一种基于人表皮生长因子的静电纺丝溶液及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明属于医药领域，涉及一种静电纺丝溶液，特别涉及一种基于人表皮生长因子的静电纺丝溶液及其制备方法。
【背景技术】
[0002]人表皮生长因子(hEGF)是一个具有53个氨基酸残基，分子量6045道尔顿的单链多肽。它能够有效地刺激或抑制细胞的增殖、促进细胞的分化，具有非常高的生物活性。同时，极微量的hEGF就能强烈地促进表皮细胞的生长和增殖，还能有效地刺激细胞外透明质酸等大分子物质的分泌与合成。临床医学表明，hEGF具有极强的促进表皮生长代谢的作用，主要用于促进外科手术伤口及创面的提前愈合，并且hEGF可使皮肤细嫩光滑，具有显著的美容效果。
[0003]但是，由于hEGF在常温下裸露空气中难以维持其生物学活性、易被蛋白酶降解而失去活性及难以透皮吸收等一系列问题，极大地限制了 hEGF的实际应用。
[0004]姜黄素是从姜科植物姜黄中提取的一种活性成分，具有抗炎、抗氧、抗菌、抗肿瘤等活性。然而，研究表明，姜黄素水溶性差、难以透皮吸收等缺点，从而限制了姜黄素的实际应用。
[0005]此外，银一来自土壤的天然无机抗菌剂，作用十分广泛，能够杀死650多种致病菌，抗菌率达99.9%以上。微量浓度的银离子对人体基本无毒害作用，具有安全性高、抗菌持续时间长等优点。但是，由于银容易与静电纺丝装置中的金属针头发生置换反应，从而降低银的杀菌效率。
[0006]我们知道，作为伤口包覆材料必须要有较高的气体透过性，能够阻隔细菌侵染和防止脱水等作用。但是，一般的伤口包覆材料功能单一、抗菌效果差、气体透过性不好、不易保持药物活性因子的活性且药物活性因子不易被表皮细胞吸收。
[0007]然而，静电纺丝作为一种制备聚合物纳米纤维的技术，利用电场力对聚合物溶液进行纺丝的过程中，可以得到孔隙率小、比表面积大、直径在纳米级的超细纳米纤维。从病理学理论可知，药物和药物载体的表面积越大，药物颗粒的分解速率和透皮吸收效果就越好。而且，纳米纤维材料能够均匀地黏附在伤口上，使伤口血液很快凝结，起到止血的作用。因此，借助静电纺丝技术将药物和药物载体制成纳米纤维能够有效解决上述问题。
【发明内容】
[0008]本发明的目的在于针对上述现有技术中存在的问题与缺陷，提出了一种基于人表皮生长因子的静电纺丝溶液及其制备方法。
[0009 ]本发明拟采用以下技术方案:
一种基于人表皮生长因子的静电纺丝溶液及其制备方法，其特征在于它是按以下重量比的原料和方法制成静电纺丝溶液:
人表皮生长因子50-100ug、透皮吸收促进剂l-8g、活性稳定剂20-40g、蛋白酶抑制剂5-10g、活性促进剂l-10g、薰衣草精油0.01-0.03ml、维生素E l_20mg、醋酸银6_12ml、姜黄素5-20mg、乙醇70-100ml、PBS溶液10ml、丙三醇5_8ml、适量聚丙烯腈(PAN)、适量二甲基甲酰胺(DMF) 0
[0010]所述醋酸银为弱电解质醋酸银，且其摩尔浓度为0.04-0.18 mol/L;所述乙醇浓度90%以上;所述活性促进剂是纯度大于95%的水溶性胶原蛋白；所述PBS溶液PH值为4.8-7.5;所述PAN的分子量为Mw=150000 g/mol;所述透皮吸收促进剂是丙二醇、巯基乙酸|丐中任一种;所述活性稳定剂是透明质酸、右旋糖酐中任一种;所述蛋白酶抑制剂是硼酸亮氨酸、N-乙酰半胱氨酸中任一种。
