专利名称：用于治疗与白三烯有关的疾病的酰胺连接的吡啶-苯甲酸衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及用于治疗与白三烯有关的疾病的酰胺连接的吡啶-苯甲酸衍生物。这些化合物特别用于治疗由羟基白三烯，尤其是LTB4和LTB4-促效药活性物质引起的疾病。
通称为白三烯的生物活性脂类对于呼吸，心血管和胃肠系统产生药理作用。白三烯通常分为两个亚类，即肽白三烯(白三烯C4、D4和E4)和羟基白三烯(白三烯B4)。本发明主要涉及羟基白三烯(LTB4)，但并不局限于这种特定的白三烯。
肽白三烯与生物应答有关，此生物应答是与“过敏反应的缓慢应答物质”(SRS-A)相联系的。这种应答在体内表现为延长支气管收缩，在心血管中的作用，如冠状动脉血管收缩和许多其他生物应答。肽白三烯的药理学包括平滑肌收缩、心肌阻抑、增大血管渗透性和增加粘液的产生。
比较起来，LTB4是通过刺激白细胞和淋巴细胞功能而产生其生物学作用。它刺激多形核白细胞(PMNS)的趋化性，化学激动作用和聚集。
严格说来，它们与传递心血管的、肺的、皮肤的、肾的、过敏性的及炎性的许多种类的疾病有关，这些疾病包括哮喘，成年人呼吸窘迫综合症，膀胱的纤维变性，牛皮癣以及肠炎疾病。
白三烯B4(LTB4)最初是由Borgeat和Samuelsson在1979年描述的，以后由Corey及其合作者证实为5(S)，12(R)-二羟基-(Z，E，E，Z)-6，8，10，14-二十烷四烯酸。
由LTA4的酶催化水解所得的产物就是花生四烯酸串联。已经发现它可由柱状细胞，多形核白细胞，单核细胞和巨噬细胞产生。已经表明LTB4在体内是PMN白细胞的有效的刺激物，从而导致增加趋化性的和化学激动作用的迁移、粘连、聚集、脱粒，超氧化物的形成及细胞毒性。LTB4的作用是通过白细胞表面上具有高度立体定向性的特殊的受体部位来传递的。对于人的血液PMN白细胞之药理学研究表明存在两类LTB4特异性受体，它们是和肽趋化因子的特异性受体分开的。每类受体都可以被连接到分离类的PMN白细胞功能基上。钙迁移作用包括两种机理。
LTB4已被证实为体内炎症的传递质。除了被发现在具有严重的肺机能不良的人的肺灌洗中其浓度增大之外，它还与狗的气道过度应答有关。
通过拮抗LTB4的作用，或拮抗其他位于器官末端上的药理活性传递质如气道平滑肌的作用，本发明的化合物和药物组合物对治疗包括人或动物受治疗者的疾病是有价值的，在这些疾病中白三烯是一个因子。某些这种化合物还可以抑制5-脂氧合酶或者他们是LTD4拮抗剂。
本发明的化合物或其药物上可接受的盐或N-氧化物由通式(Ⅰ)表示，
式中T为酰胺连接基
其中的羰基碳与吡啶环连接;
R为C1至C20脂族基、未取代或取代的苯基C1至C10脂族基，其中取代苯基有一个或多个选自低级烷氧基、低级烷基、三卤代甲基，或卤素的基团，或者R为C1至C20脂族-O-，或R为未取代或取代的苯基C1至C10脂族-O-，其中取代苯基有一个或多个低级烷氧基、低级烷基、三卤代甲基，或卤素基团;
R1为R4、-(C1至C5脂族基)R4，-(C1至C5脂族基)CHO，-(C1至C5脂族基)CH2OR8，-CH2OH或-CHO;
R2为氢、COR5，其中R5为-OH，药物上可接受的形成酯的基-OR6，或OX，其中X为药物上可接受的阳离子，或者R5为-N(R7)2，其中R7为H，或1至10个碳原子的脂族基，4至10个碳原子的环烷基-(CH2)n-基，其中n为0-3，或者两个R7连在一起形成具有4至6个碳原子的环，或者R2为NHSO2R9，其中R9为-CF3，C1至C6烷基或苯基;
R3为氢，低级烷氧基，卤素，-CH，COR5，或OH;
R4为COR5，其中R5为-OH，药物上可接受的形成酯的基-OR6，或OX，其中X为药物上可接受的阳离子，或R5为-N(R7)2，其中R7为H，1至10个碳原子的脂族基，4至10个碳原子的环烷基-(CH2)n-基，其中n为0-3，或者两个R7连在一起形成具有4至6个碳原子的环;
R8为氢，C1至C6烷基，或C1至C6酰基。
另一方面，本发明包括含有这些化合物和药物上可接受的赋形剂的药物组合物。
治疗与白三烯特别是LTB4有关的或由它们所引起的疾病，或与处于器官末端的药理活性传递质有关的疾病包括在本发明范围之内。这种治疗可以通过服用一种或多种单独的或与药物上可接受的赋形剂结合在一起的通式Ⅰ化合物来进行。
又一方面，本发明涉及制备通式Ⅰ化合物的方法，该方法在下面给出的反应图解及列出的实施例中被说明。
下列定义用于描述本发明并在此陈述发明人认为是他们的发明。
“脂族的”是指包括饱和与不饱和的基团。它包括直链和支链，饱和的或单或多个不饱和链，其中双键和三键可以任意组合形式存在。术语“低级烷基”是指以任何异构形式但特别是正构或直链形式的1至6个碳原子的烷基。“低级烷氧基”是指低级烷基-O-基团。“酰基”是指具有末端羰基碳的基团。“卤素”是指氟、氯、溴或碘。苯环可以用一个或多个这些基团取代。多取代基可以相同或不同，如其中有三个氯基团，或氯与烷基的组合，而且后者这种组合在氯/烷基方式中可以有不同的烷基。
在R2和R3中的术语“药物上可接受的形成酯的基”包括由存在于这些化合物中的酸官能基形成的所有酯。所得到的酯在其用于制药用途中为可接受的。因此，这意味着单或二酯将保持母体化合物的生物活性，并且在其应用及用于治疗疾病中将没有不适宜的或有害的作用。这些酯是例如与下面由-OR6所代表的基团之一形成的那些酯，其中R6是C1至C10烷基、苯基-C1-C6烷基、环烷基、芳基、芳烷基、烷芳基、烷基芳基烷基、氨基烷基、2，3-二氢化茚基、新戊酰氧甲基、乙酰氧甲基、丙酰氧甲基、甘氨酰氧甲基、苯基甘氨酰氧甲基，或噻吩甘氨酰氧甲基。芳基包括苯基和萘基，或杂芳基如呋喃基、噻吩基、咪唑基、三唑基或四唑基。最优选的形成酯的基是其中R6为烷基，尤其是1至10个碳的烷基〔即CH3-(CH2)n-，其中的n为0-9〕或苯基-(CH2)n-，其中n为0-4的那些基团。
这些化合物的药物上可接受的盐也包括在本发明范围之内。这些盐在其制药应用中为可接受的。因此这意味着盐将保持母体化合物的生物活性，并且在其应用及用于治疗疾病中将没有不适宜的或有害的作用。
药物上可接受的盐可以按一般方法制备。在具有碱部分的酸加成盐的情况下，是在合适的溶剂中使母体化合物与过量的有机或无机酸反应，或当R4为OH时与过量的有机或无机碱反应。具有代表性的酸有氢氯酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、乙酸、马来酸、琥珀酸或甲磺酸。阳离子盐可由碱金属碱，如钠、钾、钙、镁、锌、铜等的碱以及氨容易地制备。有机碱包括单或二取代胺、乙二胺、氨基酸、咖啡碱、缓血酸胺、缓血酸胺化合物、三乙胺、哌嗪等等。
吡啶环氮的氧化物可以通过本领域已知的方法和本文所说明的方法来制备。这些被认为是本发明的一部分。
如果通过取代基的某些组合在本发明化合物中能够产生手性中心或其他形式的异构中心，则所有这些异构体形式均包括在本发明范围之内。带有手性中心的化合物可以外消旋混合物的形式给药，或将外消旋物分离并单独使用个别的对映体。
作为白三烯拮抗剂，这些化合物可用于治疗各种与白三烯特别是LTB4有关的疾病，或其起因或侵袭是由白三烯特别是LTB4引起的疾病。因此，期望这些化合物可用于治疗过敏性疾病，包括肺的和非肺种类的疾病。例如，这些化合物可用于抗原诱导的过敏反应。它们用于治疗哮喘和过敏性鼻炎。这些化合物也可用来治疗眼的疾病，如眼色素层炎和过敏性结膜炎。
本发明优选的化合物中的R为烷氧基，特别是8至15个碳的烷氧基，或取代或未取代的苯基-C1至C10-脂族基-O-;R1为-(C1至C5脂族基)R4或-(C1至C5脂族基)CH2OR3;并且R2为COOH或其碱金属盐或NHSO2R9，其中R9为-CF3，C1至C6烷基或苯基。本发明较优选的化合物中的R为8至15个碳原子的烷氧基或烷氧基取代的苯基-C1至C8链烯氧基或C1至C8烷氧基;R1为-COR5，-CH2-CH2COR5或-CH＝CH-COR5;R2为-COOH或NHSO2R9，特别是其中R9为CF3;R2为氢或氯。
最优选的化合物列于表Ⅱ中。
表Ⅱ
＊羰基碳被取代于吡啶环上。
＊＊反式构型。
合成这些化合物可以通过如下列反应图解中所示的中间体和试剂进行制备。这特定的一组中间体用来说明一般的方法。反应图解1说明了制备用于制备R基团化合物的方法。为了制备R基团，其他图解使用的原料的制备在图解1中描述，或得自商业来源的中间体，然后说明制备通式Ⅰ化合物的方法。
通式Ⅰ的R基团是从化学品供应商店买到的或可以通过在反应图解Ⅰ中所描述的两种方法之一进行制备。
反应图解Ⅰ(a)说明了制备不饱和苯基-脂族R基的方法。
反应图解Ⅰ(a)
仅管在此说明的是甲氧苯基化合物，但这一系列步骤及试剂可用于制备由R所表示的其他取代的苯基-ω-脂族基。起始原料苯甲醛市场上可以买到或可用已知方法容易地进行制备。
为制备酸(a)，首先在惰性气氛下将烷基硅杂叠氮化物加入惰性溶剂中。然后加入磷鎓盐。此填加是在约室温下进行的。经过短暂的混合后，该混合物通常为悬浮液。在约室温下慢慢加入苯甲醛。使用稍微摩尔过量的磷鎓盐。在约室温下经附加的短暂搅拌后，用水使反应混合物骤冷。将溶液酸化并用合适的有机溶剂萃取此酸。根据需要进一步使用一般的分离和纯化方法。
通过使用还原剂还原上面的酸制得醇。可以使用氢化铝锂或类似的还原剂，反应条件可以根据进行还原的需要而变化。
在惰性溶剂中使用对甲苯磺酰氯和碱如吡啶来制备对甲苯磺酸酯。合适的条件包括在约室温下进行该反应1至5小时。可以制备在功能上类似于对甲苯磺酸酯的其他合适的离去基团，并用作将R部分加到吡啶环上的方法。
