本发明涉及药物制备领域，具体涉及一种蒙药查干汤微丸及汤合剂的制备方法。
背景技术：
目前市售四味土木香散是由土木香、苦参、悬钩子木、山柰四味药材粉碎成粗粉，过筛， 混匀制备得到；服用方法为水煎服；由于四味土木香散中含有苦参，煎服时苦参中生物碱类成 分会刺激味觉，使四味土木香散口感极苦，不便于服用，尤其对于儿童。
技术实现要素：
为解决上述问题，本发明提供了一种蒙药查干汤微丸及汤合剂的制备方法。
为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：
一种蒙药查干汤微丸的制备方法，包括如下步骤：
S1、称取适量土木香、山柰、苦参和悬钩子木分别粉碎后，得土木香粗粉、山柰粗粉、 苦参粗粉和悬钩子木粗粉；
S2、分别对所得的土木香粗粉、山柰粗粉进行超临界CO2萃取处理，得土木香挥发油、山 柰挥发油、土木香药渣和山柰药渣；
S3、将所得的土木香药渣、山柰的药渣、苦参粗粉、悬钩子木粗粉按其质量比土木香药 渣∶苦参粗粉∶悬钩子木粗粉∶山柰药渣＝4∶4∶2∶1的比例混合后，加9倍量水水提三次，每次 0.5h，过滤，得水溶液；
S4、将S3水提三次所得的水溶液合并后浓缩至1300mL，趁热在3500rpm/min条件下离心 10min，取上清液进行喷雾干燥，得粉末；
S5、将所得的土木香挥发油、山柰挥发油混合后，采用β-环糊精包合后与S4所得的粉 末混合后，加入适量辅料搅拌均匀后，通过挤出滚圆机制成微丸；
S6、将制得的微丸进行薄膜包衣，即得包衣微丸。
优选地，所述步骤S5中的适量辅料为粘合剂，该粘合剂为20％的乙醇溶液、药粉∶微晶 纤维素按质量比1∶1.25的比例混合所得。优选地，所述步骤S5中β-环糊精与挥发油的质量 比为4∶0.5(8∶1)，包合温度50℃，包合时间为2小时。
优选地，所述喷雾干燥的参数为：进风口温度140℃，热风流量0.7(M3/h)，进料速度 (600mL/h)，干粉得率82.23％，水分含量4.2％。
优选地，所述超临界CO2萃取法的反应参数为：萃取压力为20MPa、温度35℃，分离I压力 9MPa、温度40℃，分离II压力5MPa、温度35℃，进行循环萃取；CO2流量为150L/h，萃取3小时 后，收集提取物，收率：3.5％。
本发明提供了一种蒙药查干汤合剂的制备方法，包括如下步骤：
S1、称取适量土木香、山柰、苦参和悬钩子木分别粉碎后，得土木香粗粉、山柰粗粉、 苦参粗粉和悬钩子木粗粉；
S2、分别对所得的土木香粗粉、山柰粗粉进行超临界CO2萃取处理，得土木香挥发油、山 柰挥发油、土木香药渣和山柰药渣；所述超临界CO2萃取法的反应参数为：萃取压力为20MPa、 温度35℃，分离I压力9MPa、温度40℃，分离II压力5MPa、温度35℃，进行循环萃取；CO2流量 为150L/h，萃取3小时后，收集提取物，收率：3.5％。
S3、将所得的土木香药渣、山柰的药渣、苦参粗粉、悬钩子木粗粉按其质量比土木香药 渣∶苦参粗粉∶悬钩子木粗粉∶山柰药渣＝4∶4∶2∶1的比例混合后，加9倍量水水提三次，每次 0.5h，过滤，得水溶液；
S4、将S3水提三次所得的水溶液合并后浓缩至500mL，加入无水乙醇，制成含醇量为60％ 的溶液，静置24h，趁热在3500rpm/min条件下离心10min，取上清液，回收乙醇至无醇味，并浓 缩至相对密度为1.3，加白糖、挥发油、苯甲酸钠适量，用纯化水调至全量，充分搅匀，灌装，灭 菌即得。
本发明具有以下有益效果：
采用喷雾干燥工艺，干燥过程非常迅速，易改变干燥条件，调整产品质量标准，可以在较 大范围内改变操作条件以控制产品的质量指标，如粒度分布、湿含量、生物活性、溶解性、色、 香、味等；可直接干燥成粉末；生产效率高，操作人员少；生产能力大，产品质量高；通过β-环 糊精包合工艺、挤出滚圆工艺、包衣工艺的结合，在充分保留有效成分的同时，增加了挥发性 成分及易氧化成分的稳定性，同时解决了原剂型口感差、携带与服用不便捷等问题。
