慢引起人们的关注，随着 人们健康意识和环保意识的增强，开发新的天然抗菌剂、抗氧化剂就取代合成抗菌剂、抗氧 化剂成为食品抗菌剂、抗氧化剂研究的方向，而且天然抗菌剂、抗氧化剂具有实用、高效、低 毒的特点。
【发明内容】
[0004] 为了弥补有关人心果叶子中活性物质的提取及其抗氧化和抑菌活性研究的空白， 本发明提供了一种从人心果叶子提取天然抗氧化物质的方法，该方法可获得并高效浓缩了 人心果叶子中的天然活性物质，同时大大提高了提取物中抗氧化和抑菌物质的含量。
[0005] 根据本发明的一个实施方式，提供了一种从人心果叶子提取天然抗氧化物质的方 法，包括以下步骤：以新鲜的人心果叶子为原料，以55?65% (v/v)乙醇为溶剂，采用匀 浆-负压空化技术进行联合提取，得到乙醇水提取液；所述乙醇水提取液经离心或抽滤分 离，得到分离液；重复匀浆-负压空化联合提取和离心或抽滤步骤至少2次，并合并所述 分离液；合并的所述分离液进行真空浓缩后，用水溶解，并经过超声震荡制得料液浓度为 10?15mg/mL的混悬液；然后用大孔吸附树脂对所述混悬液进行富集分离，并用70?80% (v/v)的乙醇水溶液作为洗脱剂进行洗脱，并收集洗脱液；将所述洗脱液蒸馏得到天然抗 氧化物质浓缩溶液；所述天然抗氧化物质浓缩溶液经真空冷冻干燥得到固体的天然抗氧化 物质提取物。
[0006] 所述匀浆-负压空化技术是由匀浆诱导后直接进行负压空化提取。匀浆诱导所用 的提取溶剂为55?65% (v/v)的色谱级乙醇，所用的提取溶剂体积（mL)与所述人心果叶 子的质量（g)之比为25 : 1?30 : 1，匀浆提取时间为40?50s。负压空化提取时间为 15 ?20min，负压压强为-0· 06 ?-0· 08MPa。
[0007] 所述大孔吸附树脂选自 HP-20、D4020、AB-8、ADS-17、HPD722、DM130、HPD826 或 D3520。
[0008] 所述真空冷冻干燥的时间为12?18小时，冷冻干燥的温度为-45±2°C，真空度为 15±3Pa。
[0009] 根据上述本发明的提取方法，提取过程以乙醇水为溶剂，采用匀浆-负压空化技 术联合提取，提取率较高，提取时间较短，操作简单，所用试剂毒性低，用量少，且以人心果 的叶子作为生产原料，来源广泛、可再生，提高了其生物利用度。因此，应用本发明方法可实 现从人心果叶子中提取天然抗氧化物质的广泛生产。由此所获得的产品中抗氧化和抑菌物 质含量高，且活性较强。
[0010] 由上述方法提取的高浓度活性物质可用于开发高含量的新型天然人心果抗氧化 剂和抑菌剂，以用于保健功能，并可作为食品等的天然添加剂，实现人心果高附加值综合利 用。
【专利附图】
【附图说明】
[0011] 图1是370nm波长下检测的根据本发明的方法提取的目标产物中多酚物质的HPLC 色谱图。
[0012] 图2是匀浆-负压空化联合提取的装置示意图。
【具体实施方式】
[0013] 根据本发明的实施方式，提供一种人心果叶子提取物及提取方法和应用，具体如 下：以新鲜的人心果叶子为原料，以55?65% (v/v)，优选60% (v/v)的乙醇为溶剂，采用 匀浆-负压空化技术进行联合提取，得到乙醇水提取液；所述乙醇水提取液经离心或抽滤 分离，得到澄清的分离液；重复所述匀浆-负压空化和离心或抽滤步骤至少2次，并合并所 述分离液；合并的所述分离液进行真空浓缩，用水溶解，并经过超声震荡混悬；然后用大孔 吸附树脂进行富集分离，并用70?80% (v/v)的乙醇水溶液作为洗脱剂进行洗脱，并收集 洗脱液；将所述洗脱液蒸馏得到天然抗氧化物质浓缩溶液；所述天然抗氧化物质浓缩溶液 经真空冷冻干燥得到固体的天然抗氧化物质提取物。