反应图解Ⅰ(b)概述了制备烷氧苯基烷基R基团的一种方法。该方法可用于制备苯基为脂族链上的ω基团的其他R基团，包括取代的含苯基的基团。
反应图解Ⅰ(b)
在这些实例中的ω-炔-1-醇是市场上买不到的，它的制备可由相应的3-炔-1-醇通过用强碱处理该醇来进行。这里使用碱金属酰胺。然后将醇保护起来以便使所需的苯基加在未端三键上。在此例中形成甲硅烷基醚;它说明了一般情况。卤代苯基加合物被用来将苯基加在三键上。这里三键可被还原，最适宜的是用催化的方法，如钯/碳和氢气。另一种方法是将三键保留，中间体按照所说明的进行反应得到对甲苯磺酸酯。将甲硅烷基除去并将得到的醇转化为对甲苯磺酸酯或别的基团，该基团应具有足够的反应活性，以便在以后这些化合物的合成中能很容易地形成醚。
在下列反应图解中使用在反应图解Ⅰ中制备的化合物和买到的或用已知方法制备的其他化合物，可以按照下面反应图解中概述的反应顺序制备通式Ⅰ化合物。而且，这些图解用具体的实例说明了如何制备这些化合物的一般方法。通过改变或改进此处说明的化学品，这些图解可用于制备本发明公开的其它化合物。这种改变或改进将改变反应条件，如温度、压力、反应时间，试剂用量，等等。试剂可以被其等价物或类似的试剂取代，此等价物或类似的试剂将产生相同的或等价的产物。同样地，也可以改变起始原料和中间体以适应制备具体化合物的需要。
在反应图解2中列出了制备化合物的一种方法，其中酰胺连接基团的氮是连在苯环上。
反应图解2
上述图解说明了制备通式Ⅰ化合物的一种合成路线，其通式Ⅰ中的羧基碳是连在吡啶环上。3-羟基-2-(羟甲基)吡啶可在市场上买到或可以用公开的已知方法来制备。将此二醇中2-位羟甲基转化为醛，然后转化为3-烷氧基化合物，或者首先将3-羟基转化为醚，然后将2-位羟甲基氧化为醛。氧化醇可以使用温和的氧化剂很容易地进行;优选二氧化锰，但其他氧化剂也能很好地用于此步骤中。在碱性条件下醚可以由相应的α-卤代-R基团或象对甲苯磺酸酯类的化合物很容易地进行制备。
然后利用合适的正膦基内鎓盐酯在通常用于这种反应的条件下将此3-取代-2-羧基醛(c)转化为2-甲酯基乙烯基形式(d)。再将得到的酯用过酸处理来制备N-氧化物，此N-氧化物可用于制备吡啶酮(e)。该步骤是通过间-氯过氧苯甲酸加以说明的，但也可以使用其他类似的氧化剂。之后用三氟乙酸酐或类似的试剂进行N-氧化物的重排，生成2-吡啶酮(f)。
使2-吡啶酮转化为酰胺是通过酰化2-吡啶酮(g)，然后在一定的催化剂和一氧化碳的存在下，用所需的氨基苯甲酸酯(h)与该酯反应而进行的。以三氟甲磺酸酐为例说明酰化步骤。酰胺化反应是通过在Pd(OAc)2、1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁存在下用一氧化碳鼓泡通过三氟甲磺酸酯溶液来进行的。然后将得到的二酯(ⅰ)用无机碱皂化使酯基水解。中和所得的盐以便得到游离酸。可以用已知方法将游离酸转化为另一种酯或制备成相应的酰胺。
饱和的3-位取代基可由链烯烃类似物通过催化氢化很容易地进行制备。反应图解3说明了这种方法。
反应图解3
在经典的催化还原反应中利用重金属催化剂和氢气将二酯催化还原为(3a)。还原反应完成以后，如果需要二酸(3b)，可以使用碱使二酯水解。通过合适的氧化，还原、酯化、酰胺化反应或通过其他方法，每一化合物均能转化为本发明的其他化合物。
这些化合物的碳类似物，即其中连接R基团到3-位上的原子为亚甲基的化合物可以按照在第4个流程图中列出的步骤之顺序进行制备。
反应图解4
用相应的链烷醇和酸催化剂将3-羟基吡啶甲酸转化为烷基酯。用三氟甲磺酸酐和吡啶将羟基转化为三氟甲磺酸酯(4a)。然后用合适的烷基儿茶酚硼化物连上脂尾(4b)，所用的烷基儿茶酚硼化物是用钯偶合条件(〔Pd(OAc)2〕)由1-十三碳烯和儿茶酚硼烷来制备的。再用适宜的氢化物，如氢化二异丁基铝将烷基酯转化为相应的醛。使该醛再进行威悌希(Wittig)烯化作用，例如用(三苯基膦内鎓盐)乙酸甲酯。之后，用在上面的反应图解2中概述的相同的一系列步骤将得到的吡啶基丙烯酸酯转化为目的化合物。
反向的酰胺可以按照反应图解5中给出的步骤之顺序进行制备。
反应图解5
用酸催化剂和相应的链烷醇将市场上可买到的3-羟基吡啶甲酸转化为烷基酯。接着用例如1-碘代十二烷或类似的1-卤代化合物在一般的条件下进行烷基化反应。该反应最好使用处于二甲基甲酰胺中的弱碱如K2CO3来进行。生成3-烷氧基衍生物。氧化吡啶的氮并重排所得的N-氧化物，生成2-吡啶酮。用过酸如3-氯过氧苯甲酸或类似的氧化剂可以很容易地进行氧化。可以使用在合适溶剂如二甲基甲酰胺中的三氟乙酸酐进行N-氧化物(5a)的重排。
形成三氟甲磺酸酯是利用三氟甲磺酸酐和碱如吡啶来进行的。用叠氮化钠进行的亲核取代反应生成2-叠氮基吡啶衍生物(5b)。通过催化氢化将叠氮化物还原为胺。用氢化物如氢化二异丁基铝还原烷基酯为醛。然后用威悌希(Wittig)反应制备2-氨基吡啶丙烯酸酯(5c)。例如，可使用(三苯基膦内鎓盐)乙酸甲酯。酰化胺(甲基间苯二酰氯)，接着用碱(LiOH、四氢呋喃、甲醇)将酯水解，得到目的酰胺。用本文说明的方法或本领域通常已知的方法，可以将这些化合物进一步转化为酯，酰胺，盐或由通式Ⅰ定义的类似的化合物。
制剂本发明的药物组合物包括药物载体或稀释剂及一定量的通式(Ⅰ)化合物。该化合物以能进行生理反应的量而存在，或者以较小的量存在，这样使使用者需服用二或多个单位的组合物来进行预期的治疗。这些组合物可以配制为固体，液体或气态形式。或者在给药时可以将这三种形式之一转变为另一种形式，如当固体通过气雾方式被提供时，或者当液体以喷雾或气雾形式被提供时。
组合物和药物的载体或稀释剂的性质当然取决于预期的给药途径，如肠胃外的、局部的、口服的或通过吸入的方法。
对于肠胃外给药，药物组合物的形式为无菌注射液，如安瓿或含水的或无水的液体悬浮液。
对于局部给药，药物组合物的形式为适于眼、耳或鼻给药的乳膏、软膏、搽剂、洗剂、糊剂和滴剂。
对于口服给药，药物组合物的形式为片剂、胶囊剂、粉剂、丸剂、atroche、锭剂、糖浆剂、液体或乳剂。
当药物组合物以溶液或悬浮液形式使用时，合适的药物载体或稀释剂的实例包括对于含水体系为水;对于非水体系为乙醇、甘油、丙二醇、玉米油、棉子油、花生油、芝麻油、液体石腊以及它们与水的混合物;对于固体体系为乳糖、高岭土和甘露糖醇;对于气雾体系为二氯二氟甲烷、氯三氟乙烷和压缩的二氧化碳。除了药物载体或稀释剂外，本发明的组合物还可以包括其他组份，如稳定剂、抗氧化剂、防腐剂、润滑剂、悬浮剂、粘度调节剂，等等，只要附加的组份对于本发明组合物的治疗作用无有害的影响。
所述的药物制剂可以按照适宜于所需目的产物的药剂师常用的方法进行制备。
通常，特别是对于哮喘的预防治疗，组合物适宜的给药形式是吸入法。因此对于利用一般的喷雾器给药，组合物包括活性组份的水悬浮液或水溶液。用另一方法由加压气雾容器给药时，组合物包括在一般的液化推进剂或压缩气体中的活性组份的悬浮液或溶液。对于由粉末吸入器给药，组合物还包括用固体稀释剂稀释的固体活性组份。在上面的组合物中，载体或稀释剂的量可以变化，但最好它是活性组份的悬浮液或溶液的较大的部分。当稀释剂为固体时，它存在的量可以小于，等于或大于固体活性组份的量。
通常，将通式Ⅰ化合物以组合物的形式给药于受治疗者，该组合物包括无毒量的通式Ⅰ化合物，它足以产生抑制以白三烯为因子的疾病之症状。当以这种方式使用时，组合物的剂量选自每次给药50mg至100mg活性组份的范围。为了方便起见，以规定的日剂量每天等剂量给药1至5次，所规定的日剂量选自约50mg至约5000mg。
公开的范围之内还包括治疗由LTB4传递的疾病的方法，该方法包括给受治疗者服用治疗有效量的通式Ⅰ化合物，优选以药物组合物的形式给药。例如，通过服用有效量的通式Ⅰ化合物抑制由释放传递质所产生的过敏性反应的症状。这被包括在公开的范围之内。可以根据需要在合适的间隔下以剂量单位或以单一剂量进行给药。通常，当特别需要减轻症状时将实施这种方法。然而，该方法也用来进行连续或预防治疗。在本领域的技术范围内通过常规试验，由上面列出剂量范围可以确定给药的有效剂量，同时要考虑到被治疗的疾病的严重程度等等因素。
药物组合物及其使用方法还包括通式Ⅰ化合物与H1阻断剂的结合，在此结合中包含的两种化合物的量足以治疗抗原诱导的呼吸过敏反应或类似的过敏性反应。在此有用的具有代表性的H1阻断剂包括色甘酸钠，乙醇胺类化合物(苯海拉明)，乙二胺类(吡拉明)，烷基胺类(氯苯吡丙胺)，哌嗪类(氯环嗪)，以及吩噻嗪类(异丙嗪)。在本发明中特别有用的H1阻断剂是2-〔4-(5-溴-3-甲基吡啶-2-基)丁氨基〕-5-〔(6-甲基吡啶-3-基)甲基〕-4-嘧啶酮。
生物试验本发明的许多化合物的拮抗剂活性之特异性是通过它们对于象氯化钾，碳酰胆碱，组胺和PGF2这类促效药的较低程度的拮抗作用而得到证实的。
用于本发明方法的化合物之受体结合亲和力是通过这些化合物结合到在人的U937细胞膜上的〔3H〕-LTB4结合部位上的能力来测定的。用于本发明方法中的化合物之LTB4拮抗剂活性是通过它们以剂量相关的方式拮抗LTB4可诱发钙过渡状态的能力进行测定的，用fura-2即荧光的钙试样测定钙过渡状态。所用的方法如下U937细胞培养条件U937细胞是从Dr.John Bomalaski(Medical College of PA)和Dr.John Lee(Smithkline Beecham，Dept.of Immunology)那得到的，在补加了10%(V/V)热的灭活的胎牛血清的RPMI-1640介质中，在含有5% CO2，95%空气，37℃的湿润环境中对上述细胞进行培养。细胞既可在T型烧瓶中又可在旋转器培养物中培养。为了用DMSO区分U937细胞与单核类细胞，在含有1.3%DMSO的上述介质中以1×105个细胞/ml的浓度将细胞接种，并连续培养4天。细胞密度一般为0.75-1.25×106个细胞/ml，通过在800Xg下离心10分钟将其收集。