本发明的蒙药查干汤合剂的制备方法保留了传统的服用方法，更大程度的保留了药效成 分，促进药材细胞内物质在体内的溶出量和溶出速度，提高药效；且工艺流程简便可行，方便儿 童和不同年龄人群服用。
具体实施方式
为了使本发明的目的及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本发明进行进一步详细说 明；应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例1
一种蒙药查干汤微丸的制备方法，包括如下步骤：
S1、称取适量土木香、山柰、苦参和悬钩子木分别粉碎后，得土木香粗粉、山柰粗粉、 苦参粗粉和悬钩子木粗粉；
S2、分别对所得的土木香粗粉、山柰粗粉进行超临界CO2萃取处理，得土木香挥发油、山 柰挥发油、土木香药渣和山柰药渣；
S3、将所得的土木香药渣、山柰的药渣、苦参粗粉、悬钩子木粗粉按其质量比土木香药 渣∶苦参粗粉∶悬钩子木粗粉∶山柰药渣＝4∶4∶2∶1的比例混合后，加9倍量水水提三次，每次 0.5h，过滤，得水溶液；
S4、将S3水提三次所得的水溶液合并后浓缩至1300mL，趁热在3500rpm/min条件下离心 10min，取上清液进行喷雾干燥，得粉末；
S5、将所得的土木香挥发油、山柰挥发油混合后，采用β-环糊精包合后与S4所得的粉 末混合后，加入适量辅料搅拌均匀后，通过挤出滚圆机制成微丸；
S6、将制得的微丸进行薄膜包衣，即得包衣微丸。
所述步骤S5中的适量辅料为粘合剂，该粘合剂为20％的乙醇溶液、药粉∶微晶纤维素按 质量比1∶1.25的比例混合所得，所述步骤S5中β-环糊精与挥发油的质量比为4∶0.5(8∶1)， 包合温度50℃，包合时间为2小时，所述喷雾干燥的参数为：进风口温度140℃，热风流量0.7 (M3/h)，进料速度(600mL/h)，干粉得率82.23％，水分含量4.2％，所述超临界CO2萃取法的反 应参数为：萃取压力为20MPa、温度35℃，分离I压力9MPa、温度40℃，分离II压力5MPa、温 度35℃，进行循环萃取；CO2流量为150L/h，萃取3小时后，收集提取物，收率：3.5％。
超临界CO2提取法提取挥发油工艺
经单因素实验可知各因素对挥发油收率的影响如下：当萃取压力15～35MPa时，收率随压 力升高而增加，达到25MPa时，收率几乎达最大值；当萃取温度为30～40℃时，收率呈下降趋 势；40～60℃收率呈上升趋势；萃取前2h收率增加显著，2.5h后几乎不再增加。
解析温度的影响两级解析；固定I级解析温度为40℃左右，则II级解析温度变化对总提物 收率影响不大，只是影响各级提取物的量和含量；解析压力的影响固定II级压力为5MPa左右， 则I级解析的压力变化影响同上；本实验由于只要分离总挥发油，纯度要求不高；较佳条件为： I级解析压力和温度为9MPa和40℃；II级解析压力和温度为5MPa和35℃；CO2流量对土木 香、山奈挥发油收率影响不大。
在单因素实验的基础上进行正交实验，结合单因素实验结果，以挥发油萃取率为考察指标， 选取萃取压力(A)、萃取温度(B)、萃取时间(C)、CO2流量(D)4个因素为考察因素，每个因素设 计3个水平，进行四因素三水平正交实验。
表1 提取挥发油正交实验表
以挥发油收率为评价指标，结果见表2、表3；
表2 正交试验结果及数据直观分析
表3 正交试验结果及数据方差分析
