一种含蛹虫草成分的精华液及其制备方法
【专利摘要】一种含蛹虫草成分的精华液，含有芦荟发酵物、虫草提取物、水解蜂王浆蛋白、马齿苋提取物、柿叶提取物、橘子皮提取物、黄芩根提取物、桑黄提取物、白柳皮提取物、香草提取物、冷香玫瑰花提取物、绿豆提取物、绿茶提取物、八角茴香提取物、膜荚黄芪根提取物、人参根提取物、松口蘑提取物、紫草提取物、洋甘菊提取物、树苔提取物、金银花提取物二十一种活性成分，具有安全无毒的特点。本发明还提供一种含蛹虫草成分的精华液的制备方法，该制备方法简单，且有效降低生产成本。
【专利说明】一种含蛹虫草成分的精华液及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及化妆品领域，尤其涉及一种含蛹虫草成分的精华液及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 北冬虫夏草学名叫蛹虫草(Cbr办ce/75· ?i/iiaris)，它与青海冬虫夏草同属于真 菌门子囊菌亚门虫草属，因此，被业内专家称为冬虫夏草的同属"兄弟"。蛹虫草生活史的有 性阶段包括菌丝体生长和子实体生长。鳞翅目、鞘翅目、双翅目等昆虫幼虫或蛹感染到拟青 霉的孢子，当环境条件适宜时，孢子便萌发形成菌丝体，菌丝体吸取虫(蛹）体内的营养作为 其生长发育的物质和能源。当菌丝把虫(蛹）体内的各种组织和器官分解完毕后，菌丝体发 育由营养生长转为生殖生长，菌丝体逐渐扭结分化形成菌核并穿出体外成为橘黄色或橘红 色的顶部略膨大的、呈棒状的子座(子实体)，子座多从虫体的头部、胸部、近尾部等处伸出。
[0003] 野生的北冬虫夏草与传统的冬虫夏草相似，在自然界中极为稀少。多数研究认为， 北冬虫夏草在药效成分上与天然冬虫夏草相近，其药用和食用价值可与天然的冬虫夏草媲 美。工厂化生产的北冬虫夏草素含量高于天然冬虫夏草，其蛋白质、氨基酸、维生素和微量 元素的含量均达到甚至超过了天然冬虫夏草的水平。在已报道的350余种虫草菌中，蛹虫 草是少有的能形成大量虫草素的虫草菌。因为与冬虫夏草亲缘关系最近、有效成分相当甚 至更高，且可以人工栽培，北冬虫夏草成为天然冬虫夏草的理想代用品。蛹虫草富含多种生 物活性物质，如虫草多糖、虫草素、虫草酸、SOD酶、腺苷、多肽/氨基酸、甘露醇等，以蛹虫草 提取物为原料制成的化妆品，则具有抗氧化、抗衰老和提供营养、抑制黑色素合成等作用， 能对人体肌肤产生补充营养、改善粗糙、增强弹性、保湿美白等效果。
[0004] 由于年龄增长及季节变化、紫外线照射、抽烟、工作压力大、在电脑、电视机前久 坐、接触放射性物质等各种因素造成了人们的皮肤问题，如真皮层塌陷、保湿能力下降、皮 肤干燥老化。因此，化妆品已经成为人们的一种必不可少的日常用品。精华液，是一种添加 有浓缩的高营养成分的护肤品，根据其配方的针对性，具有抗衰、抗皱、紧致、保湿、美白等 功效。目前市售的大多精华液产品成分中添加了多种浓缩精华，同时也添加了多种防腐剂， 尤其是容易致敏的防腐剂，如二丁基羟基甲苯和苯甲醇。因此，亟需开发一种含有大量生物 活性成分，既有良好使用效果、又不会损害消费者的身体健康的新型精华液。
【发明内容】
[0005] 针对上述问题，本发明提供一种含蛹虫草成分的精华液及其制备方法，具有安全 无毒、抗皱的特点，且生产成本较低。
[0006] 为实现本发明的上述目的，本发明提供一种含蛹虫草成分的精华液，是由以下A、 BI、B2、C、D和E组分原料按重量份数配制而成。
[0007] A 组分：纯水 28-36 份、卡波 U-20 0· 24-0. 38 份。
[0008] Bl组分：纯水42-55份、海藻糖L 7-2. 5份、甜菜碱2. 3-3. 75份。