U937细胞膜富集成分的制备将收集的U937细胞在25℃用50mM Tris-HCl洗涤，该洗涤液pH为7.4并含有1mM EDTA(缓冲液A)。将细胞以5×107个细胞/ml的浓度再悬浮于缓冲液A中，并用帕尔高压气体贮罐以750psi于0℃下通过氮气气穴使细胞碎裂，持续10分钟。破碎的细胞制剂在1000Xg下离心10分钟。将上清液在50，000Xg下离心30分钟。所得颗粒用缓冲液A洗涤两次。以约3mg膜蛋白/ml的浓度在25℃用50mM Tris HCl(pH为7.4)将颗粒再悬浮，并使等分试样快速冷冻，于-70℃下贮藏。
〔3H〕-LTB4结合于U937膜受体〔3H〕-LTB4结合试验是在25℃，在含有10mMCaCl2，10mM MgCl2，〔3H〕-LTB4，U937细胞膜蛋白的50mM Tris-HCl(pH 7.5)缓冲液中(标准条件)，在有或没有不同浓度的LTB4或SK & F化合物的存在下进行的。每一试验点代表重复三次的测定之平均值。在没有或有2μM未标记的LTB4存在下，分别测定了〔3H〕-LTB4的总的和非特异性结合。根据总的与非特异性结合之差计算出特异性结合。放射配体竟争试验的进行是在标准条件下，用约0.2μM〔3H〕-LTB4，20-40μg的U937细胞膜蛋白，在0.2ml反应体积中增加LTB4的浓度(0.1nM至10nM)或其他竟争性配体的浓度(0.1μM至30μM)，并于25℃下培养30分钟。通过真空过滤方法将未结合的放射配体及竞争性药物与膜结合配体分开。用液体闪烁光谱测定法测定滤器上膜结合放射活性。
U937细胞的饱和结合试验是在标准条件下，用约15-50μg U937膜蛋白，并在0.2ml反应体积中增加〔3H〕-LTB4的浓度(0.02至2.0mM)，以及在22℃培养30分钟来进行的。LTB4(2μM)被放在单独的一套培养试管中以便测定非特异性结合。由饱和结合试验所得的数据经过计算机辅助的非线性最小二乘法曲线拟合分析，并进一步用Scatchard方法分析。
用被分化的U937细胞进行Fura-2的摄取收集的细胞以2×106个细胞/ml的浓度再悬浮于Krebs Ringer Hensilet缓冲液中，该缓冲液含0.1%BSA(RIA级)，1.1mM MgSO4，1.0mM CaCl2和5mM HEPES(pH7.4，缓冲液B)。将fura-2(fura-2/AM)的二乙酰甲氧基酯加至最终浓度为2nM，在暗处于37℃下将细胞培养30分钟。在800Xg下将细胞离心10分钟，并以2×106个细胞/ml的浓度将其再悬浮于新鲜的缓冲液B中，在37℃培养20分钟，使残存的酯完全水解。在800Xg下将细胞离心10分钟，并以5×106个细胞/ml的浓度将其再悬浮于冷的新鲜的缓冲液B中。细胞被保持于暗处的冰上，直至用于荧光的测定。
荧光的测定钙迁移作用用由Johnson Foundation Biomedical Instrumentation Group设计的荧光计测定含fura-2的U937细胞的荧光。荧光计在比色杯支持器下装有温控器和磁搅拌器。激发波长位于339nm，发射波长位于499nm。全部试试验均在37℃下用恒定搅拌来进行。
U937细胞用新鲜的缓冲液稀释至浓度为1×106个细胞/ml，保持在暗处冰上。将细胞悬浮液的等分试样(2ml)放入4ml比色杯中，温度升至37℃，(保持在37℃，水浴10分钟)。将比色杯移入荧光计中，在加入兴奋剂或拮抗剂之前测定荧光约1分钟，加入兴奋剂后接着测定荧光约2分钟，促效药与拮抗药均以2μl等分试样加入。
先将拮抗剂加入荧光计内的细胞中，以便测定潜在的兴奋剂活性。然后约1分钟后加入10nM LTB4(接近最大有效浓度)，最大的Ca2+迁移浓度〔Ca2+〕i;用下式计算
F为样品的最大的相对荧光量度。Fmax是通过用10μl的10%Triton X-100(最终浓度为0.02%)溶解细胞来测定的。测定了Fmax之后，将67μl 100mM EDTA溶液(pH10)加到完全螯合的Ca2+中，使fura-2信号消失，并得到Fmin。在没有拮抗剂的情况下，对于10nM LTB4〔Ca2+〕i浓度为100%，最低的〔Ca2+〕i为0%。IC50浓度为阻断50%的10nM LTB4诱导的〔Ca2+〕i迁移作用的拮抗剂浓度。对于LTB4诱导的〔Ca2+〕i迁移作用的增加之EC50为最大增加之半的浓度。对于钙迁移作用的Ki用下式确定Ki=IC501+[LTB4][EC50]]]>对于所述的试验，LTB4浓度为10nM，EC50为2nM。
将通过这些方法试验的化合物的结果，列于表Ⅲ中。
表Ⅲ结合IC50，(Ki)，μM Ca-迁移作用U-937 PMN U-937 PMN完整的完整的 IC50兴奋剂兴奋剂构成 膜 细胞 细胞 μM % %Ex1 4.0(1.4) 2.0 2.4 3.7 0 0Ex2 23(8.0) 4.7 - 3.0 0 0Ex3 47(17) 5.8 0.65 0.58 0 0Ex4 6.5(2.2) 3.4 2.2 8.5 0 0Ex5 41(14) 1.1 2.2 0.72 0 0Ex6＊6.1(2.0) 0.68 0.14 0.74 0 0＊标题化合物实施例下面给出的实施例说明如何制备和应用本发明的化合物。这些实施例只是实例，而不限定或限制本发明的范围。由该文件作出了用以限定保留给发明人的权利要求之依据。
实施例 A8-(4-甲氧基苯基)辛烷-1-(4-甲苯磺酸酯)A(1)7-辛炔-1-醇35%KH的矿物油(27g，240mmol)溶液在氩气氛下用己烷洗涤，用1，3-二氨基丙烷一滴一滴地处理。混合物在室温下搅拌直至均匀。将烧瓶冷却至0℃，缓慢地加入3-辛炔-1-醇(10g，79mmol，Lancaster Synthesis)。然后将反应混合物在室温下搅拌18小时。反应混合物用水(50ml)骤冷，产物用乙醚萃取。有机层用10%HCl(3×15ml)和盐水洗涤，并干燥(MgSO4)。经蒸发得到标题产物，不再提纯便可使用。1H NMR(90MHz，CDCl3)δ3.65(t，J＝5Hz，2H，OCH2)，2.23(m，2H，CH2)，2.0(m，1H，炔基的)，1.7-1.2(m，8H，(CH2)4);1R(纯试样)νmax 3350，2930，2125cm-1。
A(2) 7-辛炔-1-叔丁基二苯基甲硅烷基醚将7-辛炔-1-醇(3.8g，30mmol)溶于二甲基甲酰胺(10ml)中，在0℃用叔丁基氯二苯基硅烷(10.2ml，33mmol)和咪唑(3.65g，45mmol)处理。反应混合物在0℃搅拌10分钟并在室温搅拌3小时。加入水，并用乙酸乙酯萃取产物。乙酸乙酯萃取液用水和盐水洗涤，并干燥(Ma2SO4)。蒸发出溶剂，剩余物用快速柱色谱(二氧化硅，己烷)提纯，得到黄色油状物。
1H NMR(250MHz，CDCl3)δ7.7(d，4H，芳基)，7.4(m，6H，芳基)，3.63(t，2H，OCH2)，2.23(m，2H，CH2)，1.97(t，1H，炔基的)，1.6-1.3(m，8H，(CH2)4)，1.05(s，9H，叔丁基);1R(膜)νmax 3321，2940，2125 cm-1。
A(3) 8-(4-甲氧基苯基)-7-辛炔-1-叔丁基二苯基甲硅烷基醚在氩气氛下向火焰干燥过的烧瓶中加入4-碘代茴香醚(5.34g，22mmol)的三乙胺(50ml)溶液，接着加入7-辛炔-1-叔丁基二苯基甲硅烷基醚(9.84g，27mmol)，(Ph3P)2PdCl2(350mg，0.44mmol)，和CuI(200mg，0.88mmol)。得到的混合物在50℃加热4小时。当冷却到室温时，过滤反应混合物，并蒸发溶剂。剩余物在乙酸乙酯和水之间分配，收集有机层，用盐水洗涤，并干燥(Na2SO4)。蒸发溶剂，剩余物用快速柱色谱(二氧化硅，1%乙酸乙酯的己烷溶液)提纯，得到油状物。
1H NMR(250MHz，CDCl3)δ7.7(d，4H，芳基)，7.4(m，6H，芳基)，7.35(d，2H，芳基)，6.8(d，2H，芳基)，3.8(s，3H，OCH3)，3.7(t，2H，OCH2)，2.4(t，2H，CH2)，1.7-1.3(m，8H，(CH2)4)，1.05(s，9H，叔丁基)。
A(4) 8-(4-甲氧基苯基)辛烷-1-叔丁基二苯基甲硅烷基醚将5% Pd/C(100mg)加入8-(4-甲氧基苯基)-7-辛炔-1-叔丁基二苯基甲硅烷基醚(2.2g，4.6mmol)的乙醇(10ml)和乙酸乙酯(10ml)溶液中。混合物在75PSi下加氢4小时。反应混合物通过硅藻土(Celite)进行过滤，蒸发溶剂，得到油状物。
1H NMR(250MHz，CDCl3)δ7.7(d，4H，芳基，7.4(m，6H，芳基)，7.05(d，2H，芳基)，6.8(d，2H，芳基)，3.8(s，3H，OCH3)，3.6(t，2H，OCH2)，2.5(t，2H，苄基)，1.75-1.3(m，12H，(CH2)6)，1.0(s，9H，叔丁基)。
A(5) 8-(4-甲氧基苯基)辛烷-1-醇将8(4-甲氧基苯基)辛烷-1-叔丁基二苯基甲硅烷基醚(2.2g，4.6mmol)的四氢呋喃(20ml)溶液冷却至0℃，用氟化四丁基铵(14ml，14mmol，1M的四氢呋喃溶液)处理。移去冷却浴，反应混合物在室温下搅拌24小时。反应混合物用乙酸乙酯稀释，用水和盐水洗涤，并干燥(Na2SO4)。蒸发溶剂，剩余物用快速柱色谱(二氧化硅，0-20%乙酸乙酯的己烷溶液)提纯，得到白色固体。熔点47-49℃;1H NMR(250MHz，CDCl3)δ7.15(d，2H，芳基)，6.86(d，2H，芳基)，3.85(s，3H，OCH3)，3.68(t，2H，OCH2)，2.62(t，2H，苄基)，1.75-1.3(m，12H，(CH2)6)。