[0014] 上述提取步骤中所用的溶剂为55?65% (v/v)，优选60% (v/v)乙醇，优选为色 谱级乙醇。
[0015] 优选地，在根据本发明的从人心果叶子提取天然抗氧化物质的方法中，匀浆-负 压空化技术是由匀浆诱导后直接进行负压空化提取。其中，匀浆诱导所用的提取溶剂为 60% (v/v)的色谱级乙醇，所用的提取溶剂体积与所述人心果叶子的质量比为25 : 1? 30 : 1，匀浆提取时间为40?50s。此外，负压空化提取时间为15?20min，负压压强 为-0· 06 ?-0· 08MPa。
[0016] 匀浆-负压空化技术采用本领域常用的匀浆-负压空化联合装置进行。优选地， 如图2所示，将人心果叶子与提取溶剂（例如60%的乙醇）一起加入匀浆装置①中，经匀浆 后直接导入至负压空化提取装置②中。在负压空化提取装置②中通入氮气，经负压空化提 取后提取液进入收集装置③中进行收集，随后通过泵④输出。
[0017] 在根据本发明的从人心果叶子提取天然抗氧化物质的方法中，大孔吸附树脂选自 HP-20、D4020、AB-8、ADS-17、HPD722、DM130、HPD826 或 D3520,经提取率及抗氧化活性和抑 菌活性验证，优选出DM130作为富集分离所用的大孔吸附树脂。
[0018] 此外，合并的分离液在用大孔吸附树脂进行富集分离之前，优选进行浓缩，例如通 过蒸馏或真空浓缩。优选地，经过真空浓缩的分离液可形成为膏体。分离液经真空浓缩形成 提取浸膏后，用水溶解，并经过超声震荡混悬，配制成料液浓度为10?15mg/mL的混悬液， 然后再用大孔吸附树脂进行富集分离。由于提取浸膏所含成分复杂，不容易用水溶解，利用 超声震荡混悬后，提取浸膏很均匀地与水混悬。因此，上样后，大孔吸附树脂可以更好地吸 附样品，更便于后续的富集分离。
[0019] 上述真空冷冻干燥的时间为12?18小时，冷冻干燥的温度为-45 ± 2°C，真空度为 15±3Pa。
[0020] 经过上述方法提取得到的天然抗氧化物质的颜色通常为深绿色。
[0021] 根据本发明的一个【具体实施方式】，上述从人心果叶子提取天然抗氧化物质的具体 方法步骤如下：
[0022] (1)取一定量的新鲜的人心果叶片，加入55?65% (v/v)的乙醇进行匀浆诱导， 所用溶剂体积（mL)与人心果叶片的质量（g)之比为25 : 1?30 : 1。匀浆提取时间为 40?50s。然后将匀浆后的溶液和材料直接导入联合的负压空化提取装置中，负压空化提 取时间为15?20min，负压压强为-0. 06?-0. 08MPa。将上述匀浆-负压空化联合提取 后的乙醇水提取液进行离心或抽滤，得到分离液。之后，重复上述提取和离心或抽滤步骤2 次，合并分离液。
[0023] (2)然后，将合并的分离液真空浓缩至膏状，得到提取浸膏。将所得的提取浸膏加 入水，于超声波振荡反应器中进行溶解混悬。混悬后，配制成料液浓度为10?15mg/mL的 混悬溶液。
[0024] 同时，将大孔吸附树脂采用湿法装柱，保留液面，上样量I. 0?I. 5BV，以流速 1 ±0. lmL/min条件下过吸附柱。吸附后，可选地先用纯净水3?5BV洗杂质，然后再用70? 80% (v/v)的乙醇水溶液5?8BV洗脱，收集洗脱液。
[0025] (3)将收集到的洗脱液进行蒸馏浓缩，然后再经过真空冷冻干燥，得到固体的人心 果叶子提取物。冷冻干燥的温度为-45±2°C，时间为12?18小时，真空度为15±3Pa。