由上述各表可知萃取压力(A)对挥发油的提取有显著影响、萃取时间(C)、萃取温度(B)、 CO2流量(D)次之；超临界CO2萃取法提取土木香、山奈挥发油的提取方法为萃取压力为20MPa、 温度35℃，分离I压力9MPa、温度40℃，分离II压力5MPa、温度35℃，进行循环萃取；CO2流量 为150L/h，萃取3小时后，收集提取物，收率：3.5％。
四味土木香散水提工艺的优选
在预试验和查阅文献的基础上，选取溶剂用量(倍)、提取时间(h)、提取次数(次) 为考察因素，每个因素设3个水平，以苦参碱和氧化苦参碱的总含量、干膏重为指标，取所得的 土木香、山柰的药渣与苦参、悬钩子木粗粉共70g，按其质量比混合(土木香∶苦参∶悬钩子木∶ 山柰＝4∶4∶2∶1)，精密称定，平行9份，按L9(33)因素水平正交表表4安排试验进行提取。
表4 四味土木香散的提取工艺正交实验表
以苦参碱和氧化苦参碱的总含量、干膏重为指标，通过HPLC法进行含量测定；分别量取以 下9份提取液20mL，放入蒸发皿中蒸发至恒重，计算干膏量率；结果见表5。
表5 四味土木香散提取方法实验数据分析
由上表可知四味土木香散的最佳提取工艺为A3B1C3组，即四味按比例混合的药材70g，加9 倍量的水，提取0.5h，提取三次。
β-环糊精的包合工艺的优选
影响挥发油包合的主要因素为β-环糊精与挥发油的比例、包合温度、搅拌时间，各因素 分别取个水平，以包合物收率和包合率为指标进行正交试验，筛选最佳工艺条件；包合工艺的 因素水平见表，包合工艺的因素水平见表6和表7。
表6 β-环糊精的包合工艺正交试验
表7 正交试验直观分析表
通过对正交试验结果的分析可知，各因素对包合物收率影响的主次顺序为：B包合温度＞A β-环糊精与挥发油的比例＞C搅拌时间，并得到最佳提取工艺：A2B2C3，即温度50℃，β-环糊精 与挥发油的比例是8∶1，搅拌时间2小时。
喷雾干燥工艺优选
在预试验和查阅文献的基础上，选取进风口温度、热风流量、进料速度为考察因素，每个 因素设3个水平，以喷干粉出粉量、喷干粉的含水量为指标，按L9(33)正交表安排试验，取提取 液，等分成9份，进行喷雾干燥，因素水平见表8。
表8 喷雾干燥工艺正交实验表
以喷干粉出粉量、喷干粉的含水量为指标.水分测定按2015年版《中国药典》第四部水 分测定法项下第一法测定；
出粉率(％)＝喷雾干燥粉重(g)/干膏重量(g)×100％。
结果见表9
表9 水分含量、出粉率直观分析表
方差分析
分别对出粉率和水分含量进行方差分析，由表10可知各因素对出粉量影响大小顺序为 A＞C＞B，即A进风口温度对出粉量有显著性影响；由表11可知各因素对水分的影响依次为B＞A＞C， 即B热风流量对水分含量有显著性影响；同时结合粉末的外观形状综合评价优选工艺为A3B3C2； 即进风口温度140℃，热风流量为0.70(M3/h)，进料速度为600mL/h。
表10 出粉率方差分析表
表11 水分含量方差分析表
制剂成型工艺研究
制备微丸(应用挤出滚圆法)
将药粉与辅料按合适比例混合，制成软材后，放入挤出滚圆制粒机，调节风机变频、抛丸变 频大小，在一定的滚圆时间内，制得微丸；挤出滚圆机的设置参数见表12。
表12 挤出滚圆机的设置参数
根据预试验可知，风机变频范围在5-10Hz，抛丸变频在20-30Hz之间，成丸性能挺好；而风 机变频范围在10-20Hz，抛丸变频范围在40-50Hz之间，成丸性能是不成丸；所以，风机变频与 抛丸变频分别选择为10Hz与20Hz。
微丸的辅料优选
赋形剂种类的考察
微晶纤维素(MCC)是常用的微丸赋形剂，能保留水分，制备软材时，可控制湿料中水的运 动和分布，降低黏性；成丸时，可增加物料的可塑性，使圆柱体易于滚圆，具有一定黏合作用，赋 予微丸一定的强度，是一种优良的成球促进剂；