A(6) 8-(4-甲氧基苯基)辛烷-1-(4-甲苯磺酸酯)在氩气氛下将6-(4-甲氧基苯基)辛烷-1-醇(5.9g，25mmol)溶于无水CH2Cl2(100ml)中，冷却至0℃。向其中加入吡啶(2.5ml，30mmol)和4-甲苯磺酰氯(5.4g，28mmol)。反应混合物在0℃搅拌20分钟，在室温搅拌24小时，反应溶液用水和盐水洗涤，并干燥(Na2SO4)。蒸发溶剂，剩余物用快速柱色谱(二氧化硅，0-10%乙酸乙酯的己烷溶液)提纯，得到白色固体。1H NMR(250MHz，CDCl3)δ7.79(d，2H，芳基)，7.35(d，2H，芳基)，7.09(d，2H，芳基)，6.82(d，2H，芳基)，4.04(s，2H，OCH2)，3.8(s，3H，OCH3)，2.55(t，2H，苄基)，2.46(s，3H，CH3)，1.75-1.15(m，12H，(CH2)6)。
实施例B6-(4-甲氧基苯基)-己烷-1-(4-甲苯磺酸酯)B(1)5-己炔-1-叔丁基二苯基甲硅烷基醚将5-己炔-1-醇(3g，30mmol，Aldrich)溶于二甲基甲酰胺(10ml)中，在0℃用叔丁基氯二苯基硅烷(10.2ml，33mmol)和咪唑(3.65g，45mmol)处理。反应混合物在0℃搅拌10分钟，在室温搅拌3小时。加入水，产物用乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯萃取液用水和盐水洗涤，并干燥(Na2SO4)。蒸发溶剂，剩余物用快速柱色谱(二氧化硅，己烷)提纯，得到黄色油状物。1H NMR(250MHz，CDCl3)δ7.7(d，4H，芳基)，7.4(m，6H，芳基)，3.65(t，2H，OCH2)，2.2(m，2H，CH2)，1.9(t，1H，炔基的)，1.7(m，4H，CH2-CH2)，1.05(s，9H，叔丁基)。
B(2) 6-(4-甲氧基苯基)-5-己炔-1-叔丁基二苯基甲硅烷基醚在氩气氛下，向火焰干燥过的烧瓶中加入4-碘代茴香醚(5.34g，22mmol)的三乙胺(50ml)溶液，接着加入5-己炔-1-叔丁基二苯基甲硅烷基醚(8.83g，27mmol)、(Ph3P)2PdCl2(350mg，0.44mmol)，和CuI(200mg，0.88mmol)。得到的混合物在50℃加热4小时。当冷却至室温时过滤反应混合物，蒸发溶剂。剩余物在乙酸乙酯和水之间分配，收集有机层，用盐水洗涤，并干燥(Na2SO4)。蒸发溶剂，剩余物用快速柱色谱(二氧化硅，1%乙酸乙酯的己烷溶液)提纯，得到油状物。1H NMR(250MHz，CDCl3)δ7.7(d，4H，芳基)，7.4(m，6H，芳基)，7.35(d，2H，芳基)，6.8(d，2H，芳基)，3.8(s，3H，OCH3)，3.7(t，2H，OCH2)，2.4(t，2H，CH2)，1.7(m，4H，CH2-CH2)，1.05(s，9H，叔丁基)。
B(3) 6-(4-甲氧基苯基)己烷-1-叔丁基二苯基甲硅烷基醚将5%Pd/C(100mg)加入6-(4-甲氧基苯基)-5-己炔-1-叔丁基二苯基甲硅烷基醚(2.0g，4.6mmol)的乙醇(10ml)和乙酸乙酯(10ml)溶液中。混合物在75psi下加氢4小时。反应混合物通过硅藻土进行过滤，蒸发溶剂，得到油状物。1H NMR(250MHz，CDCl3)δ7.7(d，4H，芳基)，7.4(m，6H，芳基)，7.05(d，2H，芳基)，6.8(d，2H，芳基)，3.8(s，3H，OCH3)，3.6(t，2H，OCH2)，2.5(t，2H，苄基)，1.55(m，4H，CH2-CH2)，1.3(m，4H，CH2-CH2)，1.0(s，9H，叔丁基)。
B(4) 6-(4-甲氧基苯基)己烷-1-醇将6-(4-甲氧基苯基)己烷-1-叔丁基二苯基甲硅烷基醚(2.0g，4.6mmol)的四氢呋喃(20ml)溶液冷却至0℃，用氟化四丁基铵(14ml，14mmol，1M的四氢呋喃溶液)处理。移去冷却浴，反应混合物在室温搅拌24小时。反应混合物用乙酸乙酯稀释，用H2O和盐水洗涤，并干燥(Na2SO4)。蒸发溶剂，剩余物用快速柱色谱(二氧化硅，0-20%乙酸乙酯的己烷溶液)提纯，得到白色固体。1H NMR(250MHz，CDCl3)δ7.05(d，2H，芳基)，6.8(d，2H，芳基)，3.8(s，3H，OCH3)，3.65(t，2H，OCH2)，2.55(t，2H，苄基)，1.6(m，4H，CH2-CH2)，1.4(m，4H，CH2-CH2)。
B(5) 6-(4-甲氧基苯基)己烷-1-(4-甲苯磺酸酯)在氩气氛下，将6-(4-甲氧基苯基)己烷-1-醇(5.36g，25mmol)溶于无水CH2Cl2(100ml)中，冷却至0℃。向其中加入吡啶(2.5ml，30mmol)和4-甲苯磺酰氯(5.4g，28mmol)。反应混合物在0℃搅拌20分钟，在室温搅拌24小时。反应溶液用H2O和盐水洗涤，并干燥(Na2SO4)。蒸发溶剂，剩余物用快速柱色谱(二氧化硅，0-10%乙酸乙酯的己烷溶液)提纯，得到白色固体。1H NMR(250MHz，CDCl3)δ1.6-1.3(m，8H，(CH2)4)，2.4(s，3H，CH3)，2.5(t，2H，苄基)，3.8(s，3H，OCH3)，4.0(t，2H，OCH2)，6.80(d，2H，芳基)，7.0(d，2H，芳基)，7.3(d，2H，芳基)，7.8(d，2H，芳基)。
实施例CE-6-(4-甲氧基苯基)-1-(4-甲苯磺酸酯)-5-己烯C(1) E-6-(4-甲氧基苯基)-5-己烯酸在室温和氩气氛下，将溴化(4-羧基丁基)三苯基鏻(17.6g，30mmol)在四氢呋喃(45ml)中的悬浮液加入新制备的六甲基二硅叠氮化锂(Iithium hexamethyldisilazide)(64mmol)的四氢呋喃(30ml)溶液中。反应混合物搅拌15分钟，在此期间形成桔红色内鎓盐。逐滴加入4-茴香醛(4.5g，30mmol)的四氢呋喃(30ml)溶液，再继续搅拌20分钟。反应混合物用H2O(50ml)骤冷，用乙醚(30ml)稀释。水层用3N HCl酸化至pH1.0。产物用乙酸乙酯(3×50ml)萃取。将合并的有机层进行干燥(MgSO4)，用快速柱色谱(二氧化硅，1%甲醇的CH2Cl2溶液)提纯，得到E-链烯，固体。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ7.3(d，2H，芳基)，6.8(d，2H，芳基)，6.3(d，1H，链烯)，6.0(m，1H，链烯)，3.8(s，3H，OCH3)，2.3(m，4H，烯丙基的CH2和CH2CO2)，1.8(q，2H，CH2)。
C(2) E-6-(4-甲氧基苯基)-5-己烯-1-醇在氩气氛下，将E-6-(4-甲氧基苯基)-5-己烯酸(1.1g，5.0mmol)的无水乙醚(10ml)溶液缓慢地加入LiAlH4(240mg，6.0mmol)在乙醚(10ml)中的悬浮液中。反应混合物回流45分钟。当冷却到室温时用H2O(10ml)骤冷，接着用6N H2SO4(7ml)骤冷。加入乙酸乙酯(20ml)，分离有机层，并干燥(MgSO4)。蒸发后得到白色结晶固体。熔点65-66℃;1H NMR(200MHz，CDCl3)δ7.2(d，2H，芳基)，6.8(d，2H，芳基)，6.3(d，1H，链烯)，6.1(m，1H，链烯)，3.8(s，3H，OCH3)，3.6(t，2H，OCH2)，2.2(q，2H，烯丙基)，1.5(m，4H，CH2-CH2);元素分析，计算值(C13H18O2)C，75.65;H，8.80，实验值C，75.45;H，8.95;MS(CI)207(M+H)。
C(3) E-6-(4-甲氧基苯基)-1-(4-甲苯磺酸酯)-5-己烯在氩气氛下，将E-6-(4-甲氧基苯基)-5-己烯-1-醇(1.6g，7.0mmol)溶于无水CH2Cl2(50ml)中，用4-甲苯磺酰氯(7.0g，36mmol)和吡啶(3ml)处理。反应溶液在室温下搅拌3.5小时。向反应混合物中加入水(40ml)，分离有机层，并干燥(MgSO4)。产物用快速柱色谱(二氧化硅，10%乙酸乙酯的己烷溶液)提纯，得到油状物。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ7.8(d，2H，芳基)，7.3(d，2H，芳基)，7.2(d，2H，芳基)，6.8(d，2H，芳基)，6.2(d，1H，链烯)，6.0(m，1H，链烯)，4.1(t，2H，OCH2)，3.8(s，3H，OCH3)，2.4(s，3H，CH3)，2.1(q，2H，烯丙基)，1.6(m，4H，CH2-CH2);MS(CI)361(M+H)。
实施例1N-(3-羧基苯基)-6-(E-2-羧基乙烯基)-5-癸氧基-2-吡啶甲酰胺二钠盐1(a) 3-癸氧基-2-(羟甲基)吡啶将3-羟基-2-(羟甲基)吡啶盐酸盐(500mg，3.09mmol，Aldrich，85%)溶于无水二甲基甲酰胺(10ml)中，顺序地用无水K2CO3(1.30g，9.27mmol)和1-碘代癸烷(0.80ml，3.71mmol)处理。在氩气氛下于90℃将反应混合物激烈搅拌1.5小时。当冷却到室温时，反应混合物用乙酸乙酯(100ml)稀释，用H2O(5×20ml)和盐水洗涤，并干燥(MgSO4)。得到的化合物用快速柱色谱(二氧化硅，20%乙酸乙酯的石油醚溶液)提纯，得到标题产物。1H NMR(250MHz，CDCl3)δ8.17(m，1H，6-吡啶基)，7.2(m，2H，4-吡啶基、5-吡啶基)，4.78(s，2H，CH2)，4.48(宽单峰，1H，OH)，4.05(t，J＝6.6Hz，2H，OCH2)，1.9-0.90(m，19H，脂族的)。