[0011]将上述各组分按以下步骤制备:
(I)人表皮生长因子溶液配制
将透皮吸收促进剂l_8g、活性稳定剂20-40g、蛋白酶抑制剂5-10g、活性促进剂HOg加入到100ml PBS溶液中溶解，然后向溶液中添加5-8ml丙三醇混匀后分装，置于真空冷冻机中将制品降温至2_8°C。随后向制品中添加50-100ug人表皮生产因子并混匀，制成人表皮生长因子溶液，并在2_8°C温度下保存备用。
[0012](2)专用溶媒配制
将薰衣草精油0.01-0.03ml、维生素E l_20mg、姜黄素5_20mg加入到70_100ml乙醇中混匀后用过滤机过滤得到过滤液I。取醋酸银6-12ml与过滤液I混匀后得到专用溶媒。
[0013](3)纺丝溶液制备
将聚丙烯腈(PAN)直接溶解于二甲基甲酰胺(DMF)中，配制成浓度为7wt%-9wt%的溶液I。然后，将配制好的人表皮生长因子溶液、专用溶媒和溶液I按一定比例混合，配成总浓度为40-55%的纺丝溶液，并将纺丝溶液在2-8°C温度下保存。
[0014]本发明外观为淡黄色透明液体，具有良好的稳定性。
[0015]有益效果:中国专利《便携式大气辉光放电等离子体射流及静电纺丝一体装置》(申请号:201410704814.3，申请公布号:CN 104372423 A)，公布了一种便携式大气辉光放电等离子体射流及静电纺丝一体装置。利用静电纺丝技术对本发明进行纺丝，可以得到比表面积大、孔隙率小的药物和药物载体纳米纤维。人表皮生长因子在纳米纤维中可以保持其活性，并且由于纳米纤维比表面积大、孔隙率小的特点，纳米纤维中的药物颗粒分解速率和透皮吸收效果好，生物利用率高和气体透过性好等优点。此外，本发明采用弱电解质醋酸银作为银源，可以有效减小或者防止银离子跟静电纺丝装置中的金属针头发生置换反应，从而提高银离子的杀菌效率。因此，本发明利用静电纺丝技术在临床医学、美容等领域具有良好的市场前景。
【附图说明】
[0016]图1为本发明通过静电纺丝装置制备纳米纤维的示意图。其中，静电纺丝装置(1)，纺丝溶液(2)，纳米纤维(3)，接收物体(4)。
【具体实施方式】
[0017]以下通过实施例进一步阐述本发明一种基于人表皮生长因子的静电纺丝溶液及其制备方法，但是，应当理解为，这些实施例仅用于更详细具体地说明之用，而不应理解为用于以任何形式限制本发明。
[0018]实施例1
精确称取巯基乙酸I丐3g、透明质酸23g、N-乙酰半胱氨酸5g、水溶性胶原蛋白3g加入到100ml PBS溶液中溶解，然后向溶液中添加6ml丙三醇混匀后分装，置于真空冷冻机中将制品降温至2-8°C。随后向制品中添加68ug人表皮生产因子并混匀，制成人表皮生长因子溶液，并在2-8°C温度下保存备用。将薰衣草精油0.01ml、维生素E 3mg、姜黄素Smg加入到75ml乙醇中混匀后用过滤机过滤得到过滤液I。取醋酸银7ml与过滤液I混匀后得到专用溶媒。将聚丙烯腈(PAN)直接溶解于二甲基甲酰胺(DMF)中，配制成浓度为7.3wt%的溶液I。然后，将配制好的人表皮生长因子溶液、专用溶媒和溶液I按一定比例混合，配成总浓度为42%的纺丝溶液，并将纺丝溶液在2-8 0C温度下保存。
[0019]实施例2