由于本处方药物本身黏度较大，故考虑不加入淀粉等粘合，预对微丸进行包衣，故考虑 不再加入蔗糖等调味剂改善口感。所以直接用MCC与药粉按比例混合，以成丸性能为指标进 行筛选；结果见表13；
表13 赋形剂种类的考察
由表13可知，在预实验的基础上，固定药粉与MCC的比例为1∶1.25，风机变频10Hz，抛丸 变频20Hz；成丸性能与外观性状最好
粘合剂的选择
在预实验的基础上，固定赋形剂微晶纤维素∶药粉按质量比1∶1.25，分别加入适量的水，5％ 乙醇，10％乙醇，20％乙醇，30％乙醇，40％乙醇粘合剂制软材，结果见表14；
表14 粘合剂的选择
由表14可知：粘合剂为20％乙醇时，能制成合格软材。
由上述各表可知，最佳的成型工艺是将药粉与辅料的比例为1∶1.25，混合均匀，辅料为MCC，再喷洒20％的乙醇为粘合剂；制软材，放入挤出机，调节风机变频为10Hz，抛丸变频为 20Hz，3min内，将软材制成微丸；
微丸的薄膜包衣工艺
由于查干汤中的组方药材苦参味道极苦，制备成的微丸剂不能掩盖其苦味，故采取薄膜包 衣对其苦味进行掩盖，将β-环糊精包合挥发油的包合物与喷雾干燥粉混合制包衣微丸，本产 品查干汤微丸包衣，掩盖了药物的苦味，获得了令人满意的效果；
包衣液配制：
准确称取薄膜包衣预混剂(胃溶型)欧巴代中药包衣粉，以5％的增重计，300g微丸需要包 衣粉：300×5％＝15g，固液比为15％，则需要加入蒸馏水的量为：15/0.15＝100mL；将蒸馏水加到合 适的容器中，启动搅拌器，整个液面形成漩涡，带动整个容器内的液体，但搅拌速度不宜太快， 以免卷入过多空气；将包衣粉匀速加入到漩涡中，不宜使粉末漂浮在液面上，加料过程应在5 min内完成加料完毕，调整搅拌速度，使整个溶液维持转动45min，即完成配料过程；
包衣操作：
将微丸取出置干燥器中放凉，用16目和32目筛整粒，取能通过16目不能通过32目筛的 微丸为合格微丸；包衣前将微丸置多向运动混合机内混匀，以保证样品的均匀性；选用底喷型 流化床包衣设备，由试验结果可以看出：雾化压力、进气温度和输液速度对制剂质量亦有重要 的影响；压力越大，包衣液的喷雾液滴越小，所形成的衣膜越均匀；温度太高，容易造成包衣液 的喷雾干燥，不能形成连续均匀的衣膜；输液速度太快，则由于干燥不充分而容易粘连，影响衣 膜的形成质量，降低包衣效率和成品产率；
故最后我们选用在鼓风频率为30Hz、雾化压力为0.12MPa、包衣液流速为5.0～10r/min、 进风温度50℃，物料温度控制在40℃条件下，采用卡乐康公司生产的薄膜包衣预混剂(胃溶 型)欧巴代中药水分散体为包衣材料进行包衣；
随着包衣增重的增加，对苦味的掩盖有明显的改善，但因包衣材料是影响包衣微丸释放特 性的最主要因素之一，故对包衣增重的影响进行了考察，取包衣增重分别为5％，10％和未包衣的 微丸，考察包衣增重对药物释放的影响；结果见表15、16；
表15 包衣微丸口感、色泽比较
表16 包衣前后微丸溶出度比较
由表格15、16可知：包衣增重10％的微丸掩盖苦味的效果最好，且未包衣微丸和包衣微丸 的溶出度差别不大，故选用包衣增重10％的微丸进行包衣；
防潮试验
将未包衣和包衣增重分别为5％、10％的微丸，同置室内暴露于空气中，依常规测定微丸含 水量变化，结果见表17；
从表可以看出，随着在空气中暴露时间的变化，包衣微丸水分含量变化不大，但没包衣微 丸的水分含量发生显著变化，明显增大；
表17 微丸包衣与否放置后含水量的变化(％)
实施例2
一种蒙药查干汤合剂的制备方法，包括如下步骤：
S1、称取适量土木香、山柰、苦参和悬钩子木分别粉碎后，得土木香粗粉、山柰粗粉、 苦参粗粉和悬钩子木粗粉；