1(b) 3-癸氧基-2-吡啶甲醛将由1(a)得到的3-癸氧基-2-(羟甲基)吡啶(560mg，2.11mmol)的无水CH2Cl2(7ml)溶液用MnO2(1.80g，20.7mmol)处理，在室温下搅拌24小时。反应混合物通过硅藻土填料进行过滤，用真空除去溶剂，得到醛，为浅黄色油状物。该醛不经进一步提纯直接用于下一步中。
1(c) 2-(E-2-羧甲基乙烯基)-3-癸氧基吡啶在氩气氛下，将上一步得到的3-癸氧基-2-吡啶甲醛(429mg，1.63mmol)溶于无水甲苯(3.5ml)中，用三苯基膦内鎓盐乙酸甲酯(820mg，2.45mmol)处理。反应混合物在45℃加热30分钟，在此温度下反应混合物变为均匀。当冷却到室温时，反应混合物用乙酸乙酯(100ml)稀释，用H2O(2×20ml)和盐水洗涤，并干燥(MgSO4)。产物用快速柱色谱(二氧化硅，乙酸乙酯∶CH2Cl2∶石油醚＝10∶5∶85)提纯，得到产物，为浅黄色固体。1H NMR(200MHz，CDCl3)δ8.25(m，1H，6-吡啶基)，8.1(d，J＝16.2Hz，1H，链烯)，7.25(m，2H，4-吡啶基，5-吡啶基)，7.05(d，J＝16.2Hz，1H，链烯)，4.05(t，J＝6.6Hz，2H，OCH2)，3.85(s，3H，CO2CH3)，1.95-0.90(m，19H，脂族的)。
1(d) 2-(E-2-羧甲基乙烯基)-3-癸氧基吡啶N-氧化物在氩气氛下，将2-〔E-2-羧甲基乙烯基)-3-癸氧基吡啶(390mg，1.22mmol)溶于无水CH2Cl2(6mlml)中，冷却到0℃，用85%3-氯过苯甲酸(278mg，1.34mmol)处理。接着移去冷却浴。反应混合物在室温下搅拌24小时。反应溶液用CH2Cl2(50ml)稀释，倒入饱和的NaHCO3水溶液(50ml)中。水相用CH2Cl2(3×50ml)萃取，合并的CH2Cl2萃取液用盐水洗涤，并干燥(MgSO4)。用快速柱色谱(二氧化硅，10%CH2Cl2的乙酸乙酯溶液)提纯。得到N-氧化物，为浅黄色固体。1H NMR(250MHz，CDCl3)δ8.18(d，J＝16.2Hz，1H，链烯)，7.97(d，J＝6.5Hz，1H，6-吡啶基)，7.58(d，J＝16.2Hz，1H，链烯)，7.11(dd，J＝8.6，6.5Hz，1H，5-吡啶基)，6.82(d，J＝8.6Hz，1H，4-吡啶基)，4.08(t，J＝6.6Hz，2H，OCH2)，3.82(s，3H，CO2CH3)，1.93-0.88(m，19H，脂族的)。
1(e) 6-(E-2-羧甲基乙烯基)-5-癸氧基-2-吡啶酮在氩气氛下，将2-(E-2-羧甲基乙烯基)-3-癸氧基吡啶N-氧化物(180mg，0.537mmol)溶于无水二甲基甲酰胺(2.2ml)中，冷却到0℃。向其中缓慢地加入三氟乙酐(0.76ml，5.38mmol)，接着移去冷却浴。反应混合物在室温下搅拌18小时。反应溶液用乙酸乙酯(75ml)稀释，缓慢地倒入饱和的NaHCO3(30ml)水溶液中。有机层用Na2HCO3(20ml)和盐水洗涤，并干燥(MgSO4)。得到产物，为黄色固体。不进一步提纯即可使用。1H NMR(250MHz，CDCl3)δ7.75(d，J＝16.3Hz，1H，链烯)，7.40(d，J＝9.8Hz，1H，3-吡啶基)，7.01(d，J＝16.3Hz，1H，链烯)，6.73(d，J＝9.8Hz，1H，4-吡啶基)，3.95(t，J＝6.6Hz，2H，OCH2)，3.82(s，3H，CO2CH3)，1.82-0.88(m，19H，脂族的);MS(CI)336(M+H)。
1(f) 6-(E-2-羧甲基乙烯基)-5-癸氧基-2-吡啶三氟甲基磺酸酯在氩气氛下，向冷却的(0℃)6-(E-2-羧甲基乙烯基)-5-癸氧基-2-吡啶酮(200mg，0.596mmol)的无水CH2Cl2(3.0ml)溶液中加入无水吡啶(0.48ml，5.96mmol)和三氟甲磺酸酐(0.30ml，1.78mmol)。反应混合物在0℃搅拌15分钟。反应混合物用乙酸乙酯(50ml)稀释，分别用H2O(20ml)，2%HCl(10ml)、饱和NaHCO3(20ml)和盐水洗涤，并干燥(MgSO4)。用快速柱色谱(二氧化硅，5%乙酸乙酯的石油醚溶液)提纯，得到磺酸酯，为无色油状物。1H NMR(250MHz，CDCl3)δ7.97(d，J＝15.8Hz，1H，链烯)，7.36(d，J＝8.8Hz，1H，3-吡啶基)，7.11(d，J＝8.8Hz，1H，4-吡啶基)，6.96(d，J＝15.8Hz，1H，链烯)，4.05(t，J＝6.5Hz，2H，OCH2)，3.83(s，3H，CO2CH3)，1.92-0.88(m，19H，脂族的)。
1(g) N-(3-羧甲基苯基)-6-(E-2-羧甲基乙烯基)-5-癸氧基-2-吡啶甲酰胺将6-(E-2-羧甲基乙烯基)-5-癸氧基-2-吡啶三氟甲基磺酸酯(160mg，0.342mmol)溶于无水二甲基甲酰胺(1.25ml)中，顺序地用3-氨基苯甲酸甲酯(775mg，5.13mmol，Lancaster)、Pd(OAc)2(4.5mg，0.020mmol)，和1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁(22mg，0.040mmol)处理。缓慢地将一氧化碳鼓泡通过该溶液5分钟。然后，在CO-气氛下(气球压力)和90℃加热反应混合物4小时。当冷却至室温时，用乙酸乙酯(75ml)稀释反应混合物，用2%HCl(5×10ml)、H2O(15ml)、饱和NaHCO3(15ml)和盐水洗涤，并干燥(MgSO4)。用快速柱色谱(二氧化硅，乙酸乙酯∶CH2Cl2∶石油醚＝10∶20∶70)提纯。得到酰胺，为无色固体。1H NMR(250MHz，CDCl3)δ9.85(s，1H，NH)，8.29(s，1H，2-苯基)，8.27(d，J＝8.7Hz，1H，3-吡啶基)，8.14(d，J＝7.9Hz，1H，4-苯基)，8.10(d，J＝15.8Hz，1H，链烯)，7.84(d，J＝7.9Hz，1H，6-苯基)，7.48(dd，J＝7.9Hz，1H，5-苯基)，7.38(d，J＝8.7Hz，1H，4-吡啶基)，7.08(d，J＝15.8Hz，1H，链烯)，4.12(t，J＝6.6Hz，2H，OCH2)，3.95(s，3H，CO2CH3)，3.88(s，3H，CO2CH3)，1.96-0.88(m，19H，脂族的);元素分析，计算值(C28H36O6N2)C，67.72;H，7.31;N，5.64，实验值C，67.50;H，7.27;N，5.57;MS(CI)497.5(M+H)。
1(h) N-(3-羧基苯基)-6-(E-2-羧基乙烯基)-5-癸氧基-2-吡啶甲酰胺二钠盐将N-(3-羧甲基苯基)-6-(E-2-羧甲基乙烯基)-5-癸氧基-2-吡啶甲酰胺(60mg，0.121mmol)溶于四氢呋喃(1.25ml)和MeOH(0.50ml)中，用1M LiOH(0.50ml)处理。反应混合物在室温下搅拌6小时。通过加入2%HCl(0.75ml)使反应混合物缓和地酸化，反应混合物用乙酸乙酯(50ml)稀释，用水(3×10ml)和盐水洗涤，并干燥(MgSO4)。真空除去溶剂。将二酸溶于饱和的Na2CO3水溶液(3-5ml)中，通过反相MPLC法(RP-18二氧化硅，10-65%MeOH水溶液)提纯，并冷冻干燥分离，得到产物，为白色非晶形固体。1H NMR(250MHz，CD3OD)δ8.22(s，1H，2-苯基)，8.13(d，J＝8.7Hz，1H，3-吡啶基)，7.90-7.70(m，2H，4-苯基，6-苯基)，7.73(d，J＝15.8Hz，1H，链烯)，7.65(d，J＝8.7Hz，1H，4-吡啶基)，7.48(dd，J＝7.9Hz，1H，5-苯基)，7.17(d，J＝15.8Hz，1H，链烯)，4.26(t，J＝6.6Hz，2H，OCH2)，1.98-0.82(m，19H，脂族的);FAB-MS(+ve)，513.1(M+H);(-ve)，489.0(M-Na)。
实施例2N-(3-羧基苯基)-6-(2-羧基乙基)-5-癸氧基-2-吡啶甲酰胺2(a) N-(3-羧甲基苯基)-6-(2-羧甲基乙基)-5-癸氧基-2-吡啶甲酰胺将N-(3-羧甲基苯基)-6-(E-2-羧甲基乙烯基)-5-癸氧基-2-吡啶甲酰胺(70mg，0.141mmol)溶于乙酸乙酯(1ml)中，用5%Pd/C(10mg)处理，在H2气氛(气球压力)下搅拌4小时。反应混合物不进行TLC，产物不溶于乙酸乙酯。通过加入CH2Cl2(5ml)使沉淀的产物溶解，溶液通过硅藻土填料进行过滤。产物用快速柱色谱(二氧化硅，5%乙酸乙酯的CH2Cl2溶液)提纯，得到标题的吡啶甲酰胺，为白色固体。1H NMR(250MHz，CDCl3)δ10.02(s，1H，NH)，8.48(s，1H，2-苯基)，8.18(d，J＝7.9Hz，1H，4-苯基)，8.11(d，J＝8.5Hz，1H，3-吡啶基)，7.81(d，J＝7.9Hz，1H，6-苯基)，7.46(dd，J＝7.9Hz，1H，5-苯基)，7.20(d，J＝8.5Hz，1H，4-吡啶基)，4.05(t，J＝6.4Hz，2H，OCH2)，3.94(s，3H，CO2CH3)，3.68(s，3H，CO2CH3)，3.24(t，J＝6.9Hz，2H，CH2)，2.88(t，J＝6.9Hz，2H，CH2)，1.88-0.86(m，19H，脂族的);元素分析，计算值(C28H38O6N2)C，67.45;H，7.68;N，5.62，实验值C，67.26;H，7.76;N，5.54;MS(CI)499(M+H)。