[0009] B2组分：甘油1. 5-2. 3份、羧甲基β -葡聚糖0. 1-0. 18份。
[0010] C组分：丁二醇4. 2-6份、光甘草啶0. 02-0. 04份、尼泊金酯0. 2-0. 35份、黄芩根 提取物0. 55-0. 78份、PEG-40氢化蓖麻油0. 4-0. 58份、香精0. 03-0. 085份。
[0011] D组分：氢氧化钾（10%) 0. 9-1. 4份。
[0012] E组分：HA (小分子海华1%溶液）4-5. 5份、人表皮生长因子0· 025-0. 4份、酸性 成纤维细胞生长因子〇. 15-0. 3份、锌金属硫蛋白0. 02-0. 035份、水解蜂王浆蛋白0. 3-0. 6 份、绿豆提取物0. 5-1. 05份、虫草提取物4-5. 8份、芦荟发酵物0. 5-1. 3份、马齿苋提取物 0. 1-0. 5份、柿叶提取物0. 1-0. 3份、橘子皮提取物0.01-0. 05份、桑黄提取物0.01-0. 1份、 白柳皮提取物〇. 01-0. 03份、香草提取物0. 01-0. 03份、冷香玫瑰花提取物0. 01-0. 03份、 绿茶提取物〇. 01-0. 03份、八角茴香提取物0. 01-0. 03份、膜荚黄芪根提取物0. 01-0. 05 份、人参根提取物〇. 01-0. 02份、松口蘑提取物0. 01-0. 02份、紫草提取物0. 01-0. 03份、洋 甘菊提取物〇. 01-0. 02份、树苔提取物0. 01-0. 03份、金银花提取物0. 01-0. 02份。
[0013] 所述E组分中虫草提取物的制备方法为。
[0014] 蛹虫草菌丝体发酵液中虫草多糖的超声提取。
[0015] (1)采用液体深层发酵方式获得蛹虫草菌丝体。
[0016] 蛹虫草深层液体发酵的工艺如下：发酵培养基组成为：20g/L蔗糖+2g/L玉米浆 +8g/L芽孢杆菌菌体蛋白+0. 5g/L MgS04*7H20+lg/L KH2PO4,采用两阶段控制pH策略，即开 始时控制pH值恒定在6. 0-7. 0之间的某一数值，接种蛹虫草液体菌种后40h-60h再将pH 值恒定控制为5. 0-6. 0之间的某一数值。发酵罐内的通风量控制在1:0. 3-1:0. 6之间（单 位为m3/m3/min)，发酵罐搅拌速度控制在120_200r/min。
[0017] (2)菌丝体发酵液的超声提取。
[0018] 取上述经深层发酵获得的蛹虫草菌丝体发酵液100_200ml，超声（59Hz)处 理15-45min，经超声处理后的发酵液经离心后收集离心上清液，所得初次沉淀物再加 30-100ml碱性离子水进行二次超声处理，依次共超声处理三次。合并三次离心上清液，并用 旋转蒸发仪（30°C -50°C，转数60rpm)浓缩得20-30ml的浓缩液，加浓缩液3倍量的无水乙 醇，在4°C条件下沉淀8-12h，倾出上清液，沉淀用无水乙醇洗涤、干燥，得多糖粗品，即为虫 草提取物。
[0019] 所述碱性离子水是通过将纯水进行电解产生的。
[0020] 所述碱性离子水指标为pH :9· 80-13. 80,电位：彡-120mV。
[0021] 所述E组分芦荟发酵物的制备方法如下。
[0022] (1)表面净化：把芦荟鲜叶用清水洗干净，所述清水不能用含漂白剂的自来水，因 为漂白剂可导致芦荟液变色、变质。
[0023] (2)紫外线辐射杀菌：洗干净的芦荟鲜叶晾干后，运入样品准备室，所述样品准备 室为无菌室(室内备有杀菌消毒设备)，进行紫外灯辐照杀菌5-30min。
[0024] (3)去掉叶皮：在无菌室内去掉芦荟鲜叶叶皮，用消毒的刀片割开外皮，并将芦荟 凝胶原汁取出；将凝胶原汁和叶皮分别装入塑料桶。
[0025] (4)高速粉碎与沉淀：用高速粉碎机(转速10000-30000、时间0· 2-5分钟）把叶皮 组织捣碎，成为稀浆液；然后进行沉淀处理；上清液即成为芦荟叶原汁。