S2、分别对所得的土木香粗粉、山柰粗粉进行超临界CO2萃取处理，得土木香挥发油、山 柰挥发油、土木香药渣和山柰药渣；所述超临界CO2萃取法的反应参数为：萃取压力为20MPa、 温度35℃，分离I压力9MPa、温度40℃，分离II压力5MPa、温度35℃，进行循环萃取；CO2流量 为150L/h，萃取3小时后，收集提取物，收率：3.5％。
S3、将所得的土木香药渣、山柰的药渣、苦参粗粉、悬钩子木粗粉按其质量比土木香药 渣∶苦参粗粉∶悬钩子木粗粉∶山柰药渣＝4∶4∶2∶1的比例混合后，加9倍量水，水提三次，每次 0.5h，过滤，得水溶液；
S4、将S3水提三次所得的水溶液合并后浓缩至500mL，加入无水乙醇，制成含醇量为60％ 的溶液，静置24h，趁热在3500rpm/min条件下离心10min，取上清液，回收乙醇至无醇味，并浓 缩至相对密度为1.3，加白糖、挥发油、苯甲酸钠适量，用纯化水调至全量，充分搅匀，灌装，灭 菌即得。
超临界CO2提取法提取挥发油工艺
在实施例所述的单因素实验的基础上进行正交实验，结合单因素实验结果，以挥发油萃取 率为考察指标，选取萃取压力(A)、萃取温度(B)、萃取时间(C)、CO2流量(D)4个因素为考察 因素，每个因素设计3个水平，进行四因素三水平正交实验；因素水平表见表18。
表18 提取挥发油正交实验表
以挥发油收率为评价指标，结果见表19、表20。
表19 正交试验结果及数据直观分析
表20 正交试验结果及数据方差分析
由上述各表可知萃取压力(A)对挥发油的提取有显著影响、萃取时间(C)、萃取温度(B)、 CO2流量(D)次之；超临界CO2萃取法提取土木香、山奈挥发油的提取方法为萃取压力为20MPa、 温度35℃，分离I压力9MPa、温度40℃，分离II压力5MPa、温度35℃，进行循环萃取；CO2流量 为150L/h，萃取3小时后，收集提取物，收率：3.5％。
四味土木香散水提工艺的优选
在预试验和查阅文献的基础上，选取溶剂用量(倍)、提取时间(h)、提取次数(次) 为考察因素，每个因素设3个水平，以苦参碱和氧化苦参碱的总含量、干膏重为指标，取所得的 土木香与山柰的药渣与苦参、悬钩子木共70g，按其质量比混合(土木香∶苦参∶悬钩子木∶山 柰＝4∶4∶2∶1)，精密称定，平行9份，按L9(33)因素水平正交表表21安排试验进行提取。
表21 四味土木香散的提取工艺正交实验表
以苦参碱和氧化苦参碱的总含量、干膏重为指标，通过HPLC法进行含量测定；分别量取以 下9份提取液20mL，放入蒸发皿中蒸发至恒重，计算干膏重；结果见表22。
表22 四味土木香散提取方法实验数据分析
由上表可知四味土木香散的最佳提取工艺为A3B1C3组，即四味按比例混合的药材70g，加9 倍量的水，提取0.5h，提取三次。
醇沉浓度的优选
将三次提取的水溶液合并，浓缩到1800mL，均分成6份，每份300mL，其中一份中直接吸取 20mL，旋蒸至干，应用HPLC进行含量测定；另四份分别制成含醇量为40％、50％、60％、70％、80％ 的乙醇溶液(快搅慢加)，静置24h，在3500rpm/min条件下离心10min，取上清液，回收乙醇 至无醇味，应用HPLC进行含量测定，比较未不同醇沉浓度对有效成分苦参碱和氧化苦参碱的 影响。
表23 水提醇沉方法实验数据分析
上述结果表明，60％醇沉浓度效果最佳，且损失率较少，故采用60％乙醇进行醇沉处理。
查干汤合剂
土木香、山柰粗粉用超临界CO2萃取法提取挥发油，将土木香、山柰提取挥发油后的药渣 与其他两味药的粗粉按比例混合进行水提；将三次提取的水溶液合并，浓缩到500mL，加入无水 乙醇，制成含醇量为60％的溶液，静置24h，趁热在3500rpm/min条件下离心10min，取上清液， 回收乙醇至无醇味，并浓缩至相对密度为1.3，加白糖、挥发油、苯甲酸钠适量，用纯化水调至 全量，充分搅匀，灌装，灭菌即得。