2(b) N-(3-羧基苯基)-6-(2-羧基乙基)-5-癸氧基-2-吡啶甲酰胺二钾盐将N-(3-羧甲基苯基)-6-(2-羧甲基乙基)-5-癸氧基-2-吡啶甲酰胺(54mg，0.108mmol)悬浮于四氢呋喃(1.1ml)和甲醇(0.70ml)中，用1M LiOH(0.45ml，0.45mmol)处理。反应混合物在室温下搅拌30小时。反应混合物用乙酸乙酯(50ml)稀释，倒入2%HCl(15ml)中。乙酸乙酯层用H2O(3×20ml)和盐水洗涤，并干燥(MgSO4)。真空除去溶剂，将固体二酸溶于KHCO3水溶液(3-5ml)中。用反相MPLC法(RP-18二氧化硅，10-65%甲醇水溶液)提纯，并冷冻干燥分离，得到盐，为白色非晶形固体。1H NMR(250MHz，CD3OD)δ8.49(s，1H，2-苯基)，8.00(d，J＝8.5Hz，1H，3-吡啶基)，7.88(d，J＝7.9Hz，1H，4-苯基)，7.72(d，J＝7.9Hz，1H，6-苯基)，7.36(m，2H，4-吡啶基，5-苯基)，4.11(t，J＝6.4Hz，2H，OCH2)，3.19(t，J＝6.9Hz，2H，CH2)，2.66(t，J＝6.9Hz，2H，CH2)，1.92-0.87(m，19H，脂族的);FAB-MS(+ve)，547.4(M+H);(-ve)，507.3(M-K)。
实施例3N-(3-羧基苯基)-6-(E-2-羧基乙烯基)-5-十四烷氧基-2-吡啶甲酰胺二锂盐3(a) 3-羟基-2-吡啶甲醛将3-羟基-2-(羟甲基)吡啶盐酸盐(1.32g，6.9mmol，Aldrich，85%)溶于无水CH2Cl2(35ml)中，用三乙胺(1.1ml，7.89mmol)和MnO2(6.0g，69mmol)处理。反应混合物在室温下搅拌18小时。通过硅藻土填料进行过滤，真空浓缩。粗醛不进一步提纯而直接用于下一步中。
3(b) 3-十四烷氧基-2-吡啶甲醛将上一步得到的3-羟基-2-吡啶甲醛(约6.9mmol)溶于无水二甲基甲酰胺(10ml)中，顺序地用无水K2CO3(2.86g，20.7mmol)和1-碘代十四烷(2.00ml，7.59mmol)处理上述溶液。反应混合物在氩气氛下和90℃激烈地搅拌4.5小时。当冷却到室温时，反应混合物用乙酸乙酯(100ml)稀释，用H2O(5×20ml)和盐水洗涤，并干燥(MgSO4)。用快速柱色谱(二氧化硅，30%乙酸乙酯的石油醚溶液)提纯，得到醛，为浅黄色油状物。1H NMR(250MHz，CDCl3)δ10.43(s，1H，CHO)，8.38(dd，J＝4.1、1.5Hz，1H，6-吡啶基)，7.42(m，2H，4-吡啶基，5-吡啶基)，4.10(t，J＝6.5Hz，2H，OCH2)，1.91-0.88(m，27H，脂族的)。
3(c) 2(E-2-羧甲基乙烯基)-3-十四烷氧基吡啶按照制备2-(E-2-羧甲基乙烯基)-3-癸氧基吡啶所述的方法制备。1H NMR(250MHz，CDCl3)δ8.22(dd，J＝4.0、1.8Hz，1H，6-吡啶基)，8.10(d，J＝15.8Hz，1H，链烯)，7.21(m，2H，4-吡啶基，5-吡啶基)，7.02(d，J＝15.8Hz，1H，链烯)，4.02(t，J＝6.5Hz，2H，OCH2)，3.81(s，3H，CO2CH3)，1.88-0.88(m，27H，脂族的)。
3(d) 2-(E-2-羧甲基乙烯基)-3-十四烷氧基吡啶N-氧化物该化合物按照制备2-(E-2-羧甲基乙烯基)-3-癸氧基吡啶N-氧化物所述的方法制备。1H NMR(250MHz，CDCl3)δ8.18(d，J＝16.2Hz，1H，链烯)，7.95(d，J＝6.5Hz，1H，6-吡啶基)，7.58(d，J＝16.2Hz，1H，链烯)，7.10(dd，J＝8.5、6.5Hz，1H，5-吡啶基)，6.80(d，J＝8.5Hz，1H，4-吡啶基)，4.08(t，J＝6.6Hz，2H，OCH2)，3.82(s，3H，CO2CH3)，1.88-0.88(m，27H，脂族的)。
3(e) 6-(E-2-羧甲基乙烯基)-5-十四烷氧基-2-吡啶酮该化合物按照制备6-(E-2-羧甲基乙烯基)-5-癸氧基-2-吡啶酮所述的方法制备。1H NMR(250MHz，CDCl3)δ7.75(d，J＝16.3Hz，1H，链烯)，7.40(d，J＝9.8Hz，1H，3-吡啶基)，7.01(d，J＝16.3Hz，1H，链烯)，6.73(d，J＝9.8Hz，1H，4-吡啶基)，3.95(t，J＝6.6Hz，2H，OCH2)，3.82(s，3H，CO2CH3)，1.82-0.88(m，27H，脂族的)。
3(f) 6-(E-2-羧甲基乙烯基)-5-十四烷氧基-2-吡啶三氟甲基磺酸酯该化合物按照上述制备6-(E-2-羧甲基乙烯基)-5-癸氧基-2-吡啶三氟甲基磺酸酯的方法制备。1H NMR(250MHz，CDCl3)δ7.96(d，J＝15.7Hz，1H，链烯)，7.35(d，J＝8.8Hz，1H，3-吡啶基)，7.10(d，J＝8.8Hz，1H，4-吡啶基)，6.96(d，J＝15.7Hz，1H，链烯)，4.04(t，J＝6.5Hz，2H，OCH2)，3.82(s，3H，CO2CH3)，1.85-0.88(m，27H，脂族的)。
3(g) N-(3-羧甲基苯基)-6-(E-2-羧甲基乙烯基)-5-十四烷氧基-2-吡啶甲酰胺实施例1(g)的方法用于制备N-(3-羧甲基苯基)-6-(E-2-羧甲基乙烯基)-5-十四烷氧基-2-吡啶甲酰胺。1H NMR(250MHz，CDCl3)δ9.86(s，1H，NH)8.29(s，1H，2-苯基)，8.27(d，J＝8.7Hz，1H，3-吡啶基)，8.13(d，J＝7.9Hz，1H，4-苯基)，8.09(d，J＝15.8Hz，1H，链烯)，7.84(d，J＝7.9Hz，1H，6-苯基)，7.48(dd，J＝7.9Hz，1H，5-苯基)，7.38(d，J＝8.7Hz，1H，4-吡啶基)，7.08(d，J＝15.8Hz，1H，链烯)，4.12(t，J＝6.6Hz，2H，OCH2)，3.95(s，3H，CO2CH3)，3.88(s，3H，CO2CH3)，1.94-0.88(m，27H，脂族的);MS(CI)553.4(M+H)。
3(h) N-(3-羧基苯基)-6-(E-2-羧基乙烯基)-5-十四烷氧基-2-吡啶甲酰胺二锂盐将N-(3-羧甲基苯基)-6-(E-2-羧甲基乙烯基)-5-十四烷氧基-2-吡啶甲酰胺(173mg，0.313mmol)溶于四氢呋喃(4.0ml)和甲醇(1.0ml)中，用1M LiOH(1.0ml)处理。反应混合物在室温下搅拌48小时。得到的凝胶溶于H2O(3ml)中，真空除去四氢呋喃和甲醇。产物用反相MPLC法(RP-18二氧化硅，10-65%甲醇水溶液)提纯，并冷冻干燥分离，得到盐，为无色非晶形固体。
1H NMR(250MHz，CD3OD)δ8.32(s，1H，2-苯基)，8.12(d，J＝8.7Hz，1H，3-吡啶基)，7.85(d，J＝15.7Hz，1H，链烯)，7.83(d，J＝7.9Hz，1H，4-苯基)，7.76(d，J＝7.9Hz，1H，6-苯基)，7.52(d，J＝8.7Hz，1H，4-吡啶基)，7.38(dd，J＝7.9Hz，1H，5-苯基)，7.26(d，J＝15.7Hz，1H，链烯)，4.16(t，J＝6.6Hz，2H，OCH2)，1.94-0.89(m，27H，脂族的);FAB-MS(+ve)，537(M+H);(-ve)，529(M-Li)。
实施例 4N-(3-羧基苯基)-6-(E-2-羧基乙烯基)-5-十二烷氧基-2-吡啶甲酰胺(二锂盐)按照制备N-(3-羧基苯基)-6-(E-2-羧基乙烯基)-5-十四烷氧基-2-吡啶甲酰胺二锂盐所述的方法通过以1-碘代十二烷代替1-碘代十四烷(参见实施例3)，制备N-(3-羧基苯基)-6-(E-2-羧基乙烯基)-5-十二烷氧基-2-吡啶甲酰胺二锂盐。
4(a) 3-十二烷氧基-2-吡啶甲醛1H NMR(250MHz，CDCl3)δ10.43(s，1H，CHO)，8.38(dd，1H，6-吡啶基)，7.42(m，2H，4-吡啶基，5-吡啶基)，4.1(t，2H，OCH2)，1.91-0.88(m，23H，脂族的)。
4(b) 2-(E-2-羧甲基乙烯基)-3-十二烷氧基吡啶1H NMR(250MHz，CDCl3)δ8.22(dd，1H，6-吡啶基)，8.1(d，1H，J＝15.8Hz，链烯)，7.21(m，2H，4-吡啶基，5-吡啶基)，7.02(d，1H，J＝15.8Hz，链烯)，4.02(t，2H，OCH2)，3.81(s，3H，CO2CH3)，1.88-0.88(m，23H，脂族的)。
4(c) 2-(E-2-羧甲基乙烯基)-3-十二烷氧基吡啶N-氧化物1H NMR(250MHz，CDCl3)δ8.15(d，1H，J＝16.2Hz，链烯)，7.9(d，1H，6-吡啶基)，7.58(d，1H，J＝16.2Hz，链烯)，7.1(dd，1H，5-吡啶基)，6.8(d，1H，4-吡啶基)，4.08(t，2H，OCH2)，3.82(s，3H，CO2CH3)，1.88-0.88(m，23H，脂族的)。