[0026] (5)芦荟发酵物的制备：所述芦荟发酵物包括芦荟凝胶发酵物与芦荟叶发酵物。
[0027] ①、以芦荟凝胶原汁为培养基，以异常汉逊酵母菌为接种菌种，菌液的接种量 1%-10% (体积百分比）。发酵温度26°c-31°c，发酵时间为20-30天，所得发酵物即为芦荟 凝胶发酵物。
[0028] ②、以芦荟叶原汁为培养基，以异常汉逊酵母菌为接种菌种，菌液的接种量1%_10% (体积百分比)。发酵温度26°C_31°C，发酵时间为20-30天，所得发酵物即为芦荟叶发酵物。
[0029] 所述马齿苋提取物、柿叶提取物、橘子皮提取物、黄芩根提取物、桑黄提取物、白柳 皮提取物、香草提取物、冷香玫瑰花提取物、绿豆提取物、绿茶提取物、八角茴香提取物、膜 荚黄芪根提取物、人参根提取物、松口蘑提取物、紫草提取物、洋甘菊提取物、树苔提取物、 金银花提取物的制备方法为：分别取粉末状的马齿苋、柿叶、橘子皮、黄芩根、桑黄、白柳皮、 香草、冷香玫瑰花、绿豆、绿茶、八角茴香、膜荚黄芪根、人参根、松口蘑、紫草、洋甘菊、树苔、 金银花，分别加碱性离子水震荡后得混合液，所述混合液经离心后收集离心上清液，所得初 次沉淀物分别再加碱性离子水进行二次提取，依次共提取三次；合并三次离心上清液并浓 缩得浓缩液，即分别得到马齿苋提取物、柿叶提取物、橘子皮提取物、黄芩根提取物、桑黄提 取物、白柳皮提取物、香草提取物、冷香玫瑰花提取物、绿豆提取物、绿茶提取物、八角茴香 提取物、膜荚黄芪根提取物、人参根提取物、松口蘑提取物、紫草提取物、洋甘菊提取物、树 苔提取物、金银花提取物。
[0030] 本发明还提供一种含蛹虫草成分的精华液的制备方法，包括以下步骤。
[0031] 步骤一、将A组分原料中的纯水按配方计量后加入均质乳化锅搅拌(转数 30-100rpm)，撒入卡波U-20,分散均匀，升温至80-90°C，搅拌溶解。
[0032] 步骤二、加入Bl和B2组分原料于80_90°C溶解后，降温至45°C。
[0033] 步骤三、C组分原料40°C预热后混合均匀，加入均质乳化锅，搅拌均匀，加入D组分 原料调整pH值至5. 5-6.0。
[0034] 步骤四、加入E组分原料搅拌均匀真空(真空度为0. 09-0. IOMPa)脱气10-20分钟。
[0035] 步骤五、降温至30_40°C，陈化24小时，灌装，分装并包装，即为成品。
[0036] 与现有技术相比本发明的有益效果。
[0037] 本发明提供一种含蛹虫草成分的精华液及其制备方法，所述含蛹虫草成分的精华 液含有芦荟发酵物、虫草提取物、水解蜂王浆蛋白、马齿苋提取物、柿叶提取物、橘子皮提取 物、黄芩根提取物、桑黄提取物、白柳皮提取物、香草提取物、冷香玫瑰花提取物、绿豆提取 物、绿茶提取物、八角茴香提取物、膜荚黄芪根提取物、人参根提取物、松口蘑提取物、紫草 提取物、洋甘菊提取物、树苔提取物、金银花提取物二十一种活性成分。其中芦荟发酵物具 有消除皮肤炎症及抗菌作用，且可以显著提高精华液的抗皱效果，尤其适合中老年女性使 用。马齿苋含有丰富的SL3脂肪酸及维生素 A样物质。SL3脂肪酸是形成细胞膜所必需的 物质；维生素 A样物质能维持上皮组织如皮肤、角膜的正常机能。橘子皮提取物含有萜烯 类物质，起抗菌和天然香料的作用。柿子叶中含有大量丹宁酸，可有效的杀灭各种细菌和真 菌，具有清洁和滋润皮肤的功效。水解蜂王浆蛋白具有调节皮肤代谢和抗氧化等功效。黄 芩根提取物富含黄酮类化合物，具有抑菌和收缩等功效。另外，本发明中采用液体深层发酵 方式获得蛹虫草菌丝体，具有培养周期短、活性物质易于提取等优点，很多药用真菌液体发 酵的活性物含量远高于人工栽培的药用真菌的活性物含量；菌丝体发酵液培养基中添加芽 孢杆菌的菌体蛋白，既提高蛹虫草菌丝体的产量，又大大节约了原料成本。