[0026] 由上述方法制得的固体提取物的颜色通常为深绿色。
[0027] 根据另一实施方式，提供了一种人心果叶子提取物用于制造抗氧化剂和抑菌剂的 应用。
[0028] 经检测，根据本发明的方法提取人心果叶子得到的提取物主要成分为酚酸类化合 物。得到的人心果叶子提取物，对于DPPH自由基的清除能力较强（IC 5tl值为0. 04mg/mL)，是 Trolox的3. 7倍。对于ABTS自由基的清除能力也很强（IC5tl值为4. 67 μ g/mL)，是Trolox 的5. 48倍；对于铁离子有较强的还原能力（2. 86mmol FeS04/g)，是Trolox的8. 8倍；同时 具有较强的抑菌活性。因此，可将根据本发明的人心果叶子提取物用于制备抗氧化剂和抑 菌剂等用途。
[0029] 根据本发明的另一【具体实施方式】，上述人心果叶子提取物的提取方法可包括：
[0030] (1)提取：取一定量的新鲜人心果叶子，加入60% (v/v)的色谱级乙醇进行匀浆诱 导，所用色谱级乙醇体积（HiL)与人心果叶子的质量（g)之比为25 : 1?30 : 1，匀浆提 取时间为40?50s，然后将匀浆后的溶液和人心果叶子直接导入联合的负压空化提取装置 中，负压空化提取时间为15?20min，负压压强为-0. 06?-0. 08MPa。
[0031] (2)离心或抽滤分离：提取液经离心机在转速10000 ± IOOrpm下离心20 ±2min，分 离出上清液，弃去沉淀物；或者提取液经抽滤装置，滤得分离液。
[0032] (3)重复上述提取和离心或抽滤步骤2次，合并分离液。然后将其真空浓缩至膏 状，得到提取浸膏。
[0033] (4)吸附分离：将所得的提取浸膏加入水，于超声波振荡反应器中进行溶解混悬。 混悬后，配制成料液浓度为10?15mg/mL的混悬溶液。同时将大孔吸附树脂采用湿法装柱， 保留液面，上样量I. 〇?I. 5BV，以流速1 ±0. lmL/min条件下过吸附柱。吸附后先用纯净水 3?5BV洗杂质，然后再用70?80% (v/v)的乙醇水溶液5?8BV洗脱，收集洗脱液。用 于富集分离的大孔吸附树脂为DM130。
[0034] (5)浓缩：将收集的洗脱液蒸出乙醇得人心果叶子提取物浓缩溶液；
[0035] (6)真空冷冻干燥：将人心果提取物浓缩溶液经冷却后在真空冷冻下进行脱水 干燥，即得固体的人心果叶提取物，其中冷冻干燥的温度为_45±2°C，冷冻干燥的时间为 12?18小时，真空度为15±3Pa。
[0036] 以下，将参照图1对本发明涉及的从人心果叶中提取天然抗氧化物质的方法进行 更详细地说明。
[0037] 实施例1
[0038] (1)将新鲜的人心果叶子Ig和60% (v/v)乙醇25mL置于匀浆-负压空化联合提 取装置的匀浆装置中，然后进行提取。匀浆提取时间为40s，然后将匀浆后的溶液和材料直 接导入联合的负压空化提取装置中，负压空化提取时间为15min，负压压强为-0. 06MPa，得 乙醇水提取液；
[0039] (2)将乙醇提取液冷却后经离心机离心分离，设置离心机转速为lOOOOrpm，离心 20min，得到分离液；
[0040] (3)重复2次上述提取和离心分离步骤，合并分离液；
[0041] (4)将上述合并的分离液真空浓缩，加水溶解后经过超声震荡制成料液浓度为 10mg/mL的混悬液，以5ml/min的流速加至已经过处理的DM130大孔吸附树脂富集柱，之后 用3BV的纯净水洗柱，再用5BV的70% (v/v)的乙醇水溶液以1±0. lmL/min的流速洗脱， 且合并洗脱液。所有的操作在4°C低温避光下进行。