4(e) 6-(E-2-羧甲基乙烯基)-5-十二烷氧基-2-吡啶酮1H NMR(250MHz，CDCl3)δ8.0(s，1H，OH)，7.75(d，1H，J＝16Hz，链烯)，7.4(d，1H，3-吡啶基)，7.0(d，1H，J＝16Hz，链烯)，6.7(d，1H，4-吡啶基)，4.0(t，2H，OCH2)，3.82(s，3H，CO2CH3)，1.85-0.88(m，23H，脂族的)。
4(f) 6-(E-2-羧甲基乙烯基)-5-十二烷氧基-2-吡啶三氟甲基磺酸酯1H NMR(250MHz，CDCl3)δ7.95(d，1H，J＝15.9Hz，链烯)，7.37(d，1H，3-吡啶基)，7.1(d，1H，4-吡啶基)，6.95(d，1H，J＝15.9Hz，链烯)，4.1(t，2H，OCH2)，3.8(s，3H，CO2CH3)，1.89-0.88(m，23H，脂族的)。
4(g) N-(3-羧甲基苯基)-6-(E-2-羧甲基乙烯基)-5-十二烷氧基-2-吡啶甲酰胺1H NMR(250MHz，CDCl3)δ9.86(s，1H，NH)，8.29(s，1H，芳基)，8.27(d，1H，3-吡啶基)，8.13(d，1H，芳基)，8.09(d，1H，J＝15.8Hz，链烯)，7.84(d，1H，芳基)，7.5(t，1H，芳基)，7.38(d，1H，4-吡啶基)，7.08(d，1H，J＝15.8Hz，链烯)，4.15(t，2H，OCH2)，3.98(s，3H，CO2CH3)，3.88(s，3H，CO2CH3)，1.94-0.88(m，23H，脂族的);元素分析，计算值(C30H40N2O6)C，68.68;H，7.69;N，5.34，实验值C，68.43;H，7.54;N，5.21;MS(CI)525(M+H)。
4(h) N-(3-羧基苯基)-6-(E-2-羧基乙烯基)-5-十二烷氧基-2-吡啶甲酰胺二锂盐1H NMR(250MHz，CD3OD)δ8.37(s，1H，芳基)，8.12(d，1H，3-吡啶基)，7.85(d，1H，J＝15.7Hz，链烯)，7.83(d，1H，芳基)，7.77(d，1H，芳基)，7.55(d，1H，4-吡啶基)，7.38(t，1H，芳基)，7.26(d，1H，J＝15.7Hz，链烯)，4.16(t，2H，OCH2)，1.90-0.88(m，23H，脂族的);FAB-MS(+ve)，509(M+H);(-ve)，501(M-Li)。
实施例5N-(3-羧基苯基)-6-(E-2-羧基乙烯基)-5-辛氧基-2-吡啶甲酰胺二锂盐按照制备N-(3-羧基苯基)-6-(E-2-羧基乙烯基-5-十四烷氧基-2-吡啶甲酰胺二锂盐(实施例3)所述的方法而用1-碘代辛烷代替1-碘代十四烷，制备N-(3-羧基苯基)-6-(E-2-羧基乙烯基)-5-辛氧基-2-吡啶甲酰胺二锂盐。
5(a) 3-辛氧基-2-吡啶甲醛1H NMR(250MHz，CDCl3)δ10.43(s，1H，CHO)，8.38(dd，1H，6-吡啶基)，7.42(m，2H，4-吡啶基，5-吡啶基)，4.1(t，2H，OCH2)，1.91-0.88(m，15H，脂族的)。
5(b) 2-(E-2-羧甲基乙烯基)-3-辛氧基吡啶1H NMR(250MHz，CDCl3)δ8.22(dd，1H，6-吡啶基)，8.1(d，1H，J＝15.8Hz，链烯)，7.21(m，2H，4-吡啶基，5-吡啶基)，7.02(d，1H，J＝15.8Hz，链烯)，4.02(t，2H，OCH2)，3.81(s，3H，CO2CH3)，1.88-0.88(m，15H，脂族的)。
5(c) 2-(E-2-羧甲基乙烯基)-3-辛氧基吡啶N-氧化物1H NMR(250MHz，CDCl3)δ8.15(d，1H，J＝16.2Hz，链烯)，7.9(d，1H，6-吡啶基)，7.58(d，1H，J＝16.2Hz，链烯)，7.1(dd，1H，5-吡啶基)，6.8(d，1H，4-吡啶基)，4.08(t，2H，OCH2)，3.82(s，3H，CO2CH3)，1.88-0.88(m，15H，脂族的)。
5(d) 6-(E-2-羧甲基乙烯基)-5-辛氧基-2-吡啶酮1H NMR(250MHz，CDCl3)δ8.0(s，1H，OH)，7.75(d，1H，J＝16Hz，链烯)，7.4(d，1H，3-吡啶基)，7.0(d，1H，J＝16Hz，链烯)，6.7(d，1H，4-吡啶基)，4.0(t，2H，OCH2)，3.82(s，3H，CO2CH3)，1.85-0.88(m，15H，脂族的)。
5(e) 6-(E-2-羧甲基乙烯基)-5-辛氧基-2-吡啶三氟甲基磺酸酯1H NMR(250MHz，CDCl3)δ7.95(d，1H，J＝15.9Hz，链烯)，7.37(d，1H，3-吡啶基)，7.1(d，1H，4-吡啶基)，6.95(d，1H，J＝15.9Hz，链烯)，4.1(t，2H，OCH2)，3.8(s，3H，CO2CH3)，1.89-0.88(m，15H，脂族的)。
5(f) N-(3-羧甲基苯基)-6-(E-2-羧甲基乙烯基)-5-辛氧基-2-吡啶甲酰胺1H NMR(250MHz，CDCl3)δ9.86(s，1H，NH)，8.29(s，1H，芳基)，8.27(d，1H，3-吡啶基)，8.13(d，1H，芳基)，8.09(d，1H，J＝15.8Hz，链烯)，7.84(d，1H，芳基)，7.5(t，1H，芳基)，7.38(d，1H，4-吡啶基)，7.08(d，1H，J＝15.8Hz，链烯)，4.15(t，2H，OCH2)，3.98(s，3H，CO2CH3)，3.88(s，3H，CO2CH3)，1.94-0.88(m，15H，脂族的)。
5(g) N-(3-羧基苯基)-6-(E-2-羧基乙烯基)-5-辛氧基-2-吡啶甲酰胺二锂盐1H NMR(250MHz，CD3OD)δ8.37(s，1H，芳基)，8.12(d，1H，3-吡啶基)，7.85(d，1H，J＝15.7Hz，链烯)，7.83(d，1H，芳基)，7.77(d，1H，芳基)，7.55(d，1H，4-吡啶基)，7.38(t，1H，芳基)，7.26(d，1H，J＝15.7Hz，链烯)，4.16(t，2H，OCH2)，1.90-0.88(m，15H，脂族的);FAB-MS(+ve)，601.3(M+H);(-ve)，598.9(M-H)。
实施例6N-(3-羰基苯基)-6-(E-2-羧基乙烯基)-5-〔8-(4-甲氧基苯基)辛氧基〕-2-吡啶甲酰胺二锂盐按照制备N-(3-羧基苯基)-6-(E-2-羧基乙烯基)-5-十四烷氧基-2-吡啶甲酰胺二锂盐所描述的方法(实施例4)，而用8-(4-甲氧基苯基)辛烷-1-(4-甲苯磺酸酯)代替1-碘代十四烷，制备N-(3-羧基苯基)-6-(E-2-羧基乙烯基)-5-〔8-(4-甲氧基苯基)辛氧基〕-2-吡啶甲酰胺二锂盐(参见实施例3)。
按照实施例3(d)以及下列的方法制备下列化合物。
6(a) 2-(E-2-羧甲基乙烯基)-3-〔8-(4-甲氧基苯基)辛氧基〕吡啶实施例A的甲苯磺酸酯用于制备该化合物。1H NMR(250MHz，CDCl3)δ8.28(dd，J＝4.0、1.8Hz，1H，6-吡啶基)，8.17(d，J＝15.8Hz，1H，链烯)，7.28(m，2H，4-吡啶基，5-吡啶基)，7.12(d，J＝8.6Hz，2H，芳基)，7.02(d，J＝15.8Hz，1H，链烯)，6.89(d，J＝8.6Hz，2H，芳基)，4.08(t，J＝6.5Hz，2H，OCH2)，3.87(s，3H，CO2CH3)，3.85(s，3H，OCH3)，2.61(t，J＝7.5Hz，2H，苄基)，1.94-1.38(m，12H，脂族的)。
6(b) 2-(E-2-羧甲基乙烯基)-3-〔8-(4-甲氧基苯基)-辛氧基〕吡啶N-氧化物1H NMR(250MHz，CDCl3)δ8.02(d，J＝16.2Hz，1H，链烯)，7.80(d，J＝6.5Hz，1H，6-吡啶基)，7.39(d，J＝16.2Hz，1H，链烯)，7.00(m，2H，5-吡啶基，4-吡啶基)，6.85(d，J＝8.6Hz，2H，芳基)，6.65(d，J＝8.6Hz，2H，芳基)，3.91(t，J＝6.5Hz，2H，OCH2)，3.68(s，3H，CO2CH3)，3.62(s，3H，OCH3)，2.37(t，J＝7.5Hz，2H，苄基)，1.82-1.10(m，12H，脂族的)。
6(c) 6-(E-2-羧甲基乙烯基)-5-〔8-(4-甲氧基苯基)辛氧基〕-2-吡啶酮1H NMR(250MHz，CDCl3)δ7.75(d，J＝16.2Hz，1H，链烯)，7.40(d，J＝9.8Hz，1H，3-吡啶基)，7.10(d，J＝8.6Hz，2H，芳基)，7.00(d，J＝16.2Hz，1H，链烯)，6.82(d，J＝8.6Hz，2H，芳基)，6.70(d，J＝9.8Hz，1H，4-吡啶基)，3.95(t，J＝6.5Hz，2H，OCH2)，3.85(s，3H，CO2CH3)，3.82(s，3H，OCH3)，2.57(t，J＝7.5Hz，2H，苄基)，1.85-1.22(m，12H，脂族的)。