查干汤微丸剂、合剂的质量控制方法如下：
查干汤微丸剂的质量检查：
粒度：采用粒度和粒度分布测定法的双筛测定法，取药物称定重量，置该剂型或品种项下 的上层(孔径大的)药筛中(下层的筛下配有密合的接收容器)，保持水平状态过筛，左右往 返，边筛边拍打3分钟，取不能通过大孔径筛和能通过小孔径筛的微丸及粉末，称定重量，计算 其所占比例(％)；不能通过1号筛和能通过5号筛的总和不得超过15％。
干燥失重：于80℃减压干燥至恒重，减失重量不得少于2.0％。
溶出度比较：采用浆状搅拌法测定溶出度，在溶出杯中加水900mL，恒温(37±0.5)℃， 分别精密称取四味土木香微丸各5g置溶出杯中，转速100r·min-1，开始计时，分别于5、10、 15、20、30、40、50、60min各取样适量，经0.45μm微孔滤膜滤过，过滤后立即补充等温 等体积水和滤后沉淀物；精密量取适量续滤液按上述色谱条件测定，比较不同时间溶出液中土 木香内酯异土木香内酯、苦参碱、氧化苦参碱的溶出度。
查干汤合剂的质量检查：
外观性状：除另有规定外，合剂应澄清；在贮藏期间不得有发霉、酸败、异物、变色、产生 气体或其他其他变质现象，允许有少量摇之易散的沉淀。
根据需要可加入适宜的附加剂，除另有规定外，在制剂确定处方时，该处方的抑菌效力应 符合抑菌效力检查法(通则1211)的规定；山梨酸和苯甲酸的用量不得超过0.3％。
装量：单剂量灌装的合剂，照下述方法检查，应符合规定。
检查法：取供试品5支，将内容物分别倒入经标化的量入式量筒内，在室温下检视，每支装 量与标示装量相比较，少于标示装量的不得多于1支，并不得少于标示装量的95％。
查干汤中的土木香内酯、异土木香内酯的含量测定
对照品溶液的制备：取异土木香内酯对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL约含50μg 的溶液即得。
供试品溶液的制备：取本品适量，研细，取0.3g精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇 25mL，密塞，称定重量，放置过夜，超声处理30分钟，放冷，称定重量，用甲醇补足减失的重量， 摇匀，过滤，取续滤液既得。
色谱条件：Diamonsil C18(4.6×250mm，5μm)色谱柱；以乙腈-0.04％磷酸溶液(50∶50) 为流动相；流速1.0mL/min；检测波长210nm；柱温25℃；进样量为20μL。
查干汤中的苦参生物碱的含量测定
对照品溶液的制备：取氧化苦参碱对照品、苦参碱对照品适量，精密称定，加乙腈-无水乙 醇(80∶20)的混合溶液分别制成每1毫升约含氧化苦参碱0.0438mg、氧化槐果碱0.0142mg 的溶液即得。
供试品溶液的制备：称取喷雾干燥粉末0.651g，精密称定，置锥形瓶中，加浓氨试液0.5mL， 三氯甲烷20mL，摇匀，称重，放置半小时后，超声40min，放冷，用三氯甲烷补足重量，过滤，取续 滤液5mL，过中性氧化铝(100～200目，5g，内径1cm)，依次用三氯甲烷、三氯甲烷∶甲醇(7∶3) 各20mL洗脱，合并洗脱液，蒸干，用适量无水乙醇溶解，定容于10mL容量瓶中，即得。
色谱条件：Ultimte XB-NH2(250×4.6mm，5μm)色谱柱，以乙腈∶无水乙醇∶3％磷酸水 (80∶10∶10)流动相；流速为1mL·min-1；进样量为20μL；柱温：25℃；检测波长：220nm。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说， 在不脱离本发明原理的前提下，还可以作出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明 的保护范围。