中药黄芩和赤芍药物组合物在制备治疗肺癌伴抑郁症药物中的用途的制作方法

本发明属中药领域，涉及中药黄芩和赤芍药物组合物新的药用用途，具体涉及中药黄芩和赤芍药物组合物在制备治疗肺癌伴抑郁症药物中的用途。

背景技术：
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据统计资料显示，肺癌是世界上发病率和死亡率最高的恶性肿瘤之一，约占所有肿瘤的12.4％，其中肺癌伴抑郁的发病率为16％-44％，明显高于其他肿瘤。现代医学对于肺癌伴抑郁尚没有针对性的治疗手段。

现有技术中，有研究公开了中药清热活血方具有抗肿瘤和抗炎症作用，所述中药清热活血方主要含有黄芩和赤芍相关组分，迄今，尚未见关于黄芩和赤芍及其药物组合物对肺癌伴抑郁具有治疗作用的报道。

鉴于此，

本技术：
的发明人拟在动物实验的基础上，提供中药清热活血方的新的药用用途，具体涉及中药清热活血方中有效组分黄芩和赤芍其药物组合物在制备治疗肺癌伴抑郁症药物中的用途。

技术实现要素：

本发明的目的在于，提供中药清热活血方的新的药用用途，具体涉及中药清热活血方中有效组分黄芩和赤芍其药物组合物在制备治疗肺癌伴抑郁症药物中的用途。

本发明所述的黄芩和赤芍其药物组合物由中药材黄芩和赤芍按配伍比例6:5制成。

本发明所述的药物组合物进行了小鼠肺癌伴抑郁模型实验，实验结果显示，所述的药物组合物能抑制实验鼠血清中皮质醇、tnf-α和il-6水平的升高；以及抑制实验鼠肿瘤组织中nf-κb和vegf蛋白表达。

本发明中：给予c57小鼠社交应激并接种lewis肺癌细胞，建立小鼠肺癌伴抑郁模型；采用应激方法：攻击性强的cd1小鼠为定居者，c57小鼠为入侵者，c57小鼠每天接受不同cd1小鼠攻击，持续3-5分钟，然后将c57小鼠放 入由带孔透明挡板相隔的鼠笼一侧，可看到并嗅到cd1小鼠，相处24小时，连续应激十天；应激结束后接种肿瘤细胞；期间给予本发明所述的药物组合物进行体内干预，结果显示：本药物组合物能改善小鼠在旷场内的社交回避行为，用药组小鼠在社交区停留时间延长，并且抑制了肿瘤的生长；统计显示：本药物组合物的作用与抑制血清中皮质醇、tnf-α和il-6水平的升高有关；本药物组合物的作用与抑制肿瘤组织中nf-κb和vegf蛋白表达有关。

本发明黄芩和赤芍其药物组合物可用于制备治疗肺癌伴抑郁症药物。

附图说明

图1：cd1出现时各组小鼠在社交区停留时间，

其中，与正常组比较，*p<0.05；与模型组比较，#p<0.05。

图2：各组小鼠皮下肿瘤重量，

其中，与模型组比较，#p<0.05。

图3：血清皮质醇、tnf-α、il-6表达水平，

其中，与正常组比较，*p<0.05；与模型组比较，#p<0.05。

图4：本药物组合物对肿瘤组织中nf-κb蛋白表达的抑制作用，

其中，a、b、c、d、e分别为模型组、本药物组合物高、中、低剂量组nf-κb的免疫组织染色，与模型组比较，#p<0.05。

图5：本药物组合物对肿瘤组织中vegf蛋白表达的抑制作用，

其中，a、b、c、d、e分别为模型组、本药物组合物高、中、低剂量组vegf的免疫组织染色，与模型组比较，#p<0.05。

具体实施方式

实施例1：本发明黄芩和赤芍其药物组合物改善肺癌伴抑郁的体内实验

一、材料与方法

1.小鼠肺癌伴抑郁模型的建立及分组

采用社交失败应激方式和皮下接种lewis肺癌细胞建立小鼠肺癌伴抑郁模型，将60只c57小鼠随机分为6组，正常对照组；模型组；本药物组合物高剂量组(15g/kg灌胃)；本药物组合物中剂量组(7.5g/kg灌胃)；本药物 组合物低剂量组(3.75g/kg灌胃)；双药组(氟西汀灌胃，顺铂腹腔注射)；

