专利名称：荷苞牡丹碱在良性前列腺增生治疗中的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及荷苞牡丹碱在良性前列腺增生治疗中的应用，更具体地说是涉及含有荷苞牡丹碱作为活性组分的药物组合物，以及用该药物组合物治疗良性前列腺增生的方法。
良性前列腺增生(BPH)是一种多发于中年以后男性中的疾病。其临床表现为尿流受阻。临床和尸体解剖学研究报告表明至少有30%的BPH患者发病在60到70岁之间(Hieble和Caina，Fed.Proc.45;2601，1986)。虽然外科手术仍将为治疗该病患者的主要方法，但是药物治疗有重要的潜力。已有的功能性研究表明肾上腺素能受体在腺瘤和囊组织中有重要作用。刺激BPH患者的前列腺中的α-肾上腺素能受体能够产生尿的急性滞流，并且临床研究已证实阻断α-肾上腺素能受体的药物能够缓解这些患者的尿流受阻(Hedlundetal，J.Urol.130;275，1983)。
在BPH患者中适用于α-肾上腺素能阻断剂的主要症状是(1)具有中度梗阻症状的BPH，没有重要的残尿或者上部尿道浮肿;(2)发生在无贫尿流病史患者中的急性滞流;(3)BPH患者并且同时还患有其它的医学或外伤疾病，并且不能或者不想进行手术治疗。但是，在应用α1-肾上腺素能受体阻断剂治疗BPH时，也观察到一些副作用(Bouffioux and Penders;Eur.Urol.10;306，1984)。
荷苞牡丹碱(6，7，7a，8-四氢-10，11-二甲氧基-7-甲基-5H-苯并[g]-1，3-苯并二氧杂戊环[5，4-de]喹啉;9，10-二甲氧基-1，2-(亚甲基二氧基)阿朴啡;1，2-亚甲基二氧基-9，10-二甲氧基阿朴啡;C20H21NO4;分子量339)的结构式如下通式所示。在自然界中普遍存在的是d-构型，存在于小荷苞牡丹Sieb.& Zucc.，罂粟科和几种其它荷苞牡丹属植物中。
Lu等从大香叶树(大叶)Hewsl中分离了荷苞牡丹碱和其它生物碱(Yakugaku Zasshii 92;910，1972)，但是他们没有给出这些化合物的任何生物活性。Kondo等报道，荷苞牡丹碱能抑制某些小鼠肿瘤细胞的增生，其IC50值为13.8-22.5μg/ml(J.Pharmacobio-Dyn.13，426，1990)。Teng等报道，荷苞牡丹碱是一种血管舒张剂，它能阻断血管平滑肌的α1-肾上腺素能受体(Br.J.Phannacol.104;651，1991)。在研究中他们仅研究了大鼠胸主动脉。Yu等报道了荷苞牡丹碱具有抗血小板活性，它能抑制血栓的形成和增加兔子血小板中环AMP的浓度(Biochem，Pharmacol.43;323，1992)。另外，Chen等也报道了荷苞牡丹碱能提高胸肌的动作电位，并预见了它的抗心律不齐作用(Planta Medica 57;406，1991)。
本发明的目的是提供一种药物组合物，它含有能治疗BPH的有效量的荷苞牡丹碱。
本发明的另一个目的是为治疗良性前列腺增生提供一方法，它采用以荷苞牡丹碱作为活性物质的药物组合物。
荷苞牡丹碱竞争性地抑制从BPH患者身上分离的去甲肾上腺素或苯肾上腺素诱发的前列腺肌的收缩。荷苞牡丹碱的PA2值对去甲肾上腺素和苯肾上腺素分别为8.0和8.3。拮抗剂的摩尔浓度的反对数和在拮抗剂存在与不存在的增殖剂的等效浓度之比值是PA2的两个值(Mackay，J.Pharm.Pharmacol.30，312，1978)。
前列腺组织样品来自于男性患者(50-80岁)，他们经外科手术对尿动力证明的尿流受阻进行前列腺和后耻骨前列腺切除术而经尿道切除(Chapple et al.，Br.J.Urol 63，487-496，1989)。从外侧叶切除的组织分成中央和末梢部分。中央腺瘤前列腺组织的环形切除实施后，洗去囊，收集这些组织。之后用相似方式进行末梢组织的活组织检查。在切割显微镜下前列腺组织切成约1cm×1cm的小条，使被选择的部分在一个方向上有相当数量的纤维排列着。然后，它们被悬挂在5ml器官浴箱中。该组织保持在下列组成的Krebs溶液中(mM)NaCl 133，KCl 4.7，NaH2PO41.3，NaHCO316.3，MgSO40.61，葡萄糖 7.8及CaCl22.52。溶液中连续通入由95% O2和5% CO2组成的气体，并维持在37℃。该组织最初由0.5g的静张力固定，接着平衡60 min。等长张力的变化由置换转换器(Grass FT 03)记录，并记录在Grass多种波动描记器上。
根据本发明，荷苞牡丹碱是一种潜在的前列腺肌的舒张剂。它抑制由去甲肾上腺素和苯肾上腺素引起的收缩，但不能抑制由碳酰胆碱或KCl引起的收缩。