【具体实施方式】
[0038] 下面结合具体实施例进一步详细说明本发明。
[0039] 本发明提供一种含蛹虫草成分的精华液，由以下A、B1、B2、C、D和E组分原料配制 而成，其组分含量按重量份数为。
[0040] A组分：纯水33份、卡波U-20 0. 28份。
[0041] B1组分：纯水45份、海藻糖1 · 9份、甜菜碱3. 2份。
[0042] B2组分：甘油1. 8份、羧甲基β -葡聚糖0. 15份。
[0043] C组分：丁二醇5. 25份、光甘草啶0. 03份、尼泊金酯（ΡΗΕΝΟΝΙΡ)Ο. 3份、黄芩根提 取物0. 6份、PEG-40氢化蓖麻油0. 5份、香精0. 06份。
[0044] D组分：氢氧化钾（10%) L 2份。
[0045] E组分：HA (小分子海华1%溶液)5份、人表皮生长因子（rh EGF)0. 3份、酸性成纤 维细胞生长因子（aFGF)O. 2份、锌金属硫蛋白（MT-ZN)O. 035份、水解蜂王浆蛋白0. 4份、绿 豆提取物〇. 75份、虫草提取物4. 5份、芦荟发酵物0. 5份、马齿苋提取物0. 1份、柿叶提取 物0. 2份、橘子皮提取物0. 02份、桑黄提取物0. 03份、白柳皮提取物0. 01份、香草提取物 〇. 01份、冷香玫瑰花提取物〇. 02份、绿茶提取物0. 01份、八角茴香提取物0. 03份、膜荚黄 芪根提取物〇. 01份、人参根提取物〇. 01份、松口蘑提取物〇. 02份、紫草提取物0. 02份、洋 甘菊提取物〇. 01份、树苔提取物〇. 03份、金银花提取物0. 01份。
[0046] 所述E组分中虫草提取物的制备方法为。
[0047] 蛹虫草菌丝体发酵液中虫草多糖的超声提取。
[0048] (1)采用液体深层发酵方式获得蛹虫草菌丝体。
[0049] 野生蛹虫草是在含有大量昆虫蛋白的蚕蛹体内生长的，本发明采用添加与蚕蛹昆 虫蛋白更接近的芽孢杆菌菌体蛋白，使蛹虫草菌丝体发酵产率获得提高。蛹虫草深层液体 发酵的具体过程如下：发酵培养基组成为：20g/L蔗糖+2g/L玉米浆+8g/L芽孢杆菌菌体蛋 白+0. 5g/L MgS04*7H20+lg/L KH2PO4,采用两阶段控制pH策略，即开始时控制pH值恒定在 6. 2,接种蛹虫草液体菌种(该液体菌种由蛹虫草(Cbr办ce/75· 发酵而来）后50h 再将pH值恒定控制为5. 6。发酵罐内的通风量控制在1:0. 4(单位为m3/m3/min)，发酵罐搅 拌速度控制在180r/min。
[0050] (2)菌丝体发酵液的超声提取：取上述经深层发酵获得的蛹虫草菌丝体发酵液 100ml，超声（59Hz)处理30min，经超声处理后的发酵液经离心后收集离心上清液，所得沉 淀物再加 IOOml碱性离子水进行二次超声提取，依次共超声提取三次。合并三次离心上清 液并用旋转蒸发仪（40°C，转数60rpm)浓缩得30ml的浓缩液，加浓缩液3倍量的无水乙醇， 在4°C条件下沉淀10h，倾出上清液得沉淀物，该沉淀物用无水乙醇洗涤、干燥，得多糖粗 品，即为虫草提取物。
[0051] 所述碱性离子水是通过将纯水进行电解产生的；所述纯水经电解后，阴极附近水 中富集氢氧根离子，呈碱性，得到碱性离子水。
[0052] 所述碱性离子水出水口产生的碱性离子水指标为pH :9. 80-13. 80,电位： > _120mv。
[0053] 以蒸馏水提取蛹虫草菌丝体有效成分，提取效率为17%，而碱性离子水的提取效率 为23%。由此可见，所述碱性离子水提取蛹虫草菌丝体有效成分不仅大幅度提高了提取效 率，还避免了因使用化学溶剂带来的污染。
[0054] 所述E组分芦荟发酵物的制备方法。