精确称取丙二醇4g、透明质酸27g、硼酸亮氨酸6g、水溶性胶原蛋白4.3g加入到10mlPBS溶液中溶解，然后向溶液中添加6ml丙三醇混匀后分装，置于真空冷冻机中将制品降温至2-8°C。随后向制品中添加71ug人表皮生产因子并混匀，制成人表皮生长因子溶液，并在2_8°C温度下保存备用。将薰衣草精油0.01ml、维生素E 5mg、姜黄素6mg加入到75ml乙醇中混匀后用过滤机过滤得到过滤液I。取醋酸银7ml与过滤液I混匀后得到专用溶媒。将聚丙烯腈(PAN)直接溶解于二甲基甲酰胺(DMF)中，配制成浓度为7.5wt%的溶液I。然后，将配制好的人表皮生长因子溶液、专用溶媒和溶液I按一定比例混合，配成总浓度为45%的纺丝溶液，并将纺丝溶液在2-8°C温度下保存。
[0020]实施例3
精确称取丙二醇5.5g、右旋糖酐31g、N-乙酰半胱氨酸7g、水溶性胶原蛋白5.5g加入到100ml PBS溶液中溶解，然后向溶液中添加6ml丙三醇混匀后分装，置于真空冷冻机中将制品降温至2-8°C。随后向制品中添加76ug人表皮生产因子并混匀，制成人表皮生长因子溶液，并在2-8°C温度下保存备用。将薰衣草精油0.01ml、维生素E 8mg、姜黄素12mg加入到80ml乙醇中混匀后用过滤机过滤得到过滤液I。取醋酸银6ml与过滤液I混匀后得到专用溶媒。将聚丙烯腈(PAN)直接溶解于二甲基甲酰胺(DMF)中，配制成浓度为8wt%的溶液I。然后，将配制好的人表皮生长因子溶液、专用溶媒和溶液I按一定比例混合，配成总浓度为49%的纺丝溶液，并将纺丝溶液在2-8 0C温度下保存。
[0021 ] 实施例4
精确称取巯基乙酸钙7.2g、右旋糖酐36g、硼酸亮氨酸8g、水溶性胶原蛋白7.5g加入到100ml PBS溶液中溶解，然后向溶液中添加7ml丙三醇混匀后分装，置于真空冷冻机中将制品降温至2-8°C。随后向制品中添加Slug人表皮生产因子并混匀，制成人表皮生长因子溶液，并在2-8°C温度下保存备用。将薰衣草精油0.02ml、维生素E 12mg、姜黄素9.3mg加入到90ml乙醇中混匀后用过滤机过滤得到过滤液I。取醋酸银Ilml与过滤液I混匀后得到专用溶媒。将聚丙烯腈(PAN)直接溶解于二甲基甲酰胺(DMF)中，配制成浓度为8.5wt%的溶液I。然后，将配制好的人表皮生长因子溶液、专用溶媒和溶液I按一定比例混合，配成总浓度为53%的纺丝溶液，并将纺丝溶液在2-8 0C温度下保存。
[0022]使用时，将以上制备好的纺丝溶液通过静电纺丝装置制备成纳米纤维，该纳米纤维可用于包敷伤口、美容等等。
【主权项】
1.一种基于人表皮生长因子的静电纺丝溶液及其制备方法，其特征在于它是按以下重量比的原料和方法制成静电纺丝溶液: 人表皮生长因子50-100ug、透皮吸收促进剂l-8g、活性稳定剂20-40g、蛋白酶抑制剂5-10g、活性促进剂l-10g、薰衣草精油0.01-0.03ml、维生素E l_20mg、醋酸银6_12ml、姜黄素5-20mg、乙醇70-100ml、PBS溶液10ml、丙三醇5_8ml、适量聚丙烯腈(PAN)、适量二甲基甲酰胺(DMF); 将上述各组分按以下步骤制备: 精确称取透皮吸收促进剂l_8g、活性稳定剂20-40g、蛋白酶抑制剂5-10g、活性促进剂1-1Og加入到100ml PBS溶液中溶解，然后向溶液中添加5_8ml丙三醇混匀后分装，置于真空冷冻机中将制品降温至2_8°C;随后向制品中添加50-100ug人表皮生产因子并混匀，制成人表皮生长因子溶液，并在2-8°C温度下保存备用；将薰衣草精油0.01-0.03ml、维生E 