下面的实施例显示了权利要求中的化合物荷苞牡丹碱的药理活性。
实施例1去甲肾上腺素(0.1-30μM)引起的BPH前列腺肌收缩与浓度的依存性。由荷苞牡丹碱(特别α1拮抗剂，0.03-0.3μm)预处理15min后的前列腺肌引起抑制去甲肾上腺素诱发的收缩(表1)。荷苞牡丹碱0.3μM时导致抑制由30μM的去甲肾上腺素引起的最大收缩的50%以上。这就是说，必须有至少7μg/kg的剂量才能得到0.3μM的血液浓度。这大约是一个体重70kg的人需要0.5mg，并且是100%生物有效药物吸收。这些结果的Schild图得到pA28.0，斜率为-0.9，表明对前列腺肌α1-肾上腺素能受体具有高效和竞争性活性。体外等长前列腺条研究(Caine，Fed.Proc.452604，1986)证实了交感神经系统对膀胱流出道的重要影响，从而提高了通过α-肾上腺素能受体阻断的药理治疗的可能性。
表1收缩(%)NE(μM)荷苞牡丹碱(μM)对照0.030.10.30.10±0---0.39±20±0--133±615±35±12-360±535±518±56±01087±460±840±620±330100±485±465±540±5100100±495±575±552±430086±668±5对照组的最大收缩百分率由标准误差平均值表示(6个独立实验的标准误差)。
实施例2苯肾上腺素是一种更加特别的α1-肾上腺能受体拮抗剂。它引起与去甲肾上腺素相似的收缩。由荷苞牡丹碱(0.01-0.3μM)对前列腺肌预处理15分钟后，导致抑制由苯肾上腺素引起的收缩(表2)。pA2值为8.3，表明它在前列腺肌的α1-肾上腺素能受体的阻断中具有高效。0.3μM的荷苞牡丹碱能抑制由30μM苯肾上腺素引起的最大收缩的三分之二。通过对正常和非正常前列腺α1-肾上腺素能受体在调节交感神经作用的认识，注意力转移到选择性α1拮抗剂在治疗中的应用。
表2PE(μM)收缩(%)荷苞牡丹碱(μM)对照0.010.030.10.30.30±00---120±29±10±0--349±331±120±25±21±11085±565±245±325±513±130100±085±269±247±429±1100100±096±278±260±447±230095±280±471±3对照组中最大收缩的百分率由标准误差的平均值表示(6个独立实验的标准误差)。
实施例3荷苞牡丹碱的专一性由四种不同增殖剂引起前列腺肌收缩的情况进行了试验。例如，高钾(KCl，100mM)，碳酰胆碱(10μM)，去甲肾上腺素(3μM)和苯肾上腺素(3μM)。荷苞牡丹碱(1μM)抑制α-肾上腺素能受体拮抗剂(去甲肾上腺素和苯肾上腺素)的作用，但不能抑制毒蕈碱受体拮抗剂(碳酰胆碱)或电位依赖的Ca2+通道拮抗剂(KCl)的作用(表3)。这一结果表明，荷苞牡丹碱作为选择性α1-肾上腺素能受体拮抗剂起作用而不影响毒蕈碱受体(碳酰胆碱)或Ca2+通道(高KCl)。
表3缩肌质张力(g)对照荷苞牡丹碱(1μM)KCl(100μM)0.05±0.170.45±0.10碳酰胆碱(10μM)0.60±0.020.45±0.10NE(3μM) 0.92±0.05 0.10±0.10*PE(3μM) 0.65±0.10 0.05±0.05*张力(g)由标准误差的平均值表示(6-8个独立实验的标准误差)＊与相应的对照组比较P＜0.001。
表四荷苞牡丹碱与Prozosin50%抑制因苯肾上腺素(100μM)引起的收缩反应的有效浓度(ED50)于血管中及于前列腺中的比较荷苞牡丹碱Prozosin血管1μM0.025μM前列腺0.3μM0.1μM比率1:0.31:权利要求
1.治疗良性前列腺增生(BPH)的药物组合物，包括有效量的荷苞牡丹碱和可药用的稀释剂和载体。
2.权利要求1的药物组合物，其中所述的荷苞牡丹碱的有效量为0.5-50mg。
3.治疗良性前列腺增生(BPH)的方法，包括口服或静脉给药时使用药物组合物，该药物组合物包括有效量的荷苞牡丹碱或其可药用盐和可药用稀释剂和载体。
4.权利要求1的方法，其中所述的荷苞牡丹碱的有效量是0.5-50mg。
全文摘要
本发明是提供一种治疗良性前列腺增生的方法和供该治疗用的药物组合物。该药物组合物包括有效量的活性化合物荷苞牡丹碱和可药用的稀释剂和载体。该药物组合物根据需要口服或静脉给药。
文档编号A61K31/47GK1091637SQ9311295
公开日1994年9月7日 申请日期1993年12月21日 优先权日1993年1月26日
发明者邓哲明, 陈建志, 余淑美 申请人:邓哲明, 陈建志, 余淑美