[0042] (4)在常压下（I. OlX IO5Pa)蒸馏出上述洗脱液中的乙醇，得到天然抗氧化物质浓 缩溶液。
[0043] (5)真空冷冻干燥：将天然抗氧化物质浓缩溶液经冷却后在真空下于_45°C进行 12小时的脱水干燥，真空度为12Pa，即得粉状天然抗氧化活性物质0. 125g，得率12. 5%。
[0044] 实施例2
[0045] (1)将新鲜的人心果叶子Ig和色谱级60% (v/v)色谱级乙醇30mL置于匀浆-负 压空化联合提取装置中。然后进行提取，匀浆提取时间为50s，然后将匀浆后的溶液和材料 直接导入联合的负压空化提取装置中，负压空化提取时间为20min，负压压强为-0. 08MPa， 得乙醇水提取液。
[0046] (2)将提取液直接经抽滤装置进行抽滤后，得澄清滤液。
[0047] (3)重复2次上述提取和抽滤分离步骤，合并滤液。
[0048] (4)将上述合并的滤液浓缩至膏体，再将该膏体加水后经过超声震荡制成料液浓 度为15mg/mL的混悬液，以5ml/min的流速加至已经过处理的DM130大孔树脂富集柱，之后 用5BV纯净水洗柱，再用8BV的80% (v/v)的乙醇水溶液洗脱，合并洗脱液。
[0049] (5)在常压下（I. 01 X IO5Pa)下从洗脱液中蒸出乙醇得到天然抗氧化物质浓缩溶 液。
[0050] (6)真空冷冻干燥：将天然抗氧化物质浓缩溶液经冷却后在真空下_45°C进行18 小时的脱水干燥，真空度为12Pa，即得粉状天然抗氧化活性物质0. 146g，得率14. 6%。
[0051] 对比例1
[0052] (1)将干净并粉碎的人心果叶子Ig和60% (v/v)乙醇30mL置于IOOml单颈瓶中， 然后进行搅拌回流提取，控制回流温度为55°C，回流时间为120min，得乙醇水提取液。
[0053] (2)将乙醇提取液冷却后经离心机离心分离，设置离心机转速为lOOOOrpm，离心 20min，分离出上清液。
[0054] (3)重复2次上述浸提和离心分离步骤，合并上清液。
[0055] (4)将上述合并的上清液浓缩，加水后经过超声震荡制成混悬液，以5ml/min的流 速加至已经过处理的DM130大孔树脂吸附富集柱，之后用3BV纯净水洗柱，再用70% (v/v) 的乙醇水溶液5BV，以1±0. lmL/min的流速洗脱，且合并洗脱液。所有的操作在4°C低温避 光下进行。
[0056] (4)在常压下（I. OlX IO5Pa)蒸出上述洗脱液中的乙醇，得到天然抗氧化活性物质 溶液。
[0057] (5)真空冷冻干燥：将天然抗氧化物质溶液经冷却后在真空下于_45°C进行脱水 干燥12小时，真空度为12Pa，即得粉状天然抗氧化活性物质0. 102g，得率10. 2%。
[0058] 对比例2
[0059] (1)将干净并粉碎的人心果叶子Ig和60% (v/v)乙醇9mL置于有盖的玻璃试管 中，用漩涡仪混匀，然后进行超声波水浴浸提。控制超声波水浴温度为40°C，超声时间为 30min，得乙醇水提取液。
[0060] (2)将乙醇提取液冷却后经离心机离心分离，设置离心机转速为5000rpm，离心 30min，分离出上清液。
[0061] (3)重复2次上述提取和离心分离步骤，合并上清液。