[0055] (1)表面净化：首先把芦荟鲜叶用清水洗干净，所述清水不能用含漂白剂的自来 水，因为漂白剂可导致芦荟液变色、变质。
[0056] (2)紫外线辐照杀菌：洗干净的芦荟鲜叶晾干后，运入样品准备室，所述样品准备 室为无菌室(室内备有杀菌消毒设备)，进行紫外灯辐照杀菌6min。
[0057] (3)去掉叶皮：在无菌室内去掉芦荟叶皮，用消毒的刀片割开外皮，并将芦荟凝胶 原汁取出；将凝胶原汁和叶皮分别装入塑料桶。
[0058] (4)高速粉碎与沉淀：用高速粉碎机(转速20000、时间3分钟）把叶皮组织捣碎， 成为稀浆液；然后进行沉淀处理；上清液即成为芦荟叶原汁。
[0059] (5)芦荟发酵物的制备：所述芦荟发酵物包括芦荟凝胶发酵物与芦荟叶发酵物。
[0060] ①、以芦荟凝胶原汁为培养基，以异常汉逊酵母菌(批号：AS2. 297,上海北诺生物 科技有限公司）为接种菌种，接种量4% (体积百分比)。发酵温度28°C，发酵时间为25天， 所得发酵物即为芦荟凝胶发酵物。
[0061] ②、以芦荟叶原汁为培养基，以异常汉逊酵母菌(批号：AS2. 297,上海北诺生物科 技有限公司）为接种菌种，接种量4% (体积百分比）。发酵温度28°C，发酵时间为25天，所 得发酵物即为芦荟叶发酵物。
[0062] 现有技术常用芦荟原汁，而本发明采用芦荟发酵物，该芦荟发酵物与没经发酵的 芦荟原汁相比具有如下好处：成分更多样且分子更小，从而更容易被皮肤吸收。
[0063] 所述马齿苋提取物、柿叶提取物、橘子皮提取物、黄芩根提取物、桑黄提取物、白柳 皮提取物、香草提取物、冷香玫瑰花提取物、绿豆提取物、绿茶提取物、八角茴香提取物、膜 荚黄芪根提取物、人参根提取物、松口蘑提取物、紫草提取物、洋甘菊提取物、树苔提取物、 金银花提取物的制备方法为：分别取粉末状的马齿苋、柿叶、橘子皮、黄芩根、桑黄、白柳皮、 香草、冷香玫瑰花、绿豆、绿茶、八角茴香、膜荚黄芪根、人参根、松口蘑、紫草、洋甘菊、树苔、 金银花，分别加碱性离子水震荡后得混合液，所述混合液经离心后收集离心上清液，所得初 次沉淀物分别再加碱性离子水进行二次提取，依次共提取三次；合并三次离心上清液并浓 缩得浓缩液，即分别得到马齿苋提取物、柿叶提取物、橘子皮提取物、黄芩根提取物、桑黄提 取物、白柳皮提取物、香草提取物、冷香玫瑰花提取物、绿豆提取物、绿茶提取物、八角茴香 提取物、膜荚黄芪根提取物、人参根提取物、松口蘑提取物、紫草提取物、洋甘菊提取物、树 苔提取物、金银花提取物。
[0064] 本发明还提供一种含蛹虫草成分的精华液的制备方法，包括以下步骤。
[0065] 步骤一、将A组分原料中的纯水按配方计量后加入均质乳化锅搅拌(转数50rpm)， 撒入卡波U-20，分散均匀，升温至80°C，搅拌溶解。
[0066] 步骤二、加入Bl和B2组分原料于80°C溶解后，降温至45°C。
[0067] 步骤三、C组分原料40°C预热后混合均匀，加入均质乳化锅，搅拌均匀，加入D组分 原料调整pH值至6.0。
[0068] 步骤四、加入E组分原料搅拌均匀真空(真空度为0. 09-0. IOMPa)脱气10分钟。
[0069] 步骤五、降温至30°C，陈化24小时，灌装，分装并包装，即为成品。
[0070] 本实施例配方组成及其制备方法所得精华液产品的功效评价。
[0071] 1、实际使用效果评价：参加精华液效果评测受访者人数为33人，使用本实施例含 蛹虫草成分的精华液每天早晚各1次，30天为一疗程。使用本实施例含蛹虫草成分的精华 液一疗程后，对该精华液保湿、补水、吸收度、涂展性、粘稠度、气味做出客观评价，每种功效 评判标准共分三档，其中保湿：第一档为保湿效果非常好，第二档为保湿效果一般，第三档 为保湿效果不好；补水：第一档为补水效果非常明显，第二档为补水效果一般，第三档为补 水效果不好；吸收度：第一档为精华易于吸收，第二档为精华吸收效果一般，第三档为精华 吸收效果不好；涂展性：第一档为涂展性非常好，第二档为涂展性一般，第三档为涂展性不 好；粘稠度：第一档为粘稠度非常好，第二档为粘稠度一般，第三档为粘稠度不好；气味：第 一档为天然舒适，第二档为化学试剂明显，第三档为没有特殊味道。具体评价结果见表1。