1-20mg、姜黄素5-20mg加入到70-100ml乙醇中混匀后用过滤机过滤得到过滤液I;取醋酸银6-12ml与过滤液I混匀后得到专用溶媒;将聚丙烯腈(PAN)直接溶解于二甲基甲酰胺(DMF冲，配制成浓度为7wt%-9wt%的溶液I;然后，将配制好的人表皮生长因子溶液、专用溶媒和溶液I按一定比例混合，配成总浓度为40-55%的纺丝溶液，并将纺丝溶液在2-8°C温度下保存。2.根据权利要求1所述的一种基于人表皮生长因子的静电纺丝溶液及其制备方法，其特征在于各原料的重量配比的优先范围是: 人表皮生长因子60-85ug、透皮吸收促进剂3-7.5g、活性稳定剂22-38g、蛋白酶抑制剂5-8g、活性促进剂2-8g、薰衣草精油0.01-0.03ml、维生素E l_20mg、醋酸银6_12ml、姜黄素5-14mg、乙醇70-100ml、PBS溶液10ml、丙三醇6-7.5ml、适量聚丙烯腈(PAN)、适量二甲基甲酰胺(DM1。3.根据权利要求1所述的一种基于人表皮生长因子的静电纺丝溶液及其制备方法，其特征在于各原料的重量配比的最佳配方是: 人表皮生长因子76ug、透皮吸收促进剂5.5g、活性稳定剂31g、蛋白酶抑制剂7g、活性促进剂5.5g、薰衣草精油0.01ml、维生素E 8mg、醋酸银6ml、姜黄素12mg、乙醇80ml、PBS溶液100ml、丙三醇6ml、适量聚丙烯腈(PAN)、适量二甲基甲酰胺(DMF)。4.根据权利要求1或2或3所述的一种基于人表皮生长因子的静电纺丝溶液及其制备方法，其特征在于所述醋酸银为弱电解质醋酸银，且其摩尔浓度为0.04-0.18 mol/L;所述乙醇浓度90%以上；所述活性促进剂是纯度大于95%的水溶性胶原蛋白；所述PBS溶液PH值为4.8-7.5;所述PAN的分子量为Mw=150000 g/mol;所述透皮吸收促进剂是丙二醇、巯基乙酸钙中任一种;所述活性稳定剂是透明质酸、右旋糖酐中任一种;所述蛋白酶抑制剂是硼酸亮氨酸、N-乙酰半胱氨酸中任一种。
【专利摘要】本发明公开了一种基于人表皮生长因子的静电纺丝溶液及其制备方法，该纺丝溶液是按以下重量比的原料制成：人表皮生长因子50?100ug、透皮吸收促进剂1?8g、活性稳定剂20?40g、蛋白酶抑制剂5?10g、活性促进剂1?10g、薰衣草精油0.01?0.03ml、维生素E 1?20mg、醋酸银6?12ml、姜黄素5?20mg、乙醇70?100ml、PBS溶液100ml、丙三醇5?8ml、适量聚丙烯腈（PAN）、适量二甲基甲酰胺（DMF）。利用静电纺丝技术对本发明进行纺丝，得到比表面积大、孔隙率小的药物和药物载体纳米纤维，从而提高药物颗粒分解速率、药物活性和透皮吸收效果。由本发明制成的纳米纤维具有药物利用率高、气体透过性好、药物稳定性高以及应用范围广等优点，在临床医学、美容等领域具有良好的市场前景。
【IPC分类】D01F1/10, A61L15/40, A61L15/24, D01F6/54, A61K47/42, A61L15/42, A61L15/32, A61L15/44, A61L15/20, A61K47/32
【公开号】CN105709260
【申请号】CN201610241394
【发明人】陈兆权, 丘汉标, 洪伶俐
【申请人】陈兆权, 丘汉标