[0062] (4)将上述合并的上清液浓缩，加水后经过超声震荡制成混悬液，以5ml/min的 流速加至已经过处理的DM 130大孔树脂吸附富集柱，之后用3BV纯净水洗柱，再用5BV的 70% (v/v)的乙醇水溶液以1±0. lmL/min的流速洗脱，且合并洗脱液。所有的操作在4°C 低温避光下进行。
[0063] (4)在常压下（I. OlX IO5Pa)蒸出上述洗脱液中的乙醇，得到天然抗氧化活性物质 溶液。
[0064] (5)真空冷冻干燥：将天然抗氧化物质溶液经冷却后在真空下于_45°C进行脱水 干燥12小时，真空度为12Pa，即得粉状天然抗氧化活性物质0. 110g，得率11. 0%。
[0065] 对比例3
[0066] (1)将新鲜的人心果叶子Ig和色谱级60% (v/v)乙醇30mL置于匀浆-负压空化 联合提取装置中，然后进行提取，匀浆提取时间为50s。然后将匀浆后的溶液和材料直接导 入联合的负压空化提取装置中，负压空化提取时间为20min，负压压强为-0. OSMPa得乙醇 水提取液。
[0067] (2)将提取液冷却后经离心机离心分离，设置离心机转速为lOOOOrpm，离心 20min，分离出上清液。
[0068] (3)重复2次上述提取和离心分离步骤，合并上清液。
[0069] (4)将上述合并的上清液浓缩，加水后经过超声震荡制成混悬液，以5ml/min的 流速加至预先经净化处理的非极性的C18十八烷基固相萃取柱，之后用纯净水洗柱，再用 70% (v/v)的乙醇水溶液洗脱，合并洗脱液。
[0070] (5)在常压下（I. 01 X IO5Pa)下从洗脱液中蒸出乙醇得到天然抗氧化物质溶液。
[0071] (6)真空冷冻干燥：将天然抗氧化物质溶液经冷却后在真空下_45°C进行脱水干 燥12小时，真空度为12Pa，即得粉状天然抗氧化活性物质0. 103g，得率10. 3%。
[0072] 在根据本发明的提取方法中，应用匀浆-负压空化联合提取，大孔吸附树脂进行 富集，作为人心果叶子活性物质的提取富集方法，其优点在于：
[0073] (1)预先经过匀浆处理后，与搅拌回流及超声波水浴浸提的方法相比，其细胞破碎 程度较大，且植物材料充分混悬于溶液中，从而增加活性成分的游离，而且相比干燥粉碎再 提取，是环境友好型的，不会产生粉尘。
[0074] (2)同时，在根据本发明的方法中，联合负压空化进行提取，通过通入的氮气在溶 液内部和固液界面产生一系列的小气泡，气泡随之上升，扩大，溃灭，在固体材料表面一瞬 间溃灭产生巨大的瞬时压强。该过程随着氮气的不断通入而反复进行，进一步破坏细胞壁， 释放活性物质。经过释放，传质，进而促进活性物质在提取溶剂中的溶解。与搅拌回流的提 取方法相比，可最大程度地保护细胞中的有效成分，不至于因为高温等因素的影响，而受到 破坏。
[0075] (3)本发明的方法再与超声波水浴浸提的方法相比，要求的设备简单，易于操作， 可实现大规模的生产。
[0076] (4)本发明采用大孔吸附树脂进行富集，而非C18十八烷基固相萃取柱，因其具有 价格低、操作方便、选择性好、再生处理方便，吸附速度快、重现性好、产品质量稳定，适合于 大规模生产等优点。而C18十八烷基固相萃取柱价格较高，多用于颜色较丰富的提取物的 纯化，去除较多的色素。
[0077] 因此，应用本发明的方法获得人心果叶活性物质的提取率较高，提取时间较短，操 作简单，提取物活性较强。
[0078] 以下对根据实施例2的天然抗氧化活性物质进行活性物质组成及抗氧化性和抑 菌性进行测试。
[0079] 测试例1
[0080] 将实施例2得到的人心果叶提取物干粉用于测定其多酚的组成和含量分析。