[0072] 表1 :本发明含蛹虫草成分的精华液使用效果评价。
【权利要求】
1. 一种含蛹虫草成分的精华液，是由以下A、Bl、B2、C、D和E组分原料配制而成： A组分：纯水28-36份、卡波U-20 0. 24-0. 38份； B1组分：纯水42-55份、海藻糖1. 7-2. 5份、甜菜碱2. 3-3. 75份； B2组分：甘油1. 5-2. 3份、羧甲基0 -葡聚糖0. 1-0. 18份； C组分：丁二醇4. 2-6份、光甘草啶0. 02-0. 04份、尼泊金酯0. 2-0. 35份、黄芩根提取 物 0. 55-0. 78 份、PEG-40 氢化蓖麻油 0. 4-0. 58 份、香精 0. 03-0. 085 份； D组分：氢氧化钾0. 9-1. 4份； E组分：HA(小分子海华1%溶液)4-5. 5份、人表皮生长因子0. 025-0. 4份、酸性成纤维细 胞生长因子0. 15-0. 3份、锌金属硫蛋白0. 02-0. 035份、水解蜂王浆蛋白0. 3-0. 6份、绿豆 提取物0. 5-1. 05份、虫草提取物4-5. 8份、芦荟发酵物0. 5-1. 3份、马齿苋提取物0. 1-0. 5 份、柿叶提取物〇. 1-0. 3份、橘子皮提取物0. 01-0. 05份、桑黄提取物0. 01-0. 1份、白柳皮 提取物0. 01-0. 03份、香草提取物0. 01-0. 03份、冷香玫瑰花提取物0. 01-0. 03份、绿茶提 取物0. 01-0. 03份、八角茴香提取物0. 01-0. 03份、膜荚黄芪根提取物0. 01-0. 05份、人参 根提取物〇. 01-0. 02份、松口蘑提取物0. 01-0. 02份、紫草提取物0. 01-0. 03份、洋甘菊提 取物0. 01-0. 02份、树苔提取物0. 01-0. 03份、金银花提取物0. 01-0. 02份； 所述E组分中虫草提取物的制备方法为： (1) 采用液体深层发酵方式获得蛹虫草菌丝体： 蛹虫草深层液体发酵的工艺如下：发酵培养基组成为：20g/L蔗糖+2g/L玉米浆+8g/L 芽孢杆菌菌体蛋白+〇. 5g/L MgS04*7H20+lg/L KH2P04,采用两阶段控制pH策略，即开始时控 制pH值恒定在6. 0-7. 0之间的某一数值，接种蛹虫草液体菌种后40h-60h再将pH值恒定 控制为5. 0-6. 0之间的某一数值；发酵罐内的通风量控制在1:0. 3-1:0. 6之间（单位为m3/ m3/min)，发酵罐搅拌速度控制在120_200r/min ; (2) 菌丝体发酵液的超声提取：取上述经深层发酵获得的蛹虫草菌丝体发酵液 100-200ml，超声（59Hz)处理15-45min，经超声处理后的发酵液经离心后收集离心上清液， 所得初次沉淀物再加30-100ml碱性离子水进行二次超声处理，依次共超声处理三次；合并 三次离心上清液，并用旋转蒸发仪（30°C -50°C，转数60rpm)浓缩得20-30ml的浓缩液，力口 浓缩液3倍量的无水乙醇，在4°C条件下沉淀8-12h，倾出上清液，沉淀用无水乙醇洗涤、干 燥，得多糖粗品，即为虫草提取物； 所述E组分芦荟发酵物的制备方法为： (1) 表面净化：芦荟鲜叶用清水洗干净； (2) 紫外线辐射杀菌：洗干净的芦荟鲜叶晾干后，运入样品准备室，所述样品准备室为 无菌室(室内备有杀菌消毒设备)，进行紫外灯辐照杀菌5-30min ; (3) 去掉叶皮：在无菌室内去掉芦荟鲜叶叶皮，用消毒的刀片割开外皮，并将芦荟凝胶 原汁取出；将凝胶原汁和叶皮分别装入塑料桶； (4) 高速粉碎与沉淀：用高速粉碎机(转速10000-30000、时间0. 