1.本发明属于生物医药技术领域，具体涉及藤黄酸联合奥沙利铂在制备胰腺癌治疗药物中的应用。
背景技术：
2.藤黄酸 (ga) 是从藤黄中分离出来的主要成分之一，具有很强的抗肿瘤作用，且在较低浓度下依然有效，表现出良好的安全性及较大的治疗指数。奥沙利铂是一种新型铂类抗癌药，在胰腺癌及多种肿瘤模型中都表现出良好的抗肿瘤作用。过去10年，吉西他滨已成为胰腺癌标准的辅助治疗，近年，包含奥沙利铂的folfirinox方案已经被用于转移性胰腺癌的一线治疗，极大的延长了患者的生存期。folfirinox方案在胰腺癌中的效果已经得到了证实，明显优于吉西他滨单药治疗。本研究即探究藤黄酸与奥沙利铂的联合作用效果对临床治疗胰腺癌及为胰腺癌的治疗方案提供了参考。
技术实现要素：
3.本发明的目的是提供藤黄酸联合奥沙利铂在制备胰腺癌治疗药物中的应用。本发明发现天然产物藤黄中提取的藤黄酸（ga）联合新型铂类抗癌药物奥沙利铂（oxa）能显著抑制胰腺癌（pac）细胞的生长。通过mtt实验验证了较低浓度的藤黄酸与新型铂类抗癌药物奥沙利铂可发挥协同抗pac作用，提示了这种联合给药方式在治疗pac中的应用潜力。
附图说明
4.图1为藤黄酸联合奥沙利铂对胰腺癌细胞株bxpc3增殖的影响结果。
具体实施方式
5.下面结合附图和具体实施例对本发明作进一步详细说明，但不应理解为对本发明的限制。在不背离本发明精神和实质的情况下，对本发明方法、步骤或条件所作的修改或替换，均属于本发明的范围。实施例中未注明具体条件的实验方法及未说明配方的试剂均为按照本领域常规条件。
6.实施例11、实验材料（1）藤黄酸（gambogic acid, c
33h44
o8，分子量：628.7512）由中国药科大学提供，黄色粉末，纯度95%，使用前用二甲亚砜（dmso）将药物粉末配制为0.01m母液，置于-80℃保存。奥沙利铂粉末购于csnpharm试剂公司，-20℃避光保存，使用前用无菌水配制为0.005m的母液，-80℃保存，所有试剂临用前用含10% 胎牛血清的rpmi-1640培养液配成所需浓度。
7.（2）细胞培养试剂
①ꢀ
培养液：rpmi-1640培养基，购自美国gibco公司。取rpmi-1640粉末10.39 g溶于1000 ml灭菌三蒸水中，并加入2.0 g nahco3，用1 m 盐酸调ph值至7.0，圆筒式过滤器过
滤除菌、分装，4℃冰箱保存。使用前加入100 u/ml的青霉素和100 u/ml的链霉素。
8.②ꢀ
胎牛血清：美国gibco公司产品。经56℃水浴灭活30 min，分装并保存于-20℃低温冰箱中。
9.③ꢀ
pbs缓冲液：称取nacl 8.0 g、kcl 0.20 g、na2hpo4·
h2o 1.56 g、kh2po4. 2.0 g，溶于1000 ml三蒸水中，高压灭菌，4℃冰箱保存。
10.（3）细胞生长活力抑制检测相关试剂mtt粉末购自sigma-aldrich公司。
11.（4）细胞株人pac细胞株bxpc3购自上海中国科学院细胞所。细胞均用含100 u/ml青霉素、100 mg/ml链霉素和10%胎牛血清的rpmi1640培养液培养。
12.2、实验方法mtt实验mtt溶液能够被活细胞内的线粒体脱氢酶还原为蓝紫色的结晶甲臜，dmso可溶解甲臜，形成的溶液颜色深浅与细胞活力成正比，据此可以检测细胞的活力。将细胞按照合适的细胞密度培养在96孔酶标板内，每孔内的细胞体积为100
ꢀµ
l，待细胞贴壁且融合度达50%，吸去培养基，加入100
ꢀµ
l浓度为0或者0.5
ꢀµ
m的藤黄酸和奥沙利铂（100、120、140、160、180、200、220、240、260、280
µ
m）；将给过药物的细胞继续置于孵箱培养24 h后，每孔加入20
ꢀµ
l mtt溶液；继续孵育4 h后将上清液移除，每孔加入100
ꢀµ
l dmso，置于微型振荡器振荡，待结晶完全溶解后，使用570 nm波长检测其吸光度。将检测后的吸光值整理后按下面的公式计算药物对细胞的生长抑制率：。
13.3、实验结果通过mtt实验测定24 h时间点天然产物藤黄酸联合奥沙利铂对pac细胞系bxpc3生长的抑制作用。如图1所示，相较于奥沙利铂单用组（ga-0），藤黄酸联合奥沙利铂（ga-0.5）能显著抑制pac细胞bxpc3细胞的生长，该结果初步证实了藤黄酸联合化疗药抗pac的作用。
技术特征：
1.藤黄酸联合奥沙利铂在制备胰腺癌治疗药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：藤黄酸和奥沙利铂的浓度比为0.5：100-280。3.一种胰腺癌治疗药物，其特征在于：所述药物的活性成分为藤黄酸和奥沙利铂。4.根据权利要求3所述的药物，其特征在于：藤黄酸和奥沙利铂的浓度比为0.5：100-280。
技术总结
本发明公开了藤黄酸联合奥沙利铂在制备胰腺癌治疗药物中的应用，属于生物医药技术领域。本发明发现天然产物藤黄中提取的藤黄酸（GA）联合新型铂类抗癌药物奥沙利铂（OXA）能显著抑制胰腺癌（PaC）细胞的生长。通过MTT实验验证了较低浓度的藤黄酸与新型铂类抗癌药物奥沙利铂可发挥协同抗PaC作用，提示了这种联合给药方式在治疗PaC中的应用潜力。给药方式在治疗PaC中的应用潜力。给药方式在治疗PaC中的应用潜力。
技术研发人员：杨林 郭青龙 周煜新 郭滨 郭永健 葛展虹
受保护的技术使用者：南京芩康医药科技有限公司
技术研发日：2022.03.21
技术公布日：2022/6/7