[0081] 采用高效液相色谱法测定了上述目标产物中的多酚组成。其中，高效液相色谱 (HPLC)条件为 ：
[0082] Supelco (Bellefonte，PA) Discovery C18 十八烧基固相萃取柱，柱温 35°C ;
[0083] LC-20AD分离器单元；
[0084] SPD-20A UV/VIS 检测器；
[0085] LC solutionl. 26SP1 色谱管理软件；
[0086] 流动相为乙腈和10 %乙酸水溶液的混合液，流速为I. OmL/min，采用梯度洗脱；
[0087] 检测波长为 370nm、280nm、520nm。
[0088] 同时在相同的色谱条件下绘制没食子酸、绿原酸、表儿茶酸、花青素、香豆酸、阿魏 酸、鞣花酸、芥子酸、芦丁、肉桂酸等标准样品的标准曲线，从而定性和定量确定其中的多酚 组分和含量。
[0089] 目标产物中多酚物质经上述乙酸-乙腈体系分离后得到的HPLC图谱（图1)，再通 过与先用HPLC分析多酚物质的标准样品比较，通过标准样品的分离时间和最大吸收确定 目标产物中的主要成分。
[0090] 如图1所示，在370nm波长下检测的目标产物中多酚物质的HPLC色谱图：
[0091] 1、没食子酸；2、绿原酸；3、表儿茶酸；4、花青素；5、香豆酸；6、阿魏酸；7、鞣花酸； 8、芥子酸；9、芦丁；10、肉桂酸。
[0092] 对以上色谱分析结果进行定量，并换算为各组分基于每克人心果叶子的含量示于 表1中。
[0093] 表1.人心果叶子中的多酚含量
【权利要求】
1. 一种从人心果叶子提取天然抗氧化物质的方法，包括以下步骤： 以新鲜的人心果叶子为原料，以55?65% (v/v)乙醇为溶剂，采用匀浆-负压空化技 术进行联合提取，得到乙醇水提取液； 所述乙醇水提取液经离心或抽滤分离，得到分离液； 重复匀浆-负压空化联合提取和离心或抽滤步骤至少2次，并合并所述分离液； 合并的所述分离液进行真空浓缩后，用水溶解，并经过超声震荡制得料液浓度为10? 15mg/mL的混悬液； 然后用大孔吸附树脂对所述混悬液进行富集分离，并用70?80% (v/v)的乙醇水溶液 作为洗脱剂进行洗脱，并收集洗脱液； 将所述洗脱液蒸馏得到天然抗氧化物质浓缩溶液； 所述天然抗氧化物质浓缩溶液经真空冷冻干燥得到固体的天然抗氧化物质提取物。
2. 根据权利要求1所述的从人心果叶子提取天然抗氧化物质的方法，其特征在于，所 述匀浆-负压空化技术是由匀浆诱导后直接进行负压空化提取，其中，匀浆诱导所用的提 取溶剂为55?65% (v/v)的色谱级乙醇，所用的提取溶剂体积与所述人心果叶子的质量比 为25 : 1?30 : 1，匀浆提取时间为40?50s，负压空化提取时间为15?20min，负压压 强为-〇· 06 ?-0· 08MPa。
3. 根据权利要求1所述的从人心果叶子提取天然抗氧化物质的方法，其特征在于，所 述大孔吸附树脂选自 HP-20、D4020、AB-8、ADS-17、HPD722、DM130、HPD826 或 D3520。
4. 根据权利要求1所述的从人心果叶子提取天然抗氧化物质的方法，其特征在于，所 述真空冷冻干燥的时间为12?18小时，冷冻干燥的温度为-45±2°C，真空度为15±3Pa。
【文档编号】A61K127/00GK104256640SQ201410521401
【公开日】2015年1月7日 申请日期:2014年9月30日 优先权日:2014年9月30日
【发明者】张秀梅, 马飞跃, 刘玉革, 涂行浩, 付琼 申请人:中国热带农业科学院南亚热带作物研究所