2-5分钟）把叶皮组织 捣碎，成为稀浆液；然后进行沉淀处理；上清液即成为芦荟叶原汁； (5) 芦荟发酵物的制备：所述芦荟发酵物包括芦荟凝胶发酵物与芦荟叶发酵物； ①、以芦荟凝胶原汁为培养基，以异常汉逊酵母菌为接种菌种，菌液的接种量1%_1〇% ; 发酵温度26°C -31°C，发酵时间为20-30天，所得发酵物即为芦荟凝胶发酵物； ②、以芦荟叶原汁为培养基，以异常汉逊酵母菌为接种菌种，菌液的接种量1%-10% ;发 酵温度26°C -31°c，发酵时间为20-30天，所得发酵物即为芦荟叶发酵物； 所述马齿苋提取物、柿叶提取物、橘子皮提取物、黄芩根提取物、桑黄提取物、白柳皮提 取物、香草提取物、冷香玫瑰花提取物、绿豆提取物、绿茶提取物、八角茴香提取物、膜荚黄 芪根提取物、人参根提取物、松口蘑提取物、紫草提取物、洋甘菊提取物、树苔提取物、金银 花提取物的制备方法为：分别取粉末状的马齿苋、柿叶、橘子皮、黄芩根、桑黄、白柳皮、香 草、冷香玫瑰花、绿豆、绿茶、八角茴香、膜荚黄芪根、人参根、松口蘑、紫草、洋甘菊、树苔、金 银花，分别加碱性离子水震荡后得混合液，所述混合液经离心后收集离心上清液，所得初次 沉淀物分别再加碱性离子水进行二次提取，依次共提取三次；合并三次离心上清液并浓缩 得浓缩液，即分别得到马齿苋提取物、柿叶提取物、橘子皮提取物、黄芩根提取物、桑黄提取 物、白柳皮提取物、香草提取物、冷香玫瑰花提取物、绿豆提取物、绿茶提取物、八角茴香提 取物、膜荚黄芪根提取物、人参根提取物、松口蘑提取物、紫草提取物、洋甘菊提取物、树苔 提取物、金银花提取物。
2.如权利要求1所述的含蛹虫草成分的精华液，其特征在于，由以下A、Bl、B2、C、D和 E组分原料配制而成： A组分：纯水33份、卡波U-20 0. 28份； B1组分：纯水45份、海藻糖1. 9份、甜菜碱3. 2份； B2组分：甘油1. 8份、羧甲基0 -葡聚糖0. 15份； C组分：丁二醇5. 25份、光甘草啶0. 03份、尼泊金酯0. 3份、黄芩根提取物0. 6份、 PEG-40氢化蓖麻油0. 5份、香精0. 06份； D组分：氢氧化钾1. 2份； E组分：HA (小分子海华1%溶液）5份、人表皮生长因子0. 3份、酸性成纤维细胞生长 因子0. 2份、锌金属硫蛋白0. 035份、水解蜂王浆蛋白0. 4份、绿豆提取物0. 75份、虫草提 取物4. 5份、芦荟发酵物0. 5份、马齿苋提取物0. 1份、柿叶提取物0. 2份、橘子皮提取物 〇. 02份、桑黄提取物0. 03份、白柳皮提取物0. 01份、香草提取物0. 01份、冷香玫瑰花提取 物0. 02份、绿茶提取物0. 01份、八角茴香提取物0. 03份、膜荚黄芪根提取物0. 01份、人参 根提取物〇. 01份、松口蘑提取物〇. 02份、紫草提取物0. 02份、洋甘菊提取物0. 01份、树苔 提取物0. 03份、金银花提取物0. 01份； 所述D组分中虫草提取物的制备方法为： (1) 采用液体深层发酵方式获得蛹虫草菌丝体： 蛹虫草深层液体发酵的具体过程如下：发酵培养基组成为：20g/L蔗糖+2g/L玉米浆 +8g/L芽孢杆菌菌体蛋白+0. 5g/L MgS04*7H20+lg/L KH2P04,采用两阶段控制pH策略，即开 始时控制pH值恒定在6. 2,接种蛹虫草液体菌种后50h再将pH值恒定控制为5. 6 ;发酵罐 内的通风量控制在1:0. 