2.小鼠行为学及肿瘤重量检测：

使用行为学跟踪软件记录下cd1小鼠在于不在情况下，两个150s内c57小鼠在社交接触旷场内的运动轨迹，并用行为学分析软件进行分析；取材时用天平计量小鼠皮下肿瘤的重量；

3.elisa法检测小鼠血清中皮质醇、tnf-α和il-6水平

所有小鼠眼眶动脉采血，4℃静置2h后，3000r/min，4℃离心15min，上清液-80℃保存进行elisa检测；按照试剂盒说明，检测血清中皮质醇、tnf-α和il-6水平；

4.免疫组化方法检测肿瘤组织中nf-κb及vegf表达

将实验鼠肿瘤组织石蜡切片经烘烤、脱水、煮沸、pbs冲洗后，经一抗、二抗孵育后，滴加100uldab显色3～5min，苏木素复染30s，盐酸酒精分化1s，脱水吹干后，树脂封片，镜下观察，细胞核呈紫蓝色，阳性产物呈棕黄色或黄色；

二、结果显示

1.社交接触实验结果，

当cd1小鼠存在时，模型组比正常组在社交区停留时间明显缩短(p<0.05)，显示了社交回避行为；而本药物组合物各剂量组与模型组比较在社交区停留时间延长，差异有显著性(p<0.05)，表明本药物组合物能改善小鼠的社交回避行为，具有抗抑郁作用；

2.各组小鼠皮下肿瘤结果

本药物组合物各剂量组同样抑制了肿瘤的生长，其中以高剂量组对肿瘤的抑制作用最为明显，三个剂量组与双药组比较差异不显著(p>0.05)；

3.血清皮质醇、tnf-α和il-6检测结果

实验结果显示模型组小鼠hpa轴被激活，血清中皮质醇水平明显升高，与正常组比较(p<0.01)；与模型组比较，本药物组合物各剂量组均能降低血清中异常升高的皮质醇(p<0.05)，各剂量组之间疗效无明显差异(p>0.05)；模型组较正常组血清中炎症因子tnf-α和il-6明显升高，表明肺癌伴抑郁小鼠体内炎症微环境的存在，而本药物组合物能够降低两种炎症因子的水平，与模型组比较 差异有显著性(p<0.05)；与双药组比较差异无显著性(p>0.05)；

4.肿瘤组织nf-κb及vegf表达

本药物组合物各组及双药组抑制了小鼠皮下肿瘤组织中nf-κb和vegf蛋白的表达，与模型组比较差异有显著性(p<0.01)；本药物组合物各剂量组与双药组比较，差异无显著性(p>0.05)。

技术特征：

技术总结
本发明属中药领域，涉及中药黄芩和赤芍药物组合物新的药用用途，具体涉及中药黄芩和赤芍药物组合物在制备治疗肺癌伴抑郁症药物中的用途。本发明采用小鼠Lewis肺癌伴社交应激作为模型，并给予药物组合物进行干预，结果显示：本药物组合物能改善小鼠在社交接触旷场的社交回避行为并且能够有效抑制肿瘤的生长；本药物组合物对肿瘤伴抑郁的改善作用与抑制皮质醇和炎症因子(TNF-α和IL-6)有关；本药物组合物对肿瘤的抑制作用与抑制肿瘤组织中核转录因子-κB和血管内皮生长因子有关。本发明的黄芩和赤芍其药物组合物可用于制备治疗肺癌伴抑郁症药物。

技术研发人员：董竞成;李密辉
受保护的技术使用者：复旦大学附属华山医院
技术研发日：2015.12.31
技术公布日：2017.07.07