6(d) N-(3-羧甲基苯基)-6-(E-2-羧甲基乙烯基)-5-〔8-(4-甲氧基苯基)辛氧基〕-2-吡啶甲酰胺熔点70-73℃;1H NMR(250MHz，CDCl3)δ9.87(s，1H，NH)，8.31(s，1H，2-苯基)，8.28(d，J＝8.7Hz，1H，3-吡啶基)，8.15(d，J＝7.9Hz，1H，4-苯基)，8.08(d，J＝15.8Hz，1H，链烯)，7.85(d，J＝7.9Hz，1H，6-苯基)，7.48(dd，J＝7.9Hz，1H，5-苯基)，7.36(d，J＝8.7Hz，1H，4-吡啶基)，7.10(d，J＝8.6Hz，2H，芳基)，7.08(d，J＝15.8Hz，1H，链烯)，6.85(d，J＝8.6Hz，2H，芳基)，4.12(t，J＝6.5Hz，2H，OCH2)，3.95(s，3H，CO2CH3)，3.88(s，3H，CO2CH3)，3.79(s，3H，OCH3)，2.56(t，J＝7.5Hz，2H，苄基)，1.99-1.28(m，12H，脂族的);元素分析，计算值(C33H33N2O7)C，68.97;H，6.67;N，4.88，实验值C，69.21;H，6.88;N，4.46;MS(CI)575(M+H)。
6(e) N-(3-羧基苯基)-6-(E-2-羧基乙烯基)-5-〔8-(4-甲氧基苯基)辛氧基〕-2-吡啶甲酰胺二锂盐熔点315℃(分解)1H NMR(250MHz，CD3OD)δ8.31(s，1H，2-苯基)，8.12(d，J＝8.7Hz，1H，3-吡啶基)，7.86(d，J＝7.9Hz，1H，4-苯基)，7.85(d，J＝15.8Hz，1H，链烯)，7.76(d，J＝7.9Hz，1H，6-苯基)，7.52(d，J＝8.7Hz，1H，4-吡啶基)，7.39(dd，J＝7.9Hz，1H，5-苯基)，7.26(d，J＝15.8Hz，1H，链烯)，7.07(d，J＝8.6Hz，2H，芳基)，6.80(d，J＝8.6Hz，2H，芳基)，4.15(t，J＝6.5Hz，2H，OCH2)，3.74(s，3H，OCH3)，2.53(t，J＝7.5Hz，2H，苄基)，1.93-1.37(m，12H，脂族的);元素分析，实验值C，61.69;H，5.91;N，4.60;FAB-MS(+ve)，559.4(M+H);(-ve)，551.4(M-Li)。
按照相同的方法，但是用合适的氯取代的3-氨基苯甲酸甲酯代替3-氨基苯甲酸甲酯，制备下列化合物N-(3-羧基-6-氯苯基)-6-(E-2-羧基乙烯基)-5-〔8-(4-甲氧基苯基)辛氧基〕-2-吡啶甲酰胺二锂盐;和N-(3-羧基-4-氯苯基)-6-〔E-2-羧基乙烯基)-5-〔8-(4-甲氧基苯基)辛氧基〕-2-吡啶甲酰胺二锂盐。
实施例7通过将盐溶于水溶液中并加入足够的酸以至使pH调至约中性(pH7.0)左右，可使盐转化为游离酸。虽然优选使用无机酸如HCl等，但是可使用任何酸。优选使用稀酸而不用浓酸，例如1至6当量溶液最有用。酸可在约室温下加入;不需要特殊条件。当溶液-达到中性pH或成为酸性时，酸就从溶液中沉淀出来，可以通过结晶方法或对给定酸有用的任何其他方法来回收。
实施例8包括本发明化合物的药用制剂可以用各种形式和用各种赋形剂制备。这些制剂的实施例如下吸入剂将式Ⅰ化合物溶于等渗盐水中，配成浓度为1-10mg/ml的溶液。每次使用在调节的空气流下由喷雾器喷成雾状以提供需要的药量。
片剂组分 每片 每10，000片1.活性组分(式Ⅰ化合物) 40mg 400g2.玉米淀粉 20mg 200g3.藻酸 20mg 200g4.藻酸钠 20mg 200g5.硬脂酸镁 1.3mg 13g101.3mg 1013g制备片剂的方法第1步 在合适的混合器/掺合机中将组分1、2、3和4混合。
第2步 向第一步得到的混合物中分批加入足够的水，每次加入后仔细混合。这样加入水并混合直至物料具有一定的稠性使其能转变成湿的颗粒。
第3步 使湿物料通过振动制粒机用8号(2.38mm)筛将其转变成颗粒。
第4步 然后，湿颗粒在60℃于烘箱中烘干，直至干燥。
第5步 干燥的颗粒用组分5润滑。
第6步 润滑的颗粒在合适的压片机上压制成片。
栓剂组分 每个栓 每1000个栓1.活性组分，式Ⅰ化合物 40.0mg 40g2.聚乙二醇1000 1350.0mg 1，350g3.聚乙二醇4000 450.0mg 450g1840.0mg 1，840g制备方法第1步 将组分2和3一起熔解，并搅拌直至均匀。
第2步 将组分1溶于第1步得到的熔融的物料中，并搅拌直至均匀。
第3步 将第2步得到的熔融物料倒入栓剂模具中，冷却，从模具中取出栓剂，包装。
权利要求
1.制备式Ⅰ化合物或其药物上可接受的盐或N-氧化物的方法，
式中T是酰胺连接基，其中羰基碳连接在吡啶环上；
R是C1-C20脂族基，未取代的或取代的苯基C1-C10脂族基，其中取代的苯基有一个或多个选自下列基团中的基低级烷氧基、低级烷基、三卤甲基或卤素，或者R是C1-C20脂族氧基，或者R是未取代的或取代的苯基C1-C10脂族氧基，其中取代的苯基有一个或多个低级烷氧基、低级烷基、三卤甲基或卤素；R1是R4、-(C1-C5脂族基)R4、-(C1-C5脂族基)CHO、-(C1-C5脂族基)CH2OR8、-CH2OH或-CHO；R2是氢、-COR5，其中R5是-OH、药物上可接受的形成酯的基团-OR6或OX，其中X是药物上可接受的阳离子，或者R5是-N(R7)2，其中R7是H或1-10个碳原子的脂族基、4-10个碳原子的环烷基-(CH2)n-基，其中n是0-3，或者两个R7基结合形成有4-6个碳原子的环，或者R2是NHSO2R9，其中R9是-CF3、C1-C6烷基或苯基；R3是氢、低级烷氧基、卤素、-CN、COR5或OH；R4是COR5，其中R5是-OH、药物上可接受的形成酯的基团-OR6或OX，其中X是药物上可接受的阳离子，或者R5是-N(R7)2，其中R7是H或1-10个碳原子的脂族基、4-10个碳原子的环烷基-(CH2)n-基，其中n是0-3，或者两个R7结合形成有4-6个碳原子的环；R8是氢、C1-C6烷基或C1-C6酰基；该方法包括a)将式Ⅰ化合物
式中L是如三氟甲磺酰基的基团，用一氧化碳，1，1-双(二苯基膦基)二茂铁、合适的钯催化剂和式2的胺处理，
式中R2不是酰胺或酸；或b)氢化式3的化合物
式中R1是-(C2-C5链烯基)R4、-(C2-C5链烯基)CHO或-(C2-C5链烯基)CH2OR8，形成式Ⅰ的化合物，其中R1是-(C2-C5烷基)R4、-(C2-C5烷基)CHO或-(C2-C5烷基)CH2OR8；或c)水解式Ⅰ化合物，其中R1、R2或R3是酯，形成盐或酸；或d)酯化式Ⅰ化合物，其中R1、R2或R3是酸；或e)形成式Ⅰ化合物的酰胺，其中R1R2或R3是酸；或f)将盐转化成酸。
2.根据权利要求1的方法，制备其中R是C1-C20脂族氧基或C1-C20脂族基，R1是-(C1-C5脂族基)R4或R4，和R2是-COOH的化合物或其药物上可接受的盐。
3.根据权利要求2的方法，制备其中R是C8-C15烷氧基和R1是-CH＝CHR4(其中双键是顺式或反式)的化合物。
4.根据权利要求3的方法，制备其中R是H17C8-O-，R1是反式-CH＝CHCOOH，和R2是间位取代的-COOH的化合物，即化合物N-(3-羧基苯基)-6-(E-2-羧基乙烯基)-5-辛氧基-2-吡啶甲酰胺，其二锂盐或其药物上可接受的其他盐或酯。
5.根据权利要求3的方法，制备其中R是H21C10-O-，R1是反式-CH＝CHCOOH，和R2是间位取代的-COOH的化合物，即化合物N-(3-羧基苯基)-6-(E-2-羧基乙烯基)-5-癸氧基-2-吡啶甲酰胺，其二钠盐或其药物上可接受的其他盐或酯。
6.根据权利要求3的方法，制备其中R是H25C12-O-，R1是反式-CH＝CHCOOH和R2是间位取代的-COOH的化合物，即化合物N-(3-羧基苯基)-6-(E-2-羧基乙烯基)-5-十二烷氧基-2-吡啶甲酰胺，其二锂盐或其药物上可接受的其他盐或酯。
7.根据权利要求3的方法，制备其中R是H29C14-O-，R1是反式-CH＝CHCOOH，和R2是间位取代的-COOH的化合物，即化合物N-(3-羧基苯基)-6-(E-2-羧基乙烯基)-5-十四烷氧基-2-吡啶甲酰胺，其二锂盐或其药物上可接受的其他盐或酯。
8.根据权利要求2的方法，制备其中R是取代的或未取代的苯基-C1-C10脂族基，R1是-(C1-C5脂族基)R4的化合物。
9.根据权利要求8的方法，制备其中R是低级烷氧基取代的苯基-C1-C8烷氧基的化合物。
10.根据权利要求9的方法，制备其中R是对位H3CO-苯基-(CH2)8-O-，R1是HO2CCH＝CH-，和R2是间位取代的-COOH的化合物，即化合物N-(3-羧基苯基)-6-(E-2-羧基乙烯基)-5-〔8-(4-甲氧基苯基)辛氧基〕-2-吡啶甲酰胺，N-(3-羧基-6-氯苯基)-6-(E-2-羧基乙烯基)-5-〔8-(4-甲氧基苯基)辛氧基〕-2-吡啶甲酰胺二锂盐，或N-(3-羧基-4-氯苯基)-6-(E-2-羧基乙烯基)-5-〔8-(4-甲氧基苯基)辛氧基〕-2-吡啶甲酰胺二锂盐或其药物上可接受的其他盐或酯。
11.根据权利要求2的方法，制备其中R1是R4CH2CH2-的化合物。
12.根据权利要求11的方法，制备其中R是H21C10-O-，R1是HO2CCH2CH2-和R2是间位取代的-COOH的化合物，即化合物N-(3-羧基苯基)-6-(2-羧基乙基)-5-癸氧基-2-吡啶甲酰胺，其二钾盐或其药物上可接受的其他盐或酯。
13.制备药物组合物的方法，包括将权利要求1中定义的式Ⅰ化合物或其药物上可接受的盐和药物上可接受的载体结合。
14.根据权利要求13制备药物组合物的方法，制成适于吸入、肠胃外的、口服的或局部给药的形式。
全文摘要
本发明是关于下式化合物
文档编号A61K31/4418GK1057834SQ9110485
公开日1992年1月15日 申请日期1991年6月7日 优先权日1990年6月7日
发明者R·A·戴恩斯, W·D·金斯伯里 申请人:史密丝克莱恩比彻姆公司