4 (单位为m3/m3/min)，发酵罐搅拌速度控制在180r/min ; (2) 菌丝体发酵液的超声提取：取上述经深层发酵获得的蛹虫草菌丝体发酵液100ml， 超声（59Hz)处理30min，经超声处理后的发酵液经离心后收集离心上清液，所得沉淀物再 加100ml碱性离子水进行二次超声提取，依次共超声提取三次；合并三次离心上清液并用 旋转蒸发仪（40°C，转数60rpm)浓缩得30ml的浓缩液，加浓缩液3倍量的无水乙醇，在4°C 条件下沉淀l〇h，倾出上清液得沉淀物，该沉淀物用无水乙醇洗涤、干燥，得多糖粗品，即为 虫草提取物； 所述D组分芦荟发酵物的制备方法为： (1) 表面净化：芦荟鲜叶用清水洗干净； (2) 紫外线辐照杀菌：洗干净的芦荟鲜叶晾干后，运入样品准备室，所述样品准备室为 无菌室(室内备有杀菌消毒设备)，进行紫外灯辐照杀菌6min ; (3) 去掉叶皮：在无菌室内去掉芦荟叶皮，用消毒的刀片割开外皮，并将芦荟凝胶原汁 取出；将凝胶原汁和叶皮分别装入塑料桶； (4) 高速粉碎与沉淀：用高速粉碎机(转速20000、时间3分钟）把叶皮组织捣碎，成为 稀浆液；然后进行沉淀处理；上清液即成为芦荟叶原汁； (5) 芦荟发酵物的制备：所述芦荟发酵物包括芦荟凝胶发酵物与芦荟叶发酵物； ① 、以芦荟凝胶原汁为培养基，以异常汉逊酵母菌为接种菌种，接种量4% ;发酵温度 28°C，发酵时间为25天，所得发酵物即为芦荟凝胶发酵物； ② 、以芦荟叶原汁为培养基，以异常汉逊酵母菌为接种菌种，接种量4% ;发酵温度 28°C，发酵时间为25天，所得发酵物即为芦荟叶发酵物； 所述马齿苋提取物、柿叶提取物、橘子皮提取物、黄芩根提取物、桑黄提取物、白柳皮提 取物、香草提取物、冷香玫瑰花提取物、绿豆提取物、绿茶提取物、八角茴香提取物、膜荚黄 芪根提取物、人参根提取物、松口蘑提取物、紫草提取物、洋甘菊提取物、树苔提取物、金银 花提取物的制备方法为：分别取粉末状的马齿苋、柿叶、橘子皮、黄芩根、桑黄、白柳皮、香 草、冷香玫瑰花、绿豆、绿茶、八角茴香、膜荚黄芪根、人参根、松口蘑、紫草、洋甘菊、树苔、金 银花，分别加碱性离子水震荡后得混合液，所述混合液经离心后收集离心上清液，所得初次 沉淀物分别再加碱性离子水进行二次提取，依次共提取三次；合并三次离心上清液并浓缩 得浓缩液，即分别得到马齿苋提取物、柿叶提取物、橘子皮提取物、黄芩根提取物、桑黄提取 物、白柳皮提取物、香草提取物、冷香玫瑰花提取物、绿豆提取物、绿茶提取物、八角茴香提 取物、膜荚黄芪根提取物、人参根提取物、松口蘑提取物、紫草提取物、洋甘菊提取物、树苔 提取物、金银花提取物。
3. 如权利要求1或2所述的含蛹虫草成分的精华液，其特征在于，所述碱性离子水是通 过将纯水进行电解产生的。
4. 如权利要求3所述的含蛹虫草成分的精华液，其特征在于，所述碱性离子水指标为 pH :9. 80-13. 80,电位：彡-120mV。
5. 如权利要求4所述的含蛹虫草成分的精华液的制备方法，其特征在于： 步骤一、将A组分原料中的纯水按配方计量后加入均质乳化锅搅拌，撒入卡波U-20,分 散均匀，升温至80-90°C，搅拌溶解； 步骤二、加入B1和B2组分原料于80-90°C溶解后，降温至45°C ; 步骤三、C组分原料40°C预热后混合均匀，加入均质乳化锅，搅拌均匀，加入D组分原料 调整pH值至5. 5-6.0 ; 步骤四、加入E组分原料搅拌均匀真空脱气10-20分钟； 步骤五、降温至30-40°C，陈化24小时，灌装，分装并包装，即为成品。
【文档编号】A61K8/97GK104367535SQ201410678966
【公开日】2015年2月25日 申请日期:2014年11月24日 优先权日:2014年11月24日
【发明者】王楠, 佟庆辉, 杨伟超 申请人:沈阳源康医疗器械有限公司